CN105612147B - 大环脒基脲衍生物，其制备方法及其作为几丁质酶抑制剂的应用 - Google Patents

大环脒基脲衍生物，其制备方法及其作为几丁质酶抑制剂的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN105612147B
CN105612147B CN201480045663.3A CN201480045663A CN105612147B CN 105612147 B CN105612147 B CN 105612147B CN 201480045663 A CN201480045663 A CN 201480045663A CN 105612147 B CN105612147 B CN 105612147B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
pharmaceutical composition
antifungal
chitinase
definition
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201480045663.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105612147A (zh
Inventor
S·桑菲利普
B·珀斯特拉罗
M·桑格内提
M·伯塔
G·麦卡里
F·德鲁卡
J-D·多奎尔
D·蒂奥达托
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
BAKKER MEDICAL Srl
Original Assignee
BAKKER MEDICAL Srl
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by BAKKER MEDICAL Srl filed Critical BAKKER MEDICAL Srl
Publication of CN105612147A publication Critical patent/CN105612147A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105612147B publication Critical patent/CN105612147B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D273/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D261/00 - C07D271/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4192—1,2,3-Triazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/20—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/20—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups containing any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom, e.g. acylguanidines
    • C07C279/24—Y being a hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及式8的大环脒基脲衍生物，其制备方法和应用，特别是在真菌感染治疗中用作几丁质酶抑制剂的药物组合物。

Description

大环脒基脲衍生物，其制备方法及其作为几丁质酶抑制剂的 应用
发明领域
本发明涉及大环脒基脲衍生物，其制备方法和应用，特别是用作几丁质酶抑制剂的药物组合物。
背景技术
自二十世纪六十年代，由于抗生素治疗的发展导致真菌病大量出现，真菌感染流行病学不断发展。今天，真菌感染已成为全球主要的健康威胁，并且侵入性和机会性真菌病发生率的增加常常伴有过高的发病率和死亡率。真菌感染在过去数十年的发生率增加，常常是因为先进医疗处理和免疫受损患者数量增加的结果。1
真菌感染的诊断和治疗是富有挑战性的任务，由于患者群体的差异和病原体种类的增加而变得复杂。虽然多种真菌物种在人体中潜在地致病，念珠菌属(尤其是白色念珠菌)是导致大多数真菌疾病的生物体。2
针对念珠菌属感染的疗法依赖于实用有限数量的化疗药，包括唑类(例如氟康唑和伏立康唑)和多烯类化合物(例如，两性霉素B)。虽然这些分子构成了优选的一线疗法，耐药性真菌物种的出现和传播限制了它们的应用。今天，氟康唑对抗突变念珠菌属的疗效差或者没有疗效3。因此，需要开发新的并且活性更高的分子，尤其是针对多重耐药的物种。
几丁质是真菌细胞壁的必要结构组分。认为几丁质酶对于真菌细胞壁重塑是重要的，并且已经提出这些酶的抑制可以作为开发新型抗真菌剂的潜在方案。几丁质是单体间β-1,4连接的N-乙酰基葡糖胺(GlcNAc)的聚合物。糖基水解酶18家族包括几丁质酶。几丁质酶是负责几丁质降解的酶；已经证实它们是设计针对真菌感染的新型治疗剂的潜在靶点。6-8
已知哺乳动物不能合成几丁质或将其代谢作为营养物，但是人基因组编码了8种详细记载的基因，这些基因针对现在分类为糖基水解酶18家族成员的蛋白质。已知上述家族的成员采取由高度保守的(β/α)8-筒状结构构成的TIM(丙糖磷酸异构酶)折叠。通常，单独的几丁质结合域(CBM14)位于该蛋白质的羧基末端区域(参考文件1:GH18家族域结构)。该蛋白质家族包括几丁质酶以及称类几丁质酶(chitolectin)的同源蛋白质。后者缺乏提供水解酶活性所需的质子的关键活性位点谷氨酸残基，但是保留参与寡糖结合和总的三维结构的高度保守的残基。传统上，几丁质酶分为两个糖苷水解酶家族，GH18和GH19，具有不同的结构和催化机制。家族GH18包括来自病毒、细菌、真菌和动物的几丁质酶以及来自植物的III和V类。GH19几丁质酶大多存在于植物(I，II和IV类)，线虫和一些细菌中。最近的数据表明，几丁质酶活性也存在于蛋白质家族GH48和GH20中。N-乙酰基-β-D-葡萄糖苷酶，例如家族GH20中的那些，通过水解几内-寡糖非还原末端的GlcNAc也参与几丁质降解。
虽然几丁质本身在人体中并不存在，但是几丁质酶在人基因组中存在。人几丁质酶家族成员包括酸性哺乳动物几丁质酶(AMCase)。在啮齿动物和人体中，发现AMCase在胃肠道较富集而在肺部较少10。近来，已显示AMCase在气源性致敏原哮喘模型中在上皮细胞和巨噬细胞中经Thelper-2-特异性白介素-13-介导途径诱导，并且在人哮喘中以夸张的数量表达。AMCase中和可缓解Th2炎症和气道高反应性。在肺部炎症的小鼠模型中抑制与寄生虫感染相关的AMCase可以减少炎症细胞的募集并显著缓冲T辅助细胞2(Th2)的细胞反应，提示该酶可能是哮喘药物治疗的潜在靶点。9也有报道AMCase过度表达可抑制生长因子退缩和FasL诱导的上皮细胞凋亡11。已经证实Th2炎症反应和遭到破坏的增殖/凋亡细胞比率均是哮喘背后的驱动机制，提示该酶可能称为哮喘药物治疗有前景的靶点。
WO 2009/113033公开了特别针对念珠菌属的环状胍衍生物用作抗真菌剂，具有以下通式：
发明内容
在抗真菌化合物的研究过程中，发明人发现大环脒基脲衍生物针对野生型和耐受性念珠菌属具有优异的活性。4-5
针对Manetti等人20094和WO 2009/113033报道的化合物，制备了一系列新的具有改善的活性的化合物以及更加通用的合成路径。
本发明化合物的抗真菌活性是因为几丁质酶的抑制，该酶降解几丁质壁并且是真菌细胞复制和分化所必需的。
在本发明中，合成了一系列新的脒基脲衍生物。测试了这些化合物对抗来自7种不同的念珠菌属的116个临床分离物(口腔，阴道，肛门直肠，尿液，粪便，血液，中心静脉导管和呼吸道样本)的作用，分析其对抗突变白色念珠菌和光滑念珠菌的作用。这些突变菌株显示对抗真菌治疗的耐受性。本发明的化合物具有优异的抗真菌活性，具有以下特点：
1)对抗念珠菌活性非常强；
2)对耐药的念珠菌也具有活性；
3)是强效的几丁质酶，尤其是真菌几丁质酶的抑制剂。
在本发明的一个实施方式中，提供了通式8的化合物或其药学上可接受的盐：
式中：
n1为0-4的数值；
n2为1-7的数值；
R1是H；直链或支链C1-C6烷基；炔丙基，环丙基甲基、丁-2-烯-1-基，γ-甲基烯丙基，β-甲基烯丙基，γ,γ-二甲基烯丙基，苄基，烯丙基，吡啶-基甲基；甲基氨甲酰基，乙基氨甲酰基，丙基氨甲酰基，或丙-2-烯基氨甲酰基；
R2是H或
R3是OH，硝基，NH2，NHR8，NR9R10，C1-C6烷基，COOH，CONH2，CONR11H，CONR12R13，氰基，F，Cl，Br；
其中R8，R9，R10，R11，R12，R13相同或各自独立地是C1-C6烷基，甲基环丙基或丙烷-2-基；
X是CH2或C(＝0)；
Y是CH2，
或X-Y是
其中，R4，R5，R6，R7相同或者各自独立地是H，OH，硝基，NH2，NHR14，NR15R16，C1-C6烷基，COOH，CONH2，CONR17H，CONR18R19，氰基，F，Cl，Br；
其中，R14，R15，R16，R17，R18，R19相同或者各自独立地是C1-C6烷基，甲基环丙基或丙烷-2-基；
Z是CH2，
优选地，化合物如式8所示或为其药学上可接受的盐，其中n1，n2和R1参照权利要求1的定义；
R2是
R3参照权利要求1的定义；
X-Y是其中R4，R5，R6，R7参照上述定义，并且
Z是CH2。
更优选地，化合物如式8所示或为其药学上可接受的盐，其中n1，n2和R1参照上述定义；
R2是H；
X-Y是其中R4，R5，R6，R7参照上述定义，并且
Z是
更优选地，本发明的化合物如式8a所示或为其药学上可接受的盐，
其中，n1，n2，R1，X和Y参照上述定义。
在一个优选的实施方式中，化合物如式8a所示或为其药学上可接受的盐，其中
X-Y是R4，R5，R6和R7＝H。
在一个优选的实施方式中，化合物如式8a所示或为其药学上可接受的盐，其中X是C(＝0)，Y是CH2。
在一个优选的实施方式中，化合物如下所示或为其药学上可接受的盐：
优选地，本发明化合物用于医疗应用。
优选地，本发明化合物用作几丁质酶抑制剂。更优选地，几丁质酶属于几丁质酶的糖苷水解酶GH18家族。GH18家族包括来自病毒、细菌、真菌和动物的几丁质酶以及来自植物的III和V类。具体说，包括哺乳动物几丁质酶如酸性哺乳动物几丁质酶(AMCase)。
更优选地，本发明的化合物用于治疗和/或预防真菌感染。
更优选地，真菌感染是念珠菌属。
更优选地，念珠菌属选自下组：白色念珠菌(C.albicans)、吉利蒙念珠菌(C.guilliermondii)、克鲁斯念珠菌(C.krusei)、近平滑念珠菌(C.parapsilosis)、热带念珠菌(C.tropicalis)、乳酒念珠菌(C.kefyr)或光滑念珠菌(C.glabrata)。
更优选地，本发明的化合物用于治疗和/或预防耐药性念珠菌的真菌感染。该耐药性念珠菌可以对当前用于治疗真菌感染的任意药物具有耐受性。优选地，念珠菌耐受氟康唑和/或伏立康唑。
更优选地，本发明的化合物用于治疗和/或预防IL-13和/或Th-2-介导的疾病。
在本发明的一个实施方式中，IL-13和/或Th-2-介导的疾病是Th-2-介导的炎症。
在本发明的一个实施方式中，IL-13和/或Th-2-介导的疾病是过敏性气道疾病，优选哮喘。
本发明的另一个实施方式提供了一种药物组合物，其包含至少一种上文所述的本发明化合物以及合适的赋形剂或稀释剂。
优选地，组合物还包含至少一种选自下组的治疗剂：抗真菌剂、抗炎剂。
更优选地，额外的抗真菌剂选自下组：唑类抗真菌剂(氟康唑，伏立康唑)，大环内酯类如两性霉素，多烯类抗真菌剂如两性霉素B，克念菌素，非律平(Filipin)，哈霉素(Hamycin)，纳他霉素(Natamycin)，制霉菌素(Nystatin)，龟裂杀菌素(Rimocidin)，咪唑，三唑和噻唑类抗真菌剂，例如咪唑类：氯三苯甲咪唑(Canesten)(克霉唑)，联苯苄唑(Bifonazole)，布康唑(Butoconazole)，克霉唑(Clotrimazole)，益康唑(Econazole)，芬替康唑(Fenticonazole)，异康唑，酮康唑，卢立康唑(Luliconazole)，咪康唑(Miconazole)，奥莫康唑(Omoconazole)，奥昔康唑(Oxiconazole)，舍他康唑(Sertaconazole)，硫康唑(Sulconazole)，噻康唑(Tioconazole)；三唑类：阿巴康唑(Albaconazole)，氟康唑，艾沙康唑(Isavuconazole)，伊曲康唑，泊沙康唑(Posaconazole)，雷夫康唑(Ravuconazole)，特康唑(Terconazole)，伏立康唑；对于噻唑类：阿巴芬净(Abafungi)；丙烯胺类：阿莫罗芬，布替萘芬，萘替芳(Naftifine)，特比萘芬；棘白菌素类(echinocandins)：阿尼芬净(Anidulafungin)，卡泊芬净(Caspofungin)，米卡芬净(Micafungin)；其他抗真菌剂可以是苯甲酸；环吡酮；氟胞嘧啶；灰黄霉素；卤普罗近(Haloprogin)；托萘酯(Tolnaftate)；十一烯酸；结晶紫或秘鲁香脂。
本发明的另一个实施方式提供了式4的中间体：
本发明的另一个实施方式是制备如权利要求1所述的式8的化合物的方法，该方法包括以下步骤：
反应试剂和条件：(i)烯丙基NH2,EDC,HOBt,DIPEA,DMF(ii)DIBAL-H,DCM,室温(iii)THF,回流,12h(iv)Grubbs第二代催化剂,甲苯或DCM 2-10mM,40-80℃(v)H2,Pd/C,EtOH(vi)R1NBoc(C＝NBoc)SMe,THF,回流,12h,其中n1,n2,R1,R2,X,Y和Z如上文的定义。
本发明的另一个实施方式是抑制哺乳动物内的几丁质酶的方法，包括给予需要的哺乳动物适当量的上文所述的本发明化合物。
本发明的另一个实施方式是治疗哺乳动物内的真菌感染的方法，包括给予需要的哺乳动物适当量的本发明化合物。
优选地，真菌感染是念珠菌属。
本发明的另一个实施方式是治疗哺乳动物之内的IL-13和/或Th-2介导的疾病的方法，包括给予需要的哺乳动物适当量的上文所述的本发明化合物。
优选地，所述IL-13和/或Th-2-介导的疾病是哮喘。
在本发明中，术语“C1-C6烷基”是指直链或支链烃链基团，仅由碳氢原子组成，具有1-6个碳原子。合适的C1-C6烷基的例子包括：甲基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基和己基。
在本发明中，“耐药性”或“药物耐受性”是指对目前市场上的抗真菌药物或化合物，尤其是对唑类抗真菌剂如氟康唑和伏立康唑，大环内酯类如两性霉素耐受的能力。耐受性也可针对其他抗真菌剂，例如多烯类抗真菌剂如两性霉素B，克念菌素，非律平(Filipin)，哈霉素(Hamycin)，纳他霉素(Natamycin)，制霉菌素(Nystatin)，龟裂杀菌素(Rimocidin)，咪唑，三唑和噻唑类抗真菌剂，例如咪唑类：氯三苯甲咪唑(Canesten)(克霉唑)，联苯苄唑(Bifonazole)，布康唑(Butoconazole)，克霉唑(Clotrimazole)，益康唑(Econazole)，芬替康唑(Fenticonazole)，异康唑，酮康唑，卢立康唑(Luliconazole)，咪康唑(Miconazole)，奥莫康唑(Omoconazole)，奥昔康唑(Oxiconazole)，舍他康唑(Sertaconazole)，硫康唑(Sulconazole)，噻康唑(Tioconazole)；三唑类：阿巴康唑(Albaconazole)，氟康唑，艾沙康唑(Isavuconazole)，伊曲康唑，泊沙康唑(Posaconazole)，雷夫康唑(Ravuconazole)，特康唑(Terconazole)，伏立康唑；对于噻唑类：阿巴芬净(Abafungi)；丙烯胺类：阿莫罗芬，布替萘芬，萘替芳(Naftifine)，特比萘芬；棘白菌素类(echinocandins)：阿尼芬净(Anidulafungin)，卡泊芬净(Caspofungin)，米卡芬净(Micafungin)；其他抗真菌剂可以是苯甲酸；环吡酮；氟胞嘧啶；灰黄霉素；卤普罗近(Haloprogin)；托萘酯(Tolnaftate)；十一碳烯酸；结晶紫或秘鲁香脂。
药学上可接受的盐包括通过用无机酸(例如盐酸、氢溴酸、硫酸或磷酸)，或者用有机酸(例如乙酸、丙酸、琥珀酸、苯甲酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基-苯甲酸、肉桂酸、苦杏仁酸、水杨酸、乙醇酸、乳酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸或萘磺酸)使式8或8a的化合物成盐获得的常规非毒性盐。对于合适的药用盐的综述可以参见Berge S.M.等,J.Pharm.Sci.1977,66,1-19；Gould P.L.Int.J.Pharm1986,33,201-217；和Bighley等，药学技术百科全书,Marcel Dekker Inc,纽约1996,第13卷,第453-497页。不是药学上可接受的其他盐，例如三氟乙酸盐，对于制备本发明的化合物也是有用的，这些形成了本发明的其他方面。本发明包括式8或8a的化合物的盐的所有可能的化学计量和非化学计量形式。
此外，式8或8a的化合物可以是非溶剂合物或者是与药学上可接受的溶剂如水，EtOH等形成溶剂合物形式。
某些式8或8a的化合物可以是立体异构体形式(例如，它们可以含有一个或多个不对称碳原子)。各个立体异构体(对映异构体和非对映异构体)以及它们的混合物均包括在本发明的范围内。本发明还涵盖了式8或8a表示的化合物的个体异构体与其异构体(该异构体中反转一个或多个手性中心)的混合物。
本发明还包括本发明化合物所有合适的同位素变体。可以结合入本发明化合物的同位素的例子包括例如：2H，3H，13C，14C，15N，17O，18O，31P，32P，35S，18F和36Cl。某些同位素变体，如结合有放射性同位素如3H或14C，可用于药物和/或底物的组织分布研究。并且，用同位素如氘2H取代可以提供更大代谢稳定性带来的某些治疗优势。本发明化合物的同位素变体可以通过常规技术一般地制备，例如采用合适的反应试剂的同位素变体通过下文中示例性方法或者实施例中描述的制备过程制备。
考虑到几丁质酶在Th2细胞反应中的作用，尤其是白介素-13介导途径，本发明的化合物在预防和/或治疗IL-13和/或Th2-介导的病症或疾病中也是有用的9和11。
式8或8a的化合物也可以与其他试剂，尤其是抗真菌剂联用，不论是单独给予，还是两种有效成分包含在同一药物制剂中。合适的其他试剂的非穷尽例子如下文所述。
本发明还提供了药物组合物，其包含一种或多种本发明的化合物以及一种或多种药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂。药物组合物可以基于治疗需要进行选择。这些组合物可以通过掺混制备并且适当地调配成口服或胃肠外给药，这样，可以片剂、胶囊、口服制剂、粉末剂、颗粒剂、丸剂、注射剂或可滴注的液体溶液、混悬剂、栓剂、吸入制剂的形式。
口服给予的片剂和胶囊通常以单位剂量形式呈现并且包含常规赋形剂如粘合剂，填充剂(包括纤维素、甘露醇、乳糖)，稀释剂，压片试剂(tableting agents)，润滑剂(包括硬脂酸镁)，去污剂，崩解剂(例如聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物如乙醇酸淀粉钠)，着色剂，调味剂和湿润剂(例如月桂基硫酸钠)。
口服固体组合物可以通过掺混、填充或压片的常规方法制备。掺混操作可以重复进行，从而将有效成分分布到含有大量填充剂的组合物中。这些操作是常规的。
口服液体制剂可以是例如水性或油性混悬剂、溶液剂、乳剂、糖浆或酏剂的形式，或者可以是临用前用水或合适载剂重建的干燥产品。这类液体制剂可含有常规的添加剂，例如助悬剂，如山梨糖醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶、或氢化食用脂；乳化剂，如卵磷脂、去水山梨糖醇单油酸酯或阿拉伯胶；非水性载剂(可包括食用油)，如杏仁油、分馏椰子油，油酯(如甘油、丙二醇或乙醇的酯)；防腐剂，如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯或者山梨酸，需要时还可含有常规的调味剂或着色剂。口服制剂也包括常规缓释制剂，例如肠溶包衣片或颗粒。
吸入给予的药物制剂可以通过吹入器或雾化增压包递送。
对于胃肠外给药，可以制备含化合物和无菌载剂的流体剂量单位。化合物可以悬浮或溶解，取决于载剂和浓度。通常通过将化合物溶解在载剂中，过滤消毒，装入合适的药瓶并密封来制备胃肠道外给药溶液。有利的是，可将佐剂如局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂溶解于载剂中。为了增加稳定性，组合物可以在填充小瓶并且真空下除水后进行冷冻。胃肠外混悬剂可以以基本上相同的方式进行制备，区别在于化合物悬浮在载剂中而非溶解在其中，在悬浮于无菌载剂中之前暴露于环氧乙烷进行灭菌。有利的是，组合物可以包含表面活性剂或湿润剂以便于本发明化合物的均匀分布。
对于含服或舌下给药，组合物可以是片剂、锭剂、软锭剂或凝胶。
化合物可以是药学配制成栓剂或保留灌肠剂，例如含有常规栓剂基质如可可豆脂、聚乙二醇或其他甘油酯，用于直肠给药。
另一种给予本发明化合物的方式涉及局部治疗。局部制剂可以包括例如：软膏剂，乳膏剂，洗剂，凝胶，溶液剂，糊剂和/或并且包含脂质体，胶束和/或微球。软膏剂的例子包括：油脂性软膏，例如植物油，动物脂肪，半固体烃，可乳化的软膏，例如硫酸羟基硬脂精，无水羊毛脂，十六醇，甘油单硬脂酸酯，硬脂酸，水溶性软膏，含有各种分子量的聚乙二醇。如制剂专家所知，乳膏剂是粘稠液体或半固体乳剂，含有油相、乳化剂和水相。油相通常含有凡士林油和醇如十六或十八醇。适用于对眼睛局部给药的制剂包括滴眼剂，其中活性成分溶解或悬浮在对于该活性成分合适的载体(具体是水性溶剂)中。
给予本发明化合物的另一种方法涉及透皮递送。常见的透皮制剂包括传统的水性和非水性载剂(vector)，例如乳膏、油、洗剂或糊剂或者可以以膜或者加药贴剂的形式提供。
制剂参考参见雷明顿的书(“Remington:The Science and Practice ofPharmacy”《雷明顿药物科学》，Lippincott Williams&Wilkins,2000)。
本发明化合物可以单独使用作为单一治疗或者与其他治疗剂联用用于治疗上述疾病。
其他治疗剂可以是目前市场上的抗真菌药物或化合物，具体是唑类如氟康唑和伏立康唑，和大环内酯类如两性霉素。其他抗真菌剂包括多烯类抗真菌剂如两性霉素B，克念菌素，非律平(Filipin)，哈霉素(Hamycin)，纳他霉素(Natamycin)，制霉菌素(Nystatin)，龟裂杀菌素(Rimocidin)，咪唑，三唑和噻唑类抗真菌剂，例如咪唑类：氯三苯甲咪唑(克霉唑)，联苯苄唑，布康唑，克霉唑，益康唑，芬替康唑，异康唑，酮康唑，卢立康唑(Luliconazole)，咪康唑，奥莫康唑，奥昔康唑，舍他康唑，硫康唑，噻康唑；噻唑类：阿巴康唑(Albaconazole)，氟康唑，艾沙康唑(Isavuconazole)，伊曲康唑，泊沙康唑(Posaconazole)，雷夫康唑(Ravuconazole)，特康唑(Terconazole)，伏立康唑；对于三唑类：阿巴芬净(Abafungi)；丙烯胺类：阿莫罗芬，布替萘芬，萘替芳，特比萘芬；棘白菌素类(echinocandins)：阿尼芬净(Anidulafungin)，卡泊芬净(Caspofungin)，米卡芬净(Micafungin)；其他抗真菌剂可以是苯甲酸；环吡酮；氟胞嘧啶；灰黄霉素；卤普罗近(Haloprogin)；托萘酯(Tolnaftate)；十一碳烯酸；结晶紫或秘鲁香脂。
联用可以是各个治疗组分单独的组合物(同时、按顺序)给予或者作为含有两种试剂的单一剂型给予。当本发明的化合物与其他活性成分联合给予时，活性成分可以单独配制成上述形式之一的单一成分的制剂然后以合并制剂形式提供，它们同时或者在不同时间给予，或者可以一起配制成两种或更多种成分的制剂。
通式8或8a的化合物可以以总的日剂量例如0.001-1000毫克/千克体重/日给予患者。剂量单位组合物能包含所述量或其约数以组成每日剂量。就具体患者确定最优剂量为本领域技术人员熟知。
作为常规做法，组合物通常伴有书写或者印刷的针对治疗过程的使用说明。
提供下面的实施例和生物学数据以进一步阐述本发明。
在本发明的另一个目的是提供一种制备权利要求1中任意描述的化合物的方法，包括以下步骤：
a)使通式1的化合物与通式3的化合物反应
b)通式4的胍二烯的分子内反应
发明详述
化学物质
本发明所述式8的化合物可以根据以下方案1所示进行合成：
方案1
试剂和条件：(i)烯丙基NH2,EDC,HOBt,DIPEA,DMF(ii)DIBAL-H,DCM,室温(iii)THF,回流,12h(iv)Grubbs第二代催化剂,甲苯或DCM 2-10mM,40-80℃(v)H2,Pd/C,EtOH(vi)R1NBoc(C＝NBoc)SMe,THF,回流,12h。其中，n1,n2,R1,R2,X,Y和Z如上文的定义。
除非另有说明，市售反应试剂和溶剂无需进一步纯化即可使用。具体说，在实验方法部分的描述中采用了以下缩写：
min:分钟；h:小时；r.t.:室温,NMR:核磁共振；MHz:兆赫兹；1H:质子；13C:碳13；mg:毫克；mmol:毫摩尔；mL:毫升；μL:微升；N:当量；NMR核磁共振；LC-MS液相色谱质谱；TMS:四甲基硅烷；THF:四氢呋喃；Tf:三氟甲磺酰基；Boc:叔丁氧基羰基；DCM：二氯甲烷；EtOAc:乙酸乙酯；EDC:N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐；HOBT:1-羟基苯并三唑；DMF:N,N-二甲基甲酰胺；DIPEA:N,N'-二异丙基乙基胺；DIBAL-H:二异丁基氢化铝；MeOH:甲醇；MeOD:氘化甲醇；EtOH:乙醇；Et2O:乙醚；Et3N:三乙胺；DMSO:二甲亚砜；CbzCl:氯甲酸苄酯；EP:石油醚；DCC:N,N'-二环己基碳二亚胺；TMSCl:三甲基甲硅烷基氯化物；Py:吡啶。
除非另有说明，所有温度均以℃(摄氏度)或K(开耳文温度)表示。
合成的中间体和最终化合物的结构通过NMR和/或LC-MS分析验证。
1H-NMR谱的获取采用Varian Gemini 200(200MHz)或Brucker Avance DPX400(400MHz)。
13C-NMR谱的获取采用Brucker Avance DPX400(400MHz)。
化学位移的单位是百万分之份数(ppm，δ单位)。偶合常数以赫兹(Hertz)(Hz)表示，峰裂分布表示为s(单峰)，bs(宽信号)，d(双峰)，t(三重峰)，q(四重峰)，quint(五重峰)，m(多重峰)。
在由以下部件组成的系统上进行LC-MS分析：包括真空溶剂脱气单元的Varian装置(瓦里安有限公司(Varian Inc))，两个泵(212-LC)，三联四级MSD(Mod.320-LC)质谱仪，带有ES界面和Varian MS工作站系统控制版本6.9软件。色谱分离的实现采用Pursuit C18柱(50x2.0mm)(Varian)，粒度3μm，梯度洗脱：洗脱液A是CH3CN，洗脱液B由甲酸的水溶液(0.1％)构成。分析开始时使用0％洗脱液A，10分钟内线性增加一直到50％，然后在15分钟内缓慢增加一直到60％。流速为0.3ml/min，注射体积为5μL。设备以正极模式进行并且参数如下：检测器1850V，干燥气体压力25.0psi，去溶剂化温度300.0℃，喷雾气体45.0psi，针5000V，屏蔽600V。采用氮气作为喷雾和干燥气体。碰撞诱导解离实验采用氩气作为碰撞气体，碰撞室内压力为1.8mTorr，碰撞能量设定为149eV。设定毛细管压力为-27.5V，-23.5V和-19.5V，在279.8(m/z)，321.9(m/z)和368.0(m/z)分别记录三种转变。
实施例16
为清楚起见，实施例16的详细合成如以下方案2所示。
如果没有特殊说明，假定产物纯度100％来计算产率。
方案2：合成实施例16的实验步骤
试剂和条件：(i)BrCH2CH＝CH2,K2CO3,DCM,回流(ii)NH2OH,Py,EtOH,回流(iii)Zn,HCl,THF,回流(iv)(BocNH)2C＝NTf,Et3N,DCM(v)烯丙基NH2,EDC,HOBt,DIPEA,DMF(vi)DIBAL-H,DCM,室温(vii)THF,回流,12h(viii)Grubbs第二代催化剂，甲苯或DCM 2-10mM,40-80℃(ix)H2,Pd/C,EtOH(x)丁烯基NBoc(C＝NBoc)SMe,THF,回流,12h。
制备2-丙-2-烯氧基苯甲醛10的过程
2-羟基苯甲醛9(0.5ml,4.69mmol,西格玛-奥德里奇公司目录编号:S356)溶解在CH3CN(10ml)和K2CO3(0.97ml,7.03mmol)中，加入3-溴丙-1-烯(0.45ml,5.16mmol,西格玛-奥德里奇公司目录编号:337528)。混合物在回流下搅拌12小时。真空蒸发溶剂，残留物溶解在EtOAc(5mL)中。加入水(10ml)，混合物于室温下搅拌10分钟。分离有机相，水层用EtOAc(2x10ml)萃取。合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到标题化合物10。
产率99％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝10.25(1H，s)，7.54-7.52(1H，m)，7.23-7.19(1H，m)，6.72-6.66(2H，m)，5.82-5.75(1H，m)，5.20-5.15(1H，d，J＝17.6Hz)，5.05-5.03(1H，d，J＝10.8Hz)，4.33-4.31(2H，m)ppm。
13C NMR(CDCl3)δ188.9，160.6，135.6，132.2，127.8，124.7，120.5，117.5，112.7，68.7ppm,
液相色谱质谱(LCMS)m/z(ES+)m/z:347.0[2M+Na]+，185.0[M+Na]+，163.0[M+H]+。
C10H10O2的元素分析：计算值C 74.06,H 6.21；实测值C 74.36,H 6.52。
制备(2-丙-2-烯氧基苯基)甲胺11的过程
2-丙-2-烯氧基苯甲醛10(4.69mmol)溶解于EtOH(10ml)和吡啶(0.45ml，5.63mmol)中，加入NH2OH(490mg，7.03mmol)。将混合物在回流下加热2小时。加入盐水，水层用EtOAc(2x10ml)萃取，合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤。减压蒸发溶剂，残留物通过快速色谱(SiO2)纯化，采用己烷-Et2O(3:1)作为洗脱剂，得到肟E/Z异构体的混合物。
N-[(2-丙-2-烯氧基苯基)亚甲基]羟胺(818mg，4.62mmol)溶解于THF(30ml)，加入Zn(3.00g，46.23mmol)。加入HCl 2N(12ml)，混合物在回流下搅拌3小时。反应混合物冷却至室温，用硅藻土滤垫过滤以除去多余的锌，减压浓缩。加入氢氧化铵将pH调节至>10。水层用EtOAc(2x10ml)萃取，合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤。溶剂减压蒸发，得到标题化合物11。
产率99％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝7.06-7.01(2H，m)，6.77-6.73(1H，m)，6.67-6.65(1H，m)，5.92-5.84(1H，m)，5.28-5.24(1H，d，J＝17.2Hz)，5.13-5.10(1H，d，J＝10.4Hz)，4.36-4.35(2H，m)，3.70-3.68(2H，m)，1.65(2H，br s)ppm。
13C NMR(CDCl3)δ156.1，133.2，131.9，128.2，127.7，120.5，116.8，111.3，68.3，42.4ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝349.0[2M+Na]+，202.0[M+Na]+，163.9[M+H]+。
C10H13NO的元素分析：计算值C 73.59,H 8.03,N 8.58；实测值C 73.86,H 8.47,N9.01。
制备N-({[(叔丁氧基)羰基]氨基}(三氟甲磺酰基亚氨基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(也称为1,3-二-Boc-2-(三氟甲磺酰基)胍)的过程
N-[N-[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基]甲脒基(carbamimidoyl)]氨基甲酸叔丁基酯(7.12g，27.45mmol，西格玛-奥德里奇公司目录编号：496871)溶解于无水DCM(136ml)中，加入Et3N(4.2ml，30.19mmol)。溶液在-78℃冷却，一次性加入1M的在二氯甲烷中的三氟甲基磺酰基三氟甲磺酸酯(西格玛-奥德里奇公司,目录编号:91737)溶液(35.68ml)。该混合物温度升高至室温，搅拌4小时。混合物中加入水，有机层用盐水洗涤两次，水相用EtOAc萃取两次。最终合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤，真空蒸发。固体残留物用己烷重结晶，得到标题化合物N-({[(叔丁氧基)羰基]氨基}(三氟甲磺酰基亚氨基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(也称为1,3-二-Boc-2-(三氟甲磺酰基)胍)。
产率70％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝8.00(2H，s)，1.4(18H，m)ppm。
13C NMR(CDCl3)δ151.0，148.0，117.5，85.9，27.7ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝805.0[2M+Na]+，414.0[M+Na]+，391.9[M+H]+。
C12H20F3N3O6S的元素分析：计算值C 36.83，H 5.15，N 10.74；实测值C 37.13，H5.35，N 10.94；
制备N-[[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基氨基]-[(2-丙氧基苯基)甲基氨基]甲基]氨基甲酸叔丁酯1a的过程
将(2-丙-2-烯氧基苯基)甲胺11(345mg，2.1mmol)，Et3N(0.58ml，4.2mmol)和1,3-二-Boc-2-(三氟甲磺酰基)胍在DCM(25ml)中混合，混合物室温下搅拌过夜。分离水层，用EtOAc(2x10ml)萃取，合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤。溶剂减压蒸发，残留物通过快速色谱纯化(己烷-Et2O，8:2)，得到胍标题化合物1a。
产率75％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝11.42(1H，s)，8.62(1H，s)，7.09-7.07(1H，d，J＝7.6Hz)，7.03-6.99(1H，m)，6.71-6.63(2H，m)，5.92-5.83(1H，m)，5.22-5.18(1H，d，J＝17.6Hz)，5.06-5.04(1H，d，J＝10.4Hz)，4.46-4.45(2H，m)，4.37-4.35(2H，m)，1.31(9H，s)，1.26(9H，s)ppm。
13C NMR(CDCl3)δ163.4，156.4，155.8，152.9，132.9，129.4，128.7，125.5，120.4，117.1，111.3，82.3，78.5，68.5，40.6，28.0，27.7ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝833.0[2M+Na]+，428.0[M+Na]+,406.2[M+H]+。
C21H13N3O5的元素分析：计算值C 62.20，H 7.71，N 10.36；实测值C62.56，H 7.92，N10.85。
制备8-(苄氧基羰基氨基)辛酸2a的过程
8-氨基辛酸(500mg，3.14mmol，西格玛-奥德里奇公司目录编号:855294)和K2CO3(867mg，6.28mmol)溶解于THF(15ml)(悬浮液)。然后加入CbzCl(0.67ml，4.71mmol)，混合物室温下搅拌过夜。
反应用EtOAc和H2O淬灭。将水相分离，通过加入HCl 4N将水相的pH调节至pH＝2，用EtOAc萃取两次。然后，合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤，真空蒸发，得到标题化合物2a。
产率99％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ11.01(1H，s)，7.28-7.19(5H，m)，5.11-5.07(1H，d，J＝16Hz)，5.05-5.03(1H,d，J＝8Hz)，3.18-3.16(2H，m)，2.44-2.40(2H m)，1.64-1.62(2H，m)，1.48-1.43(2H，m)，1.32(6H，m)ppm。
13C NMR(CDCl3)δ178.7，156.4，136.5，128.4，128.0，128.0，66.5，41.4，33.8，29.7，28.6，26.4，24.7ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝609.0[2M+Na]+,316.0[M+Na]+,294.1[M+H]+。
C16H23NO4的元素分析：计算值C 65.51，H 7.90，N 4.77；实测值C 65.96，H 8.35，N5.04。
制备N-[8-氧代-8-(丙-1-烯基氨基)辛基]氨基甲酸苄基酯的过程
8-(苄氧基羰基氨基)辛酸2a(14mmol)，HOBT(424mg，3.14mmol)，EDC(487mg，3.14mmol)，DIPEA(0.66ml，3.77mmol)，烯丙基胺(0.23ml，3.14mmol)在DMF(5ml)中混合。混合物于室温下搅拌过夜。反应用NaHCO3淬灭，然后将水相分离并用EtOAc(3x5ml)萃取。溶剂减压蒸发，残留物通过快速色谱纯化(EtOAcEP，4:1)，得到N-[8-氧代-8-(丙-2-烯基氨基)辛基]氨基甲酸苄基酯。
产率75％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.28-7.19(5H，m)，5.79-5.70(1H，m)，5.74(1H，br s)，5.11-5.07(1H，d，J＝17.2Hz)，5.03-5.01(1H，d，J＝10.4Hz)，5.00(2H，s)，4.78(1H，br s)，3.81-3.78(2H，t，J＝4.8Hz)，3.10-3.08(2H，m)，2.12-2.08(2H，t，J＝7.6Hz)，1.55(2H，m)，1,40(2H，m)，1.23-1.18(8H，m)ppm。
13C NMR(CDCl3)δ172.8，156.3，136.5，134.2，128.4，127.9，127.6，116.9，66.4，41.7，40.8，36.4，29.7，28.9，28.7，26.3，25.4ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝687.0[2M+Na]+，355.0[M+Na]+,333.1[M+H]+。
C19H28N2O3的元素分析：计算值C 68.65，H8.49，N8.43；实测值C 69.06，H 8.95，N8.93。
制备N-[8-(丙-2-烯基氨基)辛基]氨基甲酸苄基酯3a的过程
N-[8-氧代-8-(丙-2-烯基氨基)辛基]氨基甲酸苄基酯(747mg，2.25mmol)溶解于无水CH2Cl2(5ml)，在-78℃冷却。加入DIBAL(3.37ml，3.37mmol)，混合物于-78℃搅拌1小时，然后混合物在室温升温。再次加入DIBAL(4.5ml，4.5mmol)，混合物搅拌2/3h。反应用EtOAc和Rochelle盐淬灭。粗品标题化合物3a用于下一步骤。
产率99％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝7.28-7.19(5H，m)，5.79-5.70(1H，m)，5.11-5.07(1H，d，J＝17.2Hz)，5.03-5.01(1H，d，J＝10.4Hz)，5.00(2H，s)，3.22-3.20(2H，m)，2.09-2.05(4H，m)，1.40-1.50(4H，m)，1.23-1.18(8H，m)ppm。
13C NMR(CDCl3)δ156.3，141.2，134.2，129.0，128.1，127.9，116.0，65.0，52.1，49.8，41.9，31.0，29.9，29.4，27.0，26.8ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝659.0[2M+Na]+，341.0[M+Na]+,319.0[M+H]+。
制备N-[8-[[N'-[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基]-N-[(2-丙-2-烯氧基苯基)甲基]甲脒基]氨甲酰基-丙-2-烯基氨基]辛基]氨基甲酸苄基酯12的过程
N-[[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基氨基]-[(2-丙氧基苯基)甲基氨基]甲基]氨基甲酸酯苄基8-(烯丙基氨基)辛基氨基甲酸叔丁酯1a(2.25mmol)和化合物3a(1.4mmol)在THF(10ml)中混合，加入Et3N(1.4mmol)，混合物回流过夜。除去溶剂，残留物通过快速色谱纯化(己烷-Et2O从9:1到1:1)，得到标题化合物12。
产率80％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ12.27(1H，s)，8.47(1H，s)，7.26-7.21(5H，m)，7.18-7.12(2H，m)，6.83-6.76(2H，m)，6.05-5.97(1H，m)，5.75-5.67(1H，m)，5.36-5.32(1H，d，J＝17.2Hz)，5.21-5.18(1H，d，J＝10.4Hz)，5.07-5.01(1H，m)，5.00-4.99(2H，m)，4.98-4.96(1H，m)，4.52-4.47(4H，m)，3.86-3.84(2H，m)，3.37-3.33(1H，m)，3.18-3.14(1H，m)，3.09-3.06(2H，m)，1.43(4H，m)，1.37(9H，m)，1.21-1.16(8H，m)ppm。
13C NMR(CDCl3)δ163.6，156.3，153.9，153.1，136.7，135.3，134.6，129.2，128.8，128.2，128.0，127.8，127.0，120.4，117.1，115.4，111.4，81.7，68.6，66.1，50.3，48.3，40.9，40.2，29.8，29.2，28.5，27.9，27.8，26.8，26.5ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝672.3.0[M+Na]+，688.2[M+K]+，650.3[M+H]+。
C36H51N5O6的元素分析：计算值C 66.54，H 7.91，N 10.78；实测值C 66.93，H 8.11，N 10.98。
制备N-[8-[4-[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基亚氨基]-6-氧代-12-氧杂-3,5,7-三氮杂双环[11.4.0]十七碳-1(13),9,14,16-四烯-7-基]辛基]氨基甲酸苄基酯13的过程
下一步骤是闭环置换，通过两个不同的过程进行：
A.起始材料化合物12(0.43mmol)溶解于DCM(溶液2mM)；第二代Grubbs催化剂(0.043mmol，西格玛-奥德里奇公司目录编号:569747)溶解于2ml的DCM中并在40/50℃于4小时内通过注射泵加入到前述溶液中。减压蒸发溶剂，残留物通过快速色谱纯化(己烷-Et2O，9:1)，得到标题化合物13。
B.起始材料化合物12(0.76mmol)溶解于甲苯(溶液10mM)；Grubbs催化剂(0.15mmol)溶解于2ml的甲苯中并在100℃于4小时内通过注射泵加入到前述溶液中。减压蒸发溶剂，残留物通过快速色谱纯化(己烷-Et2O，9:1)，得到标题化合物13。
过程B；产率30％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.33-7.16(5H，m)，7.02-7.89(4H，m)，5.38-5.32(2H，m)，5.07-5.05(2H，m)，4.65-4.45(4H，m)，3.80-3.70(2H，m)，3.17-3.14(4H，m)，1.43(9H，m)，1.26(12H，m)ppm。
13C NMR(CDCl3)δ163.8，156.3，155.3，153.4，152.9，136.6，129.8，129.3，128.7，128.4，121.6，113.4，82.0，75.0，66.4，48.1，46.3，41.0，29.8，29.3，29.1，28.6，28.0，26.9，26.5，24.6ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝660.3[M+Na]+，688.2[M+K]+，622.3[M+H]+。
C34H47N5O6的元素分析：计算值C 65.68，H 7.62，N 11.26，O 15.44；实测值C65.98，H 7.91，N 11.72，O 15.83。
N-[7-(8-氨基辛基)-6-氧代-12-氧杂-3,5,7-三氮杂双环[11.4.0]十七碳-1(13),14,16-三烯-4-亚基]氨基甲酸叔丁酯14脱保护的过程
化合物13(0.097mmol)在EtOH(9ml)中稀释，加入Pd/C 10wt.％(45mg)。吹入H2，混合物搅拌5小时。反应混合物过滤通过硅藻土，然后真空下蒸发溶剂。粗品标题化合物14无需进一步纯化即可用于下一步骤。
产率99％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝7.27-7.08(2H，m)，6.88-6.77(2H，m)，4.61-4.60(2H，m)，4.02-3.98(2H，m)，3.30-3.26(4H，m)，3.14-3.10(2H，m)，1.76-1.75(2H，m)，1.59-1.54(6H，m)，1.43(9H，m)，1.20-1.14(8H，m)ppm
LCMS m/z(ES+)m/z＝512.3[M+Na]+,528.2[M+K]+，490.3[M+H]+。
制备N-丁-2-烯基-N-[N'-[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基]-N-甲基硫烷基甲脒基]氨基甲酸叔丁酯的过程
向搅拌的KOH(2.8mmol)在CH2Cl2/CH3CN溶液(19:1，3.5mL)的悬浮液中加入四丁基溴化铵(0.2mmol)和N-[N-[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基]甲脒基]氨基甲酸酯(1mmol，西格玛-奥德里奇公司目录编号:496871)。几分钟后，逐滴加入(E)-1-溴丁-2-烯(2.4mmol,西格玛-奥德里奇公司目录编号:C86405)的CH2Cl2/CH3CN(19:1,3.5mL)溶液，所得溶液于室温搅拌16-18小时。然后将反应混合物倒到冰上，水层用CH2Cl2(2x5mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。粗产物通过快速柱色谱(SiO2)纯化，采用1:9MeOH/CH2Cl2作为洗脱剂，得到标题化合物N-丁-2-烯基-N-[N'-[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基]-N-甲基硫烷基甲脒基]氨基甲酸叔丁酯。
时间16小时，产率70％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.34-5.21(2H，m)，3.69-3.68(2H，d，J＝8Hz)，2.02-2.01(3H，s)，1.15(9H，s)，1.12(9H，m)ppm。
13C NMR(CDCl3)δ162.8，157.7，151.5，129.6，126.5，82.0，82.4，45.4，27.9，17.5，15.3ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝710.9[2M+Na]+，367.0[M+Na]+，345.1[M+H]+
C16H28N2O4S的元素分析:计算值C 55.79，H 8.19，N 8.13；实测值C 55.83，H 8.21，N 8.34。
制备N-[N-[(E)-丁-2-烯基]-N'-[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基]甲脒基]-N-[8-[4-[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基亚氨基]-6-氧代-12-氧杂-3,5,7-三氮杂双环[11.4.0]十七碳-1(13),14,16-三烯-7-基]辛基]氨基甲酸叔丁酯15的过程
向搅拌的化合物14(0.097mmol)的无水THF(5ml)溶液中逐滴加入N-丁-2-烯基-N-[N'-[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基]-N-甲基硫烷基甲脒基]氨基甲酸叔丁酯(0.10mmol)的无水THF(4ml)溶液。然后加入Et3N(0.14mmol)。然后，混合物回流搅拌过夜。减压蒸发溶剂，残留物通过快速色谱(SiO2)纯化，采用1:1己烷-Et2O作为洗脱剂，得到标题化合物15。
产率50％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ11.97(1H，s)，8.44(1H，s)，7.28-6.74(4H，m)，5.57-5.55(1H，m),5.44-5.41(1H,m)，4.09-4.07(2H，d，J＝8Hz)，4.02-4.00(2H，d，J＝6.4Hz)，3.31-3.30(2H，m)，3.17-3.10(6H，m)，1.60-1.58(3H，d，J＝6.4Hz)，1.42-1.36(27H，m)，1.22-1.17(16H，m)ppm。
13C NMR(CDCl3)δ163.9，158.0，155.5，153.4，153.0，130.3，128.3，128.2，127.9，126.1，120.4，111.7，81.9，67.1，47.4，46.3，43.7，37.1，39.5，29.3，28.5，28.0，26.9，26.7，24.5，23.8，20.9，17.6ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝808.3[M+Na]+，824.0[M+K]+，786.2[M+H]+。
C41H67N7O8的元素分析:计算值C 62.65，H 8.59，N 12.47；实测值C 63.08，H 8.98，N 12.84。
制备实施例16：1-[(E)-丁-2-烯基]-3-[8-(4-亚氨基-6-氧代-12-氧杂-3,5,7-三氮杂双环[11.4.0]十七碳-1(13),14,16-三烯-7-基)辛基]胍16的过程
胍基化(Guanylated)化合物15(0.025mmol)溶解于无水DCM(30mL得到1mmol)，用10％新鲜蒸馏的TFA溶液处理。所得溶液于氩气下室温搅拌。24小时后，反应混合物减压浓缩，得到定量产率的粗品标题化合物16(棕色油状物)。
产率定量。1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.33-6.94(4H，m)，5.68-5.64(1H，m),5.44-5.41(1H,m)，4.44-4.38(2H，m)，4.21-4.20(2H，m)，3.68-3.67(2H，d，J＝4.8Hz)，3.54(2H，m)，3.30-3.28(2H，m)，3.12-3.09(2H，t，J＝6.8Hz)，1.65-1.64(3H，m)，1.55-1.45(4H，m)，1.32-1.21(12H，m)ppm。
13C NMR(MeOD)δ163.5，157.6，156.2，155.8，131.0，129.9，128.6，127.9，127.1，124.8，121.3，111.4，69.0，47.2，43.0，41.0，31.5，29.2，28.7，28.4，27.2，26.1，24.9，22.0，16.2ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝508.3[M+Na]+，524.0[M+K]+，486.2[M+H]+。
C26H43N7O2的元素分析：计算值C 64.30，H 8.92，N 20.19；实测值C 64.68，H 9.08，N 20.84。
实施例17
1-[(E)-丁-2-烯基]-3-[8-(4-亚氨基-6-氧代-13-氧杂-3,5,7-三氮杂双环[12.4.0]十八碳-1(14),15,17-三烯-7-基)辛基]胍17
化合物17的合成基于实施例16所述过程，从合适的中间体1f开始。
化合物17的分析数据
1H NMR(400MHz MeOD)δ7.23-6.88(4H，m)，5.62-5.64(1H，m),5.40-5.35(1H，m)，4.43-4.42(2H，m)，4.06(2H，m),3.65(2H，m)，3.45-3.41(2H，m)，3.23(2H，m)，3.08-3.00(2H，m)，1.63-1.62(3H，m)，1.49-1.48(6H，m)，1.28-1.17(12H，m)ppm。
13C NMR(100MHz MeOD)δ163.5，156.7，156.2，154.7，130.0，128.5，127.9，127.1，124.8，120.0，111.1，64.6，49.2，46.6，42.4，41.0，39.6，28.7，28.3，27.0，26.0ppm。LC-MSm/z(ES+)m/z＝522.3[M+Na]+，538.0[M+K]+，500.2[M+H]+
实施例18
1-[(E)-丁-2-烯基]-3-[8-(4-亚氨基-6-氧代-14-氧杂-3,5,7-三氮杂双环[13.4.0]十九碳-1(15),16,18-三烯-7-基)辛基]胍18
化合物18的合成基于实施例16所述过程，从合适的中间体1g开始。
化合物18的分析数据
1H NMR(400MHz MeOD)δ12.31(1H，s)，8.05(1H，s)，7.26-7.22(2H，m),6.92-6.84(2H，m)，5.66-5.65(1H，m),5.49-5.42(1H,m)，4.37(2H，m)，3.97(2H，m)，3.68(2H，m)，3.51(2H，m),3.30(2H，m)，3.15-3.11(4H，m)，1.63-1.62(3H，m)，1.50-1.48(6H，m)，1.28-1.23(12H，m)ppm。
13C NMR(100MHz MeOD)δ163.7，157.5，156.1，155.8，130.3，128.5，124.9，119.8，110.9，67.2，53.3，46.42.5，41.0，29.0，28.7，28.4，27.1，26.7，26.4，26.4，26.3，26.2，26.1，26.0ppm。
LC-MS m/z(ES+)m/z＝536.3[M+Na]+，552.0[M+K]+，514.2[M+H]+
实施例19
1-[(E)-丁-2-烯基]-3-[8-(6-亚氨基-2,8-二氧代-1-氧杂-5,7,9-三氮杂环十四-9-基)辛基]胍19
化合物19的合成基于方案1，将中间体1b与中间体3a反应，并施用与实施例16类似的过程。
中间体1b的合成如方案3。
方案3
试剂和条件：(i)(BocNH)2C＝NTf，Et3N，DCM，(ii)TMSCl，Et3N，DCM，回流；(iii)DMAP，DCC，丁-3-烯-1-醇(西格玛-奥德里奇公司，目录编号:496839)，DCM，室温，24h；
3-氨基丙酸(600mg 6.74mmol，西格玛-奥德里奇公司目录编号:146064)溶解于CH2Cl2(10ml)，室温下5分钟内逐滴加入三甲基甲硅烷基氯(0.86ml，6.74mmol)。反应混合物回流1小时，然后冷却至0℃。然后加入三乙胺(1.22ml，8.76mmol)，然后是N,N’-双(叔丁氧基羰基)-S-甲基异硫脲(977mg，3.37mmol)。所得混合物回流1小时，然后冷却至室温，加入MeOH(10ml)并搅拌10分钟。然后蒸发溶剂，残留物用水稀释，然后用HCl 1N酸化至pH 2。混合物用AcOEt(2x10ml)萃取。将有机层收集，用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，减压蒸发。残留物无需进一步纯化即可用于下一步骤。向3-[[N,N'-二[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基]甲脒基]氨基]丙酸(8.98mmol)的无水DCM(20ml)溶液中加入丁-3-烯-1-醇(17.96mmol，西格玛-奥德里奇公司目录编号:496839)和DMAP(0.89mmol)。混合物冷却至0℃，然后加入DCC(13.47mmol)。混合物在氩气下搅拌的同时过夜升温至室温。将反应期间形成的白色沉淀过滤掉。然后将溶液用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，真空浓缩。残留物通过快速色谱纯化，采用己烷-Et2O 4:6作为洗脱剂，得到所需的化合物1b，3-[[N,N'-二[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基]甲脒基]氨基]丙酸丁-3-烯基酯。
化合物19的分析数据
1H NMR(400MHz MeOD)δ12.31(1H，s)，8.05(1H，s)，5.64(1H，m),5.42(1H,m)，4.13(2H，m)，3.78(2H，m)，3.64(2H，m)，3.43(2H，m)，3.08(2H，m)，2.51(2H，m)，1.63(3H，m)，1.55(4H,m)，1.49(4H,m)，1.27(12H，m)ppm。
13C NMR(100MHz MeOD)δ171.3，171.1，155.1，154.0，137.5，128.6，63.9，42.5，41.0，37.6，34.1，29.2，28.7，28.4，27.6，26.1，21.9，18.7ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝488.0[M+Na]+，466.2[M+H]+。
实施例20
1-[(E)-丁-2-烯基]-3-[8-(6-亚氨基-2,8-二氧代-1-氧杂-5,7,9-三氮杂环十五-9-基)辛基]胍20
化合物20的合成基于方案1，将中间体1h与中间体3a反应，并施用基于实施例16的类似过程。
中间体1h的合成如方案4。
方案4
试剂和条件：(i)(BocNH)2C＝NTf，Et3N，DCM(ii)TMSCl，Et3N，DCM，回流；(iii)DMAP，DCC，戊-4-烯-1-醇(西格玛-奥德里奇公司，目录编号:111279)，DCM，室温24小时；
3-氨基丙酸(600mg 6.74mmol，西格玛-奥德里奇公司目录编号:146064)溶解于CH2Cl2(10ml)，室温下5分钟内逐滴加入三甲基甲硅烷基氯(0.86ml，6.74mmol)。反应混合物回流1小时，然后冷却至0℃。然后加入三乙胺(1.22ml，8.76mmol)，然后加入N,N’-双(叔丁氧基羰基)-S-甲基异硫脲(977mg，3.37mmol)。所得混合物回流1小时，然后冷却至室温，加入MeOH(10ml)搅拌10分钟。然后蒸发溶剂，残留物用水稀释，然后用HCl 1N酸化至pH 2。混合物用AcOEt(2x10ml)萃取。将有机层收集，用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，减压蒸发。残留物无需进一步纯化即可用于下一步骤。向上一步骤制备的3-[[N,N'-二[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基]甲脒基]氨基]丙酸(8.98mmol)的无水DCM(20ml)溶液中加入戊-4-烯-1-醇(17.96mmol，西格玛-奥德里奇公司目录编号:111279)和DMAP(0.89mmol)。混合物冷却至0℃，然后加入DCC(13.47mmol)。混合物在氩气下搅拌的同时过夜升温至室温。将反应期间形成的白色沉淀过滤掉。然后将溶液用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，真空浓缩。残留物通过快速色谱纯化，采用己烷-Et2O 4:6作为洗脱剂，得到所需的化合物1b，3-[[N,N'-二[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基]甲脒基]氨基]丙酸丁-3-烯基酯。
化合物20的分析数据
1H NMR(300MHz MeOD)δ12.31(1H，s)，8.05(1H，s)，5.65(1H，m),5.43(1H,m)，4.06(2H，m)，3.68(2H，m)，3.58(2H，m)，3.44(2H，m)，3.30(2H，m)，3.11-3.07(2H，m)，2.62-2.59(2H，m)，1.63(3H，d，J＝6.0Hz)，1.51(8H,m)，1.27(12H，m)ppm。
13C NMR(100MHz MeOD)δ171.3，171.1，155.1，154.0，136.1，129.2，76.4，41.1，41.0，37.3，36.8，29.4，29.2，29.3，29.0，28.8，28.4，28.5，26.1，21.8，19.0ppm。
LCMS m/z(ES+)m/z＝502.0[M+Na]+,480.2[M+H]+。
实施例21
1-[(E)-丁-2-烯基]-3-[6-[4-亚氨基-6-氧代-2-(1-苯基三唑-4-基)-14-氧杂-3,5,7-三氮杂双环[13.4.0]十九碳-1(15),16,18-三烯-7-基]己基]胍21
化合物21的合成基于方案1，将中间体1c与中间体3a反应，并施用基于实施例16的类似过程。
中间体1c的合成如方案5。
方案5
试剂和条件：(i)Br(CH2)3CH＝CH2(1.2当量)，K2CO3(1.2当量)，CH3CN，回流，12h(ii)乙炔基溴化镁(1.5当量)，THF，-15℃，4h(iii)N3Ph(2.5当量)，抗坏血酸钠(0.1当量)，CuSO4(0.01当量)，H2O/t-BuOH，MW，125℃，30’(iv)MnO2(10当量)，DCM，室温，18h(v)NH2OH(2.5当量)，Py(1.2)，EtOH，回流，4h(vi)Zn(10.0当量)，HCl(2N，10.0当量)，THF，回流，2h(vii)(BocNH2)2C＝Tf(1.1当量)，Et3N(2.0)，DCM，室温，18小时
化合物21的分析数据
1H NMR(400MHz，MeOD)δ8.56(1H bs)，7.87-7.85(2H，d，J＝7.2Hz)，7.59-7.55(2H，t，J＝8.0Hz)，7.50-7.47(1H，t，J＝7.2Hz)，7.39-7.35(1H，t，J＝7.2Hz)，7.30-7.29(1H，d，J＝4.0Hz)，7.07-7.05(1H，t，J＝8.4Hz)，6.90(2H，bs)，6.35(1H，s)，5.73-5.67(1H，m)，5.47-5.43(1H，m)，4.13(2H，s)，3.71-3.70(2H，d，J＝5.6Hz)，3.47(2H，s)，3.33(2H，s)，3.07-3.04(2H，t，J＝6.8)，1.69-1.67(3H，d，J＝6.0Hz)，1.59-1.52(8H，m)，1.28-1.23(12H，m)
