CN105362283A - 连翘苷/连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品中的应用 - Google Patents
连翘苷/连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105362283A CN105362283A CN201410389232.0A CN201410389232A CN105362283A CN 105362283 A CN105362283 A CN 105362283A CN 201410389232 A CN201410389232 A CN 201410389232A CN 105362283 A CN105362283 A CN 105362283A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- phillyrin
- phillygenol
- compositions
- group
- virus
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- KFFCKOBAHMGTMW-LGQRSHAYSA-N Forsythin Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1[C@H]1[C@@H](CO[C@@H]2C=3C=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)=CC=3)[C@@H]2CO1 KFFCKOBAHMGTMW-LGQRSHAYSA-N 0.000 title claims abstract description 245
- CPJKKWDCUOOTEW-UHFFFAOYSA-N sylvatesmin Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1C(COC2C=3C=C(OC)C(O)=CC=3)C2CO1 CPJKKWDCUOOTEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 238
- JJVGFDTWFVSBIM-UHFFFAOYSA-N Phillyrin Natural products COc1ccc(cc1OC)C2OCC3C2COC3c4ccc(OC)c(OC5OC(CO)C(O)C(O)C5O)c4 JJVGFDTWFVSBIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 232
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 202
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 66
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 title claims abstract description 43
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 34
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title claims abstract description 25
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title claims abstract description 25
- 230000036541 health Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title abstract description 27
- DJHDOMQWAUJNKX-UHFFFAOYSA-N phillygenin Natural products COc1ccc(cc1O)C2OCC3C2COC3c4ccc(OC)c(OC)c4 DJHDOMQWAUJNKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 38
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 claims abstract description 13
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 claims abstract description 9
- 241000709687 Coxsackievirus Species 0.000 claims abstract description 6
- CPJKKWDCUOOTEW-YJPXFSGGSA-N 4-[(3s,3ar,6r,6ar)-6-(3,4-dimethoxyphenyl)-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrofuro[3,4-c]furan-3-yl]-2-methoxyphenol Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1[C@H]1[C@@H](CO[C@@H]2C=3C=C(OC)C(O)=CC=3)[C@@H]2CO1 CPJKKWDCUOOTEW-YJPXFSGGSA-N 0.000 claims description 249
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 50
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 claims description 33
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 29
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 26
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 claims description 23
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 21
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims description 21
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 18
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 13
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 claims description 13
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 11
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 11
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 9
- 241000701085 Human alphaherpesvirus 3 Species 0.000 claims description 8
- -1 cataplasma Substances 0.000 claims description 8
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 8
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 claims description 7
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 claims description 6
- GDSRMADSINPKSL-HSEONFRVSA-N gamma-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO GDSRMADSINPKSL-HSEONFRVSA-N 0.000 claims description 6
- 229940080345 gamma-cyclodextrin Drugs 0.000 claims description 6
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims description 5
- 241000709675 Coxsackievirus B3 Species 0.000 claims description 4
- 241001597008 Nomeidae Species 0.000 claims description 4
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 claims description 4
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 4
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims description 4
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 4
- 239000011505 plaster Substances 0.000 claims description 4
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 4
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims description 4
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 45
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 31
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 abstract description 20
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 abstract description 13
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 abstract description 5
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 abstract description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 3
- 239000002547 new drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 abstract 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 42
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 37
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 30
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 19
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 19
- 239000000047 product Substances 0.000 description 17
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 16
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 16
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 15
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 15
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 13
- 231100000111 LD50 Toxicity 0.000 description 12
- 241001429382 Coxsackievirus A16 Species 0.000 description 11
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 11
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 11
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 11
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 11
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 10
- 230000001166 anti-perspirative effect Effects 0.000 description 10
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 10
- 239000003213 antiperspirant Substances 0.000 description 10
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 10
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 10
- 210000000106 sweat gland Anatomy 0.000 description 10
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- QCHFTSOMWOSFHM-WPRPVWTQSA-N (+)-Pilocarpine Chemical compound C1OC(=O)[C@@H](CC)[C@H]1CC1=CN=CN1C QCHFTSOMWOSFHM-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 8
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 8
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 8
- 229960004756 ethanol Drugs 0.000 description 8
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 8
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- VSZGPKBBMSAYNT-RRFJBIMHSA-N oseltamivir Chemical compound CCOC(=O)C1=C[C@@H](OC(CC)CC)[C@H](NC(C)=O)[C@@H](N)C1 VSZGPKBBMSAYNT-RRFJBIMHSA-N 0.000 description 8
- 229960002194 oseltamivir phosphate Drugs 0.000 description 8
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 description 7
- QCHFTSOMWOSFHM-UHFFFAOYSA-N SJ000285536 Natural products C1OC(=O)C(CC)C1CC1=CN=CN1C QCHFTSOMWOSFHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 7
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 7
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 7
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 7
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 7
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 7
- 229960001416 pilocarpine Drugs 0.000 description 7
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 7
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 6
- 206010033971 Paratyphoid fever Diseases 0.000 description 6
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 208000037386 Typhoid Diseases 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 6
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 6
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 6
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 6
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 6
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 6
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 6
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 229960000329 ribavirin Drugs 0.000 description 6
- HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N ribavirin Natural products O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1N=CN=C1 HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N 0.000 description 6
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 201000008297 typhoid fever Diseases 0.000 description 6
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 6
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 5
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 5
- 238000010422 painting Methods 0.000 description 5
- 229960005489 paracetamol Drugs 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- 210000000436 anus Anatomy 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 4
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 4
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 4
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 4
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 4
- 206010006448 Bronchiolitis Diseases 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 241000701076 Macacine alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 3
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 3
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 description 3
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 3
- 206010046306 Upper respiratory tract infection Diseases 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000001754 anti-pyretic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002221 antipyretic Substances 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 229960000935 dehydrated alcohol Drugs 0.000 description 3
- FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxomagnesium;hydrate Chemical compound O.[Mg]=O.[Mg]=O.[Mg]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 208000030194 mouth disease Diseases 0.000 description 3
- 231100000028 nontoxic concentration Toxicity 0.000 description 3
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 3
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 3
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QGKBSGBYSPTPKJ-UZMKXNTCSA-N 2,6-di-o-methyl-β-cyclodextrin Chemical compound COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1OC)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COC)[C@H]([C@@H]([C@H]3OC)O)O[C@H]3O[C@H](COC)[C@H]([C@@H]([C@H]3OC)O)O[C@H]3O[C@H](COC)[C@H]([C@@H]([C@H]3OC)O)O[C@H]3O[C@H](COC)[C@H]([C@@H]([C@H]3OC)O)O3)[C@H](O)[C@H]2OC)COC)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](OC)[C@@H]3O[C@@H]1COC QGKBSGBYSPTPKJ-UZMKXNTCSA-N 0.000 description 2
- NZAQRZWBQUIBSF-UHFFFAOYSA-N 4-(4-sulfobutoxy)butane-1-sulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCCCOCCCCS(O)(=O)=O NZAQRZWBQUIBSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 2
- 239000001116 FEMA 4028 Substances 0.000 description 2
- 241000628997 Flos Species 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000555712 Forsythia Species 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 2
- 241000207834 Oleaceae Species 0.000 description 2
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 2
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 2
- 239000010231 banlangen Substances 0.000 description 2
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 description 2
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 2
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 2
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 2
- 208000020029 respiratory tract infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 2
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- UAJTZZNRJCKXJN-UHFFFAOYSA-M sodium;2-dodecoxy-2-oxoethanesulfonate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOC(=O)CS([O-])(=O)=O UAJTZZNRJCKXJN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000012109 statistical procedure Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- DKVBOUDTNWVDEP-NJCHZNEYSA-N teicoplanin aglycone Chemical compound N([C@H](C(N[C@@H](C1=CC(O)=CC(O)=C1C=1C(O)=CC=C2C=1)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)OC=1C=C3C=C(C=1O)OC1=CC=C(C=C1Cl)C[C@H](C(=O)N1)NC([C@H](N)C=4C=C(O5)C(O)=CC=4)=O)C(=O)[C@@H]2NC(=O)[C@@H]3NC(=O)[C@@H]1C1=CC5=CC(O)=C1 DKVBOUDTNWVDEP-NJCHZNEYSA-N 0.000 description 2
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 2
- ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N trappsol cyclo Chemical compound CC(O)COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)COCC(O)C)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1COCC(C)O ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N 0.000 description 2
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 2
- PCWPQSDFNIFUPO-VDQKLNDWSA-N (1S,3R,5R,6S,8R,10R,11S,13R,15R,16S,18R,20R,21S,23R,25R,26S,28R,30R,31S,33R,35R,36R,37S,38R,39S,40R,41S,42R,43S,44R,45S,46R,47S,48R,49S)-37,39,41,43,45,47,49-heptakis(2-hydroxyethoxy)-5,10,15,20,25,30,35-heptakis(hydroxymethyl)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29,32,34-tetradecaoxaoctacyclo[31.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26.228,31]nonatetracontane-36,38,40,42,44,46,48-heptol Chemical group OCCO[C@H]1[C@H](O)[C@@H]2O[C@H]3O[C@H](CO)[C@@H](O[C@H]4O[C@H](CO)[C@@H](O[C@H]5O[C@H](CO)[C@@H](O[C@H]6O[C@H](CO)[C@@H](O[C@H]7O[C@H](CO)[C@@H](O[C@H]8O[C@H](CO)[C@@H](O[C@H]1O[C@@H]2CO)[C@@H](O)[C@@H]8OCCO)[C@@H](O)[C@@H]7OCCO)[C@@H](O)[C@@H]6OCCO)[C@@H](O)[C@@H]5OCCO)[C@@H](O)[C@@H]4OCCO)[C@@H](O)[C@@H]3OCCO PCWPQSDFNIFUPO-VDQKLNDWSA-N 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-AAKVHIHISA-N 2,3-bis[[(z)-12-hydroxyoctadec-9-enoyl]oxy]propyl (z)-12-hydroxyoctadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCC(O)C\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC\C=C/CC(O)CCCCCC)COC(=O)CCCCCCC\C=C/CC(O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-AAKVHIHISA-N 0.000 description 1
- YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 4-toluenesulfonyl chloride Chemical compound CC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- COXVTLYNGOIATD-HVMBLDELSA-N CC1=C(C=CC(=C1)C1=CC(C)=C(C=C1)\N=N\C1=C(O)C2=C(N)C(=CC(=C2C=C1)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O)\N=N\C1=CC=C2C(=CC(=C(N)C2=C1O)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O Chemical compound CC1=C(C=CC(=C1)C1=CC(C)=C(C=C1)\N=N\C1=C(O)C2=C(N)C(=CC(=C2C=C1)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O)\N=N\C1=CC=C2C(=CC(=C(N)C2=C1O)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O COXVTLYNGOIATD-HVMBLDELSA-N 0.000 description 1
- 206010007247 Carbuncle Diseases 0.000 description 1
- 241000050051 Chelone glabra Species 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- DBAKFASWICGISY-BTJKTKAUSA-N Chlorpheniramine maleate Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O.C=1C=CC=NC=1C(CCN(C)C)C1=CC=C(Cl)C=C1 DBAKFASWICGISY-BTJKTKAUSA-N 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010015719 Exsanguination Diseases 0.000 description 1
- 241000576429 Forsythia suspensa Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 206010069767 H1N1 influenza Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 240000000233 Melia azedarach Species 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- MKYBYDHXWVHEJW-UHFFFAOYSA-N N-[1-oxo-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propan-2-yl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(C(C)NC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 MKYBYDHXWVHEJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035109 Pneumococcal Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010035742 Pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 208000026062 Tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- FRMNJQBQFVJDJE-UHFFFAOYSA-N [Cl].[S].CC1=CC=CC=C1 Chemical compound [Cl].[S].CC1=CC=CC=C1 FRMNJQBQFVJDJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical group [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 238000002832 anti-viral assay Methods 0.000 description 1
- 238000011951 anti-virus test Methods 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229940046978 chlorpheniramine maleate Drugs 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 229960003699 evans blue Drugs 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000000556 factor analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000012847 fine chemical Substances 0.000 description 1
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 1
- 150000008131 glucosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000009863 impact test Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 201000007227 lymph node tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012567 medical material Substances 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000474 nursing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000000879 optical micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 238000000197 pyrolysis Methods 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 1
- 210000003371 toe Anatomy 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 1
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 1
- 239000002435 venom Substances 0.000 description 1
- 210000001048 venom Anatomy 0.000 description 1
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
- A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
- A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
- A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/2022—Organic macromolecular compounds
- A61K9/205—Polysaccharides, e.g. alginate, gums; Cyclodextrin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/5005—Wall or coating material
- A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
- A61K9/5036—Polysaccharides, e.g. gums, alginate; Cyclodextrin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
- A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种连翘苷与连翘脂素的组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病药物中的新应用。试验证明,连翘苷与连翘脂素的组合物治疗病毒性流感及肺炎疗效显著,并对呼吸道合胞病毒、肠道病毒、单纯带状疱疹病毒、柯萨奇病毒等均具有显著疗效。该组合物见效快、毒副作用小、是一种安全、高效、稳定、制备工艺简单的抗病毒药物和保健品,适于工业化生产,易于推广。本发明为预防和治疗多种病毒性疾病提供了一种新的药物、保健品及原料。
Description
技术领域
本发明属于药物化学领域,具体而言,本发明涉及连翘苷/连翘脂素组合物或混合物及其在制备用于缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品中的应用。
背景技术
流行性感冒是严重危害人类健康的急性、病毒性呼吸道传染病。二十一世纪以来,SARS、H5N1病毒和甲型H1N1流感病毒的流行,给人类带来极大的危害。目前世界上尚无有效治疗病毒性流感及肺炎的天然药物。
连翘为木犀科(Oleaceae)连翘属(Forsythia)植物连翘(Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl)的干燥果实,主要分布于我国河南、山西、陕西、山东等地,此外,湖北、河北、四川、甘肃亦有分布。常用于治疗急性风热感冒、痈肿疮毒、淋巴结结核、尿路感染等症[1]。连翘的主要成分为连翘苷(phillyrin)和连翘苷元,连翘苷元又称连翘脂素((+)-phillygeninin),两种成分的结构式如下。
连翘主要成分为连翘苷,具有抗病毒、抗菌、抗氧化、清除自由基等药理作用。连翘脂素,亦为连翘的主要活性成分之一,具有抗氧化、降低血脂、清除自由基、抑菌、抗肿瘤、抗炎等作用。已发表文献中,主要对未明确成分和已明确几种成分的连翘提取物、连翘苷单一成分抗病毒药理作用进行了研究,而未见有人对连翘脂素和连翘苷的组合物、连翘脂素单一成分进行抗病毒药理作用研究。
发明内容
本发明的目的是针对现有在治疗、预防或缓解病毒性疾病的过程中存在的技术缺陷,提供一种连翘苷/连翘脂素组合物在制备用于缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品中的应用。本发明的连翘脂素/连翘苷组合物缓解或/和治疗病毒性疾病的性能和功效强,为研制用于缓解或/和治疗病毒性疾病的新药提供了新的途径,即在治疗、调理和缓解病毒性疾病的药物或保健食品中的新应用提供了新的思路。
为实现上述目的,本发明一方面提供一种连翘苷/连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品中的应用。
其中,所述病毒性疾病为流感病毒、副流感病毒、柯萨奇病毒CoxA16、呼吸道合胞病毒RSV、单纯带状疱疹病毒HSV-I、单纯带状疱疹病毒HSV-II、单纯带状疱疹病毒CVB3、腺病毒ADV或肠道病毒EV71所致病毒性疾病,尤其是由流感病毒、副流感病毒、柯萨奇病毒CoxA16、呼吸道合胞病毒RSV所致的病毒性感冒、肺炎呼吸道传染病。
在筛选具有缓解或/和治疗病毒性流感及肺炎呼吸道传染病作用的天然活性成分的过程中,发明人发现连翘苷/连翘脂素组合物具有强烈的抑制病毒性流感及肺炎的作用,其疗效显著优于连翘苷或连翘脂素单独使用的效果。
其中,所述连翘苷/连翘脂素组合物中连翘苷与连翘脂素的重量份配比为80-98:2-20,优选为90-98:2-10,进一步优选为98:2。
特别是,所述连翘苷/连翘脂素组合物还包括药学上可接受的载体。
药学上可接受的载体通常被保健专家认可用于这一目的且作为药剂的非活性成分。有关药学上可接受的载体的汇编可以在《药物赋形剂手册》(HandbookofPharmaceuticalexcipients,第2版,由A.Wade和P.J.Weller编辑;AmericanPhar-maceuticalAssociation出版,WashingtonandThePharmaceuticalPress,London,1994)等工具书中找到。
尤其是,所述的载体包括赋形剂,如淀粉、水等;润滑剂,如硬脂酸镁等;崩解剂,如微晶纤维素等;填充剂,如乳糖等;粘结剂,如预胶化淀粉、糊精等;甜味剂;抗氧化剂;防腐剂、矫味剂、香料等。
特别是,所述药物以片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、乳剂、注射剂、喷雾剂、气雾剂、凝胶剂、霜剂、巴布剂、橡胶贴膏剂或贴膏剂形式存在。
其中,所述连翘苷/连翘脂素组合物中连翘苷与连翘脂素的总重量与药学上可接受的载体的重量之比为1:1~1:100,优选为1:10,进一步优选为1:5,更进一步优选为1:2,再更进一步优选为1:1。
特别是,所述的连翘苷/连翘脂素组合物含量≥80%,优选为≥85%,进一步优选为≥88%,更进一步优选为≥90%,再更进一步优选为≥99%。
特别是,所述的连翘苷/连翘脂素组合物中两种成分的重量比为:2~98:98~2;优选为80:20或20:80,进一步优选为90:,6或6:90,更进一步优选为98:2或2:98。
其中,所述连翘苷/连翘脂素组合物以连翘苷和连翘脂素以单体组成、或采用溶剂加热提取方法制备而成的连翘脂素-连翘苷提取组合物,或连翘脂素和连翘苷与环糊精或环糊精的衍生物组合而成连翘脂素-连翘苷-环糊精组合物。
特别是,所述连翘脂素-连翘苷-环糊精组合物选择连翘脂素和连翘苷与α-、β-或γ-环糊精或其衍生物相混合而成的混合物,或连翘脂素和连翘苷与α-、β-或γ-环糊精或其衍生物经物理、化学方法处理形成的复合物。
其中,所述连翘脂素-连翘苷-环糊精组合物中连翘苷和连翘脂素重量与环糊精或环糊精的衍生物的重量之比为1:1-50。
特别是,所述环糊精为α-或β-、γ-环糊精;所述环糊精衍生物为羟乙基β-环糊精、2,6-二甲基β-环糊精、2,3,6-三甲基β-环糊精、2,6-二乙基β-环糊精、2,3,6-三乙基β-环糊精、麦芽糖基β-环糊精或磺丁醚β-环糊精、对甲基苯磺酰氯(p-TsCl)取代的β-环糊精、6-位取代的β-CD对甲基苯磺酸酯(β-环糊精-6-OTs)、2-氧羟丙基-β-环糊精、2-位单取代的对甲基苯磺酸酯(β-环糊精-2-OTs)、β-环糊精对甲基苯磺酸酯(Tosyl-β-CD)、β-环糊精的星形大分子PCL-(Tos)7-β-CD。
其中,所述连翘脂素-连翘苷提取组合物按照如下方法提取制备而成:
1)采用溶剂对连翘叶或连翘果实进行加热回流提取2~3次,每次2~4小时;
2)提取液浓缩后静置,析出沉淀,获得连翘脂素和连翘苷混合物粗品;
3)将连翘脂素和连翘苷混合物粗品采用溶剂溶解后,静置,析出结晶,获得连翘脂素和连翘苷混合物;
4)用溶剂对连翘脂素和连翘苷混合物进行重结晶处理,得到连翘脂素-翘苷提取物。
特别是,步骤1)、3)、4)中所述溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、含水甲醇或含水乙醇。
尤其是,所述含水甲醇的质量百分比浓度为70-95%;所述含水乙醇的质量百分比浓度为70-95%。
其中,步骤2)中静置的温度为室温,优选为10-35℃,进一步优选为20-25℃;静置时间为1-48h;步骤2)中提取液浓缩后的体积与原提取液的体积之比为0.1-0.5:1。
特别是,步骤4)中所述重结晶处理的温度为室温,优选为10-35℃,进一步优选为20-25℃。
本发明另一方面提供一种缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品,含有连翘苷和连翘脂素。
其中,所述连翘苷与连翘脂素的重量份配比为80-98:2-20,优选为90-98:2-10,进一步优选为98:2。
特别是,所述药物或保健品由连翘苷/连翘脂素组合物和药学上可接受的载体组成。
其中,所述连翘苷/连翘脂素组合物中连翘苷与连翘脂素的总重量与药学上可接受的载体的重量之比为1:1~1:100,优选为1:10,进一步优选为1:5,更进一步优选为1:2,再更进一步优选为1:1。
特别是,所述连翘脂素/连翘苷组合物的重量与所述药物或保健品的总重量之比为0.01~10:100,优选为0.1~10:100,进一步优选为1~10:100。
特别是,所述药物以片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、乳剂、注射剂、喷雾剂、气雾剂、凝胶剂、霜剂、巴布剂、橡胶贴膏剂或贴膏剂形式存在。
特别是,所述药物或保健品中还包括蒲公英提取物、板蓝根提取物、金银花提取物、知母提取物、玄参提取物、夏枯草提取物、芦根提取物、淡竹叶提取物、栀子提取物、川贝提取物、苦丁茶提取物、鱼腥草提取物中的一种或多种。
所述药物可以采用本领域公知的方法制成各种剂型,如片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、乳剂、注射剂、喷雾剂、气雾剂、凝胶剂、霜剂、巴布剂、橡胶贴膏剂或贴膏剂等。
本发明还提供了一种治疗病毒性流感及肺炎疾病的方法,包括向受试者给予治疗有效量的连翘脂素和连翘苷的组合物的药物组合物,其治疗有效量为0.1~50mg/kg.d,优选为0.3~30mg/kg.d,进一步优选为0.5~10mg/kg.d。
除非另外说明,本文所用的术语“治疗有效量”为需要产生有效作用的药物的用量;“治疗有效量”是可以调整和变化的,最终由医务人员确定,其所考虑的因素包括给药途径和制剂的性质、接受者的体重、年龄等一般情况以及所治疗疾病的性质和严重程度。
与现有技术相比,本发明具有如下的明显优点:
本发明连翘苷/连翘脂素组合物的制备方法简便、适于工业化生产,组合物具有明显的抗流感、肺炎等多种病毒的疗效,且抗病毒效果显著优于单独使用连翘苷、连翘脂素的疗效,也明显优于目前临床最新抗病毒药——磷酸奥司他韦(达菲);此外,还发掘了连翘苷/连翘脂素组合物具有抗其他病毒的疗效,能显著抑制柯萨奇病毒CoxA16及呼吸道合胞病毒RSV、单纯带状疱疹病毒HSV-I和HSV-II及CVB3、腺病毒ADV、肠道病毒EV71,可用于治疗上述病毒所致流感及肺炎、带状疱疹、心肌炎、手足口病、上呼吸道感染、毛细支气管炎、皮疹、脑膜炎等疾病,故本发明可制备成用于缓解或/和治疗病毒性流感及肺炎、带状疱疹、心肌炎、手足口病、上呼吸道感染、毛细支气管炎、皮疹、脑膜炎等疾病的高效天然药物或保健食品,为连翘药材的应用开拓了一个新的领域。
1、本发明的连翘苷/连翘脂素组合物具有抗流感及肺炎病毒的疗效,其疗效显著优于连翘苷、连翘脂素单独用药的疗效,连翘苷与连翘脂素按照特定比例组合使用,具有协同增效的作用;
2、本发明的连翘苷/连翘脂素组合物具有抑制柯萨奇病毒CoxA16及呼吸道合胞病毒RSV、单纯带状疱疹病毒HSV-I和HSV-II及CVB3、腺病毒ADV、肠道病毒EV71等多种病毒的作用,连翘苷/连翘脂素组合物治疗上述病毒所致流感及肺炎、带状疱疹、心肌炎、手足口病、上呼吸道感染、毛细支气管炎、皮疹、脑膜炎等疾病;
3、本发明的连翘苷/连翘脂素组合物具有显著抑制病毒所致炎症及增强患者的免疫力的功效;连翘苷/连翘脂素组合物抑制病毒性流感及肺炎的药理作用强,用于缓解、调理和治疗病毒性流感及肺炎的功效显著,见效快、毒副作用小、安全性好,能够长期服用,具有良好的药用前景;
4、本发明的产品原料来源丰富、价廉、临床使用安全,制备工艺简单,可制成各种剂型,且服量小,使用方便,因此易于推广;
5、本发明的连翘苷/连翘脂素组合物既可采用单体成分定量配制而成,也可通过提取制备成连翘苷/连翘脂素组合物,或上述连翘苷/连翘脂素组合物与一种α-或β-、γ-环糊精或环糊精的衍生物组合而成配方成组合物,还可采用连翘苷/连翘脂素组合物与其他活性成分(例如与蒲公英提取物、板蓝根提取物、金银花提取物、知母提取物、玄参提取物、夏枯草提取物、芦根提取物、淡竹叶提取物、栀子提取物、川贝提取物、苦丁茶提取物、鱼腥草提取物中的一种或多种)共同组方,制备治疗病毒性流感、肺炎及其他病毒性疾病的复方药物。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步描述本发明所述配方的有益效果。这些实施例仅是范例性的,并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是,在不偏离本发明的配方思路、用途范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换,但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
实施例1-4连翘苷/连翘脂素组合物的制备
分别取连翘苷和连翘脂素的两种单体成分粉末,两者可以按表1的重量比混合制备成连翘苷/连翘脂素组合物,连翘苷单体由大连富生天然药物开发有限公司生产,经高效液相色谱两种检测器紫外检测器和蒸发光散射检测器面积归一化法测定,其纯度为99.5%,并用中国药品生物制品含量测定用连翘苷对照品标定和确认其含量为99.5%;连翘脂素由大连富生天然药物开发有限公司生产,经高效液相色谱两种检测器紫外检测器和蒸发光散射检测器面积归一化法测定,其纯度为99.1%。
表1实施例1-4的连翘苷/连翘脂素组合物的原料配比表
实施例5-24连翘苷/连翘脂素组合物的制备
取实施例1-4制备的连翘苷/连翘脂素组合物,以表2所述重量比、按以下方法制备组合物:(1)直接加入到环糊精溶液中,或(2)直接加入到环糊精溶液中并充分搅拌1-24h、(3)直接加入到环糊精溶液中并加热10-120分钟、(4)直接加入到环糊精溶液中并超声10-120分钟、(5)直接与环糊精粉末研磨10-120分钟、(6)使连翘苷/连翘脂素组合物与所述环糊精粉末混合均匀、过筛;(7)直接加入环糊精衍生物溶液中,或(8)直接加入到环糊精衍生物溶液中并充分搅拌1-24h、(9)直接加入到环糊精衍生物溶液中并加热10-120分钟、(10)直接加入到环糊精衍生物溶液中并超声10-120分钟、(11)直接与环糊精衍生物粉末研磨10-120分钟、(12)与环糊精衍生物粉末混合均匀、过筛。
表2实施例5-24的原料配比和制备方法
实施例5-24中的辅料以选用β-环糊精为例进行举例说明,其他环糊精、环糊精衍生物均适用于本发明,例如1)β-羟丙基环糊精、2)羟乙基β-环糊、3)2,6-二甲基β-环糊精、4)2,3,6-三甲基β-环糊精、5)2,6-二乙基β-环糊精、6)2,3,6-三乙基β-环糊精、7)麦芽糖基β-环糊精、8)磺丁醚β-环糊精、9)对甲基苯磺氯(p-TsCl)取代的β-环糊精、10)6-位取代的β-CD对甲基苯磺酸酯(β-环糊精-6-OTs)、11)2-氧羟丙基-β-环糊精、12)2-位单取代的对甲基苯磺酸酯(β-环糊精-2-OTs)、13)β-环糊精对甲基苯磺酸酯(Tosyl-β-CD)j,以及15)β-环糊精的星形大分子PCL-(Tos)7-β-CD。
实施例25连翘苷和连翘脂素组合物的制备
干燥的连翘叶1kg,加入95%(m/m)乙醇10kg,加热回流提取2次,每次2小时,过滤,滤液减压浓缩至原体积的1/2,于25℃放置1h,析出沉淀;再用甲醇溶解,进行重结晶,析出沉淀;重复上述方法用甲醇重结晶,得连翘苷/连翘脂素组合物无定形粉末,采用HPLC测定连翘苷、连翘脂素的含量,分别为98%、2%。
实施例26连翘苷和连翘脂素组合物的制备
干燥的连翘果实1kg,加入甲醇10kg,加热回流提取3次,每次4小时,过滤,滤液减压浓缩至原体积的1/10,于20℃放置48h,析出沉淀;再用乙醇溶解,进行重结晶,析出沉淀;重复上述方法用乙醇重结晶,得连翘苷/连翘脂素组合物无定形粉末,其所含连翘苷、连翘脂素的含量分别为95%、4%。
实施例27连翘苷和连翘脂素组合物的制备
干燥的连翘叶1kg,加入70%(m/m)甲醇10kg,加热回流提取3次,每次3小时,过滤,滤液减压浓缩至原体积的1/3,于室温放置2h,析出沉淀;再用90%甲醇溶解之,进行重结晶,析出沉淀;重复上述方法用甲醇重结晶,得连翘苷/连翘脂素组合物无定形粉末,其所含连翘苷、连翘脂素的含量分别为88%、2%。
实施例28连翘苷和连翘脂素组合物的制备
干燥的连翘果实1kg,加入无水乙醇10kg,加热回流提取2次,每次4小时,过滤,滤液减压浓缩至原体积的1/4,于室温放置24h,析出沉淀;再用丙酮溶解之,进行重结晶,析出沉淀;重复上述方法用丙酮重结晶,得连翘苷/连翘脂素组合物无定形粉末,其所含连翘苷、连翘脂素的含量分别为90%、6%。
实施例29连翘苷和连翘脂素组合物的制备
干燥的连翘叶子1kg,加入丙酮10kg,加热回流提取3次,每次3小时,过滤,滤液减压浓缩至原体积的1/5,于室温放置10h,析出沉淀;再用70%乙醇溶解之,进行重结晶,析出沉淀;重复上述方法用70%乙醇重结晶,得连翘苷/连翘脂素组合物无定形粉末,其所含连翘苷、连翘脂素的含量分别为80%、5%。
实施例30连翘苷和连翘脂素组合物片剂制备
按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的片剂:
按上述配比,取实施例1中制备的连翘苷/连翘脂素组合物与淀粉混合均匀后,制成颗粒,加入滑石粉和硬脂酸镁混合均匀后压制成10000片。
实施例31连翘苷/连翘脂素组合物颗粒剂制备
按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的颗粒剂:
连翘苷/连翘脂素组合物(两者重量比为98:2)100g
微晶纤维素10000g
按上述配比,取实施例1中制备的连翘苷/连翘脂素组合物与微晶纤维素混合均匀后,制成颗粒装袋,制成10000袋。
实施例32连翘苷/连翘脂素组合物胶囊剂制备
按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的胶囊剂:
连翘苷/连翘脂素组合物(两者重量比为98:2)250g
淀粉2500g
按上述配比,取实施例1中制备的连翘苷/连翘脂素组合物与淀粉混合均匀后装胶囊,制成10000粒。
实施例33-36连翘苷/连翘脂素组合物胶囊剂制备
实施例33-36中,连翘苷/连翘脂素组合物分别按表3的重量比与淀粉混合均匀后装胶囊,各制成10000粒胶囊。
表3
表中原料,可替换为实施例5-29制备的连翘脂素和连翘苷的组合物。
实施例:37-40连翘苷/连翘脂素组合物颗粒剂制备
实施例37-30中,连翘苷/连翘脂素组合物分别按表4的重量比与微晶纤维素混合均匀后,制成颗粒装袋,制成10000袋。
表4
表中原料,可替换为实施例5-29制备的连翘脂素和连翘苷的组合物。
实施例41连翘苷/连翘脂素组合物片剂制备
按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的片剂:
按上述配比,连翘苷/连翘脂素组合物与上述提取物粉末混合均匀,再与淀粉混合均匀后制成颗粒,加入滑石粉和硬脂酸镁混合均匀后压制成10000片。其中,本实施例中的连翘苷/连翘脂素组合物可替换为实施例5-29制备的连翘脂素和连翘苷的组合物。
实施例42连翘苷/连翘脂素组合物颗粒剂制备
按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的颗粒剂:
按上述配比,连翘苷/连翘脂素组合物与上述提取物粉末混合均匀,再与微晶纤维素混合均匀后制成颗粒装袋,制成10000袋。其中,本实施例中的连翘苷/连翘脂素组合物可替换为实施例5-29制备的连翘脂素和连翘苷的组合物。
实施例43连翘苷/连翘脂素组合物胶囊剂制备
按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的胶囊剂:
按上述配比,连翘苷/连翘脂素组合物与上述提取物粉末混合均匀,再与淀粉混合均匀后装胶囊,制成10000粒。其中,本实施例中的连翘苷/连翘脂素组合物可替换为实施例5-29制备的连翘脂素和连翘苷的组合物。
实施例52连翘苷/连翘脂素组合物片剂制备
按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的片剂:
按上述配比,连翘苷/连翘脂素组合物与上述提取物粉末混合均匀,再与淀粉混合均匀后制成颗粒,加入滑石粉和硬脂酸镁混合均匀后压,制成10000片。其中,本实施例中的连翘苷/连翘脂素组合物可替换为实施例5-29制备的连翘脂素和连翘苷的组合物。
实施例53连翘苷/连翘脂素组合物颗粒剂制备
按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的颗粒剂:
按上述配比,连翘苷/连翘脂素组合物与上述提取物粉末混合均匀,再与微晶纤维素混合均匀后制成颗粒装袋,制成10000袋。其中,本实施例中的连翘苷/连翘脂素组合物可替换为实施例5-29制备的连翘脂素和连翘苷的组合物。
实施例54连翘苷/连翘脂素组合物胶囊剂制备
按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的胶囊剂:
按上述配比,连翘苷/连翘脂素组合物与上述提取物粉末混合均匀,再与淀粉混合均匀后装胶囊,制成10000粒。其中,本实施例中的连翘苷/连翘脂素组合物可替换为实施例5-29制备的连翘脂素和连翘苷的组合物。
试验例1连翘苷/连翘脂素组合物抗病毒试验
1体外抗病毒试验
1.1试验材料
(1)药物
①连翘苷,白色粉末,大连富生天然药物开发有限公司生产,经高效液相色谱两种检测器紫外检测器和蒸发光散射检测器面积归一化法测定,其纯度为99.5%,并用中国药品生物制品含量测定用连翘苷对照品标定和确认其含量为99.5%。
②连翘脂素,白色粉末,大连富生天然药物开发有限公司生产,经高效液相色谱两种检测器紫外检测器和蒸发光散射检测器面积归一化法测定,其纯度为99.1%;
③连翘苷/连翘脂素组合物:连翘苷/连翘脂素组合物1:白色粉末,大连富生天然药物开发有限公司生产,由连翘苷和连翘脂素两种单体配比而成,用99.5%连翘苷和99.1%连翘脂素作为对照品进行标定,连翘苷/连翘脂素组合物中两种单体成分含量均为98%,其中连翘苷/连翘脂素组合物1中连翘苷与连翘脂素的重量比98:2;连翘苷/连翘脂素组合物2中连翘苷与连翘脂素的重量比为80:20。
④利巴韦林注射液,无色透明液体,由河南润弘股份有限公司生产,产品批号:1206261,国药准字:H19993553,100mg/ml,作为本次试验阳性对照药物。
⑤磷酸奥司他韦,中国药品生物制品检定所。产品批号:101096-200901,100mg/支作为本次试验阳性对照药物。
上述药品均用纯净水溶解,滤过,除菌分装,4℃备用,为本次试验待测药物。
(2)细胞株:Vero(非洲绿猴肾细胞细胞)由吉林大学基础医学院保存细胞株。
(3)病毒株:①流感病毒株、副流感病毒株、呼吸道合胞病毒(RSV)株:购于中国预防医学科学院病毒研究所;②柯萨奇病毒B3(CVB3)株:来源于美国,为本教研室保存;③柯萨奇病毒A16(CoxA16)株、肠道病毒EV71株:由日本仙台国立医院馈赠,于本教研室保存;④腺病毒(AdV)来源于白求恩医科大学一院儿科研究室;⑤单纯疱疹病毒I型(HSV-1)购于卫生部药品生物制品检定所。
(4)主要设备与试剂:
生物安全柜:BHC-1300ⅡA/B3,AIRTECH;CO2培养箱:MCO-18AIC,SANYO;倒置显微镜:CKX41,OLYMPUS;电子分析天平:AR1140/C,DHAUS;培养基:DMEM,HyClone;胎牛血清:HyClone;胰蛋白酶:Gibco;MTT:Sigma;DMSO:天津市北联精细化学品开发有限公司。
1.2试验方法
(1)细胞准备
Vero细胞传代培养1-2d,使之成片,界线清晰,立体感及折光度强时,用胰酶消化,待细胞面出现针尖样小孔,吸尽消化液,取数毫升培养液吹散细胞,计数,用培养液(含10%胎牛血清的DMEM)稀释至约5×107个/L后,接种于96孔培养板内,待细胞长成单层。
(2)药物毒性测定
细胞毒性试验:将药物按表1-1所示浓度进行稀释,用于细胞毒性测定。
表1-1药物稀释参照表(单位:g/L)
将上述用维持液(含2%胎牛血清的DMEM)稀释好的不同浓度的药品滴加于Vero单层细胞上,每孔0.2ml,每个浓度6个复孔,另设6孔正常对照(不加药物的正常对照组)和6孔空白对照(培养液),置37℃,5%CO2培养箱中培养,每日置倒置显微镜观察CPE并记录。72h后,每孔加入MTT溶液20μL(5mg·mL-1),继续孵育4h,吸弃各孔培养液,每孔加入100μLDMSO,振荡5min,492nm测定OD值,计算细胞存活率。在SPSS18.0统计软件中,将细胞存活率进行Probit回归分析,计算药物对Vero细胞的最大无毒浓度(TC0)和半数毒性浓度(TC50)。
(3)各种病毒TCID50的测定
将各种病毒进行10倍递减稀释为10-1,10-2,10-3,10-4,10-5,10-6不同稀释度,按序接种于单层的Vero细胞96孔培养板上,每孔100μL,每个稀释度6孔,同时设正常细胞对照组。置37℃,5%CO2中孵育2h,弃病毒液,随即每孔加细胞维持液100μL,置37℃,5%CO2中培养。第3天开始在显微镜下观察细胞病变结果,第7-8天判定结果并做好记录,以能使50%细胞孔发生阳性病变的最高稀释度作为终点,用karber法计算病毒滴度。
公式(TCID50:50%组织细胞感染量;XM:病毒最高浓度稀释度的对数;d:稀释度系数(倍数)的对数;Σpi:每个稀释度病变百分数的总和。)
(4)药物对病毒致细胞病变作用的影响
取已长满单层细胞的培养板,吸弃培养液,以100TCID50对应的病毒攻击量接种细胞,37℃,5%CO2培养箱吸附2h,加入特定浓度(最大无毒浓度左右)的各药液,每浓度6个复孔培养,200μL/孔。设利巴韦林注射液和磷酸奥司他韦为阳性药物对照组,同时设正常对照组(不加病毒不加药)和病毒对照组(加病毒但不加药物的对照组),观察药物对病毒致CPE的影响。72h后,用MTT比色法,在492nm波长下测定OD值,计算药物抗病毒有效率(ER%)。在SPSS18.0统计软件中用ANOVA法比较各药物抗病毒有效率之间的显著性差异。
ER%=(药物处理组平均OD值-病毒对照组平均OD值)/(细胞对照组平均OD值-病毒对照组平均OD值)×100%
1.3试验结果
(1)各种病毒的TCID50
副流感病毒:
流感病毒:
CVB3:
HSV-1:
AdV:
RSV:
CoxA16:
EV71:
(2)药物毒性测定
1)药物对细胞毒性的测定
各药物对Vero细胞的最大无毒浓度(TC0)、半数毒性浓度(TC50)及药物抗病毒实验用浓度见表1-2。
表1-2药物细胞毒性实验结果(单位:g/L)
2)药物对病毒致细胞病变保护作用结果
药物抗各种病毒的有效率及ANOVA法单因素方差分析结果,详见表1-3。
表1-3药物抗病毒有效率(ER%)统计表
注:与病毒对照组相比,*P<0.05,**P<0.01;连翘苷/连翘脂素组合物与连翘苷相比,#P<0.05,##P<0.01;连翘苷/连翘脂素组合物与连翘脂素相比,▲P<0.05,▲▲P<0.01;连翘苷/连翘脂素组合物与利巴韦林相比相比,△P<0.05,△△P<0.01,△△△P<0.001;连翘苷/连翘脂素组合物与磷酸奥司他韦相比,●P<0.05,●●P<0.01,●●●P<0.001。
表1-3结果显示,连翘苷/连翘脂素组合物对8种病毒均有明显抑制作用(P<0.01或P<0.001),对流感病毒、副流感病毒、单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-I)、肠道病毒EV71及腺病毒(ADV)抗病毒的有效率均达到100%,且疗效明显优于连翘苷、连翘脂素,表明连翘苷/连翘脂素组合物具有协同增效作用。此外,连翘苷/连翘脂素组合物抑制流感、柯萨奇病毒A16(CoxA16)、呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-I)、腺病毒(ADV)、肠道病毒EV71及柯萨奇病毒B3(CVB3)的疗效明显优于阳性药利巴韦林(P<0.01或P<0.001),抑制流感、柯萨奇病毒A16(CoxA16)、呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒I型(HSV-I)、腺病毒(ADV)、肠道病毒EV71及柯萨奇病毒B3(CVB3)的疗效上明显优于磷酸奥司他韦(P<0.05,或P<0.01、P<0.001)。
2.体内抗病毒试验
2.1实验材料
(1)实验动物
昆明种小鼠由吉林大学白求恩医学部实验动物中心提供,医动字第10-5219号。
(2)检测仪器、试剂
2.2实验方法
(1)流感病毒和副流感病毒对小鼠半数致死量的测定
将流感病毒和副流感病毒(细胞裂解液)10倍递比稀释为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5浓度的病毒液。取昆明种小鼠120只,流感病毒和副流感病毒组各60只,分别随机分成6组,乙醚轻度麻醉小鼠,滴鼻感染不同稀释度病毒液0.03mL/只。同时设空白对照,用生理盐水代替病毒悬液。以死亡和生存为观察指标,每天观察,直至感染后的14天。感染24h内死亡的为非特异死亡,不予统计,Karber法计算病毒液LD50。计算公式:[其中:LD50:半数致死量;XM:病毒最高浓度稀释度的对数;d:稀释度系数(倍数)的对数;Σpi:每个稀释度病变百分数的总和]。
(2)连翘苷/连翘脂素组合物抗流感病毒和副流感病毒感染所致肺炎的研究
1)试验动物及分组
取四周龄的昆明小鼠540只,进行2项试验。
先取小鼠270只,随机分成27组,每组10只,用于连翘苷/连翘脂素组合物对流感和副流感病毒感染小鼠肺指数和肺指数抑制率的测定试验;每次试验取小鼠90只,3次重复试验。另取小鼠270只,随机分成27组,每组10只,用于连翘脂素和连翘苷的组合物对肺悬液病毒血凝滴度的测定试验;每次试验取小鼠90只,3次重复试验。
2)感染方法
在200~300mL大小的烧杯内放入一团脱脂棉,然后倒入适量的乙醚(使脱脂棉变湿即可),把装有脱脂棉的烧杯倒扣过来,把小鼠放入进行麻醉,见小鼠极度兴奋,明显呈无力样时,将小鼠仰卧,滴鼻感染15LD50流感病毒和副流感病毒0.03ml/鼻孔,正常对照组用生理盐水代替病毒悬液。
3)给药方法及给药剂量
连翘苷/连翘脂素组合物1组、连翘苷/连翘脂素组合物2组、连翘脂素组、连翘苷组、利巴韦林和磷酸奥司他韦对照组,分别于感染前一天开始常规灌胃给药,连翘苷/连翘脂素组合物1、2分别分为高、中、低剂量组,给药剂量分别为13.0、6.5、3.25mg/kg,连翘苷组给药剂量为13mg/kg、连翘脂素组给药剂量为13mg/kg、利巴韦林阳性药给药剂量为58.5mg/kg、磷酸奥司他韦给药剂量为19.5mg/kg,每天一次,连续给药5d,正常对照组、病毒对照组灌服相同体积的生理盐水。
4)观察指标
①肺指数测定
小鼠用药后第5天,先禁食水8小时,称体重后摘眼球放血处死动物,打开胸腔摘出全肺,以生理盐水洗涤两次,用滤纸吸干表面水份,电子天平称肺重,按下列公式计算计算肺指数和肺指数抑制率:
肺指数=(小鼠肺重/小鼠体重)×100%
肺指数抑制率=(感染模型组平均肺指数-实验组平均肺指数)/感染模型组平均肺指数×100%
②肺悬液病毒血凝滴度测定
分别取治疗后第5天的各组小鼠肺,低温下置匀浆器研磨成匀浆,生理盐水稀释为10%的肺组织悬液,离心取上清,倍比稀释,按0.2ml/孔滴于滴定板上,每孔加入0.2ml1%鸡红细胞悬液,混匀,置室温30min,观察记录血凝滴度。以红细胞凝集(++)时为終点,以悬液稀释倍数表示其滴度。
2.3试验结果及分析
(1)流感病毒和副流感病毒对小鼠半数致死量的测定结果
试验组昆明种小鼠分别被滴鼻感染不同浓度流感病毒、副流感病毒液30μL,感染第3天前3组(病毒浓度为10-1组、10-2组、10-3组)小鼠均出现不同程度的发病症状:耸毛、发抖、饮食减少等;第5天小鼠出现走路摇摆不定;第6天最高病毒浓度组小鼠开始出现死亡,其余各组于感染后第7天陆续出现死亡现象。观察14天结束后,统计各组小鼠死亡数目,结果见下表1-4、1-5。计算该流感病毒的LD50为稀释度10-2.9,副流感病毒的LD50为稀释度10-2.5。
表1-4流感病毒半数致死量试验结果统计
Karber法计算病毒的LD50。流感病毒的LogLD50如下:
表1-5副流感病毒半数致死量试验结果统计
Karber法计算病毒的LD50。副流感病毒的LogLD50如下:
(2)连翘苷/连翘脂素组合物抗流感病毒和副流感病毒感染所致肺炎的作用结果
①肺指数测定
流感病毒和副流感病毒感染小鼠后,平均肺指数结果显示:与感染模型组比较,正常对照组、连翘苷组13.0mg/kg/d、连翘脂素组16.0mg/kg/d、连翘苷/连翘脂素组合物1和2的3个剂量组(低剂量组3.25mg/kg/d、中剂量组6.5mg/kg/d、高剂量组13.0mg/kg/d)、利巴韦林组及磷酸奥司他韦组的肺指数明显降低(P<0.05或P<0.01);其中,连翘苷/连翘脂素组合物在3.25~13.0mg/kg/d浓度范围内有明显保护作用,肺指数均明显降低、对肺组织病变指数的抑制率,其疗效明显优于优于与连翘苷组、连翘脂素组(P<0.01或P<0.05),结果见表1-6、1-7。
表1-6连翘苷/连翘脂素组合物对流感病毒感染小鼠肺指数的抑制率(n=3)
各试验组病毒对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;连翘苷/连翘脂素组合物与连翘苷比较,#P<0.05,##P<0.01;连翘苷/连翘脂素组合物与连翘脂素比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01。
表1-7连翘苷/连翘脂素组合物对副流感病毒感染小鼠肺指数的抑制率(n=3)
各试验组病毒对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;连翘苷/连翘脂素组合物与连翘苷比较,#P<0.05,##P<0.01;连翘苷/连翘脂素组合物与连翘脂素比较,▲P<0.05。
②肺悬液病毒血凝滴度测定
流感病毒和副流感病毒感染小鼠后,感染模型组肺组织病毒血凝滴度(InX)分别为32.40和33.11,不同浓度连翘脂素/连翘苷组合物1和2用药治疗5天后,肺组织病毒血凝滴度均有所下降,与感染模型组比较,差异有显著性(P<0.01),且它们的不同剂量组对流感、副流感病毒血凝滴度均明显低于连翘苷组、连翘脂素组(P<0.05~P<0.001),表明组合物具有协同增效作用,其对病毒繁殖的抑制率均明显高于连翘苷组、连翘脂素组(P<0.05~P<0.001)其中,连翘苷/连翘脂素组合物1和2的高、中、低剂量组对流感病毒感染小鼠肺悬液血凝滴度的抑制率均显著高于连翘苷组、连翘脂素组(P<0.01~P<0.001)。上述试验结果详见表1-8、1-9。
表1-8连翘苷/连翘脂素组合物对流感病毒感染小鼠肺悬液血凝滴度的影响(n=3)
表1-9连翘苷/连翘脂素组合物对副流感病毒感染小鼠肺悬液血凝滴度的影响(n=3)
表1-8和1-9中,各试验组病毒对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;连翘苷/连翘脂素组合物与连翘苷比较,#P<0.05,##P<0.01,###P<0.001;连翘苷/连翘脂素组合物与连翘脂素比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01,▲▲▲P<0.001。
试验例2连翘苷/和连翘脂素组合物解热、抗炎试验
1.1试验材料
(1)试验动物Wistar大鼠,体重120~250g,雌雄兼用,合格证号:医动字第13-1225;日本大耳白兔,雄性,体重1.5~2.0kg。合格证号:医动字第10-5115,均由长春高新医学动物实验中心供给,动物饲料由吉林大学实验动物部供给。
(2)试验药品
①连翘苷,白色粉末,大连富生天然药物开发有限公司生产,经高效液相色谱两种检测器紫外检测器和蒸发光散射检测器面积归一化法测定,其纯度为99.5%,并用中国药品生物制品含量测定用连翘苷对照品标定和确认其含量为99.5%;
②连翘脂素,白色粉末,大连富生天然药物开发有限公司生产,经高效液相色谱两种检测器紫外检测器和蒸发光散射检测器面积归一化法测定,其纯度为99.1%;
③连翘苷/连翘脂素组合物:白色粉末,大连富生天然药物开发有限公司生产。由连翘苷与连翘脂素两种单体配比而成,用99.5%连翘苷和99.1%连翘脂素作为对照品进行标定,连翘苷/连翘脂素组合物中两种单体成分含量均为98%,其中连翘苷/连翘脂素组合物1中连翘苷与连翘脂素的重量比98:2,连翘苷/连翘脂素组合物1中连翘苷与连翘脂素的重量比80:20。
1.2主要仪器与试剂
YLS-7A大鼠足趾肿胀测量仪:山东省医学科学院设备站;722可见分光光度计:上海光谱仪器有限公司生产;便携式数字测温仪:型号WSC-411P,上海浦东三厂;毛果芸香碱:天津市人民制药厂,批号:20130112;组胺:上海生化所,批号:20130115;5-羟色胺:上海生化所,批号:20130623;伊文思蓝:上海化学试剂采购供应站,批号:20130217;扑尔敏片:长春经济开发区药业有限公司,批号:20130801;角叉菜胶:吉林省药物研究所,批号:20130502;扑热息痛片:辽源市百康药业有限责任公司,批号:20130512;阿司匹林片:白城万达药业有限公司,批号:20130305;啤酒酵母:北京奥博星生物技术责任有限公司,批号:2013020;伤寒、副伤寒疫苗:长春生物制品研究所,批号:20130216。
1.3统计处理
统计分析采用两样本比较的秩和检验、X2检验及t检验。
2.1连翘苷/连翘脂素组合物对大鼠足跖部汗液分泌影响胡试验(着色法)
(1)材料与方法
本试验根据大鼠足跖部肉垫上有汗腺分布,其汗液分泌的多少可利用碘与淀粉遇汗液即可产生紫色反应的机理,观测汗液分泌的变化。
试验取Wistar大鼠500只,雌雄各半,体重120~150g。按体重、性别随机分为50组,即:对照(0.5%羧甲基纤维素)组,连翘苷组、连翘脂素组、连翘苷/连翘脂素组合物组1和2的低、中、高剂量组(分别为2.5、5、10mg/kg)及阳性药毛果芸香碱(35mg/kg)组,每组10只,每次试验10组,共5个时间段的试验(1、5、10、15、20min)。将大鼠置入自制的大鼠固定袋内,暴露双后肢。用棉签蘸取无水乙醇将其右足跖部污物轻轻擦洗干净。除毛果芸香碱溶液皮下注射外,其余各组均采用灌胃方式给药。给药后1h(毛果芸香碱组于给药后30min),先将各组大鼠右足跖原有的和由于挣扎时所致的汗液用干棉签轻轻拭干,涂上和田-高垣氏试剂A液(取碘2g溶于100ml无水乙醇),待充分干燥后,再薄薄涂上和田-高垣氏试剂B液(取可溶性淀粉50g、蓖麻油100ml均匀混合)。分别于涂B液后1、5、10、15及20min用放大镜仔细观察深紫色着色点(即汗点)出现的颜色和数量。试验结束后,按两样本比较的秩和检验进行统计学处理,比较各组间的差异。
(2)结果
与对照组比较,连翘苷/连翘脂素组合物的中、高剂量组(5、10mg/kg)于涂B液后10、15及20min对大鼠足跖部汗液分泌均有明显促进作用(p<0.05),连翘苷/连翘脂素组合物的2.5mg/kg组于涂B液后15及20min对大鼠足跖部汗液分泌均有明显促进作用(p<0.05),它们的发汗作用与阳性药毛果芸香碱相当,且具有缓缓促进大鼠足跖部汗液分泌的作用特点。连翘苷/连翘脂素组合物高剂量组于涂B液后10、15、20min后对大鼠足跖部汗液分泌的促进作用明显优于连翘苷和连翘脂素(p<0.05),连翘苷/连翘脂素组合物中剂量组于涂B液后10、15min后对大鼠足跖部汗液分泌的促进作用明显优于连翘苷和连翘脂素(p<0.05),连翘苷/连翘脂素组合物低剂量组于涂B液后15min后对大鼠足跖部汗液分泌的促进作用明显优于连翘苷和连翘脂素(p<0.05)。上述试验结果,表明连翘苷/连翘脂素组合物促进大鼠足跖部汗液分泌的作用明显优于连翘苷和连翘脂素,详见2-1、2-2、2-3、2-4、2-5。
表2-1连翘苷/连翘脂素组合物对正常大鼠足跖部汗液分泌的影响(着色法)
表2-2连翘苷/连翘脂素组合物对正常大鼠足跖部汗液分泌的影响(着色法)
表2-3连翘苷/连翘脂素组合物对正常大鼠足跖部汗液分泌的影响(着色法)
表2-4连翘苷/连翘脂素组合物对正常大鼠足跖部汗液分泌的影响(着色法)
表2-5连翘苷/连翘脂素组合物对正常大鼠足跖部汗液分泌的影响(着色法)
汗点等级评定标准:
“-”大鼠足跖肉垫表面无汗点;“+”大鼠足跖肉垫表面偶见汗点,汗点面积约占足跖表面的10%以下;“++”大鼠足跖肉垫表面散在分布汗点,汗点面积约占足跖表面的11-40%;“+++”大鼠足跖肉垫表面多处分布汗点,汗点面积约占足跖表面的41-70%;“++++”大鼠足跖肉垫表面均匀分布汗点,汗点面积约占足跖表面的71%以上。
各试验组病毒对照组比较,*P<0.05;连翘苷/连翘脂素组合物与连翘苷比较,#P<0.05;连翘苷/连翘脂素组合物与连翘脂素比较,▲P<0.05。
2.2连翘苷/连翘脂素组合物对大鼠足跖部汗液分泌的影响(组织形态观察法)
(1)材料与方法
本试验根据大鼠汗腺兴奋时,除汗液分泌增加外,汗腺上皮细胞内的形态也随之改变。光学显微镜下可见汗腺上皮细胞空胞数目增多、扩大。这种扩大的空泡在电子显微镜下则是汗腺上皮细胞内线粒体肿胀、破裂,融合和分泌小泡扩大,通过对大鼠足跖部汗腺上皮组织形态学观察,即可了解汗腺的分泌活动。
试验取Wistar大鼠300只,雌雄各半,体重120~160g。按体重、性别随机分为30组,即:对照组(0.5%羧甲基纤维素)连翘脂素、连翘苷、连翘苷/连翘脂素组合物1和2分别分为低、中、高(2.5、5、10mg/kg)剂量组及阳性药毛果芸香碱(35mg/kg)组,每组10只,每组试验3次。除毛果芸香碱溶液皮下注射给药外,其余各组均采用灌胃方式给药。对照组给予0.5%羧甲基纤维素1h后、阳性药组给予毛果芸香碱30min后,以及连翘苷、连翘脂素、连翘苷/连翘脂素组合物均给药后1h,于齐踝关节处瞬时截断右后肢,随即取下右足跖部肉垫,置10%甲醛溶液中,按常规方法固定、脱水、包埋、切片、HE染色,光学显微镜下观察各组大鼠足跖部汗腺上皮细胞内变化,主要观察空泡发生率,并通过X2检验进行统计学处理,比较各组间的差异。上述试验重复3次。
空泡发生百分率=空泡汗腺数/观察汗腺数×100%
(2)结果
与对照组比较,连翘苷/连翘脂素组合物1和2的2.5、5、10mg/kg组对大鼠足跖部汗液分泌均有极显著的促进作用(p<0.001);其中,它们的低、中、高剂量组(2.5、5、10mg/kg)的疗效显著优于连翘苷及连翘脂素(p<0.001或p<0.01),表明连翘苷/连翘脂素组合物具有协同增效作用。试验结果详见表2-6;
表2-6连翘苷/连翘脂素组合物对大鼠足跖部汗液分泌的影响(组织形态观察法,n=3)
与对照组比较,**p<0.01,***p<0.001;连翘苷/连翘脂素组合物与连翘苷比较,##p<0.01,###p<0.001;连翘苷/连翘脂素组合物与连翘脂素比较,▲▲p<0.01,▲▲▲p<0.001;
2.3连翘苷/连翘脂素组合物对啤酒酵母致大鼠发热的影响
(1)材料与方法
雄性Wistar大鼠,体重180~200g。试验前分别用WSC-411P型便携式数字测温仪测量正常肛温2次(每次间隔一定时间),取两次测量的平均值作为大鼠的正常体温。然后选体温在36.5~38℃的大鼠300只,按体重随机分为30组:模型组(0.5%羧甲基纤维素),连翘苷/连翘脂素组合物1、2组分别分为低、中、高(2.5、5、10mg/kg)剂量组、连翘苷组(13mg/kg)、连翘脂素组(13mg/kg)及阳性药扑热息痛(100mg/kg)组,每组10只,每组重复试验3次。各组大鼠均背部皮下注射10%鲜啤酒酵母混悬液10ml/kg致热。给10%鲜啤酒酵母混悬液6.0h后,连翘脂素和连翘苷的组合物及扑热息痛均灌胃给药,模型组灌胃等体积0.5%羧甲基纤维素。分别于给药后1、2、3及4h测量肛温。观察体温变化情况,并通过解热百分率进行组间t检验处理,比较各组间的差异。上述试验共重复3次。
(2)结果
各组大鼠皮下注射10%鲜啤酒酵母混悬液6h后,体温升高均在1.5℃左右,与致热前比较差异显著(p<0.001),表明啤酒酵母致大鼠发热模型建立成功。与模型组比较,连翘苷/连翘脂素组合物1和2的中、高剂量组于药后1、2、3及4h,以及低剂量组于药后2、3及4h对啤酒酵母混悬液所致大鼠发热均有明显的降温作用(p<0.05~p<0.001);同时,连翘苷/连翘脂素组合物1和2的不同剂量组的降温疗效极显著优于连翘苷组、连翘脂素组(p<0.001或p<0.01),表明它们具有明显协同增效作用。上述试验结果见表2-7。
2.4连翘苷/连翘脂素组合物对伤寒、副伤寒疫苗致家兔发热的影响
(1)材料与方法
雄性日本大耳白兔,体重1.5~2.0kg。试验前分别用WSC-411P型便携式数字测温仪测量正常肛温2次,取均值作为正常体温。然后选体温在38~39.6℃的日本大耳白兔198只,按体重随机分为33组,即:空白对照(生理盐水)组,模型对照(0.5%羧甲基纤维素)组,连翘苷/连翘脂素组合物1、2组分为低、中、高(1.25、2.5、5mg/kg)剂量组、连翘苷组、连翘脂素组及阳性药扑热息痛(50mg/kg)组。每组6只大白兔,各试验均重复3次。将兔置固定器内固定。空白对照组由耳缘静脉注射生理盐水1ml/kg;模型对照组和各药物组耳缘静脉注射伤寒、副伤寒疫苗0.8ml/kg。待兔体温升高超过1℃时(约需1~1.5h,本实验限定在1h),空白对照组和模型组灌胃0.5%羧甲基纤维素1ml/kg,给药组灌胃连翘脂素和连翘苷的组合物和扑热息痛。于药后30、60、90、120、180及240min测量肛温,观察体温变化情况,并通过解热百分率进行组间t检验处理,比较各组间的差异。
(2)结果
家兔耳缘静脉注射伤寒、副伤寒疫苗1h后,体温升高在1℃左右,表明伤寒、副伤寒疫苗可制备家兔发热模型。与空白对照组比较,模型组的体温在300min观察期内持续升高(p<0.05~p<0.001),与模型组比较,连翘苷/连翘脂素组合物的高、中、低剂量组于药后30~240min、60~240min、90~240min对伤寒、副伤寒疫苗所致家兔发热有明显的解热作用(p<0.05~p<0.001),且它们的疗效也明显优于连翘苷组、连翘脂素组(p<0.01),表明连翘苷/连翘脂素组合物具有明显的协同增效作用。上述试验结果见表2-8。
2-5连翘苷/连翘脂素组合物对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀影响
(1)材料与方法
取体重120~150g的雄性Wistar大鼠70只,按体重随机分为7组,即:空白对照(0.5%羧甲基纤维素钠)组,连翘苷/连翘脂素组合物1组分为低、中、高(2.5、5及10mg/kg)剂量组、连翘苷组、连翘脂素组及阳性药阿司匹林(200mg/kg)组,每组10只。实验各组均采用舌下静脉注射方式给药。实验前用毛细管放大测量法测定各组大鼠右后足的正常体积。为避免误差,应固定测量位置,给药前后均由1人操作。取两次测量的平均值作为给药前大鼠右后足的正常体积。给药后立即在大鼠右后肢足跖皮下注射1%角叉菜胶0.1ml致炎。测定致炎后15、30、60、120、180、240、300及360min的右后足跖体积。并通过大鼠致炎前后足跖体积的差值百分率(肿胀率)进行组间t检验处理,比较各组间的差异。
结果
与空白对照组比较,连翘苷/连翘脂素组合物的高剂量组(10mg/kg)给药后于15min至360min内、连翘苷/连翘脂素组合物的中剂量组(5mg/kg)、低剂量组(2.5mg/kg)均于给药后30min至360min内均对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀均有明显的抑制作用(p<0.05或p<0.01),其疗效明显优于连翘苷10mg/kg组及连翘脂素10mg/kg组(p<0.05或p<0.01),且上述组合物的各剂量组在给药后60min、240min的疗效皆极显著优于连翘脂素组(p<0.01)。以上试验结果表明,连翘苷/连翘脂素组合物中连翘苷与连翘脂素组合使用具有明显的协同增效作用,详见表2-9。
Claims (10)
1.一种连翘苷/连翘脂素组合物在制备用于缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品中的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征是所述病毒性疾病为流感病毒、副流感病毒、柯萨奇病毒CoxA16、呼吸道合胞病毒RSV、单纯带状疱疹病毒HSV-I、单纯带状疱疹病毒HSV-II、单纯带状疱疹病毒CVB3、腺病毒ADV或肠道病毒EV71所致病毒性疾病。
3.如权利要求1或2所述的应用,其特征是所述连翘苷/连翘脂素组合物中连翘苷与连翘脂素的重量份配比为80~98:2~20。
4.如权利要求1或2所述的应用,其特征是所述连翘苷/连翘脂素组合物还包括药学上可接受的载体。
5.如权利要求4所述的应用,其特征是所述连翘苷/连翘脂素组合物中连翘苷与连翘脂素的总重量与药学上可接受的载体的重量之比为1:1~1:100。
6.如权利要求1或2所述的应用,其特征是所述连翘苷/连翘脂素组合物以连翘苷和连翘脂素以单体组成、或采用溶剂加热提取方法制备而成的连翘脂素-连翘苷提取组合物,或连翘脂素和连翘苷与环糊精或环糊精的衍生物组合而成连翘脂素-连翘苷-环糊精组合物。
7.如权利要求4所述的的应用,其特征是所述连翘脂素-连翘苷-环糊精组合物选择连翘脂素和连翘苷与α-、β-或γ-环糊精或其衍生物相混合而成的混合物,或连翘脂素和连翘苷与α-、β-或γ-环糊精或其衍生物经物理、化学方法处理形成的复合物。
8.如权利要求1或2所述的应用,其特征是所述药物以片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、乳剂、注射剂、喷雾剂、气雾剂、凝胶剂、霜剂、巴布剂、橡胶贴膏剂或贴膏剂形式存在。
9.一种缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品,其特征是含有连翘苷和连翘脂素。
10.如权利要求9所述的药物或保健品,其特征是所述连翘苷与连翘脂素的重量份配比为80~98:2~20。
Priority Applications (12)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410389232.0A CN105362283B (zh) | 2014-08-07 | 2014-08-07 | 连翘苷/连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品中的应用 |
CN201810718068.1A CN108578421B (zh) | 2014-08-07 | 2014-08-07 | 连翘苷/连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病的药物中的应用 |
US15/502,000 US10286002B2 (en) | 2014-08-07 | 2014-12-23 | Application of a phillyrin/phillygeninin composition in preparing a medicine or health care product for alleviating or/and treating viral diseases, and medicine or health care product for treating viral diseases |
ES14899145T ES2839090T3 (es) | 2014-08-07 | 2014-12-23 | Aplicaciones de la composición de filirina/filigenina en la preparación de fármacos o productos para el cuidado de la salud para aliviar y/o tratar enfermedades virales |
RU2017107136A RU2655616C1 (ru) | 2014-08-07 | 2014-12-23 | Применение композиции филлирина/филлигенина при приготовлении медикамента или продукта медицинского назначения для облегчения и/или назначения для лечения вирусных заболеваний, и медикамент или продукт медицинского назначения для лечения вирусных заболеваний |
PCT/CN2014/094710 WO2016019684A1 (zh) | 2014-08-07 | 2014-12-23 | 连翘苷/连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品中的应用 |
EP14899145.8A EP3178482B1 (en) | 2014-08-07 | 2014-12-23 | Applications of phillyrin/phillygenin composition in preparing drugs or health care products for relieving and/or treating viral diseases |
CA2956988A CA2956988C (en) | 2014-08-07 | 2014-12-23 | Composition of phillyrin and phillygeninin and uses therefor as a medicine or health care product to treat viral diseases |
AU2014402938A AU2014402938B2 (en) | 2014-08-07 | 2014-12-23 | Applications of phillyrin/phillygenin composition in preparing drugs or health care products for relieving and/or treating viral diseases |
JP2017505134A JP6343389B2 (ja) | 2014-08-07 | 2014-12-23 | ウイルス性疾患の軽減及び/又は治療のための薬剤又は健康管理用品の調製におけるフィリリン/フィリゲニン組成物の使用、及びウイルス性疾患の治療のための薬剤又は健康管理用品 |
KR1020177006088A KR101939726B1 (ko) | 2014-08-07 | 2014-12-23 | 바이러스 질병을 경감시키고/시키거나 치료하기 위한 약물 또는 건강 관리 제품을 제조하는데 있어서의 필리린/필리게닌 조성물의 용도 |
US16/281,826 US10881679B2 (en) | 2014-08-07 | 2019-02-21 | Application of a phillyrin/phillygeninin composition in preparing a medicine or health care product for alleviating or/and treating viral diseases, and medicine or health care product for treating viral diseases |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410389232.0A CN105362283B (zh) | 2014-08-07 | 2014-08-07 | 连翘苷/连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品中的应用 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201810718068.1A Division CN108578421B (zh) | 2014-08-07 | 2014-08-07 | 连翘苷/连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病的药物中的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN105362283A true CN105362283A (zh) | 2016-03-02 |
CN105362283B CN105362283B (zh) | 2018-07-27 |
Family
ID=55263087
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201410389232.0A Active CN105362283B (zh) | 2014-08-07 | 2014-08-07 | 连翘苷/连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品中的应用 |
CN201810718068.1A Active CN108578421B (zh) | 2014-08-07 | 2014-08-07 | 连翘苷/连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病的药物中的应用 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201810718068.1A Active CN108578421B (zh) | 2014-08-07 | 2014-08-07 | 连翘苷/连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病的药物中的应用 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US10286002B2 (zh) |
EP (1) | EP3178482B1 (zh) |
JP (1) | JP6343389B2 (zh) |
KR (1) | KR101939726B1 (zh) |
CN (2) | CN105362283B (zh) |
AU (1) | AU2014402938B2 (zh) |
CA (1) | CA2956988C (zh) |
ES (1) | ES2839090T3 (zh) |
RU (1) | RU2655616C1 (zh) |
WO (1) | WO2016019684A1 (zh) |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105796861A (zh) * | 2015-04-23 | 2016-07-27 | 富力 | 连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物在制备提高免疫功能的药物中的应用 |
WO2016169487A1 (zh) * | 2015-04-23 | 2016-10-27 | 富力 | 连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素的组合物在制备抗炎药物中的应用 |
WO2016169491A1 (zh) * | 2015-04-23 | 2016-10-27 | 富力 | 连翘苷、其衍生物、连翘苷/连翘脂素组合物在制备治疗细菌感染药物中的应用 |
CN106063788A (zh) * | 2015-04-23 | 2016-11-02 | 富力 | 连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗呕吐药物或保健品中的应用 |
CN109602699A (zh) * | 2019-01-15 | 2019-04-12 | 富力 | 小儿连翘苷连翘脂素及其衍生物的注射剂 |
CN112293737A (zh) * | 2020-12-01 | 2021-02-02 | 曾晓飞 | 欧米伽3与连翘苷结合的植物抗病毒抗炎食品补充剂 |
CN112957341A (zh) * | 2021-03-01 | 2021-06-15 | 河南中医药大学 | Mhs细胞来源外泌体装载连翘苷递药系统及其应用 |
WO2021179878A1 (zh) | 2020-03-09 | 2021-09-16 | 大连富生天然药物开发有限公司 | 靶向3CLpro的连翘苷及其衍生物和抗新冠应用 |
WO2023098650A1 (zh) * | 2021-12-01 | 2023-06-08 | 盖鑫 | 双环氧木脂素化合物及组合物抗病毒的应用和制备 |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110101659A (zh) * | 2019-05-20 | 2019-08-09 | 山西大学 | 一种连翘脂素自微乳及其制备方法 |
CN114177220A (zh) * | 2020-09-14 | 2022-03-15 | 富力 | 人参与连翘的组合物及其抗病毒等药用 |
CN115955975A (zh) * | 2020-09-04 | 2023-04-11 | 大连富生天然药物开发有限公司 | 连翘组分和任选的人参组分及其应用 |
CN114601866B (zh) * | 2020-12-08 | 2023-01-17 | 北京远大九和药业有限公司 | 治疗或预防病毒性感冒的组合物及其用途 |
CN116210834A (zh) * | 2023-04-10 | 2023-06-06 | 武汉安慧生物科技有限公司 | 一种含有连翘叶碳量子点的功能性植物饮料及其制备方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6063383A (en) * | 1999-01-28 | 2000-05-16 | Hsu; Wu-Ching | Pharmaceutical suppository composites for fever and influenza and method of producing the composites |
CN101285812A (zh) * | 2008-03-06 | 2008-10-15 | 广州中医药大学 | 抗病毒复方制剂的质量控制方法 |
CN101670074A (zh) * | 2009-10-13 | 2010-03-17 | 广州中医药大学 | 一种抗病毒组合物的制备方法 |
CN102161685A (zh) * | 2011-03-11 | 2011-08-24 | 河北科星药业有限公司 | 用连翘叶制备连翘苷提取物的方法 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1748776A (zh) * | 2004-09-13 | 2006-03-22 | 成都市健欣医药工业研究有限公司 | 抗病毒含片或抗病毒咀嚼片及其制备方法 |
CN102210837A (zh) | 2010-04-09 | 2011-10-12 | 肖嘉惠 | 治疗艾滋病的药物 |
-
2014
- 2014-08-07 CN CN201410389232.0A patent/CN105362283B/zh active Active
- 2014-08-07 CN CN201810718068.1A patent/CN108578421B/zh active Active
- 2014-12-23 US US15/502,000 patent/US10286002B2/en active Active
- 2014-12-23 RU RU2017107136A patent/RU2655616C1/ru active
- 2014-12-23 JP JP2017505134A patent/JP6343389B2/ja active Active
- 2014-12-23 EP EP14899145.8A patent/EP3178482B1/en active Active
- 2014-12-23 AU AU2014402938A patent/AU2014402938B2/en active Active
- 2014-12-23 KR KR1020177006088A patent/KR101939726B1/ko active IP Right Grant
- 2014-12-23 CA CA2956988A patent/CA2956988C/en active Active
- 2014-12-23 ES ES14899145T patent/ES2839090T3/es active Active
- 2014-12-23 WO PCT/CN2014/094710 patent/WO2016019684A1/zh active Application Filing
-
2019
- 2019-02-21 US US16/281,826 patent/US10881679B2/en active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6063383A (en) * | 1999-01-28 | 2000-05-16 | Hsu; Wu-Ching | Pharmaceutical suppository composites for fever and influenza and method of producing the composites |
CN101285812A (zh) * | 2008-03-06 | 2008-10-15 | 广州中医药大学 | 抗病毒复方制剂的质量控制方法 |
CN101670074A (zh) * | 2009-10-13 | 2010-03-17 | 广州中医药大学 | 一种抗病毒组合物的制备方法 |
CN102161685A (zh) * | 2011-03-11 | 2011-08-24 | 河北科星药业有限公司 | 用连翘叶制备连翘苷提取物的方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
雷秋香 等: "连翘药理学作用研究进展", 《河北医药》 * |
Cited By (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105796861B (zh) * | 2015-04-23 | 2020-02-11 | 富力 | 连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物在制备提高免疫功能的药物中的应用 |
WO2016169487A1 (zh) * | 2015-04-23 | 2016-10-27 | 富力 | 连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素的组合物在制备抗炎药物中的应用 |
WO2016169491A1 (zh) * | 2015-04-23 | 2016-10-27 | 富力 | 连翘苷、其衍生物、连翘苷/连翘脂素组合物在制备治疗细菌感染药物中的应用 |
CN106063788A (zh) * | 2015-04-23 | 2016-11-02 | 富力 | 连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗呕吐药物或保健品中的应用 |
CN105796861A (zh) * | 2015-04-23 | 2016-07-27 | 富力 | 连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物在制备提高免疫功能的药物中的应用 |
CN111481563A (zh) * | 2019-01-15 | 2020-08-04 | 富力 | 小儿连翘苷连翘脂素及其衍生物的注射剂 |
CN109602699A (zh) * | 2019-01-15 | 2019-04-12 | 富力 | 小儿连翘苷连翘脂素及其衍生物的注射剂 |
CN111481563B (zh) * | 2019-01-15 | 2022-11-15 | 富力 | 小儿连翘苷连翘脂素及其衍生物的注射剂 |
WO2021179878A1 (zh) | 2020-03-09 | 2021-09-16 | 大连富生天然药物开发有限公司 | 靶向3CLpro的连翘苷及其衍生物和抗新冠应用 |
CN115551515A (zh) * | 2020-03-09 | 2022-12-30 | 大连富生天然药物开发有限公司 | 靶向3CLpro的连翘苷及其衍生物和抗新冠应用 |
JP2023510015A (ja) * | 2020-03-09 | 2023-03-10 | 大▲連▼富生天然▲薬▼物▲開▼▲発▼有限公司 | 3CLproを標的とするフィリリンとその誘導体、及び新型コロナウイルスに対する用途 |
JP7430803B2 (ja) | 2020-03-09 | 2024-02-13 | 大▲連▼富生天然▲薬▼物▲開▼▲発▼有限公司 | 3CLproを標的とするフィリリンとその誘導体、及び新型コロナウイルスに対する用途 |
CN112293737A (zh) * | 2020-12-01 | 2021-02-02 | 曾晓飞 | 欧米伽3与连翘苷结合的植物抗病毒抗炎食品补充剂 |
CN112957341A (zh) * | 2021-03-01 | 2021-06-15 | 河南中医药大学 | Mhs细胞来源外泌体装载连翘苷递药系统及其应用 |
WO2023098650A1 (zh) * | 2021-12-01 | 2023-06-08 | 盖鑫 | 双环氧木脂素化合物及组合物抗病毒的应用和制备 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2956988C (en) | 2019-06-18 |
CA2956988A1 (en) | 2016-02-11 |
KR20170036098A (ko) | 2017-03-31 |
KR101939726B1 (ko) | 2019-01-17 |
EP3178482A4 (en) | 2018-04-11 |
AU2014402938A1 (en) | 2017-03-23 |
JP6343389B2 (ja) | 2018-06-13 |
EP3178482A1 (en) | 2017-06-14 |
RU2655616C1 (ru) | 2018-05-29 |
CN108578421A (zh) | 2018-09-28 |
US10881679B2 (en) | 2021-01-05 |
CN105362283B (zh) | 2018-07-27 |
JP2017523191A (ja) | 2017-08-17 |
US20170232025A1 (en) | 2017-08-17 |
WO2016019684A1 (zh) | 2016-02-11 |
US10286002B2 (en) | 2019-05-14 |
US20190175635A1 (en) | 2019-06-13 |
EP3178482B1 (en) | 2020-09-30 |
AU2014402938B2 (en) | 2019-02-14 |
CN108578421B (zh) | 2020-02-11 |
ES2839090T3 (es) | 2021-07-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN105362283A (zh) | 连翘苷/连翘脂素组合物在制备缓解或/和治疗病毒性疾病的药物或保健品中的应用 | |
CN104490969B (zh) | 蒙药漏芦花抗炎有效部位的制备及其应用 | |
CN105461731B (zh) | 连翘脂素布洛芬酯、其制备及其应用 | |
CN101143166B (zh) | 消肿止痛的药物及其制备方法与应用 | |
CN104650108A (zh) | 连翘脂素硫酸酯及其衍生物、制备方法及其应用 | |
CN104945452B (zh) | 一种连翘脂素葡萄糖醛酸衍生物的制备方法及其应用 | |
CN101618146A (zh) | 一种用于治疗上呼吸道感染的复方中药制剂及其制备方法 | |
CN103285230B (zh) | 用于治疗咽炎的药物组合物及其制备方法 | |
CN100386093C (zh) | 一种治疗感冒及上呼吸道感染的药物组合物、其制备方法及其用途 | |
CN103463577A (zh) | 一种治疗产后身痛的药剂 | |
CN106063791A (zh) | 连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素的组合物在制备抗炎药物中的应用 | |
CN113577187B (zh) | 一种治疗流行性感冒的中药组合物、中药提取物及其制备方法和应用 | |
CN104474021A (zh) | 治疗表热的中药组合物及其制备方法 | |
CN1919270B (zh) | 组合物,其提取物及它们的药物用途 | |
CN115955975A (zh) | 连翘组分和任选的人参组分及其应用 | |
CN105816583B (zh) | 一种治疗感冒的复方药物及其制备方法 | |
CN103920010A (zh) | 具有止血止痛及抗炎作用的药物组合物及其制备方法和用途 | |
CN104161902B (zh) | 一种药物组合物及其制剂在制备抗流感药物中的新用途 | |
CN114177220A (zh) | 人参与连翘的组合物及其抗病毒等药用 | |
CN107669971A (zh) | 六味木香制剂在制备预防治疗风湿及并发症的药物中的应用 | |
CN104524175A (zh) | 一种治疗急性结膜炎的中药组合物 | |
CN104740118B (zh) | 一种石岐外感制剂的制备方法 | |
CN103655540B (zh) | 杨梅素晶体化合物用于神经抑制剂的药物的应用 | |
JP2020117493A (ja) | 補気調節用チワン族医薬品組成物及びその調製方法 | |
CN102512359A (zh) | 一种具有抗疱疹病毒作用的芒果苷乳膏 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |