CN106107023A - 一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法 - Google Patents

一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106107023A
CN106107023A CN201610723778.4A CN201610723778A CN106107023A CN 106107023 A CN106107023 A CN 106107023A CN 201610723778 A CN201610723778 A CN 201610723778A CN 106107023 A CN106107023 A CN 106107023A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fermentation
culture
medium
condition
sterilizing
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201610723778.4A
Other languages
English (en)
Inventor
于长青
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Sloan Biological Technology Co Ltd
Original Assignee
Beijing Sloan Biological Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beijing Sloan Biological Technology Co Ltd filed Critical Beijing Sloan Biological Technology Co Ltd
Priority to CN201610723778.4A priority Critical patent/CN106107023A/zh
Publication of CN106107023A publication Critical patent/CN106107023A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法，其特征在于：制备方法为：将按重量分计的腐植酸发酵原料，豆粕粉，玉米粉，葡萄糖，无机盐，水按常规方法制备成培养基；然后用蒸汽对培养基进行灭菌，之后对培养基进行冷却；将微生物混合发酵液接种到培养基上，先进行好氧发酵，然后进行厌氧发酵厌氧发酵结束得到降解的腐植酸发酵液，经干燥制得腐植酸基微生态产品。本发明基于合生发酵原理，能有效提高动物生产性能；提高低值矿源的高效利用率；对改善动物肠道健康，提高动物采食量，控制动物腹泻有益处；可以降低饲料中氧化锌和抗生素的使用量，保护生态环境等方面有良好效益。

Description

一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种腐植酸饲料及其制备方法，特别涉及一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法。
背景技术
腐植酸(Humic Acid，HA)是动植物的遗骸，主要是植物的遗骸，经过微生物的分解和转化，以及地球化学的一系列过程，先分解为比较简单的有机化合物，然后再经过缩合作用最终形成的一种无定型高分子化合物。主要由核、桥键与活性基团组成。腐植酸中含有多种活性官能团，可激活多种酶类，如多酚氧化酶、过氧化物酶、抗坏血酸酶，还能促进细胞吸收及代谢，增强动物的免疫功能，提高抗病力。刺激胃壁黏膜，增加胃液分泌，从而增加食欲；能兴奋副交感神经，促进肠管蠕动，增加腺体分泌，促进消化吸收，增加有机物积累；激活己糖激酶，促进葡萄糖的吸收利用；促进消化酶的活力，有效地分解营养物质，游离出芳香烃从而提高饲料的适口性，从而增加食欲，改善饲料报酬。目前市场动物腐植酸均为腐植酸钠单一产品，且腐植酸钠产品质量良莠不齐，有干法、湿法、干湿混合等多种生产方法，大部分厂家生产设备简陋、卫生条件差，使最终产品有效成分含量不均一，重金属、杂质含量偏高，长期饲喂动物，导致腐植酸钠效果不稳定，甚至会给动物带来副作用。
发明内容
为了解决上述问题，本发明公开了一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法。本发明利用“合生发酵理论”，依据腐植酸是微生物长期酵解植物或动物遗骸的产物，将自然发酵工艺在发酵罐中快速、优化进行，腐植酸经微生物发酵转化后，分子量变小，甲基含量降低，而羰基、羧基、羟基等活性官能团数量增加，可激活体内多种酶如多酚氧化酶、过氧化物酶、抗坏血酸酶，还能促进细胞吸收及代谢，增强动物的免疫功能，提高抗病力。尤其是增加了抗腹泻能力。所用菌株经腐植酸诱导后，菌株活力增强，繁殖更快，抗逆性强，定值速度加快。
一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法，其制备方法为：
步骤一：将按重量分计的腐植酸发酵原料60-100份通过60目筛子，豆粕粉6-10份，玉米粉6-10份，葡萄糖2-6份，无机盐0-0.3份，水120-180份按常规方法制备成培养基；
步骤二：然后用蒸汽对培养基进行灭菌，100-135℃灭菌15-30分钟，之后对培养基进行冷却到28℃-35℃培养温度；将微生物混合发酵液接种到培养基上，接种比例为0.9-1.2∶0.05-0.2，先进行好氧发酵，发酵条件为搅拌速度160-200r/min，开始通气比调至1∶0.4-0.7，培养期间灌压要保持在0.03-0.06pa，随着菌体的不断生长溶氧值也逐渐发生变化，因此需要调通气比和搅拌速度使溶氧相对值20％-40％，发酵时间36-48小时，发酵温度32-35℃；然后进行厌氧发酵，发酵条件为静置发酵，发酵时间48-60小时，发酵温度32℃-35℃，每六小时搅拌1分钟；厌氧发酵结束得到降解的腐植酸发酵液，经干燥制得腐植酸基微生态产品。
所述腐植酸原料为腐植酸钠、风化煤、褐煤、泥炭中的一种或多种。
所述的无机盐为磷酸二氢钾、硫酸亚铁、硫酸铜、硫酸镁、硫酸锌、硫酸锰、氯化钙中的一种或多种的复配。
所述微生物混合发酵液由枯草芽孢杆菌发酵液、地衣芽孢杆菌发酵液、植物乳杆菌发酵液、嗜酸乳杆菌按重量比35-45％∶35-45％∶8-12％∶8-12％的比例混合而成。
所述的微生物混合发酵液，其生产工艺如下：
A：枯草芽孢杆菌发酵液的生产：
1)固体培养基为：葡萄糖1-3％、蛋白胨1-3％、酵母膏0.3-0.6％、琼脂1-4％，蒸馏水90％-97％，调节培养基pH为6.5-7.0、110-120℃灭菌16-20分钟；培养条件：放入25-35℃恒温培养箱中培养22-26h；
2)将上述所得物质进行摇瓶培养，培养基为：葡萄糖1-3％、蛋白胨0.5-2％、酵母膏0.3-0.8％，水94-99％，调节摇瓶培养基pH为6.5-7.0、110-120℃灭菌16-20分钟；培养条件：在上述所得菌种中挑选生长健壮的菌落接入摇瓶，放入25-35℃恒温摇床中，180-230r/min振荡培养22-26h；
3)将上述所得物质进行种子罐、发酵罐扩繁：培养基为：豆粕0.5-1.3％、玉米0.2-0.8％、蔗糖1-3％、蛋白胨0.5-1.2％、酵母膏0.3-0.8％、磷酸二氢钾0.05-0.8％、硫酸铵0.1-0.3％、氯化钠0.02-0.05％、消泡剂0.02-0.07％，水90-98％，培养基起始pH＝7.0-7.5、115-130℃灭菌20-40分钟；培养条件：摇瓶到种子罐接种量及种子罐到发酵罐按3-7％接种，种子罐培养时间为22-26h，发酵罐培养时间为30-40h；
B：地衣芽孢杆菌发酵液的生产：
1)固体培养基为：蛋白胨8-12％，牛肉膏1-5％，NaCl 3-7％，琼脂12-18％，蒸馏水58％-76％，调节培养基pH7.0-7.5，105-125℃灭菌15-20分钟；培养条件：放入30-35℃恒温培养箱中培养22-24h；
2)将上述所得物质进行摇瓶种子培养：培养基为蛋白胨8-12％，牛肉膏1-5％，NaCl 3-7％，琼脂12-18％，蒸馏水58％-76％，调节培养基pH7.0-7.5，105-125℃灭菌15-20分钟；培养条件：放入30-35℃恒温培养箱中培养22-24h；培养条件：将上述所得菌种接入摇瓶，放入30-35℃恒温摇床中，180-220r/min振荡培养22-26h；
3)种子罐、发酵罐扩繁培养：培养基为：豆粕2-7％、糖蜜0.5-1.5％、蛋白胨0.3-0.8％、酵母膏0.1-0.5％、磷酸二氢钾0.05-0.2％、硫酸铵0.05-0.5％、氯化钠0-0.08％、豆油0.05-0.25％、消泡剂0-0.1％，水89-97％，调节培养基pH＝6.5-7.5、115-125℃灭菌25-35分钟；培养条件：摇瓶到种子罐及种子罐到发酵罐接种量按3-7％接种，种子罐培养时间为22-26h，发酵罐培养时间为32-40h；
C：植物乳杆菌发酵液的生产：
1)固体培养基为：葡萄糖0.5-1.5％、蛋白胨0.5-1.5％、酵母膏0.1-0.8％、牛肉膏0.1-0.8％、磷酸二氢钾0.05-0.15％、琼脂1-3％，水93％-98％，调节培养基pH值到6.5-7.0、110-120℃灭菌15-25分钟；培养条件：放入30-35℃恒温培养箱中厌氧培养22-24h；
2)摇瓶种子培养：培养基为：葡萄糖0.5-1.5％、蛋白胨0.5-1.5％、酵母膏0.1-0.8％、牛肉膏0.1-0.8％、磷酸二氢钾0.05-0.15％，琼脂1-3％，水93％-98％，调节培养基pH值到6.5-7.0、110-120℃灭菌15-25分钟；培养条件：将上述所得菌种接入摇瓶厌氧培养22-26h；
3)种子罐、发酵罐扩繁培养：培养基为：豆粕0.5-1.5％、玉米0.2-0.7％、蔗糖0.5-1.5％、蛋白胨1-2％、酵母膏0.2-0.7％、磷酸二氢钾0.1-0.5％、硫酸铵0.1-0.5％、乙酸钠0.3-0.8％、柠檬酸三钠0.1-0.5％、吐温80 0.05-0.2％、硫酸镁0.01-0.05％、豆油0.1-0.3％、消泡剂0.03-0.07％，水93％-97％，起始pH＝6.5-7.0、110-125℃灭菌25-40分钟；培养条件：摇瓶到种子罐及种子罐到发酵罐接种量按3-7％接种，种子罐培养时间为22-24h，发酵罐培养时间为30-40h；
D.嗜酸乳杆菌发酵液的生产：
1)斜面培养基为：葡萄糖0.5-1.5％、蛋白胨0.5-1.5％、酵母膏0.2-0.8％、牛肉膏0.2-0.8％、磷酸二氢钾0.05-0.2％、琼脂0.5-4％，水92-99％调节培养基pH＝6.5-7.0、110-125℃灭菌15-20分钟；培养条件：将试管菌种扩繁至培养皿，放入30-40℃恒温培养箱中厌氧培养22-26h；
2)摇瓶种子培养：培养基为：葡萄糖0.5-1.5％、蛋白胨0.5-1.5％、酵母膏0.2-0.8％、牛肉膏0.2-0.8％、磷酸二氢钾0.05-0.2％，水96-99％调节培养基pH＝6.8、110-125℃灭菌15-20分钟；培养条件：将培养皿菌种接入摇瓶厌氧培养22-26h；
3)种子罐、发酵罐扩繁培养：培养基为：豆粕0.5-1.5％、玉米0.3-0.8％、蔗糖0.5-1.5％、蛋白胨1-3％、酵母膏0.2-1％、磷酸二氢钾0.05-0.3％、硫酸铵0.1-0.3％、乙酸钠0.3-0.8％、柠檬酸三钠0.05-0.3％、吐温800.4-1％、硫酸镁0-0.05％、豆油0.05-0.1％、消泡剂0.01-0.08％，水90％-97％，调节培养基pH＝6.5-7.0、110-130℃灭菌25-40分钟；培养条件：摇瓶到种子罐及种子罐到发酵罐接种量按3-8％接种，种子罐培养时间为22-26h，发酵罐培养时间为30-40h。
本发明一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法具有如下优点：
(1)本发明基于合生发酵原理，筛选出对腐植酸有很好降解能力的复合菌，腐植酸经微生物降解后，分子量变小，生理活性提高，更易被动物利用；而微生物经腐植酸诱导后，抗逆性增强，胞外酶产量增加，如淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、半纤维素酶等，分泌许多小肽、胞外多糖，这些物质对病原菌、有抑制和杀伤的作用，还分泌一些促生长因子，能有效提高动物生产性能；
(2)本发明可以直接降解风化煤、泥炭等含腐植酸较高的低阶煤中的腐植酸，提高低值矿源的高效利用率；
(3)本发明生产出的腐植酸基微生态可广泛用于畜禽水产各类饲料，对改善动物肠道健康，提高动物采食量，控制动物腹泻有益处；
(4)使用本产品可以降低饲料中氧化锌和抗生素的使用量，对提高畜产品安全、减少动物粪便中锌和抗生素的排放，保护生态环境等方面有良好效益。
下面通过实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。
具体实施方式：
实施例1：
一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法，制备方法为：
步骤一：将按重量分计的腐植酸钠、风化煤、褐煤、泥炭80份通过60目筛子，豆粕粉8份，玉米粉8份，葡萄糖4份，磷酸二氢钾、硫酸亚铁、硫酸铜、氯化钙混合后的无机盐0.2份，水150份按常规方法制备成培养基；
步骤二：然后用蒸汽对培养基进行灭菌，120℃灭菌18分钟，之后对培养基进行冷却到32℃培养温度；将微生物混合发酵液接种到培养基上，接种比例为1∶0.1，先进行好氧发酵，发酵条件为搅拌速度180r/min，开始通气比调至1∶0.5，培养期间灌压要保持在0.05pa，随着菌体的不断生长溶氧值也逐渐发生变化，因此需要调通气比和搅拌速度使溶氧相对值30％，发酵时间45小时，发酵温度33℃；然后进行厌氧发酵，发酵条件为静置发酵，发酵时间50小时，发酵温度33℃，每六小时搅拌1分钟；厌氧发酵结束得到降解的腐植酸发酵液，经干燥制得腐植酸基微生态产品。
所述的微生物混合发酵液，其生产工艺如下：
A：枯草芽孢杆菌发酵液的生产：
1)固体培养基为：葡萄糖2％、蛋白胨2％、酵母膏0.5％、琼脂3％，蒸馏水92.5％，调节培养基pH为6.8、115℃灭菌18分钟；培养条件：放入33℃恒温培养箱中培养24h；
2)将上述所得物质进行摇瓶培养，培养基为：葡萄糖2％、蛋白胨1％、酵母膏0.5％，水96.5％，调节摇瓶培养基pH为6.8、温度在115℃灭菌18分钟；培养条件：在上述所得菌种中挑选生长健壮的菌落接入摇瓶，放入25-35℃恒温摇床中，180-230r/min振荡培养22-26h；
3)将上述所得物质进行种子罐、发酵罐扩繁：培养基为：豆粕0.8％、玉米0.5％、蔗糖2％、蛋白胨0.8％、酵母膏0.5％、磷酸二氢钾0.3％、硫酸铵0.2％、氯化钠0.05％、消泡剂0.05％，水94.8％，培养基起始pH＝7.2、120℃灭菌30分钟；培养条件：摇瓶培养所得到种子罐接种量按5％接种，种子罐培养时间为24h，发酵罐培养时间为35h；
B：地衣芽孢杆菌发酵液的生产：
1)固体培养基为：蛋白胨10％，牛肉膏3％，NaCl5％，琼脂15％，蒸馏水67％，调节培养基pH7.2，115℃灭菌18分钟；培养条件：放入32℃恒温培养箱中培养23h；
2)将上述所得物质进行摇瓶种子培养：培养基为蛋白胨10％，牛肉膏3％，NaCl5％，琼脂15％，蒸馏水67％，调节培养基pH7.2，115℃灭菌18分钟；培养条件：放入32℃恒温培养箱中培养23h；培养条件：将上述所得菌种接入摇瓶，放入32℃恒温摇床中，200r/min振荡培养23h；
3)种子罐、发酵罐扩繁培养：培养基为：豆粕5％、糖蜜5％、蛋白胨0.5％、酵母膏0.3％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸铵0.2％、氯化钠0.05％、豆油0.1％、消泡剂0.1％，水88.65％，调节培养基pH＝7.0、120℃灭菌30分钟；培养条件：摇瓶到种子罐接种量按5％接种，种子罐培养时间为24h，发酵罐培养时间为35h
C：植物乳杆菌发酵液的生产：
1)固体培养基为：葡萄糖1％、蛋白胨1％、酵母膏0.5％、牛肉膏0.5％、磷酸二氢钾0.1％、琼脂2％，水94.9％调节培养基pH值到6.8、115℃灭菌18分钟；培养条件：放入32℃恒温培养箱中厌氧培养24h；
2)摇瓶种子培养：葡萄糖1％、蛋白胨1％、酵母膏0.5％、牛肉膏0.5％、磷酸二氢钾0.1％、琼脂2％，水94.9％调节培养基pH值到6.8、115℃灭菌18分钟；培养条件：将上述所得菌种接入摇瓶厌氧培养24h；
3)种子罐、发酵罐扩繁培养：培养基为：豆粕1％、玉米0.5％、蔗糖0.1％、蛋白胨1.5％、酵母膏0.5％、磷酸二氢钾0.3％、硫酸铵0.3％、乙酸钠0.5％、柠檬酸三钠0.3％、吐温800.1％、硫酸镁0.03％、豆油0.2％、消泡剂0.05％，水93.65％，起始pH＝6.8、115℃灭菌30分钟；培养条件：摇瓶到种子罐接种量按5％接种，种子罐培养时间为24h，发酵罐培养时间为35h；
D.嗜酸乳杆菌发酵液的生产：
1)斜面培养基为：1)固体培养基为：葡萄糖1％、蛋白胨1％、酵母膏0.5％、牛肉膏0.5％、磷酸二氢钾0.1％、琼脂2％，水94.9％调节培养基pH值到6.8、115℃灭菌18分钟；培养条件：将试管菌种扩繁至培养皿，放入32℃恒温培养箱中厌氧培养24h；
2)摇瓶种子培养：培养基为葡萄糖1％、蛋白胨1％、酵母膏0.5％、牛肉膏0.5％、磷酸二氢钾0.1％、水96.9％调节培养基pH值到6.8、115℃灭菌18分钟；培养条件：将培养皿菌种接入摇瓶厌氧培养24h；
3)种子罐、发酵罐扩繁培养：培养基为：豆粕1％、玉米0.5％、蔗糖1％、蛋白胨2％、酵母膏0.5％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸铵0.2％、乙酸钠0.5％、柠檬酸三钠0.1％、吐温800.8％、硫酸镁0.02％、豆油0.08％、消泡剂0.05％，水93.2％，调节培养基pH＝6.8、120℃灭菌35分钟；培养条件：摇瓶到种子罐接种量按5％接种，种子罐培养时间为24h，发酵罐培养时间为35h。
将A-D所得发酵液即枯草芽孢杆菌发酵液、地衣芽孢杆菌发酵液、植物乳杆菌发酵液、嗜酸乳杆菌按重量比40％∶40％∶10％∶10％的比例混合即得微生物混合发酵液。
实施例2：一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法，制备方法为：
步骤一：将按重量分计的腐植酸发酵原料腐植酸钠、褐煤70份通过60目筛子，豆粕粉6份，玉米粉6份，葡萄糖6份，由硫酸亚铁、硫酸镁、硫酸锌、氯化钙组成的无机盐0.1份，水150份按常规方法制备成培养基；
步骤二：然后用蒸汽对培养基进行灭菌，110℃灭菌25分钟，之后对培养基进行冷却到30℃培养温度；将微生物混合发酵液接种到培养基上，接种比例为1∶0.15，先进行好氧发酵，发酵条件为搅拌速度170r/min，开始通气比调至1∶0.6，培养期间灌压要保持在0.04pa，随着菌体的不断生长溶氧值也逐渐发生变化，因此需要调通气比和搅拌速度使溶氧相对值25％，发酵时间40小时，发酵温度35℃；然后进行厌氧发酵，发酵条件为静置发酵，发酵时间55小时，发酵温度35℃，每六小时搅拌1分钟；厌氧发酵结束得到降解的腐植酸发酵液，经干燥制得腐植酸基微生态产品。
所述的微生物混合发酵液，其生产工艺如下：
A：枯草芽孢杆菌发酵液的生产：
1)固体培养基为：葡萄糖3％、蛋白胨3％、酵母膏0.3％、琼脂2％，蒸馏水91.2％，调节培养基pH为7.0、110℃灭菌20分钟；培养条件：放入30℃恒温培养箱中培养25h；
2)将上述所得物质进行摇瓶培养，培养基为：葡萄糖3％、蛋白胨1％、酵母膏0.5％，水95.5％，调节摇瓶培养基pH为7.0、110℃灭菌20分钟；培养条件：在上述所得菌种中挑选生长健壮的菌落接入摇瓶，放入30℃恒温摇床中，200r/min振荡培养25h；
3)将上述所得物质进行种子罐、发酵罐扩繁：培养基为：豆粕0.9％、玉米0.7％、蔗糖3％、蛋白胨1％、酵母膏0.6％、磷酸二氢钾0.2％、硫酸铵0.2％、氯化钠0.04％、消泡剂0.06％，水93.3％，培养基起始pH＝7.0、125℃灭菌38分钟；培养条件：摇瓶培养所得到种子罐接种量按6％接种，种子罐培养时间为26h，发酵罐培养时间为35h；
B：地衣芽孢杆菌发酵液的生产：
1)固体培养基为：蛋白胨10％，牛肉膏4％，NaCl3％，琼脂13％，蒸馏水70％，调节培养基pH7.1，115℃灭菌20分钟；培养条件：放入30℃恒温培养箱中培养24h；
2)将上述所得物质进行摇瓶种子培养：培养基为蛋白胨9％，牛肉膏3％，NaCl7％，琼脂12％，蒸馏水69％，调节培养基pH7.1，125℃灭菌16分钟；培养条件：放入34℃恒温培养箱中培养23h；培养条件：将上述所得菌种接入摇瓶，放入34℃恒温摇床中，180r/min振荡培养23h；
3)种子罐、发酵罐扩繁培养：培养基为：豆粕5％、糖蜜1.5％、蛋白胨0.8％、酵母膏0.4％、磷酸二氢钾0.2％、硫酸铵0.3％、氯化钠0.01％、豆油0.25％、消泡剂0.1％，水91.44％，调节培养基pH＝7.1、120℃灭菌30分钟；培养条件：摇瓶到种子罐接种量按6％接种，种子罐培养时间为25h，发酵罐培养时间为32h；
C：植物乳杆菌发酵液的生产：
1)固体培养基为：葡萄糖1.5％、蛋白胨0.5％、酵母膏0.3％、牛肉膏0.2％、磷酸二氢钾0.05％、琼脂1％，水96.45％，调节培养基pH值到6.5、113℃灭菌22分钟；培养条件：放入31℃恒温培养箱中厌氧培养23h；
2)摇瓶种子培养：培养基为：葡萄糖1.5％、蛋白胨0.5％、酵母膏0.3％、牛肉膏0.2％、磷酸二氢钾0.05％、琼脂1％，水96.45％，调节培养基pH值到6.5、113℃灭菌22分钟；培养条件：将上述所得菌种接入摇瓶厌氧培养23h；
3)种子罐、发酵罐扩繁培养：培养基为：豆粕0.5％、玉米0.2％、蔗糖0.8％、蛋白胨1.5％、酵母膏0.6％、磷酸二氢钾0.4％、硫酸铵0.4％、乙酸钠0.6％、柠檬酸三钠0.1％、吐温800.2％、硫酸镁0.05％、豆油0.2％、消泡剂0.05％，水94.4，起始pH＝6.7、122℃灭菌33分钟；培养条件：摇瓶到种子罐接种量按3％接种，种子罐培养时间为24h，发酵罐培养时间为40h
D.嗜酸乳杆菌发酵液的生产：
1)斜面培养基为：葡萄糖1.5％、蛋白胨0.5％、酵母膏0.3％、牛肉膏0.2％、磷酸二氢钾0.05％、琼脂1％，水96.45％，调节培养基pH值到6.5、113℃灭菌22分钟；培养条件：将试管菌种扩繁至培养皿，放入35℃恒温培养箱中厌氧培养25h；
2)摇瓶种子培养：培养基为：葡萄糖0.5％、蛋白胨0.5％、酵母膏0.3％、牛肉膏0.2％、磷酸二氢钾0.05，水98.45％调节培养基pH＝6.8、120℃灭菌17分钟；培养条件：将培养皿菌种接入摇瓶厌氧培养23h；
3)种子罐、发酵罐扩繁培养：培养基为：豆粕0.7％、玉米0.3％、蔗糖1.4％、蛋白胨3％、酵母膏0.6％、磷酸二氢钾0.2％、硫酸铵0.3％、乙酸钠0.4％、柠檬酸三钠0.1％、吐温801％、硫酸镁0.05％、豆油0.05％、消泡剂0.05％，水91.85％，调节培养基pH＝6.7、128℃灭菌26分钟；培养条件：摇瓶到种子罐接种量按7％接种，种子罐培养时间为23h，发酵罐培养时间为34h。
将上述A-D制得的发酵液即枯草芽孢杆菌发酵液、地衣芽孢杆菌发酵液、植物乳杆菌发酵液、嗜酸乳杆菌按重量比38％∶38％∶12％∶12％的比例混合即得微生物混合发酵液。
下面通过具体的试验来说明本发明的显著功效。
实施例1：
客户名称：某知名教保料企业
试验时间：2015年7月11日至2015年7月25日
试验动物：选用(21±2)日龄五元杂交配套系断奶仔猪240头，每个栏20头猪，共12栏，其中6栏试验组，6栏对照组。
试验方法：对照组为：基础料+2.8kg/t氧化锌；试验组为：基础料+1.8kg/t氧化锌+1kg/t本发明产品。目的是在断奶后2周内减少氧化锌的使用，还能有效的抗腹泻
试验结果：试验组仔猪无腹泻，对照组有腹泻，腹泻率平均是7％。；试验组皮毛比对照组皮毛提高2度(包括皮肤红润程度，毛的长短和亮度)；试验组采食量比对照组多12克，增重比对照组增18克。
结果表明在乳仔猪饲料中添加本发明产品，可以等量取代氧化锌，对腹泻有很好的预防效果，并能改善自住皮毛，提高采食量。
实施例2：
客户名称：某知名饲料集团
试验时间：2016年2月21日至2016年3月2日
试验动物：保育猪，选择180头保育猪，分成试验组和对照组
试验方法：试验组用1公斤/吨本发明产品，替代对照组中200克/吨进口抗敌素，其他不变。目的是在寻找抗敌素的有效替代品，同时能在保育料中预防腹泻。
试验结果：同时试验的还有其他厂家的微生态制剂和抗菌肽，使用本发明产品组无腹泻，其他试验组腹泻率为5-9％。料比在所有组中本发明产品的最好。在乳仔猪饲料中添加本发明产品，按每吨1-1.5千克，可以完全取代硫酸粘杆菌素，抗腹泻效果显著。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，在本发明基础上，本领域技术人员比较容易在不脱离本发明技术方案的精神和范围内做一些修改或者等同替换。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (5)

1.一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法，其特征在于：制备方法为：
步骤一：将按重量分计的腐植酸发酵原料60-100份通过60目筛子，豆粕粉6-10份，玉米粉6-10份，葡萄糖2-6份，无机盐0-0.3份，水120-180份按常规方法制备成培养基；
步骤二：然后用蒸汽对培养基进行灭菌，100-135℃灭菌15-30分钟，之后对培养基进行冷却到28℃-35℃培养温度；将微生物混合发酵液接种到培养基上，接种比例为0.9-1.2∶0.05-0.2，先进行好氧发酵，发酵条件为搅拌速度160-200r/min，开始通气比调至1∶0.4-0.7，培养期间灌压要保持在0.03-0.06pa，随着菌体的不断生长溶氧值也逐渐发生变化，因此需要调通气比和搅拌速度使溶氧相对值20％-40％，发酵时间36-48小时，发酵温度32-35℃；然后进行厌氧发酵，发酵条件为静置发酵，发酵时间48-60小时，发酵温度32℃-35℃，每六小时搅拌1分钟；厌氧发酵结束得到降解的腐植酸发酵液，经干燥制得腐植酸基微生态产品。
2.根据权利要求1所述的一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法：其特征在于：所述腐植酸原料为腐植酸钠、风化煤、褐煤、泥炭中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法，其特征在于：所述的无机盐为磷酸二氢钾、硫酸亚铁、硫酸铜、硫酸镁、硫酸锌、硫酸锰、氯化钙中的一种或多种的复配。
4.根据权利要求1所述的一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法，其特征在于：所述微生物混合发酵液由枯草芽孢杆菌发酵液、地衣芽孢杆菌发酵液、植物乳杆菌发酵液、嗜酸乳杆菌按重量比35-45％∶35-45％∶8-12％∶8-12％的比例混合而成。
5.根据权利要求1所述的一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法，其特征在于：所述的微生物混合发酵液，其生产工艺如下：
A：枯草芽孢杆菌发酵液的生产：
1)固体培养基为：葡萄糖1-3％、蛋白胨1-3％、酵母膏0.3-0.6％、琼脂1-4％，蒸馏水90％-97％，调节培养基pH为6.5-7.0、110-120℃灭菌16-20分钟；培养条件：放入25-35℃恒温培养箱中培养22-26h；
2)将上述所得物质进行摇瓶培养，培养基为：葡萄糖1-3％、蛋白胨0.5-2％、酵母膏0.3-0.8％，水94-99％，调节摇瓶培养基pH为6.5-7.0、110-120℃灭菌16-20分钟；培养条件：在上述所得菌种中挑选生长健壮的菌落接入摇瓶，放入25-35℃恒温摇床中，180-230r/min振荡培养22-26h；
3)将上述所得物质进行种子罐、发酵罐扩繁：培养基为：豆粕0.5-1.3％、玉米0.2-0.8％、蔗糖1-3％、蛋白胨0.5-1.2％、酵母膏0.3-0.8％、磷酸二氢钾0.05-0.8％、硫酸铵0.1-0.3％、氯化钠0.02-0.05％、消泡剂0.02-0.07％，水90-98％，培养基起始pH＝7.0-7.5、115-130℃灭菌20-40分钟；培养条件：摇瓶到种子罐接种量及种子罐到发酵罐按3-7％接种，种子罐培养时间为22-26h，发酵罐培养时间为30-40h；
B：地衣芽孢杆菌发酵液的生产：
1)固体培养基为：蛋白胨8-12％，牛肉膏1-5％，NaCl 3-7％，琼脂12-18％，蒸馏水58％-76％，调节培养基pH7.0-7.5，105-125℃灭菌15-20分钟；培养条件：放入30-35℃恒温培养箱中培养22-24h；
2)将上述所得物质进行摇瓶种子培养：培养基为蛋白胨8-12％，牛肉膏1-5％，NaCl 3-7％，琼脂12-18％，蒸馏水58％-76％，调节培养基pH7.0-7.5，105-125℃灭菌15-20分钟；培养条件：放入30-35℃恒温培养箱中培养22-24h；培养条件：将上述所得菌种接入摇瓶，放入30-35℃恒温摇床中，180-220r/min振荡培养22-26h；
3)种子罐、发酵罐扩繁培养：培养基为：豆粕2-7％、糖蜜0.5-1.5％、蛋白胨0.3-0.8％、酵母膏0.1-0.5％、磷酸二氢钾0.05-0.2％、硫酸铵0.05-0.5％、氯化钠0-0.08％、豆油0.05-0.25％、消泡剂0-0.1％，水89-97％，调节培养基pH＝6.5-7.5、115-125℃灭菌25-35分钟；培养条件：摇瓶到种子罐及种子罐到发酵罐接种量按3-7％接种，种子罐培养时间为22-26h，发酵罐培养时间为32-40h；
C：植物乳杆菌发酵液的生产：
1)固体培养基为：葡萄糖0.5-1.5％、蛋白胨0.5-1.5％、酵母膏0.1-0.8％、牛肉膏0.1-0.8％、磷酸二氢钾0.05-0.15％、琼脂1-3％，水93％-98％，调节培养基pH值到6.5-7.0、110-120℃灭菌15-25分钟；培养条件：放入30-35℃恒温培养箱中厌氧培养22-24h；
2)摇瓶种子培养：培养基为：葡萄糖0.5-1.5％、蛋白胨0.5-1.5％、酵母膏0.1-0.8％、牛肉膏0.1-0.8％、磷酸二氢钾0.05-0.15％，琼脂1-3％，水93％-98％，调节培养基pH值到6.5-7.0、110-120℃灭菌15-25分钟；培养条件：将上述所得菌种接入摇瓶厌氧培养22-26h；
3)种子罐、发酵罐扩繁培养：培养基为：豆粕0.5-1.5％、玉米0.2-0.7％、蔗糖0.5-1.5％、蛋白胨1-2％、酵母膏0.2-0.7％、磷酸二氢钾0.1-0.5％、硫酸铵0.1-0.5％、乙酸钠0.3-0.8％、柠檬酸三钠0.1-0.5％、吐温80 0.05-0.2％、硫酸镁0.01-0.05％、豆油0.1-0.3％、消泡剂0.03-0.07％，水93％-97％，起始pH＝6.5-7.0、110-125℃灭菌25-40分钟；培养条件：摇瓶到种子罐及种子罐到发酵罐接种量按3-7％接种，种子罐培养时间为22-24h，发酵罐培养时间为30-40h；
D.嗜酸乳杆菌发酵液的生产：
1)斜面培养基为：葡萄糖0.5-1.5％、蛋白胨0.5-1.5％、酵母膏0.2-0.8％、牛肉膏0.2-0.8％、磷酸二氢钾0.05-0.2％、琼脂0.5-4％，水92-99％调节培养基pH＝6.5-7.0、110-125℃灭菌15-20分钟；培养条件：将试管菌种扩繁至培养皿，放入30-40℃恒温培养箱中厌氧培养22-26h；
2)摇瓶种子培养：培养基为：葡萄糖0.5-1.5％、蛋白胨0.5-1.5％、酵母膏0.2-0.8％、牛肉膏0.2-0.8％、磷酸二氢钾0.05-0.2％，水96-99％调节培养基pH＝6.8、110-125℃灭菌15-20分钟；培养条件：将培养皿菌种接入摇瓶厌氧培养22-26h；
3)种子罐、发酵罐扩繁培养：培养基为：豆粕0.5-1.5％、玉米0.3-0.8％、蔗糖0.5-1.5％、蛋白胨1-3％、酵母膏0.2-1％、磷酸二氢钾0.05-0.3％、硫酸铵0.1-0.3％、乙酸钠0.3-0.8％、柠檬酸三钠0.05-0.3％、吐温800.4-1％、硫酸镁0-0.05％、豆油0.05-0.1％、消泡剂0.01-0.08％，水90％-97％，调节培养基pH＝6.5-7.0、110-130℃灭菌25-40分钟；培养条件：摇瓶到种子罐及种子罐到发酵罐接种量按3-8％接种，种子罐培养时间为22-26h，发酵罐培养时间为30-40h。
CN201610723778.4A 2016-08-26 2016-08-26 一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法 Pending CN106107023A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610723778.4A CN106107023A (zh) 2016-08-26 2016-08-26 一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610723778.4A CN106107023A (zh) 2016-08-26 2016-08-26 一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN106107023A true CN106107023A (zh) 2016-11-16

Family

ID=57273876

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610723778.4A Pending CN106107023A (zh) 2016-08-26 2016-08-26 一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106107023A (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107494936A (zh) * 2017-08-01 2017-12-22 北京斯隆生物技术有限责任公司 一种治疗奶牛乳房炎的中药腐植酸饲料及其制备方法
CN111616259A (zh) * 2020-06-02 2020-09-04 沈阳博善英胜生物技术有限公司 一种充分发挥吸附物料作用的发酵型干饲料的生产方法
CN111621063A (zh) * 2020-06-09 2020-09-04 河南功能高分子膜材料创新中心有限公司 一种易降解的腐植酸地膜
CN112617037A (zh) * 2021-01-07 2021-04-09 沈阳康缘益生水土环境修复研究所有限公司 一种饲用活性腐殖酸复合微生物菌剂的制备及其应用

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103184174A (zh) * 2011-12-30 2013-07-03 沈阳博善英胜生物技术有限公司 培养基中含腐植酸钠饲料用枯草芽孢杆菌生物制剂的生产
CN101711548B (zh) * 2009-03-27 2013-07-17 广州市博善生物饲料有限公司 一种含腐植酸钠的发酵饲料、其工艺及应用
CN103652367A (zh) * 2013-10-16 2014-03-26 内蒙古斯隆生物技术有限责任公司 一种反刍动物复合微生态饲料添加剂及其制备方法
CN103739375A (zh) * 2013-12-19 2014-04-23 山西惠亿农生物科技有限公司 一种微生物发酵腐植酸生物肥及其应用和制备方法
CN103740611A (zh) * 2013-12-19 2014-04-23 山西省农业科学院生物技术研究中心 一种复合微生物菌剂及其降解腐植酸的应用和应用方法
CN105432935A (zh) * 2014-09-05 2016-03-30 辽宁威兰生物技术有限责任公司 一种水产畜禽用功能性氨基酸腐植酸微生态制剂的生产方法
CN105831394A (zh) * 2016-03-25 2016-08-10 中粮生物化学（安徽）股份有限公司 一种微生物发酵饲料原料的制备方法

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101711548B (zh) * 2009-03-27 2013-07-17 广州市博善生物饲料有限公司 一种含腐植酸钠的发酵饲料、其工艺及应用
CN103184174A (zh) * 2011-12-30 2013-07-03 沈阳博善英胜生物技术有限公司 培养基中含腐植酸钠饲料用枯草芽孢杆菌生物制剂的生产
CN103652367A (zh) * 2013-10-16 2014-03-26 内蒙古斯隆生物技术有限责任公司 一种反刍动物复合微生态饲料添加剂及其制备方法
CN103739375A (zh) * 2013-12-19 2014-04-23 山西惠亿农生物科技有限公司 一种微生物发酵腐植酸生物肥及其应用和制备方法
CN103740611A (zh) * 2013-12-19 2014-04-23 山西省农业科学院生物技术研究中心 一种复合微生物菌剂及其降解腐植酸的应用和应用方法
CN105432935A (zh) * 2014-09-05 2016-03-30 辽宁威兰生物技术有限责任公司 一种水产畜禽用功能性氨基酸腐植酸微生态制剂的生产方法
CN105831394A (zh) * 2016-03-25 2016-08-10 中粮生物化学（安徽）股份有限公司 一种微生物发酵饲料原料的制备方法

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107494936A (zh) * 2017-08-01 2017-12-22 北京斯隆生物技术有限责任公司 一种治疗奶牛乳房炎的中药腐植酸饲料及其制备方法
CN111616259A (zh) * 2020-06-02 2020-09-04 沈阳博善英胜生物技术有限公司 一种充分发挥吸附物料作用的发酵型干饲料的生产方法
CN111621063A (zh) * 2020-06-09 2020-09-04 河南功能高分子膜材料创新中心有限公司 一种易降解的腐植酸地膜
CN112617037A (zh) * 2021-01-07 2021-04-09 沈阳康缘益生水土环境修复研究所有限公司 一种饲用活性腐殖酸复合微生物菌剂的制备及其应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101711548B (zh) 一种含腐植酸钠的发酵饲料、其工艺及应用
CN101946853B (zh) 一种利用复合微生物发酵秸秆生产青储饲料的方法
CN107129953B (zh) 一种用于牛粪污处理的微生物添加剂及制备方法和应用
CN108157673A (zh) 一种发酵对虾配合饲料的制备方法
CN106212915B (zh) 分级发酵生产牛羊全价饲料的方法及产品
CN106901015A (zh) 含有活性益生菌的饲料添加剂及其制备方法和用途
CN104250119B (zh) 一种发酵废水和农业废弃物生产生物有机肥的方法
CN100408673C (zh) 有机微生物组合物和用途
CN106107023A (zh) 一种微生物降解腐植酸饲料及其制备方法
CN103829042A (zh) 一种多维活性木薯蛋白饲料的生产方法
CN106234755B (zh) 以甘蔗渣为原料分级发酵生产牛羊全价饲料的方法
CN104920915A (zh) 一种微生物发酵猪饲料
CN105707478A (zh) 一种复合益生菌培养物及其制备方法
CN101407762B (zh) 微生物固体菌剂及其制备方法和应用
CN101836688B (zh) 一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法
CN1934989A (zh) 一种微生物饲料添加剂
CN103098980A (zh) 一种微生物秸秆饲料发酵剂
CN107712462A (zh) 一种水产用高效活性生物发酵饵料及其制备方法和应用
CN102342371B (zh) 一种利用纳豆芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌制备复合饲料添加剂的工艺
CN102224885B (zh) 一种育肥猪用液体诱食剂的生产方法
KR101115306B1 (ko) 대추를 이용한 가축용 고체발효 생균제 조성물 및 이의 제조방법
CN106035988B (zh) 一种畜禽用精氨酸活性肽粉的生产方法
CN105124169A (zh) 一种生物复合酶及其制备方法
CN108130290A (zh) 一种微生物菌与微量元素结合治理盐碱地的方法
CN107467414A (zh) 一种益生菌发酵天然谷物的复配饲料添加剂

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20161116

RJ01 Rejection of invention patent application after publication