CN105343550A - 一种用于治疗眼病的制剂制备方法及其制剂 - Google Patents

Abstract

本发明属于中药领域，涉及一种用于治疗眼病的制剂制备方法及其制剂。所述制剂包括以下重量份数的原料：丹参9-15份、川芎3-9份、熊胆1-2份、白术6-12份、冬虫夏草3-9份、枸杞子6-12份、牛黄1-2份、白茅根9-30份、茯苓9-15份、泽兰6-12份、赤芍6-12份、黄芩3-9份、石斛6-12份、熟地9-15份、当归6-12份、黄芪6-15份、车前子9-15份、葛根9-15份、陈皮3-10份、茺蔚子5-9份和蒲公英9-15份；制备方法包括将上述原料药煎煮后得到的药物混合液与复合菌液按照1:0.05-0.3的比例混合后进行发酵，经过处理后得到制剂。该制剂具有清热解毒、滋补肝肾，益精明目、补气固表、利水渗湿、化瘀通络的功效。

Description

一种用于治疗眼病的制剂制备方法及其制剂

技术领域

本发明属于中药领域，尤其涉及一种用于治疗眼病的制剂制备方法及其制剂。

背景技术

黄斑变性是一种慢性眼病，它能引起中心视力的急剧下降，而中心视力是日常活动所必需的，如阅读、看时间、识别面部特征和驾驶等。它是不可逆的中心视力的下降或丧失，很难再治愈。老年性黄斑变性多发生在45岁以上，年龄越大，发病率就越高。发病率有种族差异，白种人的发病率高于有色人种。

黄斑变性的病理机制主要为黄斑区结构的衰老性改变。黄斑变性分为萎缩型和渗出型两种。萎缩型又称干性或非渗出性，主要为脉络膜毛细血管猥琐，玻璃膜增厚和视网膜色素上皮萎缩引起的黄斑区萎缩变性。渗出型又称湿性或盘状黄斑变性，主要是玻璃膜的破坏，脉络膜血管侵入视网膜下构成脉络膜新生血管，发生黄斑区视网膜色素上皮下或神经上皮下浆液性或出血性的盘状脱离，最终成为机化瘢痕，据临床观察，萎缩型也可转变成渗出型。

视锥细胞的营养供应和代谢废物的转运，要通过视网膜色素上皮细胞来完成。视锥细胞在完成感光任务时会脱落外节盘膜，脱落的外节盘膜由视网膜色素上皮细胞负责吞噬，并在细胞内的特定消化酶的催化下消化排泄。眼底视网膜区域由于含氧丰富和光线照射的缘故，处于高氧化环境，视锥细胞脱落的外节盘膜很容易氧化变性，原先的消化酶无法识别，使其无法被完全消化在视网膜色素上皮细胞内沉积，视网膜色素上皮细胞因此出现功能退化甚至凋亡，从而导致视锥细胞萎缩、凋亡。

黄斑变性的病因常常因为年老体弱，脏气虚衰活着是先天禀负不足够，脾肾两虚还有肝郁火旺，痰湿化热为发病的常见因素。脾主气主运化还有脾气虚则运化不能以及血津液化生不足够，肾气虚则鼓动无力。黄斑变性的初期所见的现象，即玻璃膜疣之病理的产物大多数是由此而形成的。黄斑病变当损害色素上皮及神经上皮导致脱离的时候，可以让患者的视力减退或者是视物变形就是“视瞻昏渺”，当少量的出血进入玻璃体引起混浊的时候，又被成为“云雾移晴”。但是一旦大量的积血进入玻璃体而导致视力骤降的患者，则可归入“暴盲”之中。引起黄斑变性的还有可能是不良的生活习惯，如酗酒，或者患有心血管病，比如心脏病和高血压。

黄斑变性的治疗，目前现代医学没有特效的治疗方法，临床也常根据病程的阶段，使用抗氧化剂，维生素类，止血剂，以及视神经营养药或细胞激活制剂。对脉络膜有新生血管的及早施行光凝术，以免病情恶化。此时，光凝可以封闭已经存在的新生血管，不能阻止新的新生血管的形成，所以以上的治疗大多为对症治疗。但是，手术等治疗方法存在一定的风险，且易复发。由于中药的独特的药理作用，对于慢性反复性的疾病，疗效很好，对于保护视细胞，稳定和提高视力，对阻止病情的复发，瘢痕的修复，防止另眼病情发展。尤其对陈旧性出血及渗出的吸收，尤为专长。能够整体调整人的机能，并且毒副作用极小，所以在治疗的过程中，争取更多的机会运用中药以达到标本兼治的效果。

公开号为102188637A的中国专利文献公开了一种用于治疗黄斑变性的中药组合物及其制备方法，所述中药组合物主要由丹参、川芎、枸杞子、菊花、五味子、白茅根和黄芩组成，按其重量份数计丹参0.8-3.0份、川芎0.3-2.0份、枸杞子0.6-2.4份、菊花0.5-2.0

份、五味子0.2-1.2份、白茅根0.9-6.0份、黄芩0.5-2.0份，该中药组合物具有滋补肝肾，固本培元、清肝明目、活血化瘀、利水消肿、凉血止血的功效，解决了现有西药不能治疗干性黄斑变性的问题，但是治疗周期长，疗效慢，效果不明显。

发明内容

为了解决该技术问题，本发明提供了一种用于治疗眼病的制剂制备方法及其制剂，该制剂具有清热解毒、滋补肝肾，益精明目、补气固表、利水渗湿、化瘀通络的功效，还具有疗效好、副作用低、不易复发等优点，此外，本发明还提供该药物制剂相应的制造工艺。

其中，本发明提供一种用于治疗眼病的制剂制备方法，包含下述步骤：

（100）、按如下重量组份取原料药：

丹参9-15份、川芎3-9份、熊胆1-2份、白术6-12份、冬虫夏草3-9份、枸杞子6-12份、牛黄1-2份、白茅根9-30份、茯苓9-15份、泽兰6-12份、赤芍6-12份、黄芩3-9份、石斛6-12份、熟地9-15份、当归6-12份、黄芪6-15份、车前子9-15份、葛根9-15份、陈皮3-10份、茺蔚子5-9份和蒲公英9-15份；

（200）、煎煮原料药；

对上述原料药加入重量为原料药8-10倍量的水，煎煮1-3小时，得到原料煎液；

（300）、过滤；

对原料煎液进行过滤除杂，得到药物混合液；

（400）、发酵；

（410）将药物混合液装入发酵罐中，升温至121摄氏度进行高温灭菌，灭菌时间为5-10分钟，冷却至25-28摄氏度；

（420）在冷却后的药物混合液中按1:0.05-0.3的重量组份比例加入复合菌液，混合均匀，得到混合药液；

（430）在25-28摄氏度的条件下，发酵罐内保持正压，连续或间歇搅拌，连续地向发酵罐内通入无菌空气的情况下，发酵5-10小时，得到发酵液；

（500）、破壁处理；

对过滤后的发酵液使用超声波细胞破碎仪进行破壁处理，每次超声1-3s,间隔1-3s,共超声40-50次；

（600）过滤处理

用过滤离心机对破壁处理后的发酵液高速离心，除去大部分杂质，采用反渗透膜过滤法进行精滤，即得到用于治疗眼病的制剂。

作为对本发明的改进，在步骤（420）中，所述复合菌液的制备方法步骤如下；

（1）、培养液的制备，取重量份的麦芽粉20-30份，淀粉60-80份，按下述方法处理；

（11）、淀粉糊化，将淀粉与水按1：2-3重量份的比例放入糊化锅，升温至90-100摄氏度，在不断搅拌的情况下，直至淀粉成糊状，再用20-25摄氏度的水将糊化好的浆料的温度调到68-73摄氏度；

（12）、将麦芽粉放入糖化锅内，将（11）步制好的浆料移到糖化锅内，在搅拌的情况下，使麦芽粉与浆料充分混合，然后，静置，并保持温度在64-66摄氏度范围内，4-6小时，直到淀粉完全被糖化；

（13）、将糖化好的糖化汁移入煮沸锅内，升温至100摄氏度，煮沸5-10分钟；

（14）、将煮沸锅内的糖化汁抽入旋涡分离器，分离出固相物质，被分离后的糖化汁进入发酵罐内；

（15）、在发酵罐内将温度升至121摄氏度，维持1小时，然后，用无菌空气保持发酵罐内正压时，将被分离后的糖化汁冷却至25-28摄氏度；

（2）、接种；

按被分离后的糖化汁的总重量的3-10%接入混合菌种，其中，混合菌种由重量相等的黑根霉、黑曲霉、红曲霉、白地霉和米酒酵母组成；

（3）、发酵；

在25-28摄氏度，发酵罐内保持正压，连续或间歇搅拌，连续地向被分离后的糖化汁通入无菌空气的情况下，发酵5-10小时，得到复合菌液；

作为对本发明的改进，在步骤（100）中，按如下重量组分取原料药；

丹参10-14份、川芎4-8份、熊胆1-2份、白术7-10份、冬虫夏草4-8份、枸杞子7-10份、牛黄1-2份、白茅根15-25份、茯苓10-14份、泽兰7-11份、赤芍7-10份、黄芩5-8份、石斛7-10份、熟地11-14份、当归8-11份、黄芪7-12份、车前子10-13份、葛根11-14份、陈皮4-8份、茺蔚子5-8份和蒲公英10-14份。

作为对本发明的改进，在步骤（100）中，按如下重量组分取原料药；

丹参11-13份、川芎5-7份、熊胆1-2份、白术8-9份、冬虫夏草5-7份、枸杞子8-10份、牛黄1-2份、白茅根20-25份、茯苓10-13份、泽兰7-9份、赤芍8-10份、黄芩6-8份、石斛8-10份、熟地11-13份、当归8-10份、黄芪7-10份、车前子10-12份、葛根12-14份、陈皮5-7份、茺蔚子6-8份和蒲公英11-13份。

作为对本发明的改进，在步骤（100）中，按如下重量组分取原料药；

丹参12份、川芎6份、熊胆1份、白术9份、冬虫夏草6份、枸杞子9份、牛黄1份、白茅根22份、茯苓12份、泽兰8份、赤芍9份、黄芩7份、石斛9份、熟地12份、当归9份、黄芪9份、车前子11份、葛根13份、陈皮6份、茺蔚子7份和蒲公英12份。

作为对本发明的改进，在步骤（2）中，所述混合菌种的制备方法的步骤如下；

（21）、将黑根霉按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得黑根霉种液；

（22）、将黑曲霉按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得黑曲霉种液；

（23）、将红曲霉按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得红曲霉种液；

（24）、将白地霉按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得白地霉种液；

（25）将米酒酵母按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得米酒酵母种液；

（26），将上述制备的黑根霉种液、黑曲霉种液、红曲霉种液、白地霉种液和米酒酵母种液，按等重量混合，即得混合菌种。

作为对本发明的改进，在步骤（1）中的所述淀粉可以是大米粉、小麦粉、红薯粉或马铃薯粉，或者是大米粉、小麦粉、红薯粉和马铃薯粉中的任意两种以上的组合物。

作为对本发明的改进，在第（600）步后，还包括以下步骤：

（700）分装；

将制剂按预定包装容量进行分装；

本发明还公开了一种用于治疗眼病的制剂，该制剂是用上述方法制备得到的。

本发明所用组分的来源、性味、归经及功效：

丹参：本品为唇形科植物丹参的干燥根及根茎；味苦，性微寒；归心、肝经；祛瘀止痛，活血通经，清心除烦。

川芎：本品为伞形科植物川芎的干燥根茎；味辛，性温；归肝、胆、心包经；活血行气，祛风止痛。

熊胆：本品为熊科动物黑熊、东北马熊或棕熊胆囊内的干燥胆汁；味苦，性寒；归肝、胆、睥、胃经；清热解毒，明目，止痉。

白术：本品为菊科植物白术的干燥根茎；味苦、甘，性温；归脾、胃经；健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎。

冬虫夏草：本品为麦角菌科真菌冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体；味甘，性平；归肺、肾经；补肺益肾，止血化痰。

枸杞子：本品为茄科植物宁夏枸杞的干燥成熟果实；味甘，性平；归肝、肾经；滋补肝肾，益精明目。

牛黄：本品为牛科动物牛的干燥的胆结石；味甘，性凉；归心、肝经；清心，豁痰，开窍，凉肝，息风，解毒。

白茅根：本品为禾本科植物白茅的干燥根茎；味甘，性寒；归肺、胃、膀胱经；凉血止血，清热利尿。

茯苓：本品为多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核；味甘、淡，性平；归心、肺、脾、肾经；利水渗湿，健脾宁心。

泽兰：本品为唇形科植物毛叶地瓜儿苗的干燥地上部分；味苦、辛，性微温；归肝、脾经；活血化瘀，行水消肿。

赤芍：本品为毛茛科植物芍药或川赤芍的干燥根；味苦，性微寒；归肝经；清热凉血，散瘀止痛。

黄芩：本品为唇形科植物黄芩的干燥根；味苦，性寒；归肺、胆、脾、大肠、小肠经；清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎。

石斛：本品为兰科植物环草石斛、马鞭石斛、黄草石斛、铁皮石斛或金钗石斛的新鲜或干燥茎；味甘，性微寒；归胃、肾经；益胃生津，滋阴清热。

熟地：本品为生地黄的炮制加工品；味甘，性微温；归肝、肾经；滋阴补血，益精填髓。

当归：本品为伞形科植物当归的干燥根；味甘、辛，性温；归肝、心、脾经；补血活血，调经止痛，润肠通便。

黄芪：本品为豆科植物红花岩黄芪的干燥根；味甘，性温；归心、肺、脾、肾经；补气固表，利尿，托毒排脓，生肌敛疮。

车前子：本品为车前科植物车前或平车前的干燥成熟种子；味甘，性微寒；归肝、肾、肺、小肠经；清热利尿，渗湿通淋，明目，祛痰。

葛根：本品为豆科植物野葛或甘葛藤的干燥根；味甘、辛，性凉；归脾、胃经；解肌退热，生津，透疹，升阳止泻。

陈皮：本品为芸香科植物橘及其栽培变种的干燥成熟的果皮；味辛、苦，性温；归脾、肺经；理气健脾，燥湿化痰。

茺蔚子：本品为唇形科植物益母草的干燥成熟果实；味辛、苦，性微寒；归心包、肝经；活血调经，清肝明目。

蒲公英：本品为菊科植物蒲公英、碱地蒲公英或同属数种植物的干燥全草；苦、甘，性寒；归肝、胃经；清热解毒，消肿散结，利尿通淋。

与现有技术相比，本发明具有如下技术优势：

1、本发明药物组合物与其他治疗眼病的药物相比，在清热解毒、滋补肝肾，益精明目方面，具有更显著的的功效；

2、与当前治疗眼病的化学治疗药物相比，本发明药物组合物为天然纯中药制剂，不良反应和副作用显著降低，且本发明药物组合物作用全面，药物治疗效果更佳；

3、本发明药物组合物还具有配伍科学、制备工艺简单、疗效好、副作用低、不易复发和易于推广应用等优点。

附图说明

图1是本发明制剂的制备原理结构示意图。

图2是图1中复合菌液制备原理结构示意图。

图3是图2中培养液制备的方框结构示意图。

具体实施方式

本领域技术人员应理解，以下实施例中所公开的技术代表本发明人发现的在本发明的实践中发挥良好作用的技术。然而，在所公开的具体实施方案中可以做出许多改变，并仍然获得相同或相似的结果，而不脱离本发明的精神和范围。

请参见图1，图1揭示了一种用于治疗眼病的制剂制备方法，包含下述步骤；

（100）、按如下重量组份取原料药：

丹参9-15份、川芎3-9份、熊胆1-2份、白术6-12份、冬虫夏草3-9份、枸杞子6-12份、牛黄1-2份、白茅根9-30份、茯苓9-15份、泽兰6-12份、赤芍6-12份、黄芩3-9份、石斛6-12份、熟地9-15份、当归6-12份、黄芪6-15份、车前子9-15份、葛根9-15份、陈皮3-10份、茺蔚子5-9份和蒲公英9-15份。

（200）、煎煮原料药；

在煎煮上述原料药之前，对上述原料药进行清除杂质和分离、去除非药用部位，再浸泡、淘洗原料药，必要时适当地切碎或粉碎；

对上述原料药加入重量为原料药8-10倍量的水，煎煮1-3小时，得到原料煎液。

（300）、过滤；

对原料煎液过滤除杂，通常使用的过滤方式是板框过滤或离心过滤，得到药物混合液。板框过滤的设备是板框过滤机，其工作原理是利用浮液用泵送入滤机的每个密闭的滤室，在工作压力的作用下，滤液透过滤膜或其它滤材，经出液口排出，滤渣则留在框内形成滤饼，从而达到固液分离目的。其中滤板采用螺纹网状结构，可根据不同过滤介质和生产工艺的要求，更换不同滤材。还可以根据过滤量的大小，相应减少或增加过滤层数，使之适合生产需要。

离心过滤方式的设备是过滤离心机，其工作原理是，在过滤离心机转鼓壁上有许多孔，转鼓内表面覆盖过滤介质。加入转鼓的悬浮液随转鼓一同旋转产生巨大的离心压力，在压力作用下悬浮液中的液体流经过滤介质和转鼓壁上的孔甩出，固体被截留在过滤介质表面，从而实现固体与液体的分离。悬浮液在转鼓中产生的离心力为重力的千百倍，使过滤过程得以强化，加快过滤速度，获得含湿量较低的滤渣。固体颗粒大于0.01毫米的悬浮液一般可用过滤离心机过滤。

除了板框过滤机和过滤离心机，还可以采用硅藻土过滤机。硅藻土过滤机的结构是，在过滤机内，自下而上水平放置不锈钢过滤圆盘，圆盘的上层是不锈钢滤网，下层是不锈钢支撑板，中间是液体收集腔。工作原理是，过滤时，先进行硅藻土预涂，使盘上形成一层硅藻土涂层，待过滤液体，在泵压力作用下，通过预涂层而进入收集腔内，颗粒及高分子被截流在预涂层，进入收集腔内的澄清液体，通过中心轴，流出容器。

（400）、发酵；

（410）将药物混合液装入发酵罐中，升温至121摄氏度进行高温灭菌，灭菌时间为5-10分钟，冷却至25-28摄氏度；

（420）在冷却后的药物混合液中按1:0.05-0.3的重量组份比例加入复合菌液，混合均匀，得到混合药液；

（430）在25-28摄氏度的条件下，发酵罐内保持正压，连续或间歇搅拌，连续地向发酵罐内通入无菌空气的情况下，发酵5-10小时，得到发酵液。

（500）、破壁处理；

对过滤后的发酵液使用超声波细胞破碎仪进行破壁处理，每次超声1-3s,间隔1-3s,共超声40-50次。

超声波细胞破碎仪的工作原理是将电能通过换能器转换为声能，这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡，这些小气泡迅速炸裂，产生的象小炸弹一样的能量，从而起到破碎细胞等物质的作用。超声波细胞破碎仪包括超声波发生器，信号发生器的作用是产生一个特定频率的信号，这个特定频率就是换能器的频率，一般应用在超声波设备中的超声波频率为20KHz、25KHz、28KHz、33KHz、40KHz、60KHz；换能器组件，换能器组件主要由换能器和变幅杆组成；隔音箱，作用是可以有效地的降低工作过程中的所发出的噪音。

除了超声波细胞破碎的方法，还可以使用渗透压冲击法，即将发酵液先置于高渗透压的溶液当中，用于提高发酵液中细胞的体内渗透压，再离心分离菌体，重悬于水中，利用细胞内外渗透压的压差，可释放细胞内的有效成分。

（600）过滤处理；

用过滤离心机对破壁处理后的发酵液高速离心，除去大部分杂质，采用反渗透膜过滤法进行精滤，即得到用于治疗眼病的制剂。

反渗透是一种借助于选择透过性膜的功能以压力为推动力的膜分离技术，当系统中所加的压力大于发酵液渗透压时，发酵液中的分子不断地透过膜，经过流道流入中心管，然后在另一端流出发酵液中的杂质，如离子、病毒等，被截留在膜的进液侧，然后在出液端流出，从而达到分离净化目的。反渗透膜过滤的设备包括精细过滤器、颗粒活性炭过滤器、压缩活性炭过滤器等，发酵液依次经过上述设备，再通过泵加压，利用反渗透膜，使较高浓度的发酵液变为低浓度发酵液，同时将杂质全部隔离，从而达到净化和过滤的效果。

在第（600）步后，还包括以下步骤：

（700）分装；

将制剂按预定包装容量进行分装,制剂为口服剂的，按照注射剂工艺要求，灌封于安瓿或易拉盖瓶中，通常是每瓶10毫升，灭菌后即可服用。

其中，在步骤（420）中，所述复合菌液的制备方法步骤如下（如图2和图3）：

（1）、培养液的制备，取重量份的麦芽粉20-30份，淀粉60-80份，按下述方法处理：

（11）、淀粉糊化，将淀粉与水按1：2-3重量份的比例放入糊化锅，升温至90-100摄氏度，在不断搅拌的情况下，直至淀粉成糊状，再用20-25摄氏度的水将糊化好的浆料的温度调到68-73摄氏度；

（12）、将麦芽粉放入糖化锅内，将（11）步制好的浆料移到糖化锅内，在搅拌的情况下，使麦芽粉与浆料充分混合，然后，静置，并保持温度在64-66摄氏度范围内，4-6小时，直到淀粉完全被糖化；在糖化过程中可以用碘作检测，如果碘检测不出现碘与淀粉的反应，则说明糖化过程结束，可以进行下一步动作；

（13）、将糖化好的糖化汁移入煮沸锅内，升温至100摄氏度，煮沸5-10分钟；

（14）、将煮沸锅内的糖化汁抽入旋涡分离器，在旋涡分离器内实现固液分离，被分离后的糖化汁进入发酵罐内；

（15）、在发酵罐内将温度升至121摄氏度，维持1小时，达到消灭杂菌的效果，然后，用无菌空气保持发酵罐内正压时，将被分离后的糖化汁冷却至25-28摄氏度；

（2）、接种；

按被分离后的糖化汁的总重量的3-10%接入混合菌种，其中，混合菌种由重量相等的黑根霉、黑曲霉、红曲霉、白地霉和米酒酵母组成；

（3）、发酵；

在25-28摄氏度，保持发酵罐内正压，连续或间歇搅拌，且连续地向被分离后的糖化汁通入无菌空气的情况下，发酵5-10小时，得到发酵液。

优选的，在所述第（3）步之后，还可以包括如下步骤，

（4）、过滤；

用过滤器将发酵液中的固态物滤除，得到复合菌液。

优选的，所述混合菌种是按如下方法制备的：

（21）、将黑根霉按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得黑根霉种液；

（22）、将黑曲霉按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得黑曲霉种液；

（23）、将红曲霉按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得红曲霉种液；

（24）、将白地霉按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得白地霉种液；

（25）将米酒酵母按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得米酒酵母种液；

（26），将上述制备的黑根霉种液、黑曲霉种液、红曲霉种液、白地霉种液和米酒酵母种液，按等重量混合，即得混合菌种。

制备菌种的麦芽汁是直接用麦芽，按麦芽与水的比例，重量份1：3-5调匀后，在64-66摄氏度范围内，糖化4-6小时得到，高压灭菌（1个大气压，121摄氏度，60分钟）后，冷却得到。

上述黑根霉菌种、黑曲霉菌种、红曲霉菌种和白地霉菌种，均从中国微生物菌种保藏管理委员会武汉大学保藏中心获得；米酒酵母菌种从市面上购得。

优选的，所述淀粉可以大米粉，尤其是应用米厂扎米时剩下的碎米，磨成粉为最佳；小麦粉可以包含麦麸在内；红薯粉可以用红薯制作，马铃薯粉是用马铃薯制作的。本发明中，也可以采用大米粉、小麦粉、红薯粉和马铃薯粉中的任意两种以上的组合物。本明中的大米粉、小麦粉、红薯粉和马铃薯粉最好是磨成100目以上的细粉。

制备培养液的具体实施方式如下：

实施例一

培养液的制备包括以下重量份数的原料：

麦芽粉20份，淀粉60份，按下述方法处理，

（201）、淀粉糊化，将淀粉与水按1：2-3重量份的比例放入糊化锅，升温至90-100摄氏度，在不断搅拌的情况下，直至淀粉成糊状，再用20-25摄氏度的水将糊化好的浆料的温度调到68-73摄氏度；

（202）、将麦芽粉放入糖化锅内，将（11）步制好的浆料移到糖化锅内，在搅拌的情况下，使麦芽粉与浆料充分混合，然后，静置，并保持温度在64-66摄氏度范围内，4-6小时，直到淀粉完全被糖化；在糖化过程中可以用碘作检测，如果碘检测不出现碘与淀粉的反应，则说明糖化过程结束，可以进行下一步动作；

（203）、将糖化好的糖化汁移入煮沸锅内，升温至100摄氏度，煮沸5-10分钟；

（204）、将煮沸锅内的糖化汁抽入旋涡分离器，在旋涡分离器内实现固液分离，被分离后的糖化汁进入发酵罐内；

（205）、在发酵罐内将温度升至121摄氏度，维持1小时，达到消灭杂菌的效果，然后，用无菌空气保持发酵罐内正压时，将被分离后的糖化汁冷却至25-28摄氏度，得到培养液。

实施例二

培养液的制备包括以下重量份数的原料：

麦芽粉25份，淀粉65份，按下述方法处理；

（201）、淀粉糊化，将淀粉与水按1：2-3重量份的比例放入糊化锅，升温至90-100摄氏度，在不断搅拌的情况下，直至淀粉成糊状，再用20-25摄氏度的水将糊化好的浆料的温度调到68-73摄氏度；

（202）、将麦芽粉放入糖化锅内，将（11）步制好的浆料移到糖化锅内，在搅拌的情况下，使麦芽粉与浆料充分混合，然后，静置，并保持温度在64-66摄氏度范围内，4-6小时，直到淀粉完全被糖化；在糖化过程中可以用碘作检测，如果碘检测不出现碘与淀粉的反应，则说明糖化过程结束，可以进行下一步动作；

（203）、将糖化好的糖化汁移入煮沸锅内，升温至100摄氏度，煮沸5-10分钟；

（204）、将煮沸锅内的糖化汁抽入旋涡分离器，在旋涡分离器内实现固液分离，被分离后的糖化汁进入发酵罐内；

（205）、在发酵罐内将温度升至121摄氏度，维持1小时，达到消灭杂菌的效果，然后，用无菌空气保持发酵罐内正压时，将被分离后的糖化汁冷却至25-28摄氏度，得到培养液。

实施例三

培养液的制备包括以下重量份数的原料：

麦芽粉30份，淀粉70份，按下述方法处理；

（201）、淀粉糊化，将淀粉与水按1：2-3重量份的比例放入糊化锅，升温至90-100摄氏度，在不断搅拌的情况下，直至淀粉成糊状，再用20-25摄氏度的水将糊化好的浆料的温度调到68-73摄氏度；

（202）、将麦芽粉放入糖化锅内，将（11）步制好的浆料移到糖化锅内，在搅拌的情况下，使麦芽粉与浆料充分混合，然后，静置，并保持温度在64-66摄氏度范围内，4-6小时，直到淀粉完全被糖化；在糖化过程中可以用碘作检测，如果碘检测不出现碘与淀粉的反应，则说明糖化过程结束，可以进行下一步动作；

（203）、将糖化好的糖化汁移入煮沸锅内，升温至100摄氏度，煮沸5-10分钟；

（204）、将煮沸锅内的糖化汁抽入旋涡分离器，在旋涡分离器内实现固液分离，被分离后的糖化汁进入发酵罐内；

（205）、在发酵罐内将温度升至121摄氏度，维持1小时，达到消灭杂菌的效果，然后，用无菌空气保持发酵罐内正压时，将被分离后的糖化汁冷却至25-28摄氏度，得到培养液。

实施例四

培养液的制备包括以下重量份数的原料：

麦芽粉25份，淀粉75份，按下述方法处理；

（201）、淀粉糊化，将淀粉与水按1：2-3重量份的比例放入糊化锅，升温至90-100摄氏度，在不断搅拌的情况下，直至淀粉成糊状，再用20-25摄氏度的水将糊化好的浆料的温度调到68-73摄氏度；

（202）、将麦芽粉放入糖化锅内，将（11）步制好的浆料移到糖化锅内，在搅拌的情况下，使麦芽粉与浆料充分混合，然后，静置，并保持温度在64-66摄氏度范围内，4-6小时，直到淀粉完全被糖化；在糖化过程中可以用碘作检测，如果碘检测不出现碘与淀粉的反应，则说明糖化过程结束，可以进行下一步动作；

（203）、将糖化好的糖化汁移入煮沸锅内，升温至100摄氏度，煮沸5-10分钟；

（204）、将煮沸锅内的糖化汁抽入旋涡分离器，在旋涡分离器内实现固液分离，被分离后的糖化汁进入发酵罐内；

（205）、在发酵罐内将温度升至121摄氏度，维持1小时，达到消灭杂菌的效果，然后，用无菌空气保持发酵罐内正压时，将被分离后的糖化汁冷却至25-28摄氏度，得到培养液。

实施例五

培养液的制备包括以下重量份数的原料：

麦芽粉30份，淀粉80份，按下述方法处理；

（201）、淀粉糊化，将淀粉与水按1：2-3重量份的比例放入糊化锅，升温至90-100摄氏度，在不断搅拌的情况下，直至淀粉成糊状，再用20-25摄氏度的水将糊化好的浆料的温度调到68-73摄氏度；

（202）、将麦芽粉放入糖化锅内，将（11）步制好的浆料移到糖化锅内，在搅拌的情况下，使麦芽粉与浆料充分混合，然后，静置，并保持温度在64-66摄氏度范围内，4-6小时，直到淀粉完全被糖化；在糖化过程中可以用碘作检测，如果碘检测不出现碘与淀粉的反应，则说明糖化过程结束，可以进行下一步动作；

（203）、将糖化好的糖化汁移入煮沸锅内，升温至100摄氏度，煮沸5-10分钟；

（204）、将煮沸锅内的糖化汁抽入旋涡分离器，在旋涡分离器内实现固液分离，被分离后的糖化汁进入发酵罐内；

（205）、在发酵罐内将温度升至121摄氏度，维持1小时，达到消灭杂菌的效果，然后，用无菌空气保持发酵罐内正压时，将被分离后的糖化汁冷却至25-28摄氏度，得到培养液。

（4）、二次发酵；

（41）将药物混合液装入二次发酵罐中，高温灭菌，冷却至25-28摄氏度；

（42）将复合菌液15份加入到药物混合液中，混合均匀；

（43）将培养液加入二次发酵罐中，混合均匀，在25-28摄氏度的条件下，二次发酵罐内保持正压，连续或间歇搅拌，连续地向发酵罐内通入无菌空气的情况下，发酵5-10小时，得到二次发酵液。

本发明还公开了一种用于治疗眼病的制剂，该制剂是用上述方法制备得到的。

该制剂的原料重量份数的具体实施方式如下；

实施例1：

本发明实施例1包括以下重量份数的原料：丹参9份、川芎3份、熊胆1份、白术6份、冬虫夏草3份、枸杞子6份、牛黄1份、白茅根9份、茯苓9份、泽兰6份、赤芍6份、黄芩3份、石斛6份、熟地9份、当归6份、黄芪6份、车前子9份、葛根9份、陈皮3份、茺蔚子5份和蒲公英9份。

实施例2：

本发明实施例2包括以下重量份数的原料：丹参10份、川芎4份、熊胆份、白术7份、冬虫夏草4份、枸杞子7份、牛黄1份、白茅根15份、茯苓10份、泽兰7份、赤芍7份、黄芩5份、石斛7份、熟地11份、当归8份、黄芪7份、车前子10份、葛根11份、陈皮4份、茺蔚子5份和蒲公英10份。

实施例3：

本发明实施例3包括以下重量份数的原料：丹参11份、川芎5份、熊胆1份、白术8份、冬虫夏草5份、枸杞子8份、牛黄1份、白茅根20份、茯苓10份、泽兰7份、赤芍8份、黄芩6份、石斛8份、熟地11份、当归8份、黄芪7份、车前子10份、葛根12份、陈皮5份、茺蔚子6份和蒲公英11份。

实施例4：

本发明实施例4包括以下重量份数的原料：丹参12份、川芎6份、熊胆1份、白术9份、冬虫夏草6份、枸杞子9份、牛黄1份、白茅根22份、茯苓12份、泽兰8份、赤芍9份、黄芩7份、石斛9份、熟地12份、当归9份、黄芪9份、车前子11份、葛根13份、陈皮6份、茺蔚子7份和蒲公英12份。

实施例5：

本发明实施例5包括以下重量份数的原料：丹参13份、川芎7份、熊胆2份、白术9份、冬虫夏草7份、枸杞子10份、牛黄2份、白茅根25份、茯苓13份、泽兰9份、赤芍10份、黄芩8份、石斛10份、熟地13份、当归10份、黄芪10份、车前子12份、葛根14份、陈皮7份、茺蔚子8份和蒲公英13份。

实施例6：

本发明实施例6包括以下重量份数的原料：丹参14份、川芎8份、熊胆2份、白术10份、冬虫夏草8份、枸杞子10份、牛黄2份、白茅根25份、茯苓14份、泽兰11份、赤芍10份、黄芩8份、石斛10份、熟地14份、当归11份、黄芪12份、车前子13份、葛根14份、陈皮8份、茺蔚子8份和蒲公英14份。

实施例7：

本发明实施例7包括以下重量份数的原料：丹参15份、川芎9份、熊胆2份、白术12份、冬虫夏草9份、枸杞子12份、牛黄2份、白茅根30份、茯苓15份、泽兰12份、赤芍12份、黄芩9份、石斛12份、熟地15份、当归12份、黄芪15份、车前子15份、葛根15份、陈皮10份、茺蔚子9份和蒲公英15份。

临床疗效观察

本发明的组合物所制成的制剂，经测试，与对照样品1、对照样品2相比较，如下表所示：

志愿者的挑选：

1、挑选160名萎缩型黄斑变性患者，其中男性80名，女性80名，年龄最大75岁，最小49岁。将160名萎缩型黄斑变性患者随机分成八组，每组20人，每组对应分别饮用对照样品1、对照样品2、实施例1样品、实施例2样品、实施例3样品、实施例4样品、实施例5样品、实施例6样品及其实施例7样品制成的口服液。

2、挑选160名渗出型黄斑变性患者，其中男性80名，女性80名，年龄最大76岁，最小45岁。将160名渗出型黄斑变性患者随机分成八组，每组20人，每组对应分别饮用对照样品1、对照样品2、实施例1样品、实施例2样品、实施例3样品、实施例4样品、实施例5样品、实施例6样品及其实施例7样品制成的口服液。其中，对照品1是止血祛瘀明目片（国药准字Z20025316，陕西摩美得制药有限公司生产），对照品2是博士伦博士康牌叶黄素片（国食健字J20070004，德国博士曼大药厂生产）。

口服的用量：

实施例样品：每人每日2次，每次1瓶（10ml），疗程为一周。

对照品1和对照品2：每人每日2次，每次1粒，疗程为一周。

疗效标准：

（1）有效：视力提高两行或以上；

（2）效果不明显：视力提高一行或保持稳定或视力下降。

治疗效果的分析：

由上表可知，萎缩型黄斑变性患者中，使用本发明中的口服液的，有效率均达到85%以上，即有85%的患者症状得到明显改善；而使用对照样品1和对照样品2的患者，有效率为30%和40%，其他人使用后效果均不明显；同样地，对于渗出型黄斑变性患者，使用本发明中的口服液的，有效率也达到85%以上，即有85%的患者症状得到明显改善；而使用对照样品1和对照样品2的患者，有效率均为50%和35%，其他人使用后效果均不明显。

由此可知，相对于对照样品1和对照样品2而言，本发明中的口服液对于萎缩型黄斑变性患者和渗出型黄斑变性患者的病情具有非常明显的改善效果。

特别地，本发明中的口服液对于渗出型黄斑变性患者而言，治疗效果不仅仅在于视力上的体现，还表现在减少了眼底部的出血面积，证明本发明的口服液在活血化瘀方面具有显著的效果。

由于已经通过以上较佳实施例描述了本发明，在本发明的精神和/或范围内，任何针对本发明的替换/或组合来实施本发明，对于本领域的技术人员来说都是显而易见的，且包含在本发明之中。

Claims (9)

1.一种用于治疗眼病的制剂制备方法，其特征在于，其步骤如下（100）、按如下重量组份取原料药：

丹参9-15份、川芎3-9份、熊胆1-2份、白术6-12份、冬虫夏草3-9份、枸杞子6-12份、牛黄1-2份、白茅根9-30份、茯苓9-15份、泽兰6-12份、赤芍6-12份、黄芩3-9份、石斛6-12份、熟地9-15份、当归6-12份、黄芪6-15份、车前子9-15份、葛根9-15份、陈皮3-10份、茺蔚子5-9份和蒲公英9-15份；

（200）、煎煮原料药；

对上述原料药加入重量为原料药8-10倍量的水，煎煮1-3小时，得到原料煎液；

（300）、过滤；

对原料煎液进行过滤除杂，得到药物混合液；

（400）、发酵；

（410）将药物混合液装入发酵罐中，升温至121摄氏度进行高温灭菌，灭菌时间为5-10分钟，冷却至25-28摄氏度；

（420）在冷却后的药物混合液中按1:0.05-0.3的重量组份比例加入复合菌液，混合均匀，得到混合药液；

（430）在25-28摄氏度的条件下，发酵罐内保持正压，连续或间歇搅拌，连续地向发酵罐内通入无菌空气的情况下，发酵5-10小时，得到发酵液；

（500）、破壁处理；

对过滤后的发酵液使用超声波细胞破碎仪进行破壁处理，每次超声1-3s,间隔1-3s,共超声40-50次；

（600）过滤处理；

用过滤离心机对破壁处理后的发酵液高速离心，除去大部分杂质，采用反渗透膜过滤法进行精滤，即得到用于治疗眼病的制剂。

2.根据权利要求1所述的用于治疗眼病的制剂制备方法，其特征在于，在步骤（420）中，所述复合菌液的制备方法步骤如下；

（1）、培养液的制备，取重量份的麦芽粉20-30份，淀粉60-80份，按下述方法处理；

（11）、淀粉糊化，将淀粉与水按1：2-3重量份的比例放入糊化锅，升温至90-100摄氏度，在不断搅拌的情况下，直至淀粉成糊状，再用20-25摄氏度的水将糊化好的浆料的温度调到68-73摄氏度；

（12）、将麦芽粉放入糖化锅内，将（11）步制好的浆料移到糖化锅内，在搅拌的情况下，使麦芽粉与浆料充分混合，然后，静置，并保持温度在64-66摄氏度范围内，4-6小时，直到淀粉完全被糖化；

（13）、将糖化好的糖化汁移入煮沸锅内，升温至100摄氏度，煮沸5-10分钟；

（14）、将煮沸锅内的糖化汁抽入旋涡分离器，分离出固相物质，被分离后的糖化汁进入发酵罐内；

（15）、在发酵罐内将温度升至121摄氏度，维持1小时，然后，用无菌空气保持发酵罐内正压时，将被分离后的糖化汁冷却至25-28摄氏度；

（2）、接种；

按被分离后的糖化汁的总重量的3-10%接入混合菌种，其中，混合菌种由重量相等的黑根霉、黑曲霉、红曲霉、白地霉和米酒酵母组成；

（3）、发酵；

在25-28摄氏度，发酵罐内保持正压，连续或间歇搅拌，连续地向被分离后的糖化汁通入无菌空气的情况下，发酵5-10小时，得到复合菌液。

3.根据权利要求1或2所述的用于治疗眼病的制剂制备方法，其特征在于，在步骤（100）中，按如下重量组分取原料药；

丹参10-14份、川芎4-8份、熊胆1-2份、白术7-10份、冬虫夏草4-8份、枸杞子7-10份、牛黄1-2份、白茅根15-25份、茯苓10-14份、泽兰7-11份、赤芍7-10份、黄芩5-8份、石斛7-10份、熟地11-14份、当归8-11份、黄芪7-12份、车前子10-13份、葛根11-14份、陈皮4-8份、茺蔚子5-8份和蒲公英10-14份。

4.根据权利要求1或2所述的用于治疗眼病的制剂制备方法，其特征在于，在步骤（100）中，按如下重量组分取原料药；

丹参11-13份、川芎5-7份、熊胆1-2份、白术8-9份、冬虫夏草5-7份、枸杞子8-10份、牛黄1-2份、白茅根20-25份、茯苓10-13份、泽兰7-9份、赤芍8-10份、黄芩6-8份、石斛8-10份、熟地11-13份、当归8-10份、黄芪7-10份、车前子10-12份、葛根12-14份、陈皮5-7份、茺蔚子6-8份和蒲公英11-13份。

5.根据权利要求1或2所述的用于治疗眼病的制剂制备方法，其特征在于，在步骤（100）中，按如下重量组分取原料药；

丹参12份、川芎6份、熊胆1份、白术9份、冬虫夏草6份、枸杞子9份、牛黄1份、白茅根22份、茯苓12份、泽兰8份、赤芍9份、黄芩7份、石斛9份、熟地12份、当归9份、黄芪9份、车前子11份、葛根13份、陈皮6份、茺蔚子7份和蒲公英12份。

6.根据权利要求2所述的用于治疗眼病的制剂制备方法，其特征在于，在步骤（2）中，所述混合菌种的制备方法的步骤如下；

（21）、将黑根霉按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得黑根霉种液；

（22）、将黑曲霉按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得黑曲霉种液；

（23）、将红曲霉按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得红曲霉种液；

（24）、将白地霉按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得白地霉种液；

（25）将米酒酵母按麦芽汁重量的3-5%接入装有麦芽汁的三角瓶内，放在摇床上，在25-28摄氏度，培养5-7小时，即得米酒酵母种液；

（26），将上述制备的黑根霉种液、黑曲霉种液、红曲霉种液、白地霉种液和米酒酵母种液，按等重量混合，即得混合菌种。

7.根据权利要求2所述的用于治疗眼病的制剂制备方法，其特征在于，在步骤（1）中的所述淀粉可以是大米粉、小麦粉、红薯粉或马铃薯粉，或者是大米粉、小麦粉、红薯粉和马铃薯粉中的任意两种以上的组合物。

8.根据权利要求1或2所述的用于治疗眼病的制剂制备方法，其特征在于，在第（600）步后，还包括以下步骤：

（700）分装；

将制剂按预定包装容量进行分装。

9.一种用于治疗眼病的制剂，其特征在于，用权利要求1-8中任何一项权利要求所述的方法制备的制剂。