CN111642620A - 一种复合型益生菌制剂及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种复合型益生菌制剂及其制备方法和应用。所述复合型益生菌制剂包括益生菌粉、鱿鱼膏、蚯蚓提取物、二甲基‑β‑丙酸噻亭、大豆寡糖、螺旋藻粉。本发明还提供一种复合型益生菌制剂的制备方法：(1)称取所述原料混匀；(2)将步骤(1)的混合物置于压片机中压片、干燥即得到复合型益生菌菌剂。本发明还提供所述复合型益生菌制剂在水产养殖中的应用。本发明复合型益生菌制剂天然无公害，而且还可以通过风味物质引诱水产养殖生物入食复合型益生菌制剂提高复合型益生菌制剂的利用率。而且本发明复合型益生菌制剂可提高水产养殖生物的免疫机能和肠道微生态平衡，促进了营养物质的吸收和利用，提高水产饲料的利用率。
Description
技术领域
本发明涉及益生菌技术领域，特别是涉及一种复合型益生菌制剂及其制备方法和应用。
背景技术
随着世界范围内的渔业捕捞量下降，水产养殖业已经成为人类水产品需求的主要来源，据世界粮油组织(2015)统计，水产养殖业所供应水产品的量正以每年9％的速度增长，其已经成为增长最快的食品行业。
目前随着水产养殖“四化”现象的加剧，每年因水产病害而造成的巨大损失也让从事水产养殖业者们苦不堪言，极大地影响了水产养殖者的养殖信心。而在水产病害中细菌性疾病是最为常见的冷酷杀手，不管是四大家鱼养殖中的老三病、出血病，还是对虾养殖中的红腿病、菌血病等等，细菌性疾病危害着整个水产养殖业。在此情况下抗生素应运而生，成为了治疗细菌性疾病的救命稻草，但是随着抗生素在水产养殖中的过度应用，人们发现使用抗生素导致的一系列副作用，导致水产品安全质量问题愈演愈烈。益生菌的发现与应用给人们带来了希望。
而且，目前水产养殖中，水产养殖从业者为了追求更高的经济效益大量投放饲料来提高水产养殖生物的增重率，但是同时会造成水体环境污染与饲料资源的浪费。
提供一种先进的益生菌制剂来提高水产养殖中的饲料利用率，增强水产养殖生物免疫力，增加抗病能力是针对当前水产养殖业需要解决的问题。
发明内容
本发明的目的是解决上述问题提供一种复合型益生菌制剂及其制备方法和应用。
为实现上述目的，本发明提供了如下方案：
本发明提供一种复合型益生菌制剂，按重量份数计，包括以下组分：益生菌粉30～60份、鱿鱼膏10～15份、蚯蚓提取物15～20份、二甲基-β-丙酸噻亭3～5份、大豆寡糖5～9份、螺旋藻粉2～5份。
作为本发明的进一步优化，所述制备蚯蚓提取物方法为：按重量份取10～20份蚯蚓洗净，置于清水中吐沙后，将蚯蚓送入高速粉碎机中粉碎，得到蚯蚓原液，然后向蚯蚓原液中加入促溶剂混匀，再按重量比1:2.5～3加入纯净水，然后在温度为40～50℃、pH为5～6的条件下自溶酶解3～5h，然后沸水浴酶灭活6～8min，再经10000～11000r/min的转速离心12～15min，上清液即为自溶酶解液，取上清液在30～40℃温度下浓缩10～15min，将浓缩液进行冷冻干燥，即得蚯蚓提取物。其中促溶剂为薄荷醇和月桂氮酮的混合溶剂其重量比为3.5:1.2。所述蚯蚓提取物中含有大量的多肽和氨基酸。
作为本发明的进一步优化，所述复合型益生菌制剂，包括以下组分：益生菌粉55份、鱿鱼膏11份、蚯蚓提取物16份、二甲基-β-丙酸噻亭5份、大豆寡糖7份、螺旋藻粉5份。
作为本发明的进一步优化，所述益生菌粉包括乳酸菌、芽孢杆菌、双歧杆菌的一种或多种，其重量分数比为0～2.5∶0～3∶0～1.5，其中乳酸菌、芽孢杆菌、双歧杆菌的添加量不同时为0。芽孢杆菌进入水体中能够强化水质，同时也可对弧菌起到抑制作用，防止了弧菌病的出现。乳酸菌能够分泌乳酸、过氧化氢等物质，这些物质对水产生物体内有害细菌具有杀灭或拮抗作用，使有害菌在肠道内难以生存，从而对一些肠道疾病具有预防、治疗作用。
作为本发明的进一步优化，芽孢杆菌选自地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌一种或多种，乳酸菌选自嗜酸乳酸杆菌，双歧杆菌选自长双歧杆菌。
作为本发明的进一步优化，所述地衣芽孢杆菌菌落数为3×109～4×109cfu/g、枯草芽孢杆菌菌落数为5×109～7×109cfu/g、嗜酸乳酸杆菌菌落数为5×109～6×109cfu/g、长双歧杆菌菌落为2×109～4×109cfu/g。
本发明还提供一种复合型益生菌制剂的制备方法，包含以下步骤：
(1)称取益生菌粉、鱿鱼膏、蚯蚓提取物、二甲基-β-丙酸噻亭、大豆寡糖、螺旋藻粉混合均匀后备用；
(2)将步骤(1)的混合物置于压片机中，并加入20～40重量份的水，在50～65℃下压片，然后在3～8℃，真空度为0.05～0.06MPa的条件下干燥至水分含量≤12％，即得到复合型益生菌菌剂。
作为本发明的进一步优化，步骤(2)在60℃下压片，然后在3℃，真空度为0.05MPa的条件下干燥，即得到复合型益生菌菌剂。
本发明还提供复合型益生菌制剂在水产养殖中的应用。
作为本发明的进一步优化，作为饲料添加剂在水产养殖中的应用，所述复合型益生菌制剂作为饲料添加剂占饲料的重量百分比为0.5～1％。
本发明复合型益生菌制剂中的原料均选自自然界中天然存在的物质，其成分不会对水产养殖的生态环境造成损害。
益生菌制剂作为饲料添加剂能够调节水产动物体内微生态平衡，推动生长发育，增加抗病力、免疫力，起到增进健康和控制疾病的作用。乳酸菌在肠道内大量定殖，能够抵抗革兰氏阴性致病菌，提升机体感染力，推动鱼类生长，可以增加抗病能力。芽孢杆菌是一种耐受性强、需氧型、稳定的益生菌，地衣芽孢杆菌、长双歧杆菌、嗜酸乳酸杆菌的复合型菌能够切实减少弧菌数，增加机体的免疫力，推动生长。同时还具有推动营养吸收、提高机体消化水平，提升机体体重的特点。水产动物体内的益生菌除了本身能够帮助消化，增加饲料利用率，而且自身也含有多种维生素、菌体蛋白等营养物质。同时，益生菌制剂首先进入的是肠道，肠道黏膜的面积有皮肤表面的两倍，它不但是消化的主要区域，同时也能发挥一定的免疫作用，在外界环境恶化造成消化道疾病时，益生菌的进入能够调节提高肠道菌群，增强免疫力，以达到防治疾病的目的。
螺旋藻粉具有丰富的蛋白质、胡萝卜素、各种维生素、藻多糖、多不饱和脂肪酸、叶绿素等。其中蛋白质含量很高，螺旋藻中所含的藻多糖复合型物可作为免疫佐剂增强抗原性和机体免疫功能。
本发明双歧杆菌、乳酸菌、芽孢杆菌利用大豆寡糖、螺旋藻粉的营养会促进自身的生长和增殖，从而刺激巨噬细胞产生活性，被激活的巨噬细胞将分泌抗菌素，又会促进淋巴细胞分裂增殖，使水产生物肠道免疫器官生长，从而提高水产养殖生物机体免疫力。
本发明公开了以下技术效果：
本发明所提供的复合型益生菌制剂可以单独使用也可以与饲料配合使用，本发明复合型益生菌制剂天然无公害，其中的大豆寡糖、螺旋藻粉可提高益生菌在水产生物肠道内定殖率，而且还可以通过风味物质鱿鱼膏、蚯蚓提取物、二甲基-β-丙酸噻亭引诱水产养殖生物入食复合型益生菌制剂，提高复合型益生菌制剂的利用率。避免当下在饲料生产中添加益生菌导致的益生菌定殖率与利用率低的问题。而且本发明复合型益生菌制剂可以改善水产养殖的水体环境，提高水产养殖生物的免疫机能和肠道微生态平衡，促进了营养物质的吸收和利用，提高水产饲料的利用率。本发明所利用的原料来源稳定、价格低廉且其制作工艺简单。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
本发明所用原材料均来源于市场采购。
实施例1
蚯蚓提取物的制备：
称取20g份蚯蚓洗净，置于清水中吐沙后，将蚯蚓送入高速粉碎机中粉碎，得到蚯蚓原液，然后向蚯蚓原液中加入促溶剂混匀，再加入60g纯净水，然后在温度为50℃、pH为6的条件下自溶酶解5h，然后沸水浴酶灭活8min，再经11000r/min的转速离心15min，上清液即为自溶酶解液，取上清液在40℃温度下浓缩15min，将浓缩液进行冷冻干燥，即得蚯蚓提取物。其中促溶剂为薄荷醇和月桂氮酮的混合溶剂，其重量比为3.5:1.2。
复合益生菌制剂制备：
(1)称取地衣芽孢杆菌10g、枯草芽孢杆菌10g、嗜酸乳酸杆菌15g、长双歧杆菌10g、鱿鱼膏10g、蚯蚓提取物15g、二甲基-β-丙酸噻亭3g、大豆寡糖5g、螺旋藻粉2g混合均匀后备用。地衣芽孢杆菌菌落数为3×109cfu/g、枯草芽孢杆菌菌落数为5×109cfu/g、嗜酸乳酸杆菌菌落数为5×109cfu/g、长双歧杆菌菌落为2×109cfu/g。
(2)将步骤(1)的混合物置于压片机中，并加入20g的水，在50℃下压片，然后在3℃，真空度为0.05MPa的条件下干燥至水分含量为12％，即得到复合型益生菌菌剂。
将上述复合型益生菌制剂按照重量百分比为0.2％添加在南美白对虾水产饲料中，喂食对虾。对照组为未添加复合型益生菌制剂的普通饲料喂食组。
饲养试验结果显示，与对照组比较，对虾日增重提高了18.53％，饵料系数降低了12.42％，存活率提高了18.03％，经济效益增加了19.55％。实验组与对照组对对虾肠道酶活性进行进一步检测分析，发现其中蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性分别提高了42.85％、33.81％、35.95％。实验组与对照组比较进行进一步的免疫学指标分析，结果表明，复合益生菌制剂显著提高了血细胞呼吸爆发活性和血清中超氧化物歧化酶活性，分别提高了192.33％和52.33％，本发明的一种复合型益生菌制剂对水产动物的免疫机能有增强作用。本发明的一种复合型益生菌制剂有利于保持水产动物肠道完整性和促进肠道健康。
实施例2
蚯蚓提取物制备：
称取20g蚯蚓洗净，置于清水中吐沙后，将蚯蚓送入高速粉碎机中粉碎，得到蚯蚓原液，然后向蚯蚓原液中加入促溶剂混匀，再加入50g纯净水，然后在温度为45℃、pH为5.5的条件下自溶酶解4h，然后沸水浴酶灭活7min，再经10000r/min的转速离心14min，上清液即为自溶酶解液，取上清液在35℃温度下浓缩13min，将浓缩液进行冷冻干燥，即得蚯蚓提取物。其中促溶剂为薄荷醇和月桂氮酮的混合溶剂其重量比为3.5:1.2。
复合益生菌制剂制备：
(1)称取地衣芽孢杆菌10g、枯草芽孢杆菌10g、嗜酸乳酸杆菌20g、长双歧杆菌15g、鱿鱼膏11g、蚯蚓提取物16g、二甲基-β-丙酸噻亭5g、大豆寡糖7g、螺旋藻粉5g混合均匀后备用。地衣芽孢杆菌菌落数为4×109cfu/g、枯草芽孢杆菌菌落数为7×109cfu/g、嗜酸乳酸杆菌菌落数为6×109cfu/g、长双歧杆菌菌落为4×109cfu/g。
(2)将步骤(1)的混合物置于压片机中，并加入30g的水，在60℃下压片，然后在3℃，真空度为0.05MPa的条件下干燥至水分含量＝10％，即得到复合型益生菌菌剂。
将上述复合型益生菌制剂按照重量百分比为0.3％添加在异育银鲫水产饲料中，喂食异育银鲫。对照组为未添加复合型益生菌制剂的普通饲料喂食组。
饲养试验结果表明，与对照组比较，异育银鲫日增重提高了15.2％，存活率提高了11.5％，饵料系数降低了10.5％，经济效益增加了12.4％。实验组与对照组对鲫鱼肠道酶活性进行进一步检测分析，发现其中蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性分别提高了52.85％、23.81％、40.95％。实验组与对照组比较进行进一步的免疫学指标分析，结果表明，复合益生菌制剂显著提高了血细胞呼吸爆发活性和血清中超氧化物歧化酶活性，分别提高了222.33％和62.33％，而且鲫鱼体内的血浆补体C3和补体C4含量分别提高了53.83％和63.57％。本发明的一种复合型益生菌制剂对水产动物的免疫机能有增强作用。
实施例3
蚯蚓提取物的制备：
称取10g蚯蚓洗净，置于清水中吐沙后，将蚯蚓送入高速粉碎机中粉碎，得到蚯蚓原液，然后向蚯蚓原液中加入促溶剂混匀，再加入25g纯净水，然后在温度为40℃、pH为5的条件下自溶酶解3h，然后沸水浴酶灭活6min，再经10000r/min的转速离心12min，上清液即为自溶酶解液，取上清液在30℃温度下浓缩10min，将浓缩液进行冷冻干燥，即得蚯蚓提取物。其中促溶剂为薄荷醇和月桂氮酮的混合溶剂其重量比为3.5:1.2。
复合益生菌制剂的制备：
(1)称取地衣芽孢杆菌10g、枯草芽孢杆菌15g、长双歧杆菌15g、鱿鱼膏15g、蚯蚓提取物20g、二甲基-β-丙酸噻亭4g、大豆寡糖9g、螺旋藻粉5g混合均匀后备用。地衣芽孢杆菌菌落数为4×109cfu/g、枯草芽孢杆菌菌落数为6×109cfu/g、长双歧杆菌菌落为3×109cfu/g。
(2)将步骤(1)的混合物置于压片机中，并加入30g的水，在55℃下压片，然后在5℃，真空度为0.06MPa的条件下干燥至水分含量＝8％，即得到复合型益生菌菌剂。
将上述复合型益生菌制剂按照重量百分比为0.5％添加入甲鱼水产饲料中，喂食甲鱼。对照组为未添加复合型益生菌制剂的普通饲料喂食组。
饲养试验结果表明，与对照组比较，甲鱼成活率提高了20.4％，平均亩产提高了15.7％，饵料系数降低了15.5％，经济效益增加了25.7％。实验组与对照组对甲鱼肠道酶活性进行进一步检测分析，发现其中蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性分别提高了47.23％、52.26％、38.76％。实验组与对照组进行进一步的免疫学指标分析比较，结果表明，复合益生菌制剂显著提高了血细胞呼吸爆发活性和血清中超氧化物歧化酶活性，分别提高了212.33％和56.47％，而且甲鱼体内的血浆补体C3和补体C4含量分别提高了58.59％和66.53％。本发明的一种复合型益生菌制剂对水产动物的免疫机能有增强作用。另外通过分析甲鱼的肠道绒毛、发现对照组的肠道绒毛长度显著低于实验组。本发明的一种复合型益生菌制剂有利于保持水产动物肠道完整性和促进肠道健康。
实施例4
蚯蚓提取物的制备：
称取15g蚯蚓洗净，置于清水中吐沙后，将蚯蚓送入高速粉碎机中粉碎，得到蚯蚓原液，然后向蚯蚓原液中加入促溶剂混匀，再加入45g纯净水，然后在温度为45℃、pH为5的条件下自溶酶解3h，然后沸水浴酶灭活6min，再经10000r/min的转速离心15min，上清液即为自溶酶解液，取上清液在40℃温度下浓缩15min，将浓缩液进行冷冻干燥，即得蚯蚓提取物。其中促溶剂为薄荷醇和月桂氮酮的混合溶剂其重量比为3.5:1.2。
复合益生菌制剂制备：
(1)称取地衣芽孢杆菌10g、嗜酸乳酸杆菌10g、长双歧杆菌10g、鱿鱼膏13g、蚯蚓提取物18g、二甲基-β-丙酸噻亭4g、大豆寡糖7g、螺旋藻粉5g混合均匀后备用。所述地衣芽孢杆菌菌落数为4×109cfu/g、嗜酸乳酸杆菌菌落数为6×109cfu/g、长双歧杆菌菌落为3×109cfu/g。
(2)将步骤(1)的混合物置于压片机中，并加入30g的水，在50℃下压片，然后在5℃，真空度为0.06MPa的条件下干燥至水分含量＝10％，即得到复合型益生菌菌剂。
将上述复合型益生菌制剂按照重量百分比为0.6％添加在鲈鱼水产饲料中。对照组为未添加复合型益生菌制剂的普通饲料喂食组。
饲养试验结果表明，与对照组比较，鲈鱼日增重提高了16.11％，存活率提高了13.45％，饵料系数降低了13.5％、综合经济效益增加了18.2％。实验组与对照组对鲫鱼肠道酶活性进行进一步检测分析，发现其中蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性分别提高了51.44％、47.15％、40.68％。实验组与对照组进一步的免疫学指标分析表明，与对照组比较实验组体内的血浆补体C3含量和血清中超氧化物酶活性均有显著的提高，分别提高了61.4％和64.5％。本发明的一种复合型益生菌制剂对水产动物的免疫机能有增强作用。
实施例5
蚯蚓提取物制备：
称取20g蚯蚓洗净，置于清水中吐沙后，将蚯蚓送入高速粉碎机中粉碎，得到蚯蚓原液，然后向蚯蚓原液中加入促溶剂混匀，再加入60g纯净水，然后在温度为45℃、pH为6的条件下自溶酶解5h，然后沸水浴酶灭活8min，再经10000r/min的转速离心15min，上清液即为自溶酶解液，取上清液在30℃温度下浓缩10min，将浓缩液进行冷冻干燥，即得蚯蚓提取物。其中促溶剂为薄荷醇和月桂氮酮的混合溶剂其重量比为3.5:1.2。
复合益生菌制剂制备：
(1)称取嗜酸乳酸杆菌20g、长双歧杆菌20g、鱿鱼膏13g、蚯蚓提取物18g、二甲基-β-丙酸噻亭4g、大豆寡糖7g、螺旋藻粉5g混合均匀后备用。嗜酸乳酸杆菌菌落数为6×109cfu/g、长双歧杆菌菌落为4×109cfu/g。
(2)将步骤(1)的混合物置于压片机中，并加入30g的水，在50℃下压片，然后在5℃，真空度为0.06MPa的条件下干燥至水分含量＝10％，即得到复合型益生菌菌剂。
将上述复合型益生菌制剂按照重量百分比为0.6％添加在团头鲂水产饲料中。对照组为未添加复合型益生菌制剂的普通饲料喂食组。
饲养试验结果表明，与对照组比较，团头鲂日增重提高了12.11％，存活率提高了18.35％，饵料系数降低了11.27％、综合经济效益增加了20.12％。实验组与对照组对团头鲂肠道酶活性进行进一步检测分析，发现其中蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性分别提高了39.18％、45.26％、33.21％。而且复合益生菌制剂显著提高了团头鲂血细胞呼吸爆发活性和血清中超氧化物歧化酶活性，分别提高了203.78％和58.15％，而且团头鲂体内的血浆补体C3和补体C4含量分别提高了49.63％和55.67％。本发明的一种复合型益生菌制剂对水产动物的免疫机能有增强作用。
实施例6
蚯蚓提取物制备：
称取15g蚯蚓洗净，置于清水中吐沙后，将蚯蚓送入高速粉碎机中粉碎，得到蚯蚓原液，然后向蚯蚓原液中加入促溶剂混匀，再加入40g纯净水，然后在温度为45℃、pH为6的条件下自溶酶解4.5h，然后沸水浴酶灭活7min，再经10500r/min的转速离心14min，上清液即为自溶酶解液，取上清液在33℃温度下浓缩12min，将浓缩液进行冷冻干燥，即得蚯蚓提取物。其中促溶剂为薄荷醇和月桂氮酮的混合溶剂其重量比为3.5:1.2。
复合益生菌制剂制备：
(1)称取地衣芽孢杆菌25g、嗜酸乳酸杆菌30g、鱿鱼膏13g、蚯蚓提取物18g、二甲基-β-丙酸噻亭4g、大豆寡糖7g、螺旋藻粉5g混合均匀后备用。所述地衣芽孢杆菌菌落数为4×109cfu/g、嗜酸乳酸杆菌菌落数为6×109cfu/g。
(2)将步骤(1)的混合物置于压片机中，并加入30g的水，在50℃下压片，然后在5℃，真空度为0.06MPa的条件下干燥至水分含量＝10％，即得到复合型益生菌菌剂。
将上述复合型益生菌制剂按照重量百分比为0.4％添加在鲤鱼水产饲料中。对照组为未添加复合型益生菌制剂的普通饲料喂食组。
饲养试验结果表明，与对照组比较，鲤鱼日增重提高了16.37％，存活率提高了15.72％，饵料系数降低了15.94％、综合经济效益增加了18.67％。实验组与对照组对鲤鱼肠道酶活性进行进一步检测分析，发现其中蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性分别提高了47.96％、54.23％、30.44％。而且复合益生菌制剂显著提高了鲤鱼血细胞呼吸爆发活性和血清中超氧化物歧化酶活性，分别提高了189.17％和51.89％，而且鲤鱼体内的血浆补体C3和补体C4含量分别提高了49.28％和59.61％。本发明的一种复合型益生菌制剂对水产动物的免疫机能有增强作用。
对比例1
本实施例与实施例2相同，区别仅仅是未添加鱿鱼膏、二甲基-β-丙酸噻亭成分。
将上述实施例2与对比例1的复合型益生菌制剂分别按照重量百分比为0.3％添加在异育银鲫水产饲料中，喂食异育银鲫。
饲养试验结果表明，实施例2喂食组相较于对比例1喂食组，异育银鲫日增重提高了10.3％，存活率提高了6.5％，经济效益增加了9.4％。通过对对比例1喂食组养殖环境的观察发现了大量复合益生菌制剂与饲料存在并未被银鲫入食，实施例2喂食组则未出现此种情况，提高了益生菌制剂以及饲料的利用率。
对比例2
本实施例与实施例2相同，区别仅仅是未添加大豆寡糖、螺旋藻粉成分。
将实施例2与对比例2复合型益生菌制剂分别按照重量百分比为0.5％添加入甲鱼水产饲料中，喂食甲鱼。
饲养试验结果表明，实施例2，甲鱼成活率提高了11.34％，平均亩产提高了11.27％，饵料系数降低了10.5％，经济效益增加了15.45％。对甲鱼肠道酶活性进行进一步检测分析，发现实施例2喂食组其中蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性分别提高了33.43％、36.78％、24.35％。进行进一步的免疫学指标分析，结果表明，实施例2复合益生菌制剂显著提高了血细胞呼吸爆发活性和血清中超氧化物歧化酶活性，分别提高了124.57％和33.47％，而且甲鱼体内的血浆补体C3和补体C4含量分别提高了40.14％和46.24％。另外通过分析甲鱼的肠道绒毛，发现对比例2喂食组的肠道绒毛长度低于实施例2喂食组。发明人发现实施例2喂食组中乳酸菌、芽孢杆菌、双歧杆菌在肠道中的定殖率明显高于对比例2喂食组。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。
Claims (9)
1.一种复合型益生菌制剂，其特征在于，按重量份数计，包括以下组分：益生菌粉30～60份、鱿鱼膏10～15份、蚯蚓提取物15～20份、二甲基-β-丙酸噻亭3～5份、大豆寡糖5～9份、螺旋藻粉2～5份。
2.根据权利要求1所述的一种复合型益生菌制剂，其特征在于，包括以下组分：益生菌粉55份、鱿鱼膏11份、蚯蚓提取物16份、二甲基-β-丙酸噻亭5份、大豆寡糖7份、螺旋藻粉5份。
3.根据权利要求2所述的一种复合型益生菌制剂，其特征在于，所述益生菌粉包括乳酸菌、芽孢杆菌、双歧杆菌的一种或多种，其重量分数比为0～2.5∶0～3∶0～1.5，其中乳酸菌、芽孢杆菌、双歧杆菌的添加量不同时为0。
4.根据权利要求3所述的一种复合型益生菌制剂，其特征在于芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌一种或多种，乳酸菌为嗜酸乳酸杆菌，双歧杆菌为长双歧杆菌。
5.根据权利要求4所述的一种复合型益生菌制剂，其特征在于，所述地衣芽孢杆菌菌落数为3×109～4×109cfu/g、枯草芽孢杆菌菌落数为5×109～7×109cfu/g、嗜酸乳酸杆菌菌落数为5×109～6×109cfu/g、长双歧杆菌菌落为2×109～4×109cfu/g。
6.一种如权利要求1～5所述的复合型益生菌制剂的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
(1)称取益生菌粉、鱿鱼膏、蚯蚓提取物、二甲基-β-丙酸噻亭、大豆寡糖、螺旋藻粉混合均匀后备用；
(2)将步骤(1)的混合物置于压片机中，并加入20～40重量份的水，在50～65℃下压片，然后在3～8℃，真空度为0.05～0.06MPa的条件下干燥至水分含量≤12％，即得到复合型益生菌菌剂。
7.根据权利要求6所述的一种复合型益生菌制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)在60℃下压片，然后在3℃，真空度为0.05MPa的条件下干燥，即得到复合型益生菌菌剂。
8.一种如权利要求1～5任一项所述的复合型益生菌制剂在水产养殖中的应用。
9.根据权利要求8所述的复合型益生菌制剂在水产养殖中的应用，其特征在于，作为饲料添加剂在水产养殖中的应用，所述复合型益生菌制剂作为饲料添加剂占饲料的重量百分比为0.2～0.6％。
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