CN105403611B - 一种检测l半胱氨酸浓度的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种检测L半胱氨酸浓度的方法。利用4‑甲酰苯甲酸金刚烷酯缩邻氨基苯酚席夫碱镍配合物的电化学活性，经滴涂法，制备了席夫碱镍配合物/氧化石墨烯修饰玻碳电极。L半胱氨酸浓度在0.01～0.08mol/L范围内，浓度与其氧化峰电流值呈现良好的线性关系，线性方程为y＝‑4.53963e‑5+1.71341e‑4×x，相关系数为0.99303，据此可利用循环伏安方法，测定L半胱氨酸浓度浓度。本发明提出的检测L半胱氨酸浓度的方法具有电极制作简单、操作方法简便、安全、环保等优点。

Description

一种检测L半胱氨酸浓度的方法
技术领域
本发明涉及电分析化学领域，特别是一种利用化学修饰电极快速检测L半胱氨酸浓度的方法。
背景技术
L半胱氨酸(Cys,2-氨基一3-琉基丙酸)是一种重要具有生物活性的含硫氨基酸，基于其独特的结构，在动物体内起着营养和免疫相关的重要生理功能，许多酶的活性都与它们结构中的琉基有关。因此，建立L半胱氨酸浓度测定方法对生命科学具有重要意义。席夫碱分子中的C＝N双键可以与金属离子配位以及与其它不饱和基团形成共轭结构，在其两边引入不同的空间位阻、不同的功能基团，可以改变席夫碱化合物的性质。目前席夫碱化合物被广泛的应用于催化、药物和光电材料等领域，对席夫碱衍生物的电分析应用也很热门。目前，用于L-半胱氨酸浓度测定的方法有分光光度法、HPLC法、化学发光法、高效液相色谱法和伏安法。伏安法测定L半胱氨酸具有电极制作简便、操作方法简便、安全、绿色环保等优点，一直是受到人们的追捧，而配合物修饰电极是近年来扩展的化学修饰电极的一个新的领域，配合物中特有的配体和中心金属离子能使配合物修饰电极具有高度的富集选择性和电催化作用，能系统地有针对地分析检测物质的含量和性状。基于此，本专利提供了一种新的镍配合物修饰剂用来检测L半胱氨酸浓度。即利用4-甲酰苯甲酸金刚烷酯缩邻氨基苯酚席夫碱镍配合物的电化学活性，经滴涂法，制备了席夫碱镍配合物/氧化石墨烯修饰玻碳电极。考察了席夫碱镍配合物/氧化石墨修饰玻碳电极对L半胱氨酸的循环伏安行为，结果表明PBS缓冲液pH为7,修饰电极的浸渍吸附时间为30min，L半胱氨酸浓度在0.01～0.08mol/L范围内，与氧化峰电流值具有良好的线性关系，该方法已用于食品样中L半胱氨酸的含量测定，相对标准偏差为3.9％，加标回收率在97.88％～99.96％，据此建立了食品中L半胱氨酸含量检测新方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种利用化学修饰电极快速检测L半胱氨酸浓度的方法。
本发明方法检测L半胱氨酸浓度的原理：L半胱氨酸分子含有巯基易被氧化。本发明将镍配合物席夫碱修饰到电极表面，利用镍配合物作为电子媒介，直接在电极表面将-SH氧化成-S2，形成氧化还原峰，因而具备用循环伏安法进行检测L半胱氨酸浓度的必要条件。
具体步骤为：
(1)先用0.5μm的Al2O3粉末将直径为2mm的玻碳电极在麂皮上抛光至镜面，在超声波辅助下依次于超纯水、无水乙醇和二次蒸馏水中各超声3分钟，于室温中晾干，干燥后置于阴 凉处备用。
(2)将1mg氧化石墨烯溶于1mL分析纯N,N-二甲基甲酰铵(DMF)溶剂中，用超声波震荡至变成黑色的悬浮液。
(3)将5μL步骤(2)所得的氧化石墨烯悬浮液滴涂在玻碳电极表面，在室温下自然挥发至干，得氧化石墨烯/玻碳电极。
(4)将5μL浓度为0.002mol/L的4-甲酰苯甲酸金刚烷酯缩邻氨基苯酚席夫碱镍配合物的N,N-二甲基甲酰铵(DMF)溶液滴涂在步骤(3)所得的氧化石墨烯/玻碳电极表面，滴涂6-10次，配合物溶液自然吸附在电极表面,然后在室温下晾干1小时；最后，用蒸馏水冲洗，以除去未吸附在电极表面上的物质，获得4-甲酰苯甲酸金刚烷酯缩邻氨基苯酚席夫碱镍配合物/氧化石墨烯修饰玻碳电极。
(5)以步骤(4)制得的4-甲酰苯甲酸金刚烷酯缩邻氨基苯酚席夫碱镍配合物/氧化石墨烯修饰玻碳电极为工作电极，饱和氯化钠溶液的Ag/AgCl电极为参比电极，铂金电极为辅助电极，采用三电极体系，在室温下，在含有不同浓度的L半胱氨酸的PBS缓冲溶液中(pH＝7.0)进行循环伏安法扫描，扫描速度50mv/s，扫描范围为-0.85V～+0.4V，记录不同浓度L半胱氨酸循环伏安图中对应的氧化峰电流，结果表明，L半胱氨酸浓度在0.01～0.08mol/L范围内，浓度与其氧化峰电流值呈现良好的线性关系，线性方程为y＝-4.53963e-5+1.71341e-4×x，相关系数为0.99303。
(6)另取一定量的L半胱氨酸待测溶液，同步骤(5)中的方法测定氧化峰电流，再根据步骤(5)所得的线性回归方程计算待测溶液中L半胱氨酸的浓度。
本发明提出的检测L半胱氨酸浓度的方法具有电极制作简单、操作方法简便、安全、环保等优点。
附图说明
图1为本发明实施例中以L半胱氨酸浓度为横纵标和以氧化峰电流为纵坐标绘制的工作曲线图。
具体实施方式
实施例:
(1)先用0.5μm的Al2O3粉末将玻碳电极(为2mm)在麂皮上抛光至镜面，在超声波辅助下依次于超纯水、无水乙醇和二次蒸馏水中各超声3分钟，于室温中晾干，干燥后置于阴凉处备用。
(2)将1mg氧化石墨烯溶于1mL分析纯N,N-二甲基甲酰铵(DMF)溶剂中，用超声波震荡至变成黑色的悬浮液。
(3)将5μL步骤(2)所得的氧化石墨烯悬浮液滴涂在玻碳电极表面，在室温下自然挥发至干，得氧化石墨烯/玻碳电极。
(4)将5μL浓度为0.002mol/L的4-甲酰苯甲酸金刚烷酯缩邻氨基苯酚席夫碱镍配合物的N,N-二甲基甲酰铵(DMF)溶液滴涂在步骤(3)所得的氧化石墨烯/玻碳电极表面，滴涂8次，配合物溶液自然吸附在电极表面,然后在室温下晾干1小时；最后，用蒸馏水冲洗，以除去未吸附在电极表面上的物质，获得4-甲酰苯甲酸金刚烷酯缩邻氨基苯酚席夫碱镍配合物/氧化石墨烯修饰玻碳电极。
(5)以步骤(4)制得的4-甲酰苯甲酸金刚烷酯缩邻氨基苯酚席夫碱镍配合物/氧化石墨烯修饰玻碳电极为工作电极，饱和氯化钠溶液的Ag/AgCl电极为参比电极，铂金电极为辅助电极，采用三电极体系，在室温下，在含有不同浓度的L半胱氨酸的PBS缓冲溶液中(pH＝7.0)进行循环伏安法扫描，扫描速度50mv/s，扫描范围为-0.85V～+0.4V，记录不同浓度L半胱氨酸循环伏安图中对应的氧化峰电流，结果表明，L半胱氨酸浓度在0.01～0.08mol/L范围内，浓度与其氧化峰电流值呈现良好的线性关系，线性方程为y＝-4.53963e-5+1.71341e-4×x，相关系数为0.99303。
(6)将市售牛奶样品煮沸，确保无氧，冷却后，取5.00mL加入pH＝7的PBS缓冲溶液，溶液定容至25.00mL，按步骤(5)所示的方法，进行循环伏安扫描，读出氧化峰电流，按步骤(5)所示方法将氧化峰电流代入线性方程，测定L-半胱氨酸的含量；再向5.00mL处理过的牛奶加入20.00mLPBS溶液，再加入标准L-半胱氨酸溶液，进行加标回收实验，结果见表1。相对标准偏差RSD＝3.9％，加标回收率在95％以上(见下表1)。
表1:饮料中L-半胱氨酸含量的测试结果
。

Claims (1)

1.一种检测L半胱氨酸浓度的方法，其特征在于具体步骤为：
(1)先用0.5μm的Al2O3粉末将直径为2mm的玻碳电极在麂皮上抛光至镜面，在超声波辅助下依次于超纯水、无水乙醇和二次蒸馏水中各超声3分钟，于室温中晾干，干燥后置于阴凉处备用；
(2)将1mg氧化石墨烯溶于1mL分析纯N,N-二甲基甲酰铵溶剂中，用超声波震荡至变成黑色的悬浮液；
(3)将5μL步骤(2)所得的氧化石墨烯悬浮液滴涂在玻碳电极表面，在室温下自然挥发至干，得氧化石墨烯/玻碳电极；
(4)将5μL浓度为0.002mol/L的4-甲酰苯甲酸金刚烷酯缩邻氨基苯酚席夫碱镍配合物的N,N-二甲基甲酰铵溶液滴涂在步骤(3)所得的氧化石墨烯/玻碳电极表面，滴涂6-10次，配合物溶液自然吸附在电极表面,然后在室温下晾干1小时；最后，用蒸馏水冲洗，以除去未吸附在电极表面上的物质，获得4-甲酰苯甲酸金刚烷酯缩邻氨基苯酚席夫碱镍配合物/氧化石墨烯修饰玻碳电极；
(5)以步骤(4)制得的4-甲酰苯甲酸金刚烷酯缩邻氨基苯酚席夫碱镍配合物/氧化石墨烯修饰玻碳电极为工作电极，饱和氯化钠溶液的Ag/AgCl电极为参比电极，铂金电极为辅助电极，采用三电极体系，在室温下，在含有不同浓度的pH＝7.0的L半胱氨酸的PBS缓冲溶液中进行循环伏安法扫描，扫描速度50mv/s，扫描范围为-0.85V～+0.4V，记录不同浓度L半胱氨酸循环伏安图中对应的氧化峰电流，结果表明，L半胱氨酸浓度在0.01～0.08mol/L范围内，浓度与其氧化峰电流值呈现良好的线性关系，线性方程为y＝-4.53963e-5+1.71341e-4×x，相关系数为0.99303；
(6)另取一定量的L半胱氨酸待测溶液，同步骤(5)中的方法测定氧化峰电流，再根据步骤(5)所得的线性回归方程计算待测溶液中L半胱氨酸的浓度。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106568818B (zh) * 2016-11-06 2019-10-11 桂林理工大学 一种镍配合物/氧化石墨烯修饰玻碳电极及其制作方法
CN107576715B (zh) * 2017-09-17 2019-11-26 桂林理工大学 一种利用修饰玻碳电极检测苯甲酸浓度的方法
CN107688044B (zh) * 2017-09-17 2020-04-14 桂林理工大学 一种同时检测对乙酰氨基酚和4-氨基苯酚浓度的方法
CN108707160B (zh) * 2018-05-29 2020-08-04 山西大学 一种Zn功能配合物及其制备方法和应用
CN108802124B (zh) * 2018-08-28 2023-09-08 长沙理工大学 一种基于谷胱甘肽复合膜栅极金电极的l-胱氨酸的检测方法及传感器

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102175732A (zh) * 2010-12-08 2011-09-07 桂林理工大学 一种席夫碱配合物修饰碳纳米管电极的制备方法
CN103575795A (zh) * 2013-11-03 2014-02-12 桂林理工大学 一种检测啤酒样品中l-酪氨酸含量的方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011119724A2 (en) * 2010-03-23 2011-09-29 Babak Borhan Colorimetric and fluorescent proteins

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102175732A (zh) * 2010-12-08 2011-09-07 桂林理工大学 一种席夫碱配合物修饰碳纳米管电极的制备方法
CN103575795A (zh) * 2013-11-03 2014-02-12 桂林理工大学 一种检测啤酒样品中l-酪氨酸含量的方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
L-半胱氨酸席夫碱铜(Ⅱ)配合物自组装金电极的制备及对大黄酸的测定;夏金虹等;《分析科学学报》;20101031;第26卷(第5期);全文 *
N-Salicylideneamino acidato complexes of oxovanadium(IV). The cysteine and penicillamine complexes;João Costa Pessoa等;《The Royal Society Of Chemistry》;20040824;全文 *
Voltammetric studies of a cobalt(II)-4-methylsalophen modified carbon-paste electrode and its application for the simultaneous determination of cysteine and ascorbic acid;Saeed Shahrokhian等;《Electrochimica Acta》;20040820;第50卷;全文 *

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