CN105339346B - Neoseptin：小分子佐剂 - Google Patents

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Abstract

本文公开了MD‑2:TLR4复合物激动剂化合物，其结构对应于其中所定义的式I：

Description

NEOSEPTIN：小分子佐剂
政府支持
本发明是在根据来自国家卫生研究院/国家过敏和感染性疾病研究院(NationalInstitutes of Health/National Institute of Allergy and Infectious Diseases)的资助AI082657的政府支持下进行的。政府对本发明享有某些权利。
技术领域
本发明考虑了小分子佐剂化合物，和尤其是一组定义明确的化合物，其在巨噬细胞制备物中诱导TNF-α分泌并因此模拟LPS的一些性质而无LPS所显示的结构多样性或毒性。
背景技术
天然免疫系统是对抗感染的第一道防线并被认为主要由吞噬性免疫细胞(例如巨噬细胞和树突细胞)介导。这些细胞经由有限数量的种系编码的模式识别受体(PRR)识别微生物，所述受体识别被称为病原体相关分子模式的微生物组分，所述组分是微生物生存所必需的，并且因此对于微生物而言难以改变所述组分。
若干类别的PRR，包括位于细胞表面的Toll-样受体(TLR)和胞质受体，识别不同的微生物组分并直接活化免疫细胞，触发胞内信号转导级联，其快速诱导多种炎性细胞因子的表达，此类细胞因子启动多种重叠的免疫应答。一种最著名的PRR是TLR4，其识别主要的革兰氏阴性菌表面组分脂多糖(LPS) [Akira等人, Cell124:783–801 (2006)]。另见，Beutler, Blood, 113:1399-1407 (2009)，和Moresco等人, Curr. Biol. 21(13):R488-93, (2011)和其中的在发现TLR和确定TLR功能中进行的研究的历史展望的引用。
大多数TLR是功能性多聚物。一些是异聚物。一些看来是同聚物，并且在某些情况下，非TLR亚基是信号转导复合物的一部分。例如，TLR4看来不能直接检测LPS，但仅作为与MD-2的复合物，MD-2是与TLR4胞外域紧密相关的小的分泌蛋白。晶体学分析已经显示出特定TLR配体和Toll-样受体之间的相互作用的性质，包括LPS和MD-2:TLR4复合物之间的相互作用的性质。Beutler, Blood113:1399-1407 (2009)。
对单核细胞、巨噬细胞和树突细胞中的TLR4信号转导的研究已经揭示出LPS对MD-2:TLR4复合物(为便于表达，以下仅称为“TLR4”)的结合触发了信号转导级联，其涉及若干胞质内和核转录因子。TLR4活化首先结合一组适配器家族成员，其将TLR4连接到丝氨酸/苏氨酸激酶。这些激酶介导多种底物的磷酸化和遍在蛋白化，最终导致转录因子NF-κB的活化，NF-κB调节若干免疫调节性细胞因子的表达[Kawai等人, Cell Death Differ13:816–825 (2006)]。
弗氏佐剂(在矿物油或植物油中的分枝杆菌)、氢氧化铝(“明矾”)和LPS (脂多糖)已经用于增强针对共同给予的蛋白质的抗体反应。在美国，仅明矾被批准用于人用疫苗。
在这些佐剂中，仅LPS及其衍生的脂质A具有定义明确的靶--TLR4，但这些TLR4配体的毒性值得考虑，因为它们在体内的不稳定性和它们不容易与抗原缀合。
在提供用于合成的“非天然”佐剂发现的有力范例的工作中，我们鉴定了一类新的稳健的小分子佐剂，其：(1)从筛选α-螺旋模拟文库中产生，(2)通过定义明确的机制(TLR4激动剂)起作用，(3)容易生产和进行结构操作，(4)无毒，和(5)即使与LPS共享相同受体，引发与LPS相比改进的和性质上不同的反应。这样的佐剂可用于针对对基于抗体的保护性免疫接种敏感的任何微生物的共同给予或共价连接的疫苗接种。
发明简述
本发明考虑了TLR4受体激动剂化合物，其不表现出LPS毒性，同时表现出许多类似的细胞信号转导途径的活化。所考虑的化合物在结构上对应于下式I，或其药学上可接受的盐，
其中X是O、S、NR1、CH2，其中R1是H或C1-C4烃基，或X不存在和两个原子连接所示苯环。Y是O、S、NR2、CH2，其中R2是H或C1-C4烃基。R3是C1-C6烃基。R4和R5是氢(hydrido)或羟基，但是R4和R5中仅有一个是氢，或R4和R5两者都是羟基。W是环结构，其含有一个或两个环并在环结构中包含5-12个原子。该环结构W任选地包含：a) 1、2、3或4个杂原子，其独立地是氧、氮或硫，和b) 与一个或多个环原子键合的一个或多个取代基，其中所述一个或多个取代基含有总共至多8个原子，其选自氟、氯、碳、氮、氧和硫及其混合物。虚线(----)代表一个或多个任选的双键。
在对于式I化合物的单独的优选中，a) X不存在或是O；b) Y是CH2；c) 环结构W在环结构中含有至多10个原子；和d) W是单环结构。
一种优选的式I化合物是下式II化合物、其药学上可接受的盐。在式II中，环系W的A、B、E、G、L和M是碳(C)或氮(N)，
其中A、B、E、G、L和M中不超过3个是氮。另外，环系W任选地含有与一个或多个环原子键合的一个或多个取代基，其中所述一个或多个取代基含有总共至多8个原子，其选自氟、氯、碳、氮、氧和硫及其混合物。X是O、S、NR1、CH2，其中R1是H，或C1-C4烃基，或X不存在和两个原子连接所示苯环。R3是C1-C6烃基。
在对于式II化合物的另外的单独的优选中，a) A、B、E、G、L和M中不超过2个是氮；X不存在或是O；b) R3是含有4-6个碳原子的大的烃基；和c) 环结构W含有选自叠氮基、氟代、甲基、甲氧基和三氟甲基的取代基，并且所述取代基位于自与该分子剩余部分连接位置开始计数的6-元环的4位和5-元环的3位上。
特别优选的式II化合物和盐是下式III或式IV化合物的化合物和药学上可接受的盐，其中A、B、E、G、L和M是碳(C)或氮(N)原子，
其中A、B、E、G、L和M中不超过2个是氮，和R3是含有4-6个碳原子的大的烃基。在式III和式IV化合物中，R3优选地是叔丁基、新戊基、环戊基或环己基，和单独地，W优选地是苯基。
特别优选的式III和式IV化合物示于以下并且分别称为neoseptin-3和neoseptin-4。
Neoseptin-3 Neoseptin-4
也考虑了药物组合物，其含有溶于或分散于生理学上可接受的载体中的有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。
也考虑了改良的接种方法。在此，使需要接种的哺乳动物细胞与免疫组合物接触，所述组合物包含有效量的免疫原和有效量的佐剂。该方法中的改进包括使用式I化合物或药学上可接受的化合物的盐作为佐剂。
附图简述
在构成本公开内容的一部分的附图中，
图1在图1A和图1B两部分中，是柱状图，显示使用5 ng/ml LPS或50 mMneoseptin-3，在来自含有TLR和下游信号转导蛋白的编码基因的失能种系突变或敲除的小鼠的巨噬细胞中的标准化的TNF-α产生的测定法。
图2是一幅图，比较了neosepin-3和LPS的活性并显示了neoseptin-3更有效得多地刺激I型干扰素反应，导致INF-β(但不是INF-α)的释放，表明其用作佐剂的潜在优势。
图3，在图3A和图3B两个图面中，是表明neoseptin-3的佐剂作用的ELIZA结果的图。在图3A中，将佐剂与卵白蛋白(OVA, 100 μg)混合并以指定剂量经肌内注射入C57BL/6J小鼠。给予两次免疫接种，在第7天给予强化剂量。在图3B中，将LPS (0.2 mg/kg)、neoseptin-3 (250 mg/kg)或来自明尼苏达沙门氏菌R595(Salmonella minnesota R595(MPLA))的单磷酰脂质A (0.2 mg/kg)与卵白蛋白(OVA, 0、1、10和100 μg)混合。在免疫接种后指定天数时测定(ELISA) OVA-特异性IgG的血清水平。
图4是一幅图，其柱表明不同的潜在TLR-4激动剂在小鼠腹膜巨噬细胞激动剂测定法中对TNF-α (pg/mL)的刺激，所述激动剂包括LPS (5 ng/mL)、neoseptin-3及其若干种类似物，所述类似物在羧基上用不同基团取代，正如其字母数字标识符所标识的那样，并且在测定法中以50 μM存在。
图5是类似于图4的图，其中柱代表LPS (5 ng/mL)、neoseptin-3 (两倍)和其它neoseptin-3类似物(50 μM)，所述类似物在α-碳原子上用不同取代基取代，正如其字母数字标识符所标识的那样。
图6是类似于图4的图，其中柱代表LPS (5 ng/mL)、neoseptin-4、neoseptin-3和其它neoseptin-3类似物(50 μM)，所述类似物在酚和苯胺环部分之间用不同连接基团取代，正如其字母数字标识符所标识的那样。
图7是类似于图4的图，其中柱代表LPS (5 ng/mL)、neoseptin-3和其它neoseptin-3类似物(50 μM)，其苯胺环氨基存在于不同位置上，有和无进一步的氮键合的取代基，正如其字母数字标识符所标识的那样。
图8是类似于图4的图，其中柱代表LPS (5 ng/mL)、neoseptin-3和其它neoseptin-3类似物(50 μM)，其酚环羟基存在于不同位置上，正如其字母数字标识符所标识的那样。
图9是类似于图3的图，显示在使用佐剂和卵白蛋白(OVA, 100 μg)并经肌内注射入C57BL/6J小鼠的免疫接种后14天的抗卵白蛋白滴度。所用的佐剂是所示量的neoseptin-3、LPS、MPLA和明矾。
图10显示20 μM neoseptin-3与350 μM MD-2结合的等温滴定量热研究结果。neoseptin-3结合到MD-2的Kd是11.7 μM，而MPLA结合到MD-2的Kd是14.4 μM。
图11，在图11A、11-B和11–C的3个图面中，提供了本发明的特别优选的实施方案的结构式，其中图11A显示这样的实施方案的一个式子，该式被通过酰胺键的一条线分开，所述线终止于指向11B和11C的箭头，所述图11B和图11C提供迄今为止对于由图11A的结构式内的化合物所包括的优选实施方案测定的结构活性关系。
本发明具有若干益处和优势。一个益处在于替代定义不明确的弗氏佐剂或明矾(氢氧化铝)和有毒LPS的在分子上定义明确和容易进行结构操作的佐剂的发现是主要进展。
一个优势是所开发的佐剂可用于预防感染所致的早产儿死亡。所公开的小分子例如neoseptin-3是比天然配体(LPS或脂质A)更有前途的佐剂候选物，更容易生产和进行结构操作，并且它们毒性更小，即使当它们共享相同受体(TLR4)也引发与LPS或脂质A相比改进的和性质上不同的反应。
定义
在本发明和所附权利要求书的上下文中，以下术语具有以下含义：
冠词“一个”和“一种”在本文中用于指一个(种)或不止一个(种)(即至少一个(种))该冠词的语法上的对象。举例而言，“一个(种)要素”意指一个(种)要素或不止一个(种)要素。
措词“抗原”在历史上用于指抗体所结合的实体，并且也指诱导抗体产生的实体。更当前的用法将抗原的含义限制为抗体所结合的实体，而措词“免疫原”用于诱导抗体产生的实体。更当前的用法在本文中将沿用。
措词“邻位”、“间位”和“对位”按其通常方式用于描述苯环型化合物，其分别是取代的“1-2”、“1-3”和“1-4”。这些同样措词在本文也用作描述在脂族化合物中的那些相同取代模式的便利物。
措词“烃基”在本文中用做非芳族基团的简写，其包括仅含碳和氢的直链和支链脂族以及脂环族基团。因此，考虑了烷基、烯基和炔基，其中严格地说来也是烃基的芳烃例如苯基和萘基，在本文中称为芳基，如下文讨论的。
当意在特定脂族烃基取代基时，记载了该基团；即C1-C4烷基、甲基或叔丁基。示例性的烃基含有1-4个碳原子、和优选1或2个碳原子的链。
特别优选的烃基是烷基。因此，可通过在本文列举的任何取代基中用“烷基”取代描述词“烃基”，记载普遍的但更优选的取代基。
烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基。合适的烯基的实例包括乙烯基、2-丙烯基、3-丙烯基、1,4-丁二烯基、1-丁烯基、2-丁烯基和3-丁烯基。炔基的实例包括乙炔基、2-丙炔基、1-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基和1-甲基-2-丙炔基。
正如技术人员会理解的，不能存在的取代基例如C1烯基无意包含在措辞“烃基”中，尽管具有两个或更多个碳原子的这类取代基是意图的。
当使用措辞“烃基”时遵循通常的化学后缀命名法，但去除末端的“基”并增加合适后缀的惯例并不总是被遵循，因为导致一个或多个取代基的命名的可能的相似性。因此，烃基醚被称为“烃基氧基(hydrocarbyloxy)”基团，而不是当遵循化学命名法的常规法则时可能更合适的“hydrocarboxy”基团。说明性的烃基氧基基团包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、烯丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。
术语“环结构”在本文中用于指环状取代基，其可含有单环例如咪唑基或苯基，或两个稠环例如在萘基、嘌呤基或萘烷基基团中所存在的那样，或两个连接的环如在联苯基中所存在的那样。
术语“环烃基”或“碳环”，单用或联用，是指含有5至大约12个碳原子、优选地大约5至大约10个碳原子的环状烃基(或环)。这类环烃基的实例包括环丙基、环丁基、环戊烯基、环己基、环庚炔基、1-和2-萘烷基等。
术语“芳基”，单用或联用，是指芳环系。这样的环系包括苯基、萘基和联苯基环系。
杂环基(杂环)是单个5-或6-元环或稠合或连接的5,5-、5,6-、6,6-环系，其在环中含有1-4个杂原子(非碳)，所述杂原子在饱和或部分不饱和环中独立地是氮、氧或硫原子。这类杂环基的实例是吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫杂吗啉基(thiamorpholinyl)、氧杂噻唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、吡唑基、1,2,4-噁二嗪基和吖庚因基和联哌啶基。
“杂芳基”基团是芳族杂环环，其在环中优选地含有1或2或3或4个并非碳的原子。这些杂原子可以独立地是氮、硫或氧。杂芳基可含有单个5-或6-元环或具有两个6-元环或5-和6-元环的稠合环系，或连接的5,5-、5,6-或6,6-元环，如在联吡啶基中那样。示例性的额外杂芳基包括6-元环取代基例如吡啶基、吡嗪基、嘧啶基和哒嗪基；5-元环取代基例如1,3,5-、1,2,4-或1,2,3-三嗪基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、1,2,3-、1,2,4-、1,2,5-或1,3,4-噁二唑基和异噻唑基；6-/5-元稠环取代基例如苯并硫代呋喃基、异苯并硫代呋喃基、苯并异噁唑基、苯并噁唑基、嘌呤基和邻氨基苯甲酸基(anthranilyl)；和6-/6-元稠环例如1,2-、1,4-、2,3-和2,1-苯并吡喃酮基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、喹唑啉基和1,4-苯并噁嗪基。
上述4种环系的每一种都包括在环系W中。这些环系的每一种都可以任选地携带一个或多个取代基，其含有选自氟、氯、碳、氮、氧和硫及其混合物的总共至多8个原子。在所述一个或多个取代基中存在的总原子数中不计氢。
发明详述
本发明考虑了式I化合物或其药学上可接受的盐，含有有效量的这类化合物或其盐的药物组合物，以及使用化合物或其药学上可接受的盐的方法。更具体地讲，所考虑的化合物有时在本文中称为neoseptin并且在结构上对应于下式I。
在式I化合物中，X是O、S、NR1、CH2，其中R1是H，或C1-C4烃基，或X不存在和两个原子连接所示苯环。优选地，X不存在或是O。
Y是O、S、NR2、CH2，其中R2是H，或C1-C4烃基。优选地，Y优选地是CH2。R3是C1-C6烃基。R4和R5是氢或羟基，但R4和R5的至少一个是羟基，或R4和R5两者都是羟基。
W是环结构，其含有一个或两个环并在环结构中包含5-12个原子，和优选地5-10个原子。W可以任选地包含：a)在环结构中的1、2、3或4个杂原子，其独立地是氧、氮或硫，和b)键合到一个或多个环原子的一个或多个取代基，其中所述一个或多个取代基含有总共至多8个原子，和优选地至多6个原子，选自氟、氯、碳、氮、氧和硫及其混合物。优选的取代基包括叠氮基、氟代、甲基、甲氧基和三氟甲基。当W是单环结构时，优选取代基位于自与该分子剩余部分连接位置开始计数的6-元环的4-位和5-元环的3-位。例如，自式I的Y开始计数。
虚线(----)代表一个或多个任选的双键。
环系W优选地是芳族或杂芳族(相比环烃基或杂环基)，使得任选的双键存在。也优选至多3个杂原子存在并且这些杂原子各自是氮。更优选在环系W中有一个或两个氮原子。
广泛地看，说明性的W环系包括环戊烯基、环己基、环庚炔基、环辛基、1-和2-萘烷基、苯基、萘基、联苯基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫杂吗啉基、氧杂噻唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、吡唑基、1,2,4-噁二嗪基、吖庚因基、联吡啶基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、1,3,5-、1,2,4-或1,2,3-三嗪基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、1,2,3-、1,2,4-、1,2,5-或1,3,4-噁二唑基、异噻唑基、苯并硫代呋喃基、异苯并硫代呋喃基、苯并异噁唑基、苯并噁唑基、嘌呤基、邻氨基苯甲酰基(anthraniloyl)、1,2-、1,4-、2,3-和2,1-苯并吡喃酮基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、喹唑啉基和1,4-苯并噁嗪基。
含单环的6-或5-元环W环系是优选的并且包括苯基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、1,2,3-、1,2,4-、1,2,5-或1,3,4-噁二唑基和异噻唑基。苯基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、咪唑基和呋喃基是更优选的，其中苯基目前是特别优选的。
R3是C1-C6烃基。优选地，R3是含有4-6个碳原子的大的烃基例如叔丁基(t-Bu)、新戊基或环戊基或环己基。R3更优选地是叔丁基。
按照上述优选，一种优选的式I化合物是下式II化合物
其中A、B、E、G、L和M是碳(C)或氮(N)，不超过3个是氮。如上所述，优选A、B、E、G、L和M均是碳，使得W是苯基。在式II化合物中，X和R3如先前定义，R3优选地是含有至多4-6个碳原子的大的烃基。
特别优选的式II化合物是下式III和式IV的那些。
在式III和式IV化合物中，A、B、E、G、L和M是碳(C)或氮(N)，其中不超过两个是氮，和R3如先前定义。
Neoseptin-3和neoseptin-4分别是特别优选的式III和式IV化合物。
药物组合物和方法
所考虑的式I化合物，neoseptin，也可用于药物(药物组合物)的制备中。当这样使用时，所考虑的式I化合物以溶于或分散于药学上可接受的稀释剂(或载体)中的TLR4激动剂有效量存在。
这类组合物的一个用途是作为疫苗的佐剂。因此，考虑了改进的接种方法，其中给予需要接种的哺乳动物有效量的免疫原和有效量的佐剂。在此，所述改进包括使用式I化合物或其药学上可接受的盐作为佐剂。
例如，研究在本文的别处表明，neoseptin-3充当强力的体内佐剂或TLR4激动剂，其当与作为免疫原的卵白蛋白经肌内途径共同注射时，诱发功效等于或大于LPS的更持续的免疫应答。另外，当用作佐剂时，在能够给予的最大剂量时，neoseptin-3不表现出LPS给予所特有的明显毒性。因此，所考虑的式I化合物在TLR4受体上充当激动剂，因为其结合到细胞的TLR4受体并触发该细胞的反应，从而模拟LPS的作用，而无因使用LPS作为佐剂所致的毒性结果。
所考虑的组合物也典型地含有药学上可接受的盐、缓冲剂等赋形剂，其统称为药学上(或生理学上)可接受的稀释剂或载体，相比于可存在于不意图用于药用(如在体外测定法中)的组合物中的那些。
可以提供本发明的化合物本身供使用，或作为药学上可接受的盐。所考虑的式I化合物——苯胺，是弱碱。母体苯胺离子的报告pKa值是4.6。该分子中也存在羧基，其优选地被酯化，但可以盐形式存在。
用于所考虑的化合物的示例性的盐包括但不限于以下：硫酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、环戊烷丙酸盐、十二烷基磺酸盐、乙烷磺酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙烷磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、双氢萘酸盐(palmoate)、果胶酸盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基-丙酸盐、苦味酸盐、三甲基乙酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐和十一烷酸盐。羧酸基团的盐包括钠盐、钾盐、镁盐、钙盐、铝盐、铵盐和许多取代的铵盐。
对于与药用化合物形成药学上可接受的盐的常用的药学上可接受的酸和碱的列表，指导读者到Berge、J.Pharm.Sci.197768(1):1-19。
在某些情况下，盐也可作为助剂用于本发明的化合物的分离、纯化或拆分。在这类用途中，所用的酸和所制备的盐不必是药学上可接受的。
正如随后的数据所示，所考虑的化合物在微摩尔量时在体内和在体外测定研究中有活性。当用于测定例如体外测定时，所考虑的化合物在组合物中存在的量足以提供大约10μM至大约100 μM的浓度以接触所测定的细胞。
所考虑的药物组合物含有溶于或分散于生理学上(药学上)可接受的载体中的有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。在某些实施方案中，使用有效(TLR4激动剂有效)量的佐剂。这类组合物可在体外(如在细胞培养物中)给予哺乳动物细胞，以接触这样的细胞，或者可在体内(如在有需要的活的宿主哺乳动物中)接触细胞。
当用作疫苗佐剂时，式I化合物优选地与所选免疫原一起给予。这两种组分优选地一起存在于单一组合物中。然而，这两种组分可以存在于分开给予的组合物中，并且这些分开的组合物可以以至多大约1至大约2小时的间隔给予。优选当给予两种分开的组合物时，在尽可能接近的时间内给予它们。
以大约250 mg/kg的每千克受试者动物的佐剂重量在体内说明性地给予式I化合物。通常，以每平方米受者体表面积(bsa)的重量计在体内经胃肠外给予本文所考虑的式I化合物。对于成人，该量典型地是大约1至大约20 mg/m2 bsa，对于儿童，大约是这些量的一半。
通常在一个月内多次例如每天或每周一次地将所考虑的组合物在体内给予有需要的受试者，并且可以在若干个月至若干年的周期内给予。更通常，在治疗过程中多次给予所考虑的组合物。
所考虑的药物组合物在含有常规无毒的药学上可接受的载体、佐剂和溶媒(视需要)的制剂中，可以经口服(经口)或胃肠外给予，优选后者。本文使用的术语胃肠外包括皮下注射、静脉内、肌内(这是最优选的)、胸骨内注射或输注技术。药物配制的讨论参见例如，Hoover,JohnE.,Remington's Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co.,Easton,Pennsylvania；1975和Liberman,H.A.和Lachman,L.,编著.,Pharmaceutical Dosage Forms, MarcelDecker, New York, N.Y., 1980。
所考虑的药物组合物优选地适于胃肠外给予。因此，药物组合物在给予时优选地是以液体形式，和最优选地，所述液体是含水液体，尽管如下所述地考虑了其它液体，和目前最优选的组合物是注射用制剂。
因此，可以按照已知技术，使用合适的分散剂或润湿剂和助悬剂，配制注射用制剂，例如，无菌注射用水性或油性溶液剂或混悬剂。无菌注射用制剂也可以是在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射用溶液剂或混悬剂，例如，作为在1,3-丁二醇中的溶液剂。在可使用的可接受的溶媒和溶剂中有水、林格溶液和等渗氯化钠溶液、磷酸缓冲盐水。
其它液体药物组合物包括，例如，适于胃肠外给予的溶液剂。式I化合物的无菌水溶液剂或在包括水、乙醇或丙二醇在内的溶剂中的式I化合物的无菌溶液剂是适于胃肠外给予的液体组合物的实例。在一些方面，以干粉剂形式提供所考虑的式I化合物，在使用前将其溶于合适的液体介质例如氯化钠中用于注射。
另外，无菌的不挥发油类常规用作溶剂或悬浮介质。对于该目的，任何温和的不挥发油类都可使用，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。另外，脂肪酸例如油酸在注射用组合物的制备中有用途。可以使用二甲基乙酰胺、表面活性剂(包括离子型和非离子型去垢剂)、聚乙二醇。溶剂和润湿剂例如上述的那些的混合物也可使用。
可通过将活性成分溶于所需溶剂系统中，然后将所得溶液通过膜滤器使其除菌，或通过在无菌条件下将无菌化合物溶于先前灭菌的溶剂中，制备无菌溶液剂。
供口服给予用的固体剂型可包括胶囊剂、片剂、丸剂、粉剂和颗粒剂。所考虑的式I化合物(neoseptin)在固体剂型中的量如前所述，即足以在血清或血浆中提供大约10 mM至大约100 mM，优选地大约1 nM至大约50 nM的浓度的量。也可在一周的时间周期内多次给予固体剂型。
在这类固体剂型中，将本发明的化合物与适于指定给药途径的一种或多种佐剂常规混合。如果是经口给予，可将化合物与乳糖、蔗糖、淀粉粉末、链烷酸的纤维素酯、纤维素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸和硫酸的钠盐和钙盐、明胶、阿拉伯胶、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇混合，然后制片或包封用于便利给药。这类胶囊剂或片剂可含有控制释放制剂，如可以活性化合物在羟丙基甲基纤维素中的分散体提供。就胶囊剂、片剂和丸剂的情况而言，剂型也可包含缓冲剂，例如柠檬酸钠、碳酸镁或钙或者碳酸氢镁或钙。片剂和丸剂可以额外地用肠溶包衣制备。
需要治疗并给予含有式I化合物的药物组合物的哺乳动物(受试者)可以是灵长类，例如人、猿例如黑猩猩或大猩猩、猴例如食蟹猴或恒河猴；实验室动物，例如大鼠、小鼠或兔；陪伴动物，例如狗、猫、马；或食用动物，例如牛或阉牛、绵羊、羔羊、猪、山羊、美洲驼等。
当考虑体外测定时，可以使用待测定的样品例如细胞和组织。这些体外组合物典型地含有水、氯化钠或氯化钾、以及一种或多种缓冲盐例如乙酸盐和磷酸盐、Hepes等等、金属离子螯合剂例如EDTA，其缓冲至所需pH值例如pH 4.0-8.5，优选地大约pH 7.2-7.4，取决于所进行的测定，正如熟知的那样。
优选地，药物组合物是呈单位剂型。在这样的形式中，将组合物分为含有合适量的活性化合物的单位剂量。单位剂型可以是包装的制剂，所述包装含有离散量的制剂，例如，在小瓶或安瓿中。
