CN105497919A - miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用 - Google Patents

miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN105497919A
CN105497919A CN201510975322.2A CN201510975322A CN105497919A CN 105497919 A CN105497919 A CN 105497919A CN 201510975322 A CN201510975322 A CN 201510975322A CN 105497919 A CN105497919 A CN 105497919A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mir
cell
pancreatic cancer
cancer
application
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201510975322.2A
Other languages
English (en)
Inventor
李健
王槐志
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
First Affiliated Hospital of TMMU
Original Assignee
First Affiliated Hospital of TMMU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by First Affiliated Hospital of TMMU filed Critical First Affiliated Hospital of TMMU
Priority to CN201510975322.2A priority Critical patent/CN105497919A/zh
Publication of CN105497919A publication Critical patent/CN105497919A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid

Abstract

本发明公开了miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用，首次将miR-506作为胰腺癌的标志物，证实了miR-506表达在人胰腺癌组织和细胞中均显著下调，其原因是由于基因启动子CpG岛甲基化所致；同时也证实胰腺癌中SPHK1是miR-506的直接作用靶标，过表达miR-506通过SPHK1/PI3K/AKT信号通路抑制胰腺癌生长，促进细胞周期阻滞和凋亡，提高对吉西他滨化疗的敏感性，进一步临床相关性分析表明miR-506能作为胰腺癌预后检测的标志物；对胰腺癌的诊断和治疗具有重要意义。

Description

miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用
技术领域
本发明属于生物医药领域，具体涉及miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用。
背景技术
根据最新流行病学调查，胰腺癌位居欧美等发达国家恶性肿瘤死亡率第四位，全球每年约250万人死于胰腺癌。近20年来我国胰腺癌的发病率持续增高，目前胰腺癌位居恶性肿瘤死亡率第五位。在胰腺癌的治疗中，外科手术、化疗及放疗等手段的疗效均不尽人意，其术后1年生存率不到20％，5年生存率仅为4％。因此，发现一种特有的、可用于早期诊断和预后的标记物和靶向分子，对于战胜胰腺癌具有重要意义。
microRNAs(miRNAs)是近年来发现的一种长约22个核苷酸的内源性非编码RNA，可与目的基因3’UTR结合降解mRNA和(或)抑制其翻译，在转录后调控基因表达。人类基因组中目前已经被鉴定的miRNA数目在1000个以上，miRNA具有高度保守性，在个体生长发育以及包括肿瘤在内的多中疾病的发生发展过程中发挥重要作用。最近的许多研究发现miRNA参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、分化、耐药及侵袭转移，与肿瘤的发生和发展密切相关。
研究表明，在不同的肿瘤中，miR-506的功能不尽相同。miR-506在羟喜树碱耐药的结肠癌细胞中高表达，miR-506的过表达可以下调PPARα提高癌细胞的耐药性。在黑色素瘤中，miR-506可以启动黑色素细胞的恶性转化、促进黑色素瘤的生长。相反，在恶性转化后的人支气管上皮细胞(16HBE-T)中miR-506低表达；过表达miR-506后可以抑制细胞增殖，诱导G0/G1细胞周期阻滞，明显抑制细胞的锚定非依赖生长以及裸鼠移植瘤模型的生长。但miR-506在调节胰腺癌的的表达及临床相关性，以及它所发挥的作用和分子机制仍未见报道。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的之一在于提供miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用；本发明的目的之二在于提供miR-506与吉西他滨联合用于制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用；本发明的目的之三在于提供检测miR-506的试剂在制备诊断和预示胰腺癌试剂盒中的应用。
为实现上述发明目的，本发明提供如下技术方案：
1、miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用。
进一步，所述miR-506在制备抑制胰腺癌细胞增殖的药物中的应用。
进一步，所述miR-506在制备抑制胰腺癌成瘤能力的药物中的应用。
进一步，所述miR-506在制备诱导胰腺癌细胞细胞周期阻滞的药物中的应用。
进一步，所述miR-506在制备诱导胰腺癌细胞凋亡的药物中的应用。
2、miR-506与吉西他滨联合用于制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用。
3、检测miR-506的试剂在制备诊断和预示胰腺癌试剂盒中的应用，miR-506在胰腺癌中明显低表达。
进一步，所述诊断和预示为评估胰腺癌预后效果，miR-506低表达的胰腺癌患者预后差。
本发明的有益效果在于：本发明通过对miR-506在胰腺癌、癌旁组织和正常胰腺表达进行分析，发现在胰腺癌组织及胰腺癌细胞中miR-506明显低表达，临床分析显示miR-506低表达的胰腺癌患者预后差，因此miR-506可以作为诊断和预示胰腺癌的标志物。进一步探索miR-506低表达的机制，发现miR-506启动子在癌组织中高甲基化，在癌旁及正常胰腺组织中低甲基化，并且甲基化水平和miR-506表达呈负相关；用去甲基化试剂处理胰腺癌细胞株后发现miR-506表达上调，表明甲基化可能是miR-506低表达的主要原因，临床分析还发现高甲基化与胰腺癌患者预后负相关。
通过在胰腺癌细胞中过表达miR-506发现miR-506miR-506显著抑制胰腺癌细胞增殖抑制裸鼠皮下成瘤能力，降低Ki-67表达，流式检测表明miR-506诱导胰腺癌细胞细胞周期阻滞和凋亡，凋亡标志物cleaved-PARP和caspase-3在过表达miR-506组中明显上调，因此miR-506可以作为预防和治疗胰腺癌的药物；通过细胞存活实验还发现miR-506增强胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性，因此miR-506可以与吉西他滨联合用药，提高吉西他滨的治疗效果。进一步对治疗或预防胰腺癌的机制进行研究发现，miR-506和SPHK1的表达在细胞株及胰腺癌组织中呈负相关，miR-506还可以下调PI3K/AKT通路下游相关分子表达，表明miR-506通过SPHK1/PI3K/AKT信号通路抑制胰腺癌生长，促进细胞周期阻滞和凋亡，为胰腺癌的治疗提供了新的标志物，对临床胰腺癌的诊断和治疗具有重要意义。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图：
图1为胰腺癌、癌旁组织及正常胰腺组织中miR-506表达结果(a.胰腺癌与癌旁组织比较结果，Aj表示癌旁组织，T表示胰腺癌组织；b.正常组织与胰腺癌组织比较结果，N表示正常组织，T表示胰腺癌组织；c.生存分析结果)。
图2为胰腺癌、癌旁组织及正常胰腺组织中miR-506启动子甲基化检测结果(a.癌旁组织与胰腺癌组织比较结果，Aj表示癌旁组织，T表示胰腺癌组织；b.正常组织与胰腺癌组织比较结果，N表示正常组织，T表示胰腺癌组织；c.甲基化水平与miR-506表达分析结果；d.焦磷酸测序代表图)。
图3为去甲基化试剂处理胰腺癌细胞株对miR-506表达的影响及临床生存分析结果(a.去甲基化试剂处理胰腺癌细胞株与未处理细胞株miR-506表达情况；b.临床生存分析结果)。
图4为细胞增殖、成瘤能力和细胞周期实验结果(a和b为miR-506过表达细胞胰腺癌细胞增殖实验结果；c和d为miR-506过表达细胞成瘤能力检测结果；e和f为流式细胞术检测miR-506过表达细胞胰腺癌细胞细胞周期结果)。
图5为细胞凋亡实验结果(a和b为流式细胞述检测miR-506诱导胰腺癌细胞凋亡结果；c和d为过表达miR-506对吉西他滨的敏感性实验；e为Westernblot检测示过表达miR-506细胞中cleaved-PARP和caspase-3表达情况)。
图6为检测miR-506与SPHK1作用(a.正常胰腺细胞株HPC-Y5和人胰腺癌细胞株AsPC-1，CFPAC-1，Hs766t，PANC-1，BxPC-3的miR-506基因与SPHK1蛋白表达结果；b.miR-506基因与SPHK1蛋白的线性关系)。
图7为双荧光素酶报告实验结果(a.野生型和突变型SPHK13’-UTR序列比对图；b.双荧光素酶报告实验示荧光表达情况)。
图8为Westernblot检测PI3K/AKT通路下游相关分子表达情况。
具体实施方式
下面将结合附图，对本发明的优选实施例进行详细的描述。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。
本发明中胰腺癌及癌旁组织从第三军医大学西南医院肝胆外科取得，正常胰腺组织从器官捐献者获取，手术取出后，组织块以生理盐水冲洗干净，迅速将组织切成小块，部分样品放入2mL冻存管中与液氮中保存备用。
一、胰腺癌、癌旁组织及正常胰腺组织中miR-506表达情况
首先根据miR-506基因序列：71-uaaggcacccuucugaguaga-91(SEQIDNO.1)，设计检测miR-506的引物，具体引物序列如下：5’-taaggcacccttctgagtaga-3’(SEQIDNO.2)，然后分别取胰腺癌、癌旁组织及正常胰腺组织，提取总RNA，反转为cDNA后获得的cDNA为模板，SEQIDNO.2所示引物为模板进行RT-qPCR检测miR-506表达情况，结果如图1所示。结果显示，与癌旁组织相比，miR-506在胰腺癌中低表达(图1中a)；与正常胰腺癌组织相比，miR-506在胰腺癌中低表达(n＝84)(图1中b)；进一步临床生存分析表明miR-506低表达患者较miR-506高表达患者预后差(图1中c)。上述结果表明miR-506可以作为区分胰腺癌与正常胰腺组织以及胰腺癌患者预后标志物。
其中提取总RNA方法如下：取约100mg组织放于玻璃研磨器内，先加0.2ml的Trizol(TaKaRa，大连)溶液，研磨组织后，倒1.5mlEP管中，再在研磨器内加入0.8ml的Trizol溶液洗，后全部再倒入EP管中；颠倒混匀10下，室温(18～25℃)静置5分钟。分离阶段：每1mlTrizol中加0.2ml氯仿，盖紧样品管盖，用手用力摇晃试管15秒，使其充分混匀，室温(18～25℃)静置5分钟后12000rmp离心15分钟；然后将上层水相转入新的1.5mlEP管中(约400-500μl)，加入0.5ml异丙醇，混匀后放于室温(18～25℃)3分钟后12000rmp离心10分钟；小心倒掉上清，留取沉淀，加1ml现配的75％的乙醇(预冷)振荡洗涤RNA沉淀一次，后7500rmp离心5分钟，小心倒掉上清，取沉淀置超净工作台开风机吹干(约20分钟，此时RNA沉淀变透明)；操作时不能让RNA沉淀完全干燥(会极大地降低它地可溶性)，再在管中加20μl的DEPC水溶解，在55-60℃下孵育10分钟助溶。RNA的保存提取的RNA保存于-70℃超低温冰箱中，或立即用于逆转录。
RT-qPCR检测方法如下：miRNA反转录应用PrimeScriptRTreagentkit(TaKaRa)，以cDNA为模板，使用miR-506特定的引物及SYBRPremixExTaqII(TaKaRa)试剂盒的PCR体系，在StratageneMx3000PPCR仪(AgilentTechnologies,SantaClara,CA,USA)上进行扩增，反应条件为：95℃30s；95℃5s、60℃30s，共40个循环，并以U6作内参，正向引物序列：5’-ctcgcttcggcagcaca-3’(SEQIDNO.6)；反向引物序列：5’-aacgcttcacgaatttgcgt-3’(SEQIDNO.7)。
二、检测miR-506启动子区CpG岛的甲基化状态
为探索了miR-506低表达的机制，采用亚硫酸氢盐转化焦磷酸测序的方法检测胰腺癌、癌旁组织及正常胰腺组织中miR-506启动子区CpG岛的甲基化状态。焦磷酸测序按上海生工生物技术有限公司试验方法参照说明书进行，基本流程通过亚硫酸氢盐处理基因组DNA，使其中未甲基化的C转变成T后，运用特异性引物扩增目的区段，然后用焦磷酸测序技术测定目标位点中C/T的比率，以此判断目标位点的甲基化程度。其中扩增引物如下：正向5’-tagtatggttgatggtggtggta-3’(SEQIDNO.3)，反向5'-biotin-actcaataataaatcaactcatacaacc-3’(SEQIDNO.4)；测序引物：5’-gtggtggtattgattattttaat-3’(SEQIDNO.5)，检测结果如图2所示。由图2可知，miR-506启动子在癌组织中高甲基化，在癌旁及正常胰腺组织中低甲基化(图2中a和b)；然后分析甲基化与甲基化的相关性，显示甲基化水平和miR-506表达呈负相关(图2中c和d)。
然后检测胰腺癌细胞株miR-506启动子区CpG岛的甲基化状态，人胰腺癌细胞株AsPC-1，PANC-1，BxPC-3，Hs766t和CFPAC-1购自ATCC(MANASSAS，USA)，人正常胰腺上皮细胞HPC-Y5购自中科院。PANC-1，Hs766t，CFPAC-1和HPC-Y5细胞培养在DMEM高糖培养基中(Gibico)，AsPC-1和BxPC-3培养在1640培养基(Gibico)中。上述培养基均含有10％的FBS(Gibico)，1％的双抗(含100u/ml青霉素，100ng/ml链霉素，碧云天)。所有细胞放于37℃培养箱，5％CO2，用3μM的去甲基化试剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-CdR，Sigma，USA)处理胰腺癌细胞72小时，然后RT-qPCR检测去甲基化处理细胞的miR-506表达情况，同时以未加去甲基化试剂的细胞作为对照，并分析临床生存情况，结果如图3所示。结果显示，去甲基化试剂处理胰腺癌细胞株后发现miR-506表达上调(图3中a)，表明甲基化可能是miR-506低表达的主要原因；临床生存分析还发现高甲基化与胰腺癌患者预后负相关(图3中b)。
三、miR-506对胰腺癌细胞增殖，细胞周期，凋亡和耐药的影响
1、细胞增殖实验
在96孔板中分别接种等量的(约1*103个)miR-506过表达AsPC-1细胞和对照细胞悬液(100μl/孔)，将培养板放在培养箱中预培养(37℃，5％CO2)，向每孔加入10μlCCK8溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数)，孵育1-4小时后，用酶标仪测定在450nm处的吸光度，用GraphPadPrismv6统计分析各组数据，结果如图4中a和b所示。结果显示，miR-506显著抑制胰腺癌细胞增殖。
2、成瘤能力实验
首先制备miR-506过表达AsPC-1细胞，具体方法如下：将400μl去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解lipofectamine2000(Invitrogen)，然后与miR-506mimic混合，荡后在加入转染试剂，再次震荡，将混合液在室温放置10-15分钟；同时按照上述方法培养细胞，然后吸去培养板中的培养基，用PBS清洗一次，加入混合液，将细胞放回培养箱中培养6-8小时，之后加入完全培养基继续培养24-48小时。
然后miR-506过表达细胞接种于裸鼠右侧腋下，实验裸鼠为4-6周龄雌性裸鼠，由第三军医大学大坪医院动物所提供，标准条件饲养。接种方法采用常规消化细胞脱壁后稀释为细胞悬液，计数，1×106/只接种于裸鼠右侧腋下miR-506过表达细胞和AsPC-1细胞作为对照组，一个月后观察检测成瘤情况，结果如图4中c所示。结果显示，miR-506过表达细胞成瘤能力低于对照组，表明miR-506能够抑制裸鼠皮下成瘤能力。然后通过免疫组化检测Ki-67蛋白的表达量，结果如图4中d所示。结果显示，miR-506过表达细胞Ki-67表达量低于对照组，表明miR-506能够抑制Ki-67表达。
3、细胞周期实验
按照miR-506过表达AsPC-1细胞的制备方法，制备miR-506过表达PANC-1细胞。然后流氏细胞检测miR-506过表达AsPC-1细胞和miR-506过表达AsPC-1细胞的细胞周期，具体方法如下：收集对数生长期细胞，计数，以(1～5)×105/孔接种于6孔板，置37℃，5％CO2条件下培养过夜，使细胞贴壁。各组转染细胞培养48小时后中止培养，胰酶消化后，收集细胞于流式管1000r/min离心5min，弃上，冷PBS洗涤细胞3次，离心去上清；一边震荡一边向细胞沉淀中加入体积分数为70％预冷乙醇混匀，4℃固定18h以上；离心，弃去乙醇上清，加入预冷的PBS洗沉淀1次，离心去上清；加入RNA酶(50mg/L)10μl/孔和PI(50mg/L)300μl/孔，震荡混匀，室温、避光反应30min；流式细胞仪进行DNA检测，用Modifit软件(BDBioscience,Sparks,MD,USA)分析各时相细胞周期的比例，结果如图4中e和f所示。结果显示，miR-506过表达AsPC-1细胞和miR-506过表达AsPC-1细胞较对照组G0/G1期细胞比例增多，而S期细胞比例减少，表明miR-506诱导胰腺癌细胞细胞周期阻滞。
4、细胞凋亡实验
将细胞用不含EDTA的胰酶消化收集(注：胰酶消化时间不易过长，否则容易引起假阳性)；用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1～5×105细胞；加入500μl的BindingBuffer(凯基，南京)悬浮细胞；加入5μlAnnexinV-FITC(凯基，南京)混匀后，加入5μlPropidiumIodide(凯基，南京)，混匀；室温、避光、反应5～15min后进行流式细胞仪的检测miR-506过表达AsPC-1细胞和miR-506过表达AsPC-1细胞的凋亡，结果如图5中a和b所示。结果显示，miR-506过表达AsPC-1细胞和miR-506过表达AsPC-1细胞凋亡率高于对照组，表明miR-506能够诱导胰腺癌细胞凋亡。
为了进一步验证miR-506对胰腺癌细胞凋亡的影响，将生长至对数生长期的miR-506过表达AsPC-1细胞和miR-506过表达AsPC-1细胞分别用浓度为0.2μM、2μM、20μM和200μM的吉西他滨处理，然后检测细胞的存活率，结果如图5中c和d所示。结果显示，随着吉西他滨的浓度增加实验组和对照组细胞的存活率均呈下降趋势，但是miR-506过表达AsPC-1细胞比对照AsPC-1细胞下降速度更为明显，表明miR-506能够增强胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性。
为了证明细胞存活率下降是由细胞凋亡机制引起的，通过Westernblot检测miR-506过表达AsPC-1细胞和miR-506过表达AsPC-1细胞凋亡标志物cleaved-PARP和caspase-3的表达量，结果如图5中e所示。结果显示，miR-506过表达AsPC-1细胞比对照AsPC-1细胞凋亡标志物cleaved-PARP和caspase-3表达明显上调。
四、验证miR-506作用于SPHK1
分别取人正常胰腺细胞株HPC-Y5和人胰腺癌细胞株AsPC-1，CFPAC-1，Hs766t，PANC-1，BxPC-3，提取总RNA然后检测miR-506基因情况和SPHK1蛋白表达情况，结果如图6中a和b所示。结果显示，miR-506与SPHK1表达呈负相关，表明miR-506可能直接作用于SPHK1。然后采用荧光素酶检测miR-506过表达对SPHK1的影响，具体方法如下：将野生型和突变型SPHK13’-UTR(图7中a)插入pGL3载体XbaIandFseI位点(吉凯，上海)；HEK293T细胞转染miR-506lentivirus和对照，然后用LipofectamineLTX(Invitrogen,Camarillo,CA,USA)再共转50ngpGL3vector和10ngpRL-TKvector。荧光素酶检测：将LuciferaseAssayBufferII(promega)完全加入到LuciferaseAssaySubstrate瓶中，完全溶解底物，形成LuciferaseAssayReagent，分装保存于-80℃，一年内有效；裂解细胞前，将PassiveLysisBuffer5×使用D-Hanks稀释配制成PassiveLysisBuffer1×；吸去24孔板中培养基，加入300ul的PassiveLysisBuffer1×，放至4℃冰箱反应20min左右以待细胞充分裂解，吹打混匀，放至-80℃超低温冰箱过夜使其裂解更加彻底。上机检测前，提前将Stop&Buffer放于室温下溶解、平衡，将Stop&Substrate50×加入到Stop&Buffer中，使其充分溶解，形成稀释成Stop&Substrate1×Reagent。Stop&Substrate1×Reagent需要现配现用，配好的Stop&Substrate1×Reagent在常温下48小时内有效。常温下溶解前面步骤中的细胞裂解液，吸取20μl于Lockwellmaxisorp检测板中，加入40ulLuciferaseAssayReagent，震荡混匀后立即使用酶标仪检测fireflyluminescence。检测fireflyluminescence后，再在每孔中加入40μlStop&Reagent，震荡混匀后立即使用酶标仪检测Renillaluminescence，结果如图7中b所示。结果显示，荧光在转染野生型SPHK13’-UTR的miR-506过表达的细胞中显著下调，表明miR-506可以直接与SPHK13’-UTR结合下调SPHK1。
最后利用Westernblot检测miR-506过表达AsPC-1细胞PI3K/AKT通路相关分子的表达情况，包括SPHK1，p-AKT，Akt，p-IκBa，IκBα，NF-kB和Bcl2，同时以GAPDH为对照，结果如图8所示。结果表明miR-506可以通过调控PI3K/AKT通路，下调下游相关分子。
最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。

Claims (8)

1.miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述miR-506在制备抑制胰腺癌细胞增殖的药物中的应用。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述miR-506在制备抑制胰腺癌成瘤能力的药物中的应用。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述miR-506在制备诱导胰腺癌细胞细胞周期阻滞的药物中的应用。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述miR-506在制备诱导胰腺癌细胞凋亡的药物中的应用。
6.miR-506与吉西他滨联合用于制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用。
7.检测miR-506的试剂在制备诊断和预示胰腺癌试剂盒中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述诊断和预示为评估胰腺癌预后效果。
CN201510975322.2A 2015-12-22 2015-12-22 miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用 Pending CN105497919A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510975322.2A CN105497919A (zh) 2015-12-22 2015-12-22 miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510975322.2A CN105497919A (zh) 2015-12-22 2015-12-22 miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105497919A true CN105497919A (zh) 2016-04-20

Family

ID=55706464

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510975322.2A Pending CN105497919A (zh) 2015-12-22 2015-12-22 miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105497919A (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007081680A2 (en) * 2006-01-05 2007-07-19 The Ohio State University Research Foundation Microrna expression abnormalities in pancreatic endocrine and acinar tumors
CN103861121A (zh) * 2012-12-10 2014-06-18 中国医学科学院基础医学研究所 微小RNA分子miR491-5p在胰腺癌的治疗和/或诊断和/或预后中的用途

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007081680A2 (en) * 2006-01-05 2007-07-19 The Ohio State University Research Foundation Microrna expression abnormalities in pancreatic endocrine and acinar tumors
CN103861121A (zh) * 2012-12-10 2014-06-18 中国医学科学院基础医学研究所 微小RNA分子miR491-5p在胰腺癌的治疗和/或诊断和/或预后中的用途

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HOWARD A.BURRIS Ⅲ等: "Improvements in survival and clinical benefit with gemcitabine as first-line therapy for patients with advanced pancreas cancer: a randomized trial", 《JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY》 *
JUNDONG DU等: "MicroRNA‑506 participates in pancreatic cancer pathogenesis by targeting PIM3", 《MOLECULAR MEDICINE REPORTS》 *
JUNDONG DU等: "MicroRNA-506 participates in pancreatic cancer pathogenesis by targeting PIM3，Molecular Medicine Reports", 《MOLECULAR MEDICINE REPORTS》 *
于琦等: "MicroRNA与胰腺癌关系的研究进展", 《中国普通外科杂志》 *
余飞等: "miR_506在乳腺肿瘤细胞增殖及转移中的作用", 《同济大学学报（医学版）》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Fang et al. MicroRNA‐29b suppresses tumor angiogenesis, invasion, and metastasis by regulating matrix metalloproteinase 2 expression
CN102985558B (zh) 用于肝细胞癌症的微rna表达谱分析的组合物和方法
Yao et al. MiR-449a exerts tumor-suppressive functions in human glioblastoma by targeting Myc-associated zinc-finger protein
CN105079821A (zh) 一种长链非编码rna hnf1a-as1在制备治疗人体恶性实体瘤药物中的应用
CN108721319A (zh) 抑制circ_CLASP2的试剂在制备鼻咽癌治疗制剂中的应用及制剂
CN108179194A (zh) 一种肿瘤分子标志物circBIRC6及其抑制剂和用途
CN106591306A (zh) 靶向干扰肿瘤ptn‑ptprz1通路的小干扰rna在肿瘤免疫治疗中的应用
Qiao et al. Microarray analysis of circRNAs expression profile in gliomas reveals that circ_0037655 could promote glioma progression by regulating miR-214/PI3K signaling
Fan et al. Prognostic and diagnostic significance of long non-coding RNA AGAP2-AS1 levels in patients with non-small cell lung cancer.
CN107630092A (zh) miR‑505‑3p应用于前列腺癌骨转移的诊断、预后和治疗
CN104774929B (zh) miR‑455‑3p在食管鳞状细胞癌中的诊断、治疗和预后的应用
CN108374048A (zh) 一种用于诊断和治疗肝细胞癌的lncRNA标志物
CN105779598A (zh) 一种诊治垂体瘤的分子标志物
CN104726584B (zh) miR‑425在肿瘤的诊断、治疗及预后中的应用
CN107028970A (zh) miR‑1288在诊断或治疗骨关节炎疾病中的应用
CN105412944A (zh) miR-451a细胞在非小细胞肺癌中的作用
Wu et al. Circ_0000064 adsorption of microRNA-143 promotes malignant progression of hepatocellular carcinoma.
CN114517204B (zh) 一种用于肿瘤治疗靶点和诊断生物标志物的circPOLK及其应用
CN103215268B (zh) 一种针对人fascin-1基因的siRNA及其应用
CN106167822A (zh) 一种长链非编码rna及其应用
CN105497919A (zh) miR-506在制备预防或/和治疗胰腺癌的药物中的应用
Wang et al. MicroRNA screening and functional study of obliterative bronchiolitis in a rat model simulating lung transplantation
CN105624325A (zh) 肺腺癌的诊治标记物
CN112641797B (zh) 抑制结直肠癌生长、转移的靶标与诊断标志物及其应用
CN102424818B (zh) 一种米非司酮诱导的caspase-1-ES细胞系

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20160420