CN105541861A - 精制银杏内酯提取工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种精制银杏内酯提取工艺，其包括如下步骤：(1)将原料银杏叶提取物溶解到水中，离心分离，收集滤液，将滤渣用磷酸氢二钠溶液进行溶解，离心并收集滤液；(2)将合并后的滤液进行萃取，蒸发酯相并收集固态目标产物；(3)将步骤(2)中固态目标产物溶解在水中，煮沸，离心，取上清液，洗涤上清液，浓缩；(4)将步骤(3)中得到的银杏内酯粗提物溶于60％的乙醇溶液，径进行结晶，重结晶，陈化，冷冻干燥后得到精制银杏内酯；通过以上工艺过程能够将银杏叶中银杏内酯最大限度的提取出来，并且该提取工艺操作简单，成本低廉，适用于推广使用。
Description
技术领域
本发明涉及一种精制银杏内酯提取工艺。
背景技术
银杏，又名白果树、公孙树,是我国特有树种。银杏的叶、果、树皮均可入药,尤以叶的药用价值最高。银杏叶的化学成分较为复杂，其提取物中主要含有黄酮类化合物和银杏内酯，目前已分离出6种萜内酯，统称为银杏内酯。银杏叶萜内酯为二萜和倍半萜类化合物，其具有极高的药用价值。怎样能够提高其提取率，降低提取成本，一直是众多科研机构所关注并尚未解决技术难题。
发明内容
本发明要解决的技术问题是，针对现有技术不足，提供一种精制银杏内酯提取工艺，其提取效率高，成本低。
为了达到以上发明目的，本发明采用如下技术方案：
一种精制银杏内酯提取工艺，其包括如下步骤：
(1)将原料银杏叶提取物中加入30℃～75℃的水并溶解，，形成银杏叶提取物溶液；
将银杏叶提取物溶液进行离心分离，收集滤液；将滤渣用0.1％～0.15％磷酸氢二钠溶液在55℃～60℃下溶解，离心并收集滤液；
合并上述滤液；
(2)将步骤(1)中合并后的滤液pH调整至4.5～5.0；
向调整好pH的滤液中加入等体积的萃取剂进行萃取，取酯相，蒸发酯相并收集固态目标产物；
所述萃取剂为乙酸乙酯与石油醚混合溶液或乙酸乙酯与正庚烷混合溶液；
所述乙酸乙酯与石油醚的体积比或乙酸乙酯与正庚烷的体积比为3:1～6:1；
(3)将步骤(2)中固态目标产物溶解在水中，煮沸，进行离心分离，取上清液；
所述固态目标产物与水的质量体积浓度为50g/L；
将所述上清液用等体积乙酸乙酯进行萃取，取酯相；
将所述酯相依次使用水和饱和氯化钠溶液进行洗涤；
将洗涤后的酯相进行浓缩；
将所述浓缩后的有效成分进行冷冻干燥，得到银杏内酯粗提物；
(4)将步骤(3)中得到的银杏内酯粗提物溶于60％的乙醇溶液，再进行结晶，重结晶，得到固液混合物；
将所述固液混合物在4℃下陈化12h；
将所述陈化后的固液混合物去除母液，将固相进行冷冻干燥，得到精制银杏内酯。
作为优选的，所述步骤(1)中银杏叶提取物与水的质量体积浓度为50g/L～40g/L。
作为优选的，所述滤渣用0.1％磷酸氢二钠溶液在55℃下溶解。
作为优选的，所述乙酸乙酯与石油醚的体积比或乙酸乙酯与正庚烷的体积比为4:1。
作为优选的，所述步骤(4)中银杏内酯粗提物与60％乙醇溶液的质量体积浓度为100g/L～166.67g/L。
作为优选的，所述步银杏内酯粗提物与60％乙醇溶液的质量体积浓度为125g/L。
作为优选的，所述步骤(1)中所述银杏叶提取物在水中超声溶解时间为2min～3min，所述滤渣用在磷酸氢二钠溶液中溶解时间为15min-18min。
作为优选的，所述结晶，重结晶包括如下步骤，银杏内酯粗提物加入60％的乙醇溶液，60℃-70℃水浴加热至完全溶解；
然后将温度缓慢减低到室温20℃；
再重复加热、放冷，使结晶生长；
最后放置在4℃冰箱陈化12h～18h。
作为优选的，所述步骤(2)中调整pH的试剂为稀磷酸和氢氧化钠。
本发明包括如下步骤：
(1)将原料银杏叶提取物中加入30℃～75℃的水，超声波震荡溶解，形成银杏叶提取物溶液；
将银杏叶提取物溶液进行离心分离，收集滤液；将滤渣用0.1％～0.15％磷酸氢二钠溶液在55℃～60℃下超声溶解，离心并收集滤液；
合并上述滤液；
(2)将步骤(1)中合并后的滤液用稀磷酸和氢氧化钠溶液调整pH至4.5～5.0；
向调整好pH的滤液中加入等体积的萃取剂进行萃取，取酯相，蒸发酯相并收集固态目标产物；
所述萃取剂为乙酸乙酯与石油醚混合溶液或乙酸乙酯与正庚烷混合溶液；
所述乙酸乙酯与石油醚的体积比或乙酸乙酯与正庚烷的体积比为3:1～6:1；
(3)将步骤(2)中固态目标产物溶于水中，煮沸1h，进行离心分离，取上清液；
将所述上清液用等体积乙酸乙酯进行萃取，取酯相；
将所述酯相依次使用水和饱和氯化钠溶液进行洗涤；
将洗涤后的酯相进行浓缩；
将所述浓缩后的有效成分进行冷冻干燥，得到银杏内酯粗提物；
(4)将步骤(3)中得到的银杏内酯粗提物溶于乙醇溶液中，再进行结晶，重结晶，得到固液混合物；
将所述固液混合物在4℃下陈化12h；
将所述陈化后的固液混合物去除母液，将固相进行冷冻干燥，得到精制银杏内酯。
通过以上工艺过程能够将银杏叶中银杏内酯最大限度的提取出来，并且该提取工艺操作简单，成本低廉，适用于推广使用。
具体实施方式
本发明实施例公开了一种精制银杏内酯提取工艺。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的产品已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的产品
和方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
一种精制银杏内酯提取工艺，其包括如下步骤：
(1)将1g原料银杏叶提取物中加入55℃的水20mL，即原料银杏叶提取物质量与水的体积的质量体积浓度(w/v)为50g/L，超声波震荡溶解2min～3min，形成银杏叶提取物溶液；
将银杏叶提取物溶液进行离心分离，收集滤液；将滤渣用0.1％磷酸氢二钠溶液在55℃下超声溶解15～18min，离心并收集滤液；
合并上述滤液；
(2)将步骤(1)中合并后的滤液用稀磷酸和氢氧化钠溶液调整pH至4.5～5.0；(调整pH的试剂组合可以更换为稀盐酸和氢氧化钠组合)
向调整好pH的滤液中加入等体积的萃取剂进行萃取，萃取三次，分别取酯相，合并酯相，蒸发合并后的酯相并收集固态目标产物；
所述萃取剂为乙酸乙酯与石油醚混合溶液，所述乙酸乙酯与石油醚的体积比4:1；
(3)将步骤(2)中固态目标产物溶解在水中，煮沸1h，进行离心分离，取上清液；所述固态目标产物与水的质量体积浓度为50g/L；
将所述上清液用等体积乙酸乙酯进行萃取三次，分别取酯相，合并所得酯相；
将所述合并后的酯相依次使用水和饱和氯化钠溶液进行洗涤一次；
将洗涤后的酯相进行浓缩；
将所述浓缩后的有效成分进行冷冻干燥，得到银杏内酯粗提物；
经过不断的优化工艺证明，使用水和饱和氯化钠溶液进行洗涤可以将酯相回收固体中残存的黄酮类、原花青素等多元酚类水溶性成分进一步转入水溶液中，使酯相中更进一步只剩余内酯；
(4)将步骤(3)中得到的银杏内酯粗提物溶于60％的乙醇溶液中，在60℃-70℃水浴下加热至完全溶解，然后温度缓慢减低到室温(20℃)，再重复加热、放冷，使结晶生长，最后放置在4℃冰箱陈化12h；将所述陈化后的固液混合物去除母液，将固相进行冷冻干燥，得到精制银杏内酯；所述银杏内酯粗提物与60％的乙醇溶液的物质体积浓度(w/v)为166.67，即向银杏内酯粗提物中加入6倍体积(w/v)的60％乙醇溶液。实施例2
一种精制银杏内酯提取工艺，其包括如下步骤：
(1)将1g原料银杏叶提取物中加入30℃的水20mL，即原料银杏叶提取物与水的质量体积浓度(w/v)为50g/L，超声波震荡溶解2min～3min，形成银杏叶提取物溶液；
将银杏叶提取物溶液进行离心分离，收集滤液；将滤渣用0.15％磷酸氢二钠溶液在55℃下超声溶解15min～18min，离心并收集滤液；
合并上述滤液；
(2)将步骤(1)中合并后的滤液用稀磷酸和氢氧化钠溶液调整pH至4.5～5.0；(调整pH的试剂组合可以更换为稀盐酸和氢氧化钠组合)
向调整好pH的滤液中加入等体积的萃取剂进行萃取，萃取三次，分别取酯相，合并酯相，蒸发合并后的酯相并收集固态目标产物；
所述萃取剂为乙酸乙酯与石油醚混合溶液，所述乙酸乙酯与石油醚的体积比3:1；
(3)将步骤(2)中固态目标产物水中，煮沸1h，进行离心分离，取上清液；所述固态目标产物与水的质量体积浓度为50g/L；
将所述上清液用等体积乙酸乙酯进行萃取三次，分别取酯相，合并所得酯相；
将所述合并后的酯相依次使用水和饱和氯化钠溶液进行洗涤；
将洗涤后的酯相进行浓缩；
将所述浓缩后的有效成分进行冷冻干燥，得到银杏内酯粗提物；
经过不断的优化工艺证明，使用水和饱和氯化钠溶液进行洗涤可以将酯相回收固体中残存的黄酮类、原花青素等多元酚类水溶性成分进一步转入水溶液中，使酯相中更进一步只剩余内酯；
(4)将步骤(3)中得到的银杏内酯粗提物溶于60％的乙醇溶液中，在60℃-70℃水浴下加热至完全溶解，然后温度缓慢减低到室温(20℃)，再重复加热、放冷，使结晶生长，最后放置在4℃冰箱陈化18h；将所述陈化后的固液混合物去除母液，将固相进行冷冻干燥，得到精制银杏内酯；所述银杏内酯粗提物与60％的乙醇溶液的质量体积浓度为100g/L,即向银杏内酯粗提物中加入10倍体积(w/v)的60％乙醇溶液。
实施例3
一种精制银杏内酯提取工艺，其包括如下步骤：
(1)将1g原料银杏叶提取物中加入75℃的水20mL，即原料银杏叶提取物与水的质量体积浓度(w/v)为50g/L，超声波震荡溶解2min～3min，形成银杏叶提取物溶液；
将银杏叶提取物溶液进行离心分离，收集滤液；将滤渣用0.15％磷酸氢二钠溶液在60℃下超声溶解15～18min，离心并收集滤液；
合并上述滤液；
(2)将步骤(1)中合并后的滤液用稀磷酸和氢氧化钠溶液调整pH至4.5～5.0；(调整pH的试剂组合可以更换为稀盐酸和氢氧化钠组合)
向调整好pH的滤液中加入等体积的萃取剂进行萃取，萃取三次，分别取酯相，合并酯相，蒸发合并后的酯相并收集固态目标产物；
所述萃取剂位乙酸乙酯与石油醚混合溶液，所述乙酸乙酯与石油醚的体积比6:1；
(3)将步骤(2)中固态目标产物水中，煮沸1h，进行离心分离，取上清液；所述固态目标产物与水的质量体积浓度为50g/L；
将所述上清液用等体积乙酸乙酯进行萃取三次，分别取酯相，合并所得酯相；
将所述合并后的酯相依次使用水和饱和氯化钠溶液进行洗涤；
将洗涤后的酯相进行浓缩；
将所述浓缩后的有效成分进行冷冻干燥，得到银杏内酯粗提物；
经过不断的优化工艺证明，使用水和饱和氯化钠溶液进行洗涤可以将酯相回收固体中残存的黄酮类、原花青素等多元酚类水溶性成分进一步转入水溶液中，使酯相中更进一步只剩余内酯；
(4)将步骤(3)中得到的银杏内酯粗提物溶于60％的乙醇溶液中，在60℃-70℃水浴下加热至完全溶解，然后温度缓慢减低到室温(20℃)，再重复加热、放冷，使结晶生长，最后放置在4℃冰箱陈化18h；将所述陈化后的固液混合物去除母液，将固相进行冷冻干燥，得到精制银杏内酯；所述银杏内酯粗提物与60％的乙醇溶液的质量体积浓度为100g/L,即向银杏内酯粗提物中加入10倍体积(w/v)的60％乙醇溶液。
实施例4
本实施例为对照例，其于实施例1～3的不同之处在于步骤(2)中所述萃取剂为乙酸乙酯与正庚烷混混合溶剂。
实施例5
本实施例为对照例，其余实施例1～3的不同之处在于所述步骤(1)中加入银杏叶提取物1g，加入水25mg，即银杏叶提取物的质量与水的体积之间的质量体积浓度为40g/L。
为了提高提取效率，减少杂质干扰以上实施例中溶解银杏叶提取物的水均为注射用水。
以上实施例中所用到的“银杏叶提取物”为符合国家标准的原料，其有效成分含量：银杏黄酮(参照国家相关标准方法分析，以槲皮素、山奈酚以及异鼠李素为对照品计算)，含量不低于24％；银杏内酯(以银杏内酯A、B、C以及白果内酯总量计算)，含量不低于6％。银杏酸的含量不超过国家标准。
依照药典测定实施例1～5最终产品中的平均银杏内酯含量，结果表明其平均含量均高于国家标准6％，并且银杏内酯中各有效成分的含量合理，其药用效果优于市场上同类别产品。
以下为实施例1～5的检测结果：
表1各实施例内酯粗提物中内酯含量
表2各实施例最终产品中内酯含量
实施例4与实施例5中各检测结果中个数据与所对比的实施例的相对应的数据相差均在0.01％～0.05之间，符合实验误差率，证明将可将萃取剂替换为乙酸乙酯与正庚烷混混合溶剂或将银杏叶提取物的质量与水的体积之间的质量体积浓度替换为为40g/L。
通过上表可明显看出，实施例1所制得产品中的银杏内酯含量高于其它实施例，其中各个有效组分的含量均衡合理，产品品质高。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (7)
1.一种精制银杏内酯提取工艺，其特征在于其包括如下步骤：
(1)将原料银杏叶提取物中加入30℃～75℃的水并溶解，形成银杏叶提取物溶液；
将银杏叶提取物溶液进行离心分离，收集滤液；将滤渣用0.1％～0.15％磷酸氢二钠溶液在55℃～60℃下溶解，离心并收集滤液；
合并上述滤液；
(2)将步骤(1)中合并后的滤液pH调整至4.5～5.0；
向调整好pH的滤液中加入等体积的萃取剂进行萃取，取酯相，蒸发酯相并收集固态目标产物；
所述萃取剂为乙酸乙酯与石油醚混合溶液或乙酸乙酯与正庚烷混合溶液；
所述乙酸乙酯与石油醚的体积比或乙酸乙酯与正庚烷的体积比为3:1～6:1；
(3)将步骤(2)中固态目标产物溶解在水中，煮沸，进行离心分离，取上清液；
所述固态目标产物与水的质量体积浓度为50g/L；
将所述上清液用等体积乙酸乙酯进行萃取，取酯相；
将所述酯相依次使用水和饱和氯化钠溶液进行洗涤；
将洗涤后的酯相进行浓缩；
将所述浓缩后的有效成分进行冷冻干燥，得到银杏内酯粗提物；
(4)将步骤(3)中得到的银杏内酯粗提物溶于60％的乙醇溶液，再进行结晶，重结晶，得到固液混合物；
将所述固液混合物在4℃下陈化12h；
将所述陈化后的固液混合物去除母液，将固相进行冷冻干燥，得到精制银杏内酯。
2.根据权利要求1所述的精制银杏内酯提取工艺，其特征在于所述步骤(1)中银杏叶提取物与水的质量体积浓度为50g/L～40g/L。
3.根据权利要求1或2所述的精制银杏内酯提取工艺，其特征在于所述滤渣用0.1％磷酸氢二钠溶液在55℃下溶解。
4.根据权利要求1或2所述的精制银杏内酯提取工艺，其特征在于所述乙酸乙酯与石油醚的体积比或乙酸乙酯与正庚烷的体积比为4:1。
5.根据权利要求1或2所述的精制银杏内酯提取工艺，其特征在于所述步骤(4)中银杏内酯粗提物与60％乙醇溶液的质量体积浓度为100g/L～166.67g/L。
6.根据权利要求(5)所述的精制银杏内酯提取工艺，其特征在于所述步银杏内酯粗提物与60％乙醇溶液的质量体积浓度为125g/L。
7.根据权利要求1或2所述的精制银杏内酯提取工艺，其特征在于所述步骤(1)中所述银杏叶提取物在水中超声溶解时间为2min～3min，所述滤渣用在磷酸氢二钠溶液中溶解时间为15min-18m。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20160504 |