CN105418756A - 一种水蛭唾液重复提取的方法 - Google Patents

一种水蛭唾液重复提取的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105418756A
CN105418756A CN201511008637.6A CN201511008637A CN105418756A CN 105418756 A CN105418756 A CN 105418756A CN 201511008637 A CN201511008637 A CN 201511008637A CN 105418756 A CN105418756 A CN 105418756A
Authority
CN
China
Prior art keywords
leech
blood
saliva
extraction
intestines
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201511008637.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105418756B (zh
Inventor
汤浩强
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201511008637.6A priority Critical patent/CN105418756B/zh
Publication of CN105418756A publication Critical patent/CN105418756A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105418756B publication Critical patent/CN105418756B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/81—Protease inhibitors
    • C07K14/815—Protease inhibitors from leeches, e.g. hirudin, eglin

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明公开一种水蛭唾液重复提取的方法，包括以下步骤：在新鲜血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化钠，混合均匀；选用新鲜的动物肠脏，将血液灌入肠中并扎紧；将水蛭置于灌有血液的肠脏附近，让水蛭吸食肠脏内血液；水蛭充分吸饱后，改变环境温度使其吐出唾液，收集获得水蛭唾液。该方法可实现连续提取数次，这即节省了成本，又增加了水蛭素的功效，使得水蛭活体重复利用，解决了目前水蛭素提取一次性利用的低效率、工艺复杂、高成本的痛点，有助于节约和保护我国野生水蛭资源，有助于大幅降低医药用水蛭素原料价格。

Description

一种水蛭唾液重复提取的方法
技术领域
本发明涉及水蛭素提取领域，尤其涉及一种水蛭唾液重复提取的方法。
背景技术
水蛭，俗称蚂蟥，它是一种贵重的中药材，我国古代许多医学典籍都有记载，明代《本草纲目》中记载：水蛙“主逐恶血、痕血、月闭，破血下积聚，无子，利水通……治折伤坠扑畜血有功”。现代医学研究表明，水蛭唾腺中含有一种抗血凝物质——蛭素，能广泛应用于断肢再植、抑制癌细胞生长等医疗领域。随着现代生物技术的应用和提高，蛭素的提取加工和医学临床应用，以及中成药的开发、研制和推广，对水蛭的需求量逐年增多。但是，现有技术中水蛭素的方法多以对水蛭活体的破坏方法获得水蛭素，影响所得水蛭素的纯度，同时对水蛭资源的供应依赖过大，尤其难以避免水蛭素生产的季节性问题。
因此，现有技术还有待于改进和发展。
发明内容
鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种水蛭唾液重复提取的方法，旨在解决现有技术中采用血液直接喂养不能提高水蛭抗病能力的问题。
一种水蛭唾液重复提取的方法，其中，包括以下步骤：
在新鲜血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化钠，混合均匀；
选用新鲜的动物肠脏，将血液灌入肠中并扎紧；
将水蛭置于灌有血液的肠脏附近，让水蛭吸食肠脏内血液；
水蛭充分吸饱后，改变环境温度使其吐出唾液，收集获得水蛭唾液。
所述的水蛭唾液重复提取的方法，其中，改变环境温度是瞬间或缓慢升温至30～70℃之间。
所述的水蛭唾液重复提取的方法，其中，所述谷氨酸、精氨酸的添加量分别为新鲜血液重量的0.01～10％，所述氯化钠的添加量为新鲜血液重量的0.02～20％。
所述的水蛭唾液重复提取的方法，其中，氯化钠在使用前，用水稀释至浓度为0.01～40％的氯化钠溶液。
所述的水蛭唾液重复提取的方法，其中，谷氨酸、精氨酸在使用前，用水稀释至浓度为0.01～40％的谷氨酸、精氨酸溶液。
所述的水蛭唾液重复提取的方法，其中，所述新鲜血液中还加入了柠檬酸钠。
所述的水蛭唾液重复提取的方法，其中，柠檬酸钠在使用前，用水稀释至浓度为0.01～40％的柠檬酸钠溶液。
有益效果：本发明所提供的一种水蛭唾液重复提取的方法，该方法可实现连续提取数次，这即节省了成本，又增加了水蛭素的功效，使得水蛭活体重复利用，解决了目前水蛭素提取一次性利用的低效率、工艺复杂、高成本的痛点，有助于节约和保护我国野生水蛭资源，有助于大幅降低医药用水蛭素原料价格。
具体实施方式
本发明提供一种水蛭唾液重复提取的方法，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
经过研究发现，水蛭的唾液中也含有水蛭素，而且活性高，因此，本发明中提供一种水蛭唾液重复提取的方法，可连续提取数次，这即节省了成本，又增加了水蛭素的功效，使得水蛭活体重复利用，解决了目前水蛭素提取一次性利用的低效率、工艺复杂、高成本的痛点，有助于节约和保护我国野生水蛭资源，有助于大幅降低医药用水蛭素原料价格。
具体地，所述水蛭唾液重复提取的方法，包括以下步骤：
在新鲜血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化钠，混合均匀；
选用新鲜的动物肠脏，将血液灌入肠中并扎紧；
将水蛭置于灌有血液的肠脏附近，让水蛭吸食肠脏内血液；
水蛭充分吸饱后，改变环境温度使其吐出唾液，收集获得水蛭唾液。
其中，所述新鲜血液可以为猪血、牛血、羊血、鸡血或驴血。通过在血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化钠，可以吸引水蛭吸食。其中，所述谷氨酸、精氨酸的添加量分别为新鲜血液重量的0.01～10％，所述氯化钠的添加量为新鲜血液重量的0.02～20％。所述氯化钠可以为有机盐或无机盐，新鲜血液中的含盐量不同，加入氯化钠还可以调节血液中的含盐浓度，吸引水蛭吸食。优选地，氯化钠在使用前，可以用水稀释至浓度为0.01～40％的氯化钠溶液，方便混合均匀。所述谷氨酸、精氨酸在使用前，也可以用水稀释至浓度为0.01～40％的谷氨酸、精氨酸溶液，方便混合均匀。
氯化钠还具有防止血液凝结的作用，优选地，所述新鲜血液中还加入了柠檬酸钠，有效防止血液凝结，所述柠檬酸钠的添加为新鲜血液重量的1～2％。所述柠檬酸钠在使用前，也可以用水稀释至浓度为0.01～40％的柠檬酸钠溶液，方便混合均匀。
水蛭在吃饱的情况，通过改变其环境温度，会使其分泌出大量的唾液，采用此种方法刺激水蛭，既无需添加催吐剂污染唾液成分，也无需对水蛭进行挤压使其受伤，是一种高效又对水蛭活体伤害不大的方法。改变环境温度是瞬间或缓慢升温至30～70℃之间。水蛭在的原始温度可以为0～25℃，当升温至30～70℃之间，温差可达20℃以上，水蛭在经过20℃以上的温差变化，就会吐出大量唾液。每次每条活体水蛭可以提取1～60次，每次能提取3～12毫升左右，每个月能提取1～6次，唾液中水蛭素含量为20～120AT-(U国际单位)/mL。
以下通过实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
从饲养池内捞出成熟、健康的菲牛水蛭盛放到清水池中，每隔2天换水清洗一次，去除活体水蛭表面的杂质，不喂食，如此保持一个月。一个月后，用清水再次清洗活体水蛭，室温下，将水蛭放置于灌有贮藏槽内，将灌有血液的肠脏放入贮藏槽中，水蛭吸食肠脏内的血液，充分喂饱。对贮藏槽瞬间升温至50℃，收集水蛭吐出的唾液。瞬间升温3次，收集水蛭吐出的唾液。
经过检测，这些唾液中，水蛭素含量为45AT-(U国际单位)/mL。
实施例2
从饲养池内捞出成熟、健康的菲牛水蛭盛放到清水池中，每隔2天换水清洗一次，去除活体水蛭表面的杂质，不喂食，如此保持一个月。一个月后，用清水再次清洗活体水蛭，室温下，将水蛭放置于灌有贮藏槽内，将灌有血液的肠脏放入贮藏槽中，水蛭吸食肠脏内的血液，充分喂饱。对贮藏槽缓慢升温至70℃，收集水蛭吐出的唾液。瞬间升温3次，收集水蛭吐出的唾液。
经过检测，这些唾液中，水蛭素含量为50AT-(U国际单位)/mL。
实施例3
从饲养池内捞出成熟、健康的菲牛水蛭盛放到清水池中，每隔2天换水清洗一次，去除活体水蛭表面的杂质，不喂食，如此保持一个月。一个月后，用清水再次清洗活体水蛭，室温下，将水蛭放置于灌有贮藏槽内，将灌有血液的肠脏放入贮藏槽中，水蛭吸食肠脏内的血液，充分喂饱。对贮藏槽瞬间升温至40℃，收集水蛭吐出的唾液。瞬间升温3次，收集水蛭吐出的唾液。
经过检测，这些唾液中，水蛭素含量为52AT-(U国际单位)/mL。
应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。

Claims (7)

1.一种水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，包括以下步骤：
在新鲜血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化钠，混合均匀；
选用新鲜的动物肠脏，将血液灌入肠中并扎紧；
将水蛭置于灌有血液的肠脏附近，让水蛭吸食肠脏内血液；
水蛭充分吸饱后，改变环境温度使其吐出唾液，收集获得水蛭唾液。
2.根据权利要求1所述的水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，改变环境温度是瞬间或缓慢升温至30～70℃之间。
3.根据权利要求1所述的水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，所述谷氨酸、精氨酸的添加量为新鲜血液重量的1～3％，所述氯化钠的添加量为新鲜血液重量的3～5％。
4.根据权利要求1所述的水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，氯化钠在使用前，用水稀释至浓度为0.01～40％的氯化钠溶液。
5.根据权利要求1所述的水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，谷氨酸、精氨酸在使用前，用水稀释至浓度为0.01～40％的谷氨酸、精氨酸溶液。
6.根据权利要求1所述的水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，所述新鲜血液中还加入了柠檬酸钠。
7.根据权利要求6所述的水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，柠檬酸钠在使用前，用水稀释至浓度为0.01～40％的柠檬酸钠溶液。
CN201511008637.6A 2015-12-25 2015-12-25 一种水蛭唾液重复提取的方法 Expired - Fee Related CN105418756B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201511008637.6A CN105418756B (zh) 2015-12-25 2015-12-25 一种水蛭唾液重复提取的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201511008637.6A CN105418756B (zh) 2015-12-25 2015-12-25 一种水蛭唾液重复提取的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105418756A true CN105418756A (zh) 2016-03-23
CN105418756B CN105418756B (zh) 2018-12-21

Family

ID=55497338

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201511008637.6A Expired - Fee Related CN105418756B (zh) 2015-12-25 2015-12-25 一种水蛭唾液重复提取的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105418756B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108782477A (zh) * 2018-05-17 2018-11-13 金华市呗力水产养殖技术有限公司 适用于大范围水蛭捕捞设备
CN113577821A (zh) * 2021-07-07 2021-11-02 三峡大学 一种活体水蛭素的重复提取装置及方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1423929A (zh) * 2003-01-15 2003-06-18 周维海 菲牛蛭的养殖方法及水蛭素的提取技术
CN102964446A (zh) * 2012-11-28 2013-03-13 周维官 一种吸血水蛭活体多次提取天然水蛭素方法
CN104151425A (zh) * 2014-08-15 2014-11-19 周维海 一种天然水蛭素的规模化生产方法
CN104837495A (zh) * 2012-09-17 2015-08-12 比奥佩普解决方案有限公司 水蛭的全唾液提取物

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1423929A (zh) * 2003-01-15 2003-06-18 周维海 菲牛蛭的养殖方法及水蛭素的提取技术
CN104837495A (zh) * 2012-09-17 2015-08-12 比奥佩普解决方案有限公司 水蛭的全唾液提取物
CN102964446A (zh) * 2012-11-28 2013-03-13 周维官 一种吸血水蛭活体多次提取天然水蛭素方法
CN104151425A (zh) * 2014-08-15 2014-11-19 周维海 一种天然水蛭素的规模化生产方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
段超: "活体诱导高效提取水蛭素工艺研究", 《中国学位论文全文数据库》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108782477A (zh) * 2018-05-17 2018-11-13 金华市呗力水产养殖技术有限公司 适用于大范围水蛭捕捞设备
CN108782477B (zh) * 2018-05-17 2020-12-22 金华市呗力水产养殖技术有限公司 适用于大范围水蛭捕捞设备
CN113577821A (zh) * 2021-07-07 2021-11-02 三峡大学 一种活体水蛭素的重复提取装置及方法
CN113577821B (zh) * 2021-07-07 2022-08-30 三峡大学 一种活体水蛭素的重复提取装置及方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN105418756B (zh) 2018-12-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103931537B (zh) 一种螃蟹的养殖方法
CN102524192A (zh) 一种可食用蚯蚓的养殖方法
CN104258319A (zh) 一种治疗牛腐蹄病的中药喷雾剂
CN105418756A (zh) 一种水蛭唾液重复提取的方法
CN104472432B (zh) 可去除德化黑鸡养殖过程中体内残留药物的养殖方法
CN104012793A (zh) 一种蚕饲料添加剂
CN104957397A (zh) 一种人工养殖螳螂成虫专用饲料
KR101104326B1 (ko) 사료 첨가제
CN102512486B (zh) 一种防治蜂螨的药物及用途
CN102823627A (zh) 一种药组合物畜牧保健蚊香
CN104434982A (zh) 一种药用河豚鱼油的制备方法
CN106665500A (zh) 一种提高土蜂繁殖蜂蛹量的养殖方法
CN107348147A (zh) 香鸭饲料添加剂
CN103891636A (zh) 一种鱼病防治的方法
CN105853511B (zh) 防治斑点叉尾鮰爱德华氏菌病的中草药药饵及其制备方法
CN110960584B (zh) 一种发泡型奶牛护蹄液及其制备方法
CN104938402A (zh) 循环生物链的培育方法
CN105713790A (zh) 一种蚕蛾酒
CN104137945A (zh) 中草药辛温解表饲料添加剂配方
CN108112787A (zh) 一种观赏鱼专用盐及其制备方法
CN108552119A (zh) 头花蓼废弃药渣的处理方法
CN107348242A (zh) 一种幼蛭饵料
CN105557504B (zh) 利用蜜蜂为大棚辣椒授粉的方法
UA128500U (uk) Спосіб вилучення біологічно активної субстанції з сухої трави чистотілу
CN108114003A (zh) 一种斑蝥原液的发酵提取工艺

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20181221

Termination date: 20191225

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee