CN105399766A - 一种鸭蛋黄卵磷脂的提取与精制方法 - Google Patents

Abstract

该发明首先利用鸭蛋为原料经过酶解离心等操作得到卵磷脂粗品。再利用有机溶剂无机盐复合沉淀法精制卵磷脂,大大提高卵磷脂纯度。本发明具有工艺简单，操作方便，处理量大，产率高，产品纯度高、成本低、可控性好、适应性强、较适合于大规模工业化制备等优点。

Description

一种鸭蛋黄卵磷脂的提取与精制方法

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地涉及到卵磷脂技术领域，利用有机溶剂无机盐复合沉淀法精制卵磷脂的方法。

背景技术

卵磷脂被广泛应用于食品、药品、保健品、化妆品和饲料中，在临床上可用于治疗动脉粥样硬化、脂肪肝、神经衰弱等。它广泛存在于动植物体中，尤其在蛋黄中含量最高为8％～10％，而鸭蛋黄比鸡蛋黄还高出0．5％，所以开发鸭蛋黄卵磷脂更具经济性。

目前，卵磷脂的提取方法主要为有机溶剂萃取法和超临界C02萃取法，且通常认为后者较理想，但其原料需用蛋黄粉，而蛋黄粉的制备常用喷雾干燥法，使卵磷脂处于50℃以上的高温环境中，降低了生物活性。此外，采用超临界C02萃取法仅能从蛋黄粉中提取出中性脂肪，卵磷脂的提取仍需乙醇作夹带剂才能提取，本文直接采用乙醇提取法，成本低，工艺简单。

发明内容

本发明的目的是领用一种更简便、快捷、可大规模工业生产的方法。并且经专利搜索没有利用有机溶剂无机盐复合沉淀法精制卵磷脂的专利。

该发明的方案为：鸭蛋→清洗→打蛋→分离蛋黄→酶解→乙醇提取→离心→沉淀进行乙醇2次提取→第2次离心→沉淀进行3次提取→第3次离心→合并3次上清液→真空浓缩→冷冻干燥→粗卵磷脂→提取液→加入ZnCl2→搅拌→过滤→沉淀物→丙酮低温洗涤。

1、鸭蛋黄卵磷脂的粗提：

(1)蛋黄分离：取3Kg左右鸭蛋，先用清水冲洗干净(蛋壳可用)，再将蛋黄与蛋清分离，大约能获得500g蛋黄(须将蛋黄和蛋清彻底分离)；

（2)加0.05%的一种蛋白酶在37℃下水解2h；

(3)乙醇的配制与加入：配制体积分数为90％的乙醇4500mL，分3次加入蛋黄液中；

(4)离心提取：将配好的溶液进行离心，离心机的转速为4000r／min，温度为40℃时间60min，取上清液；

(5)蒸发回收：将3次提取的上清液在旋转蒸发仪上回收获得粗卵磷脂；

(6)干燥：将粗卵磷脂放人冷冻干燥器中，得到干物质。

2、有机溶剂无机盐复合沉淀法精制鸭蛋黄卵磷脂

（1）以95%乙醇为溶剂，pH值为8.43，加入卵磷脂质量的50％的ZnC1₂乙醇溶液100mL，室温搅拌反应32min，过滤。在该条件下所得制品中磷脂酰胆碱的含量为79.2%；

（2）将鸭蛋黄卵磷脂(SPC)粗品溶于适量无水乙醇中，滴加60%ZnC1₂水溶液，得乳白色沉淀，分离出沉淀并溶于一定量氯仿；

（3）再用30%(体积比)乙醇溶液萃取除去ZnC1₂(用AgNO₃鉴别)。有机层蒸去氯仿，用乙醚、丙酮清洗沉淀10次，蒸去乙醚，即得大豆卵磷脂产品；

（4）用ZnC1₂与卵磷脂生成配合物，然后用丙酮沉淀，最终得到卵磷脂纯度为99.6%。

具体实施方式：

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实例一：

1、鸭蛋黄卵磷脂的粗提

(1)蛋黄分离：取3Kg左右鸭蛋，先用清水冲洗干净(蛋壳可用)，再将蛋黄与蛋清分离，大约能获得500g蛋黄(须将蛋黄和蛋清彻底分离)；

（2)加0.05%的一种蛋白酶在37℃下水解2h；

(3)乙醇的配制与加入：配制体积分数为90％的乙醇4500mL，分3次加入蛋黄液中；

(4)离心提取：将配好的溶液进行离心，离心机的转速为4000r／min，温度为40℃时间60min，取上清液；

(5)蒸发回收：将3次提取的上清液在旋转蒸发仪上回收获得粗卵磷脂；

(6)干燥：将粗卵磷脂放人冷冻干燥器中，得到干物质。

2、有机溶剂无机盐复合沉淀法精制鸭蛋黄卵磷脂

（1）以95%乙醇为溶剂，pH值为8.43，加入卵磷脂质量的50％的ZnC1₂乙醇溶液100mL，室温搅拌反应32min，过滤。在该条件下所得制品中磷脂酰胆碱的含量为79.2%；

（2）将鸭蛋黄卵磷脂(SPC)粗品溶于适量无水乙醇中，滴加60%ZnC1₂水溶液，得乳白色沉淀，分离出沉淀并溶于一定量氯仿；

（3）再用30%(体积比)乙醇溶液萃取除去ZnC1₂(用AgNO₃鉴别)。有机层蒸去氯仿，用乙醚、丙酮清洗沉淀10次，蒸去乙醚，即得大豆卵磷脂产品；

（4）用ZnC1₂与卵磷脂生成配合物，然后用丙酮沉淀，最终得到卵磷脂纯度为99.6%。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。

Claims (1)

1.一种鸭蛋黄卵磷脂的提取与精制方法，具体包括如下步骤：

第一步，鸭蛋黄卵磷脂的粗提：

(1)蛋黄分离：取3Kg左右鸭蛋，先用清水冲洗干净(蛋壳可用)，再将蛋黄与蛋清分离，大约能获得500g蛋黄(须将蛋黄和蛋清彻底分离)；

（2)加0.05%的一种蛋白酶在37℃下水解2h；

(3)乙醇的配制与加入：配制体积分数为90％的乙醇4500mL，分3次加入蛋黄液中；

(4)离心提取：将配好的溶液进行离心，离心机的转速为4000r／min，温度为40℃时间60min，取上清液；

(5)蒸发回收：将3次提取的上清液在旋转蒸发仪上回收获得粗卵磷脂；

(6)干燥：将粗卵磷脂放人冷冻干燥器中，得到干物质；

第二步，有机溶剂无机盐复合沉淀法精制鸭蛋黄卵磷脂：

（1）以95%乙醇为溶剂，pH值为8.43，加入卵磷脂质量的50％的ZnC1₂乙醇溶液100mL，室温搅拌反应32min，过滤；在该条件下所得制品中磷脂酰胆碱的含量为79.2%；

（2）将鸭蛋黄卵磷脂(SPC)粗品溶于适量无水乙醇中，滴加60%ZnC1₂水溶液，得乳白色沉淀，分离出沉淀并溶于一定量氯仿；

（3）再用30%(体积比)乙醇溶液萃取除去ZnC1₂(用AgNO₃鉴别)，有机层蒸去氯仿，用乙醚、丙酮清洗沉淀10次，蒸去乙醚，即得大豆卵磷脂产品；

（4）用ZnC1₂与卵磷脂生成配合物，然后用丙酮沉淀，最终得到卵磷脂纯度为99.6%。