CN105663237A - 中药组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

<b>本发明涉及医药技术领域，是一种中药组合物及其制备方法和应用；该中药组合物原料按重量份数由5.5份至6.5份薄荷、5.5份至6.5份牛蒡子、0至5.5份荆芥穗、3.5份至4.5份淡豆豉组成。</b><b>本发明中药组合物（臣药）不仅对流感病毒引起的小鼠肺炎模型具有治疗作用，而且能够增强流感病毒引起的小鼠肺脏降低的</b><b>NK</b><b>细胞活性；同时本发明中药组合物（臣药）较现有银翘散大大降低了服用量，降低了生产成本。</b>

Description

中药组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及医药技术领域，是一种中药组合物及其制备方法和应用。
背景技术
急性上呼吸道感染多由病毒引起，传染性强，发病率高，容易引起暴发流行或大流行。其主要通过含有病毒的飞沫进行传播。病毒易发生基因重组重排，产生突变体，使得临床药物的应用滞后于病毒变异的速度，出现药物治疗疗效低或无效的现象。
免疫系统在对抗病原微生物过程中发挥着重要作用。研究表明提高机体免疫功能能够增强机体的抗病毒能力。自然杀伤（NK）细胞是抗病毒感染免疫防御的第一道防线。因为NK细胞无需预先致敏，可直接杀伤病毒及被病毒感染的靶细胞。因此，在发生病毒感染时，NK细胞总是先于T、B等免疫细胞，最早发挥抗病毒免疫应答效应。通过药物治疗增强NK细胞活性，提高免疫细胞的监视作用，进而增强机体的抗病毒能力，这对于病毒变异引起的治疗无效有重要的意义。
银翘散出自清代吴瑭所著《温病条辨》，为辛凉解表的代表方剂，其主要功用为辛凉透表，清热解毒，是临床上治疗流行性感冒的常用中医方剂。但现有银翘散颗粒治疗效果一般，方剂中药味较多，生产成本高。
发明内容
本发明提供了一种中药组合物及其制备方法和应用，克服了上述现有技术之不足，其能有效解决现有银翘散颗粒治疗效果一般，方剂中药味较多，生产成本高的问题。
本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种中药组合物，原料按重量份数由5.5份至6.5份薄荷、5.5份至6.5份牛蒡子、0至5.5份荆芥穗、3.5份至4.5份淡豆豉组成。
下面是对上述发明技术方案之一的进一步优化或/和改进：
上述中药组合物，原料按重量份数由5.5份至6.5份薄荷、5.5份至6.5份牛蒡子、4.5份至5.5份荆芥穗、3.5份至4.5份淡豆豉组成。
上述中药组合物原料按重量份数由5.7份至6.3份薄荷、5.7份至6.3份牛蒡子、4.75份至5.25份荆芥穗、3.8份至4.2份淡豆豉组成。
上述中药组合物原料按重量份数由6份薄荷、6份牛蒡子、5份荆芥穗、4份淡豆豉组成。
上述中药组合物为颗粒剂或胶囊剂或丸剂或片剂或口服液体。
上述颗粒剂按下述方法得到：将所需量的薄荷、牛蒡子、荆芥穗和淡豆豉混合均匀后，得到颗粒剂。
本发明的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种中药组合物的制备方法，按下述方法进行：将所需量的薄荷、牛蒡子、荆芥穗和淡豆豉混合均匀后，得到颗粒剂的药组合物。
本发明的技术方案之三是通过以下措施来实现的：一种中药组合物在制备治疗肺炎和增强上呼吸道感染中自然杀伤细胞活性药物中的应用。
本发明中药组合物（臣药）不仅对流感病毒引起的小鼠肺炎模型具有治疗作用，而且能够增强流感病毒引起的小鼠肺脏降低的NK细胞活性；同时本发明中药组合物（臣药）较现有银翘散大大降低了服用量，降低了生产成本。
附图说明
附图1为为本发明中药组合物（臣药）、银翘散及其拆方对流感病毒感染小鼠肺脏NK细胞活性的柱状对比图。
附图2为本发明中药组合物（臣药）及其拆方和利巴韦林对流感病毒感染小鼠肺脏NK细胞活性的柱状对比图。
具体实施方式
本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。
实施例1，该中药组合物原料按重量份数由5.5份至6.5份薄荷、5.5份至6.5份牛蒡子、3.5份至4.5份淡豆豉组成。
实施例2，该中药组合物原料按重量份数由5.5份或6.5份薄荷、5.5份或6.5份牛蒡子、3.5份或4.5份淡豆豉组成。
实施例3，作为上述实施例的优化，该中药组合物原料按重量份数由5.5份至6.5份薄荷、5.5份至6.5份牛蒡子、4.5份至5.5份荆芥穗、3.5份至4.5份淡豆豉组成。
实施例4，作为上述实施例的优化，该中药组合物原料按重量份数由5.7份至6.3份薄荷、5.7份至6.3份牛蒡子、4.75份至5.25份荆芥穗、3.8份至4.2份淡豆豉组成。
实施例5，作为上述实施例的优化，该中药组合物原料按重量份数由6份薄荷、6份牛蒡子、5份荆芥穗、4份淡豆豉组成。
实施例6，作为上述实施例的优化，中药组合物为颗粒剂或胶囊剂或丸剂或片剂或口服液体。
实施例7，该中药组合物按下述制备方法得到：将所需量的薄荷、牛蒡子、荆芥穗和淡豆豉混合均匀后，得到颗粒剂的中药组合物。
实施例8，该中药组合物在制备治疗肺炎和增强上呼吸道感染中自然杀伤细胞活性药物中的应用。
上述实施例得到的中药组合物在制备治疗肺炎和增强上呼吸道感染中自然杀伤细胞活性药物中的应用如下：
1.实验材料及药品
流感病毒鼠肺适应株A/H1N1/PuertoRico/8/34，简写为PR8，购自中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所流感室，中国中医科学院生物安全实验室常规鸡胚传代，-80℃冰箱保存。
小鼠及C57BL/6小鼠（SPF/VAF级），雌雄各半，体重为14±1g，由北京金牧阳试验动物技术有限公司提供，动物许可证号SCXK(京)2006-0009。
市售药品利巴韦林颗粒用于呼吸道病毒感染性疾病的预防和治疗。
市售药品银翘散为颗粒剂，包括连翘、金银花、薄荷、淡豆豉、桔梗、牛蒡子、淡竹叶、荆芥穗、甘草、芦根。根据实验银翘散按照君、臣、佐、使组方原理进行拆方后组方，君药为连翘和金银花；本发明中药组合物（臣药）为薄荷、牛蒡子、荆芥穗和淡豆豉；佐药为芦根、淡竹叶和桔梗；使药为甘草。
动物给药时，按照原方比例进行配伍后，折算成小鼠给药量进行灌胃。
本发明中药组合物（臣药）、银翘散及其拆方对PR8感染小鼠肺炎模型的影响
将ICR小鼠按体重随机分为7组，分别为正常对照组、模型组、银翘散组、君药组、本发明中药组合物（臣药）组、佐药组和使药组，每组10只；除正常对照组外，将小鼠麻醉后，以15个LD50流感病毒鼠肺适应株PR8滴鼻感染，每只30μL；于感染后2h开始给药，每次按0.2mL/10g灌胃给药，每天1次，连续5天，正常对照组和模型组给予等体积的蒸馏水；治疗第5天称重后解剖，称取肺重，计算肺指数及肺指数抑制率；结果采用组间比较t检验进行统计学处理。
肺指数=肺湿重(g)/体重（g）
肺指数抑制率=（模型组肺重-受试药物组肺重）/（模型组肺重-正常对照组肺重）×100%
表1为本发明中药组合物（臣药）、银翘散及其拆方对PR8感染小鼠肺炎模型影响的对比数据（n=10）；
从表1可以看出，采用甲型H1N1流感病毒PR8感染正常小鼠后，小鼠肺指数明显增高，与正常对照组比较有显著性差异（P<0.01）；感染当天开始给予受试药物治疗5天，所试的银翘散组、君药组、本发明中药组合物（臣药）组、佐药组和使药组肺指数均有不同程度的降低，其中银翘散组和本发明中药组合物（臣药）组均能够显著降低流感病毒引起的肺指数增加（P<0.05）；并且本发明中药组合物（臣药）组的抑制率高于银翘散组及其它受试药物组。
本发明中药组合物（臣药）、银翘散及其拆方对流感病毒感染小鼠肺脏NK细胞活性的影响
将C57BL/6小鼠按体重随机分为7组，分别为正常对照组、模型组、银翘散组、君药组、本发明中药组合物（臣药）组、佐药组和使药组，每组3只；除正常对照组外，将小鼠麻醉后，以15个LD50流感病毒鼠肺适应株PR8滴鼻感染，每只30μL；于感染后2h开始给药，每次按0.2mL/10g灌胃给药，每天1次，连续5天，正常对照组和模型组给予等体积的蒸馏水；治疗第5天称重后解剖，摘取肺脏，制备肺脏单细胞悬液，去除红细胞，将所得白细胞与小鼠Ly49D单克隆抗体和Ly49H单克隆抗体4℃避光孵育30min；同时制备同型对照组，阴性对照组及各单抗对照；PBS缓冲液洗2次，以4%多聚甲醛固定，采用流式细胞仪检测；结果采用组间比较t检验进行统计学处理。
图1为本发明中药组合物（臣药）、银翘散及其拆方对流感病毒感染小鼠肺脏NK细胞活性的柱状对比图；从图1可以看出，小鼠感染流感病毒后，肺脏Ly49D+单阳性NK细胞、Ly49H+单阳性NK细胞和Ly49D+Ly49H+双阳性NK细胞均显著减低（P<0.01）；经药物治疗后，各给药组对NK细胞表面Ly49D+和Ly49H+抗原表达均有显著的促进作用（P<0.01，P<0.05），其中本发明中药组合物（臣药）组优于银翘散组及其他各药物组。
本发明中药组合物（臣药）及其拆方和利巴韦林对流感病毒感染小鼠肺脏NK细胞活性的影响
将C57BL/6小鼠按体重随机分为18组，分别为正常对照组、模型组、利巴韦林对照组、本发明中药组合物（臣药）组（将每味中药看做一个独立的因素，按照4因素2水平析因设计排列组合），每组3只；除正常对照组外，将小鼠麻醉后，以15个LD50流感病毒鼠肺适应株PR8滴鼻感染，每只30uL；于感染后2h开始给药，每次按0.2ml/10g灌胃给药，每天1次，连续5天，正常对照组和模型组给予等体积的蒸馏水；治疗第5天称重后解剖，摘取肺脏，制备肺脏单细胞悬液，去除红细胞，将所得白细胞与小鼠Ly49D单克隆抗体和Ly49H单克隆抗体4℃避光孵育30min；同时制备同型对照，阴性对照及各单抗对照；PBS缓冲液洗2次，以4%多聚甲醛固定，采用流式细胞仪检测；结果采用组间比较t检验进行统计学处理。
图2为本发明中药组合物（臣药）及其拆方和利巴韦林对流感病毒感染小鼠肺脏NK细胞活性的柱状对比图；图2中标号1为本发明中药组合物（臣药），组成为薄荷+牛蒡子+淡豆豉+荆芥穗，用量为0.83g/kg/d；标号2为本发明中药组合物（臣药），组成为薄荷+牛蒡子+淡豆豉，用量为0.7g/kg/d；标号3为薄荷+牛蒡子+荆芥穗，用量为0.67g/kg/d；标号4为薄荷+牛蒡子，用量为0.53g/kg/d；标号5为薄荷+淡豆豉+荆芥穗，用量为0.63g/kg/d；标号6为薄荷+淡豆豉，用量为0.5g/kg/d；标号7为薄荷+荆芥穗，用量为0.47g/kg/d；标号8为薄荷，用量为0.33g/kg/d；标号9为牛蒡子+淡豆豉+荆芥穗，用量为0.5g/kg/d；标号10为牛蒡子+淡豆豉，用量为0.37g/kg/d；标号11为牛蒡子+荆芥穗，用量为0.33g/kg/d；标号12为牛蒡子，用量为0.2g/kg/d；标号13为淡豆豉+荆芥穗，用量为0.3g/kg/d；标号14为淡豆豉，用量为0.17g/kg/d。
从图2可以看出，小鼠感染流感病毒后，肺脏NK细胞表面Ly49D及Ly49H单阳性细胞和Ly49D/Ly49H双阳性细胞均显著减低（P<0.05，P<0.01）。经药物治疗后，本发明中药组合物（臣药）组能显著提高Ly49D及Ly49H单阳性细胞和Ly49D/Ly49H双阳性细胞的表达（P<0.05，P<0.01）。
本发明中药组合物（臣药）能够显著降低流感病毒引起的肺指数增加，抑制率高于现有银翘散；本发明中药组合物（臣药）对NK细胞表面Ly49D+和Ly49H+抗原表达有显著的促进作用，效果优于现有银翘散；本发明中药组合物（臣药）能显著提高Ly49D及Ly49H单阳性细胞和Ly49D/Ly49H双阳性细胞的表达，效果优于现有银翘散和利巴韦林；说明本发明中药组合物（臣药）不仅对流感病毒引起的小鼠肺炎模型具有治疗作用，而且能够增强流感病毒引起的小鼠肺脏降低的NK细胞活性；同时现有银翘散的服用量为18g/人/次，而本发明中药组合物（臣药）的服用量仅为6g/人/次，本发明中药组合物（臣药）较现有银翘散大大降低了服用量，降低了生产成本。
综上所述，本发明中药组合物（臣药）不仅对流感病毒引起的小鼠肺炎模型具有治疗作用，而且能够增强流感病毒引起的小鼠肺脏降低的NK细胞活性；同时本发明中药组合物（臣药）较现有银翘散大大降低了服用量，降低了生产成本。
以上技术特征构成了本发明的实施例，其具有较强的适应性和实施效果，可根据实际需要增减非必要的技术特征，来满足不同情况的需求。
表1
组别 剂量（g/kg） 肺指数 抑制率(%)
正常对照组 - 0.74±0.05 -
模型组 - 1.51±0.15## -4 -->
银翘散组 3.09 1.33±0.11* 23.86
君药组 1.0 1.37±0.17 17.91
本发明中药组合物（臣药）组 0.83 1.25±0.16* 33.41
佐药组 0.7 1.45±0.17 8.24
使药组 0.56 1.37±0.15 18.17
注：与正常组比较##P<0.01；与模型对照组比较，**P<0.01，*P<0.05。

Claims (8)

1.一种中药组合物，其特征在于原料按重量份数由5.5份至6.5份薄荷、5.5份至6.5份牛蒡子、0至5.5份荆芥穗、3.5份至4.5份淡豆豉组成。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于原料按重量份数由5.5份至6.5份薄荷、5.5份至6.5份牛蒡子、4.5份至5.5份荆芥穗、3.5份至4.5份淡豆豉组成。
3.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于原料按重量份数由5.7份至6.3份薄荷、5.7份至6.3份牛蒡子、4.75份至5.25份荆芥穗、3.8份至4.2份淡豆豉组成。
4.根据权利要求3所述的中药组合物，其特征在于原料按重量份数由6份薄荷、6份牛蒡子、5份荆芥穗、4份淡豆豉组成。
5.根据权利要求1或2或3或4所述的中药组合物，其特征在于中药组合物为颗粒剂或胶囊剂或丸剂或片剂或口服液体。
6.根据权利要求5所述的中药组合物，其特征在于颗粒剂按下述方法得到：将所需量的薄荷、牛蒡子、荆芥穗和淡豆豉混合均匀后，得到颗粒剂中药组合物。
7.根据权利要求1或2或3或4所述的中药组合物的制备方法，其特征在于按下述方法进行：将所需量的薄荷、牛蒡子、荆芥穗和淡豆豉混合均匀后，得到颗粒剂的药组合物。
8.一种根据权利要求1或2或3或4或5或6所述的中药组合物在制备治疗肺炎和增强上呼吸道感染中自然杀伤细胞活性药物中的应用。
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