CN105622447B - 克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN105622447B
CN105622447B CN201610113644.0A CN201610113644A CN105622447B CN 105622447 B CN105622447 B CN 105622447B CN 201610113644 A CN201610113644 A CN 201610113644A CN 105622447 B CN105622447 B CN 105622447B
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkane type
type diterpene
kind compound
crow
component
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201610113644.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105622447A (zh
Inventor
宋小平
余章昕
陈光英
韩长日
邵泰明
吴梨君
李小宝
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hainan Normal University
Hainan Institute of Science and Technology
Original Assignee
Hainan Normal University
Hainan Institute of Science and Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hainan Normal University, Hainan Institute of Science and Technology filed Critical Hainan Normal University
Priority to CN201610113644.0A priority Critical patent/CN105622447B/zh
Publication of CN105622447A publication Critical patent/CN105622447A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105622447B publication Critical patent/CN105622447B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/22—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/16—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C07C233/24—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C233/28—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by a carbon atom of a six-membered aromatic ring having the carbon atom of the carboxamide group bound to an acyclic carbon atom of an unsaturated carbon skeleton containing rings other than six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
    • C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
    • C07C69/738—Esters of keto-carboxylic acids or aldehydo-carboxylic acids

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明公开了一种克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用，该克罗烷型二萜类化合物的制备方法如下：将海南暗罗组织经过阴干、粉碎后，用提取溶液回流提取，减压浓缩后得浸膏；浸膏中加入蒸馏水悬浮后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取；将乙酸乙酯部位先经硅胶柱层析，然后经石油醚‑丙酮体系梯度洗脱，合并相同流份，得到丙酮洗脱部分组分1和组分2；组分1经薄层层析色谱分离得到化合物A，组分2依次经柱层析分离和高效液相色谱分离得到化合物B。本发明的克罗烷型二萜类化合物对肿瘤细胞，尤其是Hela（宫颈癌细胞）、MCF‑7（人乳腺癌细胞）和A549（人肺癌细胞）具有增殖抑制作用。

Description

克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于生物化学医药技术领域，具体涉及一种克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用。
背景技术
海南暗罗（PolyalthialauiMerr.）为番荔枝科（Annonaceae）暗罗属（Polyalthia）植物，常为直立灌木。据中国植物志记载，该属植物全世界约有200种，分布于马来西亚、菲律宾、印度、斯里兰卡等亚热带地区，我国分布于云南、广东、广西南部及海南。我国有17种，海南有7种，分别为：细基丸（P.cerasoides），沙煲暗罗（P.consanguinea），海南暗罗（P.laui），陵水暗罗（P.nemoralis），斜脉暗罗（P.plagioneura），香花暗罗（P.rumphii）和暗罗（P.suberosa）。其中，海南暗罗和沙煲暗罗为海南特有种。
克罗烷型二萜类化合物最早是在1988年由Phadnis A. P.等从P.longifolia中分离得到，化学名称为16-hydroxycleroda-3,13(14)E-dien-15-oic acid；1990年Kijjoa A.等从P.viridis中分离得到了5个克罗烷型二萜类化合物16(R)-3,13Z-kolavadien-15,16-olide、Methyl-2E,6E-farnesoate-3,13E-kolavadien-15-oic acid、16(R&S)-3,13Z-kolavadien-15,16olide-2-one、14,15-bisnor-3,11E-kolavadien-13-one、(4→2)-abeo-16(R&S)-2,13Z-kolavadien-15,16-olide-3-ol；1992年Chakraborty M.等从P.longifolia中分离得到了2个克罗烷型二萜类化合物16α-hydroxylcleroda-3,13Z-dien-16,15-olide和4β,16α-dehydroxycleroda-13(14)Z-dien-15,16-olide；1994年Hasan C.等从P.longifolia中分离得到了3个克罗烷型二萜类化合物16-oxocleroda-3,13(14)E-dien-15-oic acid、Kolavenic acid和16β-hydroxycleroda-3,13(14)Z-dien-15,16-olide。
发明内容
本发明的目的在于解决上述问题，提供一种新的具有抗肿瘤活性的克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用。
实现本发明上述目的的技术方案之一是：一种克罗烷型二萜类化合物，其结构如式A所示：
（A）。
实现本发明上述目的的技术方案之二是：一种克罗烷型二萜类化合物，其结构如式B所示：
（B）。
上述克罗烷型二萜类化合物A的制备方法包括以下步骤：
①将海南暗罗组织经过阴干、粉碎后，用提取溶液回流提取，减压浓缩后得浸膏；浸膏中加入蒸馏水悬浮后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取；
②将乙酸乙酯部位先经硅胶柱层析，然后经石油醚-丙酮体系梯度洗脱，合并相同流份，得到丙酮洗脱部分组分1和组分2；
③对组分1进行薄层层析色谱分离，得到克罗烷型二萜类化合物A。
上述克罗烷型二萜类化合物B的制备方法包括以下步骤：
①将海南暗罗组织经过阴干、粉碎后，用提取溶液回流提取，减压浓缩后得浸膏；浸膏中加入蒸馏水悬浮后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取；
②将乙酸乙酯部位先经硅胶柱层析，然后经石油醚-丙酮体系梯度洗脱，合并相同流份，得到丙酮洗脱部分组分1和组分2；
③对组分2依次进行柱层析分离和高效液相色谱分离，得到克罗烷型二萜类化合物B。
其中，海南暗罗组织具体为海南暗罗的根或茎。
上述步骤①中所述的提取溶液为体积分数为75%的乙醇水溶液；上述步骤①中所述浸膏与所述蒸馏水的体积比为1∶1。
上述制备化合物A的步骤③中的薄层层析色谱分离采用的展开剂为乙酸乙酯-石油醚混合溶剂，其中乙酸乙酯的体积百分数为10%～30%，优选为25%。
上述制备化合物B的步骤③中的高效液相色谱分离采用的流动相为46%H2O和54%MeCN。
上述化合物A和化合物B在增殖抑制肿瘤细胞上的应用。
上述肿瘤细胞包括Hela（宫颈癌细胞）、MCF-7（人乳腺癌细胞）和A549（人肺癌细胞）。
本发明具有的积极效果：（1）本发明的克罗烷型二萜类化合物对肿瘤细胞，尤其是Hela（宫颈癌细胞）、MCF-7（人乳腺癌细胞）和A549（人肺癌细胞）具有增殖抑制作用。（2）本发明的克罗烷型二萜类化合物制备工艺简单、成本低廉。
附图说明
图1为化合物A的1H-1HCOSY（━）相关和主要的HMBC（→）相关。
图2为化合物A的NOESY谱图。
图3为化合物B的1H-1HCOSY（━）相关和主要的HMBC（→）相关。
图4为化合物B的NOESY谱图。
具体实施方式
（实施例1）
本实施例为化合物A和化合物B的制备方法，包括以下步骤：
①取海南暗罗根或茎，阴干、粉碎后，用8倍重量的体积分数为75%的乙醇水溶液回流提取3次，每次6天，过滤、合并提取液，减压浓缩得到浸膏；向浸膏中加入蒸馏水（体积比为1∶1），悬浮后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取。
②将乙酸乙酯部位先经硅胶柱层析，然后经石油醚-丙酮体系梯度洗脱，合并相同流份，得到丙酮洗脱部分组分1和组分2。
③对组分1进行薄层层析色谱分离，展开剂为石油醚-乙酸乙酯混合溶剂（V∶V＝3∶1），得到化合物A（12.5mg）。
对组分2先进行柱层析分离，然后进行高效液相色谱分离，流动相为46%H2O和54%MeCN，得到化合物B（4.6mg）。
化合物A为无色针状晶体，易溶于氯仿、乙酸乙酯，254nm紫外灯下呈黑色暗斑。
化合物B为淡黄色油状液体，易溶于氯仿、乙酸乙酯，254nm紫外灯下呈黑色暗斑。
化合物A的结构式如下：
。
化合物A的核磁数据见表1，化合物A的1H-1HCOSY（━）相关和主要的HMBC（→）相关见图1和表1，化合物A的NOESY谱图见图2。
根据高分辨质谱数据（m/z=424.3221[M+H]+），推出化合物A的分子式为C28H41NO2，不饱和度为9。
表1
NO. δC δH（J in Hz） mult HMBC 1H-1H COSY
1 18.4 1.51m CH2 2,10 2,10
2 27.0 1.97m CH2 -- 1,3
3 120.5 5.20br,s CH -- 2,4
4 144.7 -- C -- 3,18
5 38.3 -- C -- --
6 36.9 1.73m CH2 -- 7
7 27.6 1.18m CH2 -- 6,8
8 36.4 1.48m CH -- 7,9,17
9 38.8 -- C -- 8
10 46.6 1.32m CH -- 1
11 36.5 1.48m CH2 -- 12
12 34.7 2.03m CH2 -- 11,13
13 157.8 -- C -- 12,14,16
14 117.8 5.66s CH 13,15 13
15 165.1 -- C -- --
16 19.0 2.20s CH3 12,13,14 13
17 16.1 0.83d（4.2） CH3 7,8,9 --
18 18.2 1.59s CH3 3,4,5 4
19 20.1 1.00s CH3 4,5,6,10 --
20 18.5 0.74s CH3 8,9,10,11 --
1’ 131.3 -- C -- --
2’,6’ 121.6 7.42d（8.4） CH -- 3’,5’
3’,5’ 114.8 6.80d（8.8） CH -- 2’,6’
4’ 155.7 -- C -- --
7’ 63.8 4.01q（7.8） CH2 4’ 8’
8’ 15.0 1.40t（7.8） CH3 7’ 7’
NH -- 7.02br,s NH -- --
化合物B的结构式如下：
。
化合物B的核磁数据见表2，化合物B的1H-1HCOSY（━）相关和主要的HMBC（→）相关见图3和表2，化合物A的NOESY谱图见图4。
根据高分辨质谱数据（m/z=329.2093[M+Na]+），推出化合物B的分子式为C19H30O3，不饱和度为5。
表2
NO. δC δH（J in Hz） mult HMBC 1H-1H COSY
1 35.0 2.35dd（11.2,4.80）、2.37m CH2 -- 2,10
2 200.1 -- C -- 1
3 125.7 5.72s CH 2 4,15
4 172.4 -- C -- 3,15
5 40.0 -- C -- --
6 35.7 1.35m、1.81m CH2 -- 7
7 27.0 1.51m、1.49m CH2 -- 6,8
8 36.3 1.40m CH -- 7,9,14
9 38.7 -- C -- 8
10 46.0 1.77dd（10.8,4.4） CH -- --
11 32.3 1.65m CH2 -- 12
12 28.2 2.15m、2.09m CH2 13 11
13 173.8 -- C -- --
14 15.9 0.854d（7.2） CH3 7,9 8
15 19.1 1.88s CH3 3,4,5 4
16 18.5 1.11s CH3 4,6,10 --
17 17.8 0.84s CH3 8.9.10.11 --
18 60.6 4.11q（8.2） CH2 13 19
19 14.4 1.24t（8.2） CH3 -- 18
（试验例、抗肿瘤活性实验）
本试验例为采用MTT法评价化合物A和化合物B对肿瘤细胞增殖抑制作用。
将对数生长期的Hela（宫颈癌细胞）、MCF-7（人乳腺癌细胞）和A549（人肺癌细胞）配制细胞悬液，分别接种于96孔培养板；细胞贴壁后分别加入用PBS配制的浓度梯度的（0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L共六个浓度）20μL化合物A和化合物B。每组设5个复孔，同时设空白对照和溶媒（DMSO）对照，置于37.0℃、5%CO2、饱和湿度条件下，培养44h后，每孔加入50μL的MTT溶液（1mg/mL，PBS配制），作用4h后弃上清，每孔加入150μL的DMSO，震荡10min，在酶联免疫检测仪上选择570nm波长处测吸光A值，抑制率（%）=（对照组A值-实验组A值）/对照组A值×100%。
表3
阿霉素a为阳性对照。
由表3可以看出：化合物 A和化合物B 对三种肿瘤细胞均具有较好的增殖抑制作用，能够用于制备抗肿瘤药物。

