CN105412187A - 一种低钾刺五加提取物的制备方法 - Google Patents

一种低钾刺五加提取物的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种中药提取物制备方法,具体涉及一种采用纳滤技术去除钾离子的刺五加提取物制备方法。本发明创造为将刺五加药材经水提取、石硫处理、纳滤、醇沉、灭菌浓缩等工序制备得刺五加提取物,且进一步的可以将刺五加提取物制成浸膏。本发明创造通过纳滤技术的应用去除钾离子,大大提高刺五加提取物的质量及刺五加注射液的用药安全性。

Description

一种低钾刺五加提取物的制备方法
技术领域
本发明涉及一种中药提取物制备方法,具体涉及一种低钾刺五加提取物的制备方法。
背景技术
刺五加(Acanthopanaxsenticosus)为五加科植物,其干燥根和茎具有舒筋活血、益气健脾及补肾安神的药用功效。现代中医药制剂学中将刺五加经提取加工制成注射液,主要功效为平补肝肾,益精壮骨,用于治疗肝肾不足所致的短暂性脑缺血发作,脑动脉硬化,脑血栓形成及脑栓塞等病症;同时也用于治疗冠心病,心绞痛合并神经衰弱和更年期综合症等。
随着现代科学技术发展而产生的中药新剂型,克服了传统中药生物利用度低、起效慢等缺点,逐渐受到广大患者的青睐。然而,临床使用过程中,中药注射液不良反应的报道日益增多,其安全性也越加受到重视。临床研究表明静脉滴注含钾离子的药物时,会增加血液中钾离子浓度,能够导致心脏扩张和无力,甚至导致死亡。钾离子能够减慢心率并且阻止心脏从心房到心室的搏动,其原因是细胞外的高浓度钾离子减少了心肌纤维的静息膜电位,导致动作电位降低,心脏收缩无力。如果细胞外的钾离子浓度太高,静息膜电位就会被消除,心肌细胞就不能产生搏动,从而心脏停止跳动。因此,静脉滴注含钾离子的药物时,钾离子含量控制尤为重要。而刺五加注射液中的钾离子是由其药材刺五加所引入的,所以需要再刺五加药材提取、浓缩等工艺环节中采取适宜的方法降低钾离子的含量,提升注射液的质量安全。
现有的刺五加药材提取分离技术中,大多涉及充分高效的对有效成分含量的提取,极少有对控制钾离子含量的工艺研究,所以为了进一步提高用药安全性,迫切需要开发一种低钾刺五加提取物的制备方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是有效控制刺五加提取物中钾离子的含量,提供一种低钾刺五加提取物的制备方法,从而确保刺五加注射液的用药安全。
为了解决上述技术问题,本发明采用如下的技术方案:将刺五加药材经水提取、石硫处理、纳滤、醇沉、灭菌浓缩工序制备而成。
具体包括以下步骤:
1)用6~12体积倍量的水提取刺五加药材1~3次,过滤,合并滤液,待滤液温度降至室温;
2)用石灰乳调节pH值至碱性,充分搅拌,再用硫酸调节pH值至酸性,充分搅拌,静置4~12小时,滤取上清液;
3)用纳滤膜进行过滤,浓缩截留液,放置至室温;
4)加乙醇使含醇量达80%~85%,充分搅拌,静置12~48小时,滤取上清液,药渣离心后过滤,合并滤液,回收乙醇至无醇味并浓缩即得刺五加提取物。
上述方法,所述步骤1)中每次提取煎煮1~2小时。
步骤2)中所述石灰乳为15%~25%的石灰乳,优选为20%,所述碱性为pH值10~12,优选pH值11;所述硫酸为15%~25%硫酸,优选为20%硫酸,所述酸性为pH值4~7,优选pH值5-6。
步骤3)中所述纳滤膜截留分子量在200~1000Da,操作压力为3~8kg/cm2,温度为20~30℃,浓缩截留液至相对密度为1.10~1.25(80℃测)。
步骤4)中所述浓缩至相对密度为1.15~1.20(80℃测)。
上述步骤2)和4)中所涉及的“%”含量均为体积百分比。
优选地,所述刺五加提取物由以下方法制备:
1)用8~10体积倍量的水提取刺五加药材1~3次,每次煎煮1~2小时,过滤,合并滤液,待滤液温度降至室温;
2)用15%~25%石灰乳调节pH值至10~12,充分搅拌,再用15%~25%硫酸调节pH值至4~7,充分搅拌,静置4~12小时,滤取上清液;
3)用纳滤膜200~1000Da进行过滤,操作压力为3~8kg/cm2,温度为20~30℃,截留液浓缩至相对密度为1.10~1.25(80℃测),放置至室温;
4)加乙醇使含醇量达80%~85%,充分搅拌,静置12~48小时,滤取上清液,药渣离心后过滤,合并滤液,回收乙醇至无醇味并浓缩至相对密度为1.15~1.20(80℃测),即得刺五加提取物。
更优选地,所述刺五加提取物由以下方法制备:
1)用10体积倍量的水提取刺五加药材2次,每次煎煮1.5小时,过滤,合并滤液,待滤液温度降至室温;
2)用20%石灰乳调节pH值至11,充分搅拌,再用20%硫酸调节pH值至5.5,充分搅拌,静置8小时,滤取上清液;
3)用纳滤膜200~500Da进行过滤,操作压力为5kg/cm2,温度为25℃,截留液浓缩至相对密度为1.20(80℃测),放置至室温;
4)加乙醇使含醇量达85%,充分搅拌,静置24小时,滤取上清液,药渣离心后过滤,合并滤液,回收乙醇至无醇味并浓缩至相对密度为1.20(80℃测),即得刺五加提取物。
本发明还提供一种将刺五加提取物精制成浸膏的方法,包括以下步骤:
1)取上述刺五加提取物加注射用水稀释至每1ml含总黄酮为10~20mg,搅拌均匀后,调节pH值至4.0~5.5,充分搅拌,经120℃高温热处理40分钟,4℃以下冷藏12~96小时;
2)将上述冷藏液进行板框过滤,滤液再经120℃高温热处理40分钟,4℃以下冷藏12~96小时,缓化过滤,滤液浓缩至相对密度为1.20~1.25(80℃测),即得刺五加精制膏。
上述步骤2)板框过滤温度为10~20℃。
与现有技术相比,本发明的有益效果如下:
本发明所提供的方法中刺五加药材经水提后用石灰乳调碱,使有效成分中黄酮类与之形成螯合物,再加硫酸进行调酸,使黄酮类成分溶于溶液中,而杂质成分沉淀下来,在经过后续的纳滤处理,不仅增加了总黄酮的溶出量,也有效地除去了杂质,提高产品质量。
其次,在纳滤过程中本发明人经研究发现,经石硫处理后的滤液上清液选用截留分子量为200~500Da的纳滤膜,温度25℃,压力5kg/cm2下过滤,充分除去溶液中的钾离子,并且最大程度保留刺五加中总黄酮、紫丁香苷及刺五加苷E的含量;再经过纯沉后处理,有效除去大分子蛋白质等物质,并且同时吸附少量残留的钾离子一并除去,其终产品钾离子含量可控制在187μg/mL,有利于产品在制剂生产及成品中的检测和控制,大大提高刺五加药品的安全性。
此外,本发明提供的方法,不仅能显著降低刺五加提取物中钾离子的含量,还具有操作简单、提取周期短、安全高效的优点特别适合工业化生产。
具体实施方式
除非另有定义,本发明使用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属技术领域普通技术人员通常理解的含义相同。通常,本发明使用的命名及下述实验方法都是本领域公知的或常用的,若未特别指明,本发明实施例中所用的试验材料。试剂盒仪器等均可市售获得。为了使本发明所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白,以下结合具体实施例,对本发明作进一步的说明。
实施例1:刺五加提取物的制备
1)用6体积倍量(36L)的水提取6kg刺五加药材3次,每次煎煮1小时,过滤,合并滤液,待滤液温度降至室温;
2)用15%石灰乳调节pH值至10,充分搅拌,再用15%硫酸调节pH值至4,充分搅拌,静置4小时,滤取上清液;
3)用纳滤膜200~1000Da进行过滤,操作压力为3kg/cm2,温度为20℃,截留液浓缩至相对密度为1.10(80℃测),放置至室温;
4)加乙醇使含醇量达80%,充分搅拌,静置12小时,滤取上清液,药渣离心后过滤,合并滤液,回收乙醇至无醇味并浓缩至相对密度为1.15(80℃测),即得刺五加提取物。
实施例2:刺五加提取物的制备
1)用12体积倍量(60L)的水提5kg取刺五加药材1次,煎煮2小时,过滤,合并滤液,待滤液温度降至室温;
2)用25%石灰乳调节pH值至12,充分搅拌,再用25%硫酸调节pH值至7,充分搅拌,静置8小时,滤取上清液;
3)用纳滤膜400~800Da进行过滤,操作压力为8kg/cm2,温度为30℃,截留液浓缩至相对密度为1.25(80℃测),放置至室温;
4)加乙醇使含醇量达85%,充分搅拌,静置48小时,滤取上清液,药渣离心后过滤,合并滤液,回收乙醇至无醇味并浓缩至相对密度为1.20(80℃测),即得刺五加提取物。
实施例3:刺五加提取物的制备
1)用10体积倍量(50L)的水提5kg取刺五加药材2次,每次煎煮1.5小时,过滤,合并滤液,待滤液温度降至室温;
2)用20%石灰乳调节pH值至11,充分搅拌,再用20%硫酸调节pH值至5.5,充分搅拌,静置4~12小时,滤取上清液;
3)用纳滤膜200~500Da进行过滤,操作压力为5kg/cm2,温度为25℃,截留液浓缩至相对密度为1.20(80℃测),放置至室温;
4)加乙醇使含醇量达85%,充分搅拌,静置24小时,滤取上清液,药渣离心后过滤,合并滤液,回收乙醇至无醇味并浓缩至相对密度为1.20(80℃测),即得刺五加提取物。
实施例4:刺五加提取物浸膏的制备
1)取实施例2中制备所得的刺五加提取物用注射用水稀释至每1ml含总黄酮为10mg,搅拌均匀后,调节pH值至4.0,充分搅拌,经120℃高温热处理40分钟,4℃以下冷藏12小时;
2)将上述冷藏液在10℃下进行板框过滤,滤液再经120℃高温热处理40分钟,4℃以下冷藏12小时,缓化过滤,滤液浓缩至相对密度为1.20(80℃测),即得刺五加精制膏。
实施例5:刺五加提取物浸膏的制备
1)取上述实施例3制备所得的刺五加提取物加注射用水稀释至每1ml含总黄酮为20mg,搅拌均匀后,调节pH值至5.5,充分搅拌,经120℃高温热处理40分钟,4℃以下冷藏96小时;
2)将上述冷藏液在20℃下进进行板框过滤,滤液再经120℃高温热处理40分钟,4℃以下冷藏96小时,缓化过滤,滤液浓缩至相对密度为1.25(80℃测),即得刺五加精制膏。
实施例6:刺五加提取物有效成分及钾离子含量检测
检测例:用本发明实施例1~3所述方法制备获得刺五加提取物,每组2份,进一步按照专利申请公开号为104306417A的实施例4、5、7所述的方法制备得到的刺五加注射液。
对比例:参照专利申请公开号为104306417A的实施例4、5、7制备得到的刺五加注射液。
有效成分含量检测方法:总黄酮用分光光度法,紫丁香苷和刺五加苷E用高效液相色谱法,。
钾离子含量检测方法:参照专利申请公开号为104306417A的实验例1中检验钾离子含量的方法进行检测。
实验结果:检测物中各成分含量
上述结果表明本发明提供的方法所制备的刺五加提取物在同等规格的比较中,优势明显,制备工艺能不仅能更有效的控制钾离子含量,还保证了其有效成分的保留,使产品更适合用于刺五加制剂产业化生产。
应当说明的是,虽然本发明以较佳实施例揭露如上,然其并非用以限定本发明,任何熟习此项技艺者,在不脱离本发明的精神和范围内,所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种刺五加提取物的制备方法,其特征在于将刺五加药材经水提取,依次用石灰乳调节溶液pH值为碱性,硫酸调节溶液pH值为酸性,再用纳滤膜进行过滤,将截留液进行醇沉,取滤液浓缩制得刺五加提取物。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述的石灰乳为15%~25%的石灰乳,碱性为pH值10~12;硫酸为15%~25%硫酸,酸性为pH值4~7。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述的石灰乳为20%的石灰乳,碱性为pH值11;硫酸为20%硫酸,酸性为pH值5~6。
4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述的纳滤膜截留分子量在200~1000Da,纳滤膜过滤时操作压力为3~8kg/cm2,温度为20~30℃。
5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述的纳滤膜截留分子量在200~500Da,纳滤膜过滤时操作压力为5kg/cm2,温度为25℃。
6.如权利要求1~5所述的制备方法,其特征在于所述方法步骤如下:
a)用8~10体积倍量的水提取刺五加药材1~3次,每次煎煮1~2小时,过滤,合并滤液,待滤液温度降至室温;
b)用15%~25%石灰乳调节pH值至10~12,充分搅拌,再用15%~25%硫酸调节pH值至4~7,充分搅拌,静置4~12小时,滤取上清液;
c)用纳滤膜200~1000Da进行过滤,操作压力为5kg/cm2,温度为25℃,截留液浓缩至80℃下相对密度为1.10~1.25,放置至室温;
d)加乙醇使含醇量达80%~85%,充分搅拌,静置12~48小时,滤取上清液,药渣离心后过滤,合并滤液,回收乙醇至无醇味并浓缩至80℃下相对密度为1.15~1.20,即得刺五加提取物。
7.如权利要求1~5所述的制备方法,其特征在于所述方法步骤如下:
a)用10体积倍量的水提取刺五加药材2次,每次煎煮1.5小时,过滤,合并滤液,待滤液温度降至室温;
b)用20%石灰乳调节pH值至11,充分搅拌,再用20%硫酸调节pH值至5.5,充分搅拌,静置8小时,滤取上清液;
c)用纳滤膜200~500Da进行过滤,操作压力为5kg/cm2,温度为25℃,截留液浓缩至80℃下相对密度为1.20,放置至室温;
d)加乙醇使含醇量达85%,充分搅拌,静置24小时,滤取上清液,药渣离心后过滤,合并滤液,回收乙醇至无醇味并浓缩至80℃下相对密度为1.20,即得刺五加提取物。
8.如权利要求7所述的制备方法获得的刺五加提取物制成浸膏的方法,其特征在于将刺五加提取物加注射用水稀释、调节pH值后经高温灭菌处理,再经板框过滤、高温灭菌处理后浓缩即得刺五加精制膏。
9.如权利要求8所述的制备浸膏的方法,其特征在于步骤如下:
a)取上述刺五加提取物加注射用水稀释至每1ml含总黄酮为10~20mg,搅拌均匀后,调节pH值至4.0~5.5,充分搅拌,经120℃高温热处理40分钟,4℃以下冷藏12~96小时;
b)将上述冷藏液进行板框过滤,滤液再经120℃高温热处理40分钟,4℃以下冷藏12~96小时,缓化过滤,滤液浓缩至相对密度为1.20~1.25(80℃测),即得刺五加精制膏。
10.如权利要求8或9所述的制备浸膏的方法,其特征在于所述的板框过滤温度为10~20℃。
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