CN105454731A - 一种四鳃鲈鱼专用的微生物饲料及其制作方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种四鳃鲈鱼专用的微生物饲料及其制作方法，其特征在于，所述微生物饲料的制作方法，包括：发酵菌株的选育；复合菌种的液体高速培养；菌种的固体复合发酵以及添加氨基酸锌和铁,所述微生物饲料由所述制作方法制得。本发明提供的四鳃鲈鱼专用的微生物饲料中，含有丰富的微生物多糖、有益菌，并含有多种活性酶及小肽等活性代谢物质，在饲喂后，可有效促进大分子营养物质在四鳃鲈肠道内的分解，消除饲料原料中的抗营养因子，提高饲料利用率，减少残饵对水质的破坏污染，有助于形成动物机体良性生态环境。

Description

一种四鳃鲈鱼专用的微生物饲料及其制作方法

技术领域

本发明涉及微生物发酵技术领域，尤其涉及一种四鳃鲈鱼专用的微生物饲料及其制作方法。

背景技术

四鳃鲈属于广温广盐性鱼类，适宜水温为3～33℃，且对低温适应能力较强，在-0.9℃时仍可正常生存。因其对盐度的适应范围较广，故在淡水、半咸水、海水中都能正常生长，四鳃鲈属凶猛I生肉食鱼类。

四鳃鲈为肉食性鱼类，自然状态下主要以小型甲壳类、活虾等为食，对病毒、细菌等抗感染力差，十分娇贵。

四鳃鲈为我国国家二级野生保护动物，是一种具有较高观赏价值、商业价值和营养价值的经济鱼类。但是，目前养殖尚未形成规模，这主要是因为四鳃鲈从小到大摄食海淡水动物饵料十多种，松江四鳃鲈进入河流后主要以活虾为食，若进行人工大规模养殖，大多需投喂鲜活饵料，如小鱼、虾等，鲜活饵料不但利用率低，成本较高，而且还污染水质，容易引起四鳃鲈的多种疾病。

因而，饲料是制约其大规模产业化养殖的关键因素。而人工繁殖的松江鲈鱼在孵化后的仔幼鱼养殖阶段，由于天然饵料不足或其成本较高，制约了该鱼的大规模推广。

目前在国内四鳃鲈的配合饲料品种很少，有经过高温膨化的饲料，但是此类饲料的也有诸多缺点：

1)每次投喂时敲打食台或发出声响才能起到诱食作用

2)此类饲料属于高蛋白营养饲料，若鱼吃的慢或者不食，饲料利用率低又极易破坏水质。

3)此类饲料在体内膨胀和过硬而刮伤肠胃，而且可定期适量拌喂多维、助消化的乳酸菌或护肝肠胃的药物。

目前生物技术制成的专用四鳃鲈饲料在市场上处于空白。

发明内容

针对现有的四鳃鲈饲料存在的上述问题，现提供一种四鳃鲈鱼专用的微生物饲料及其制作方法，旨在提供一种四鳃鲈鱼专用的微生物饲料，满足四鳃鲈鱼快速生长的营养需求，改变目前养殖中基本上只能投喂活体饵料的情况，同时还可提高四鳃鲈的非特异性免疫力。

具体技术方案如下：

一种四鳃鲈鱼专用的微生物饲料的制作方法，其特征在于，包含以下四个步骤：

步骤一、发酵菌株的选育

步骤1，将枯草芽孢菌、植物乳杆菌和啤酒酵母菌分别转接入培养基中进行选育培养，将得到的菌株放入冰箱中于2-6℃保存待用；

步骤二、复合菌种的液体高速培养

步骤1，按以下重量比例称取各菌液：地衣芽孢杆菌30-35％、植物乳杆菌14-28％、啤酒酵母菌20-24％、沼泽红假单胞菌20-24％；

步骤2，将所述步骤1中的称取得到的植物乳杆菌和啤酒酵母菌菌株接种于液体培养基中，培养得到复合菌液1；

步骤3，将所述述步骤1中的称取得到的地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌菌株接种于液体培养基中，培养得到复合菌液2；

步骤三、菌种的固体复合发酵

步骤1，将上述步骤二中得到的复合菌液1和复合菌液2接入固体扩大培养基中，进行密封发酵，所述固体扩大培养基中添加0.08-0.1％的二乙胺四乙酸作为产酶诱导剂；

步骤四、微生物饲料的配制

步骤1，称量氨基酸铁和氨基酸锌，并与上述步骤三中得到的发酵产品混合均匀，，得到所述微生物饲料。

上述的制作方法，优选的，所述步骤一中，将枯草芽孢菌、植物乳杆菌和啤酒酵母菌分别转接入装有营养琼脂培养基的茄子瓶中，于35-40℃温度下培养45-50小时；将沼泽红假单胞菌接入装有马铃薯培养基的茄子瓶中于20℃温度下培养5-9天，待茄子瓶表面菌苔布满，并白中带黄时即可取出。

上述的制作方法，优选的，所述步骤二中，将植物乳杆菌和啤酒酵母菌用无菌生理盐水冲洗，并制成复合菌种，按1：20的重量比例接种于经120-128℃、灭菌时间为30-45分钟灭菌的液体培养基中，并于发酵罐中搅拌25-35分钟，搅拌转速为200-220转/每分钟，搅拌均匀后放入消毒后的塑料桶内静置发酵5-7天，当活菌总数达到40亿/毫升，并且pH值达到3.0-4.5时停止发酵。

上述的制作方法，优选的，所述步骤二中，植物乳杆菌和啤酒酵母菌的复合菌种所接入的液体培养基中，各组分及其重量百分比为：玉米浆3-5％、糖蜜12-15％、酵母膏0.2-0.4％、硫酸镁0.2-0.5％、硫酸铵0.5-0.7％、磷酸氢二钠0.2-0.5％、无菌水77.8-83.9％。

上述的制作方法，优选的，所述步骤二中，将地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌菌苔用无菌生理盐水冲洗，并制成复合菌种液，按1：20-25的重量比例接种于经120-180℃、灭菌30-45分钟的液体培养基中进行发酵，发酵时通气量维持在1：1.0-1.2，发酵24-48小时。

上述的制作方法，优选的，所述步骤二中，地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌的复合菌种所接入的液体培养基中，各组分及其重量百分比为：可溶性淀粉2-5％、豆粕粉0.6-1.2％、玉米浆1-6％、磷酸二氢钾0.2-0.6％、草酸1.4-1.8％、硫酸镁0.4-1％、消泡剂0.5-1％、无菌水86-93％。

上述的制作方法，优选的，所述步骤三中，将复合菌液1和复合菌液2按1：20的重量比例混合后，接入经120-128℃、灭菌时间为30-45分钟灭菌的固体扩大培养基中，搅拌30-45分钟至均匀，倒入消毒密封罐中于32-35℃温度下密封发酵8-10天，当水分重量分数为35-40％，pH值为4.5-5.5时停止发酵。

上述的制作方法，优选的，所述步骤三中的固体扩大培养基中，各组分及其重量百分比为：清糠6-8％、豆粕10-13％、进口鱼粉35-39％、大豆粉8-11％、糖蜜8-10％、玉米粉8-10％、磷酸二氢钾0.5-1％、氯化钾1-1.5％、硫酸镁0.4-0.7％、二乙胺四乙酸0.08-0.1％、无菌水13.7％-22.02％。

上述制作方法，优选的，所述步骤四中，按照重量比为1：1称量氨基酸铁和氨基酸锌，再按2-3：100的重量比将氨基酸铁和氨基酸锌的混合物与步骤三中得到的发酵产品混合。

根据上述的制作方法制作的四鳃鲈鱼专用的微生物饲料。

需要注意的是，在没有特殊说明的情况下，本文中所述的比例、含量等概念，均是指重量比例或重量含量。

上述技术方案的有益效果：

本发明提供的四鳃鲈鱼专用的微生物饲料中，含有丰富的微生物多糖、有益菌，并含有多种活性酶及小肽等活性代谢物质，在饲喂后，通过微生物的参与，可有效促进大分子营养物质在四鳃鲈肠道内的分解，使得人工养殖中的配合饲料营养更易全面吸收，消除饲料原料中的抗营养因子；同时，微生物还能调节鱼肠道内的菌群平衡，有助于消化，同时发酵工艺所制定的产品特有的发酵醇香是很好的鱼类诱食剂，提高饲料利用率，减少残饵对水质的破坏污染，有助于形成动物机体良性生态环境，提高四鳃鲈的非特异性免疫力。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但不作为本发明的限定。

实施例一

一种四鳃鲈鱼专用的微生物饲料的制作方法，其中，包含如下四个步骤：

步骤一、发酵菌株的选育

步骤1，将枯草芽孢菌、植物乳杆菌和啤酒酵母菌分别转接入装有营养琼脂的培养基中进行选育培养，于35-40℃温度下培养45-50小时；将沼泽红假单胞菌接入装有马铃薯的培养基中进行选育培养，然后放入冰箱中于2-6℃保存待用；

步骤二、复合菌种的液体高速培养

步骤1，按照重量百分比，称取如下菌液：地衣芽孢杆菌32％、植物乳杆菌28％、啤酒酵母菌20％、沼泽红假单胞菌20％；

步骤2，将步骤1中称取的植物乳杆菌和啤酒酵母菌接种于液体培养基中，静置发酵5-7天，当活菌总数达到40亿/毫升和pH值达到3.0-4.5时停止发酵，得到菌液1；

步骤3，将步骤1中的称取的地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌菌苔接种于液体培养基中发酵24-48小时，得到菌液2；

步骤三、菌种的固体复合发酵

步骤1，将步骤二中所得到的菌液1和菌液2按一定比例混合，然后接入固体扩大培养基中密封发酵；

步骤四、添加氨基酸锌和铁

步骤1，称量氨基酸铁和氨基酸锌，并与步骤三中所得到的发酵产品混合均匀，得到四鳃鲈鱼专用的微生物饲料。

具体的，步骤一中，将枯草芽孢菌、植物乳杆菌和啤酒酵母菌分别转接入装有营养琼脂培养基的茄子瓶中，于35℃温度下培养45小时；将沼泽红假单胞菌接入装有马铃薯培养基的茄子瓶中于20℃温度下培养5天，待茄子瓶表面菌苔布满，并白中带黄时即可取出，然后放入冰箱中于2℃保存。

具体的，步骤二中，将植物乳杆菌和啤酒酵母菌用无菌生理盐水冲洗，并制成复合菌种，按1：20的比例接种于经120℃、灭菌时间为30分钟灭菌的液体培养基中，并于发酵罐中搅拌25分钟，搅拌转速为220转/每分钟，搅拌均匀后放入消毒后的塑料桶内静置5天，当活菌总数达到40亿/毫升和pH值达到3.0小时停止发酵，得到复合菌液1。

具体的，步骤二中，植物乳杆菌和啤酒酵母菌所接入的液体培养基中，各组分及其重量百分比为：玉米浆4％、糖蜜13％、酵母膏0.3％、硫酸镁0.3％、硫酸铵0.6％、磷酸氢二钠0.4％、无菌水81.4％。

具体的，步骤二中，将地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌菌苔用无菌生理盐水冲洗，并制成复合菌种液，按1：20的比例接种于经120℃、灭菌30分钟的液体培养基中进行发酵，发酵时通气量维持在1：1.0，发酵时间24小时，得到复合菌液2。

具体的，步骤二中，地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌所接入的液体培养基中，各组分及其重量百分比为：可溶性淀粉3％、豆粕粉1％、玉米浆3％、磷酸二氢钾0.4％、草酸1％、硫酸镁0.6％、消泡剂0.7％、无菌水90.3％。

具体的，步骤三中，将步骤二中得到的复合菌液1和复合菌液2按1：20的重量比例混合后，接入经120℃、灭菌时间为30分钟灭菌的固体扩大培养基中，在培养基中添加0.08％的二乙胺四乙酸作为产酶诱导剂，搅拌30分钟至均匀，倒入消毒密封罐中于32℃温度下密封发酵8天，当测定水分为35％，pH值为4.5时停止发酵。

具体的，步骤三中，固体扩大培养基中，各组分及其重量百分比为：清糠7％、豆粕12％、进口鱼粉37％、大豆粉9％、糖蜜9％、玉米粉9％、磷酸二氢钾0.8％、氯化钾1.2％、硫酸镁0.6％、二乙胺四乙酸0.09％、无菌水14.31％。

具体的，步骤四中，按照重量比为1：1称量氨基酸铁和氨基酸锌，混合后按2：100的重量比例添加到步骤三中所获得的发酵产品中。

实施例二

一种四鳃鲈鱼专用的微生物饲料的制作方法，包括以下四个步骤：

步骤一、发酵菌株的选育

步骤1，将枯草芽孢菌、植物乳杆菌和啤酒酵母菌分别转接入培养基中进行选育培养；将沼泽红假单胞菌接入培养基中进行选育培养，然后放入冰箱中于2-6℃保存待用；

步骤二、复合菌种的液体高速培养

步骤1，按照重量百分比，称取如下菌液：地衣芽孢杆菌30％、植物乳杆菌18％、啤酒酵母菌24％、沼泽红假单胞24％；

步骤2，将步骤1中称取的植物乳杆菌和啤酒酵母菌接种于液体培养基，培养得到复合菌液1；

步骤3，将步骤1中称取的地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌接种于液体培养基中，培养得到复合菌液2；

步骤三、菌种的固体复合发酵

步骤1，将上述步骤二中得到的复合菌液1和复合菌液2混合后，接入固体扩大培养基中密封发酵；

步骤四、添加氨基酸锌和铁

步骤1，称量氨基酸铁和氨基酸锌，并与上述步骤三中得到的发酵产品混合，得到四鳃鲈鱼专用的微生物饲料。

具体的，步骤一中，将枯草芽孢菌、植物乳杆菌和啤酒酵母菌分别转接入装有营养琼脂培养基的茄子瓶中，于30℃温度下培养50小时；将沼泽红假单胞菌接入装有马铃薯培养基的茄子瓶中于20℃温度下培养5天，待茄子瓶表面菌苔布满，并白中带黄时即可取出，然后放入冰箱中于2℃保存。

具体的，步骤二中，将植物乳杆菌和啤酒酵母菌用无菌生理盐水冲洗，并制成复合菌种，按1：20的比例接种于经128℃、灭菌时间为40分钟灭菌的液体培养基中，并于发酵罐中搅拌30分钟，搅拌转速为200转/每分钟，搅拌均匀后放入消毒后的塑料桶内静置6天，当活菌总数达到40亿/毫升和pH值达到4小时停止发酵，得到复合菌液1。

具体的，步骤二中，植物乳杆菌和啤酒酵母菌的复合菌种所接入的液体培养基中，各组分及其重量百分比为：玉米浆3％、糖蜜12％、酵母膏0.2％、硫酸镁0.2％、硫酸铵0.5％、磷酸氢二钠0.2％、无菌水77.8％。

具体的，步骤二中，将地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌菌苔用无菌生理盐水冲洗，并制成复合菌种液，按1：23的比例接种于经150℃、灭菌40分钟的液体培养基中进行发酵，发酵时通气量维持在1：1.1，发酵时间36小时，得到菌液2。

具体的，步骤二中，地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌的复合菌种所接入的液体培养基中，各组分及其重量百分比为：可溶性淀粉2％、豆粕粉0.6％、玉米浆1％、磷酸二氢钾0.2％、草酸1.4％、硫酸镁0.4％、消泡剂0.5％、无菌水86％。

具体的，步骤三中，将复合菌液1和复合菌液2按1：23的重量比例混合后，接入经160℃、灭菌时间为30分钟灭菌的固体扩大培养基中，在培育基中添加0.09％的二乙胺四乙酸作为产酶诱导剂，搅拌36分钟至均匀，倒入消毒密封罐中于33℃温度下密封发酵9天，当测定水分为37％，pH值为4.6时停止发酵；

具体的，步骤三中，固体扩大培养基，各组分及其重量百分比为：清糠6％、豆粕10％、进口鱼粉35％、大豆粉8％、糖蜜8％、玉米粉8％、磷酸二氢钾0.5％、氯化钾1％、硫酸镁0.4％、二乙胺四乙酸0.08％、无菌水13.7％。

具体的，步骤四中，按照1：1的重量比称量氨基酸铁和氨基酸锌，并按2.5：100的重量比例将氨基酸铁和氨基酸锌的混合物添加到步骤三中所得到的发酵产品中。

实施例三

一种四鳃鲈鱼专用的微生物饲料的制作，包括以下四个步骤：

步骤一、发酵菌株的选育

步骤1，将枯草芽孢菌、植物乳杆菌和啤酒酵母菌分别转接入培养基中进行选育培养；将沼泽红假单胞菌接入培养基中进行选育培养，然后放入冰箱中于2-6℃保存待用；

步骤二、复合菌种的液体高速培养

步骤1，按照重量百分比，称取如下菌液：地衣芽孢杆菌35％、植物乳杆菌25％、啤酒酵母菌20％、沼泽红假单胞菌20％；

步骤2，将步骤1中称取的植物乳杆菌和啤酒酵母菌接种于液体培养基，培养得到复合菌液1；

步骤3，将步骤1中称取的地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌菌苔接种于液体培养基中，培养得到复合菌液2；

步骤三、菌种的固体复合发酵

步骤1，将上述步骤二中得到的菌液1和菌液2混合后，接入固体扩大培养基中密封发酵；

步骤四、添加氨基酸锌和铁

步骤1，称量氨基酸铁和氨基酸锌，并与上述步骤三中得到的发酵产品混合，得到四鳃鲈鱼专用的微生物饲料。

具体的，步骤一中，将枯草芽孢菌、植物乳杆菌和啤酒酵母菌分别转接入装有营业琼脂培养基的茄子瓶中，于40℃温度下培养45小时；将沼泽红假单胞菌接入装有马铃薯培养基的茄子瓶中于20℃温度下培养8天，待茄子瓶表面菌苔布满，并白中带黄时即可取出，然后放入冰箱中于2℃保存。

具体的，步骤二中，将步骤1中的称取的植物乳杆菌和啤酒酵母菌用无菌生理盐水冲洗，并制成复合菌种，按1：20的比例接种于经128℃、灭菌时间为40分钟灭菌的液体培养基中，并于发酵罐中搅拌35分钟，搅拌转速为220转/每分钟，搅拌均匀后放入消毒后的塑料桶内静置7天，当活菌总数达到40亿/毫升和pH值达到4.5小时停止发酵，得到菌液1。

具体的，步骤二中，乳酸菌和啤酒酵母菌的液体培养基中，按照重量百分比，包括：玉米浆5％、糖蜜15％、酵母膏0.4％、硫酸镁0.5％、硫酸铵0.7％、磷酸氢二钠0.5％、无菌水77.9％。

具体的，步骤二中，地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌的液体培养：将按步骤(1)中的比例称取的地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌菌苔用无菌生理盐水冲洗，并制成复合菌种液，按1：25的比例接种于经170℃、灭菌42分钟的液体培养基中进行发酵，发酵时通气量维持在1：1.2，发酵时间48小时，得到菌液2。

具体的，步骤二中，地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌的培养基中，按照重量百分比，包括：可溶性淀粉4％、豆粕粉1.1％、玉米浆5％、磷酸二氢钾0.4％、草酸1.6％、硫酸镁1％、消泡剂0.9％、无菌水86％。

具体的，步骤三中，将步骤二中所获得的复合菌液1和复合菌液2按1：20的比例混合后，接入经160℃、灭菌时间为30分钟灭菌的固体扩大培养基中，在培育基中添加0.1％的二乙胺四乙酸作为产酶诱导剂，搅拌40分钟至均匀，倒入消毒密封罐中于35℃温度下密封发酵9天，当测定水分为37％，pH值为4.5时停止发酵。

具体的，步骤三中，固体扩大培养基中，按照重量百分比，还包括：清糠8％、豆粕10％、进口鱼粉37％、大豆粉10％、糖蜜9％、玉米粉9％、磷酸二氢钾0.8％、氯化钾1.3％、硫酸镁0.5％、二乙胺四乙酸0.09％、无菌水14.31％。

具体的，步骤四中，按照重量比为1：1称量氨基酸铁、氨基酸锌，并按3：100的重量比例将氨基酸铁和氨基酸锌的混合物添加到步骤三中所获得的发酵产品中。

以上仅为本发明较佳的实施例，并非因此限制本发明的实施方式及保护范围，对于本领域技术人员而言，应当能够意识到凡运用本发明说明书内容所作出的等同替换和显而易见的变化所得到的方案，均应当包含在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种四鳃鲈鱼专用的微生物饲料的制作方法，其特征在于，包含以下四个步骤：

步骤一、发酵菌株的选育

步骤1，将枯草芽孢菌、植物乳杆菌和啤酒酵母菌分别转接入培养基中进行选育培养，将选育得到的菌株放入冰箱中于2-6℃保存待用；

步骤二、复合菌种的液体高速培养

步骤1，按以下重量比例称取各菌液：地衣芽孢杆菌30-35％、植物乳杆菌14-28％、啤酒酵母菌20-24％、沼泽红假单胞菌20-24％；

步骤2，将所述步骤1中称取得到的植物乳杆菌和啤酒酵母菌菌株接种于液体培养基中，培养得到复合菌液1；

步骤3，将所述步骤1中称取得到的地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌菌株接种于液体培养基中，培养得到复合菌液2；

步骤三、菌种的固体复合发酵

步骤1，将所述步骤二中得到的复合菌液1和复合菌液2接入固体扩大培养基中，进行密封发酵，所述固体扩大培养基中添加0.08-0.1％重量比例的二乙胺四乙酸作为产酶诱导剂；

步骤四、微生物饲料的配制

步骤1，称量氨基酸铁和氨基酸锌，并与所述步骤三中得到的发酵产品混合均匀，得到所述微生物饲料。

2.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述步骤一中，将枯草芽孢菌、植物乳杆菌和啤酒酵母菌分别转接入装有营养琼脂培养基的茄子瓶中，于35-40℃温度下培养45-50小时；将沼泽红假单胞菌接入装有马铃薯培养基的茄子瓶中于20℃温度下培养5-9天，待茄子瓶表面菌苔布满，并且白中带黄时即可取出。

3.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述步骤二中，将植物乳杆菌和啤酒酵母菌用无菌生理盐水冲洗，并制成复合菌种，按1：20的重量比例接种于经120-128℃、灭菌时间为30-45分钟灭菌的液体培养基中，并于发酵罐中搅拌25-35分钟，搅拌转速为200-220转/每分钟，搅拌均匀后放入消毒后的塑料桶内静置发酵5-7天，当活菌总数达到40亿/毫升，并且pH值达到3.0-4.5时停止发酵。

4.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述步骤二中的液体培养基中，各组分及其重量百分比为：玉米浆3-5％、糖蜜12-15％、酵母膏0.2-0.4％、硫酸镁0.2-0.5％、硫酸铵0.5-0.7％、磷酸氢二钠0.2-0.5％、无菌水77.8-83.9％。

5.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述步骤二中，将地衣芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌菌苔用无菌生理盐水冲洗，并制成复合菌种液，按1：20-25的重量比例接种于经120-180℃、灭菌30-45分钟的液体培养基中进行发酵，发酵时通气量维持在1：1.0-1.2，发酵时间24-48小时。

6.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述步骤二中的液体培养基中，各组分及其重量百分比为：可溶性淀粉2-5％、豆粕粉0.6-1.2％、玉米浆1-6％、磷酸二氢钾0.2-0.6％、草酸1.4-1.8％、硫酸镁0.4-1％、消泡剂0.5-1％、无菌水86-93％。

7.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述步骤三中，将复合菌液1和复合菌液2按1：20的重量比例混合后，接入经120-128℃、灭菌时间为30-45分钟灭菌的固体扩大培养基中，搅拌30-45分钟至均匀，倒入消毒密封罐中于32-35℃温度下密封发酵8-10天，当水分为35-40％，pH值为4.5-5.5时停止发酵。

8.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述步骤三中的固体扩大培养基中，各组分及其重量百分比为：清糠6-8％、豆粕10-13％、进口鱼粉35-39％、大豆粉8-11％、糖蜜8-10％、玉米粉8-10％、磷酸二氢钾0.5-1％、氯化钾1-1.5％、硫酸镁0.4-0.7％、二乙胺四乙酸0.08-0.1％、无菌水13.7％-22.02％。

9.根据权利要求1所述制作方法，其特征在于，所述步骤四中，按照重量比为1：1称量氨基酸铁和氨基酸锌，再按2-3:100的重量比将所述氨基酸铁、氨基酸锌的混合物与所述步骤三中得到的发酵产品混合。

10.根据权利要求1-9任意一项所述的制作方法制作的四鳃鲈鱼专用的微生物饲料。