CN105349612A - 高效降解生活污水的微生物筛选方法 - Google Patents
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Abstract
一种高效降解生活污水的微生物筛选方法，包括以下步骤：将待筛选菌种添加到生活污水中处理7d；将处理后污水的上清夜经过滤、有机物富集与洗脱后分别联机进行GC/MS分析；分析得到的总离子流色谱图对比处理前后生活污水中有机物种类和含量的变化；以有机物种类的降低及含量的减少程度作为筛选高效降解生活污水优势菌株的指标。通过GC/MS分析测出菌株处理前后污水中组成成分的变化来筛选高效降解生活污水的优势菌株，得到的有关污水水质的相关信息比较全面，对于筛选优势菌株来说具有灵敏、快速，水质信息全面的优势，为污水处理领域菌株的筛选提供了一种可行的方法。
Description
技术领域
本发明涉及生活污水处理的技术领域，具体说是一种高效降解生活污水的微生物筛选方法。
背景技术
我国面临着水量型缺水和水质型缺水的双重考验，人均水资源占有量低于世界平均水平，居民用水量逐渐加大，对于水环境质量的关注和要求日渐提高。大量未处理生活污水的直接排放对于我国水环境的质量造成了安全隐患如引起附近水体的富营养化等。生活污水主要来源于洗涤、厨房、冲厕，特征污染物为COD、TN、TP、SS、氨氮，其中有机污染物含量高，污水可生化性强，重金属及有毒有害物质含量较低。
生物处理技术是利用微生物的代谢作用将有机污染物分解为CO2和H2O，或者有机酸和醇等，从而达到净化污水的目的。与物理化学方法相比，生物处理法费用低廉，同时用于污水处理的微生物繁殖快，容易培养，适应不同种类废水环境的能力强。在生物处理技术领域通常对高效降解生活污水中特征污染物的菌株进行筛选，以实现对污水的生物降解处理。
目前，用于高效降解生活污水的菌株筛选方法主要是通过检测菌株的相关酶活性，如降解生活污水中脂肪、蛋白质、纤维素等大分子物质的相应酶活性，然而，生活污水中含有的有机物种类较多，仅仅检测污水中特定的几种有机物降解酶活性并不能反应菌株降解污水中有机物的总体效果，并且测定酶活时的影响因素较多如温度、PH等，且每次测定结果的稳定性较差。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种高效降解生活污水的微生物筛选方法。
本发明为解决公知技术中存在的技术问题所采取的技术方案是:
本发明的高效降解生活污水的微生物筛选方法，包括以下步骤：将待筛选菌种添加到生活污水中处理7d；将处理后污水的上清夜经过滤、有机物富集与洗脱后分别联机进行GC/MS分析；分析得到的总离子流色谱图对比处理前后生活污水中有机物种类和含量的变化；以有机物种类的降低及含量的减少程度作为筛选高效降解生活污水优势菌株的指标。
本发明还可以采用以下技术措施：
本发明具体包括以下步骤：
（1）菌种活化：
将4℃斜面保存的酵母菌、细菌、乳酸菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，酵母菌于30℃培养2-3d，细菌于37℃培养1d，乳酸菌于37℃培养2-3d。
（2）种子液制备：
挑取活化的菌落，分别接种于各自液体培养基中，酵母菌于30℃、180rpm培养2d，细菌和乳酸菌于37℃、200rpm培养2d；
（3）将培养至对数期的各菌株的种子液分别接种到生活污水中，随后在摇床上以20℃、110rpm的条件进行为期7天的净化处理；
（4）对用菌体处理后的污水分别进行GC/MS分析，以对生活污水中的有机物进行定性定量分析，得出经各菌株降解后对应污水的总离子流色谱图；
（5）对相同体积的未处理的污水原样进行GC/MS分析，对比污水经菌株处理前后的总离子流色谱图，分析对比有机物种类和含量；
（6）以有机物种类和含量减少程度作为菌株筛选指标，经处理后有机物种类和含量降低较多的污水，其所对应的菌种即为所得。
所述各种子培养基分别为：
酵母菌培养基为YEPD培养基，其中各组分浓度为蛋白胨2g/L、酵母膏1g/L、葡萄糖2g/L，PH6.0，121℃灭菌20min；
细菌培养基为肉汤培养基，其中各组分浓度为蛋白胨10g/L、牛肉膏5g/L、NaCl5g/L，PH7.2-7.4，121℃灭菌20min；
乳酸菌培养基为MRS培养基，其中各组分浓度为蛋白胨10g/L、牛肉粉5g/L、酵母粉4g/L、葡萄糖20g/L、K2HPO42g/L、无水乙酸钠5g/L、柠檬酸二铵2g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.05g/L、土温801.0ml，PH6.2-6.4，121℃灭菌15min。
用Bioscreen全自动生长曲线测定仪对实验室所保藏的多株酵母菌、细菌、乳酸菌进行生长曲线的测定，确定菌体生长到对数期的时间，以确定菌株接种到污水中的最佳时期。
对污水进行GC/MS分析的步骤如下：
制备吸附柱：取一规格为1cm×25cm的玻璃柱，把经过纯化处理的XAD-2树脂装入玻璃柱，使树脂床的高度为13cm，保持装柱均匀，柱内无气泡；
菌株降解后污水的富集与洗脱：将经过菌株处理后的对应污水静置沉淀后分别取上清液经G4砂芯漏斗过滤，以25ml/min的流速流经吸附柱，取富集树脂置于分液漏斗中用80ml二氯甲烷萃取6次，合并所得二氯甲烷萃取剂并通过上层为无水硫酸钠、下层为玻璃棉的30ml漏斗，将所得液体放于通风橱内经自然浓缩至2.0～3.0ml，密封，低温冷藏待测；
GC/MS分析的气相色谱条件：
气体温度：240℃，
柱温：在30℃下保持2min，然后以15℃/min的速率升温至150℃，再以15℃/min的速率升温至240℃，保持10min，
进样口温度:240℃，
载气:高纯He(99.999%),流量:1.1ml/min；
GC/MS分析的质谱条件：
电离方式:电子轰击源，
电子轰击温度:140℃，
电离能量：70eV，
扫描范围：29～400m/z；
待仪器运行稳定之后，取浓缩液1ul进样分析，得出经过菌株分别降解后各污水的总离子流色谱图。
本发明具有的优点和积极效果是:
本发明的高效降解生活污水的微生物筛选方法中，通过GC/MS分析测出菌株处理前后污水中组成成分的变化，从而通过污水中有机物组成成分和含量的变化来筛选高效降解生活污水的优势菌株，得到的有关污水水质的相关信息比较全面，对于筛选优势菌株来说具有灵敏、快速，水质信息全面的优势，为污水处理领域菌株的筛选提供了一种可行的方法。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
本发明的高效降解生活污水的微生物筛选方法，包括以下步骤：将待筛选菌种添加到生活污水中处理7d；将处理后污水的上清夜经过滤、有机物富集与洗脱后分别联机进行GC/MS分析；分析得到的总离子流色谱图对比处理前后生活污水中有机物种类和含量的变化；以有机物种类的降低及含量的减少程度作为筛选高效降解生活污水优势菌株的指标。
对实验室所保藏的酵母菌、细菌、乳酸菌共32株菌种分别对污水进行降解处理，GC/MS联机对污水原样进行检测的实验数据分析结果可知，污水原样中共检测到有机污染物24种，污水中主要污染物为有机酸和酯类化合物，其次为苯系物和醇类有机物，其中，对羟基联苯为有毒物质，其相对含量达到了8%，说明生活污水已经受到一定程度的有机污染。
实施例1：
本发明实施时具体包括以下步骤：
（1）菌种活化：
将4℃斜面保存的酵母菌、细菌、乳酸菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，酵母菌于30℃培养2d，细菌于37℃培养1d，乳酸菌于37℃培养2d。
（2）种子液制备：
挑取活化的菌落，分别接种于各自液体培养基中，酵母菌于30℃、180rpm培养2d，细菌和乳酸菌于37℃、200rpm培养2d；
所述各种子培养基分别为：
酵母菌培养基为YEPD培养基，其中各组分浓度为蛋白胨2g/L、酵母膏1g/L、葡萄糖2g/L，PH6.0，121℃灭菌20min；
细菌培养基为肉汤培养基，其中各组分浓度为蛋白胨10g/L、牛肉膏5g/L、NaCl5g/L，PH7.2，121℃灭菌20min；
乳酸菌培养基为MRS培养基，其中各组分浓度为蛋白胨10g/L、牛肉粉5g/L、酵母粉4g/L、葡萄糖20g/L、K2HPO42g/L、无水乙酸钠5g/L、柠檬酸二铵2g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.05g/L、土温801.0ml，PH6.2，121℃灭菌15min；
（3）用Bioscreen全自动生长曲线测定仪对实验室所保藏的多株酵母菌、细菌、乳酸菌进行生长曲线的测定，确定菌体生长到对数期的时间，以确定菌株接种到污水中的最佳时期；将培养至对数期的各菌株的种子液分别接种到生活污水中，随后在摇床上以20℃、110rpm的条件进行为期7天的净化处理；
（4）对用菌体处理后的污水分别进行GC/MS分析，以对生活污水中的有机物进行定性定量分析，得出经各菌株降解后对应污水的总离子流色谱图；
（5）对相同体积的未处理的污水原样进行GC/MS分析，对比污水经菌株处理前后的总离子流色谱图，分析对比有机物种类和含量；
对污水进行GC/MS分析的步骤如下：
制备吸附柱：取一规格为1cm×25cm的玻璃柱，把经过纯化处理的XAD-2树脂装入玻璃柱，使树脂床的高度为13cm，保持装柱均匀，柱内无气泡；
菌株降解后污水的富集与洗脱：将经过菌株处理后的对应污水静置沉淀后分别取上清液经G4砂芯漏斗过滤，以25ml/min的流速流经吸附柱，取富集树脂置于分液漏斗中用80ml二氯甲烷萃取6次，合并所得二氯甲烷萃取剂并通过上层为无水硫酸钠、下层为玻璃棉的30ml漏斗，将所得液体放于通风橱内经自然浓缩至2.0ml，密封，低温冷藏待测；
GC/MS分析的气相色谱条件：
气体温度：240℃，
柱温：在30℃下保持2min，然后以15℃/min的速率升温至150℃，再以15℃/min的速率升温至240℃，保持10min，
进样口温度:240℃，
载气:高纯He(99.999%),流量:1.1ml/min；
GC/MS分析的质谱条件：
电离方式:电子轰击源，
电子轰击温度:140℃，
电离能量：70eV，
扫描范围：29～400m/z；
待仪器运行稳定之后，取浓缩液1ul进样分析，得出经过菌株分别降解后各污水的总离子流色谱图
（6）以有机物种类和含量减少程度作为菌株筛选指标，经处理后有机物种类和含量降低较多的污水，其所对应的菌种即为所得。
GC/MS联机分析经菌株处理后的污水发现，经酿酒酵母（CGMCCNO.2.2076）、酿酒酵母（CGMCCNO.2.1554）、蜡样芽孢杆菌（CGMCCNO.1.234）、荧光假单胞杆菌（购买自天津科技大学生物工程学院微生物菌种保藏库）、以及嗜酸乳杆菌（CGMCCNO.1.2912）处理后的污水中有机物种类分别减少了41.7%、37.6%、34.8%、28.4%、27.6%，有机物的含量分别降低了77.8%，81.7%，74.9%，76.0%，82.7%。测得污水中COD的含量都在3mg/l以下。低于《生活饮用水卫生规范》中和《城市供水水质标准》规定的COD的限值，处理水质达到标准。说明这五种微生物对生活污水中的酯类、有机酸类、苯系物等具有一定的去除效果。
实施例2：
本发明实施时具体包括以下步骤：
（1）菌种活化：
将4℃斜面保存的酵母菌、细菌、乳酸菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，酵母菌于30℃培养3d，细菌于37℃培养1d，乳酸菌于37℃培养3d。
（2）种子液制备：
挑取活化的菌落，分别接种于各自液体培养基中，酵母菌于30℃、180rpm培养2d，细菌和乳酸菌于37℃、200rpm培养2d；
所述各种子培养基分别为：
酵母菌培养基为YEPD培养基，其中各组分浓度为蛋白胨2g/L、酵母膏1g/L、葡萄糖2g/L，PH6.0，121℃灭菌20min；
细菌培养基为肉汤培养基，其中各组分浓度为蛋白胨10g/L、牛肉膏5g/L、NaCl5g/L，PH7.4，121℃灭菌20min；
乳酸菌培养基为MRS培养基，其中各组分浓度为蛋白胨10g/L、牛肉粉5g/L、酵母粉4g/L、葡萄糖20g/L、K2HPO42g/L、无水乙酸钠5g/L、柠檬酸二铵2g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.05g/L、土温801.0ml，PH6.4，121℃灭菌15min；
（3）用Bioscreen全自动生长曲线测定仪对实验室所保藏的多株酵母菌、细菌、乳酸菌进行生长曲线的测定，确定菌体生长到对数期的时间，以确定菌株接种到污水中的最佳时期；将培养至对数期的各菌株的种子液分别接种到生活污水中，随后在摇床上以20℃、110rpm的条件进行为期7天的净化处理；
（4）对用菌体处理后的污水分别进行GC/MS分析，以对生活污水中的有机物进行定性定量分析，得出经各菌株降解后对应污水的总离子流色谱图；
（5）对相同体积的未处理的污水原样进行GC/MS分析，对比污水经菌株处理前后的总离子流色谱图，分析对比有机物种类和含量；
对污水进行GC/MS分析的步骤如下：
制备吸附柱：取一规格为1cm×25cm的玻璃柱，把经过纯化处理的XAD-2树脂装入玻璃柱，使树脂床的高度为13cm，保持装柱均匀，柱内无气泡；
菌株降解后污水的富集与洗脱：将经过菌株处理后的对应污水静置沉淀后分别取上清液经G4砂芯漏斗过滤，以25ml/min的流速流经吸附柱，取富集树脂置于分液漏斗中用80ml二氯甲烷萃取6次，合并所得二氯甲烷萃取剂并通过上层为无水硫酸钠、下层为玻璃棉的30ml漏斗，将所得液体放于通风橱内经自然浓缩至3.0ml，密封，低温冷藏待测；
GC/MS分析的气相色谱条件：
气体温度：240℃，
柱温：在30℃下保持2min，然后以15℃/min的速率升温至150℃，再以15℃/min的速率升温至240℃，保持10min，
进样口温度:240℃，
载气:高纯He(99.999%),流量:1.1ml/min；
GC/MS分析的质谱条件：
电离方式:电子轰击源，
电子轰击温度:140℃，
电离能量：70eV，
扫描范围：29～400m/z；
待仪器运行稳定之后，取浓缩液1ul进样分析，得出经过菌株分别降解后各污水的总离子流色谱图
（6）以有机物种类和含量减少程度作为菌株筛选指标，经处理后有机物种类和含量降低较多的污水，其所对应的菌种即为所得。
GC/MS联机分析经菌株处理后的污水发现，经酿酒酵母（CGMCCNO.2.2076）、酿酒酵母（CGMCCNO.2.1554）、蜡样芽孢杆菌（CGMCCNO.1.234）、荧光假单胞杆菌（购买自天津科技大学生物工程学院微生物菌种保藏库）、以及嗜酸乳杆菌（CGMCCNO.1.2912）处理后的污水中有机物种类分别减少了41.3%、37.5%、34.8%、28.2%、27.9%，有机物的含量分别降低了77.2%，80.4%，75.1%，76.0%，82.5%。测得污水中COD的含量都在3mg/l以下。低于《生活饮用水卫生规范》中和《城市供水水质标准》规定的COD的限值，处理水质达到标准。说明这五种微生物对生活污水中的酯类、有机酸类、苯系物等具有一定的去除效果。
实施例3：
本发明实施时具体包括以下步骤：
（1）菌种活化：
将4℃斜面保存的酵母菌、细菌、乳酸菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，酵母菌于30℃培养2.5d，细菌于37℃培养1d，乳酸菌于37℃培养2.5d。
（2）种子液制备：
挑取活化的菌落，分别接种于各自液体培养基中，酵母菌于30℃、180rpm培养2d，细菌和乳酸菌于37℃、200rpm培养2d；
所述各种子培养基分别为：
酵母菌培养基为YEPD培养基，其中各组分浓度为蛋白胨2g/L、酵母膏1g/L、葡萄糖2g/L，PH6.0，121℃灭菌20min；
细菌培养基为肉汤培养基，其中各组分浓度为蛋白胨10g/L、牛肉膏5g/L、NaCl5g/L，PH7.3，121℃灭菌20min；
乳酸菌培养基为MRS培养基，其中各组分浓度为蛋白胨10g/L、牛肉粉5g/L、酵母粉4g/L、葡萄糖20g/L、K2HPO42g/L、无水乙酸钠5g/L、柠檬酸二铵2g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.05g/L、土温801.0ml，PH6.3，121℃灭菌15min；
（3）用Bioscreen全自动生长曲线测定仪对实验室所保藏的多株酵母菌、细菌、乳酸菌进行生长曲线的测定，确定菌体生长到对数期的时间，以确定菌株接种到污水中的最佳时期；将培养至对数期的各菌株的种子液分别接种到生活污水中，随后在摇床上以20℃、110rpm的条件进行为期7天的净化处理；
（4）对用菌体处理后的污水分别进行GC/MS分析，以对生活污水中的有机物进行定性定量分析，得出经各菌株降解后对应污水的总离子流色谱图；
（5）对相同体积的未处理的污水原样进行GC/MS分析，对比污水经菌株处理前后的总离子流色谱图，分析对比有机物种类和含量；
对污水进行GC/MS分析的步骤如下：
制备吸附柱：取一规格为1cm×25cm的玻璃柱，把经过纯化处理的XAD-2树脂装入玻璃柱，使树脂床的高度为13cm，保持装柱均匀，柱内无气泡；
菌株降解后污水的富集与洗脱：将经过菌株处理后的对应污水静置沉淀后分别取上清液经G4砂芯漏斗过滤，以25ml/min的流速流经吸附柱，取富集树脂置于分液漏斗中用80ml二氯甲烷萃取6次，合并所得二氯甲烷萃取剂并通过上层为无水硫酸钠、下层为玻璃棉的30ml漏斗，将所得液体放于通风橱内经自然浓缩至2.5ml，密封，低温冷藏待测；
GC/MS分析的气相色谱条件：
气体温度：240℃，
柱温：在30℃下保持2min，然后以15℃/min的速率升温至150℃，再以15℃/min的速率升温至240℃，保持10min，
进样口温度:240℃，
载气:高纯He(99.999%),流量:1.1ml/min；
GC/MS分析的质谱条件：
电离方式:电子轰击源，
电子轰击温度:140℃，
电离能量：70eV，
扫描范围：29～400m/z；
待仪器运行稳定之后，取浓缩液1ul进样分析，得出经过菌株分别降解后各污水的总离子流色谱图
（6）以有机物种类和含量减少程度作为菌株筛选指标，经处理后有机物种类和含量降低较多的污水，其所对应的菌种即为所得。
GC/MS联机分析经菌株处理后的污水发现，经酿酒酵母（CGMCCNO.2.2076）、酿酒酵母（CGMCCNO.2.1554）、蜡样芽孢杆菌（CGMCCNO.1.234）、荧光假单胞杆菌（购买自天津科技大学生物工程学院微生物菌种保藏库）、以及嗜酸乳杆菌（CGMCCNO.1.2912）处理后的污水中有机物种类分别减少了42%、38%、35%、29%、28%，有机物的含量分别降低了78%，81.6%，75.3%，76.4%，82.9%。测得污水中COD的含量都在3mg/l以下。低于《生活饮用水卫生规范》中和《城市供水水质标准》规定的COD的限值，处理水质达到标准。说明这五种微生物对生活污水中的酯类、有机酸类、苯系物等具有一定的去除效果。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例公开如上，然而，并非用以限定本发明,任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内,当然会利用揭示的技术内容作出些许更动或修饰，成为等同变化的等效实施例,但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的范围内。
Claims (5)
1.一种高效降解生活污水的微生物筛选方法，包括以下步骤：将待筛选菌种添加到生活污水中处理7d；将处理后污水的上清夜经过滤、有机物富集与洗脱后分别联机进行GC/MS分析；分析得到的总离子流色谱图对比处理前后生活污水中有机物种类和含量的变化；以有机物种类的降低及含量的减少程度作为筛选高效降解生活污水优势菌株的指标。
2.根据权利要求1所述的高效降解生活污水的微生物筛选方法，包括以下步骤：
(1)菌种活化：
将4℃斜面保存的酵母菌、细菌、乳酸菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，酵母菌于30℃培养2-3d，细菌于37℃培养1d，乳酸菌于37℃培养2-3d。
(2)种子液制备：
挑取活化的菌落，分别接种于各自液体培养基中，酵母菌于30℃、180rpm培养2d，细菌和乳酸菌于37℃、200rpm培养2d；
(3)将培养至对数期的各菌株的种子液分别接种到生活污水中，随后在摇床上以20℃、110rpm的条件进行为期7天的净化处理；
(4)对用菌体处理后的污水分别进行GC/MS分析，以对生活污水中的有机物进行定性定量分析，得出经各菌株降解后对应污水的总离子流色谱图；
(5)对相同体积的未处理的污水原样进行GC/MS分析，对比污水经菌株处理前后的总离子流色谱图，分析对比有机物种类和含量；
(6)以有机物种类和含量减少程度作为菌株筛选指标，经处理后有机物种类和含量降低较多的污水，其所对应的菌种即为所得。
3.根据权利要求2所述的高效降解生活污水的微生物筛选方法，其特征在于：所述各种子培养基分别为：
酵母菌培养基为YEPD培养基，其中各组分浓度为蛋白胨2g/L、酵母膏1g/L、葡萄糖2g/L，PH6.0，121℃灭菌20min；
细菌培养基为肉汤培养基，其中各组分浓度为蛋白胨10g/L、牛肉膏5g/L、NaCl5g/L，PH7.2-7.4，121℃灭菌20min；
乳酸菌培养基为MRS培养基，其中各组分浓度为蛋白胨10g/L、牛肉粉5g/L、酵母粉4g/L、葡萄糖20g/L、K2HPO42g/L、无水乙酸钠5g/L、柠檬酸二铵2g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.05g/L、土温801.0ml，PH6.2-6.4，121℃灭菌15min。
4.根据权利要求3所述的高效降解生活污水的微生物筛选方法，其特征在于：用Bioscreen全自动生长曲线测定仪对实验室所保藏的多株酵母菌、细菌、乳酸菌进行生长曲线的测定，确定菌体生长到对数期的时间，以确定菌株接种到污水中的最佳时期。
5.根据权利要求4所述的高效降解生活污水的微生物筛选方法，其特征在于：对污水进行GC/MS分析的步骤如下：
制备吸附柱：取一规格为1cm×25cm的玻璃柱，把经过纯化处理的XAD-2树脂装入玻璃柱，使树脂床的高度为13cm，保持装柱均匀，柱内无气泡；
菌株降解后污水的富集与洗脱：将经过菌株处理后的对应污水静置沉淀后分别取上清液经G4砂芯漏斗过滤，以25ml/min的流速流经吸附柱，取富集树脂置于分液漏斗中用80ml二氯甲烷萃取6次，合并所得二氯甲烷萃取剂并通过上层为无水硫酸钠、下层为玻璃棉的30ml漏斗，将所得液体放于通风橱内经自然浓缩至2.0～3.0ml，密封，低温冷藏待测；
GC/MS分析的气相色谱条件：
气体温度：240℃，
柱温：在30℃下保持2min，然后以15℃/min的速率升温至150℃，再以15℃/min的速率升温至240℃，保持10min，
进样口温度:240℃，
载气:高纯He(99.999％),流量:1.1ml/min；
GC/MS分析的质谱条件：
电离方式:电子轰击源，
电子轰击温度:140℃，
电离能量：70eV，
扫描范围：29～400m/z；
待仪器运行稳定之后，取浓缩液1ul进样分析，得出经过菌株分别降解后各污水的总离子流色谱图。
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Citations (7)
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-
2015
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Non-Patent Citations (1)
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| 李琪: "淮河中下游水环境中PAHs的分布及其降解菌的筛选", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库工程科技Ⅰ辑》 * |
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