CN105380939A - 染料木黄酮及其药用衍生物在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用 - Google Patents

染料木黄酮及其药用衍生物在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了染料木黄酮及其药用衍生物在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用。染料木黄酮与可接受的辅料混合均匀，添加在饲料中，可有效抵抗柔嫩艾美耳球虫在鸡体内的繁殖。与常规抗球虫药物二硝托胺预混剂相比，抗球虫效果明显。本发明可有效缓解当前养殖业使用抗球虫药物产生的严重耐药性问题，可以在此基础上加快新药的研发速度，对养殖业的绿色、健康发展具有重要益处。

Description

染料木黄酮及其药用衍生物在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用
技术领域
本发明涉及染料木黄酮的一种新用途，具体涉及染料木黄酮在抗柔嫩艾美耳球虫中的应用。
背景技术
鸡球虫病(Coccidiosis)是由艾美耳属(Eimeria)的一种或几种球虫(Coccidium)同时或先后寄生于鸡肠道黏膜细胞所引起的疾病。世界上凡是有养鸡的地方就会有球虫病的发生，而规模化鸡场是鸡球虫病发生的最适宜场所，常常出现该病的爆发。据统计，全世界已报道的鸡球虫中，有5种具有明显的致病性，它们是：柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、堆形艾美耳球虫(E.acervulina)及和缓艾美耳球虫(E.mitis)。其中危害最大的是E.tenella。雏鸡和青年鸡易感染球虫，发病率和致死率高达80％以上，病愈的雏鸡生长受阻，增重缓慢；成年鸡一般不发病，但为带虫者，增重和产蛋能力降低，是传播球虫病的重要病源。因此，鸡球虫病对养禽业造成严重的经济损失，全球每年因该病造成的损失高达数百亿美元，我国每年因该病造成的经济损失不少于100亿元。
在养鸡业集约化程度日益提高的今天，鸡球虫病的防控也越来越重要。在上世纪80年代，大量抗球虫药物的出现，使得鸡球虫病的防控取得令人满意的成效。到目前为止化学药物仍是控制鸡球虫病的重要措施之一，然而，大多数抗球虫药物多为化学类产品和抗生素类产品，这些产品的长期使用使得抗药现象十分普遍，而新药研发的速度又十分缓慢，致使养鸡业面临无药可用的局面，因此迫切需要新的抗球虫药物面市。
染料木黄酮(genistein)，别名：染料木素；金雀异黄酮；4',5,7-三羟基异黄酮；5,7,4-三羟基异黄酮；5,7,4一三羟基异黄酮。从金雀花、广豆根、槐果实、红车轴草中提取。该化合物的分子式为C15H10O5，分子量为：270.2369，CAS登录号：446-72-0，其化学结构如式如(Ⅰ)所示。
染料木黄酮具有多种生理功能，它是一种有效的抗氧化剂，一种有效的蛋白酪胺酸激活酶抑制剂，一种植物雌激素。多项实验证据表明这种天然成分具有抗瘤、抗氧化、降血脂、防止骨质疏松、雌激素作用、抗动脉粥样硬化的作用。近年研究发现其具有抗溶血活性、抗真菌活性等生物学活性，受到人们的普遍重视。
目前尚未有染料木黄酮具有抗柔嫩艾美耳球虫作用的报导，通过染料木黄酮已知的性质无法推断其是否具有抗柔嫩艾美耳球虫的作用。
发明内容
本发明的目的在于提供染料木黄酮及其药用衍生物在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用。
本发明所采取的技术方案是：
染料木黄酮及其药用衍生物在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用。
进一步的，上述染料木黄酮药用衍生物的结构式为：
其中M1、M2和M3独立为IA族、IIA族元素的离子；
或者为：其中R1、R2和R3独立为C1～C10的烃基；
或者为：其中R4、R5和R6独立为C1～C10的烃基。
进一步的，上述M1、M2和M3独立为Li+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+中的一种；所述R1、R2、R3、R4、R5和R6独立为C1～C5的烃基。
进一步的，上述R1、R2、R3、R4、R5和R6为烷基。
进一步的，上述药物剂型为口服制剂。
染料木黄酮及其药用衍生物在制备饲料添加剂中的应用。
进一步的，上述染料木黄酮药用衍生物的结构式为：
其中M1、M2和M3独立为IA族、IIA族元素的离子；
或者为：其中R1、R2和R3独立为C1～C10的烃基；
或者为：其中R4、R5和R6独立为C1～C10的烃基。
进一步的，上述M1、M2和M3独立为Li+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+中的一种；所述R1、R2、R3、R4、R5和R6独立为C1～C5的烃基。
进一步的，上述R1、R2、R3、R4、R5和R6为烷基。
本发明的有益效果是：
本发明通过将染料木黄酮或其药用衍生物与可接受的辅料，制成散剂，之后将散剂添加至饲料中搅拌均匀。染料木黄酮的添加量为每100kg中添加3g，使用添加有染料木黄酮的饲料按日常饲料量饲喂雏鸡；通过雏鸡感染柔嫩艾美耳球虫实验证实染料木黄酮的抗球虫指数(ACI)可达到180以上，证实其具有很好的抗柔嫩艾美耳球虫作用。
具体实施方式
染料木黄酮及其药用衍生物在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用。
优选的，上述染料木黄酮药用衍生物的结构式为：
其中M1、M2和M3独立为IA族、IIA族元素的离子；
或者为：其中R1、R2和R3独立为C1～C10的烃基；
或者为：其中R4、R5和R6独立为C1～C10的烃基。
优选的，上述M1、M2和M3独立为Li+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+中的一种；所述R1、R2、R3、R4、R5和R6独立为C1～C5的烃基。
优选的，上述R1、R2、R3、R4、R5和R6为烷基。
优选的，上述药物剂型为口服制剂。
染料木黄酮及其药用衍生物在制备饲料添加剂中的应用。
优选的，上述染料木黄酮药用衍生物的结构式为：
其中M1、M2和M3独立为IA族、IIA族元素的离子；
或者为：其中R1、R2和R3独立为C1～C10的烃基；
或者为：其中R4、R5和R6独立为C1～C10的烃基。
优选的，上述M1、M2和M3独立为Li+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+中的一种；所述R1、R2、R3、R4、R5和R6独立为C1～C5的烃基。
优选的，上述R1、R2、R3、R4、R5和R6为烷基。
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但并不局限于此。
实施例1
染料木黄酮散剂的制备：取3g染料木黄酮(含量不低于99％)和97g可溶性淀粉混匀，即可。
散剂的用法用量：将上述100g散剂拌入100kg饲料中，按日常食量喂食。
实施例2
染料木黄酮水溶性粉剂的制备：取3g染料木黄酮(含量不低于99％)和97g葡萄糖混匀，即可。
水溶性粉剂的用法用量：将上述100g粉剂溶于100升水中，按正常饮水量喂食。
实施例3
染料木黄酮药用衍生物水溶性粉剂的制备：取3g染料木黄酮药用衍生物(含量不低于99％)和97g葡萄糖混匀，即可。
水溶性粉剂的用法用量：将上述100g粉剂溶于100升水中，按正常饮水量喂食。
下面以染料木黄酮为代表，结合具体的实验说明染料木黄酮及其药用衍生物的抗鸡球虫作用。
实验材料
1.对照药物：常规抗球虫药物二硝托胺预混剂，由广东省前沿动物保健有限公司生产。
2.染料木黄酮：100kg饲料中混有3g染料木黄酮，搅拌均匀。
3.鸡球虫卵囊：柔嫩艾美耳球虫(Eimeriatenella)广东株孢子化卵囊，由广东省农业科学院动物卫生研究所保存，使用前在无球虫雏鸡体内复壮，采集盲肠，收集卵囊，置于28℃水浴中孢子化，待孢子化率达80％以上时，计数卵囊，放于4℃冰箱备用。
4.雏鸡：1日龄岭南黄肉鸡，由广东省农业科学院动物科学研究所提供，饲养于已消毒且无球虫的专用动物房内；鸡笼及料槽、水槽均严格消毒，自由采食并饮用纯净水；试验前观察雏鸡有无鸡球虫病临床症状及连续2d检查粪便有无球虫卵囊，如有症状和卵囊则淘汰，如无症状和卵囊则备用。
5.饲料：由广东省农业科学院动物科学研究所特制，不含任何抗球虫药物。
实验方法
分组：将10日龄150只岭南黄肉鸡逐只称重，淘汰弱雏和体重过大者，将体重均匀的剩余雏鸡随机分成4组，每组30只，并调整每组雏鸡总体重大致相等；
处理：除第I组(空白对照)外，其余各组雏鸡均经口灌服柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊l×105个/羽；除第I组和第Ⅱ组(阳性对照)外，其余各组雏鸡均于感染后立即饲喂含抗球虫药物的饲料。
每天观察并记录鸡群的精神状况、采食量、粪便情况等；对死亡雏鸡称重，剖检，观察病变，如因感染柔嫩艾美耳球虫而死亡则病变记分为+4分；所有雏鸡于感染后第7.5天逐只称重，剖检，进行盲肠病变记分；最后计算各组雏鸡的增重和饲料报酬。试验雏鸡的分组情况见表1。
表1试验雏鸡分组
药效判定方法及标准抗球虫指数(ACI)按美国默克公司推荐的公式计算：ACI＝(相对增重率+存活率)一(卵囊值+病变值)；相对增重率＝(试验组增重÷空白对照组增重)×100％；存活率＝(各组存活雏鸡数÷各组雏鸡总数)×100％。病变按五级记分：①无卵囊，盲肠正常，为0分；②有卵囊，盲肠黏膜稍增厚，有少量散在出血或少量血样肠内容物，为+1分；③有卵囊，盲肠黏膜增厚，有明显出血或明显血样肠内容物，为+2分；④有卵囊，盲肠黏膜增厚，有大量凝血块或血样肠芯，为+3分；⑤雏鸡因球虫病死亡或有大量卵囊，盲肠外观呈酱油色(或小肠中部有点状坏死灶，黏膜面呈绯红色)，肠管明显肿大，内容物形成明显的血样肠芯，为+4分。组内病变值＝每组平均病变记分×20。药效判定标准是ACI<120为无效，120—160为弱效，160—180为中效，180以上为强效。卵囊值由盲肠内容物克卵囊数(OPG)换算而来。
实验结果：
临床症状观察:
组I未接种柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊，雏鸡精神良好，采食正常，无血便出现。
组Ⅱ接种柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊后第2天，雏鸡出现精神沉郁，呆立，食欲减退等症状；第5天开始出现明显血便，并发生死亡，随后血便逐渐减少。
抗球虫指数计算：
剖检鸡只，取盲肠，根据病变计分、相对增重率、存活率等分别计算各组抗球虫指数，结果见表2所示。
表2各组抗球虫指数
由表2可知，第Ⅲ、Ⅳ组的抗球虫指数均高于第Ⅱ组，第Ⅳ组的抗球虫指数明显高于第Ⅲ组，证实染料木黄酮及其药用衍生物的抗球虫指数(ACI)可达到189以上，具有较好的抗柔嫩艾美耳球虫作用，且明显优于常规抗球虫药物二硝托胺预混剂。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.染料木黄酮及其药用衍生物在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述染料木黄酮药用衍生物的结构式为：
其中M1、M2和M3独立为IA族、IIA族元素的离子；
或者为：其中R1、R2和R3独立为C1～C10的烃基；
或者为：其中R4、R5和R6独立为C1～C10的烃基。
3.根据权利要求2所述应用，其特征在于：所述M1、M2和M3独立为Li+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+中的一种；所述R1、R2、R3、R4、R5和R6独立为C1～C5的烃基。
4.根据权利要求3所述应用，其特征在于：所述R1、R2、R3、R4、R5和R6为烷基。
5.根据权利要求1所述应用，其特征在于：所述药物剂型为口服制剂。
6.染料木黄酮及其药用衍生物在制备饲料添加剂中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述染料木黄酮药用衍生物的结构式为：
其中M1、M2和M3独立为IA族、IIA族元素的离子；
或者为：其中R1、R2和R3独立为C1～C10的烃基；
或者为：其中R4、R5和R6独立为C1～C10的烃基。
8.根据权利要求7所述应用，其特征在于：所述M1、M2和M3独立为Li+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+中的一种；所述R1、R2、R3、R4、R5和R6独立为C1～C5的烃基。
9.根据权利要求8所述应用，其特征在于：所述R1、R2、R3、R4、R5和R6为烷基。
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