CN109966289B - 瑞香素在抗鸡球虫病中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了瑞香素在抗鸡球虫病中的应用。将瑞香素与可接受的辅料混合均匀,添加在饲料中,可有效抵抗鸡球虫在鸡体内的繁殖。动物感染试验证实瑞香素的抗球虫指数可达到180以上,抗球虫效果明显,证实瑞香素具有较好的抗鸡球虫的作用;本发明可有效缓解当前养殖业使用抗球虫药物产生的严重耐药性问题,可以在此基础上加快新药的研发速度,对养殖业的绿色、健康发展具有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及瑞香素的一种新应用,具体涉及瑞香素在抗鸡球虫病中的应用。
背景技术
鸡球虫病(Coccidiosis)是由顶复门艾美耳属球虫寄生于鸡的肠道上皮细胞所引起的一种寄生性原虫病。该病传染性较强,几乎有养鸡的地方就有球虫病的发生。主要危害3月龄以内的雏鸡,发病率可达100%,死亡率达80%以上。耐过的雏鸡生长缓慢、消瘦、发育不良,成鸡多为带虫者,增重缓慢,产蛋率下降,对养鸡业的危害十分严重,每年给养鸡业造成巨大的经济损失。在已经报道的七种艾美耳球虫中,以柔嫩艾美耳球虫的致病力最强,发生最广泛。在养鸡业集约化程度日益提高的今天,鸡球虫病的防控也越来越严峻。
当前鸡球虫病的防控主要采用抗球虫药物和活卵囊疫苗免疫相结合的方式,但是活卵囊疫苗仍存在散毒的风险,因此抗球虫药物是控制鸡球虫病的重要措施。但是由于大多数抗球虫药物为化学类产品和抗生素类产品,随着这些药物的长期使用,导致非常严重的抗药性问题,而新药研发的速度又十分缓慢,致使当前养鸡业面临无新药可用的局面,因此迫切需要一种新的抗球虫药物面市。因此,是否可以将诸如瑞香素等人用药物,运用于养殖中,就显得十分重要。
瑞香素(Daphnetin),又名:瑞香内酯、祖师麻甲素、百瑞香素,是从瑞香属植物长白瑞香(Daphne Korean Nakai)中提取出来的有效成分。化学名为7,8-二羟基香豆素,分子式为C9H6O4,其化学结构如式如(Ⅰ)所示。
目前尚未有瑞香素具有抗鸡球虫作用的报导,通过瑞香素已知的性质无法推断其是否具有抗鸡球虫的作用。
发明内容
本发明的目的在于提供瑞香素在抗鸡球虫病中的应用。
本发明所采取的技术方案是:
本发明通过将瑞香素与可接受的辅料,制成散剂,之后将散剂添加至饲料中搅拌均匀。瑞香素的添加量为每100kg饲料中添加15g,使用添加有瑞香素的饲料按日常饲料量饲喂雏鸡;通过雏鸡感染鸡球虫试验证实瑞香素的抗球虫指数(ACI)可达到180以上,证实其具有很好的抗鸡球虫作用。
瑞香素在制备抗鸡球虫病药物中的应用。
进一步的,所述的药物为口服制剂;所述口服制剂包括散剂、颗粒剂。
本发明的有益效果:
本发明的瑞香素抗球虫效果明显,瑞香素的抗球虫指数(ACI)可达到180以上,可有效缓解当前养殖业使用抗球虫药物产生的严重耐药性问题,可以在此基础上加快新药的研发速度,对养殖业的绿色、健康发展具有重要益处。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明,但并不局限于此。
实施例1
瑞香素散剂的制备:取15g瑞香素(含量不低于98%)与85g可溶性淀粉混匀,即可。
用法与用量:将上述100g散剂拌入100kg饲料中混匀,按日常食量饲喂。
下面以瑞香素为代表,结合具体的试验说明。
试验材料
1)对照药物 常规的抗球虫药物——尼卡巴嗪,批号:216120203,由浙江汇能生物股份有限公司生产。
2)瑞香素 100kg饲料中混有15g瑞香素,搅拌均匀。
3)雏鸡 1日龄岭南黄肉鸡,由广东省农业科学院动物科学研究所提供,饲养于已消毒且无球虫的专用动物房内;鸡笼及料槽、水槽均严格消毒,自由采食并饮用纯净水;试验前观察雏鸡有无鸡球虫病临床症状及连续7d检查粪便有无球虫卵囊,有症状和卵囊的鸡淘汰,无症状和无卵囊的鸡备用。
4)鸡球虫卵囊 柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,E.tenella DG株)由广东省农业科学院动物卫生研究所保存。
5)饲料 由广州市恒日目丰饲料有限公司特制,不含任何抗鸡球虫药物。
试验方法
1)鸡球虫卵囊的繁殖 取14日龄20只岭南黄肉鸡经口接种E.tenella(DG株)新鲜孢子化卵囊,每只鸡接种5×104个,7.5天后,处死试验鸡,收集粪便,采用饱和盐水漂浮法纯化并收集鸡球虫卵囊,以2.5%(w/v)重铬酸钾溶液重悬卵囊沉淀,置于28~30℃水浴中震荡培养24~48h,待孢子化率达80%以上时,计数卵囊,置于2~8℃条件下备用。
2)拌料 分别称量药物尼卡巴嗪和瑞香素,称量饲料6份,每份15公斤。其中1份饲料添加药物尼卡巴嗪搅拌均匀,另外3份饲料分别添加不同剂量的瑞香素搅拌均匀,其余2份饲料不添加药物。
3)分组 将14日龄200只岭南黄肉鸡逐只称重,淘汰弱雏和体重过大者,将体重均匀的剩余雏鸡随机分成6组,每组30只,并调整每组雏鸡总体重大致相等。第I组(空白对照)和第Ⅱ组(阳性对照)饲喂不含任何药物饲料,其余四组(组Ⅲ、组Ⅳ、组Ⅴ、组Ⅵ)均于感染球虫卵囊前24小时饲喂添加药物饲料。
4)接种 除第I组(空白对照)外,其余各组雏鸡均经口接种1.2×105个E.tenella(DG株)孢子化卵囊;除第I组(空白对照)和第Ⅱ组(阳性对照)外,其余各组雏鸡均于感染后继续饲喂含药物的饲料,一直持续到试验结束。
5)记录数据 每天观察并记录鸡群的精神状况、采食量、粪便情况等;对死亡雏鸡称重,剖检,观察病变,如因感染球虫而死亡则病变记分为+4分;所有雏鸡于感染后第7.5天称重,剖检,进行盲肠病变记分;最后计算各组雏鸡的增重和饲料报酬,试验雏鸡的分组情况见表1。
表1试验雏鸡分组
6)抗球虫效果评价标准
(1)药效判定方法及标准抗球虫指数(ACI)按美国默克公司推荐的公式计算:
ACI=(相对增重率+存活率)-(卵囊值+病变值);
相对增重率=(试验组增重÷空白对照组增重)×100%;
存活率=(各组存活雏鸡数÷各组雏鸡总数)×100%。
(2)病变按五级记分:
①无卵囊,盲肠正常,为0分;
②有卵囊,盲肠黏膜稍增厚,有少量散在出血或少量血样肠内容物,为+1分;
③有卵囊,盲肠黏膜增厚,有明显出血或明显血样肠内容物,为+2分;
④有卵囊,盲肠黏膜增厚,有大量凝血块或血样肠芯,为+3分;
⑤雏鸡因球虫病死亡或有大量卵囊,盲肠外观呈酱油色(或小肠中部有点状坏死灶,黏膜面呈绯红色),肠管明显肿大,内容物形成明显的血样肠芯,为+4分。
(3)组内病变值=每组平均病变记分×10。
(4)卵囊值由盲肠内容物克卵囊数(OPG)换算而来。
OPG值即每克粪便中的卵囊数(柔嫩×106)。
当OPG值为0~0.1时,卵囊值为0;
当OPG值为0.1~1.0时,卵囊值为1;
当OPG值为2.0~5.0时,卵囊值为10;
当OPG值为6.0~10.0时,卵囊值为20;
当OPG值为≥110.0时,卵囊值为40。
(5)药效判定标准:ACI<120为无效,120~160为弱效,160~180为中效,180以上为强效。卵囊值由盲肠内容物克卵囊数(OPG)换算而来。
试验结果
(一)临床表现观察
组I未接种E.tenella(DG株)孢子化卵囊,试验过程中鸡精神良好,食欲正常,无血便出现;组Ⅱ接种E.tenella(DG株)孢子化卵囊后第2天,鸡出现精神沉郁、呆立,食欲减退等症状;第5天开始出现明显血便,死亡3只,随后血便逐渐减少;组Ⅲ~Ⅵ接种E.tenella(DG株)孢子化卵囊后第2天,鸡食欲减少,第5天未见血便,至试验结束鸡未出现死亡,结果见表2。
表2临床症状记录
(二)盲肠病变记分
雏鸡感染E.tenella(DG株)后第7.5天处死所有试验鸡,剖检,取盲肠进行病变记分,结果第I组(空白对照组)盲肠无病变,病变记分均为0;第Ⅱ组(攻虫对照组)病死鸡记4分,其余鸡盲肠病变记分均为4分;第Ⅲ组(尼卡巴嗪拌料组)平均病变记分为0.6;第Ⅳ组(瑞香素50ppm)鸡盲肠平均病变记分为1.6;第Ⅴ组(瑞香素100ppm)鸡盲肠平均病变记分为1.3;第Ⅵ组(瑞香素150ppm)鸡盲肠平均病变记分为0.5;由结果可知,添加本发明的瑞香素药物后,鸡盲肠病变记分明显降低,说明瑞香素具有抗鸡球虫效果,其中当瑞香素的浓度为150ppm时,病变记分最低,抗鸡球虫效果最显著,具体结果见表3。
表3试验鸡盲肠病变记分结果
(三)计算相对增重率
试验结束后称重,计算各组鸡的相对增重率,参照第I组(空白对照组)相对增重率为100%;第Ⅱ组(攻虫对照组)相对增重率为76.6%;第Ⅲ组(尼卡巴嗪拌料组)相对增重率为93.2%;第Ⅳ组~第Ⅵ组(瑞香素浓度分别为50、100和150ppm)相对增重率分别为86.4%、91.3%和93.6%;由结果可知,添加药物后,药物组相对增重率均明显高于第Ⅱ组(攻虫对照组),说明瑞香素具有抗鸡球虫效果,具体结果见表4。
表4试验鸡相对增重率结果
(四)抗球虫指数
根据盲肠病变记分、相对增重率、存活率、卵囊值等计算各组抗球虫指数,结果给药组(Ⅲ组~Ⅵ组)相对增重率均高于阳性对照组;第Ⅲ组(尼卡巴嗪拌料组)ACI值为186.2,具有强效抗球虫效果,第Ⅳ组~第Ⅵ组(瑞香素50、100、150ppm)ACI值分别为169.4、177.3、187.6,瑞香素拌料组中随着给药剂量的增加,病变值相应降低,而ACI值则不断增加,当瑞香素给药剂量为150ppm时,ACI值最高为187.6,具有强效抗球虫效果,结果见表5。
表5抗球虫指数结果
上述动物试验结果说明瑞香素具有实际的抗球虫效果。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (2)
1.瑞香素在制备抗鸡球虫病药物中的应用,其特征在于,所述抗鸡球虫病为抗鸡柔嫩艾美耳球虫病。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的药物为口服制剂;所述口服制剂包括散剂、颗粒剂。
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瑞香狼毒饲料添加剂对鸡增重及抗球虫作用的研究;杨英等;《中兽医学杂志》;20031231(第115期);第10-12页 * |
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