CN105483205A - 确定乳酸菌活力的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了确定乳酸菌活力的方法。所述方法包括：(1)将乳酸菌接种在发酵培养基中进行发酵培养，其中，所述发酵培养基含有脱脂奶粉、葡萄糖和水；以及(2)基于所述发酵培养的发酵产物，确定所述乳酸菌的活力。本发明确定乳酸菌活力的方法能够准确地确定乳酸菌的活力，且操作简便。

Description

确定乳酸菌活力的方法
技术领域
本发明涉及食品领域。具体地，本发明涉及确定乳酸菌活力的方法。
背景技术
随着含有乳酸菌的产品越来越多，每种产品都对乳酸菌活菌数要求较高。目前乳酸菌菌种到货后不仅需要进行外观验收，而且更有必要进行菌种活力的检测，以验证其是否符合要求。
然而，目前确定乳酸菌活力的方法仍有待改进。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提供确定乳酸菌活力的方法。该方法能够准确地确定乳酸菌的活力，操作简单。
需要说明的是，本发明是基于发明人的下列发现而完成的：
目前，确定乳酸菌活性的方法主要是通过将乳酸菌接种于含有脱脂奶粉和水的培养基中，判断乳酸菌能够正常发酵，以确定其活力。但是，某些菌体不能在含有脱脂奶粉和水的培养基中发酵，但是测定其其他理化指标均表明其具有活力。由此，将乳酸菌接种于含有脱脂奶粉和水的培养基中，通过判断乳酸菌能否正常发酵以确定其是否具有活力的方法容易造成误判。
发明人经过大量实验发现，将乳酸菌接种于含有脱脂奶粉、葡萄糖和水的培养基中进行发酵培养，基于发酵培养的产物，确定乳酸菌活力。由此，根据本发明实施例的确定乳酸菌活力的方法能够准确地确定乳酸菌的活力，操作简单。
在本发明的第一方面，本发明提出确定乳酸菌活力的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：(1)将乳酸菌接种在发酵培养基中进行发酵培养，其中，所述发酵培养基含有脱脂奶粉、葡萄糖和水；以及(2)基于所述发酵培养的发酵产物，确定所述乳酸菌的活力。由此，根据本发明实施例的确定乳酸菌活力的方法能够准确地确定乳酸菌的活力。
根据本发明的实施例，上述确定乳酸菌活力的方法还可以具有下列附加技术特征：
根据本发明的实施例，基于100重量份的所述水，所述发酵培养基含有：8～10重量份的所述脱脂奶粉；以及1～3重量份的所述葡萄糖。由此，根据本发明实施例的确定乳酸菌活力的方法能够较准确地确定乳酸菌的活力，操作简单。
根据本发明的实施例，所述方法包括：(1-1)将所述水与葡萄糖进行混合，得到葡萄糖溶液，然后将所述葡萄糖溶液与脱脂奶粉进行混合，得到含有葡萄糖和脱脂奶粉的混合液，接着将所述混合液进行杀菌处理，得到发酵培养基；(2-1)将乳酸菌置于装有生理盐水的均质袋中，进行混合，得到种子液；(3-1)将所述种子液接入所述发酵培养基中，进行发酵培养，得到发酵产物；以及(4-1)基于下列标准，确定所述乳酸菌的活力：(a)在所述发酵产物中，出现凝固或不发生乳清析出是所述乳酸菌为正常的指标；(b)所述发酵产物的pH在3.7～4.4之间是所述乳酸菌为正常的指标；或(c)所述发酵产物不存在异常气味是所述乳酸菌为正常的指标。由此，根据本发明实施例的确定乳酸菌活力的方法能够较准确地确定乳酸菌的活力，操作简单。
在本发明的第二方面，本发明提出确定乳酸菌活力的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：(1-2)称取20g葡萄糖置于装有100ml温度为45℃-60℃无菌水的容器中进行溶解，并将溶解得到的混合物定容至1000ml，得到葡萄糖溶液，接着将95g脱脂奶粉置于装有500ml温度为45℃-60℃的葡萄糖溶液的容器中溶解，将溶解得到的混合物转移至容量瓶中并用葡萄糖溶液定容至1000ml，并将得到的混合液在121℃高压灭菌15min，冷却至室温，得到发酵培养基；(2-2)称取2g乳酸菌，置于装有198ml无菌生理盐水的无菌均质袋内，均质处理1min～2min，得到种子液；(3-2)吸取1ml所述种子液于200ml所述发酵培养基中，混匀并置于36±1℃的恒温培养箱中培养48h±2h；(4-2)基于下列标准，确定所述乳酸菌的活力：(a)在所述发酵产物中，出现凝固或不发生乳清析出是所述乳酸菌为正常的指标；(b)所述发酵产物的pH在3.7～4.4之间是所述乳酸菌为正常的指标；或(c)所述发酵产物不存在异常气味是所述乳酸菌为正常的指标。由此，根据本发明实施例的确定乳酸菌活力的方法能够准确地确定乳酸菌的活力，操作简单。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
在本发明的第一方面，本发明提出确定乳酸菌活力的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：(1)将乳酸菌接种在发酵培养基中进行发酵培养，其中，发酵培养基含有脱脂奶粉、葡萄糖和水；以及(2)基于发酵培养的发酵产物，确定乳酸菌的活力。
目前，确定乳酸菌活性的方法主要是通过将乳酸菌接种于含有脱脂奶粉和水的培养基中，判断乳酸菌能够正常发酵，以确定其活力。但是，某些菌体不能在含有脱脂奶粉和水的培养基中发酵，但是测定其其他理化指标均表明其具有活力。由此，将乳酸菌接种于含有脱脂奶粉和水的培养基中，通过判断乳酸菌能否正常发酵以确定其是否具有活力的方法容易造成误判。发明人经过大量实验发现，乳酸菌不能在含有脱脂奶粉和水的培养基中发酵的原因主要是自身合成所需的碳源能力弱，人工提供的培养基又缺少碳源，导致发酵不凝固并且pH值不在3.7-4.2(质量标准)的范围内。通过向发酵培养基中添加葡萄糖，并进行发酵培养，基于发酵产物的特性，确定乳酸菌的活力。由此，根据本发明实施例的确定乳酸菌活力的方法能够准确确定乳酸菌的活力，防止误判而将菌种弃之不用，造成浪费。
根据本发明的实施例，基于100重量份的水，发酵培养基含有：8～10重量份的脱脂奶粉；以及1～3重量份的葡萄糖。发明人经过大量实验优化得到最优脱脂乳粉及葡萄糖添加量。由此，根据本发明实施例的确定乳酸菌活力的方法能够准确确定乳酸菌的活力，操作简单。
根据本发明的实施例，该方法包括：(1-1)将水与葡萄糖进行混合，得到葡萄糖溶液，然后将葡萄糖溶液与脱脂奶粉进行混合，得到含有葡萄糖和脱脂奶粉的混合液，接着将混合液进行杀菌处理，得到发酵培养基；(2-1)将乳酸菌置于装有生理盐水的均质袋中，进行混合，得到种子液；(3-1)将种子液接入发酵培养基中，进行发酵培养，得到发酵产物；以及(4-1)基于下列标准，确定乳酸菌的活力：(a)在发酵产物中，出现凝固或不发生乳清析出是乳酸菌为正常的指标；(b)发酵产物的pH在3.7～4.4之间是乳酸菌为正常的指标；或(c)发酵产物不存在异常气味是乳酸菌为正常的指标。由此，根据本发明实施例的确定乳酸菌活力的方法能够准确确定乳酸菌的活力，操作简单。
本领域技术人员能够理解的是，“异常气味：是指不属于菌体常规发酵产物应有的气味。
在本发明的第二方面，本发明提出确定乳酸菌活力的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：(1-2)称取20g葡萄糖置于装有100ml温度为45℃-60℃无菌水的容器中进行溶解，并将溶解得到的混合物定容至1000ml，得到葡萄糖溶液，接着将95g脱脂奶粉置于装有500ml温度为45℃-60℃的葡萄糖溶液的容器中溶解，将溶解得到的混合物转移至容量瓶中并用葡萄糖溶液定容至1000ml，并将得到的混合液在121℃高压灭菌15min，冷却至室温，得到发酵培养基；(2-2)称取2g乳酸菌，置于装有198ml无菌生理盐水的无菌均质袋内溶解，均质处理1min～2min，得到种子液；(3-2)吸取1ml种子液于200ml发酵培养基中，混匀并置于36±1℃的恒温培养箱中培养48h±2h；(4-2)基于下列标准，确定乳酸菌的活力：(a)在发酵产物中，出现凝固或不发生乳清析出是乳酸菌为正常的指标；(b)发酵产物的pH在3.7～4.4之间是乳酸菌为正常的指标；或(c)发酵产物不存在异常气味是乳酸菌为正常的指标。由此，根据本发明实施例的确定乳酸菌活力的方法能够准确地确定乳酸菌的活力，操作简单。
下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
乳酸菌为乳杆菌和嗜热链球菌，乳酸菌01、02和03为不同批次的菌株。
实施例1
在该实施例中，按照下列步骤确定乳酸菌01的活力：
(1)称取20g葡萄糖置于装有100ml温度为45℃-60℃无菌水的三角瓶中进行充分溶解，将溶解得到的混合物转移至容量瓶中定容至1000ml，得到2％葡萄糖溶液，将95g脱脂奶粉置于装有500ml温度为45℃-60℃的2％葡萄糖溶液的三角瓶中充分溶解，将溶解得到的混合物转移至容量瓶中并用2％葡萄糖溶液定容至1000ml，得到含有葡萄糖和脱脂奶粉的混合液，将得到的混合液在121℃高压灭菌15min，冷却至室温，得到发酵培养基；
(2)称取2g乳酸菌01，置于装有198ml温度为36℃±1℃无菌生理盐水的无菌均质袋内充分溶解，用均质器拍打1min～2min，得到种子液；
(3)吸取1ml种子液于200ml发酵培养基中，置于36±1℃的恒温培养箱中培养48h±2h，得到发酵产物；
(4)基于下列标准，确定乳酸菌的活力：
(a)在发酵产物中，出现凝固或不发生乳清析出是乳酸菌为正常的指标；
(b)发酵产物的pH在3.7～4.4之间是乳酸菌为正常的指标；或
(c)发酵产物不存在异常气味是乳酸菌为正常的指标。
每组16个平行样品。
实施例2
按照实施例1的方法确定乳酸菌02的活力。
实施例3
按照实施例1的方法确定乳酸菌03的活力。
对比例1
按照实施例1的方法确定乳酸菌01的活力，区别在于，
步骤(1)：将95g脱脂奶粉置于装有500ml温度为45℃-60℃无菌水的容器中充分溶解，将溶解得到的混合物转移至容量瓶中并用2％葡萄糖溶液定容至1000ml，将所得到的混合液在121℃高压灭菌15min，冷却至室温，得到发酵培养基。
对比例2
按照对比例1的方法确定乳酸菌02的活力。
对比例3
按照对比例1的方法确定乳酸菌03的活力。
实施例1～3以及对比例1～3的检测结果如表1所示，可以看出：是否存在葡萄糖对乳酸菌01的发酵影响不大，说明该菌种自身合成所需碳源的能力较强，可以利用该菌株作为后续试验菌株。
乳酸菌02在含有葡萄糖的培养基中能够正常发酵，具有活性，在无葡萄糖的培养基中不能发酵，表明该菌种自身合成所需碳源能力较弱，只要在后续试验中添加一定量的碳源，该菌株仍可作为后续试验菌株。
乳酸菌03在有无葡萄糖的培养基中均不能正常发酵，说明其无活力，不能作为后续试验菌株。
表1乳酸菌活力检测结果
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换。

Claims (4)

1.一种确定乳酸菌活力的方法，其特征在于，包括：
(1)将乳酸菌接种在发酵培养基中进行发酵培养，其中，所述发酵培养基含有脱脂奶粉、葡萄糖和水；以及
(2)基于所述发酵培养的发酵产物，确定所述乳酸菌的活力。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基含有：
8～10重量份的所述脱脂奶粉；以及
1～3重量份的所述葡萄糖。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括：
(1-1)将所述水与葡萄糖进行混合，得到葡萄糖溶液，然后将所述葡萄糖溶液与脱脂奶粉进行混合，得到含有葡萄糖和脱脂奶粉的混合液，接着将所述混合液进行杀菌处理，得到发酵培养基；
(2-1)将乳酸菌置于装有生理盐水的均质袋中，进行混合，得到种子液；
(3-1)将所述种子液接入所述发酵培养基中，进行发酵培养，得到发酵产物；以及
(4-1)基于下列标准，确定所述乳酸菌的活力：
(a)在所述发酵产物中，出现凝固或不发生乳清析出是所述乳酸菌为正常的指标；
(b)所述发酵产物的pH在3.7～4.4之间是所述乳酸菌为正常的指标；或
(c)所述发酵产物不存在异常气味是所述乳酸菌为正常的指标。
4.一种确定乳酸菌活力的方法，其特征在于，包括：
(1-2)称取20g葡萄糖置于装有100ml温度为45℃-60℃无菌水的容器中进行溶解，并将溶解得到的混合物定容至1000ml，得到葡萄糖溶液，接着将95g脱脂奶粉置于装有500ml温度为45℃-60℃的葡萄糖溶液的容器中溶解，将溶解得到的混合物转移至容量瓶中并用葡萄糖溶液定容至1000ml，并将得到的混合液在121℃高压灭菌15min，冷却至室温，得到发酵培养基；
(2-2)称取2g乳酸菌，置于装有198ml无菌生理盐水的无菌均质袋内，均质处理1min～2min，得到种子液；
(3-2)吸取1ml所述种子液于200ml所述发酵培养基中，混匀并置于36±1℃的恒温培养箱中培养48h±2h；
(4-2)基于下列标准，确定所述乳酸菌的活力：
(a)在所述发酵产物中，出现凝固或不发生乳清析出是所述乳酸菌为正常的指标；
(b)所述发酵产物的pH在3.7～4.4之间是所述乳酸菌为正常的指标；或
(c)所述发酵产物不存在异常气味是所述乳酸菌为正常的指标。
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