13C NMR(400MHz，MeOD)δ163.6，162.4，156.3，156.1，153.1，152.1，149.0，137.5，137.0，131.5，131.2，130.4，129.5，128.8，127.6，124.9，120.5，120.15，119.4，119.2，115.3，97.01，67.6，66.4，50.4，48.9，48.3，47.5，45.5，42.5，41.0，30.7，30.1，29.2，28.8，28.4，26.1，17.5
LCMS m/z(ES+)m/z＝329.1[M+2H]2+，657.3[M+H]+,695.3[M+Na]+
实施例22
1-[(2E)-丁-2-烯-1-基]-3-(8-{16-亚氨基-14-氧代-2-氧杂-13,15,17-三氮杂三环[17.4.0.04,9]二十三碳-1(19),4(9),5,7,20,22-六烯-13-基}辛基)胍22
化合物22的合成基于方案1，将中间体1d与中间体3a反应，并施用基于实施例16的类似过程。
中间体1d的合成如方案6所示。
方案6
试剂和条件：(i)PPh3(1.1当量)，THF，回流，12h(ii)CH2O(1.8当量)，KOH(2.0当量)，DCM，室温，1h(iii)水杨醛(1.0当量)，K2CO3(1.5当量)，CH3CN，回流，12h(iv)NH2OH(2.5当量)，Py(1.2当量)，EtOH，回流，4h(v)Zn(10.0当量)，HCl(2N 10当量)，THF，回流，2h(iv)(BocNH2)2C＝Tf(1.1当量)，Et3N(2.0当量)，DCM，室温，18小时。
化合物22的分析数据
1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.46-7.44(1H，d，J＝6.0Hz)，7.35(2H，m)，7.23(3H，m)6.98(1H，m)，6.87-6.88(1H，t，J＝4.5)，6.84(1H，m)，5.75-5.69(1H，m)，5.51-5.48(1H，m)，5.07(2H，s)，4.46-4.40(2H，d，J＝24Hz)，3.74-3.72(2H，d，J＝5.6Hz)，3.40-3.30(4H，m)，3.17-3.13(2H，t，J＝8.8)，2.63-2.59(2H，t，J＝7.4)，1.72-1.69(3H，d，J＝6.0Hz)，1.57-1.54(4H，m)，1.32-1.28(10H，m)
13C NMR(400MHz，MeOD)δ163.7，156.4，155.9，153.2，136.8，136.6，135.3，134.7，133.7，129.7，129.6，129.4，128.6，128.1，125.7，125.6，124.9，121.1，119.5，114.8，111.9，76.2，48.4，47.5，42.5，41.0，40.4，37.4，29.2，28.9，28.8，28.7，28.5，28.4，28.1，26.1，16.3
LCMS m/z(ES+)m/z＝281.7[M+2H]2+，562.3[M+H]+。
实施例23
1-[(2E)-丁-2-烯-1-基]-3-(8-{12-亚氨基-14-氧代-3-氧杂-11,13,15-三氮杂三环[17.3.1.04,9]二十三碳-1(23),4(9),5,7,19,21-六烯-15-基}辛基)胍
化合物23的合成基于方案1，将中间体1e与中间体3a反应，并施用基于实施例16的类似过程。
中间体1e的合成如方案7所示。
方案7
试剂和条件：(i)PPh3(1.1当量)，THF，回流，12h(ii)CH2O(1.8当量)，KOH(2.0当量)，DCM，室温，1h(iii)水杨醛(1.0当量)，K2CO3(1.5当量)，CH3CN，回流，12h(iv)NH2OH(2.5当量)，Py(1.2当量)，EtOH，回流，4h(v)Zn(10.0当量)，HCl(2N 10当量)，THF，回流，2h(iv)(BocNH2)2C＝Tf(1.1当量)，Et3N(2.0当量)，DCM，室温，18小时。
化合物23的分析数据
1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.31-7.19(7H，m)，7.07(1H，s)，6.97-6.93(1H，t，J＝7.2)，5.75-5.70(1H，m)，5.59-5.47(1H，m)，5.13(2H，s)，4.53(2H，s)，3.74-3.72(2H，d，J＝4.8Hz)，3.35(2H，s)，3.17-3.13(4H，t，J＝7.2)，2.66-2.65(2H，d，J＝5.2)，2.09(2H，s)，1.71-1.69(3H，d，J＝6.4Hz)，1.56-1.48(4H，m)，1.27-1.19(10H，m)
13C NMR(400MHz，MeOD)δ161.7，157.2，155.9，154.1，153.2，147.8，141.1，136.6，130.1，130.0，128.8，128.2，127.9，127.4，125.9，125.4，124.8，122.7，120.2，111.4，70.2，69.2，44.8，44.4，42.6，42.5，41.0，37.4，31.5，29.2，28.8，28.7，28.5，27.5，27.1，26.1，25.8，16.3
LCMS m/z(ES+)m/z＝281.7[M+2H]2+，562.3[M+H]+
生物试验
抗微生物敏感性测试
使用包括平底孔的无菌塑料微量滴定板。所述板包含抗真菌剂的系列稀释，分析培养基的体积为100μL/孔。两个不含药的培养基孔用作无菌和生长对照。除了无菌对照孔之外，托盘接种100μL/孔的最终接种物。每种药物的测试浓度范围是1.25-80μM。将微量滴定板置于37℃孵育24小时。24小时确定最小抑制浓度(MIC)，通过肉眼观察以及采用Varian1475型分光光度计在595nm处通过分光光度法测定浊度。
各个测试菌株如表1所示。
表1：生物试验中使用的菌株。
结果
生物试验的结果如表2所示，生物数据表示为MIC90，即对于每个属抑制至少90％的菌株生长所需的最小浓度。
表2：实施例16-23的抗真菌活性
a:在24小时肉眼观察并且分光光度计检测确定MIC90值。b:氟康唑
化合物16，17和18具有与大环核稠合的芳环，与具有酯部分的化合物19和20相比，化合物16，17和18的活性更高。值得注意的是，与大环核中具有较少原子的类似化合物相比，大环核具有15个原子的化合物18和20显示对白色念珠菌，吉利蒙念珠菌和近平滑念珠菌之一的活性最高。具体说，化合物18和20对吉利蒙念珠菌和克鲁斯念珠菌的活性比氟康唑更高。
突变菌株
分析化合物16-19对抗在ERG11，CDR1，CDR2，SNQ2和MDR1基因上带有突变的突变型白色念珠菌和光滑念珠菌菌株，这些突变体通过临床分离物获得并且已经在科学文献中有报道。ERG11基因编码细胞色素P450，导致针对阿唑类药物如伏立康唑和氟康唑的耐药性。CDR1和CDR2基因编码ATP结合盒(ABC)转运蛋白，其过度表达导致针对阿唑类的耐药性。MDR1基因编码主要协助蛋白超家族的膜转运蛋白，导致针对各种药物和毒性化合物的耐受性。SNQ2基因编码另一种ABC转运蛋白，导致针对阿唑类和非阿唑类药物的耐药性。
伏立康唑是一种针对氟康唑耐受菌株的阿唑类活性剂，用作参比化合物。数据如表3所示，MIC值(最小抑制浓度(MIC)是过夜孵育后抑制微生物可见生长的试剂的最低浓度)，针对每种菌株三次测量取平均。
表3：化合物16-19对白色念珠菌和光滑念珠菌氟康唑耐受株的抗真菌活性
a:24小时肉眼观察并且分光光度计检测确定MIC值。b:氟康唑，c:伏立康唑；括号内的数字代表基因上的突变数。
所有化合物16-19针对白色念珠菌和光滑念珠菌氟康唑耐受菌种均有活性。针对突变型菌株DSY289，DSY296和DSY775，化合物17比伏立康唑本身的活性更强。化合物18比氟康唑活性更强，但是活性一般不如化合物16和17和伏立康唑，只有DSY289菌株例外。
几丁质酶抑制实验
针对几丁质酶的GH18家族，即从绿色木霉(Trichoderma viride)提取的几丁质酶进行几丁质酶抑制试验。该酶与白色念珠菌的几丁质酶4相比高度相同，可以从西格玛-奥德里奇公司(目录编号:C8241)购得。来自绿色木霉的几丁质酶是细胞外几丁质酶的混合物，显示外切和内切几丁质酶活性。发现主要活性是N-乙酰基-β-葡萄糖胺酶的活性。
使用的底物是溶解在pH6.0的MES 50mM中的NP-GlcNAc(西格玛-奥德里奇公司，目录编号ID:N9376)；终浓度为250μM。将酶以0.11mg/ml的浓度重悬在pH 6.0的MES 50mM中，用pH 6.0的MES 50mM和BSA 20μg/ml稀释，终浓度73nM用于试验。以50mM在DMSO 100％中制备抑制剂的储备溶液。
在读数板中直接制备含有各种浓度的抑制剂和酶的混合物，室温下孵育20分钟或者3小时。孵育结束后，加入底物，记录一直到10分钟的最长时间的值进行记数。底物浓度通过读取300nm(εM 300:11100)的UV吸收进行测量，而水解产物在400nm(ΔεM 400:2120)测量。可计算IC50和Ki。
化合物17(一种对抗念珠菌最有效的化合物)的结果如表4所示。为了比较，发明人还测试了WO2009/113033中描述的化合物(参比化合物34-39)。
化合物34：1-(环丙基甲基)-3-[8-(4-亚氨基-2-氧代-1,3,5-三氮杂环十三-1-基)辛基]胍
化合物35：1-[(E)-丁-2-烯基]-3-[8-(4-亚氨基-2-氧代-1,3,5-三氮杂环十三-1-基)辛基]胍
化合物36：1-[(E)-丁-2-烯基]-3-[6-(4-亚氨基-2-氧代-1,3,5-三氮杂环十三-1-基)己基]胍
化合物37：1-[6-(4-亚氨基-2-氧代-1,3,5-三氮杂环十三-1-基)己基]-3-(2-甲基丙-1-烯基)胍
化合物38：1-乙基-3-[6-(4-亚氨基-2-氧代-1,3,5-三氮杂环十三-1-基)己基]胍
化合物39：1-[6-(4-亚氨基-2-氧代-1,3,5-三氮杂环十三-1-基)己基]-3-丙-2-炔基胍
表4：化合物17和现有技术化合物34-39对来自绿色木霉的几丁质酶的抑制试验
化合物17(带有与大环核稠合的芳环)是几丁质酶的活性抑制剂。该化合物的活性高于化合物34-39。值得注意的是，IC50值随时间变化降低，提示抑制剂的缓慢结合。
参考文献
1.Groll,A.H.；Lumb,J.,New developments in invasive fungal disease(侵入性真菌疾病的最新进展)。Future Microbiol.2012,7(2),179-84。
2.Mishra,N.N.；Prasad,T.；Sharma,N.；Payasi,A.；Prasad,R.；Gupta,D.K.；Singh,R.,Pathogenicity and drug resistance in Candida albicans and otheryeast species(白色念珠菌和其他酵母物种中的致病性和药物耐受性)。综述，ActaMicrobiol.Immunol.Hung.2007,54(3),201-35。
3.Casalinuovo,I.A.；Di Francesco,P.；Garaci,E.,Fluconazole resistancein Candida albicans:a review of mechanisms(白色念珠菌中的氟康唑耐受：对机制的综述).Eur.Rev.Med.Pharmacol.Sci.2004,8(2),69-77。
4.Manetti,F.；Castagnolo,D.；Raffi,F.；Zizzari,A.T.；Rajamaki,S.；D'Arezzo,S.；Visca,P.；Cona,A.；Fracasso,M.E.；Doria,D.；Posteraro,B.；Sanguinetti,M.；Fadda,G.；Botta,M.,Synthesis of new linear guanidines and macrocyclicamidinourea derivatives endowed with high antifungal activity against Candidaspp.and Aspergillus spp.(针对念珠菌属和曲霉属具有高的抗真菌活性的新的线性胍和大环脒脲衍生物的合成)J.Med.Chem.2009,52(23),7376-9。
5.Botta,M.；Raffi,F.；Visca,P.Linear and cyclic guanidine derivativesas antifungal agents and their method of preparation(作为抗真菌剂的线性和环状胍衍生物及其制备方法)。WO2009113033A2,2009。
6.Kuranda,M.J.；Robbins,P.W.,Chitinase is required for cell separationduring growth of Saccharomyces cerevisiae(酿酒酵母生长期间细胞分裂所需的几丁质酶)。J.Biol.Chem.1991,266(29),19758-67。
7.Sakuda,S.,Studies on the chitinase inhibitors,allosamidins(几丁质酶抑制剂阿洛氨菌素的研究)。In Chitin enzymology,Muzzarelli,R.A.A.,Ed.AtecEdizioni:1996；Vol.2,pp 203-212。
8.Takaya,N.；Yamazaki,D.；Horiuchi,H.；Ohta,A.；Takagi,M.,Cloning andcharacterization of a chitinase-encoding gene(chiA)from Aspergillus nidulans,disruption of which decreases germination frequency and hyphal growth(来自构巢曲霉的编码几丁质酶的基因(chiA)的克隆和表征，破坏它可降低萌发频率和菌丝生长)。Biosci.Biotechnol.Biochem.1998,62(1),60-5。
9.Zhu,Z.；Zheng,T.；Homer,R.J.；Kim,Y.-K.；Chen,N.Y.；Cohn,L.；Hamid,Q.；Elias,J.A.,Acidic Mammalian Chitinase in Asthmatic Th2 Inflammation and IL-13Pathway Activation(哮喘Th2炎症和IL-13途径激活中的酸性哺乳动物几丁质酶)。Science 2004,304(5677),1678-1682。
10.Boot等,Identification of a novel acidic mammalian chitinasedistinct from chitotriosidase(一种区别于壳三糖酶的新的酸性哺乳动物几丁质酶的鉴定)。J.Biol.Chem.2001,276,6770-8。
11.Hartl.D.；等,Acidic Mammalian Chitinase Regulates Epithelial CellApoptosis via a Chitinolytic-Independent Mechanism(酸性哺乳动物几丁质酶经几丁质酶无关机制调节上皮细胞凋亡)。J-Immunolol 2009；182:5098-5106。

Claims (38)

1.一种通式8的化合物或其药学上可接受的盐:
式中：
n1为0-4的数值；
n2为1-7的数值；
R1是H；直链或支链C1-C6烷基；炔丙基，环丙基甲基、丁-2-烯-1-基，γ-甲基烯丙基，β-甲基烯丙基，γ,γ-二甲基烯丙基，苄基，烯丙基，吡啶-基甲基；甲基氨甲酰基，乙基氨甲酰基，丙基氨甲酰基，或丙-2-烯基氨甲酰基；
R2是H或
R3是OH，硝基，NH2，NHR8，NR9R10，C1-C6烷基，COOH，CONH2，CONR11H，CONR12R13，氰基，F，Cl，Br；
其中R8，R9，R10，R11，R12，R13相同或各自独立地是C1-C6烷基，甲基环丙基或丙烷-2-基；
X是CH2或C(＝0)；
Y是CH2，
或X-Y是
其中，R4，R5，R6，R7相同或者各自独立地是H，OH，硝基，NH2，NHR14，NR15R16，C1-C6烷基，COOH，CONH2，CONR17H，CONR18R19，氰基，F，Cl，Br；
其中，R14，R15，R16，R17，R18，R19相同或者各自独立地是C1-C6烷基，甲基环丙基或丙烷-2-基；
Z是CH2，
2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，
n1，n2和R1参照权利要求1的定义；
R2是
R3参照权利要求1的定义；
X-Y是其中R4，R5，R6，R7参照权利要求1的定义；和
Z是CH2。
3.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，
n1，n2和R1参照权利要求1的定义；
R2是H；
X-Y是其中R4，R5，R6，R7参照权利要求1的定义；和
Z是
4.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，具有式8a
其中n1，n2，R1，X和Y参照权利要求1的定义。
5.如权利要求4所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，
X-Y是R4，R5，R6和R7＝H。
6.如权利要求4所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，X是C(＝0)，Y是CH2。
7.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物选自：
8.如上述权利要求中任一项所述的化合物，其特征在于，所述化合物可用于医学应用。
9.如上述权利要求中任一项所述的化合物，所述化合物用作几丁质酶抑制剂。
10.如权利要求9所述的化合物，其中，几丁质酶属于几丁质酶的糖苷水解GH18家族。
11.如上述权利要求中任一项所述的化合物，所述化合物用于治疗和/或预防真菌感染。
12.如权利要求11所述的化合物，其中，所述真菌感染是念珠菌属的。
13.如权利要求12所述的化合物，其中，所述念珠菌属选自：白色念珠菌，吉利蒙念珠菌，克鲁斯念珠菌，近平滑念珠菌，热带念珠菌，乳酒念珠菌或光滑念珠菌。
14.如权利要求12或13所述的化合物，其中，所述念珠菌属是耐药的。
15.如权利要求14所述的化合物，其中，所述念珠菌属耐受氟康唑和/或伏立康唑。
16.如权利要求1-10中任一项所述的化合物，用于治疗和/或预防IL-13和/或Th-2-介导的疾病。
17.如权利要求16所述的化合物，其中，所述IL-13和/或Th-2-介导的疾病是Th-2-介导的炎症。
18.如权利要求16所述的化合物，其中，所述IL-13和/或Th-2-介导的疾病是过敏性气道疾病。
19.如权利要求18所述的化合物，其中，所述过敏性气道疾病是哮喘。
20.一种药物组合物，其包含至少一种如权利要求1-18中任一项所述的化合物和适当的赋形剂或稀释剂。
21.如权利要求20所述的药物组合物，还包含至少一种选自以下的治疗剂：抗真菌剂，消炎剂。
22.如权利要求21所述的药物组合物，所述组合物还包含选自以下的抗真菌剂：唑类抗真菌剂，大环内酯类抗真菌剂，多烯类抗真菌剂，咪唑，三唑和噻唑类抗真菌剂，丙烯胺类；棘白菌素类和其他抗真菌剂。
23.如权利要求22所述的药物组合物，其特征在于，所述唑类抗真菌剂选自：氟康唑，伏立康唑。
24.如权利要求22所述的药物组合物，其特征在于，所述大环内酯类抗真菌剂是两性霉素。
25.如权利要求22所述的药物组合物，其特征在于，所述多烯类抗真菌剂选自：两性霉素B，克念菌素，非律平，哈霉素，纳他霉素，制霉菌素，龟裂杀菌素。
26.如权利要求22所述的药物组合物，其特征在于，所述咪唑类抗真菌剂选自：氯三苯甲咪唑(克霉唑)，联苯苄唑，布康唑，克霉唑，益康唑，芬替康唑，异康唑，酮康唑，卢立康唑，咪康唑，奥莫康唑，奥昔康唑，舍他康唑，硫康唑，噻康唑。
27.如权利要求22所述的药物组合物，其特征在于，所述三唑类抗真菌剂选自：阿巴康唑，氟康唑，艾沙康唑，伊曲康唑，泊沙康唑，雷夫康唑，特康唑，伏立康唑。
28.如权利要求22所述的药物组合物，其特征在于，所述噻唑类抗真菌剂是阿巴芬净。
29.如权利要求22所述的药物组合物，其特征在于，所述丙烯胺类抗真菌剂选自：阿莫罗芬，布替萘芬，萘替芳，特比萘芬。
30.如权利要求22所述的药物组合物，其特征在于，所述棘白菌素类抗真菌剂选自：阿尼芬净，卡泊芬净，米卡芬净。
31.如权利要求22所述的药物组合物，其特征在于，所述其他抗真菌剂选自：苯甲酸；环吡酮；氟胞嘧啶；灰黄霉素；卤普罗近；托萘酯；十一烯酸；结晶紫或秘鲁香脂。
32.式4的中间体:
其中，X、Y、Z、R2、n1和n2的定义如权利要求1所述。
33.一种制备如权利要求1所述的式8的化合物的方法，该方法包括以下步骤：
试剂和条件：(i)烯丙基NH2,EDC,HOBt,DIPEA,DMF(ii)DIBAL-H,DCM,室温(iii)THF,回流,12h(iv)Grubbs第二代催化剂,甲苯或DCM 2-10mM,40-80℃(v)H2,Pd/C,EtOH(vi)R1NBoc(C＝NBoc)SMe,THF,回流,12h,其中n1,n2,R1,R2,X,Y和Z参照权利要求1的定义。
34.治疗有效量的如权利要求1-10中任一项所述的化合物在制备用于在需要的哺乳动物中抑制几丁质酶的药物中的应用。
35.治疗有效量的如权利要求1-10中任一项所述的化合物在制备用于在需要的哺乳动物中抑制真菌感染的药物中的应用。
36.如权利要求35所述的应用，其中，所述真菌感染是念珠菌属的。
37.治疗有效量的如权利要求1-10中任一项所述的化合物在制备用于在需要的哺乳动物中治疗IL-13和/或Th-2介导的疾病的药物中的应用。
38.如权利要求3所述的应用，其中，所述IL-13和/或Th-2-介导的疾病是哮喘。
CN201480045663.3A 2013-06-18 2014-06-18 大环脒基脲衍生物，其制备方法及其作为几丁质酶抑制剂的应用 Expired - Fee Related CN105612147B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361836401P 2013-06-18 2013-06-18
US61/836,401 2013-06-18
PCT/EP2014/062896 WO2014202697A1 (en) 2013-06-18 2014-06-18 New macrocyclic amidinourea derivatives, methods of preparation and uses thereof as chitinase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105612147A CN105612147A (zh) 2016-05-25
CN105612147B true CN105612147B (zh) 2018-06-05

Family

ID=50979767

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201480045663.3A Expired - Fee Related CN105612147B (zh) 2013-06-18 2014-06-18 大环脒基脲衍生物，其制备方法及其作为几丁质酶抑制剂的应用

Country Status (10)

Country Link
US (1) US10071975B2 (zh)
EP (1) EP3010896B1 (zh)
JP (1) JP6586416B2 (zh)
CN (1) CN105612147B (zh)
AU (1) AU2014283281C1 (zh)
BR (1) BR112015031820A2 (zh)
CA (1) CA2915767A1 (zh)
MX (1) MX363622B (zh)
PT (1) PT3010896T (zh)
WO (1) WO2014202697A1 (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9135200B2 (en) 2013-06-28 2015-09-15 Futurewei Technologies, Inc. System and method for extended peripheral component interconnect express fabrics
EP3854789A1 (en) 2020-01-22 2021-07-28 Cygnet Biosciences B.V. Macrocyclic compounds useful as chitinase inhibitors
CN113773233B (zh) * 2021-09-18 2022-05-06 中国农业大学 一种甲基胍基脲衍生物及其制备方法与应用
CN115754090B (zh) * 2022-12-15 2023-08-29 华夏生生药业(北京)有限公司 一种lc-ms检测氟康唑相关杂质的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3499927A (en) * 1964-08-24 1970-03-10 Evans Medical Ltd Guanidino derivatives of polyalkylene polyamines
WO2009113033A2 (en) * 2008-03-13 2009-09-17 Università Degli Studi Di Siena Linear and cyclic guanidine derivatives, method of preparation and uses thereof

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3499927A (en) * 1964-08-24 1970-03-10 Evans Medical Ltd Guanidino derivatives of polyalkylene polyamines
WO2009113033A2 (en) * 2008-03-13 2009-09-17 Università Degli Studi Di Siena Linear and cyclic guanidine derivatives, method of preparation and uses thereof

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Novel Macrocyclic Amidinoureas: Potent Non-Azole Antifungals,Active against Wild-Type and Resistant Candida Species,;Maurizio Sanguinetti et al;《ACS Med. Chem. Lett.》;20130722;第4卷;第852-857页 *
Synthesis of New Linear Guanidines and Macrocyclic Amidinourea Derivatives Endowed with High Antifungal Activity against Candida spp. and Aspergillus spp.;Fabrizio Manetti et al;《Journal of Medicinal Chemistry》;20090803;第52卷(第23期);第7376-7379页 *

Also Published As

Publication number Publication date
AU2014283281A1 (en) 2016-02-04
US10071975B2 (en) 2018-09-11
PT3010896T (pt) 2018-03-07
MX2015017446A (es) 2016-08-12
JP2016522236A (ja) 2016-07-28
JP6586416B2 (ja) 2019-10-02
EP3010896B1 (en) 2017-11-01
WO2014202697A1 (en) 2014-12-24
BR112015031820A2 (pt) 2017-07-25
CN105612147A (zh) 2016-05-25
US20160137617A1 (en) 2016-05-19
CA2915767A1 (en) 2014-12-24
MX363622B (es) 2019-03-28
AU2014283281B2 (en) 2018-10-04
AU2014283281C1 (en) 2019-01-24
EP3010896A1 (en) 2016-04-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104520309B (zh) 抗真菌抗生素两性霉素b的n-取代第二代衍生物及其制备方法和应用
CN105612147B (zh) 大环脒基脲衍生物，其制备方法及其作为几丁质酶抑制剂的应用
EP3283171B1 (en) Derivatives of amphotericin b
EP3544606B1 (en) Psychotropic agents and uses thereof
WO2017100171A1 (en) Antifungal compounds and methods
AU2020325163A1 (en) Hybrid amide derivatives of amphotericin B
WO2024020409A1 (en) Therapeutic compounds, formulations, and use thereof
CA2731696C (en) Antifungal agents
US20100069443A1 (en) Compound with benzamide skeleton having cyclooxygenase-1 (cox-1)-selective inhibitory activity
EP3431478B1 (en) Micromolecular lung-targeting drug
CN112194629B (zh) 苯乙唑类衍生物及其制备方法和用途
CN112142673B (zh) 芳基烯烃唑类衍生物及其制备方法和用途
PL196889B1 (pl) Pochodne echinokandyny, sposób wytwarzania pochodnej echinokandyny, jej zastosowanie jako substancji przeciwgrzybicznej oraz zawierająca ją kompozycja farmaceutyczna
CN109485607B (zh) β-唑类-苯基酮衍生物及其用途
LU505117B1 (en) A pan-KRAS inhibitor compound
Balestri SYNTHESIS OF ANTIFUNGAL COMPOUNDS
JP7046344B2 (ja) 抗真菌薬に対する活性増強作用を有する新規環状ペプチド化合物及びその製造方法
JP2024520500A (ja) アニデュラファンギン誘導体の調製方法
US20220363683A1 (en) Compounds active towards nuclear receptors
WO2018106571A1 (en) Antifungal compounds and methods
CN115784993A (zh) 一种3-氨基吲唑类化合物的制备及其治疗帕金森病的应用
CN113185492A (zh) 一种新型四氢苯并噻吩-2-尿素衍生物的合成及其用途

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20180605

Termination date: 20200618

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee