CN105505601A - 一种用于病理细胞制片技术的清洗液及其使用方法 - Google Patents

一种用于病理细胞制片技术的清洗液及其使用方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种用于病理细胞制片技术的清洗液，其特征在于:按质量百分比包含：粘着剂0.01%-0.50%，固定剂10%-60%，活性剂0.10%-1.5%，余量为超纯水。本发明还包括上述用于病理细胞制片技术的清洗液的使用方法。本发明所述的用于病理细胞制片技术的清洗液用于处理液基细胞片，具有镜下背景清洁度极佳，不会发生细胞脱落等优点；处理后的细胞片，均能达到均匀一致，颜色清晰、背景干净、无非特异性染色、零脱片率的效果。

Description

一种用于病理细胞制片技术的清洗液及其使用方法
技术领域
本发明涉及体外诊断领域，特别涉及一种具有清洗病理细胞片及防止因染色导致脱片的病理制片用清洗液及其使用方法。
背景技术
病理细胞制片技术是病理诊断学不可分割的一部分，制片技术的优劣直接影响病理医师能否做出正确的病理诊断。
第三代细胞学制片技术—液基沉降制片，2001年底进入中国市场，因其与传统的巴氏涂片检查相比，明显提高了标本的满意度及异常细胞检出率，解决了传统刮片假阴性率高、丢失细胞率高（80%）和涂片质量差，过多粘液、血液或炎细胞等技术难题，为脱落细胞学诊断做出了重大贡献，也使得该项技术迅速发展，正逐步占领中国市场。
然而，随着病理技术的不断发展，病理细胞制片技术运用范围越来越广。尤其是近年来快速发展的免疫细胞化学、原位杂交、DNA倍体分析技术等，伴随而来的却是液基细胞学片在后续处理过程中，因细胞片要经历各种各样的处理。如免疫细胞化学、原位杂交需对细胞片进行酶解、各种有机反应；DNA倍体分析所用的Feulgen染色则可能对细胞片进行高温、微波辐射、强酸处理。虽然有防脱载玻片提前预防，但不时仍有细胞从载玻片上脱落。同时，病理医师对制片效果的期望愈来愈高，不仅对细胞片的脱落率有着严格的控制，而且对制片后的镜下背景要求更高。因此，现有的技术问题已严重制约上述技术的推广和运用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对上述病理细胞制片技术现状提供一种具有清洗病理细胞片及防止因后续处理导致脱片的病理制片用清洗液。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种用于病理细胞制片技术的清洗液，其特征在于，按质量百分比包含：
粘着剂0.01%-0.50%；
固定剂10%-60%；
活性剂0.10%-1.5%；
余量为超纯水。
优选的，所述的粘着剂为阿拉伯胶、卡拉胶、明胶中的一种。
优选的，所述的固定剂为乙醇、甲醇、丙二醇或异丙醇中的一种或多种。
优选的，所述的活性剂为十二烷基苯磺酸钠、苯扎氯铵、十二烷基乙氧基磺基甜菜碱、聚山梨酯、山梨坦单月桂酸酯中的一种。
本发明还包括上述用于病理细胞制片技术的清洗液的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：将上述清洗液往液基细胞片上冲洗三次，每次1-2ml；
步骤2：第三次冲洗后静置1min，再倒弃清洗液残液；
步骤3：将经过清洗液冲洗的液基细胞片放入95%乙醇固定或直接晾干后备用。
优选的，步骤1中清洗液用量的优选1ml。
采用上述方案后，本发明所述的用于病理细胞制片技术的清洗液用于细胞制片清洗，具有以下优点：
1)采用全新细胞包裹技术，确保对粘液、蛋白类物质进行全方位、无死角软化处理，将粘液等蛋白类物质从细胞表面洗脱下来，有效去除非诊断成分的干扰，从而得到优质的细胞涂片；
2)在制片过程中，活性剂以减弱杂质与玻片基材表面的粘附作用，并施以机械力晃动，使杂质与玻片基材表面分离而悬浮于液体介质中，最后将杂质从玻片表面冲洗清除，液基细胞片均匀一致，颜色清晰、背景干净、无非特异性染色；
3)独特的引入防脱片技术，通过粘着剂表面的物理化学特性，粘着剂被细胞及玻片吸附，与细胞、玻片形成稳定的结合键，改善细胞与玻片的粘合力，使脱片率降至零；
4)加入适量的固定剂，防止细胞在干燥中发生溶胀、破裂等；
5)节省了病理医师阅片的时间，降低了误诊率，提高工作效率；
6)清洗液具有环保、高效、成本低廉等优点；
7)不仅适用于液基细胞学，也适用巴氏刮片和组织切片的清洗和防脱片，用于液基手工涂片，具有均匀分散细胞的特点。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明做进一步说明。
实施例1
按下表称量或量取各组分，配制成100g溶液；
卡拉胶0.100g
乙醇50g
聚山梨酯1.000g
超纯水补足100g
各组分混合后搅拌溶解，备用；
液基制备细胞片200张，将上述清洗液往液基细胞片上冲洗三次，每次1ml；第三次冲洗后静置1min，再倒弃清洗液残液；将经过清洗液冲洗的液基细胞片一半放入95%乙醇固定，一半直接晾干；采用Feulgen染色等方法处理，结果表明各种处理方法细胞脱片率均为0%；镜下玻片背景清洁度优良，细胞少重叠。
实施例2
按下表称量或量取各组分，配制成100g溶液，
阿拉伯胶0.160g
乙醇20g
甲醇10g
十二烷基苯磺酸钠0.100g
超纯水补足100g
各组分混合后搅拌溶解，备用；
液基制备细胞片200张，将上述清洗液往液基细胞片上冲洗三次，每次1ml；第三次冲洗后静置1min，再倒弃清洗液残液；将经过清洗液冲洗的液基细胞片一半放入95%乙醇固定，一半直接晾干；采用Feulgen染色等方法处理，结果表明各种处理方法细胞脱片率均为0%；镜下玻片背景清洁度优良，细胞少重叠。
实施例3
按下表称量或量取各组分，配制成100g溶液，
明胶0.100g
乙醇40g
聚山梨酯0.100g
超纯水补足100g
各组分混合后搅拌溶解，备用；
液基制备细胞片200张，将上述清洗液往液基细胞片上冲洗三次，每次1ml；第三次冲洗后静置1min，再倒弃清洗液残液；将经过清洗液冲洗的液基细胞片一半放入95%乙醇固定，一半直接晾干；采用Feulgen染色等方法处理，结果表明各种处理方法细胞脱片率均为0%；镜下玻片背景清洁度优良，细胞少重叠。
实施例4
按下表称量或量取各组分，配制成100g溶液，
卡拉胶0.160g
乙醇30g
异丙醇20g
十二烷基乙氧基磺基甜菜碱1.5g
超纯水补足100g
各组分混合后搅拌溶解，备用；
液基制备细胞片200张，将上述清洗液往液基细胞片上冲洗三次，每次1ml；第三次冲洗后静置1min，再倒弃清洗液残液；将经过清洗液冲洗的液基细胞片一半放入95%乙醇固定，一半直接晾干；采用Feulgen染色等方法处理，结果表明各种处理方法细胞脱片率均为0%；镜下玻片背景清洁度优良，细胞少重叠。
实施例5
按下表称量或量取各组分，配制成100g溶液，
阿拉伯胶0.500g
甲醇10g
丙二醇10g
山梨坦单月桂酸酯1g
超纯水补足100g
各组分混合后搅拌溶解，备用；
液基制备细胞片200张，将上述清洗液往液基细胞片上冲洗三次，每次1ml；第三次冲洗后静置1min，再倒弃清洗液残液；将经过清洗液冲洗的液基细胞片一半放入95%乙醇固定，一半直接晾干；采用Feulgen染色等方法处理，结果表明各种处理方法细胞脱片率均为0%；镜下玻片背景清洁度优良，细胞少重叠。
实施例6
按下表称量或量取各组分，配制成100g溶液，
明胶0.020g
乙醇25g
丙二醇10g
聚山梨酯1.500g
超纯水补足100g
各组分混合后搅拌溶解，备用；
液基制备细胞片200张，将上述清洗液往液基细胞片上冲洗三次，每次1ml；第三次冲洗后静置1min，再倒弃清洗液残液；将经过清洗液冲洗的液基细胞片一半放入95%乙醇固定，一半直接晾干；采用Feulgen染色等方法处理，结果表明各种处理方法细胞脱片率均为0%；镜下玻片背景清洁度优良，细胞少重叠。
综上所述，利用本发明所述的清洗液处理的液基细胞片，镜下背景清洁度极佳，不会发生细胞脱落，表明该发明处理后的细胞片，均能达到均匀一致，颜色清晰、背景干净、无非特异性染色、零脱片率的效果。
尽管结合优选实施方案具体展示和介绍了本发明，但所属领域的技术人员应该明白，在不脱离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围内，在形式上和细节上对本发明做出各种变化，均为本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种用于病理细胞制片技术的清洗液，其特征在于：按质量百分比包含：
粘着剂0.01%-0.50%；
固定剂10%-60%；
活性剂0.10%-1.5%；
余量为超纯水。
2.根据权利要求1所述的一种用于病理细胞制片技术的清洗液，其特征在于：所述的粘着剂为阿拉伯胶、卡拉胶、明胶中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种用于病理细胞制片技术的清洗液，其特征在于：所述的固定剂为乙醇、甲醇、丙二醇或异丙醇中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的一种用于病理细胞制片技术的清洗液，其特征在于：所述的活性剂是十二烷基苯磺酸钠、苯扎氯铵、十二烷基乙氧基磺基甜菜碱、聚山梨酯、山梨坦单月桂酸酯中的一种。
5.一种权利要求1-4任意权利要求所述的用于病理细胞制片技术的清洗液的使用方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1：将上述清洗液往液基细胞片上冲洗三次，每次1-2ml；
步骤2：第三次冲洗后静置1min，再倒弃清洗液残液；
步骤3：将经过清洗液冲洗的液基细胞片放入95%乙醇固定或直接晾干后备用。
6.根据权利要求5所述的一种用于病理细胞制片技术的清洗液的使用方法，其特征在于：步骤1中清洗液用量的为1ml。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN101563444A (zh) * 2006-10-02 2009-10-21 陶氏环球技术公司 高醇含量的泡沫
CN105176716A (zh) * 2015-09-10 2015-12-23 安徽网动车簇汽车清洁服务有限公司 环保型汽车挡风玻璃水

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