CN105675569A - 一种检测金黄色葡萄菌肠毒素a的方法及检测试剂盒 - Google Patents

一种检测金黄色葡萄菌肠毒素a的方法及检测试剂盒 Download PDF

Info

Publication number
CN105675569A
CN105675569A CN201610073268.7A CN201610073268A CN105675569A CN 105675569 A CN105675569 A CN 105675569A CN 201610073268 A CN201610073268 A CN 201610073268A CN 105675569 A CN105675569 A CN 105675569A
Authority
CN
China
Prior art keywords
golden yellow
staphylococcus enterotoxin
yellow staphylococcus
aptamer
ssdna
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201610073268.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105675569B (zh
Inventor
王益林
苏安梅
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangxi University
Original Assignee
Guangxi University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangxi University filed Critical Guangxi University
Priority to CN201610073268.7A priority Critical patent/CN105675569B/zh
Publication of CN105675569A publication Critical patent/CN105675569A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105675569B publication Critical patent/CN105675569B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6402—Atomic fluorescence; Laser induced fluorescence
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6486—Measuring fluorescence of biological material, e.g. DNA, RNA, cells

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种检测金黄色葡萄菌肠毒素A的方法及检测试剂盒，该方法包括如下步骤：(A)使金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体与单链信号探针DNA杂交，形成DNA杂交链；(B)使该杂交链与待测样品中金黄色葡萄菌肠毒素A时，DNA杂交链与金黄色葡萄菌肠毒素A反应释放出单链信号探针DNA；(C)利用DNA扩增，使杂交链成双链DNA，然后用外切酶催化双链DNA水解成单核苷酸，单链信号探针DNA不水解而保留下来；(D)在单链信号探针DNA诱导下，银离子被维生素C还原生成近红外荧光银纳米簇；测定体系的荧光强度，从而测定待测样品中的金黄色葡萄菌肠毒素A的含量。

Description

一种检测金黄色葡萄菌肠毒素A的方法及检测试剂盒
技术领域
本发明涉及纳米生物传感以及生物检测领域，具体是一种检测金黄色葡萄菌肠毒素A的方法及检测试剂盒。
背景技术
食品安全已成为影响人类自身健康安全和社会稳定的重要因素，由食源性疾病和食品污染引发的食物中毒与食源性疾病平均每年发生数十亿例,发达国家每年至少有三分之一的人群患食源性疾病。其中由微生物污染造成的食源性疾病位居首位，而金黄色葡萄球菌肠毒素又是引起细菌性食物中毒的最主要的食源性疾病。金黄色葡萄球菌肠毒素由金黄色葡萄球菌产生，其污染源和传播途径极广，可途径食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。因此，防止其污染非常困难。金葡菌可产生A、B、C、D、E、F等多种肠毒素。金葡菌性食物中毒以A型肠毒素引起者最多。因此，对金黄色葡萄菌肠毒素A监测非常必要。
目前，金黄色葡萄菌肠毒素A的主要检测方法有：色谱法、免疫层析法、色谱-质谱联用法等方法。最近，ZhoupingWang公开了一种基于稀土荧光纳米晶-肠毒素A核酸适体的金黄色葡萄菌肠毒素的检测方法。
但色谱-质谱联用法仪器价格昂贵，并且需要专门技术人员才能进行检测工作，技术要求高，难于普及；免疫法试剂贵、且所用生物试剂非常容易失活，或需使用价格较昂贵的通过标记的DNA等不足。
发明内容
本发明的目的是提供一种检测金黄色葡萄菌肠毒素A的方法及试剂盒。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：
1.一种检测金黄色葡萄菌肠毒素A的方法，该方法包括如下步骤：
1)将各DNA储备液在95℃下经加热处理5分钟，使用前，并在室温下放置30分钟，然后，分别取含3.0μmol金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体Apt的杂交缓冲溶液40μL和3.0μmol信号探针ssDNA的杂交缓冲溶液40μL置于2ml离心管中，在37℃下杂交1小时，生成金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体-信号探针杂交物Apt-ssDNA。
2)在37℃下，分别将浓度为0～50ng/mL的金黄色葡萄菌肠毒素A添加到Apt-ssDNA溶液中，金黄色葡萄菌肠毒素A与金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体反应，生成核酸适体-金黄色葡萄菌肠毒素A，释放出ssDNA。这时，体系中有ssDNA、剩余未反应的APT-ssDNA和核酸适体-金黄色葡萄菌肠毒素A等物质；所述金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体为5’-AGCAGCACAGAGGTCAGATGTACTTATGCATTTCCTCCCACGATCTTATTTGAGAGTGACCCTATGCGTGCTACC-3’。
3)加入10μL缓冲溶液，缓冲溶液组成为50mMTris-HCl,10mMMgCl2，10mM(NH4)2SO4,pH7.5，然后加入dNTP(10mM)18μL。再向体系中加入2μLPhi29DNA聚合酶10u/μl,在37℃下反应15分钟，使得以金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体-信号探针杂交序列Ap-ssDN为摸板扩增成双链DNA。在65℃下保持10分钟使Phi29DNA去活。
4)再向该反应体系中加入2μLExoIII核酸外切酶20u/μL，在37℃下反应30分钟，ExoIII核酸外切酶使选择性地催化双链DNA水解成单核苷酸，单链探针ssDNA不水解而保留下来；所述的单链信号探针ssDNA为5’-CCCCCCACACCCGATCCCCCCGGTAGCACGCATAGG-3’。
5)向反应液中加入25μL1mmol硝酸银和10mM，pH7.0的180μLPBS，然后，混合物在室温下避光或暗室中放置10分钟后，在快速搅拌下，加入100μL浓度为1mM的新制备的抗坏血酸溶液，然后在45℃下反应5～10min；
6)将溶液转移至微量比色皿，以波长为585nm的光为激发光，测定体系荧光发射(610-800nm)光谱，体系的荧光发射峰的强度与金黄色葡萄菌肠毒素A存在线性关系，其线性方程式为，y＝286.87+96.12C，相关系数r＝0.9988，线性范围0.002～0.20ng/mL，检测限1pg/mL，回收率在97.5～114.3％。其它细菌毒素等生物小分子对金黄色葡萄菌肠毒素A的检测无干扰。
上述金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体为5’-AGCAGCACAGAGGTCAGATGTACTTATGCATTTCCTCCCACGATCTTATTTGAGAGTGACCCTATGCGTGCTACC-3’。
上述的单链信号探针ssDNA为5’-CCCCCCACACCCGATCCCCCCGGTAGCACGCATAGG-3’。
2.一种检测金黄色葡萄菌肠毒素A的试剂盒，包括：金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体、单链信号探针ssDNA、DNA扩增体系、核酸外切酶、银离子还原检测体系，所述金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体为5’-AGCAGCACAGAGGTCAGATGTACTTATGCATTTCCTCCCACGATCTTATTTGAGAGTGACCCTATGCGTGCTACC-3’；所述的单链信号探针DNA为5’-CCCCCCACACCCGATCCCCCCGGTAGCACGCATAGG-3’；所述DNA扩增体系包括缓冲溶液(Tris-HCl、MgCl2、(NH4)2SO4)、三磷酸脱氧单核苷酸混合物dNTP和Phi29DNA聚合酶；所述核酸外切酶为ExoIII核酸外切酶；所述的银离子还原检测体系中还原剂为抗坏血酸。
3.一种可用于检测金黄色葡萄菌肠毒素A的金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体，其碱基序列为5’-AGCAGCACAGAGGTCAGATGTACTTATGCATTTCCTCCCACGATCTTATTTGAGAGTGACCCTATGCGTGCTACC-3’。
本发明的检测原理如下：先让Apt与ssDNA杂交；当有金黄色葡萄菌肠毒素A存在时，杂交链与金黄色葡萄菌肠毒素A反应释放出ssDNA；体系中存在Apt-ssDNA(剩余的)，Apt-金黄色葡萄菌肠毒素A和ssDNA。Apt-金黄色葡萄菌肠毒素A不能诱导银离子还原成近红外荧光银纳米簇，Apt-金黄色葡萄菌肠毒素A存在对测定无干扰；杂交链可能有干扰；为了消除杂交链的干扰：a.利用DNA扩增，使杂交链成双链DNA，b.用核酸外切酶选择性地催化双链DNA水解成单核苷酸，而单链信号探针ssDNA不水解而保留下来。此时体系中只留下可诱导生成近红外荧光银纳米簇的ssDNA，通过检测体系的荧光强度，依据荧光强度与金黄色葡萄菌肠毒素A的量的关系，可以测定金黄色葡萄菌肠毒素A的含量。由于消除体系中背景荧光的干扰，提高了检测的灵敏度和精度。
本发明的优点：
本发明的检测方法和试剂盒，消除了背景荧光的干扰，提高了金黄色葡萄菌肠毒素A的检测灵敏度和精度。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
检测金黄色葡萄菌肠毒素A的试剂盒包括：金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体、单链信号探针ssDNA、DNA扩增体系、核酸外切酶、银离子还原检测体系。
所述金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体为5’-AGCAGCACAGAGGTCAGATGTACTTATGCATTTCCTCCCACGATCTTATTTGAGAGTGACCCTATGCGTGCTACC-3’。
所述的单链信号探针ssDNA为5’-CCCCCCACACCCGATCCCCCCGGTAGCACGCATAGG-3’。
所述DNA扩增体系包括缓冲溶液(Tris-HCl、MgCl2、(NH4)2SO4)、dNTP和Phi29DNA聚合酶。所述核酸外切酶为ExoIII核酸外切酶。
实施例2
一种检测金黄色葡萄菌肠毒素A的方法，具体操作过程如下：
将各DNA储备液在95℃下经加热处理5分钟，使用前，并在室温下放置30分钟。然后，分别取含3.0μmol金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体(Apt)的杂交缓冲溶液40μL和3.0μmol信号探针ssDNA的杂交缓冲溶液40μL置于2ml离心管中，在37℃下杂交1小时，生成金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体-信号探针杂交物(Apt-ssDNA)。
在37℃下，分别将浓度为0～50ng/mL的金黄色葡萄菌肠毒素A添加到Apt-ssDNA溶液中，金黄色葡萄菌肠毒素A与金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体反应，生成核酸适体-金黄色葡萄菌肠毒素A，释放出ssDNA。这时，体系中有ssDNA、剩余(未反应的)APT-ssDNA和核酸适体-金黄色葡萄菌肠毒素A等物质。
加入10μL缓冲溶液(缓冲溶液组成为50mMTris-HCl,10mMMgCl2，10mM(NH4)2SO4,pH7.5)，然后加入dNTP(10mM)18μL。再向体系中加入2μLPhi29DNA聚合酶(10u/μl),在37℃下反应15分钟，使得以金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体-信号探针杂交序列(Ap-ssDNA)为摸板扩增成双链DNA。在65℃下保持10分钟使Phi29DNA去活。
再向该反应体系中加入2μLExoIII核酸外切酶(20u/μL)，在37℃下反应30分钟，ExoIII核酸外切酶使选择性地催化双链DNA水解成单核苷酸，单链探针ssDNA不水解而保留下来。
向反应液中加入25μL1mmol硝酸银和180μLPBS(10mM，pH7.0)。然后，混合物在室温下避光或暗室中放置10分钟后，在快速搅拌下，加入100μL浓度为1mM的新制备的抗坏血酸溶液。然后在45℃下反应5～10min。
将溶液转移至微量比色皿，以波长为585nm的光为激发光，测定体系荧光发射(610-800nm)光谱。体系的荧光发射峰的强度与金黄色葡萄菌肠毒素A存在线性关系，其线性方程式为，y＝286.87+96.12C，相关系数r＝0.9988，线性范围0.002～0.20ng/mL，检测限1pg/mL，回收率在97.5～114.3％。其它细菌毒素等生物小分子对金黄色葡萄菌肠毒素A的检测无干扰。

Claims (3)

1.一种检测金黄色葡萄菌肠毒素A的方法，其特征是，该方法包括如下步骤：
1)将各DNA储备液在95℃下经加热处理5分钟，使用前，并在室温下放置30分钟，然后，分别取含3.0μmol金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体Apt的杂交缓冲溶液40μL和3.0μmol信号探针ssDNA的杂交缓冲溶液40μL置于2ml离心管中，在37℃下杂交1小时，生成金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体-信号探针杂交物Apt-ssDNA；
2)在37℃下，分别将浓度为0～50ng/mL的金黄色葡萄菌肠毒素A添加到Apt-ssDNA溶液中，金黄色葡萄菌肠毒素A与金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体反应，生成核酸适体-金黄色葡萄菌肠毒素A，释放出ssDNA；这时，体系中有ssDNA、剩余未反应的APT-ssDNA和核酸适体-金黄色葡萄菌肠毒素A物质；所述金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体为5’-AGCAGCACAGAGGTCAGATGTACTTATGCATTTCCTCCCACGATCTTATTTGAGAGTGACCCTATGCGTGCTACC-3’；
3)加入10μL缓冲溶液，缓冲溶液组成为50mMTris-HCl,10mMMgCl2，10mM(NH4)2SO4,pH7.5，然后加入dNTP(10mM)18μL；再向体系中加入2μLPhi29DNA聚合酶10u/μl,在37℃下反应15分钟，使得以金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体-信号探针杂交序列Ap-ssDN为摸板扩增成双链DNA，在65℃下保持10分钟使Phi29DNA去活；
4)再向该反应体系中加入2μLExoIII核酸外切酶20u/μL，在37℃下反应30分钟，ExoIII核酸外切酶使选择性地催化双链DNA水解成单核苷酸，单链探针ssDNA不水解而保留下来；所述的单链信号探针ssDNA为5’-CCCCCCACACCCGATCCCCCCGGTAGCACGCATAGG-3’；
5)向反应液中加入25μL1mmol硝酸银和10mM，pH7.0的180μLPBS，然后，混合物在室温下避光或暗室中放置10分钟后，在快速搅拌下，加入100μL浓度为1mM的新制备的抗坏血酸溶液，然后在45℃下反应5～10min；
6)将溶液转移至微量比色皿，以波长为585nm的光为激发光，测定体系荧光发射(610-800nm)光谱，体系的荧光发射峰的强度与金黄色葡萄菌肠毒素A存在线性关系，其线性方程式为，y＝286.87+96.12C，相关系数r＝0.9988，线性范围0.002～0.20ng/mL，检测限1pg/mL，回收率在97.5～114.3％。其它细菌毒素等生物小分子对金黄色葡萄菌肠毒素A的检测无干扰。
2.一种检测金黄色葡萄菌肠毒素A的试剂盒，其特征是，包括：金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体、单链信号探针ssDNA、DNA扩增体系、核酸外切酶、银离子还原检测体系，所述金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体为5’-AGCAGCACAGAGGTCAGATGTACTTATGCATTTCCTCCCACGATCTTATTTGAGAGTGACCCTATGCGTGCTACC-3’；所述的单链信号探针DNA为5’-CCCCCCACACCCGATCCCCCCGGTAGCACGCATAGG-3’；所述DNA扩增体系包括缓冲溶液(Tris-HCl、MgCl2、(NH4)2SO4)、三磷酸脱氧单核苷酸混合物dNTP和Phi29DNA聚合酶；所述核酸外切酶为ExoIII核酸外切酶；所述的银离子还原检测体系中还原剂为抗坏血酸。
3.一种可用于检测金黄色葡萄菌肠毒素A的金黄色葡萄菌肠毒素A核酸适体，其碱基序列为5’-AGCAGCACAGAGGTCAGATGTACTTATGCATTTCCTCCCACGATCTTATTTGAGAGTGACCCTATGCGTGCTACC-3’。
CN201610073268.7A 2016-02-02 2016-02-02 一种检测金黄色葡萄菌肠毒素a的方法及检测试剂盒 Active CN105675569B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610073268.7A CN105675569B (zh) 2016-02-02 2016-02-02 一种检测金黄色葡萄菌肠毒素a的方法及检测试剂盒

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610073268.7A CN105675569B (zh) 2016-02-02 2016-02-02 一种检测金黄色葡萄菌肠毒素a的方法及检测试剂盒

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105675569A true CN105675569A (zh) 2016-06-15
CN105675569B CN105675569B (zh) 2019-04-02

Family

ID=56303398

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610073268.7A Active CN105675569B (zh) 2016-02-02 2016-02-02 一种检测金黄色葡萄菌肠毒素a的方法及检测试剂盒

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105675569B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109975542A (zh) * 2019-02-22 2019-07-05 中山大学 一种生物分子检测试剂盒以及生物分子检测方法
CN116754762A (zh) * 2023-04-26 2023-09-15 国家粮食和物资储备局科学研究院 基于核酸适体的真菌毒素无毒定量分析试剂盒及其应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004069504A (ja) * 2002-08-07 2004-03-04 Meiji Milk Prod Co Ltd 有毒物質の迅速的検出法
CN102061336A (zh) * 2010-11-19 2011-05-18 南京市产品质量监督检验院 荧光pcr法对食品中葡萄球菌肠毒素的快速检测与分型方法
CN102952886A (zh) * 2012-11-28 2013-03-06 中华人民共和国张家港出入境检验检疫局 艰难梭菌肠毒素a、b双重荧光定量pcr检测方法及检测用试剂盒
CN103224561A (zh) * 2013-01-16 2013-07-31 天津大学 葡萄球菌肠毒素小分子抗体及制备方法及用途
CN104531867A (zh) * 2014-12-25 2015-04-22 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 产气荚膜梭菌肠毒素阳性菌双重荧光定量pcr快速检测试剂盒
US20150218623A1 (en) * 2011-05-26 2015-08-06 Roche Molecular Systems, Inc. Compositions and methods for detection of staphylococcus aureus

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004069504A (ja) * 2002-08-07 2004-03-04 Meiji Milk Prod Co Ltd 有毒物質の迅速的検出法
CN102061336A (zh) * 2010-11-19 2011-05-18 南京市产品质量监督检验院 荧光pcr法对食品中葡萄球菌肠毒素的快速检测与分型方法
US20150218623A1 (en) * 2011-05-26 2015-08-06 Roche Molecular Systems, Inc. Compositions and methods for detection of staphylococcus aureus
CN102952886A (zh) * 2012-11-28 2013-03-06 中华人民共和国张家港出入境检验检疫局 艰难梭菌肠毒素a、b双重荧光定量pcr检测方法及检测用试剂盒
CN103224561A (zh) * 2013-01-16 2013-07-31 天津大学 葡萄球菌肠毒素小分子抗体及制备方法及用途
CN104531867A (zh) * 2014-12-25 2015-04-22 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 产气荚膜梭菌肠毒素阳性菌双重荧光定量pcr快速检测试剂盒

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
M. KLOTZ ET AL.: "Detection of Staphylococcus aureus Enterotoxins A to D by Real-Time Fluorescence PCR Assay", 《JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY》 *
张红河等: "快速检测金黄色葡萄球菌肠毒素A基因方法的建立与应用", 《中国微生态学杂志》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109975542A (zh) * 2019-02-22 2019-07-05 中山大学 一种生物分子检测试剂盒以及生物分子检测方法
CN116754762A (zh) * 2023-04-26 2023-09-15 国家粮食和物资储备局科学研究院 基于核酸适体的真菌毒素无毒定量分析试剂盒及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN105675569B (zh) 2019-04-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2761915C (en) A method and kit for detecting antibiotic resistant bacteria
Park et al. Multiplex PCR assay for the detection and quantification of Campylobacter spp., Escherichia coli O157: H7, and Salmonella serotypes in water samples
CN108676844B (zh) 一种双酶放大汞离子生物传感器的构建
CN114085896A (zh) 使用非干扰性噪音消除性多核苷酸鉴定标签的多重焦磷酸测序
CN105675565B (zh) 一种快速检测黄曲霉毒素b1的方法
Mentasti et al. Design and validation of a qPCR assay for accurate detection and initial serogrouping of Legionella pneumophila in clinical specimens by the ESCMID Study Group for Legionella Infections (ESGLI)
Kim et al. Ultrasensitive colorimetric detection of Salmonella enterica Typhimurium on lettuce leaves by HRPzyme-Integrated polymerase chain reaction
CN104328212A (zh) 环介导等温扩增法检测b群链球菌的引物组及试剂盒
Kumari et al. Species-specific loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for identification of tissue of cattle origin by targeting mitochondrial gene sequences
CN105675569A (zh) 一种检测金黄色葡萄菌肠毒素a的方法及检测试剂盒
Xu et al. A loop-mediated isothermal amplification integrated G-quadruplex molecular beacon (LAMP-GMB) method for the detection of Staphylococcus aureus in food
Wu et al. An enhanced visual detection assay for Listeria monocytogenes in food based on isothermal amplified peroxidase-mimicking catalytic beacon
Milton et al. Novel saltatory rolling circle amplification assay for rapid and visual detection of Campylobacter jejuni in chicken meat
Milton et al. Development of a novel visual detection technique for Campylobacter jejuni in chicken meat and caecum using polymerase spiral reaction (PSR) with pre-added dye
Wang et al. Nanoparticle-based lateral flow biosensor combined with multiple cross displacement amplification for rapid, visual and sensitive detection of Vibrio cholerae
CN111406118A (zh) 呼吸道合胞病毒种属的切口产生和延伸扩增反应(near)
CN103305605B (zh) 基于dna自组装的非酶离子检测方法
Koyuncu et al. DNA microarray for tracing Salmonella in the feed chain
CN104087655B (zh) 基于滚环扩增的限制性核酸内切酶单链切割的分析方法
JP4162187B2 (ja) ピロリン酸と核酸の定量方法およびその装置
CN105543345A (zh) 玉米赤霉烯酮的检测方法及检测试剂盒
CN108949917B (zh) 一种汞离子错配型通用隔断超快扩增比色传感器
CN114441488B (zh) 一种基于CRISPR/Cas12a系统检测沙门氏菌的生物传感器
CN105506168B (zh) 一种检测黄曲霉毒素m1的方法及试剂盒
CN105548119A (zh) 一种快速检测t-2毒素的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant