CN116019168A - 水飞蓟素在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病药物的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了水飞蓟素在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病药物的应用，涉及寄生虫病防治技术领域。具体包括水飞蓟素在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病药物的应用、一种抗鸡球虫病药物和一种抗鸡球虫病鸡饲料。本发明人通过大量实验探究，证明了水飞蓟素具有抗鸡球虫病的新用途，为抗鸡球虫病药物及饲料的开发提供了新的方案，为临床控制鸡球虫病提供了新的思路，拓展了水飞蓟素的应用范围。将水飞蓟素作用于感染鸡柔嫩艾美耳球虫病的雏鸡，与攻毒对照组的鸡只相比，水飞蓟素治疗组的雏鸡卵囊排出减少率达81％，采食了含有水飞蓟素饲料的患病雏鸡的相对增重率提高了27.1％，可提高雏鸡的抗球虫指数达到175.6。
Description
技术领域
本发明属于寄生虫病防治技术领域，具体涉及水飞蓟素在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病药物的应用。
背景技术
鸡球虫病是一种以肠道病变为主的寄生原虫病，是集约化养鸡场最常见的疾病之一，呈世界性分布，鸡球虫病的发病率高达50-70％，死亡率为20-30％，严重时高达80％，其在全球造成的经济损失每年超100亿英镑，美国农业部将该病列为对禽类危害最严重的五大疾病之一。世界公认的鸡球虫有7种，包括柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、布氏艾美耳球虫(E.brunetti)、堆型艾美耳球虫(E.acervulina)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、和缓艾美耳球虫(E.mitis)和早熟艾美耳球虫(E.praecox)。其中寄生于盲肠中的柔嫩艾美耳球虫致病性最强，危害最严重。
目前国内防治鸡球虫病的主要方式仍然是化学药物。但由于频繁用药且药量不断加大，不仅对鸡肉食品安全威胁较大，而且还易产生耐药性。随着人们对身体健康的注重及国家对抗生素药物的使用限制，近年来，利用中药治疗鸡球虫病已经成为研究热点，中药及中药提取物中有效活性成分含量、抑菌消炎效果相对稳定,同时具有低毒低残、不易产生耐药性等诸多优势。
因此，研发出一种有效抗鸡球虫病药物，是本领域技术人员亟待解决的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供水飞蓟素在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病药物的应用。
水飞蓟素(Si lymar i n)是一种天然的黄酮木脂素类化合物，系从菊科植物水飞蓟的干燥果实中提取而得到的天然活性物质，具有保护肝脏、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、调控脂质代谢、抗心血管疾病等多种的生物活性，广泛用于急、慢性肝炎、早期肝硬化、中毒性肝损伤等。目前还尚未有研究表明该药物有抗鸡球虫的作用。水飞蓟素的分子式为C25H22O10，CAS号：65666-07-1，化学结构式为：
在一优选的实施方式中，所述抗鸡球虫病包括：预防或治疗鸡球虫病。
在一优选的实施方式中，所述鸡球虫病的病原虫为艾美耳球虫。
在一优选的实施方式中，所述艾美耳球虫为柔嫩艾美耳球虫。
在一优选的实施方式中，所述预防或治疗鸡球虫病包括：抑制鸡柔嫩艾美耳球虫生长、减少鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊排出、提高感染鸡柔嫩艾美耳球虫后鸡只存活率和相对增重率。
在一优选的实施方式中，所述抗鸡球虫病药物包括水飞蓟素和一种或多种药学上可接受的载体。
在一优选的实施方式中，所述载体包括药学上可接受的稀释剂、润湿剂、黏合剂、闪崩剂、润滑剂、色香味调节剂、溶剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、抗氧剂、金属络合剂、防腐剂、pH调节剂、表面活性剂、赋形剂、填充剂和增效剂。优选的，稀释剂包括如淀粉、蔗糖、纤维素类、无机盐类等；润湿剂包括如水、乙醇等；黏合剂包括如淀粉浆、糊精、糖、纤维素衍生物、明胶、聚维酮、聚乙二醇等；崩解剂包括如淀粉、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、联羧甲基纤维素钠、表面活性剂等；润滑剂包括如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、十二烷基硫酸镁、聚乙二醇等；色香味调味剂包括如色素、甜味剂、香料、胶浆剂等；溶剂包括如水、甘油、乙醇等；增溶剂包括如吐温类、卖泽类、硫酸化物、磺酸化物等；助溶剂包括如有机酸(如枸橼酸)及其盐类、无机盐、聚乙二醇等；乳化剂包括如司盘类、甘油脂肪酸酯、阿拉伯胶、明胶、琼脂、海藻酸钠等；抗氧剂包括如亚硫酸盐、抗坏血酸、没食子酸及其盐类等；金属络合剂包括如乙二胺四乙酸二钠、多羧酸化合物等；防腐剂，包括如尼泊金类、季铵类化合物、醋酸氯己定等；pH调节剂包括如盐酸、酒石酸、醋酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、乙二胺、葡甲胺、磷酸盐、枸橼酸盐等。
在一优选的实施方式中，所述抗鸡球虫病药物的剂型包括但不限于散剂、粉剂、颗粒剂、片剂、微囊剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、喷雾剂等的口服剂、外用剂、栓剂及无菌注射溶液形式的剂型。可以理解的是，本发明所述的水飞蓟素可以与合适种类的载体结合，制备成不同形态的药物，如液态、气态、半固体和固体等，从而形成相应的剂型。
在一优选的实施方式中，所述抗鸡球虫病药物的给药方式包括但不限于群体给药、个体给药以及群体给药和个体给药相结合的方式。可以理解的是，本发明所述的水飞蓟素，基于不同的辅料、不同的剂型，相应的其给药的方式也可以是多样的。如，所述群体给药方式包括但不限于：①混水给药：首先要了解药物在水中溶解度；其次要根据饮水量计算药物用量，若因药物在水中稳定性差时可考虑“口渴服药法”；②混料给药法：将药物混入饲料供自由采食，但药物和饲料必须混合均匀，可采用递加稀释法；③气雾给药。所述个体给药方式包括但不限于：①口服给药：该方式的优点是安全、方便、经济；②注射给药：优点是药物吸收快而完全，剂量准确，作用效果好；注射给药有皮下注射、肌肉注射、静脉注射、鞘内注射、嗉囊注射、动脉注射、关节囊注射等；③局部给药：涂擦、撒粉、湿敷、滴入、灌肠、吸入、植入等。
在一优选的实施方式中，所述鸡饲料包括水飞蓟素和基础饲料。
在一优选的实施方式中，所述基础饲料包括全价配合饲料、浓缩饲料、预混料饲料、精料混合料或者混合饲料。前述饲料均指根据动物的不同生长阶段、不同生理要求、不同生产用途的营养需求以及饲料营养价值评定的实验和研究为基础，按科学配方把不同来源的饲料，以一定比例均匀混合，并按固定的工艺流程生产以满足各种实际需求的混合饲料。其中，①全价配合饲料，是由能量饲料、蛋白质饲料、矿物质饲料、维生素、氨基酸以及微量元素添加剂等，按规定的饲养标准配比而成的、营养全面而平衡的饲料，这类饲料可直接喂养。②浓缩饲料，是指由蛋白质饲料、矿物质饲料(钙、磷、食盐)、添加剂预混料按一定比例混合而成。不能直接喂养，需要加入玉米或者其他能量饲料后方可喂养。③预混料/预混合饲料，是一种或多种微量的添加剂原料和载体以及稀释剂一起拌和均匀的混合料，其微量成分经预混合后，有利于在大量饲料中均匀分布。该饲料属于半成品，不能直接喂养。④精料混合料，是用于营养不足的一种补充精料，主要由能量饲料、蛋白质饲料和矿物质饲料组成，可直接喂养。⑤混合饲料，由某些饲料原料经过简单加工混合而成，为初级配合饲料，主要考虑能量、蛋白质、钙、磷等营养指标。
本发明的另一目的在于提供一种抗鸡球虫病药物，其活性成分包括水飞蓟素；水飞蓟素可以单独地，或者与其他活性成分组合用于抗鸡球虫病。
在一优选的实施方式中，所述抗鸡球虫病药物包括水飞蓟素和一种或多种药学上可接受的载体；优选的，所述载体包括药学上可接受的稀释剂、润湿剂、黏合剂、闪崩剂、润滑剂、色香味调节剂、溶剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、抗氧剂、金属络合剂、防腐剂、pH调节剂、表面活性剂、赋形剂、填充剂和增效剂。
本发明的另一目的在于提供一种抗鸡球虫病鸡饲料，其活性成分包括水飞蓟素；水飞蓟素可以单独地，或者与其他活性成分组合用于抗鸡球虫病。
在一优选的实施方式中，所述抗鸡球虫病饲料包括水飞蓟素和基础饲料；优选的，所述基础饲料包括全价配合饲料、浓缩饲料、预混料饲料、精料混合料或者混合饲料。
与现有技术相比，本发明的技术方案具有如下优点：
本发明人经过大量的实验证明水飞蓟素具有抗鸡球虫病的新用途，为抗鸡球虫病药物及饲料的开发提供了新的方案，为临床控制鸡球虫病提供了新的思路，拓展了水飞蓟素的应用范围。
本发明中，将水飞蓟素作用于感染鸡柔嫩艾美耳球虫病的雏鸡，与攻毒对照组的鸡只相比，水飞蓟素治疗组的雏鸡卵囊排出减少率达81％，表明水飞蓟素能够显著减少柔嫩艾美耳球虫在鸡体内的发育繁殖和卵囊形成，具有较好的预防或治疗鸡柔嫩艾美耳球虫病效果；与攻毒对照组的鸡只相比，采食了含有水飞蓟素饲料的患病雏鸡的相对增重率提高了27.1％。经计算，将水飞蓟素作用于雏鸡，可提高雏鸡的抗球虫指数达到175.6。
具体实施方式
为了使本领域技术人员更好地理解本发明，下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。
若未特别指明，本发明中所用技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，本发明中所用的各种原材料、试剂、仪器和设备等均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。本发明所用试剂如无特殊说明均为分析纯。本发明实施例所用水飞蓟素购自上海麦克林生化科技股份有限公司，纯度为80％。
实施例1鸡柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的制备
用5只14日龄无球虫感染鸡，分别经口接种1×104个孢子化柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)卵囊，感染后144h后连续3天收集粪便，用饱和盐水漂浮法收集卵囊；将收集的卵囊置于27℃摇床培养，期间吸取适量卵囊液镜检，观察孢子化程度，当95％球虫卵囊完成孢子化后，停止培养，计数卵囊量，标记并置于4℃保存备用。
实施例2水飞蓟素的抗鸡球虫效果评价
2.1免疫及攻虫程序
实验材料：
(1)SPF雏鸡为1日龄三黄鸡，购自广西富凤农牧集团有限公司；
(2)日粮饲料为雏料，购自金钱农牧(广西)有限公司，其中不含任何抗球虫药物。
实验步骤：
购买40只1日龄SPF雏鸡，逐只称重，淘汰体重偏低或偏高的鸡，将剩余36只鸡随机分为3组，每组12只鸡，并适当调整使每组雏鸡总体重大致相等。
设计第一组为非攻虫对照组(空白对照组)、第二组为攻虫组(攻毒对照组)、第三组为水飞蓟素攻虫组。
鸡只饲养至5日龄时，向水飞蓟素攻虫组的鸡只日粮中持续添加1g/kg水飞蓟素至试验结束，其余两组仍饲喂不含药物的日粮，其中，1g/kg是指每千克饲料中含有1克水飞蓟素。
鸡只饲养至7日龄时，逐只称重，然后全部经口服接种柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊1×104个/羽。逐日观察，记录鸡只的精神状态、临床表现以及死亡情况。至鸡只13日龄时，每组随机剖杀5只活鸡进行盲肠病变记分；至17日龄时，再次称重收集每组剩余鸡只的粪便，进行卵囊计数。具体攻虫程序见表1。
表1免疫及攻虫程序
2.2水飞蓟素的抗球虫指标
药效判定方法及标准抗球虫指数(ACI)按美国默克公司推荐的公式计算：
1)存活率：攻虫后统计各组鸡只的存活情况，同时，对死亡鸡只进行剖检。结果表明，死亡鸡只均是由于柔嫩艾美耳球虫感染导致的，具体结果见表2。
与攻毒对照组相比，水飞蓟素攻虫组的鸡攻虫后，雏鸡的临床症状减轻，死亡率显著降低，说明水飞蓟素能有效地帮助鸡抵抗柔嫩艾美耳球虫病。
表2雏鸡攻虫后的存活率
2)增重:分别于攻虫和剖杀时对鸡逐只称重，记录攻虫前以及攻虫后到宰杀时鸡的体重变化，计算鸡只的平均增重和相对增重率。比较各组鸡只的攻虫后增重的变化。
增重＝(宰杀时重-攻虫时重)/只
相对增重率(％)＝(实验组增重/非免疫非攻虫组增重率)×100％
各组鸡的平均增重和相对增重率见表3。结果显示，水飞蓟素攻虫组与攻毒对照组之间的平均增重和相对增重率差异显著(P<0.05)，水飞蓟素攻虫组的鸡只相对增重率达98.6％，攻毒对照组鸡只相对增重率是71.5％，说明水飞蓟素能有效预防鸡只感染鸡柔嫩艾美耳球虫后导致的增重下降。
表3雏鸡攻虫后的增重变化
3)盲肠病变记分：在鸡只攻虫后第6天，称重，每组剖杀5只活鸡，按Johnson方法进行盲肠病变记分，记分标准如下：
①0分：未见病变；
②+1分：盲肠壁散在极少数的点状出血斑，肠壁不增厚，内容物正常；
③+2分：盲肠内容物混有少量血液，肠壁稍肥厚，可见很多出血病灶；
④+3分：盲肠内大量血液或盲肠凝块(凝血或灰白色的栓芯)，盲肠壁肥厚，盲肠明显地变形或萎缩；
⑤+4分：盲肠显著萎缩，病变延伸至直肠。盲肠壁极度肥厚，盲肠内容物为凝血或栓芯。
如两侧病变不一致，以病变严重的一侧为准。
病变值＝各组平均病变记分×10
各组的病变记分见表4。由表4可以看出，空白对照组与攻毒对照组之间盲肠病变记分差异明显，说明攻虫成功。攻毒对照组鸡盲肠病变最明显，平均病变记分达2.4；水飞蓟素攻虫组病变记分为1.8。水飞蓟素攻虫组平均分低于攻毒对照组，表明水飞蓟素用药后对鸡柔嫩艾美耳球虫可能存在一定的保护效果，减轻柔嫩艾美耳球虫对鸡盲肠粘膜造成的损伤。
表4雏鸡攻虫后的盲肠病变记分
4)卵囊计数：按麦克马斯特法进行卵囊计数，具体方法为：收取攻虫后6-10天的鸡粪便，加入适量的2.5％的重铬酸钾，充分搅拌粪便，称量粪便总重，用50毫升离心管在不同的三个位置各取三份粪便样品，再次混匀所取得的三份粪便样品，每份称取2g，放入100毫升烧杯，先加10mL饱和食盐水混匀，再加50mL饱和食盐水，混匀后立即取粪液充满两个计数室，静止2mi n，镜检计数。
克粪便卵囊数(OPG)＝两侧计数室卵囊总量×100％
卵囊排出量＝OPG×粪便总重(克)
卵囊减少率(％)＝(攻毒对照组鸡的卵囊排出量-水飞蓟素攻虫组鸡的卵囊排出量)/攻毒对照组鸡的卵囊排出量×100％
各组鸡的卵囊排出量和卵囊减少率结果见表5，由表5可看出水飞蓟素治疗组的雏鸡鸡卵囊排出减少率达81％，与攻毒对照组鸡相比，差异极显著(P<0.01)，表明水飞蓟素能够显著减少柔嫩艾美耳球虫在鸡体内的发育繁殖和卵囊形成，具有较好的预防或治疗鸡柔嫩艾美耳球虫病效果。
表5雏鸡攻虫后的卵囊排出量
5)抗球虫指数(ACI)：
测得上述指标后，按照抗球虫指数计算公式：
ACI＝(相对增重率+成活率)-(病变值+卵囊值)。
其中，AC I>180为高效抗球虫药，160<ACI<180为中效抗球虫药，120<ACI<160为低效抗球虫药，ACI<120为无效抗球虫药。
本实施例结果如表6所示，经过实验结果分析，水飞蓟素的抗球虫指数为175.6，表现为中效抗球虫药。
表6药物抗球虫指数(AC I)
前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。
Claims (10)
1.水飞蓟素在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病药物的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗鸡球虫病包括：预防或治疗鸡球虫病。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述鸡球虫病的病原虫为艾美耳球虫。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述艾美耳球虫为柔嫩艾美耳球虫。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述抗鸡球虫病药物包括水飞蓟素和一种或多种药学上可接受的载体。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述载体包括药学上可接受的稀释剂、润湿剂、黏合剂、闪崩剂、润滑剂、色香味调节剂、溶剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、抗氧剂、金属络合剂、防腐剂、pH调节剂、表面活性剂、赋形剂、填充剂和增效剂。
7.如权利要求1-6任意一项所述的应用，其特征在于，所述鸡饲料包括水飞蓟素和基础饲料。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述基础饲料包括全价配合饲料、浓缩饲料、预混料饲料、精料混合料或者混合饲料。
9.一种抗鸡球虫病药物，其特征在于，活性成分包括水飞蓟素。
10.一种抗鸡球虫病鸡饲料，其特征在于，活性成分包括水飞蓟素。
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| CN116019168A true CN116019168A (zh) | 2023-04-28 |
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ID=86077434
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211694424.3A Pending CN116019168A (zh) | 2022-12-28 | 2022-12-28 | 水飞蓟素在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病药物的应用 |
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| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116019168A (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105380939A (zh) * | 2015-11-12 | 2016-03-09 | 广东省农业科学院动物卫生研究所 | 染料木黄酮及其药用衍生物在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用 |
| CN109527216A (zh) * | 2018-12-29 | 2019-03-29 | 南昌傲农生物科技有限公司 | 一种替代抗生素的饲料添加剂及其制备方法与应用 |
| CN114304385A (zh) * | 2021-12-08 | 2022-04-12 | 江苏隆达生物科技有限公司 | 一种含有水飞蓟提取物的提高畜禽免疫功能的饲料添加剂 |
| CN114711340A (zh) * | 2022-06-01 | 2022-07-08 | 潍坊柯能生物科技有限公司 | 一种促进肉鸡生长的饲料及其制备方法 |
-
2022
- 2022-12-28 CN CN202211694424.3A patent/CN116019168A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105380939A (zh) * | 2015-11-12 | 2016-03-09 | 广东省农业科学院动物卫生研究所 | 染料木黄酮及其药用衍生物在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用 |
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Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 杨宝峰，等: "中华医学百科全书•药理学", vol. 1, 31 May 2021, 中国协和医科大学出版社, pages: 276 * |
| 邹知明，等: "柚子嫩茎叶对家兔生长及防制球虫病的研究", 动物保健, 31 December 2010 (2010-12-31), pages 78 - 80 * |
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