CN105724438A - 一种防治根结线虫的功能性菌剂 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种防治根结线虫的功能性菌剂，包括固氮菌菌剂、生防菌菌剂和载体，所述固氮菌菌剂、生防菌菌剂和载体的质量比为1～2.5:1.5～5:1，所述固氮菌菌剂包括根瘤菌和圆褐固氮菌，所述根瘤菌和圆褐固氮菌的有效活菌数比为1～100:1～200，所述生防菌菌剂包括淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌，所述淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌的有效活菌数比为1～100:1～100:1～100:1～100，所述功能性菌剂的有效活菌数为大于2亿/克。本发明中的功能性菌剂应用到肥料中，可以增加微生物肥料的防病效果，提高其促生作用，保证微生物肥料在施用过程中的营养补给，起到防治根结线虫，形成健康根瘤，促进植株生长的作用，提高作物产量和品质。

Description

一种防治根结线虫的功能性菌剂

技术领域

本发明属于农业领域，具体涉及一种防治根结线虫的功能性菌剂及其在肥料中的应用。

背景技术

根结线虫造成我国的农作物和经济作物产量降低，使我国农业经济遭受重大的损失。在根结线虫发病土壤里，根结线虫、农作物和根际微生物组成了一个小的生态系统，表明根结线虫病的发生与根际微生物有非常重要的关系。根结线虫作为一种顽固的土壤病害，直接危害作物的根部营养吸收。拮抗微生物作为其重要的生物防治方式，主要防病菌种已经得到筛选应用。其中有细菌、真菌和放线菌三大类主要土壤微生物种类，如芽孢杆菌属、淡紫拟青霉、厚垣轮枝菌等，但是没有充分发挥微生物在土壤根际的生态效应，也没有发挥复合微生物调节土壤肥力和固氮结瘤氮元素吸收功能。

CN103039534B公开了一种抑制根结线虫的微生物制剂的生产方法，该方法包括下述步骤：(1)分别将除虫链霉菌、淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌、球形芽抱杆菌的原始菌种在微生物实验室活化待摇瓶培养，其中除虫链霉菌、淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌的活化都在培养皿中进行，培养温度分别为32摄氏度，35摄氏度和32摄氏度，培养基按照标准的真菌培养基配料，培养时间为1天；球形芽抱杆菌的活化在试管斜面上进行，培养温度为35摄氏度，培养基成分为标准的细菌培养基，培养时间为1天；(2)分别将除虫链霉菌、淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌及球形芽抱杆菌的活化菌种摇瓶培养，获得摇瓶种子，各菌种的摇瓶种子的培养参数和步骤(1)中的培养参数相同，只是培养基选用液体培养基，且放在500mL的摇瓶中200转/分钟的转速培养，培养时间为2天；(3)分别将除虫链霉菌、淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌及球形芽抱杆菌的摇瓶种子在发酵罐二级放大培养成待混合的菌液，将摇瓶中的除虫链霉菌、淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌及球形芽抱杆菌的摇瓶种子分别接种在500L的发酵罐中培养，四株菌的培养基成分都为含10％的土豆泥、3％的豆粕粉的水溶液，培养温度为步骤(1)所述各菌种的培养温度，发酵罐转速为150转/分钟，通气量系数都为0.5，培养时间为27小时；(4)最后将500L发酵罐培养好的除虫链霉菌、淡紫拟青霉菌和厚垣轮枝菌和球形芽抱杆菌以及灭菌好的甘油按30-40％，10-20％，20-30％，10-30％和20％比例(体积比)混合即得，各菌液混合后的有效总活菌数大于25亿/毫升。该专利技术中公开了除虫链霉菌、淡紫拟青霉菌和厚垣轮枝菌和球形芽抱杆菌四种菌组成的微生物制剂用于防治根结线虫，抑制线虫卵的芽孢杆菌丰富度低，不利于其在复合微生物菌群中生存，。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种防治根结线虫的功能性菌剂，包括固氮菌菌剂、生防菌菌剂和载体，所述固氮菌菌剂、生防菌菌剂和载体的质量比为，固氮菌菌剂：生防菌菌剂：载体＝1～2.5:1.5～5:1，所述固氮菌菌剂包括根瘤菌和圆褐固氮菌，所述根瘤菌和圆褐固氮菌的有效活菌数比为，根瘤菌：圆褐固氮菌＝1～100:1～200，所述生防菌菌剂包括淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌，所述淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌的有效活菌数比为，淡紫拟青霉菌：厚垣轮枝菌：枯草芽孢杆菌：蜡状芽孢杆菌＝1～100:1～100:1～100:1～100，所述功能性菌剂的有效活菌数为大于2亿/克。

厚垣轮枝菌菌剂分泌物中含有具有杀线活性的物质，而且该物质可能在大豆胞囊线虫的部分生活史中起作用，如二龄幼虫阶段；淡紫拟青霉可以产生乙酸，它是一种重要的具有选择性杀线虫活性的代谢物质，可以对多种植物寄生线虫的卵及幼虫的发育造成影响，导致胚胎产生气泡，停止发育或畸形，对幼虫具有麻痹致死作用；枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对病菌有明显的抑制作用，并且还能分泌大量几丁质酶，几丁质酶可分解病原真菌的细胞壁而抑制真菌病害，分解菌剂生存环境中的有毒有害物质。

优选的，所述载体为活性炭和沸石中的一种或两种。

优选的，所述根结线虫包括番茄根结线虫、芹菜根结线虫、黄瓜根结线虫、丝瓜根结线虫、苦瓜根结线虫或者烟草根结线虫。

优选的，所述生防菌菌剂中还包括甘油，所述甘油占生防菌菌剂的重量百分数为15～25％。

优选的，所述固氮菌菌剂、生防菌菌剂和活性炭的质量比为，固氮菌菌剂：生防菌菌剂：载体＝2:2:1。

优选的，所述根瘤菌和圆褐固氮菌的有效活菌数比为，根瘤菌：圆褐固氮菌＝3:7。

优选的，所述淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌的有效活菌数比为，淡紫拟青霉菌：厚垣轮枝菌：枯草芽孢杆菌：蜡状芽孢杆菌＝3:5:4:4。

优选的，所述功能性菌剂的有效活菌数为5亿/克。

本发明还提供一种根据上述功能性菌剂在肥料中的应用，所述功能菌剂与肥料的重量比为，功能性菌剂：肥料＝1:5～200。

优选的，所述肥料包括有机肥、无机肥、复混肥、中微量元素肥、农家肥。

优选的，所述功能菌剂与肥料的重量比为，功能性菌剂：肥料＝1:100。

本发明的有益效果：

(1)本发明中的功能性菌剂中包含的菌种多样，起到主要抑制线虫卵的芽孢杆菌属丰富度高，除了防病防虫的效果，并具有根际固氮功能；

(2)本发明中的功能性菌剂中具有配套载体，多种微生物依附在活性炭或者沸石上，其防治根结线虫的效果不会随土壤环境的改变而呈现不稳定趋势，防治效果较好，且活性炭作为载体可以为微生物提供碳源，维持微生物生存的营养环境；

(3)本发明中的功能性菌剂中的固氮菌和生防菌菌剂合理的配比，保证了生防菌适宜的生存营养环境，生防菌菌剂中四种微生物合理的配比，使防治根结线虫的效果达到最佳；

(4)本发明中的功能性菌剂应用到肥料中，可以增加复合微生物肥料的防病效果，提高其促生作用，同时保证微生物肥料在施用过程中的营养补给以及在原土壤中微生态的适应度。由此，起到防治根结线虫，形成健康根瘤，促进植株生长的作用，提高作物产量和品质。

具体实施方式

下面对本发明的具体实施方式作进一步说明：

实施例1由防治根结线虫的功能性菌剂制备固体微生物肥

固体微生物肥的制备方法如下：

(1)将85kg无机肥原料(尿素20kg、磷酸氢二钾35kg、硫酸钾30kg)、0.02kg细胞分裂素和1.5kg微量元素盐(0.5kgEDTA-锌、0.25kg硫酸锌、0.5kg七水硫酸亚铁、0.25kg硫酸锰)混合均匀，加入3kg水，在圆盘造粒机中70℃造粒得到无机肥料颗粒；

(2)在6kg氨基酸粉中加入0.75kgpH调节剂(氢氧化钠或者硫酸)调节混合物pH值为6.0；

(3)将0.64kg防治根结线虫的功能性菌剂(该功能性菌剂按固氮菌菌剂：生防菌菌剂：活性炭＝2：2：1的质量比组成，根瘤菌和圆褐固氮菌的有效活菌数比为，根瘤菌：圆褐固氮菌＝1:50，淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌的有效活菌数比为，淡紫拟青霉菌：厚垣轮枝菌：枯草芽孢杆菌：蜡状芽孢杆菌＝100:50:10:1，功能性菌剂的有效活菌数为5亿/克)的发酵液接种在步骤(2)的混合物中，并加入4kg的水，得到喷涂液，将所得喷涂液喷在步骤(1)的无机肥料粒表面，形成菌剂层；

(4)在菌剂层外面加入0.6kg防板结粉形成防板结层，降至常温，得到固体微生物肥A。

实施例2由防治根结线虫的功能性菌剂制备液体微生物肥

液体微生物肥的制备步骤如下：

将37kg无机肥料(硝酸铵10kg、磷酸二氢钾10kg、硫酸钾17kg)混合，加入20kg水搅拌并磨碎，形成溶液；向混合溶液中依次加入3kg硼砂、2kg硫酸亚铁、2.5kgEDTA-锌、0.2kg海藻酸钠；加热至75℃，加入25kg含有机质质量百分数为60％的糖蜜发酵废液，反应1.5小时；反应液降至常温；加入pH调节剂(氢氧化钠或者硫酸)，调节反应液pH为6，缓慢加入10kg功能性菌剂(该功能性菌剂按固氮菌菌剂：生防菌菌剂：活性炭＝2：2：1的质量比组成，根瘤菌和圆褐固氮菌的有效活菌数比为，根瘤菌：圆褐固氮菌＝3:7，淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌的有效活菌数比为，淡紫拟青霉菌：厚垣轮枝菌：枯草芽孢杆菌：蜡状芽孢杆菌＝3:5:4:4，甘油占生防菌质量的20％，功能性菌剂的有效活菌数为5亿/克)、0.02kg细胞分裂素，得到液体微生物肥B。

对比实施例对比微生物肥的制备

根据实施例1中固体微生物肥的制备配方，在对比例1-5中改变功能性菌剂中的组成配比，使对比例中的原料配比低于实施例1的范围，并且不在本发明中给出的技术方案所述的范围内，其他工艺条件不变，制备得到相应的对比固体微生物肥；

根据实施例2中液体微生物肥的制备配方，在对比例6-10中改变功能性菌剂中的组成配比，使对比例中的原料配比低于实施例1的范围，并且不在本发明中给出的技术方案所述的范围内，其他工艺条件不变，制备得到相应的对比液体微生物肥；

根据实施例2，在实施例2的制备配方基础上，在功能菌剂中添加20％的甘油，其他工艺条件不变，制备得到液体微生物肥C；

表1中“固：生：碳”表示固氮菌菌剂、生防菌菌剂和活性炭的质量比，“根：圆”表示根瘤菌和圆褐固氮菌的有效活菌数比，“淡：厚：枯：蜡”表示淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌的有效活菌数比，肥料和功能性菌剂的单位为kg，具体对比数据见表1：

表1

效果实施例由防治根结线虫的功能性菌剂制备微生物肥的应用效果

将上述实施例1和对比实施例1-5中制备得到的固体微生物肥施用在芹菜作物(5亩)上，整地施肥，播前进行灭茬、深耕，结合翻地施入固体微生物肥10千克/亩；将上述实施例2-3和对比实施例6-10中制备得到的液体微生物肥施用在芹菜作物(5亩)上，在芹菜苗期，施入液体微生物肥50千克/亩。检测芹菜线虫染病率，线虫染病率为线虫染病株数占总株数的百分比，百分比越小，防病效果越好；测定芹菜的增产，增产量是相对于不施肥的情况下计算得到的。将上述实施例1-3和对比实施例1-10中制备得到的微生物肥施用在番茄作物(5亩)上，果实成熟期收获，计算增产量，增产量是相对于不施肥的情况下计算得到。具体对比数据见表2：

表2

从表2数据结果可以看出，将实施例1-3配比的功能性菌剂应用在固体微生物肥和液体微生物肥中都有较好的效果，实施例1和实施例2的实验数据表明，施用添加了防治根结线虫的功能性菌剂后的微生物肥料后，芹菜根结线虫的染病率明显低于对比例，防病效果明显增强，且芹菜和番茄的产量与对比例相比也明显提高了，这说明实施例1-2中功能性菌剂应用到肥料中，可以增加复合微生物肥料的防病效果，提高其促生作用，同时保证微生物肥料在施用过程中的营养补给以及在原土壤中微生态的适应度，由此，起到防治根结线虫，形成健康根瘤，促进植株生长的作用，提高作物产量和品质；从实施例3与实施例2的数据结果比较得知，添加了甘油的功能性菌剂，防病效果更好。

根据上述说明书的揭示和教导，本发明所属领域的技术人员还可以对上述实施方式进行变更和修改。因此，本发明并不局限于上面揭示和描述的具体实施方式，对发明的一些修改和变更也应当落入本发明的权利要求的保护范围内。此外，尽管本说明书中使用了一些特定的术语，但这些术语只是为了方便说明，并不对本发明构成任何限制。

Claims (10)

1.一种防治根结线虫的功能性菌剂，其特征在于，包括固氮菌菌剂、生防菌菌剂和载体，所述固氮菌菌剂、生防菌菌剂和载体的质量比为，固氮菌菌剂：生防菌菌剂：载体＝1～2.5:1.5～5:1，所述固氮菌菌剂包括根瘤菌和圆褐固氮菌，所述根瘤菌和圆褐固氮菌的有效活菌数比为，根瘤菌：圆褐固氮菌＝1～100:1～200，所述生防菌菌剂包括淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌，所述淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌的有效活菌数比为，淡紫拟青霉菌：厚垣轮枝菌：枯草芽孢杆菌：蜡状芽孢杆菌＝1～100:1～100:1～100:1～100，所述功能性菌剂的有效活菌数为大于2亿/克。

2.根据权利要求1所述的功能性菌剂，其特征在于，所述载体包括活性炭和沸石中的一种或两种。

3.根据权利要求1所述的功能性菌剂，其特征在于，所述生防菌菌剂中还包括甘油，所述甘油占生防菌菌剂的重量百分数为15～25％。

4.根据权利要求1所述的功能性菌剂，其特征在于，所述根结线虫包括番茄根结线虫、芹菜根结线虫、黄瓜根结线虫、丝瓜根结线虫、苦瓜根结线虫或者烟草根结线虫。

5.根据权利要求1所述的功能性菌剂，其特征在于，所述固氮菌菌剂、生防菌菌剂和活性炭的质量比为，固氮菌菌剂：生防菌菌剂：载体＝2:2:1。

6.根据权利要求1所述的功能性菌剂，其特征在于，所述根瘤菌和圆褐固氮菌的有效活菌数比为，根瘤菌：圆褐固氮菌＝3:7。

7.根据权利要求1所述的功能性菌剂，其特征在于，所述淡紫拟青霉菌、厚垣轮枝菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌的有效活菌数比为，淡紫拟青霉菌：厚垣轮枝菌：枯草芽孢杆菌：蜡状芽孢杆菌＝3:5:4:4。

8.一种根据权利要求1-7任一项所述功能性菌剂在肥料中的应用，其特征在于，所述功能菌剂与肥料的重量比为，功能性菌剂：肥料＝1:5～200。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述肥料包括有机肥、无机肥、复混肥、中微量元素肥、农家肥。

10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述功能菌剂与肥料的重量比为，功能性菌剂：肥料＝1:100。