Claims (10)

1.一种克罗烷型二萜类化合物，其结构如式A所示：
（A）。
2.权利要求1所述的克罗烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
①将海南暗罗组织经过阴干、粉碎后，用提取溶液回流提取，减压浓缩后得浸膏；浸膏中加入蒸馏水悬浮后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取；
②将乙酸乙酯部位先经硅胶柱层析，然后经石油醚-丙酮体系梯度洗脱，合并相同流份，得到丙酮洗脱部分组分1和组分2；
③对组分1进行薄层层析色谱分离，得到克罗烷型二萜类化合物A。
3.根据权利要求2所述的克罗烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于：上述步骤①中所述的提取溶液为体积分数为75%的乙醇水溶液；上述步骤①中所述浸膏与所述蒸馏水的体积比为1∶1；上述步骤③中的薄层层析色谱分离采用的展开剂为乙酸乙酯-石油醚混合溶剂，其中乙酸乙酯的体积百分数为10%～30%。
4.权利要求1所述的克罗烷型二萜类化合物在制备抗肿瘤药物上的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为宫颈癌、人乳腺癌或者人肺癌。
6.一种克罗烷型二萜类化合物，其结构如式B所示：
（B）。
7.权利要求6所述的克罗烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
①将海南暗罗组织经过阴干、粉碎后，用提取溶液回流提取，减压浓缩后得浸膏；浸膏中加入蒸馏水悬浮后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取；
②将乙酸乙酯部位先经硅胶柱层析，然后经石油醚-丙酮体系梯度洗脱，合并相同流份，得到丙酮洗脱部分组分1和组分2；
③对组分2依次进行柱层析分离和高效液相色谱分离，得到克罗烷型二萜类化合物B。
8.根据权利要求7所述的克罗烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于：上述步骤①中所述的提取溶液为体积分数为75%的乙醇水溶液；上述步骤①中所述浸膏与所述蒸馏水的体积比为1∶1；上述步骤③中的高效液相色谱分离采用的流动相为46vol.%H2O和54vol.%MeCN。
9.权利要求6所述的克罗烷型二萜类化合物在制备抗肿瘤药物上的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为宫颈癌、人乳腺癌或者人肺癌。
CN201610113644.0A 2016-03-01 2016-03-01 克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用 Expired - Fee Related CN105622447B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610113644.0A CN105622447B (zh) 2016-03-01 2016-03-01 克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610113644.0A CN105622447B (zh) 2016-03-01 2016-03-01 克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105622447A CN105622447A (zh) 2016-06-01
CN105622447B true CN105622447B (zh) 2018-02-06

Family

ID=56037836

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610113644.0A Expired - Fee Related CN105622447B (zh) 2016-03-01 2016-03-01 克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105622447B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110687242B (zh) * 2019-07-03 2021-01-19 兰州大学 Neo-克罗烷型二萜类化合物对黑麦草的植物毒活性测试方法
CN110452113B (zh) * 2019-08-26 2021-09-14 海南师范大学 一种(4→2)重排克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用
CN115073283B (zh) * 2021-08-31 2023-12-01 海南师范大学 氧化克罗烷型二萜类化合物及其分离方法和应用

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103980196A (zh) * 2014-06-03 2014-08-13 海南师范大学 一种海南暗罗根提取物的制备方法
CN105037267B (zh) * 2015-06-29 2019-11-29 海南师范大学 从沙煲暗罗中分离生物碱类化合物的方法
CN105037472B (zh) * 2015-06-29 2017-12-15 海南师范大学 从沙煲暗罗中分离羊毛烷型三萜类化合物的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN105622447A (zh) 2016-06-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Cao et al. Characterization of flavonoids from Dryopteris erythrosora and evaluation of their antioxidant, anticancer and acetylcholinesterase inhibition activities
Cao et al. Flavonoids profiles, antioxidant, acetylcholinesterase inhibition activities of extract from Dryoathyrium boryanum (Willd.) Ching
CN103910708B (zh) 一种海洋真菌来源的Azaphilones化合物及其制备方法和应用
CN105622447B (zh) 克罗烷型二萜类化合物及其制备方法和应用
CN101397241A (zh) 对映-松香烷型二萜化合物大叶香茶菜壬、癸素及其制备方法和用途
Mottaghipisheh et al. A comprehensive review on chemotaxonomic and phytochemical aspects of homoisoflavonoids, as rare flavonoid derivatives
Fan et al. Antioxidant and anti-proliferative properties of Hagenia abyssinica roots and their potentially active components
CN104761526A (zh) 一种具有抗病毒活性的异黄酮类化合物及其制备方法和应用
CN104586945A (zh) 啤酒花总黄酮提取物、制备方法及其作为制备预防和治疗肝损伤、癌症药物的应用
CN104497090B (zh) 蕨藻烯酮及其制备方法和用途
CN108503521B (zh) 愈创木烷型倍半萜a及其制备方法和作为制备预防肿瘤和抗肿瘤药物的应用
Costine et al. Exploring native Scutellaria species provides insight into differential accumulation of flavones with medicinal properties
CN104292186B (zh) 粗根大戟中分离的大环二萜类化合物及多药耐药逆转用途
CN102000066B (zh) 水朝阳旋覆花提取物,以其为有效成分的抗肿瘤药物及其制备方法和应用
CN101445499B (zh) 一种二萜类抗肿瘤化合物及其制备方法
CN107903291A (zh) 一种从防风中提取的色原酮苷类化合物及其方法和应用
CN106008422B (zh) 一种苯并内酯类化合物、其制备方法和在制备抗癌药物中的应用
CN103910701A (zh) 一种海洋真菌来源的萘醌类化合物及其制备方法和应用
CN108690023B (zh) 一种赛塔城翠雀花中二萜类生物碱化合物及制备方法和用途
CN105837506B (zh) 毛序准噶尔乌头中二萜类生物碱的制备方法和用途
Xu et al. An efficient way from naringenin to carthamidine and isocarthamidine by Aspergillus niger
CN105601693A (zh) 人参皂苷f1的制备及其抗肿瘤作用
CN107739362A (zh) 源于杂色曲霉蒽醌类化合物及制备抗人食管癌药物的应用
CN107382863A (zh) 三烯霉素类化合物、制备方法及治疗前列腺癌的应用
CN107739361A (zh) 源于杂色曲霉蒽醌类化合物及制备抗人结肠癌药物的应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20180206

Termination date: 20210301

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee