CN105477045A - 一种含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

一种含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物及其制备方法 Download PDF

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马少平
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Abstract

本发明涉及一种含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物，制备该中药组合物的原料为菊花和野菊花。该中药组合物是通过以下方法制备得到的：(1)将菊花和野菊花按照重量比例1∶1混合均匀，得菊花和野菊花混合物；(2)将混合物投入萃取釜中进行超临界萃取；再用分离釜分离，收集萃取物；(3)进行离心分液，分离去除乳白色下层液，取上清液得到野菊花和菊花的萃取组合物；(4)将萃取组合物与β-环糊精和水利用胶体磨法进行包合。本发明在制备治疗咽炎的药物中应用具有显著的效果。所述的咽炎为慢性咽炎或急性咽炎，特别适用于治疗慢性咽炎。

Description

一种含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物及其制备方法。
背景技术
菊花(FlosChrysanthemi)属于菊科植物菊的干燥头状花序，是中国十大名花之一，而中药菊花是一种多年生的草本植物。菊花的主要成分为挥发油、黄酮类及氨基酸、微量元素等。性凉、味甘苦，具有平肝明目、疏风解郁、耳鸣失眠、清热解毒、消咳止痛的作用，该药在临床上的应用主要是治疗感冒、头晕头痛、心胸烦热、疔疮肿毒、目赤昏花、眼睛肿痛等。李时珍曾指出“其苗可蔬，叶可啜，花可饵，根实可药，囊之可枕，酿之可饮，自本至末，罔不有功。”现代药理学研究表明，具有扩张冠状动脉、降低血压、预防高血脂、抗菌、抗病毒、抗炎、抗衰老等多种生理活性。
野菊花(ChrysanthemumindicumL.)是菊科植物野菊的头状花序，外形似菊花，是多年生草本植物。研究表明，野菊花的成分主要有挥发油、黄酮类化合物，其性凉、辛、味苦、归肺经肝，具有清热解毒、疏风平肝等功效，主治疗疮、丹毒、湿疹、疥癣、风热感冒、咽喉肿痛、眩晕头痛、目赤热痛，《神农本草经》中有：“菊花久服利血气，轻身，耐老延年”。在临床应用上，不良反应少，作用温和持久，具有较高的药用价值。
虽然许多专利和文献对菊花和野菊花的提取有报道：专利(CN104178350A)对菊花进行提取，但采用索氏回流法对菊花单种药材进行提取；孙桂菊(菊花挥发油提取工艺研究，时珍国医国药，2008)、琳静(野菊花挥发油提取影响因素考察，内蒙古中医药，2008)、钟才宁(均匀设计优化野菊花挥发油提取工艺及抗氧化研究，时珍国医国药，2009)皆是对单种药材进行提取，并且均采用水蒸气蒸馏法；杨剑(综合指标正交设计优选杭白菊挥发油萃取工艺，食品工业科技，2015)采用二氧化碳超临界萃取法对菊花单种药材进行提取。
表1已有专利及文献的菊花及野菊花挥发油提取信息
上述文献和专利虽然对菊花和野菊花的挥发油提取有所报道，但都对单种药材进行提取，且提取率不高，利用效果不好。
本研究中还对菊花和野菊花萃取得到的挥发油进行包合，陈秋实(野菊花挥发油的提取及其β-环糊精包合物制备工艺研究，中药工艺与制剂)和杜俊(野菊花挥发油的提取及其β-环糊精包合物制备工艺研究)虽然提到对野菊花挥发油进行β-环糊精进行包合，但是采用的是磁力搅拌法对野菊花单种药材的挥发油进行包合，此方法包合不仅费时且包合率低。
发明内容
本发明的目的是克服上述不足之处提供一种含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物。
本发明的另一目的是提供该含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物的制备方法。
本发明的目的是通过以下方式实现的：
一种含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物，制备该中药组合物的原料为菊花和野菊花。
优选的，制备该中药组合物的原料菊花和野菊花的重量比为1∶1。
一种含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物的制备方法，该中药组合物是通过以下方法制备得到的：
(1)将菊花和野菊花按照重量比例1∶1混合均匀，得菊花和野菊花混合物；
(2)将步骤(1)的菊花和野菊花混合物投入萃取釜中进行超临界萃取，萃取压力为25～35MPa，萃取温度为25～35℃，萃取时间为60～120min，二氧化碳流量为11～15L/h；再用分离釜分离，分离釜I压力为10～11MPa，温度为45～50℃；分离釜II压力为7～8MPa，温度为30～38℃；萃取釜中萃取的物质在两个分离釜中被连续分离，最后收集萃取物；
(3)对分离釜分离的萃取物进行离心分液，分离去除乳白色下层液，取上清液得到野菊花和菊花的萃取组合物；
(4)将萃取组合物与β-环糊精和水利用胶体磨法进行包合。
步骤(2)所述的超临界萃取参数为：萃取压力35MPa，萃取温度35℃，二氧化碳流量11L/h，萃取时间为60min；分离釜是由分离釜I和分离釜II组成的一体式设备，分离釜I温度48℃；分离釜II温度36℃。
步骤(4)所述的胶体磨法所采用的技术条件为：萃取组合物与β-环糊精的物料重量比为1∶4-1∶6，水用量为萃取组合物重量的3-5倍，包合时间为20-60min。
优选的，步骤(4)所述的胶体磨法所采用的技术条件为：萃取组合物与β-环糊精的物料比为1∶6，水用量为萃取组合物重量的4倍，包合时间为60min。
本发明所述的含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物在制备治疗咽炎的药物中应用具有显著的效果。所述的咽炎为慢性咽炎或急性咽炎。本发明中药组合物特别适用于治疗慢性咽炎。
本发明利用二氧化碳超临界萃取法对菊花和野菊花的混合物进行提取，弥补了对单个中药进行提取的不足，再者对其提取得到的挥发油进行β-环糊精包合，提高了包合物的稳定性，掩盖了气味，增多了包合物的给药途径。本文采用胶体磨法对菊花野菊花两种药材提取得到的挥发油进行包合，省时并且提高了包合率、油利用率及含油率。本发明采用的是二氧化碳超临界萃取法进行提取，不仅提取率高，并且把菊花和野菊花两种药材混合提取，得到的成分多样化。
与现有技术比较本发明的优点在于：
一、菊花和野菊花两种药材一起提取，得到的成分多样化。
二、采用二氧化碳超临界萃取进行提取，提取率高，得到的挥发油的气味与原料相同，明显优于其他方法。
三、得到的挥发油用β-环糊精进行包合：(1)溶解度增大，稳定性提高；(2)将液体药物粉末化，可防止挥发性成分挥发；(3)掩盖药物的不良性气味或味道；(4)调节释放速率，提高生物利用度；(5)降低药物的刺激性与毒副作用稳定性提高，掩盖气味。
以下为本发明采用的技术原理及主要工艺参数选择：
一、二氧化碳超临界萃取参数的确定
1.将等量的菊花和野菊花混合均匀粉碎成粗粉，称取300g投入萃取釜中，根据正交设计表设置萃取压力、萃取温度和二氧化碳流量，各参数达到设置参数后开始计时萃取。
萃取率％＝(所得油量/投料量)×100％
表2.菊花和野菊花二氧化碳超临界萃取的正交实验因素水平表
表3.菊花野菊花二氧化碳超临界萃取正交实验结果表
由极差分析结果可知，四因素对萃取率的影响顺序为：萃取压力＞二氧化碳流量＞萃取时间＞萃取温度。各因素与水平之间的最佳组合为A3B3C1D1，以B项为误差项，进一步进行方差分析，结果见表4。
表4方差分析表
(F0.05(2，2)＝19.00)由方差分析结果可知，各因素对萃取率均无显著性影响。得出超临界萃取的最佳因素水平为萃取压力35MPa，萃取温度为35℃，二氧化碳的流量为11L/h，萃取时间为1h。
2.超临界验证试验
为了验证二氧化碳超临界萃取的最佳工艺，称取300g的菊花和野菊花的混合物，选用A3B3C1D1条件进行超临界萃取试验，结果见表5。
表5.二氧化塘超临界验证试验结果
序号 挥发油的得率(％)
1 4.22
2 4.24
3 4.25
结论：3次试验结果证实：A3B3C1D1二氧化碳超临界萃取条件与正交试验结果基本相符，最佳的萃取参数为：萃取压力35MPa，萃取温度35℃，二氧化碳流量11L/h，萃取时间为1h。分离釜I压力10～11MPa，温度48℃；分离釜II压力7～8MPa，温度36℃。
二、包合制备技术参数的确定
1、包合方法的确定
胶体磨法、饱和水溶液法、超声法为最常用的包合方法。在相同的物料比例下，以萃取组合物与β-环糊精的物料比(ml∶g)为1∶4、水用量为萃取组合物的5倍重量、包合时间40min、加醇量50％进行包合，以包合物得率为指标对胶体磨法、饱和水溶液法、超声法进行比较。最后测得胶体磨法、饱和水溶液法、超声法的包合率分别为76.18％、72.11％、68.31％，确定胶体磨法为包合的最佳方法。
2、脱包方法参数的确定
2.1脱包溶剂的确定
取等量的经胶磨法制得的包合物，分别用等量的甲醇、二氯甲烷、石油醚溶解，超声40min，得出最佳脱包溶剂为甲醇。
2.2脱包方法的确定
取等量的经胶磨法制得的包合物，用等量的甲醇溶解，分别采用回流法和超声法进行脱包40min，得出最佳脱包方法为超声法。
2.3脱包时间的确定
取等量的经胶磨法制得的包合物，用等量的甲醇溶解，用超声法分别脱包20min、40min、60min，以油利用率和含油率为指标，得出最佳脱包时间为40min。
3、包合方法参数的确定
3.1正交试验
取适量萃取组合物，根据加水量、物料比及包合时间因素水平设置正交实验表，如表6。
表6.菊花及野菊花挥发油包合物正交实验因素水平表
以包合物得率、油利用率和含油率为考察指标得正交试验结果表
包合物含油率＝包合物含油量/包合物量×100％
油利用率＝包合物含油量/投油量×100％
表7正交试验安排及结果分析表
表中提供了9个试验方案。如第6号试验是A2B3C1D2，即物料比1∶6，水用量为萃取组合物的5倍重量，包合时间20min，以此而推。
以包合物得率为指标，极差分析结果A＞C＞B。各因素与水平之间的最佳组合为A2B2C3，以D项为误差项，进一步进行方差分析，结果见表8
表8以包合物得率为指标方差分析表
(F0.05(2，2)＝19.00)以包合率率为指标，各实验因素对实验结果均无显著性影响，优选的最佳工艺为物料比为1∶6，水用量为萃取组合物的4倍重量，包合60min。。
以油利用率为指标，极差分析结果A＞B＞C。各因素与水平之间的最佳组合为A3B2C3，以D项为误差项，进一步进行方差分析，结果见表9。
表9以油利用率为指标评分方差表
(F0.05(2，2)＝19.00)以油利用率为指标，油与β-CD比例对实验结果有著性影响，优选的最佳工艺为物料比为1∶8，水用量为萃取组合物的4倍重量，包合60min。。
以含油率为指标，极差分析结果A＞B＞C。各因素与水平之间的最佳组合为A2B2C3，以D项为误差项，进一步进行方差分析，结果见表10。
表10以含油率率为指标评分方差表
(F0.05(2，2)＝19.00)以含油率为指标，油与β-环糊精比例对实验结果有著性影响，优选的最佳工艺为物料比为1∶6，水用量为萃取组合物的4倍重量，包合60min。
从三个指标极差分析可看出：油与β-环糊精比例的影响大于其他因素；用综合评分寻找最佳工艺，在包合工艺研究的三个指标中，分别选取结果最好的作为100分，三者权重系数分别为包合得率0.2、油利用率0.4、含油率0.4。按计算公式：综合评分Y＝权重×(100-最高值+yi)通过直观分析，以综合评分为指标，得出各因素对提取结果影响顺序为A＞C＞B，各因素与水平之间的最佳组合为A2B2C3，以D项为误差项，进一步进行方差分析方差分析结果表11
表11综合评分方差表
(F0.05(2，2)＝19.00)以综合评分为指标，各因素对实验结果均无显著性影响，优选的最佳工艺为A2B2C3，即物料比为1∶6，水用量为萃取组合物的4倍重量，包合60min。
4包合参数的验证试验
为了验证上述试验结果，选择A2B2C3条件进行包合试验，结果见表12。
表12包合参数的验证实验结果
试验 包合率 油利用率 含油率
1 80.78％ 77.35％ 16.05％
2 80.99％ 78.92％ 16.46％
3 80.67％ 80.07％ 16.38％
经3次试验验证结果与正交参数结果相符，所以野菊花、菊花萃取组合物包合的最佳参数条件为物料比为1∶6，水用量为萃取组合物的4倍重量，包合60min。
以下通过具体试验例对本发明提取物的效果进行进一步说明：
咽炎是以发炎、咳嗽为特征的局部性疾病，与外界环境和自身饮食习惯密切相关。本病多发于成年人，儿童也可出现，严重影响患者的生活质量及工作。咽炎目前分为慢性咽炎和急性咽炎，急性咽炎的反复发作导致慢性咽炎的发生。菊花与野菊花二氧化碳超临界萃取工艺及其萃取组合物的包合工艺条件是经过实验筛选、验证得出的最佳工艺，动物实验也表明菊花与野菊花挥发油的包合物在具有慢性咽炎病症的家兔模型上有良好的治疗疗效，报告如下：
发明人对本发明组分拆分及其它组分进行咽炎治疗实验，五个组方分别为：
组方1：菊花二氧化碳超临界萃取挥发油(萃取方法同实施例1)；
组方2：野菊花二氧化碳超临界萃取挥发油(萃取方法同实施例1)；
组方3：菊花与野菊花分别单独萃取的挥发油混合物(将组方1和组方2的挥发油按照1∶1重量比例混合)；
组方4：菊花与野菊花水蒸气蒸馏提取挥发油的包合物；
组方5：菊花与野菊花二氧化碳超临界萃取挥发油的包合物(按照实施例1方法制备得到)；
1.实验动物：家兔，体重2.0～2.5kg中国药科大学实验动物中心
2.试剂：浓氨水，天津市科密欧化学试剂有限公司批号：140514
松节油，天津市博迪化工有限公司批号：140728
金嗓利咽胶囊，西安碑林药业股份有限公司批号：141201
5.方法与结果
5.1方法
选用幼龄家兔56只，随机分7组，将浓度为2.5％的氨水装入喉头喷雾器内给56只家兔喷咽，每天上、下午各1次，每次喷3下，连续喷16d，其中在造模第7天各给药组开始给药，在第8天用扁桃体注射针将松节油注射于兔咽部黏膜下，每只动物0.5mL，每天观察动物咽部的黏膜形态、色泽及分泌物情况。各组方均给予0.2g/kg的受试样品，空白对照组给予同体积溶剂，阳性对照组给予0.2g/kg利咽胶囊。
5.2结果
5.2.1一般状态从造模第3天起，大部分家兔逐渐出现搔抓口部，频饮水而量不多，口腔分泌物增多，纳食减少，自发活动减少，咽部充血呈暗红色、微肿胀等症状。阳性对照组、组方4、组方5治疗10d后，上述症状体征基本恢复正常。
5.2.2体重及体温变化结果见表13、14；
表13家兔体重变化(kg，n＝8)
与空白对照组比较eP＜0.05，bP＜0.01
表14家兔体温变化(℃，n＝8)
与空白对照组比较eP＜0.05，bP＜0.01
由上表可以看出组方5的治疗效果显著优于其它组方，说明二氧化碳超临界混合萃取疗效优于单独提取和单独提取再混合的组别。
具体实施方式
以下结合具体实施方式对本发明作进一步的详细描述。
实施例1
分别称取菊花和野菊花150g，粉碎，过24目筛，得菊花和野菊花粗粉混合物。将粗粉投入1L萃取釜中，设定萃取压力为35MPa，萃取温度为35℃，分离釜I压力为11MPa，温度为48℃；分离釜II压力为8MPa，温度为36℃；二氧化碳流量11L/h，仪器稳定后萃取60min，收集分离釜I、分离釜II中的萃取物合并并离心分液，分离去除乳白色下层液，取上清液得到菊花野菊花萃取组合物，萃取组合物得率为4.26％。以萃取组合物与β-环糊精比例为1∶6，水用量为萃取组合物4倍重量，包合60min。得到菊花野菊花β-环糊精的包合物，包合物得率为80.62％，油利用率为79.23％，含油率为16.42％。
实施例2
分别称取菊花和野菊花150g，粉碎，过24目筛，得菊花和野菊花粗粉混合物。将粗粉投入1L萃取釜中，设定萃取压力为30MPa，萃取温度为30℃，分离釜I压力为10MPa，温度为45℃；分离釜II压力为8MPa，温度为32℃；二氧化碳流量15L/h，仪器稳定后萃取120min，收集分离釜I、分离釜II中的萃取物合并离心分液，分离去除乳白色下层液，取上清液得到菊花野菊花萃取组合物，挥发油的得率为4.02％。以萃取组合物与β-环糊精比例为1∶4，水用量为萃取组合物5倍重量，包合40min。得到菊花野菊花β-环糊精的包合物，包合物得率为79.88％，油利用率为76.36％，含油率为15.27％。
实施例3
分别称取菊花和野菊花150g，粉碎，过24目筛，得菊花和野菊花粗粉混合物。将粗粉投入1L萃取釜中，设定萃取压力为25MPa，萃取温度为30℃，分离釜I压力为10MPa，温度为50℃；分离釜II压力为7MPa，温度为35℃；二氧化碳流量13L/h，仪器稳定后萃取90min，收集分离釜I、分离釜II中的萃取物合并并离心分液，分离去除乳白色下层液，取上清液得到菊花野菊花萃取组合物，挥发油的得率为3.98％。以萃取组合物与β-环糊精比例为1∶8，水用量为萃取组合物3倍重量，包合20min。得到菊花野菊花β-环糊精的包合物，包合物得率为78.74％，油利用率为76.23％，含油率为15.20％。
实施例4
按照实施例1方法制备得到的包合物粉碎后加入淀粉等辅料按照常规工艺制备得到颗粒剂。
实施例5
按照实施例1方法制备得到的包合物粉碎后加入淀粉等辅料按照常规工艺制备得到颗粒，再压片制得片剂。
实施例6
按照实施例1方法制备得到的包合物粉碎后加入淀粉等辅料按照常规工艺制备得到颗粒，再灌装明胶胶囊皮制得胶囊剂。
实施例7
按照实施例1方法制备得到的包合物粉碎后加入辅料按照常规工艺制备得到蜜丸。
实施例8
按照实施例1方法制备得到的包合物粉碎后加入辅料按照常规工艺制备得到滴丸。
本发明方法得到的包合物还有以下几种特点：(1)包合后掩盖挥发油的气味，嗅味得到改善，(2)包合物溶于水，使其水溶性得到很好的改善，(3)包合物长时间放置不变色。

Claims (8)

1.一种含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物，其特征在于，制备该中药组合物的原料为菊花和野菊花。
2.根据权利要求1所述的含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物，其特征在于，制备该中药组合物的原料菊花和野菊花的重量比为1∶1。
3.一种含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物的制备方法，其特征在于，该中药组合物是通过以下方法制备得到的：
(1)将菊花和野菊花按照重量比例1∶1混合均匀，得菊花和野菊花混合物；
(2)将步骤(1)的菊花和野菊花混合物投入萃取釜中进行超临界萃取，萃取压力为25～35MPa，萃取温度为25～35℃，萃取时间为60～120min，二氧化碳流量为11～15L/h；再用分离釜分离，分离釜I压力为10～11MPa，温度为45～50℃；分离釜II压力为7～8MPa，温度为30～38℃；萃取釜中萃取的物质在两个分离釜中被连续分离，最后收集萃取物；
(3)对分离釜分离的萃取物进行离心分液，分离去除乳白色下层液，取上清液得到野菊花和菊花的萃取组合物；
(4)将萃取组合物与β-环糊精和水利用胶体磨法进行包合。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述的超临界萃取参数为：萃取压力35MPa，萃取温度35℃，二氧化碳流量11L/h，萃取时间为60min；所述的分离釜是由分离釜I和分离釜II组成的一体式设备，分离釜I温度48℃；分离釜II温度36℃。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述的胶体磨法所采用的技术条件为：萃取组合物与β-环糊精的物料重量比为1∶4-1∶6，水用量为萃取组合物重量的3-5倍，包合时间为20-60min。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述的胶体磨法所采用的技术条件为：萃取组合物与β-环糊精的物料比为1∶6，水用量为萃取组合物重量的4倍，包合时间为60min。
7.权利要求3-6任意一项权利要求所述的含有菊花和野菊花挥发油的中药组合物在制备治疗咽炎的药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的咽炎为慢性咽炎或急性咽炎。
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