在另一优选的实施方案中，所考虑的式I化合物作为佐剂与一种或多种免疫原性材料一起给予为疫苗。在本文中举例说明了一种这样的组合物，其中卵白蛋白用作C57BL/6J小鼠的接种中的免疫原。
结果
使用来源于携带编码各TLR和下游信号转导分子的基因的失能种系遗传突变或敲除的小鼠的巨噬细胞，建立了化合物1 (neoseptin-1)和相关化合物信号转导的机制是TLR4。
SAR数据的代表可得自初步筛选，仅对中心酪氨酸侧链取代基观察到活性，而密切相关的苯基、4-氯苯基、萘基、4-甲氧基苯基和吲哚基衍生物混合物无活性。类似地，这两种活性混合物在羧酸端含有同型苯丙氨酸或甲硫氨酸侧链并且所有其它18个残基无活性，包括苯基-、4-氯苯基-、4-甲氧基苯基-、萘基-丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天冬酰胺、赖氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、组氨酸和Abu。
在这两种系列中，胺端也表现出定义明确的结构依赖性，其中仅含有空间适当放置的疏水性芳族取代基的那些化合物表现出活性。经由制备大约850种化合物，探测结构的两端部分，将初步筛选先导物(以下neoseptin-1)的活性优化
。
当研究neoseptin-1的中心区(80种化合物)时，用以下化合物MM-1-88时发现TLR4激动剂功效的显著增强，其中neoseptin-1中的单个原子变化(单个氧原子的去除)提供了增加的功效
。在分子的该区域的几乎所有其它变化都导致活性完全丧失。进一步优化导致额外的简化结构修饰并且有两种证明是甚至更有效的TLR4-依赖性激动剂(称为neoseptin-3和neoseptin-4)，几乎匹配LPS的功效。
这种更有效的系列(大约100种化合物)的系统研究揭示出任一化合物的甚至微小的改变也完全破坏活性。工作的关键要素包括观察精细的SAR，其中neoseptin-3和-4的TLR4激动剂活性在许多非常密切相关的结构(迄今为止>100种)中是独特的，构成neoseptin-3结构的每一组分都是活性所需的，并且两者都表现出明确定义的剂量-反应曲线(EC50 15-25 μM)。
另外，系列中的结构密切相关的类似物充当neoseptin-3的拮抗剂(结合但不活化TLR4)，并且在neoseptin-3的C-端苯基上的叠氮化物取代提供活性激动剂，其充当光亲和性(photoaffinity)交联试剂。
在使用来自携带编码TLR或其下游信号转导分子的各基因的种系遗传缺陷或敲除的小鼠(仅可得自Bruce Beutler教授的实验室(University of Texas SouthwesternMedical Center, Dallas, TX)的巨噬细胞的情况下，确立了neoseptin-3所诱导的TNF-α的产生与LPS的几乎相同，取决于TLR4、MD-2、MyD88、Trif、TRAM、MAL、IRAK4和IKBKG。还已经证明Neoseptin-3活化NF-κB、P38 MAPK、JNK和Erk信号转导途径。然而，不同于LPS，neoseptin-3独立于CD14。参见，(a) mutagenetix.utsouthwestern.edu.；(b) Arnold 等人，(2012) ENU-induced phenovariance in mice: Inferences from 587mutations.BMC Res. Notes. 5,577-0500-5-577。
如同LPS (脂多糖，内毒素)和MPLA (单磷酰脂质A)，neoseptin-3的TLR4激动剂活性被拮抗剂eritoran阻断，表明它们结合到活化MD-2/TLR4复合物中的MD-2的同一疏水性口袋上。与该预期一致的是，通过等温滴定量热法(图x)观察到neoseptin-3与MD-2的直接结合，表明亲和力稍微好于MPLA本身。
进一步区分neoseptin-3和LPS的活性(图2)，neoseptin-3更有效得多地刺激I型干扰素反应，导致INF-β(但不是INF-α)的释放，表明其用作佐剂的潜在优势。
Neoseptin-3表现为强力的体内佐剂，其与卵白蛋白经肌内途径共同注射时，诱发功效等于或大于LPS的更持续的免疫应答(图3)。而且和在能够给予的最大剂量下，neoseptin-3不表现出LPS给予所特有的明显毒性。值得注意的是这样的小分子可以表现出对活化免疫应答的如此精细的结构选择性并且以非常机械上特异性且定义明确的方式来如此进行。{参见，(a) Vogel Clin.Infect.Dis. 30(增刊3):S266–S270 (2000)；(b) Guy,Nat.Rev.Microbiol.5:505–517 (2007)；(c) Johnson,Curr.Top. Med. Chem.8:64–79(2008)；和(d) Persing 等人, Trends Microbiol.10:S32–S37 (2002)和对于使用该程序的其中的引文。]
neospetin-3和明矾(美国唯一批准的接种佐剂)的佐剂活性的进一步比较示于图9。相比明矾，Neoseptin-3在体内刺激稳健得多的免疫应答。
小鼠腹膜巨噬细胞激动剂测定
试剂：
Brewer氏巯基乙酸盐培养基，4%
将4% (w/v) Brewer氏巯基乙酸盐培养基粉末(BBL Microbiology Systems,Cockeysville, MD)加入到预加温至37℃的蒸馏水。将该溶液高压灭菌并避光贮存。
PEC回收溶液
Hepes-缓冲盐水溶液(Gibco, Invitrogen, Carlsbad, CA)
5% (v/v)热灭活胎牛血清(Atlanta Biologicals, Lawrenceville, GA)
200 IU/mL青霉素(Gibco)
200 mg/mL链霉素(Gibco)
PEC培养基
Dulbecco氏改良eagle培养基(Mediatech Inc., Herndon, VA)
5% (v/v)热灭活胎牛血清
200 IU/mL青霉素
200 mg/mL链霉素
MTT溶液
5 mg MTT (Sigma)/mL无菌PBS
DMSO
小鼠TNFα ELISA Ready-SET-Go!® (eBioscience:88-7324-76)
洗涤缓冲液: 1X PBS, 0.05% Tween-20
终止溶液: 2N H2SO4
96孔板(Corning Costar 9018或NUNC Maxisorp (#44-2404))
96孔ELISA读板器
DI水
腹膜渗出液细胞(PEC) (腹膜巨噬细胞)分离
在PEC分离前3-4天，将填充有Brewer氏巯基乙酸盐培养基的3 mL注射器用于通过25规格针经腹膜内注射小鼠1.5-2 mL。
就在分离前，在异氟烷蒸气(2-5% v/v, 2% O2)下麻醉小鼠。
填充无菌PBS的5 mL注射器用于通过灌洗经由18规针回收PEC。一旦获得，就将渗出液加入到15 mL锥形管中的5 mL PEC回收溶液中并贮存于冰上。
含有渗出液的管在台式离心机中在1200 rpm离心3分钟，和将上清液替换为1-4mL PEC培养基。通过吹吸使沉淀的细胞重悬，并吸取10 μL等分试样用于细胞计数。
使用PEC培养基将各细胞样品的浓度调整到1x106细胞/mL，100 μL各样品(1x105细胞)加入到组织培养处理的96孔平底板中，每板留下两列(11 & 12)空白。将各板在37℃/5%CO2在加湿培养箱中孵育至少1小时，让细胞粘附于板上，在此期间制备125-03溶液。
化合物筛选
PEC在96孔板上预孵育后，将未粘附的PEC随残余培养基一起弃去，并将50 μM待测化合物加入细胞中。将各板再孵育4小时。
将调节好的上清液收集到另一96孔板并留存用于TNF ELISA测定。将细胞替换为100 μL/孔的1:4 MTT溶液:PEC培养基溶液(MTT 1 mg/mL终浓度)。将PEC板在37℃/5%CO2孵育过夜(大约18小时)。去除上清液和将100 μL DMSO加入到各孔。将板摇动10分钟并在570nM处读数。该值用于度量化合物的细胞毒性。
TNFα ELISA
用在包被缓冲液中的100 μL/孔的捕获抗体包被ELISA板。密封板并在4℃孵育过夜(大约18小时)。
吹吸各孔并用300 μL/孔的洗涤缓冲液洗涤4次。在吸水纸上吸干板，以除去残余缓冲液。
用4份DI水稀释1份5X浓缩的测定稀释剂。用200 μL/孔的1X测定稀释剂封闭各孔。在室温下孵育1小时或在4℃过夜(大约18小时)。
用洗涤缓冲液吹吸和洗涤2次。
使用1X测定稀释剂进行头等标准品的2倍系列稀释以制备标准曲线，总共8点：1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、0 pg/ml。加入100 μL/孔的头等标准品浓度到合适的孔中。加入65 μL/孔测定稀释剂加上35 μL样品到各孔中。封闭板并在室温下孵育2小时[或在4℃过夜(大约18小时)]。
用洗涤缓冲液吹吸/洗涤4次。
加入在1X测定稀释剂中稀释的100 μL/孔的检测抗体。密封板并在室温下孵育1小时。
吹吸/洗涤。重复总共4次洗涤。
加入在1X测定稀释剂中稀释的100 μL/孔的抗生物素蛋白-HRP。密封板并在室温下孵育30分钟。
吹吸和洗涤。重复总共5次洗涤。
加入100 μL/孔的底物溶液到各孔中。将板在室温下孵育2-3分钟。
加入50 μL/孔的终止溶液，并在450 nm处读板。
化合物制备
所考虑的式I化合物——一种neoceptin分子，可以使用标准有机化学程序容易地制备。说明性的neoseptin-3的合成示例于以下方案1A和1B。
备选的合成陈述于以下方案2A和2B。
材料与方法
TIPS酚醚制备的通用程序
将碘苯酚(11.4 mmol)溶于无水CH2Cl2 (50 mL)。将咪唑(12.0 mmol, 1.05当量)加入到该混合物中，接着滴加TIPSCl (11.4 mmol, 1.00当量)。16小时后，将浑浊反应混合物转移至500 mL分液漏斗并用饱和NH4Cl (25 mL)和H2O (25 mL)洗涤。水相用CH2Cl2 (25mL)萃取2次，合并的萃取液经Na2SO4干燥和浓缩。快速色谱(SiO2, 己烷至10% EtOAc/己烷)得到4.12 g (96%)甲硅烷基醚。
(MM-1-58)按照通用程序将4-碘苯酚(2.50 g, 11.4 mmol)、CH2Cl2 (50 mL)、咪唑(815 mg, 12.0 mmol, 1.05当量)和TIPSCl (2.50 mL, 11.4 mmol, 1.00当量)混合。快速色谱(SiO2, 己烷至10% EtOAc/己烷)得到4.12 g (96%)甲硅烷基醚。1H NMR (300 MHz,CDCl3) δ 7.50 (dd, J = 8.9, 0.7 Hz, 2H), 6.67 (dd, J = 8.9, 0.7 Hz, 2H), 1.36– 1.16 (m, 3H), 1.10 (d, J = 6.9 Hz, 18H)。
(MM-1-234)按照通用程序将3-碘苯酚(500 mg, 2.27 mmol)、CH2Cl2 (10 mL)、咪唑(162 mg, 2.39 mmol, 1.05当量)和TIPSCl (510 μL, 2.27 mmol, 1.00当量)混合。快速色谱(SiO2, 己烷至10% EtOAc/己烷)得到710 mg (83%)甲硅烷基醚。
(MM-1-235)按照通用程序将2-碘苯酚(500 mg, 2.27 mmol)、CH2Cl2 (10 mL)、咪唑(162 mg, 2.39 mmol, 1.05当量)和TIPSCl (510 μL, 2.27 mmol, 1.00当量)混合。快速色谱(SiO2, 己烷至10% EtOAc/己烷)得到632 mg (74%)甲硅烷基醚。
与TMS-乙炔的Sonogashira交叉偶联的通用程序
将TIPSO碘化物(2.66 mmol)溶于无水甲苯(12 mL)。一次性加入PdCl2(PPh3)2(0.133 mmol, 5 mol%)和CuI (0.266 mmol, 10 mol%)，接着加入新蒸馏的Et3N (2.92mmol, 1.1当量)。搅拌15分钟后，滴加三甲基甲硅烷基乙炔(2.92 mmol, 1.1当量)，在其完成加入后，反应混合物变为深绿色。在室温下12小时后，真空除去溶剂。所得深色油状物的快速色谱(SiO2, 0至4% EtOAc/己烷)得到交叉偶联的炔烃。
(MM-1-68)按照通用程序，使用化合物MM-1-58 (1.00 g, 2.66 mmol)、甲苯(12mL)、PdCl2(PPh3)2 (94 mg, 0.133 mmol, 5 mol%)、CuI (56 mg, 0.266 mmol, 10 mol%)、Et3N (0.41 mL, 2.92 mmol, 1.1当量)和三甲基甲硅烷基乙炔(0.42 mL, 2.92 mmol,1.1当量)。快速色谱(SiO2, 0至4% EtOAc/己烷)得到0.809 g (88%)交叉偶联的炔烃。1HNMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.38 – 7.31 (m, 2H), 6.83 – 6.77 (m, 2H), 1.30 – 1.18(m, 3H), 1.10 (d, J = 3.6 Hz, 18H), 0.25 (s, 9H)。
(MM-1-271)按照通用程序，使用化合物MM-1-234 (1.00 g, 2.66 mmol)、甲苯(12mL)、PdCl2(PPh3)2 (93 mg, 0.133 mmol, 5 mol%)、CuI (51 mg, 0.266 mmol, 10 mol%)、Et3N (0.41 mL, 2.92 mmol, 1.1当量)和三甲基甲硅烷基乙炔(0.42 mL, 2.92 mmol,1.1当量)。反应混合物经过滤，浓缩，并且无需纯化用于下一步骤。
(MM-1-272)按照通用程序，使用化合物MM-1-235 (1.00 g, 2.66 mmol)、甲苯(12mL)、PdCl2(PPh3)2 (93 mg, 0.133 mmol, 5 mol%)、CuI (51 mg, 0.266 mmol, 10 mol%)、Et3N (0.41 mL, 2.92 mmol, 1.1当量)和三甲基甲硅烷基乙炔(0.42 mL, 2.92 mmol,1.1当量)。反应混合物经过滤，浓缩，并且无需纯化用于下一步骤。
选择性TMS裂解的通用程序
将TIPSO TMS-炔烃(2.00 mmol)悬于MeOH (10 mL)。在搅拌的情况下加入CH2Cl2直至得到均质混合物(大约1-2 mL)。加入K2CO3 (2.22 mmol, 1.10当量)。将混合物在室温下搅拌3小时，此后通过TLC (己烷洗脱液)观察到反应完成。将混合物用CH2Cl2 (30 mL)稀释并用H2O (20 mL)洗涤。水相用CH2Cl2 (3 × 10 mL)萃取和合并的有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和真空浓缩，得到最终的炔烃，其无需进一步纯化就使用。
(MM-1-70)按照通用程序，将TMS-炔烃MM-1-68 (700 mg, 2.02 mmol)、MeOH (10mL)、CH2Cl2、K2CO3 (320 mg, 2.22 mmol, 1.10当量)混合，得到 524 mg (95%)最终的炔烃，其无需进一步纯化就使用。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.36 (d, J = 8.6 Hz, 2H),6.81 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 2.99 (s, 1H), 1.24 (m, 3H), 1.09 (d, J = 6.8 Hz,18H)。
(MM-1-274)按照通用程序，将TMS-炔烃MM-1-271 (920 mg, 2.66 mmol)、MeOH(10 mL)、CH2Cl2 (~1 mL)、K2CO3 (370 mg, 2.68 mmol, 1.01当量)混合，得到 474 mg(65%)最终的炔烃。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.18 (td, J = 7.9, 2.6 Hz, 1H), 7.12– 7.06 (m, 1H), 7.02 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.92 – 6.87 (m, 1H), 3.05 (s, 1H),1.27 (m, 3H), 1.11 (d, J = 7.3 Hz, 18H)。
(MM-1-275)按照通用程序，将TMS-炔烃MM-1-272 (920 mg, 2.66 mmol)、MeOH(10 mL)、CH2Cl2 (~1 mL)、K2CO3 (370 mg, 2.68 mmol, 1.01当量)混合，得到 243 mg(33%)最终的炔烃。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.43 (dt, J = 7.7, 2.2 Hz, 1H), 7.24– 7.16 (m, 1H), 6.88 (dd, J = 8.0, 2.6 Hz, 2H), 3.20 (s, 1H), 1.33 (m, 3H),1.15 (d, J = 7.5 Hz, 18H)。
苯甲酸费歇尔酯化的通用程序
在装备有回流冷凝器和搅拌棒的双颈250 mL圆底烧瓶中将3-羟基苯甲酸(8.00mmol)溶于MeOH (60 mL)。加入浓H2SO4 (大约0.5 mL)，和将混合物在回流下搅拌18小时。冷却至室温后，将反应溶剂经真空浓缩至1/5体积，用EtOAc (50 mL)稀释和用饱和NaHCO3(30 mL)洗涤。水相用1 N HCl酸化至pH 2，再用EtOAc (3 × 15 mL)萃取。合并的有机相经Na2SO4干燥并在高真空度下浓缩，得到甲酯(95-99%)。当需要进一步纯化时，产物经过快速色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)。[Börger 等人, Synlett, 11:1698–1702 (2008)；Charrier 等人, Synthesis, 20:3467–3477 (2006)。]
(MM-1-40) 费歇尔酯化的通用程序如下：使用了3-羟基-4-硝基苯甲酸(3.00 g,16.4 mmol)、MeOH (120 mL)和H2SO4 (大约1.0 mL, 浓)。得到3-羟基-4-硝基苯甲酸甲酯3.2 g (99%)，为黄色固体，其无需进一步纯化就使用。
(MM-1-492)费歇尔酯化的通用程序如下：使用了3-羟基-5-硝基苯甲酸(1.50 g,8.19 mmol)、MeOH (60 mL)和H2SO4 (~0.5 mL, 浓)。得到3-羟基-5-硝基苯甲酸甲酯1.6 g(99%)，为黄色固体，其无需进一步纯化就使用。
(MM-2-5) 费歇尔酯化的通用程序如下：使用了5-羟基-2-硝基苯甲酸(1.5 g8.19 mmol)、MeOH (60 mL)和H2SO4 (~0.5 mL)。得到5-羟基-2-硝基苯甲酸甲酯1.6 g(99%)，为灰白色固体，其无需进一步纯化就使用。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.99 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.04 – 6.94 (m, 2H), 3.95 (s, 3H)。
三氟甲磺酸芳基酯制备的通用程序
在N2气氛下将羟基苯甲酸甲酯(8.00 mmol)溶于无水CH2Cl2 (40 mL)并冷却至0℃。缓慢加入Et3N (16.0 mmol, 3当量)。15分钟后，滴加三氟甲烷-磺酸酐(8.80 mmol,1.1当量)，产生黑色反应介质。16小时后，反应混合物用饱和NH4Cl (30 mL)和H2O (40 mL)洗涤。水相用CH2Cl2 (2 × 20 mL)萃取，合并的萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出，并真空浓缩。快速色谱(SiO2, 10至20% EtOAc/己烷)得到三氟甲磺酸芳基酯。
(MM-1-69) 按照通用程序，使用了3-羟基-4-硝基苯甲酸甲酯(1.50 g, 7.61mmol)、CH2Cl2 (40 mL)、Et3N (2.21 mL, 15.2 mmol, 2.00当量)、Tf2O (1.45 mL, 8.37mmol, 1.1当量)。快速柱色谱(SiO2, 10 → 20% EtOAc/己烷)得到1.98 g (79%)三氟甲磺酸芳基酯，为蓬松的灰白色固体。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.23 (t, J = 1.2 Hz,1H), 8.12 – 8.07 (m, 2H), 4.02 (s, 3H)。
(MM-1-494) 按照通用程序，使用了3-羟基-5-硝基苯甲酸甲酯(1.50 g, 7.61mmol)、CH2Cl2 (40 mL)、Et3N (2.20 mL, 15.2 mmol, 2.00当量)、Tf2O (1.41 mL, 8.37mmol, 1.10当量)。快速色谱(SiO2, 10% EtOAc/己烷)得到2.31 g (92%)三氟甲磺酸芳基酯。
(MM-2-6) 按照通用程序，使用了5-羟基-2-硝基苯甲酸甲酯(1.60 g, 8.12mmol)、CH2Cl2 (40 mL)、Et3N (2.26 mL, 16.2 mmol, 2.00当量)、Tf2O (1.50 mL, 8.93mmol, 1.10当量)。快速色谱(SiO2, 己烷→ 30% EtOAc/己烷)得到2.39 g (90%)三氟甲磺酸芳基酯，为粘稠橙色油状物。
(MM-1-452) 按照通用程序，使用了酚MRS-3-35 (412 mg, 1.16 mmol)、CH2Cl2(40 mL)、Et3N (0.325 mL, 2.32 mmol, 2.00当量)、Tf2O (0.215 mL, 1.28 mmol, 1.10当量)。快速色谱(SiO2, 20% EtOAc/己烷)得到118 mg (21%)三氟甲磺酸芳基酯，为粘稠琥珀色油状物。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.52 – 7.44 (m, 1H), 7.15 – 6.97 (m, 7H),6.86 (ddd, J = 8.4, 2.5, 1.1 Hz, 1H), 6.54 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 4.62 (td, J =7.1, 5.2 Hz, 1H), 2.67 – 2.44 (m, 2H), 2.25 – 2.08 (m, 1H), 2.06 – 1.90 (m,1H), 1.36 (s, 9H)。
第二次Sonogashira交叉偶联和水解的通用程序
在100 mL双颈圆底烧瓶中填装三氟甲磺酸酯(7.29 mmol)、PdCl2(PPh3)2 (0.73mmol, 10 mol%)、CuI (2.18 mmol, 30 mol%)和TBAI (21.8 mmol, 3.00当量)。将试剂悬于5:1 DMF/Et3N (30 mL/6 mL)，并将反应混合物淹没在70 ℃预加热的油浴中。将芳基炔烃(14.6 mmol, 2.00当量)滴加到剧烈搅拌的反应混合物中。3小时后，将混合物冷却至室温，用1:1 EtOAc/己烷(各60 mL)稀释和用饱和NH4Cl/H2O (2 × 25 mL每次)洗涤。水相用1:1混合物(3 × 30 mL)萃取，合并的有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。将所得黑色油状物溶于4:1:1 THF/MeOH/H2O (分别20 mL/5 mL/5 mL)。加入LiOH•H2O (31.0 mmol, 4.25当量)，将悬液在室温下搅拌过夜。16小时后，将反应混合物冷却至0 ℃并加入2N HCl (大约8-10 mL)直到见到沉淀物。将混合物用EtOAc (100 mL)稀释和用更多的HCl水溶液洗涤直至水相保持pH 大约2。水相用EtOAc (2 × 30 mL)萃取，合并的有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和真空浓缩。快速色谱(SiO2, 50:50:0.5 EtOAc:己烷:AcOH)得到交叉偶联的羧酸。
(MM-1-52/457) 按照通用程序，将三氟甲磺酸酯MM-1-69 (100 mg, 0.304mmol)、PdCl2(PPh3)2 (21 mg, 0.030 mmol, 10 mol%)、CuI (17 mg, 0.091 mmol, 30mol%)、TBAI (337 mg, 0.911 mmol, 3.00当量)和苯基乙炔混合。在此阶段的快速色谱得到52 mg (60%)交叉偶联的产物。LiOH•H2O (28 mg, 0.668 mmol, 4.00当量)水解得到44mg (99%)所述交叉偶联的羧酸。1H NMR (甲酯, 300 MHz, CDCl3) δ 8.34 (s, 1H), 8.12– 8.01 (m, 2H), 7.65 – 7.54 (m, 2H), 7.40 (dd, J = 3.2, 1.9 Hz, 3H), 3.98 (s,3H)。
(MM-2-3) 按照通用程序，将三氟甲磺酸酯MM-1-69 (2.40 g, 7.29 mmol)、PdCl2(PPh3)2 (510 mg, 0.73 mmol, 10 mol%)、CuI (415 mg, 2.18 mmol, 30 mol%)、TBAI(8.06 g, 21.8 mmol, 3.00当量)、炔烃MM-1-70 (4.00g, 14.6 mmol, 2.00当量)和LiOH•H2O (1.30 g, 31.0 mmol, 4.25当量)混合。快速色谱(50:50:0.5 EtOAc:己烷:AcOH)得到1.69 g (81%)所述交叉偶联的羧酸。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.35 (d, J = 1.8 Hz,1H), 8.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.05 (dd, J = 8.6, 1.8 Hz, 1H), 7.50 (d, J =8.6 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 4.19 (s, 1H)。
(MM-1-276/278) 按照通用程序，将三氟甲磺酸酯MM-1-69 (176 mg, 0.534mmol)、PdCl2(PPh3)2 (38 mg, 0.053 mmol, 10 mol%)、TBAI (590 mg, 1.60 mmol, 3.00当量)和炔烃MM-1-274 (220 mg, 0.800 mmol, 1.50当量)混合。在此阶段的快速色谱得到117 mg (48%)。LiOH•H2O (43 mg, 1.03 mmol, 4.25当量)用于水解步骤，得到112 mg(99%)所述羧酸。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.84 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.31 (d, J =1.7 Hz, 1H), 8.07 – 7.97 (m, 2H), 7.23 – 7.10 (m, 2H), 7.09 – 7.03 (m, 1H),6.88 (ddd, J = 8.1, 2.5, 1.4 Hz, 1H)。
(MM-1-277/279) 按照通用程序，将三氟甲磺酸酯XMM-1-69 (176 mg, 0.534mmol)、PdCl2(PPh3)2 (38 mg, 0.053 mmol, 10 mol%)、TBAI (590 mg, 1.60 mmol, 3.00当量)和炔烃MM-1-275 (220 mg, 0.800 mmol, 1.50当量)混合。在此阶段的快速色谱得到50 mg (31%)。LiOH•H2O (28 mg, 1.03 mmol, 4.00当量)用于水解步骤，得到48 mg (99%)所述羧酸。1H NMR (甲酯, 400 MHz, CDCl3) δ 8.39 (dd, J = 3.6, 1.9 Hz, 1H), 8.23(dd, J = 8.8, 3.4 Hz, 1H), 8.10 (ddd, J = 8.8, 3.6, 1.9 Hz, 1H), 7.46 (dq, J= 5.4, 1.8 Hz, 1H), 7.39 – 7.31 (m, 1H), 7.03 (dd, J = 8.3, 3.3 Hz, 1H), 6.94(td, J = 8.2, 3.4 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H)。
(MM-1-495/496) 按照通用程序，将三氟甲磺酸酯MM-1-494 (1.20 g, 3.64mmol)、PdCl2(PPh3)2 (256 mg, 0.36 mmol, 10 mol%)、CuI (208 mg, 1.09 mmol, 30mol%)、TBAI (4.00 g, 10.9 mmol, 3.00当量)、炔烃MM-1-70 (2.00 g, 7.3 mmol, 2.00当量)和LiOH•H2O (381 mg, 9.08 mmol, 2.50当量)混合。快速色谱(SiO2, 50:50:1EtOAc:己烷:AcOH)得到365 mg (57%)所述交叉偶联的羧酸。
(MM-2-9/11) 按照通用程序，将三氟甲磺酸酯MM-2-6 (1.20 g, 3.64 mmol)、PdCl2(PPh3)2 (256 mg, 0.36 mmol, 10 mol%)、CuI (208 mg, 1.09 mmol, 30 mol%)、TBAI (4.00 g, 10.9 mmol, 3.00当量)、炔烃MM-1-70 (2.00 g, 7.3 mmol, 2.00当量)混合。在此阶段的快速色谱得到788 mg (48%)交叉偶联的产物。LiOH•H2O (251 mg, 6.00mmol, 4.00当量，基于679 mg开始的甲酯)水解和快速色谱(SiO2, 50:50:1 EtOAc:己烷:AcOH)得到133 mg (31%)所述交叉偶联的羧酸。1H NMR (甲酯, 500 MHz, CDCl3) δ 7.94(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 8.4, 1.8 Hz,1H), 7.43 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 3.95 (s, 3H), 1.34 –1.23 (m, 3H), 1.12 (d, J = 7.4 Hz, 18H)。
(MM-1-454) 按照通用程序，将三氟甲磺酸酯MM-1-452 (99 mg, 0.203 mmol)、PdCl2(PPh3)2 (15 mg, 0.020 mmol, 10 mol%)、CuI (8 mg, 0.040 mmol, 20 mol%)、TBAI(225 mg, 0.609 mmol, 3.00当量)、炔烃MM-1-70 (111 mg, 0.406 mmol, 2.00当量)混合。在此阶段的快速色谱(SiO2, 20% EtOAc/己烷)得到88 mg (71%)交叉偶联的产物。甲硅烷基醚裂解(TBAF, 1 M在THF中, 1.0 mL, 1.00 mmol, 6.9当量)和快速色谱(SiO2, 30%EtOAc/己烷)得到14 mg (22%)所述交叉偶联的游离酚。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.80(t, J = 1.9 Hz, 1H), 7.73 – 7.67 (m, 2H), 7.62 (dt, J = 7.8, 1.3 Hz, 1H),7.44 – 7.36 (m, 5H), 7.21 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 6.88 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 4.81(td, J = 7.0, 4.9 Hz, 1H), 2.83 – 2.66 (m, 2H), 2.40 – 2.27 (m, 1H), 2.14(ddd, J = 13.9, 9.9, 6.7 Hz, 1H), 1.13 (s, 9H)。
胺与酸的偶联的通用程序
在装备有搅拌棒的20 mL闪烁管中将羧酸(1.00 mmol)、胺(1.00 mmol, 1当量)和1-羟基-7-氮杂-苯并三唑(HOAt) (1.10 mmol, 1.1当量)混合。加入无水DMF (5 mL)和2,6-二甲基吡啶(5.0 mmol, 5.0当量)，搅拌混合物直至试剂完全溶解。加入1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDCI•HCl) (1.05 mmol, 1.05当量)，将混合物搅拌12-24小时。反应混合物用EtOAc (30 mL)稀释，用0.1 N HCl (2 × 25 mL)和饱和NaCl水溶液(25 mL)洗涤。水相用EtOAc (2 × 10 mL)萃取，合并的有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。纯化产物通过快速色谱分离。
(MM-1-458) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-1-52/457 (44 mg,0.165 mmol)、HoPhe-OtBu (39 mg, 0.165 mmol, 1当量)、HOAt (25 mg, 0.181 mmol,1.1当量)、2,6-二甲基吡啶(95 μL, 0.823 mmol, 5.0当量)和EDCI•HCl (33 mg, 0.173mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 10% EtOAc/己烷)得到 11.4 mg (14%)偶联产物。1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.71 – 8.66 (m, 1H), 7.77 – 7.72 (m, 2H), 7.58 – 7.47(m, 2H), 7.47 – 7.40 (m, 2H), 7.34 – 7.28 (m, 3H), 7.21 (d, J = 7.3 Hz, 3H),6.71 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.81 (ddd, J = 7.6, 6.6, 5.1 Hz, 1H), 2.84 – 2.62(m, 2H), 2.32 (dddd, J = 13.8, 10.3, 6.5, 5.1 Hz, 1H), 2.13 (dddd, J = 13.8,12.3, 10.9, 6.0 Hz, 1H), 1.53 (s, 9H)。
(MM-1-466) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (320 mg, 1.13mmol, 1.00当量)、HoPhe-OtBu (266 mg, 1.13 mmol)、HOAt (170 mg, 1.24 mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.66 mL, 5.65 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (230 mg, 1.18mmol, 1.05当量)。快速柱色谱(SiO2, 己烷→ 30% EtOAc/己烷)得到 555 mg (98%)酰胺产物。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 1.9 Hz,1H), 7.64 (dd, J = 8.6, 2.0 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.35 – 7.28(m, 2H), 7.25 – 7.17 (m, 3H), 6.86 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.74 (d, J = 7.6 Hz,1H), 4.80 (td, J = 7.0, 4.8 Hz, 1H), 2.76 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.37 (dtd, J =13.1, 8.1, 4.8 Hz, 1H), 2.26 – 2.15 (m, 1H), 1.56 (s, 9H)。
按照以下文献所述的方法，自4-苄氧基苯乙酮(市售可得自Fisher)制备了1-(苄氧基)-4-乙炔基苯：Frontier 等人,J.Am.Chem.Soc.,130:1003–1011(2008)。
(MM-1-369/370) 按照第二次Sonogashira交叉偶联和水解(以下)的通用程序，将三氟甲磺酸酯MM-1-69 (2.77 g, 8.40 mmol)、PdCl2(PPh3)2 (590 mg, 0.84 mmol, 10mol%)、CuI (240 mg, 1.26 mmol, 15 mol%)、TBAI (9.3 g, 25.2 mmol, 3.00当量)、1-(苄氧基)-4-乙炔基苯(3.5 g, 16.8 mmol, 2.00当量)和LiOH•H2O (0.46 g, 11.0 mmol,4.00当量)混合。快速色谱(50:50:0.5 EtOAc:己烷:AcOH)得到1.05 g (33%) 交叉偶联的羧酸。1H NMR (MM-1-369, Me酯, 400 MHz, CDCl3) δ 8.35 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.10(d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.05 (dd, J = 8.5, 1.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.7 Hz,2H), 7.49 – 7.32 (m, 9H), 7.00 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.93 (d, J = 8.8 Hz, 1H),5.11 (s, 2H), 3.99 (s, 3H)。
(MM-1-477) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (71 mg, 0.191mmol, 1.00当量)、D-HoPhe-OtBu (45 mg, 0.191 mmol, 1.00当量)、HOAt (30 mg, 0.210mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.111 mL, 0.960 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (39mg, 0.200 mmol, 1.05当量)。快速色谱( SiO2, 10至30% EtOAc/己烷)得到20 mg (18%)所需酰胺产物。
(MM-1-281)胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-1-276/278 (73 mg,0.258 mmol, 1.00当量)、HoPhe-OtBu (61 mg, 0.258 mmol, 1.00当量)、HOAt (39 mg,0.284 mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.150 mL, 1.29 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl(52 mg, 0.271 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)得到58 mg (48%)酰胺产物。
(MM-1-282) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-1-277/279 (48 mg,0.169 mmol, 1.00当量)、HoPhe-OtBu (40 mg, 0.169 mmol, 1.00当量)、HOAt (25 mg,0.186 mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.100 mL, 0.847 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (34 mg, 0.178 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)得到36 mg(45%)酰胺产物。
(MM-1-497) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-1-495/496 (100 mg,0.353 mmol, 1.00当量)、HoPhe-OtBu (83 mg, 0.353 mmol, 1.00当量)、HOAt (53 mg,0.388 mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.205 mL, 1.77 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl(71 mg, 0.371 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 30至40% EtOAc/己烷)得到88 mg(50%)酰胺产物。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.37 (dt, J = 9.4, 2.0 Hz, 2H), 7.95 –7.93 (m, 1H), 7.39 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.32 – 7.16 (m, 5H), 6.83 (d, J = 8.6Hz, 2H), 4.84 (dd, J = 7.6, 4.8 Hz, 1H), 2.78 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.40 –2.28 (m, 1H), 2.26 – 2.15 (m, 1H), 1.56 (s, 9H)。
(MM-2-12) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-9/11 (100 mg, 0.353mmol, 1.00当量)、HoPhe-OtBu (83 mg, 0.353 mmol, 1.00当量)、HOAt (53 mg, 0.388mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.205 mL, 1.77 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (71mg, 0.371 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 30% EtOAc/己烷)得到154 mg (87%)酰胺产物。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.06 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 8.5,1.8 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.31 (d, J =7.5 Hz, 2H), 7.26 – 7.15 (m, 3H), 6.81 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.56 (d, J = 7.7Hz, 1H), 4.80 (ddd, J = 7.7, 6.4, 4.9 Hz, 1H), 2.88 – 2.67 (m, 2H), 2.45 –2.34 (m, 1H), 2.18 – 2.09 (m, 1H), 1.55 (s, 9H)。
(MM-2-99) 胺与酸偶联的通用程序如下：将H-Nva(5-Ph)-OtBu (18 mg, 0.071mmol)加入到装备有搅拌棒并填充有羧酸MM-2-3 (20 mg, 0.071 mmol, 1.00当量)和HOAt(11 mg, 0.077 mmol, 1.10当量)的1打兰(dram)闪烁管中。将试剂溶于无水DMF (0.35mL)和2,6-二甲基吡啶(0.041 mL, 0.35 mmol, 5.00当量)。一次性加入EDCI•HCl (14 mg,0.074 mmol, 1.05当量)，将反应混合物搅拌过夜。16小时后，混合物用EtOAc (5 mL)稀释并用0.1 N HCl (5 mL)洗涤2次。水相用EtOAc (2 × 2.5 mL)萃取，合并的萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 40% EtOAc/己烷)得到30 mg (83%)酰胺产物。
(MM-2-83) 胺与酸偶联的通用程序如下：叔丁酯(75 mg, 0.285 mmol)、羧酸MM-2-3 (81 mg, 0.285 mmol, 1.00当量)、HOAt (43 mg, 0.313 mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.166 mL, 1.42 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (57 mg, 0.299 mmol, 1.05当量)在无水DMF (1.5 mL)中。快速色谱(SiO2, 30% EtOAc/己烷)得到45 mg (30%)外消旋酰胺产物。
(MM-2-138) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3(20 mg, 0.071mmol, 1.00当量)、叔戊酯(20 mg, 0.071 mmol, 1.00当量)、HOAt (11 mg, 0.078 mmol,1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.040 mL, 0.353 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (14 mg,0.074 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 20 → 30% EtOAc/己烷)得到15 mg (42%)酰胺产物。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.07 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.0 Hz,1H), 7.64 (dd, J = 8.6, 2.0 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.34 – 7.28(m, 2H), 7.24 – 7.19 (m, 3H), 6.86 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.75 (d, J = 7.6 Hz,1H), 4.85 – 4.76 (m, 1H), 2.82 – 2.71 (m, 2H), 2.37 (dd, J = 10.8, 3.3 Hz,1H), 2.25 – 2.14 (m, 1H), 1.86 (m, 2H), 1.53 (d, J = 2.5 Hz, 6H), 0.96 (t, J= 7.5 Hz, 3H)。
(MM-2-128) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (20 mg, 0.071mmol, 1.00当量)、金刚烷基酯(25 mg, 0.071 mmol, 1.00当量)、HOAt (11 mg, 0.078mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.040 mL, 0.353 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (14mg, 0.074 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 30% EtOAc/己烷)得到32 mg (78%)酰胺产物。
(MM-2-127) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (20 mg, 0.071mmol, 1.00当量)、新戊酯(20 mg, 0.071 mmol, 1.00当量)、HOAt (11 mg, 0.078 mmol,1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.040 mL, 0.353 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (14 mg,0.074 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 40% EtOAc/己烷)得到26 mg (72%)酰胺产物。
(MM-1-467) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (10 mg, 0.036mmol, 1.00当量)、异丙酯(8 mg, 0.036 mmol, 1.00当量)、HOAt (5.4 mg, 0.040 mmol,1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.020 mL, 0.180 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (7.2 mg,0.038 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2 30% EtOAc/己烷)得到17 mg (97%)酰胺产物。1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.09 – 8.02 (m, 1H), 7.83 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.63(d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.49 – 7.42 (m, 2H), 7.34 – 7.26 (m, 2H), 7.22 (q, J =3.5 Hz, 3H), 6.88 – 6.82 (m, 2H), 6.33 – 6.24 (m, 1H), 5.15 (p, J = 6.3 Hz,1H), 4.85 (td, J = 7.7, 3.5 Hz, 1H), 2.77 (q, J = 7.7, 6.5 Hz, 2H), 2.36 (qd,J = 8.7, 8.3, 4.8 Hz, 1H), 2.27 – 2.16 (m, 1H), 1.34 (d, J = 6.2 Hz, 6H)。
(MM-1-438) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3(80 mg, 0.282mmol, 1.00当量)、乙酯(59 mg, 0.282 mmol, 1.00当量)、HOAt (42 mg, 0.310 mmol,1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.165 mL, 1.41 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (57 mg,0.297 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 30% EtOAc/己烷)得到16 mg (12%)酰胺产物。
(MM-1-437) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (70 mg, 0.247mmol, 1.00当量)、甲酯(48 mg, 0.247 mmol, 1.00当量)、HOAt (37 mg, 0.272 mmol,1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.144 mL, 1.24 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (50 mg,0.259 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 40% EtOAc/己烷)得到19 mg (17%)酰胺产物。
(MM-2-94)胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (33 mg, 0.116mmol, 1.00当量)、甲酰胺(25 mg, 0.116 mmol, 1.00当量)、HOAt (17 mg, 0.128 mmol,1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.068 mL, 0.582 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (23 mg,0.122 mmol, 1.05当量)。未纯化的反应产物用于还原步骤。
(MM-2-121) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (20 mg, 0.071mmol, 1.00当量)、金刚烷基酰胺(25 mg, 0.071 mmol, 1.00当量)、HOAt (11 mg, 0.078mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.040 mL, 0.353 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (14mg, 0.074 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 40至50% EtOAc/己烷)得到29 mg (71%)酰胺产物。
(MM-2-93) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (21 mg, 0.074mmol, 1.00当量)、叔丁基酰胺(20 mg, 0.074 mmol, 1.00当量)、HOAt (11 mg, 0.081mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.043 mL, 0.353 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (15mg, 0.078 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 40% EtOAc/己烷)得到31 mg (84%)酰胺产物。
(MM-2-120) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3(20 mg, 0.071mmol, 1.00当量)、新戊基酰胺(20 mg, 0.071 mmol, 1.00当量)、HOAt (11 mg, 0.078mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.040 mL, 0.353 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (14mg, 0.074 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 40至50% EtOAc/己烷)得到28 mg (78%)酰胺产物。
(MM-2-119) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (20 mg, 0.071mmol, 1.00当量)、正己基酰胺(21 mg, 0.071 mmol, 1.00当量)、HOAt (11 mg, 0.078mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.040 mL, 0.353 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (14mg, 0.074 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 40至50% EtOAc/己烷)得到13 mg (35%)酰胺产物。
(MM-2-155) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (20 mg, 0.071mmol, 1.00当量)、正辛基酰胺(23 mg, 0.071 mmol, 1.00当量)、HOAt (11 mg, 0.078mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.040 mL, 0.353 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (14mg, 0.074 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 40% EtOAc/己烷)得到22 mg (56%)酰胺产物。
(MM-2-156) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (20 mg, 0.071mmol, 1.00当量)、正癸基酰胺(25 mg, 0.071 mmol, 1.00当量)、HOAt (11 mg, 0.078mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.040 mL, 0.353 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (14mg, 0.074 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 40% EtOAc/己烷)得到23 mg (56%)酰胺产物。
(MM-2-157) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (20 mg, 0.071mmol, 1.00当量)、正十二烷基酰胺(27 mg, 0.071 mmol, 1.00当量)、HOAt (11 mg,0.078 mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.040 mL, 0.353 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (14 mg, 0.074 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 40% EtOAc/己烷)得到23 mg(53%)酰胺产物。
(MM-2-158) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了羧酸MM-2-3 (20 mg, 0.071mmol, 1.00当量)、正十四烷基酰胺(29 mg, 0.071 mmol, 1.00当量)、HOAt (11 mg,0.078 mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.040 mL, 0.353 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl (14 mg, 0.074 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 40% EtOAc/己烷)得到30 mg(67%)酰胺产物。
(MM-2-175) 在1打兰闪烁管中将羧酸MM-2-3 (10 mg, 0.035 mmol, 1.00当量)、α-甲基-3-苯基丙基胺XX (5.3 mg, 0.035 mmol, 1.00当量)和Et3N (10 μL, 0.071mmol, 2.00当量)混合。加入THF (200 μL)，接着加入3-(二乙氧基磷酰基氧基)-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮(DEPBT, 11.6 mg, 0.039 mmol, 1.10当量)。16小时后，反应混合物用EtOAc (5 mL)稀释并用0.1 N HCl (5 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥和浓缩。快速色谱(SiO2, 40% EtOAc/己烷)得到8.5 mg (58%)酰胺产物。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.06(d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 8.6, 2.0 Hz,1H), 7.49 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.30 (dd, J = 8.3, 6.8 Hz, 2H), 7.26 – 7.18(m, 3H), 6.88 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 5.99 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.37 – 4.25 (m,1H), 2.77 (m, 2H), 2.02 – 1.93 (m, 2H), 1.34 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。
硝基芳基炔烃还原的通用程序
在装备有搅拌棒和3通真空适配器的双颈圆底烧瓶中将硝基芳基炔烃(1.00mmol)溶于EtOAc (10 mL)。将Pearlman氏催化剂(5 mol%, 在碳上的20%重量的Pd)悬于反应溶剂中，将溶剂用N2喷雾10分钟。将反应顶空快速排空直至溶剂开始沸腾，然后回填H2。将该过程重复15-20次以确保反应混合物上的最大H2气氛。搅拌16小时后，将混合物通过具有2 mm顶层SiO2的沙/Celite塞过滤，用EtOAc充分洗涤。真空除去溶剂，残余物进行快速/制备型薄层色谱，得到完全还原的苯胺。
(MM-1-460) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：使用了硝基炔烃MM-1-458(11.4mg, 0.024 mmol)、EtOAc (1.20 mL)、Pearlman氏催化剂(20 mg)。制备型薄层色谱(SiO2,20% EtOAc/己烷)得到7.3 mg (68%)完全还原的产物。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.75(d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.51 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 7.44 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.36– 7.26 (m, 3H), 7.21 (d, J = 7.6 Hz, 3H), 6.73 (m, 1H), 4.87 – 4.77 (m, 1H),2.88 – 2.63 (m, 4H), 2.32 (dt, J = 9.8, 4.9 Hz, 1H), 2.12 (td, J = 15.6,14.3, 6.7 Hz, 1H), 1.53 (s, 9H)。
(MM-1-406/470/Neoseptin-3) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：使用了硝基炔烃MM-1-466 (530 mg, 1.06 mmol)、EtOAc (10 mL)、Pearlman氏催化剂(250 mg)。快速色谱(SiO2, 30至50% EtOAc/己烷)得到411 mg (82%)完全还原的产物，Neoseptin-3。1HNMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.44 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 2.2 Hz,1H), 7.32 – 7.28 (m, 2H), 7.25 – 7.16 (m, 3H), 6.99 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.78(d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.82– 4.76 (m, 1H), 2.90 – 2.61 (m, 6H), 2.28 (dddd, J = 13.7, 10.2, 6.3, 5.1 Hz,1H), 2.10 (m, 1H), 1.53 (s, 9H)。13C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 172.1, 167.2,154.5, 147.8, 141.2, 133.0, 129.5, 129.1, 128.49, 128.48, 128.37, 126.3,126.1, 125.2, 123.4, 115.6, 114.7, 82.5, 53.0, 34.5, 34.2, 33.4, 31.6, 28.1。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C29H35N2O4)[M+H]+：475.2591，实测值：475.2592。
(MM-1-481) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：使用了硝基炔烃MM-1-477 (20mg, 0.0389 mmol)、EtOAc (10 mL)、Pearlman氏催化剂(20 mg)。制备型薄层色谱(SiO2,60% EtOAc/己烷)得到3.7 mg (23%)完全还原的产物。1H NMR数据匹配Neoseptin-3的数据。
(MM-1-442) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：使用了硝基炔烃MM-1-281(21.6 mg, 0.046 mmol)、EtOAc (1.00 mL)、Pearlman氏催化剂(20 mg)。过滤后得到的产物，21.4 mg (99%)，通过TLC监测是均质的和无需进一步纯化。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.47 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.41 (dd, J = 8.3, 2.1 Hz, 1H), 7.26 – 7.21 (m,2H), 7.19 – 7.13 (m, 3H), 7.10 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.70 (dd, J = 9.9, 7.5Hz, 2H), 6.61 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.79 (td, J =7.3, 5.1 Hz, 1H), 3.83 (s, 2H), 2.83 – 2.58 (m, 6H), 2.34 – 2.19 (m, 1H),2.13 – 2.00 (m, 1H), 1.49 (s, 9H)。
(MM-1-443) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：使用硝了基炔烃MM-1-282 (5.7mg, 0.012 mmol)、EtOAc (0.5 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。过滤后得到的产物，5.6mg (98%)，通过TLC监测是均质的和无需进一步纯化。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.57(d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 8.2, 2.2 Hz, 1H), 7.32 – 7.27 (m, 2H),7.24 – 7.14 (m, 3H), 7.08 (dd, J = 7.7, 1.7 Hz, 1H), 6.88 (td, J = 7.3, 1.0Hz, 1H), 6.84 – 6.79 (m, 1H), 6.66 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 8.3 Hz,1H), 6.32 (s, 1H), 4.87 – 4.78 (m, 1H), 4.27 (s, 2H), 3.00 – 2.61 (m, 6H),2.29 (ddt, J = 15.4, 11.1, 5.7 Hz, 1H), 2.16 – 2.06 (m, 1H), 1.53 (s, 9H)。
(MM-1-500) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：使用了硝基炔烃MM-1-497 (88mg, 0.176 mmol)、EtOAc (1.5 mL)、Pearlman氏催化剂(50 mg)。过滤后得到的产物，65 mg(78%)，通过TLC监测是均质的和无需进一步纯化。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.31 –7.26 (m, 2H), 7.21 – 7.18 (m, 3H), 6.94 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.89 (s, 1H),6.76 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.67 (s, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.49 (d, J = 6.0 Hz,1H), 4.77 (dd, J =6.0, 2.0 Hz, 1H), 2.86 – 2.67 (m, 6H), 2.25 (m, 1H), 2.13(m, 1H), 1.52 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C29H35N2O4)[M+H]+：475.2591，实测值：475.2590.
(MM-2-14) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：使用了硝基炔烃MM-2-12 (65mg, 0.130 mmol)、EtOAc (1.2 mL)、Pearlman氏催化剂(50 mg)。过滤后得到的产物，58 mg(94%)，通过TLC监测是均质的和无需进一步纯化。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.33 –7.28 (m, 2H), 7.24 – 7.17 (m, 3H), 7.03 (dd, J = 8.3, 2.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.85 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.82 – 6.76 (m, 2H), 6.62 (d, J =8.3 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 2.86 – 2.62(m, 6H), 2.27 (dddd, J = 13.7, 9.9, 6.7, 5.1 Hz, 1H), 2.10 (m, 1H), 1.54 (s,9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C29H35N2O4)[M+H]+：475.2591，实测值：475.2605.
(MM-2-103) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-99 (30 mg,0.058 mmol)、EtOAc (0.5 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)得到13.1 mg (47%)完全还原的产物。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 7.48 (dd, J = 8.2, 2.2 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.31 –7.24 (m, 2H), 7.21 – 7.13 (m, 3H), 6.97 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.77 (d, J = 8.4Hz, 2H), 6.62 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.74 (dt, J =7.8, 5.7 Hz, 1H), 2.87 – 2.57 (m, 6H), 2.03 – 1.91 (m, 1H), 1.77 (m, 2H),1.71 – 1.58 (m, 1H), 1.48 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C30H37N2O4)[M+H]+：489.2748，实测值：489.2757.
(MM-2-100) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-83 (45 mg,0.085 mmol)、EtOAc (0.5 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)得到19.6 mg (47%)完全还原的产物。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 7.47 (dd, J = 8.2, 2.2 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.24 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 7.19 – 7.13 (m, 3H), 6.98 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.80 (d, J =8.4 Hz, 2H), 6.62 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.75 – 4.67(m, 1H), 2.86 – 2.65 (m, 4H), 2.61 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 1.95 (ddd, J = 10.9,8.2, 5.4 Hz, 1H), 1.84 – 1.74 (m, 1H), 1.73 – 1.62 (m, 2H), 1.47 (s, 9H)。HRMS(ESI-TOF) m/z计算值(C31H39N2O4)[M+H]+ ：503.2904，实测值：503.2912.
(MM-2-140) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-138 (15 mg,0.029 mmol)、EtOAc (0.25 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 60% EtOAc/己烷)得到2.2 mg (16%)完全还原的产物。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 7.45 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.31 –7.28 (m, 2H), 7.22 – 7.17 (m, 3H), 7.01 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.4Hz, 2H), 6.64 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.81 (td, J =7.0, 5.0 Hz, 1H), 2.94 – 2.63 (m, 6H), 2.29 (ddt, J = 15.6, 11.1, 5.8 Hz,1H), 2.13 – 2.03 (m, 1H), 1.90 – 1.75 (m, 2H), 1.50 (d, J = 2.9 Hz, 6H), 0.94(t, J = 7.5 Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C30H37N2O4)[M+H]+：489.2748，实测值：489.2740.
(MM-2-130) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-128 (32 mg,0.055 mmol)、EtOAc (0.5 mL)、Pearlman氏催化剂(15 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)得到11.3 mg (38%)完全还原的产物。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 7.43 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.29 (d, J= 1.2 Hz, 2H), 7.20 (dd, J = 7.7, 2.4 Hz, 3H), 6.99 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.79(d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.62 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.83– 4.76 (m, 1H), 3.82 (s, 2H), 2.86 – 2.63 (m, 6H), 2.33 – 2.24 (m, 1H), 2.21(q, J = 3.3 Hz, 3H), 2.17 (d, J = 2.9 Hz, 6H), 2.14 – 2.05 (m, 1H), 1.70 (d,J = 3.6 Hz, 6H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C35H41N2O4)[M+H]+：553.3061，实测值：553.3072.
(MM-2-129) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-127 (26 mg,0.051 mmol)、EtOAc (0.5 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)得到8.6 mg (34%)完全还原的产物。1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ 7.43 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 7.9Hz, 2H), 7.20 (dt, J = 5.9, 1.4 Hz, 3H), 6.99 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.79 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.94 (td,J = 7.3, 5.1 Hz, 1H), 3.88 (q, J = 10.5 Hz, 2H), 3.83 (s, 2H), 2.88 – 2.63(m, 6H), 2.33 (ddd, J = 10.0, 5.0, 3.0 Hz, 1H), 2.21 – 2.08 (m, 1H), 0.98 (s,9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C30H37N2O4)[M+H]+：489.2748，实测值：489.2746.
(MM-1-468) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-1-467 (18 mg,0.037 mmol)、EtOAc (0.25 mL)、Pearlman氏催化剂(15 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)得到10 mg (59%)完全还原的产物。1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.43 (dd, J = 8.3, 2.1 Hz, 1H), 7.35 – 7.28 (m, 2H), 7.25 – 7.15 (m,3H), 6.98 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.3 Hz,1H), 6.51 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.28 (q, J = 5.7 Hz, 1H), 5.12 (tt, J = 12.5,6.2 Hz, 1H), 4.85 (ddt, J = 12.3, 7.3, 4.1 Hz, 1H), 2.91 – 2.62 (m, 6H), 2.40– 2.22 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 1.31 (dd, J = 6.2, 2.3 Hz, 6H)。HRMS (ESI-TOF)m/z计算值(C28H33N2O4)[M+H]+：461.2435，实测值：461.2434.
(MM-1-440) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-1-438 (16 mg,0.034 mmol)、EtOAc (0.4 mL)、Pearlman氏催化剂(15 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)得到5.2 mg (35%)完全还原的产物。1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.77 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.34 – 7.16 (m, 5H), 6.87 (d, J = 8.7 Hz, 2H),4.55 (dd, J = 9.3, 5.1 Hz, 1H), 4.21 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.92 – 2.68 (m,4H), 2.22 (dd, J = 28.3, 6.5 Hz, 4H), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。
(MM-1-439) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-1-437 (19 mg,0.041 mmol)、EtOAc (0.4 mL)、Pearlman氏催化剂(15 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)得到9 mg (50%)完全还原的产物。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ8.64 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.26 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 8.15 (d, J = 8.8Hz, 2H), 7.70 (dd, J = 10.3, 8.6 Hz, 2H), 7.30 – 7.11 (m, 5H), 6.91 (d, J =8.8 Hz, 2H), 6.82 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.58 (dd, J = 9.6, 4.9 Hz, 1H), 3.72(s, 3H), 2.88 – 2.62 (m, 4H), 2.32 – 2.07 (m, 4H)。
(MM-2-102) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-94 (50 mg,0.113 mmol)、EtOAc (0.5 mL)、Pearlman氏催化剂(15 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 10% MeOH/CH2Cl2)得到40 mg (85%)完全还原的产物。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C25H28N3O3)[M+H]+：418.2125，实测值：418.2128.
(MM-2-126) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-121 (29 mg,0.050 mmol)、EtOAc (0.5 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 75% EtOAc/己烷)得到22.4 mg (81%)完全还原的产物。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 7.54 – 7.45 (m, 1H), 7.34 – 7.28 (m, 2H), 7.26 – 7.17 (m, 3H), 6.90– 6.84 (m, 2H), 6.79 (dd, J = 9.1, 2.4 Hz, 2H), 6.71 (d, J = 2.2 Hz, 1H),6.65 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.15 (m, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.47 (m, 1H), 3.89 (brs, 2H), 3.00 – 2.53 (m, 6H), 2.13 – 2.07 (m, 3H), 2.03 (d, J = 6.8 Hz, 6H),1.74 – 1.67 (m, 6H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C35H42N3O3)[M+H]+：552.3221，实测值：552.3225.
(MM-2-101) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-93 (31 mg,0.063 mmol)、EtOAc (0.5 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)得到16.2 mg (55%)完全还原的产物。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 7.47 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 7.26 – 7.23 (m, 2H), 7.19 – 7.14 (m,3H), 6.99 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.3 Hz,2H), 6.59 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.56 (m, 1H), 4.53 (m, 1H), 2.88 – 2.62 (m,6H), 2.57 (dt, J = 13.9, 7.5 Hz, 1H), 2.12 – 2.02 (m, 1H), 1.35 (s, 9H)。HRMS(ESI-TOF) m/z计算值(C29H36N3O3)[M+H]+：474.2751，实测值：474.2754.
(MM-2-125) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-120 (28 mg,0.055 mmol)、EtOAc (0.5 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 75% EtOAc/己烷)得到23 mg (87%)完全还原的产物。1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ 7.51 – 7.43 (m, 1H), 7.27 (dt, J = 4.7, 2.5 Hz, 2H), 7.23 – 7.15 (m, 3H),6.86 – 6.82 (m, 2H), 6.77 (dd, J = 8.3, 1.3 Hz, 2H), 6.69 (d, J = 2.1 Hz,1H), 6.66 – 6.61 (m, 1H), 6.56 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 6.09 (d, J = 8.7 Hz, 1H),4.60 (q, J = 7.5 Hz, 1H), 3.91 (br s, 2H), 3.15 – 3.05 (m, 2H), 2.90 (dd, J =12.7, 6.4 Hz, 1H), 2.82 (dt, J = 12.5, 5.6 Hz, 1H), 2.78 – 2.51 (m, 4H), 2.30– 2.18 (m, 1H), 2.16 – 2.02 (m, 1H), 1.74 (s, 1H), 0.91 (d, J = 1.2 Hz, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C30H38N3O3)[M+H]+ ：488.2908，实测值：488.2913。
(MM-2-124) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-119 (13 mg,0.025 mmol)、EtOAc (0.25 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 75% EtOAc/己烷)得到4.2 mg (34%)完全还原的产物。1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.45 (dd, J = 8.6, 2.3 Hz, 1H), 7.18 (t, J = 6.5 Hz, 5H), 7.02 (s,1H), 6.83 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.76 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.61 (d, J = 8.4 Hz,1H), 6.56 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 6.29 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.57 (q, J = 7.8 Hz,1H), 3.23 (m, 2H), 2.71 (m, 6H), 2.21 (m, 1H), 2.10 (m, 1H), 1.32 – 1.14 (m,8H), 0.86 (t, J = 6.4 Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C31H40N3O3)[M+H]+：502.3064，实测值：502.3069。
(MM-2-160) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-155 (22 mg,0.040 mmol)、EtOAc (1.0 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 60% EtOAc/己烷)得到20.5 mg (98%)完全还原的产物。1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.46 (dd, J = 8.3, 2.1 Hz, 1H), 7.31 – 7.24 (m, 2H), 7.19 (m, 3H),6.85 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.79 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.70 (d, J = 2.1 Hz, 1H),6.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.17 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.54 (td, J = 8.1, 6.4Hz, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.25 (m, 2H), 2.89 (m, 1H), 2.81 (dt, J = 13.6, 5.7Hz, 1H), 2.76 – 2.52 (m, 4H), 2.26 – 2.14 (m, 1H), 2.07 (dtd, J = 14.2, 8.5,6.7 Hz, 1H), 1.49 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 1.33 – 1.15 (m, 10H), 0.87 (t, J = 6.8Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C33H44N3O3)[M+H]+：530.3377，实测值：530.3378。
(MM-2-161) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-156 (23 mg,0.039 mmol)、EtOAc (1.0 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 60% EtOAc/己烷)得到7.6 mg (35%)完全还原的产物。1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 7.46 (dd, J = 8.3, 2.1 Hz, 1H), 7.32 – 7.23 (m, 2H), 7.19 (m, 3H), 6.85 (d,J = 8.4 Hz, 2H), 6.79 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.68 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.64 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 6.48 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.63 –4.47 (m, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.25 (m, 2H), 2.90 (dd, J = 12.1, 6.0 Hz, 1H),2.86 – 2.77 (m, 1H), 2.77 – 2.48 (m, 4H), 2.31 – 2.14 (m, 1H), 2.09 (m, 1H),1.50 (m, 2H), 1.35 – 1.14 (m, 14H), 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF)m/z计算值(C35H48N3O3)[M+H]+：558.3690，实测值：558.3685。
(MM-2-162) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-157 (23 mg,0.038 mmol)、EtOAc (1.0 mL)、Pearlman氏催化剂(15 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 60% EtOAc/己烷)得到8.0 mg (36%)完全还原的产物。1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.23 – 7.14 (m, 3H),6.84 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.71 (s, 1H), 6.62 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 6.49 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.56 (m,1H), 3.89 (s, 2H), 3.36 – 3.15 (m, 2H), 2.95 – 2.51 (m, 6H), 2.29 – 2.15 (m,1H), 2.14 – 2.01 (m, 1H), 1.50 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.26 (d, J = 11.2 Hz,18H), 0.88 (t, J = 6.7 Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C37H52N3O3)[M+H]+：586.4003，实测值：586.3989。
(MM-2-163) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-158 (30 mg,0.047 mmol)、EtOAc (1.0 mL)、Pearlman氏催化剂(15 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 60% EtOAc/己烷)得到12.2 mg (42%)完全还原的产物。1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.46 (dd, J = 8.3, 2.1 Hz, 1H), 7.31 – 7.23 (m, 2H), 7.18 (dd, J =7.6, 5.2 Hz, 3H), 6.85 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 6.62(d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.56 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.58(q, J = 7.6 Hz, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.25 (m, 2H), 2.93 – 2.50 (m, 6H), 2.21(ddt, J = 13.4, 8.8, 6.6 Hz, 1H), 2.14 – 2.03 (m, 1H), 1.50 (m, 2H), 1.25 (d,J = 5.7 Hz, 22H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C39H56N3O3)[M+H]+：614.4316，实测值：614.4311。
(MM-2-176) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：硝基炔烃MM-2-175 (8.5 mg,0.021 mmol)、EtOAc (0.75 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。经过滤的材料的制备型薄层色谱(SiO2, 60% EtOAc/己烷)得到2.8 mg (35%)完全还原的产物。1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.39 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.35 (dd, J = 8.2, 2.2 Hz, 1H), 7.30 (m,2H), 7.24 – 7.16 (m, 3H), 7.02 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 2H),6.62 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.69 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.27 (m, 1H), 3.80 (s,2H), 2.84 (dd, J = 8.9, 6.1 Hz, 2H), 2.76 – 2.69 (m, 4H), 1.92 – 1.83 (m,2H), 1.27 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C25H29N2O2)[M+H]+：389.2223，实测值：389.2228。
氨基酸与酸偶联和还原
(MM-2-43–62) 利用下列胺使用了胺与酸偶联和用Pearlman氏催化剂进行的硝基芳基炔烃还原的通用程序(0.035 mmol规模的胺/酸)。收率为制备型薄层色谱(SiO2, 50%EtOAc/己烷)纯化后的两步骤内的收率：
(MM-2-43-Gly) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.53 – 7.45 (m, 2H), 7.01 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.62 (d,J = 8.1 Hz, 1H), 6.52 (m, 1H), 4.19 – 4.07 (m, 2H), 2.80 (dd, J = 9.3, 6.3Hz, 1H), 2.70 (dd, J = 9.2, 6.4 Hz, 1H), 1.51 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C21H27N2O4)[M+H]+ ：371.1965，实测值：371.1979。
(MM-2-44-Ala) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.51 – 7.47 (m, 1H), 7.45 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.04 – 6.95 (m, 2H), 6.80 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.62 (d, J =8.0 Hz, 1H), 4.68 (m, 1H), 2.86 – 2.78 (m, 2H), 2.75 – 2.66 (m, 2H), 1.51 (s,9H), 1.48 (d, J = 5.0 Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C22H29N2O4)[M+H]+：385.2122，实测值：385.2139。
(MM-2-45-Abu) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.50 (dd, J = 8.2, 2.2 Hz,1H), 7.45 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz,2H), 6.63 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.69 (m, 1H), 2.87 –2.77 (m, 2H), 2.75 – 2.66 (m, 2H), 2.04 – 1.93 (m, 1H), 1.87 – 1.77 (m, 1H),1.51 (s, 9H), 0.95 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C23H31N2O4)[M+H]+：399.2278，实测值：399.2278。
(MM-2-46-Val) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.50 (dd, J = 8.2, 2.2 Hz,1H), 7.41 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz,2H), 6.64 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.68 (dd, J = 8.6,4.6 Hz, 1H), 2.91 – 2.64 (m, 4H), 2.30 – 2.20(七重峰, J = 6.9 Hz, 1H), 1.51(s, 9H), 1.00 (d, J = 6.8 Hz, 3H),0.97(d,J = 6.9 Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C24H33N2O4)[M+H]+：413.2435，实测值：413.2430。
(MM-2-47-Leu) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.48 (dd, J = 8.2, 2.2 Hz,1H), 7.39 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.79 (d, J = 8.4 Hz,2H), 6.63 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.36 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.74 (td, J = 8.5,5.2 Hz, 1H), 3.83 (br s, 2H), 2.89 – 2.62 (m,4H),1.79– 1.58 (m, 3H), 1.50 (s,9H), 0.99 (d, J = 3.4 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 3.5 Hz,3H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C25H35N2O4)[M+H]+ ：427.2591，实测值：427.2599。
(MM-2-48-Ile) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.49 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz,1H), 7.41 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.79 (d, J = 8.4 Hz,2H), 6.64 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.71 (dd, J = 8.3,4.6 Hz, 1H), 3.87 (br s, 2H), 2.89 – 2.67 (m, 4H), 2.02 – 1.92 (m, 1H), 1.51(s, 9H), 0.98 (t, J = 7.4 Hz, 3H),0.96 (d, J = 6.8 Hz, 3H)。HRMS(ESI-TOF)m/z计算值(C25H35N2O4)[M+H]+ ：427.2591，实测值：427.2591。
(MM-2-49-Phe) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.42 (dd, J = 8.2, 2.1 Hz,1H), 7.37 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.33 – 7.28 (m, 2H), 7.26 – 7.15 (m, 3H), 6.99(d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.62 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.43(d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.96 (dt, J = 7.5, 5.8 Hz, 1H), 3.83 (br s, 2H), 3.21(d, J = 5.9 Hz, 2H), 2.90 – 2.64 (m, 4H), 1.44 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C28H33N2O4)[M+H]+ ：461.2435，实测值：461.2437。
(MM-2-50-Asn) 1H NMR (500 MHz, 丙酮-d 6) δ 7.59 (d, J = 8.7 Hz, 1H),7.57 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 8.4Hz, 2H), 6.75 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.73 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.00 (s, 1H),4.77 (ddd, J = 8.1, 5.8, 4.9 Hz, 1H), 2.83 – 2.71 (m, 6H), 1.44 (s, 9H)。HRMS(ESI-TOF) m/z计算值(C23H30N3O5)[M+H]+：428.2180，实测值：428.2184。
(MM-2-51-2-Nap-Ala) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.86 – 7.69 (m, 4H),7.64 – 7.61 (m, 1H), 7.52 – 7.38 (m, 2H), 7.33 (dd, J = 8.3, 1.7 Hz, 1H),7.30 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.72 (d, J = 8.4 Hz, 2H),6.59 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.10 – 5.01 (m, 1H), 3.38(d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.93 – 2.60 (m, 4H), 1.44 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C32H35N2O4)[M+H]+：511.2591，实测值：511.2593。
(MM-2-52-HoPhe) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.44 (dd, J = 8.2, 2.1 Hz,1H), 7.34 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.32 – 7.28 (m, 2H), 7.25 – 7.16 (m, 3H), 7.00(d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.79 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.47(d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.80 (td, J = 7.2, 5.0 Hz, 1H), 3.83 (br s, 2H), 2.90 –2.63 (m, 6H), 2.29 (m, 1H), 2.13 – 2.07 (m, 1H), 1.53 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF)m/z计算值(C29H35N2O4)[M+H]+ ：475.2591，实测值：475.2581。
(MM-2-53-Met) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.57 (m, 1H), 7.48 (m, 1H),7.37 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.99 – 6.96 (m, 2H), 6.90 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.78(d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.69 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.78 (m, 1H), 2.78 – 2.40 (m,6H), 2.23 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.51 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C24H33N2O4S)[M+H]+：445.2155，实测值：445.2154。
(MM-2-54-4-Cl-Phe) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.42 (dd, J = 8.3, 2.1Hz, 1H), 7.36 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 8.4Hz, 2H), 6.99 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.2Hz, 1H), 6.44 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 4.94 (m, 1H), 3.26 – 3.14 (m, 2H), 2.91 –2.66 (m, 4H), 1.45 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C28H32ClN2O4)[M+H]+：495.2045，实测值：495.2044。
(MM-2-55-TyrMe) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.43 (dd, J = 8.3, 2.1 Hz,1H), 7.37 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.99 (d, J = 8.4 Hz,2H), 6.82 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.62 (d, J = 8.3 Hz,1H), 6.41 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.96 – 4.90 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.15 (t, J= 6.1 Hz, 2H), 2.88 – 2.66 (m, 4H), 1.46 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C29H35N2O5)[M+H]+ ：491.2540，实测值：491.2544。
(MM-2-56-Trp) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.33 (s, 1H), 7.61 (d, J = 7.7Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 8.3, 2.1 Hz, 1H), 7.35 – 7.32 (m, 1H), 7.19 (d, J =2.1 Hz, 1H), 7.18 – 7.14 (m, 1H), 7.07 (ddd, J = 8.0, 7.1, 1.0 Hz, 1H), 6.98(dd, J = 5.1, 2.7 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.73 (d, J = 8.4 Hz,2H), 6.54 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.03 (m, 1H), 3.37(qd, J = 14.8, 5.5 Hz, 2H), 2.80 – 2.70 (m, 2H), 2.68 – 2.60 (m, 2H), 1.41(s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C30H34N3O4)[M+H]+：500.2544，实测值：500.2548。
(MM-2-57-Lys) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.51 – 7.45 (m, 2H), 6.96 (d,J = 7.7 Hz, 2H), 6.64 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 6.29 (m, 1H), 6.18 (d, J = 12.0Hz, 1H), 4.98 (m, 1H), 3.15 (m, 2H), 2.83 – 2.64 (m, 6H), 1.87 (m, 2H), 1.45(s, 9H), 1.32 – 1.17 (m, 2H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C25H36N3O4)[M+H]+：442.2700，实测值：442.2690。
(MM-2-58-His) 1H NMR (500 MHz, 丙酮-d 6) δ 8.23 (dd, J = 5.2, 3.3 Hz,1H), 8.04 (dd, J = 8.6, 1.9 Hz, 1H), 7.96 (m, 1H), 7.70 (m, 1H), 7.50 (d, J =8.7 Hz, 2H), 6.87 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.77 – 6.72 (m, 1H), 6.68 – 6.63 (m,1H), 4.78 – 4.72 (m, 1H), 3.23 – 3.02 (m, 4H), 2.91 – 2.79 (m, 2H), 1.39 (s,9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C25H31N4O4)[M+H]+：451.2340，实测值：451.2340。
(MM-2-59-Ser) 1H NMR (500 MHz, 丙酮-d 6) δ 8.08 (s, 1H), 7.65 (d, J =2.2 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.12(d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.76 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.73 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.00(br s, 1H), 4.59 (ddd, J = 8.1, 4.7, 3.6 Hz, 1H), 4.00 – 3.85 (m, 2H), 2.85(s, 2H), 2.83 – 2.76 (m, 4H), 1.47 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C22H29N2O5)[M+H]+：401.2071，实测值：401.2072。
(MM-2-60-Thr) 1H NMR (500 MHz, 丙酮-d 6) δ 7.65 (d, J = 2.1 Hz, 1H),7.57 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.00 (d, J = 7.5Hz, 1H), 6.76 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 6.74 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.54 (dd, J =8.8, 3.2 Hz, 1H), 4.33 (m, 1H), 2.89 – 2.76 (m, 6H), 1.47 (s, 9H), 1.20 (d, J= 6.4 Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C23H31N2O5)[M+H]+：415.2227，实测值：415.2226。
(MM-2-61-Asp) 1H NMR (500 MHz, 丙酮-d 6) δ 7.62 (d, J = 2.1 Hz, 1H),7.53 (dd, J = 8.1, 2.2 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 8.4Hz, 2H), 6.75 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.72 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.86 (m, 1H),2.91 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 2.86 – 2.74(m, 4H),1.45(s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C23H29N2O6)[M+H]+：429.2020，实测值：429.2020。
(MM-2-62-Tyr) 1H NMR (500 MHz, 丙酮-d 6) δ 8.13 (d, J = 45.8 Hz, 1H),7.58 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.9 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 2.8 Hz, 2H), 6.77 (d, J = 2.2Hz, 2H), 6.75 (d, J = 2.1 Hz, 2H), 6.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.98 (s, 1H),4.70 (td, J = 7.7, 6.1 Hz, 1H), 3.08 (dd, J = 13.8, 6.1 Hz, 1H), 3.01 (dd, J= 13.9, 7.6 Hz, 1H), 2.85 (br s, 2H), 2.84 – 2.73 (m, 4H), 1.41 (s, 9H)。HRMS(ESI-TOF) m/z计算值(C28H33N2O5)[M+H]+：477.2384，实测值：477.2388。
N -和O -烷基Neoseptin-3类似物
(MM-1-469) 将游离酚MM-1-466 (80 mg, 0.200 mmol)溶于CH2Cl2 (1 mL)。加入咪唑(15 mg, 0.209 mmol, 1.05当量)，接着缓慢加入TIPSCl (43 μL, 0.200 mmol, 1.00当量)。在室温下搅拌12小时后，反应混合物用CH2Cl2 (10 mL)稀释并用饱和NH4Cl (10 mL)洗涤。水相用CH2Cl2 (2 × 5 mL)萃取，合并的萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 10% EtOAc/己烷)得到 85 mg (81%)甲硅烷基醚。
(MM-1-471) 甲硅烷基醚 MM-1-469经历硝基炔烃还原的通用程序：甲硅烷基醚MM-1-469 (85 mg, 0.129 mmol), 在EtOAc (0.75 mL)中的Pearlman氏催化剂(40 mg)达3.5小时。过滤和浓缩后，残余物经过快速柱色谱(SiO2, 20至50% EtOAc/己烷)，得到 56mg (70%)还原的苯胺，为黄色泡沫。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.60 (t, J = 2.1 Hz,1H), 7.50 (dt, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 7.38 – 7.30 (m, 2H), 7.30 – 7.21 (m,3H), 7.13 – 7.06 (m, 2H), 6.87 (dd, J = 8.3, 2.4 Hz, 2H), 6.66 (dd, J = 8.5,2.3 Hz, 2H), 4.86 (dt, J = 7.4, 2.4 Hz, 1H), 3.83 (s, 2H), 2.98 – 2.88 (m,2H), 2.87 – 2.67 (m, 4H), 2.42 – 2.27 (m, 1H), 2.21 – 2.07 (m, 1H), 1.58 (s,9H), 1.37 – 1.24 (m, 3H), 1.16 (dd, J = 7.1, 2.4 Hz, 18H)。
(MM-1-472) 在室温下将苯胺MM-1-471 (13 mg, 0.021 mmol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP, 10.3 mg, 0.085 mmol, 4.00当量)溶于CH2Cl2 (220 μL)。滴加乙酰氯(大约2 μL,1.10当量)，导致轻微放热。搅拌过夜(大约18小时)后，在N2气流下去除反应溶剂并将所得残余物经过制备型薄层色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)，得到7.6 mg (55%)乙酰胺，为白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 2.1 Hz,1H), 7.50 (dd, J = 8.4, 2.1 Hz, 1H), 7.32 – 7.27 (m, 2H), 7.21 (dt, J = 8.1,1.8 Hz, 3H), 6.92 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.66 (d, J =7.6 Hz, 1H), 6.35 (s, 1H), 4.86 – 4.74 (m, 1H), 2.88 (s, 4H), 2.76 (dd, J =9.9, 5.9 Hz, 1H), 2.71 (dd, J = 9.9, 5.9 Hz, 1H), 2.36 – 2.27 (m, 1H), 2.14(m, 1H), 1.95 (s, 3H), 1.53 (s, 9H), 1.33 – 1.18 (m, 3H), 1.10 (d, J = 7.4Hz, 18H)。
(MM-1-473) 在室温下将乙酰胺MM-1-472 (7.6 mg, 0.011 mmol)溶于TBAF溶液(200 μL, 0.200 mmol, 175当量, 1 M在THF中)。1小时后，将反应混合物直接移至板上进行制备型薄层色谱(10% MeOH:CH2Cl2)，这得到3.2 mg (56%)游离酚。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 7.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.3 Hz, 1H),7.33 – 7.27 (m, 2H), 7.21 (d, J = 7.4 Hz, 3H), 6.90 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.79(d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.61 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.79 (td, J =7.0, 5.0 Hz, 1H), 3.30 – 3.20 (m, 1H), 2.86 (dd, J = 9.3, 6.9 Hz, 4H), 2.76(dd, J = 9.8, 6.0 Hz, 1H), 2.69 (dd, J = 9.8, 6.0 Hz, 1H), 2.34 – 2.26 (m,1H), 2.17 – 2.07 (m, 1H), 1.96 (s, 3H), 1.53 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C31H37N2O5)[M+H]+：517.2697，实测值：517.2703.
和
(MM-1-474) 在室温下将苯胺MM-1-471 (10.2 mg, 0.016 mmol)溶于无水DMF(150 μL)。将K2CO3 (2.2 mg, 0.016 mmo, 1.00当量)悬于该混合物中，接着加入甲基碘(大约1.5 μL, 0.024 mmol, 1.5当量)。搅拌24小时后，混合物用EtOAc (2 mL)稀释并用H2O(2 mL)洗涤。有机相经浓缩，残余油状物经过制备型薄层色谱(SiO2, 30% EtOAc/己烷)，得到单-N-甲基化化合物(R f = 0.57, 4.1 mg)和N,N-二甲基化合物(R f = 0.70, 2.0 mg)，以及回收的原料(R f = 0.50, 2.2 mg)。1H NMR (MM-1-474-Mid, N-甲基, 500 MHz,CDCl3) δ 7.60 – 7.55 (m, 2H), 7.31 – 7.28 (m, 2H), 7.24 – 7.16 (m, 3H), 7.05(d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.82 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.57 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 4.81(ddd, J = 7.6, 6.6, 5.1 Hz, 1H), 3.88 (s, 1H), 2.87 (dd, J = 9.7, 6.2 Hz,2H), 2.84 (s, 3H), 2.81 – 2.64 (m, 4H), 2.30 (ddt, J = 13.7, 11.0, 5.5 Hz,1H), 2.14 – 2.05 (m, 1H), 1.52 (s, 9H), 1.30 – 1.21 (m, 3H), 1.11 (d, J = 7.3Hz, 18H)。1H NMR (MM-1-474-Higher, N,N-二甲基, 500 MHz, CDCl3) δ 7.68 (d, J =2.3 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 8.3, 2.3 Hz, 1H), 7.29 (m, 2H), 7.21 (d, J = 7.7Hz, 3H), 7.09 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.6Hz, 2H), 6.62 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.85 – 4.77 (m, 1H), 3.03 – 2.65 (m, 2H),2.74 (d, J = 1.0 Hz, 6H), 2.30 (td, J = 13.8, 10.9, 5.7 Hz, 1H), 2.11 (m,1H), 1.53 (s, 9H), 1.30 – 1.21 (m, 3H), 1.11 (d, J = 7.2 Hz, 18H)。
和
(MM-1-475/476) 在室温下将N-烷基化合物MM-1-474-Mid和MM-1-474-Higher单独溶于1 M TBAF (0.100 mL, 0.100 mmol, 大约16当量, 1.0 M在THF中)，并搅拌1小时。将各反应混合物直接移至板上进行制备型薄层色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)，得到1.2 mgN-甲基产物和0.9 mg N,N-二甲基产物。HRMS (MM-1-475, N-甲基, ESI-TOF) m/z计算值(C30H37N2O4)[M+H]+ ：489.2748，实测值：489.2756。HRMS (MM-1-476, N,N-二甲基, ESI-TOF) m/z计算值(C31H39N2O4)[M+H]+：503.2904，实测值：503.2901。
(MM-2-15) 在½打兰闪烁管中将硝基炔烃游离酚MM-1-466 (20 mg, 0.040 mmol)溶于无水DMF (250 μL)。将K2CO3 (11 mg, 0.080 mmol, 2.00当量)悬于反应溶剂，并加入甲基碘(大约3 μL, 0.044, 1.10当量)。搅拌过夜(大约19小时)后，混合物用EtOAc (3 mL)稀释和用1:1饱和NH4Cl和H2O (各1.5 mL)洗涤。水相用EtOAc (1 mL)萃取1次，合并的EtOAc萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。制备型薄层色谱(SiO2, 30% EtOAc/己烷)得到12.8mg (62%)甲醚。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.08 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.89 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.35 –7.28 (m, 2H), 7.26 – 7.18 (m, 3H), 6.93 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.73 (d, J = 7.5Hz, 1H), 4.85 – 4.74 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.75 (td, J = 7.2, 6.2, 2.3 Hz,2H), 2.42 – 2.30 (m, 1H), 2.19 (m, 1H), 1.55 (s, 9H)。
(MM-2-18) 甲醚MM-2-15经过硝基炔烃还原的通用程序：硝基炔烃MM-2-15 (12.8mg, 0.025 mmol)、Pearlman氏催化剂(10 mg)和EtOAc (1 mL)氢化3小时。过滤并浓缩，得到7.8 mg (64%)苯胺产物，其没有进一步纯化。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.51 (d, J =2.1 Hz, 1H), 7.46 (dd, J = 8.2, 2.2 Hz, 1H), 7.32 – 7.28 (m, 2H), 7.23 – 7.17(m, 3H), 7.12 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.85 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.64 (d, J = 8.3Hz, 1H), 6.53 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.79 (td, J = 7.0, 5.0 Hz, 1H), 3.79 (brs, 5H), 2.90 (dd, J = 9.4, 6.4 Hz, 2H), 2.82 – 2.62 (m, 4H), 2.35 – 2.24 (m,1H), 2.14 – 2.06 (m, 1H), 1.52 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C30H37N2O4)[M+H]+ ：489.2748，实测值：489.2751。
(MM-1-379) 在室温下将苯胺MM-2-18 (255 mg, 0.404 mmol)、HOAt (61 mg,0.445 mmol, 1.10当量)和Boc-Phe-OH (107 mg, 0.404 mmol, 1.00当量)溶于无水DMF(1.35 mL)。加入2,6-二甲基吡啶(0.190 mL, 1.62 mmol, 4.00当量)和EDCI•HCl (81 mg,0.424 mmol, 1.10当量)，将混合物搅拌48小时。用EtOAc (10 mL)稀释后，混合物用0.1 NHCl (10 mL)和饱和NaHCO3 (5 mL)洗涤。有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 25% EtOAc/己烷)得到226 mg (64%)酰胺产物。
(MM-1-381)将酰胺MM-1-379 (226 mg, 0.257 mmol)溶于无水THF (1.5 mL)。滴加TBAF (1.00 mL, 1.00 mmol, 4.00当量)，将混合物在室温下搅拌1.5小时。混合物用EtOAc (10 mL)稀释并用H2O (10 mL)和盐水(10 mL)洗涤。水相用EtOAc (10 mL)萃取1次，将合并的萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 40% EtOAc/己烷)得到141 mg (76%)酚产物。
羧酸类似物
叔丁酯裂解的通用程序
(MM-1-423) 代表性的程序：在0.5打兰闪烁管中将Neoseptin-3 (4.0 mg, 0.015mmol, 1.00当量)溶于4 N HCl (200 μL, 0.800 mmol, 大约54当量)，并搅拌8小时，然后通过LCMS观察叔丁酯被完全消耗。浓缩溶剂，得到3.5 mg (99%)羧酸产物。
(MM-2-17) 叔丁酯裂解的通用程序如下：在4 N HCl (500 μL, 2.00 mmol, 大约50当量)中的邻位-胺MM-2-14 (18.5 mg, 0.039 mmol, 1.00当量)提供了12.9 mg (80%)羧酸产物。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C25H37N2O4)[M+H]+：419.1965，实测值：419.1963。
(MM-2-4) 叔丁酯裂解的通用程序如下：在4 N HCl (250 μL, 2.00 mmol, 大约50当量)中的间位-胺MM-1-500 (6.7 mg, 0.014 mmol, 1.00当量)，得到6.0 mg (99%)羧酸产物。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C25H27N2O4)[M+H]+：419.1965，实测值：419.1971。
(MM-2-456) 硝基芳基炔烃还原的通用程序如下：使用了硝基炔烃MM-1-454 (13mg, 0.029 mmol)、EtOAc (1.00 mL)、Pearlman氏催化剂(10 mg)。制备型薄层色谱(SiO2,20% EtOAc/己烷)得到8.0 mg (62%)完全还原的产物。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.51 –7.47 (m, 1H), 7.31 – 7.22 (m, 4H), 7.15 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.97 (d, J = 8.4Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.71 (dd, J = 9.6, 8.4 Hz, 3H), 6.52 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 4.75 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 2.89 – 2.76 (m, 4H), 2.74 – 2.59 (m,2H), 2.50 (m, 2H), 2.37 – 2.18 (m, 1H), 2.05 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 1.48 (s,9H)。
(MM-1-463) 叔丁酯裂解的通用程序如下：在4 N HCl (100 μL, 0.400 mmol, 大约57当量)中的叔丁酯XX (3.6 mg, 0.007 mmol, 1.00当量)提供了3.2 mg (99%)羧酸产物。
(MM-1-462) 叔丁酯裂解的通用程序如下：在4 N HCl (100 μL, 0.400 mmol, 大约266当量)中的邻位-酚MM-1-443 (1.3 mg, 0.003 mmol, 1.00当量)得到1.2 mg (99%)羧酸产物。
(MM-1-461) 叔丁酯裂解的通用程序如下：在4 N HCl (100 μL, 0.400 mmol, 大约364当量)中的间位-酚MM-1-442 (5.2 mg, 0.003 mmol, 1.00当量)得到4.6 mg (99%)羧酸产物。
(MM-1-464) 叔丁酯裂解的通用程序如下：在4 N HCl (100 μL, 0.400 mmol, 大约41当量)中的叔丁酯MM-1-460 (4.5 mg, 0.010 mmol, 1.00当量)提供了3.2 mg (80%)羧酸产物。
(MM-2-19) 叔丁酯裂解的通用程序如下：在4 N HCl (500 μL, 2.00 mmol, 大约333当量)中的叔丁酯MM-2-18 (3.0 mg, 0.006 mmol, 1.00当量)得到2.5 mg (93%)羧酸产物。
(MM-1-433) 叔丁酯裂解的通用程序如下：在4 N HCl (200 μL, 0.800 mmol, 大约133当量)中的叔丁酯MM-1-403 (2.7 mg, 0.006 mmol, 1.00当量)得到1.5 mg (65%)羧酸产物。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C25H23N2O4)[M+H]+：415.1652，实测值：415.1661。
(MM-1-435) 叔丁酯裂解的通用程序如下：在4 N HCl (200 μL, 0.800 mmol)中的叔丁酯MM-1-429 (2.2 mg, 0.004 mmol, 1.00当量)得到2.0 mg (99%)羧酸产物。HRMS(ESI-TOF) m/z计算值(C26H29N2O5)[M+H]+：449.2071，实测值：449.2072。
(MM-1-436) 叔丁酯裂解的通用程序如下：在4 N HCl (200 μL, 0.800 mmol)中的叔丁酯MM-1-430 (2.2 mg, 0.004 mmol, 1.00当量)得到1.9 mg (99%)羧酸产物。HRMS(ESI-TOF) m/z计算值(C27H31N2O5)[M+H]+：463.2227，实测值：463.2230。
(MM-1-434) 叔丁酯裂解的通用程序如下：在4 N HCl (200 μL, 0.800 mmol)中的叔丁酯MM-1-430 (2.0 mg, 0.005 mmol, 1.00当量)得到1.7 mg (99%)羧酸产物。HRMS(ESI-TOF) m/z计算值(C23H23N2O4)[M+H]+：391.1652，实测值：391.1658。
(MM-1-432) 叔丁酯裂解的通用程序如下：在4 N HCl (200 μL, 0.800 mmol)中的叔丁酯MM-1-89 (6.2 mg, 0.013 mmol, 1.00当量)得到5.5 mg (99%)羧酸产物。HRMS(ESI-TOF) m/z计算值(C26H29N2O4)[M+H]+ ：433.2122，实测值：433.2130。
(MM-1-88) 将Boc-氨基甲酸酯MM-1-379 (7 mg, 0.010 mmol)溶于4 N HCl(0.200 mL, 0.800 mmol, 大约80当量)。将溶液搅拌6小时，然后在N2气流下浓缩，得到5mg (86%)氨基酸，为HCl盐。
接头类似物
(MM-1-403) 在室温下将硝基炔烃MM-1-466 (800 mg, 1.60 mmol, 1.00当量)溶于丙酮(60 mL)。将锌纳米粉末(1.57 g, 23.4 mmol, 15.0当量)悬于介质中，并将混合物剧烈搅拌。缓慢加入饱和NH4Cl (12 mL)，得到锌盐沉淀，伴随反应混合物从深红色变浅为浅黄色。15分钟后，将反应混合物通过棉塞过滤并用EtOAc (50 mL)稀释。有机相用饱和NaHCO3 (30-50 mL)洗涤并且水相用EtOAc (2 × 30 mL)萃取。合并的萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 40至50% EtOAc/己烷)得到463 mg (62%)苯胺产物。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.72 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.55 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz,1H), 7.42 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.30 (m, 2H), 7.23 – 7.16 (m, 3H), 6.87 (d, J= 8.6 Hz, 2H), 6.71 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.59 (ddd,J = 7.9, 6.7, 5.1 Hz, 1H), 2.83 – 2.55 (m, 2H), 2.35 – 2.25 (m, 1H), 2.23 –2.08 (m, 1H), 1.53 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C29H31N2O4)[M+H]+：471.2278，实测值：471.2270。
(MM-1-188) 将TIPSO碘化物MM-1-58 (700 mg, 1.86 mmol)溶于无水THF (9 mL)并冷却至-78℃。滴加n-BuLi (0.89 mL, 2.23 mmol, 2.5 M在己烷中)。30分钟后，加入三异丙基硼酸酯(0.86 mL, 3.72 mmol, 2.00当量)。再过20分钟后，去除冷浴，并将混合物搅拌1小时。缓慢加入2 N HCl (10 mL)，将混合物稀释和用EtOAc (2 × 10 mL)萃取。合并的有机相用饱和NaCl水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 40%EtOAc/己烷)得到523 mg (96%)芳基硼酸，为白色固体。
(MM-1-190)将芳基硼酸MM-1-188 (300 mg, 1.00 mmol)和三氟甲磺酸芳基酯MM-1-69 (272 mg, 0.820 mmol, 0.800当量)溶于无水1,2-DME (4 mL)。将黄色反应溶液用N2喷雾15分钟。加入Pd(PPh3)4 (120 mg, 0.100 mmol, 0.100当量)，接着加入K3PO4 (145mg, 0.700当量)的H2O (1 mL)溶液。将冷凝器连接到反应容器，在N2气氛下将反应介质加热至85℃。1.5小时后，将混合物冷却至室温并用EtOAc (25 mL)稀释。有机相用饱和NH4Cl(10 mL)洗涤，水相用EtOAc萃取。合并的萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 10% EtOAc/己烷)得到345 mg (98%) Suzuki-偶联产物。1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 8.14 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.09 (dd, J = 8.4, 1.9 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.4Hz, 1H), 7.21 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.95 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 3.98 (s, 3H),1.29 (m, 3H), 1.13 (d, J = 7.4 Hz, 18H)。
(MM-1-191) 将Suzuki-偶联产物MM-1-190 (335 mg, 0.78 mmol)溶于t-BuOH/H2O (各2 mL)。加入LiOH•H2O (36 mg, 0.85 mmol, 1.10当量)，并将悬液剧烈搅拌2小时。反应物用0.1 N HCl (大约10 mL)猝灭，继续加入0.1 N HCl直到观察到羧酸沉淀。将混合物用EtOAc (10 mL)稀释和萃取(3 × 5 mL)，经Na2SO4干燥，轻轻倒出并浓缩，得到273 mg(84%)联芳基羧酸。
(MM-1-192) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了联芳基羧酸MM-1-191 (100 mg,0.241 mmol, 1.00当量)、hoPhe-OtBu (57 mg, 0.241 mmol, 1.00当量)、HOAt (36 mg,2.65 mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.140 mL, 1.20 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl(48 mg, 0.253 mmol, 1.05当量)。快速色谱(SiO2, 25% EtOAc/己烷)得到142 mg (93%)酰胺产物。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.81 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.78 – 7.72 (m,1H), 7.73 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.29 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 7.26 – 7.18 (m, 5H),7.16 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.02 – 6.95 (m, 2H), 6.90 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.83(dd, J = 6.9, 2.2 Hz, 1H), 4.16 (dd, J = 7.0, 1.3 Hz, 1H), 2.78 (t, J = 7.7Hz, 2H), 2.37 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 2.26 – 2.13 (m, 1H), 1.40 – 1.25 (m, 3H),1.17 (d, J = 7.4 Hz, 18H)。
(MM-1-195) 使用了氢化的通用程序：硝基芳烃MM-1-192 (142 mg, 0.224mmol)，Pd/C (27 mg, 在碳上10%重量)，在EtOAc (2 mL)中。3小时后，将混合物通过沙/Celite过滤并浓缩，得到132 mg (98%)苯胺。产物无需进一步纯化就直接用于下一步骤。
(MM-1-426) 在室温下将苯胺MM-1-195 (23 mg, 0.036 mmol)溶于TBAF溶液(100μL, 0.100 mmol, 2.75当量, 1 M在THF中)。搅拌2小时后，将混合物用EtOAc (5 mL)稀释并用H2O (5 mL)和饱和NaCl水溶液(2 mL)洗涤。水相用EtOAc (5 mL)萃取1次，合并的萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)得到 10 mg (63%)游离酚。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.62 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 8.4,2.2 Hz, 1H), 7.35 – 7.19 (m, 7H), 7.01 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.77 (d, J = 8.5Hz, 1H), 6.74 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.89 (td, J = 7.1, 5.1 Hz, 1H), 4.20 (brs, 2H), 2.79 (m, 2H), 2.37 (td, J = 9.5, 5.2 Hz, 1H), 2.17 (ddd, J = 10.4,7.6, 4.9 Hz, 1H), 1.59 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C27H31N2O4)[M+H]+：447.2278，实测值：447.2277。
(MM-1-73) 在室温下将4-(2-溴乙基)苯酚(1.00 g, 4.97 mmol, 1.00当量)溶于无水CH2Cl2 (30 mL)。一次性加入咪唑(360 mg, 5.22 mmol, 1.05当量)。该碱溶解后，滴加TIPSCl (1.06 mL, 4.97 mmol, 1.00当量)。16小时后，混合物用饱和NH4Cl (20 mL)和H2O(10 mL)洗涤。水相用CH2Cl2 (3 × 15 mL)萃取，合并的萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 5% EtOAc/己烷)得到1.75 g (99%)甲硅烷基醚。1H NMR (300 MHz,CDCl3) δ 7.06 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.83 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 7.8Hz , 2H), 3.09 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 1.29 – 1.20 (m, 3H), 1.11 (d, J = 7.0 Hz,18H)。
(MM-1-82) 在室温下将烷基溴MM-1-73 (800 mg, 2.24 mmol)溶于丙酮。一次性加入碘化钠(1.67 g, 11.2 mmol, 5.00当量)。反应容器用铝箔覆盖，将混合物剧烈搅拌36小时。加入Et2O (30 mL)，有机相用H2O (30 mL)洗涤。水相用Et2O (3 × 10 mL)萃取，合并的萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出并浓缩，得到875 mg (97%)烷基碘，其无需进一步纯化就使用。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.03 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.85 – 6.80 (d, J =8.1 Hz, 2H), 3.35 – 3.26 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 3.10 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 1.27– 1.19 (m, 3H), 1.10 (d, J = 7.3 Hz, 18H)。
(MM-1-83) 在装备有冷凝器的双颈圆底(r.b.)烧瓶中，将烷基碘MM-1-82 (800mg, 1.98 mmol)溶于乙腈 (3 mL)。加入三苯膦(570 mg, 1.1当量)，将反应混合物加热至85℃。16小时后，将混合物冷却至室温并自CH2Cl2 (3 × 20 mL)重浓缩，得到盐(1.30g, 99%)，为粘稠白色泡沫。
(MM-1-85) 将Wittig盐X MM-1-82 (1.20 g, 1.80 mmol, 1.2当量)溶于无水THF(6 mL)并冷却至0℃。滴加新鲜制备的二异丙基氨基化锂(LDA；6 mL, 2.10 mmol, 1.4当量, 0.35 M在THF中)，得到亮橙色溶液。30分钟后，滴加作为在无水THF (2 mL)中的溶液的3-甲酰基-4-硝基苯甲酸甲酯(314 mg, 1.50 mmol, 1.00当量)。1小时后，反应物用H2O(25 mL)猝灭并用Et2O (25 mL)稀释。水相用Et2O (3 × 20 mL)萃取，经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 10% EtOAc/己烷)得到 561 mg (66%)烯烃产物，为3:1的Z/E异构体的混合物。1H NMR (Z, 主要异构体, 300 MHz, CDCl3) δ 8.04 (dd, J = 2.5, 1.7Hz, 1H), 8.02 – 7.96 (m, 1H), 6.94 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.79 (d, J = 11.4 Hz,1H), 6.74 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.01 (dt, J = 11.4, 7.6 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H),3.33 (dd, J = 7.8, 1.2 Hz, 2H), 1.21 – 1.12 (m, 3H), 1.00 (d, J = 7.0 Hz,18H)。
(MM-1-86) 将甲酯MM-1-85 (500 mg, 1.06 mmol)溶于4:1:1的THF/MeOH/H2O混合物(共12 mL)中。一次性加入LiOH•H2O (180 mg, 4.25 mmol, 4.00当量)。30分钟后，加入1 N HCl (5 mL)，接着加入0.1 N HCl直至反应 pH = 3，此时观察到产物沉淀。水相用EtOAc (3 × 25 mL)萃取，合并的萃取液用饱和NaCl水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，轻轻倒出并浓缩，得到480 mg (99%)羧酸，缺乏甲硅烷基醚。
(MM-1-87) 胺与酸偶联的通用程序如下：使用了烯烃羧酸MM-1-86 (300 mg,0.66 mmol, 1.00当量)、HoPhe-OtBu (155 mg, 0.66 mmol, 1.00当量)、HOAt (99 mg,0.72 mmol, 1.10当量)、2,6-二甲基吡啶(0.385 mL, 3.29 mmol, 5.00当量)和EDCI•HCl(133 mg, 0.69 mmol, 1.05当量)。快速柱色谱(SiO2, 20% EtOAc/己烷)得到292 mg(86%)酰胺产物。1H NMR (Z, 主要异构体, 300 MHz, CDCl3) δ 8.03 (d, J = 8.5 Hz,1H), 7.83 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 8.4, 1.9 Hz, 1H), 7.41 – 7.19(m, 5H), 7.11 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.00 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.87 (d, J =11.4 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.08 (dt, J = 11.4, 7.5 Hz, 1H), 4.85(td, J = 7.4, 3.5 Hz, 1H), 3.44 – 3.33 (m, 2H), 2.88 – 2.73 (m, 2H), 2.38(ddd, J = 13.2, 9.4, 5.3 Hz, 1H), 2.22 (dd, J = 14.6, 7.4 Hz, 1H), 1.61 (s,9H)。
(MM-1-89) 用Pearlman氏催化剂的氢化的通用程序如下：硝基烯烃MM-1-87 (150mg, 0.290 mmol)，Pd(OH)2 (50 mg, 20%重量Pd)，在EtOAc (5 mL)中。过滤、浓缩和快速色谱(SiO2, 40 → 50% EtOAc/己烷)得到115 mg (81%)完全还原的苯胺产物。 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 7.59 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 8.3, 2.1 Hz, 1H), 7.39– 7.20 (m, 5H), 7.05 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.93 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.89 (d,J = 8.4 Hz, 2H), 6.62 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.90 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 3.99 (s,2H), 2.81 (dd, J = 7.0, 2.8 Hz, 1H), 2.63 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.52 – 2.42(m, 2H), 2.37 (tdd, J = 11.7, 5.7, 3.5 Hz, 1H), 2.28 – 2.16 (m, 1H), 1.96 –1.82 (m, 2H), 1.60 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C30H37N2O4)[M+H]+ ：489.2748，实测值：489.2753。
(MM-1-22) 在具有搅拌棒的25 mL圆底烧瓶中将3-羟基-4-硝基苯甲酸(272 mg,1.49 mmol)、HoPhe-OtBu (350 mg, 1.49 mmol, 1.00当量)和HOAt (223 mg, 1.64 mmol,1.10当量)混合。加入无水DMF (8 mL)和2,6-二甲基吡啶(0.87 mL, 7.44 mmol, 5.00当量)，搅拌混合物直至试剂溶解。加入EDCI•HCl (300 mg, 1.56 mmol, 1.05当量)，将混合物搅拌4小时，然后用EtOAc (30 mL)稀释。有机相用1 N HCl (3 × 15 mL)洗涤，再用H2O(10 mL)和饱和NaCl水溶液(20 mL)洗涤。经Na2SO4干燥后，将有机相轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 15 → 30% EtOAc/己烷)得到180 mg (30%)偶联的酰胺。1H NMR (300 MHz,CDCl3) δ 10.55 (s, 1H), 8.15 (dd, J = 8.8, 0.7 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 1.9,0.7 Hz, 1H), 7.36 – 7.16 (m, 5H), 6.70 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.82 – 4.70 (m,1H), 2.79 – 2.66 (m, 2H), 2.33 (m, 1H), 2.23 – 2.08 (m, 1H), 1.54 (s, 9H)。
(MM-1-28) 将装备有搅拌棒的烘干的50 mL圆底烧瓶中填装NaH (80 mg, 在矿物油中的60%分散体)。加入THF (5 mL)，并将混合物冷却至0℃。滴加4-(3-羟基丙基)苯酚(300 mg, 1.97 mmol)的THF (4 mL + 1 mL清洗)溶液。起泡停止后，将混合物升温至室温，并再加入5 mL THF。在室温下1小时后，加入TBSCl (312 mg, 2.07 mmol, 1.05当量)，将混合物再搅拌1小时，然后将混合物用Et2O (15 mL)稀释。将醚相用饱和NH4Cl (10 mL)和H2O(5 mL)洗涤。水相用Et2O (3 × 15 mL)萃取，合并的萃取液用饱和NaCl水溶液(10 mL)、Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 30% EtOAc/己烷)得到377 mg (72%)甲硅烷基醚。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.05 (s, J = 8.4 Hz, 2H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz,2H), 3.67 (m, 2H), 2.64 (dd, J = 8.5, 6.8 Hz, 2H), 1.95 – 1.79 (m, 2H), 0.99(s, 9H), 0.20 (s, 6H)。
(MM-1-27) 将TBS-醚MM-1-28 (200 mg, 0.751 mmol)和三苯膦(197 mg, 0.751mmol, 1.00当量)溶于无水CH2Cl2 (4 mL)。冷却至0℃后，加入咪唑(61 mg, 0.901 mmol,1.20当量)，将混合物搅拌直至碱溶解。滴加碘(200 mg, 0.788 mmol, 1.05当量)在CH2Cl2(4 mL)中的溶液。碘加完后，反应混合物保持橙色。在0℃ 20分钟后，反应物用Na2S2O3•5H2O(5 mL, 10% w/v)猝灭。水相用CH2Cl2 (5 mL)萃取1次，合并的有机相用饱和NaCl水溶液(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 10% EtOAc/己烷)得到229 mg(81%)烷基碘。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.08 – 7.02 (m, 2H), 6.80 – 6.73 (m,2H), 3.17 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.66 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.11 (p, J = 6.8 Hz,2H), 0.99 (s, 9H), 0.20 (s, 6H)。
(MM-1-31) 将装备有回流冷凝器的50 mL圆底烧瓶中填装4-(4-甲氧基苯基)丁酸(5.00 g, 25.7 mmol)。加入HBr水溶液(48%溶液, 大约6 mL)。将聚乙烯线从冷凝器顶端提供到通风橱后面，让HBr完全排出。将反应混合物加热至回流6小时。冷却至大约50℃后，将混合物倒入冷却的H2O (45 mL)中，导致产物立即沉淀，为白色固体针状物。在0℃ 1小时后，将混合物真空过滤，收集针状物，得到3.86 g (83%)酚产物。1H NMR (300 MHz, 丙酮-d 6) δ 10.48 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.07 – 6.99 (m, 2H), 6.79 – 6.71 (m, 2H),2.60 – 2.50 (m, 2H), 2.29 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.92 – 1.77 (m, 2H)。
(MM-1-34) 将羧酸MM-1-31 (1.00 g, 5.55 mmol)溶于无水THF (10 mL)和冷却至0℃。滴加氢化铝锂(1.0 M在THF中, 12 mL)。加入额外的15 mL THF，并将不均匀的混合物加热至回流。2小时后，将混合物冷却至室温并让其搅拌过夜(大约19小时)。Fieser后处理: H2O (1 mL)、NaOH水溶液(15% w/v, 1 mL)和H2O (3 mL)分别加入。20分钟后，将混合物过滤，Al2O3滤饼用Et2O (3 × 50 mL)洗涤，将醚相浓缩，得到700 mg (76%)伯醇。1H NMR(300 MHz, 丙酮-d 6) δ 8.07 (s, 1H), 7.01 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.74 (d, J = 8.5Hz, 2H), 3.56 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.52 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.55 (m, 4H)。
(MM-1-35) 将装备有搅拌棒的烘干的100 mL圆底烧瓶中填装NaH (145 mg, 在矿物油中的60%分散体)。加入THF (10 mL)，并将混合物冷却至0℃。滴加伯醇MM-1-34 (600mg, 3.61 mmol)的THF (6 mL + 2 mL清洗)溶液。起泡停止后，将混合物升温至室温，并再加入6 mL THF。在室温下1小时后，加入TBSCl (570 mg, 3.79 mmol, 1.05当量)，并将混合物再搅拌1小时，然后将混合物用Et2O (30 mL)稀释。醚相用饱和NH4Cl (20 mL)和H2O (10mL)洗涤。水相用Et2O (3 × 20 mL)萃取，合并的醚萃取液用饱和NaCl水溶液(20 mL)、Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 30% EtOAc/己烷)得到412 mg (41%)甲硅烷基醚。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.07 – 7.00 (m, 2H), 6.78 – 6.73 (m, 2H), 3.66(t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.58 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.74 – 1.53 (m, 2H), 0.99 (s,9H), 0.19 (s, 6H)。
(MM-1-36) 将TBS-醚MM-1-35 (300 mg, 1.07 mmol)和三苯膦(281 mg, 1.07mmol, 1.00当量)溶于无水CH2Cl2 (6 mL)。冷却至0℃后，加入咪唑(87 mg, 1.28 mmol,1.20当量)，并将混合物搅拌直至碱溶解。滴加碘(285 mg, 1.12 mmol, 1.05当量)的CH2Cl2(4 mL)溶液。碘加完后，反应混合物保持橙色。在0℃ 20分钟后，反应物用Na2S2O3•5H2O (8mL, 10% w/v)猝灭。水相用CH2Cl2 (10 mL)萃取1次，合并的有机相用饱和NaCl水溶液(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 10% EtOAc/己烷)得到343 mg(82%)烷基碘。
(MM-1-427) 将芳基硝基酚MM-1-22 (30 mg, 0.075 mmol)和烷基碘MM-1-27 (30mg, 0.080 mmol, 1.05当量)溶于无水DMF (0.375 mL)。加入K3CO3 (31 mg, 0.225 mmol,3.00当量)，将不均匀的混合物搅拌过夜(大约18小时)，然后反应混合物从橙色变为黄色。将混合物用EtOAc (5 mL)稀释并用饱和NH4Cl (5 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 25% EtOAc/己烷)得到32 mg (67%) SN2烷基化产物。
(MM-1-428) 将芳基硝基酚MM-1-22 (30 mg, 0.075 mmol)和烷基碘MM-1-35 (31mg, 0.080 mmol, 1.05当量)溶于无水DMF (0.375 mL)。加入K3CO3 (31 mg, 0.225 mmol,3.00当量)，并将不均匀混合物搅拌过夜，然后反应混合物从橙色变为黄色。将混合物用EtOAc (5 mL)稀释并用饱和NH4Cl (5 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 25% EtOAc/己烷)得到36 mg (72%) SN2烷基化产物。
(MM-1-429) 将硝基芳烃MM-1-427 (20 mg, 0.0308 mmol)溶于丙酮(0.5 mL)。将锌纳米粉末(30 mg, 0.462 mmol, 15当量)悬于介质中并进行剧烈搅拌。滴加饱和NH4Cl(0.1 mL)，产生锌盐沉淀。20分钟后，混合物用EtOAc (10 mL)稀释并通过1 cm Celite塞过滤，用EtOAc洗涤。滤液用饱和NaHCO3 (5 mL)洗涤，有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。将所得残余物溶于TBAF (0.200 mL, 1 M在THF中)。20分钟后，将混合物再用EtOAc (10mL)稀释并用H2O (10 mL)洗涤。经Na2SO4干燥后，将萃取液轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 40% EtOAc/己烷)得到11 mg (71%)所需产物，为白色泡沫。1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.32 – 7.23 (m, 2H), 7.19 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 7.11 (dd, J = 8.1,1.8 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.65 (d, J =8.1 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.79 (td, J = 7.1, 5.1 Hz, 1H), 4.24 –4.05 (br s, 2H), 4.01 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.71 (m, 4H), 2.34 – 2.22 (m, 1H),2.15 – 2.01 (m, 3H), 1.52 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C30H37N2O5)[M+H]+：505.2697，实测值：505.2694。
(MM-1-430) 将硝基芳烃MM-1-428 (22 mg, 0.0332 mmol)溶于丙酮(0.5 mL)。将锌纳米粉末(33 mg, 0.462 mmol, 15当量)悬于介质中并进行剧烈搅拌。滴加饱和NH4Cl(0.1 mL)，产生ppt.锌盐。20分钟后，混合物用EtOAc (10 mL)稀释并并通过1 cm Celite塞过滤，用EtOAc洗涤。滤液用饱和NaHCO3 (5 mL)洗涤，有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。将所得残余物溶于TBAF (0.200 mL, 1 M在THF中)。20分钟后，将混合物再用EtOAc (10mL)稀释并用H2O (10 mL)洗涤。经Na2SO4干燥后，将萃取液轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 40% EtOAc/己烷)得到13 mg (76%)所需产物，为白色泡沫。1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.37 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 5.6, 2.0 Hz, 2H), 7.26 (dd,J = 7.8, 1.6 Hz, 3H), 7.16 (dd, J = 8.1, 1.8 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 8.3 Hz,2H), 6.84 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.71 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 4.86 (td, J = 7.1,5.2 Hz, 1H), 4.19 (br s, 2H), 4.00 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.90 – 2.69 (m, 2H),2.63 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.42 – 2.30 (m, 1H), 2.22 – 2.10 (m, 1H), 1.91 –1.71 (m, 4H), 1.59 (s, 9H)。HRMS (ESI-TOF) m/z计算值(C31H39N2O5)[M+H]+：519.2853，实测值：519.2857。
(MRS-3-49) 将3-甲酰基-4-硝基苯甲酸甲酯(1.20 g, 5.73 mmol)溶于MeOH (10mL)和冷却至0℃。一次性加入硼氢化钠(69 mg, 1.72 mmol)，将反应混合物搅拌20分钟。还原反应用1 N HCl (10 mL)猝灭并真空蒸发甲醇部分。水相用CH2Cl2 (3 × 10 mL)萃取，得到1.06 g苄醇，其无需进一步纯化就使用。
(MRS-3-53) 将苄醇MRS-3-49 (1.06 g, 5.35 mmol)溶于Et2O (15 mL)和冷却至0℃。小心滴加三溴化磷(0.254 mL, 2.67 mmol)。1小时后，将反应混合物倒入冰水(50 mL)和用Et2O (3 × 20 mL)萃取。醚相用饱和NaHCO3 (20 mL)、水(10 mL)和饱和NaCl水溶液(10 mL)洗涤，并经Na2SO4干燥。蒸发Et2O，得到440 mg (30%)伯烷基溴化物。
(MRS-3-57) 将苄基溴MRS-3-49 (150 mg, 0.547 mmol, 1.00当量)和4-((三异丙基甲硅烷基)氧基)苯酚(175 mg, 0.656 mmol, 1.20当量)溶于丙酮(10 mL)。加入碳酸钾(113 mg, 0.820 mmol, 1.50当量)，将混合物回流加热过夜(大约18小时)。蒸发溶剂和快速色谱(SiO2, 5% EtOAc/己烷)得回170 mg (68%)烷基化产物和50 mg起始溴化物。
(MRS-3-59) 将TIPS-醚MRS-3-57 (170 mg, 0.370 mmol)溶于THF/MeOH/H2O (4mL: 1 mL: 1 mL)。一次性加入LiOH•H2O (1.48 mmol, 4.00当量)，将反应物搅拌1小时，然后通过TLC观察到反应完成。用H2O (10 mL)稀释后，将混合物用Et2O (10 mL)洗涤以除去甲硅烷基醇副产物。水相用1 N HCl酸化至pH 大约1，然后用EtOAc (3 × 10 mL)萃取。EtOAc萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。向所得残余物中加入HoPhe-OtBu (122 mg, 0.518mmol, 大约1.00当量)、HOAt (85 mg, 0.622 mmol, 1.20当量)和2,6-二甲基吡啶(0.180mL, 1.55 mmol, 3.00当量)，将混合物溶于无水DMF (2.5 mL)。加入EDCI•HCl (119 mg,0.622 mmol, 1.20当量)，将反应物搅拌过夜(大约18小时)。将混合物用EtOAc (10 mL)稀释并用0.1 N HCl (10 mL)、饱和NaHCO3 (10 mL)和饱和NaCl水溶液(5 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到偶联的酰胺，其不经进一步纯化。
(MRS-3-73) 将芳基硝基MRS-3-59 (48 mg, 0.094 mmol)溶于丙酮(0.4 mL)。将Zn纳米粉末(62 mg, 0.94 mmol, 10当量)悬于混合物中并剧烈搅拌。缓慢加入饱和NH4Cl(0.1 mL)。20分钟后，将混合物通过棉花过滤，用EtOAc (5 mL)稀释并用饱和NaHCO3 (5mL)和饱和NaCl水溶液(2 mL)洗涤。快速色谱(SiO2, 50% EtOAc/己烷)得到40 mg (91%)苯胺产物。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 8.22 (s, 1H), 8.17 (d, J = 7.8 Hz, 1H),7.70 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.30 – 7.20 (m, 5H), 6.90 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.80(d, J = 6.9 Hz, 2H), 5.40 (s, 2H), 4.80 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 2.70 – 2.65 (m,2H), 2.50 – 2.30 (m, 1H), 2.25 – 2.10 (m, 1H), 1.52 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C28H30N2O7+Na]+ ：529.2；实测值：529.2。
(MRS-2-53) 将3-甲酰基-4-硝基苯甲酸甲酯(500 mg, 2.39 mmol, 市售得自Aldrich)溶于MeOH (12 mL)和冷却至0℃。加入硼氢化钠(28 mg, 0.700 mmol, 0.3当量)，并将混合物搅拌20分钟。加入水(10 mL)并将混合物升温至室温并用EtOAc (30 mL)稀释。用EtOAc (15 mL)萃取1次后，合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到450 mg (89%)苄醇，其无需进一步纯化就使用。
(MRS-2-55) 将苄醇MRS-2-53 (615 mg, 2.91 mmol)溶于无水Et2O (15 mL)和冷却至0℃。缓慢滴加三溴化磷(0.138 mL, 1.45 mmol, 0.5当量)到搅拌溶液中。在0℃ 40分钟后，将反应物用饱和NaHCO3 (20 mL)猝灭并将混合物用EtOAc稀释。水相用EtOAc (10mL)萃取1次，合并的萃取液经Na2SO4干燥和浓缩。快速色谱(SiO2, 25% EtOAc/己烷)得到240 mg (30%)苄基溴。
(MRS-2-497) 将苄基溴MRS-2-55 (170 mg, 0.620 mmol)和芳基硼酸MM-1-188(274 mg, 0.930 mmol, 1.50当量)溶于丙酮/H2O (3:1, 4 mL)。加入碳酸钾(214 mg,1.55 mmol, 2.50当量)和PdCl2 (5.5 mg, 0.03 mmol, 5 mol%)，将反应混合物在室温下搅拌1小时。反应混合物通过Celite过滤，用EtOAc洗涤并浓缩。快速色谱(SiO2, 25%EtOAc/己烷)得到160 mg (58%)交叉偶联的产物。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 8.20(d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.80 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 7.2Hz, 2H), 6.65 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.25 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 1.30 – 1.20(m, 3H), 1.09 (d, J = 7.1 Hz, 18H)；MS-ESI (m/z)计算值[C24H33NO5Si+H]+ ：444.2；实测值：444.2。
(MRS-2-498) 将TIPS-醚MM-1-188 (160 mg, 0.360 mmol)溶于THF/MeOH/H2O (4mL: 1 mL: 1 mL)。一次性加入LiOH•H2O (1.44 mmol, 4.00当量)，将反应物搅拌1小时，然后通过TLC观察到反应完成。用H2O (10 mL)稀释后，将混合物用Et2O (10 mL)洗涤以除去甲硅烷基醇副产物。水相用1 N HCl酸化至pH大约1，然后用EtOAc (3 × 10 mL)萃取。萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩，得到130 mg水解产物。
(MRS-3-1) 将羧酸MRS-2-498 (130 mg, 0.475 mmol)和HoPhe-OtBu (112 mg,0.475 mmol, 1.00当量)溶于无水DMF。加入HOAt (78 mg, 0.570 mmol, 1.20当量)、2,6-二甲基吡啶(0.165 mL, 1.42 mmol, 3.00当量)和EDCI•HCl (109 mg, 0.570 mmol, 1.20当量)。12小时后，将反应混合物用0.1 N HCl (10 mL)洗涤和用EtOAc (3 × 10 mL)萃取，经Na2SO4干燥，过滤和浓缩。快速色谱(SiO2, 25% EtOAc/己烷)得到120 mg (51%)偶联酰胺。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 8.15 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 7.6 Hz,1H), 7.45 (s, 1H), 7.30 – 7.20 (m, 5H), 7.00 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.60 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 4.25 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 3.46 (s, 2H), 2.80 (t, J = 7.1 Hz,2H), 2.70 – 2.50 (m, 2H), 1.45 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C28H30N2O6+H]+ ：491.2；实测值：491.2。
(MRS-3-5) 将酰胺MRS-3-1 (120 mg, 0.244 mmol)溶于丙酮/NH4Cl (分别为4mL, 1 mL)。将锌纳米粉末(159 mg, 2.44 mmol, 10当量)悬于反应混合物中。剧烈搅拌1小时后，将反应混合物通过Celite过滤，用EtOAc (10 mL)稀释并用饱和NaHCO3 (10 mL)和饱和NaCl水溶液(5 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，过滤和浓缩。快速色谱(SiO2, 25% EtOAc/己烷)得到90 mg (80%)苯胺化合物。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 9.10 (s, 1H), 8.10(d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.40 – 7.25 (m,5H), 7.00 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.65 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 5.40 (s, 2H), 4.15(q, J = 6.6 Hz, 1H), 3.46 (s, 2H), 2.85 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.70 – 2.50 (m,2H), 1.49 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C28H32N2O4+H]+ ：461.2；实测值：461.2。
按照以下文献所述的程序制备了4-((三异丙基甲硅烷基)氧基)苯硫酚(以上)：Bubert等人, ChemMedChem, 3:1708–1730 (2008)。
(MRS-1-500) 在室温下将4-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-苯硫酚(710 mg, 2.51mmol, 0.93当量)溶于无水DMF (10 mL)。加入K2CO3 (420 mg, 3.08 mmol, 1.14当量)，将混合物搅拌15分钟。滴加3-氟-4-硝基苯甲酸(500 mg, 2.70 mmol, 在4 mL DMF中的溶液)，让混合物搅拌过夜(大约18小时)，然后用饱和NH4Cl (15 mL)猝灭并用EtOAc (30 mL)稀释。有机相用0.1 N HCl (2 × 10 mL)进一步洗涤，将合并的水相用EtOAc (2 × 10mL)萃取。萃取液经Na2SO4干燥，过滤和浓缩。快速色谱(3:2:0.1己烷:Et2O:AcOH)得到810mg (72%)加合物。
(MRS-2-1) 将羧酸MRS-1-500 (150 mg, 0.514 mmol)、HoPhe-OtBu (121 mg,0.514 mmol, 1.00当量)和HOAt (84 mg, 0.617 mmol, 1.20当量)溶于无水DMF (15 mL)。加入2,6-二甲基吡啶(0.11 mL, 1.54 mmol, 3.00当量)和EDCI•HCl (118 mg, 0.617mmol, 1.20当量)，将混合物搅拌过夜。反应混合物用EtOAc (25 mL)稀释并用0.1 N HCl(20 mL)、饱和NaHCO3 (20 mL)和饱和NaCl水溶液(10 mL)洗涤，并浓缩有机相。快速色谱(SiO2, 25% EtOAc/己烷)得到200 mg (76%)偶联酰胺。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ8.30 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.40 – 7.21 (m, 6H), 7.15 (d, J = 7.5Hz, 2H), 6.95 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 4.80 – 4.73 (m, 1H), 2.72 (t, J = 6.9 Hz,2H), 2.50 – 2.30 (m, 2H), 1.50 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C27H28N2O6S+H]+ ：509.1；实测值：509.2。
(MRS-2-7) 将硝基芳烃MRS-2-1 (180 mg, 0.270 mmol)溶于丙酮/饱和NH4Cl(分别为10 mL, 2 mL)。加入锌纳米粉末(230 mg, 3.51 mmol, 13当量)，将反应混合物搅拌30分钟。将不均匀的混合物通过Celite过滤，用EtOAc (30 mL)稀释并用饱和NaHCO3 (20mL)洗涤。有机相用饱和NaCl水溶液(10 mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到125 mg (97%)苯胺。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 8.30 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.60(d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.45-7.25 (m, 5H), 7.00 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 6.65 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 5.80 (s, 2H), 4.25 – 4.10 (m, 1H), 2.80 (t, J = 7.1 Hz, 2H),2.70 – 2.50 (m, 2H), 1.45 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C27H30N2O4S+H]+ ：479.2；实测值：479.2。
(MRS-2-33) 将3-氟-4-硝基苯甲酸(720 mg, 3.89 mmol)溶于PhMe:MeOH (各8mL)和冷却至0℃。在5分钟内滴加(重氮甲基)三甲基硅烷(4.3 mL, 8.56 mmol, 2.2当量,2 M在正己烷中)。将反应混合物搅拌30分钟，然后用缓慢加入AcOH而猝灭。真空除去溶剂，残余物通过快速色谱法纯化(SiO2, 10% EtOAc/己烷)，得到770 mg (99%)甲酯。
(MRS-2-35) 将甲酯MRS-2-33 (500 mg, 2.51 mmol)溶于DMSO (10 mL)。加入4-(苄氧基)苯胺(1.18 g, 5.02 mmol, 2.00当量)，将反应混合物加热至110℃达6小时。将反应物冷却至室温并用EtOAc稀释。有机层用H2O和饱和NaCl水溶液洗涤，经MgSO4干燥，过滤和浓缩。快速色谱(SiO2, 10% EtOAc/己烷)得到864 mg (91%)联芳基苯胺。[Saitoh.等人,J.Med.Chem.52:6270–6276 (2009)。]
按照以下文献所述的方法制备了4-(苄氧基)苯胺：Yang等人,Bioorg.Med.Chem.Lett.,18:1135–1139 (2008)。
(MRS-2-33) 将3-氟-4-硝基苯甲酸(720 mg, 3.89 mmol)溶于甲苯:MeOH (1:1v/v)和冷却至0℃。在5分钟内滴加三甲基甲硅烷基-重氮甲烷(4.3 mL, 8.56 mmol, 2 M在正己烷中)。搅拌30分钟后，将AcOH缓慢加入到反应混合物中直至N2放出停止，减压除去溶剂。快速色谱(SiO2, 10% EtOAc/己烷)得到770 mg (99%)芳基氟化物甲酯。
(MRS-2-35) 将芳基氟化物甲酯MRS-2-33 (500 mg, 2.51 mmol)和4-(苄氧基)苯胺(1.18 g, 5.02 mmol, 2.00当量)溶于DMSO (10 mL)和加热至110℃达6小时。冷却至室温后，反应混合物用EtOAc (50 mL)稀释并用H2O (50 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2, 10% EtOAc/己烷)得到865 mg (91%)联芳基苯胺。
(MRS-3-9) 将羧酸XX (150 mg, 0.411 mmol)、HoPhe-OtBu (97 mg, 0.411mmol, 1.00当量)和HOAt (67 mg, 0.494 mmol, 1.2当量)溶于无水DMF (2 mL)。加入2,6-二甲基吡啶(0.143 mL, 1.23 mmol, 3.00当量)和EDCI•HCl (95 mg, 0.494 mmol, 1.20当量)，将混合物搅拌过夜(大约18小时)。反应混合物用EtOAc (10 mL)稀释并用0.1 N HCl(10 mL)、饱和NaHCO3 (10 mL)和饱和NaCl水溶液(5 mL)洗涤，并浓缩有机相。快速色谱(SiO2, 25% EtOAc/己烷)得到155 mg (65%)偶联酰胺。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ8.20 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.40 – 7.20 (m, 13H), 7.00 (d, J =7.5 Hz, 2H), 5.10 (s, 2H), 4.80 – 4.70 (m, 1H), 2.72 – 2.60 (m, 2H), 2.25 –2.20 (m, 1H), 2.10 – 2.00 (m, 1H), 1.40 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C34H35N3O6+H]+ ：582.2；实测值：582.2。
(MRS-3-71) 将硝基芳基苄基醚MM-3-9 (80 mg, 0.138 mmol)溶于MeOH (1.0mL)。将披钯碳(5 mol%, 在碳上的20%重量Pd)悬于反应溶剂，将溶剂用N2喷雾10分钟。在H2气氛下搅拌2小时后，将混合物通过沙/Celite塞过滤，用EtOAc充分洗涤。真空除去溶剂，得到完全还原的苯胺。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 8.25 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.90(s, 1H), 7.45 – 7.21 (m, 8H), 7.10 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 5.80 (s, 2H), 4.83 –4.70 (m, 1H), 2.70 – 2.60 (m, 2H), 2.35 – 2.20 (m, 1H), 2.10 – 2.00 (m, 1H),1.45 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C27H31N3O4+H]+ ：462.2；实测值：462.2。
HoPhe类似物中间体制备
(MM-2-84) 在密封管反应容器中，将H-Nva(5-Ph)-OH (500 mg, 2.59 mmol)悬于无水二噁烷(5 mL)中。加入浓H2SO4 (200 μL)，并将混合物冷却至–78℃。将缩合的异丁烯(大约4 mL)经由插管转移到冷冻的反应混合物上。将反应容器严密地密封并升温至室温过夜(大约18小时)。搅拌2天后，缓慢释放压力，将混合物用Et2O (50 mL)稀释并用饱和NaHCO3(25 mL)洗涤。水相用Et2O (2 × 25 mL)萃取，合并的醚相经Na2SO4干燥并彻底浓缩。作为黄色油状物得到的H-Nva(5-Ph)-OtBu (464 mg, 72%)无需进一步纯化就使用。1H NMR(500 MHz, CDCl3) δ 7.30 – 7.25 (m, 2H), 7.21 – 7.16 (m, 3H), 3.37 – 3.28 (m,1H), 2.65 (m, 2H), 1.71 (m, 4H), 1.45 (s, 9H)。
(MM-2-68) 将4-苯基-1-丁醇(543 mg, 3.58 mmol)溶于CH2Cl2 (20 mL)。加入咪唑(810 mg, 11.8 mmol, 3.00当量)，接着加入PPh3 (986 mg, 3.76 mmol, 1.05当量)。当PPh3完全溶解后，分批加入碘(1.00 g, 3.94 mmol, 1.10当量)。1小时后，反应用Na2S2O3(10% w/v, 15 mL)猝灭。水层用CH2Cl2 (10 mL)萃取1次，经Na2SO4干燥，轻轻倒出并浓缩，得到白色固体。将固体用正戊烷(3 × 15 mL)研磨和通过6 cm二氧化硅塞过滤，用50%EtOAc/正戊烷洗涤以除去氧化膦。真空除去溶剂，得到烷基碘(868 mg, 93%)，为澄清油状物。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.34 – 7.27 (m, 2H), 7.25 – 7.17 (m, 3H), 3.22(t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.66 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 1.93 – 1.83 (m, 2H), 1.82 –1.70 (m, 2H)。
(MM-2-71) 在装备有冷凝器的50 mL双颈圆底烧瓶中，将氢化钠(350 mg, 在矿物油中的60%分散体)小心加入到EtOH (20 mL)。冷却至室温后，加入乙酰氨基丙二酸二乙酯(1.38 g, 6.34 mmol)并将混合物加热至回流。回流15分钟后，滴加4-苯基-1-碘丁烷(1.57g, 6.04 mmol)。回流16小时后，将混合物冷却至室温并倒入预冷却至0℃的0.05 M KHSO4(60 mL)/己烷(30 mL)中。产物在相界面结晶。过滤和自沸腾的己烷/EtOAc重结晶，得到736mg (35%)烷基化产物。[所采用的程序来自：Varnavas等人, J.Med.Chem. 54:5769–5785(2011)。]1H NMR (500 MHz, 丙酮-d 6) δ 7.25 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.20 – 7.11 (m,3H), 4.15 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.58 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.36 – 2.24 (m, 2H),1.96 (s, 3H), 1.68 – 1.55 (m, 2H), 1.18 (dt, J = 9.5, 5.8 Hz, 8H)。
(MM-2-72) 将按照Pevan等人, J.Med.Chem.,54:5769–5785 (2011)所述方法制备的烷基化产物MM-2-71 (700 mg, 2.00 mmol)悬于二噁烷和6 N HCl (各7 mL)中并将混合物加热至回流。3小时后，将反应混合物冷却至室温并在N2气流下去除溶剂。剩下的残余物用冷Et2O (10 mL)研磨并过滤，得到327 mg (67%)氨基酸盐酸盐。1H NMR (500 MHz,DMSO-d 6) δ 8.47 – 8.26 (br s, 1H), 7.27 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.23 – 7.12 (m,3H), 3.86 (q, J = 5.6 Hz, 1H), 3.64 – 3.23 (br s, 2H), 2.57 (t, J = 7.7 Hz,2H), 1.86 – 1.77 (m, 2H), 1.63 – 1.51 (m, 2H), 1.51 – 1.39 (m, 1H), 1.39 –1.27 (m, 1H)。
(MM-2-76) 将铵盐MM-2-72 (325 mg, 1.34 mmol)悬于无水二噁烷(5 mL)。加入浓H2SO4 (大约0.2 mL)，然后溶解原料。将反应混合物冷却至–78℃，并经由插管加入缩合的异丁烯(5 mL)。将反应容器严密地密封，升温至室温和搅拌4天。缓慢释放压力，并将混合物倒入Et2O (50 mL)。醚相用饱和NaHCO3 (50 mL)洗涤。水相用Et2O (2 × 15 mL)萃取，合并的醚层经Na2SO4干燥，轻轻倒出并浓缩，得到叔丁酯MM-2-76 (284 mg, 80%)，其无需进一步纯化就使用。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.31 – 7.24 (m, 2H), 7.21 – 7.14 (m, 3H),3.36 (dd, J = 7.2, 5.6 Hz, 1H), 2.63 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.19 (s, 2H), 1.80– 1.55 (m, 4H), 1.48 – 1.40 (m, 2H), 1.44 (s, 9H)。
(MM-1-448) 将Boc-HoPhe-OH (427 mg, 1.53 mmol, 1.00当量)溶于无水异丙醇和冷却至0℃。滴加亚硫酰氯(155 μL, 2.14 mmol, 1.40当量)，并将混合物搅拌过夜(大约18小时)，升温至室温。反应用饱和NaHCO3 (10 mL)和H2O (10 mL)猝灭并用Et2O (20 mL)稀释。水相用Et2O (5 × 10 mL)萃取，合并的萃取液经Na2SO4干燥，轻轻倒出并浓缩，得到150mg (44%)异丙酯。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.33 – 7.26 (m, 2H), 7.24 – 7.17 (m,3H), 5.06 (七重峰, J = 6.3 Hz, 1H), 3.42 (dd, J = 7.7, 5.3 Hz, 1H), 2.73(ddd, J = 9.4, 6.5, 4.5 Hz, 2H), 2.06 (dddd, J = 13.4, 9.6, 6.9, 5.3 Hz, 1H),1.92 – 1.79 (m, 1H), 1.56 (s, 2H), 1.27 (d, J = 6.3 Hz, 2H)。
(MM-2-135) 在室温下在20 mL闪烁管中将Boc-HoPhe-OH (100 mg, 0.358mmol)、二环己基碳二亚胺(DCC, 78 mg, 0.376 mmol, 1.05当量)和4-二甲氨基吡啶(DMAP, 9 mg, 0.072 mmol, 0.200当量)溶于CH2Cl2 (2 mL)。加入叔戊醇(400 μL, 3.58mmol, 10当量)，并将反应混合物搅拌2天。将浑浊混合物通过3 cmCelite塞过滤，用CH2Cl2(10 mL)稀释并用柠檬酸水溶液(10%w/v, 10 mL)和饱和NaHCO3洗涤。卤化相经Na2SO4干燥，轻轻倒出，浓缩。快速色谱(SiO2, 5% EtOAc/己烷)返回83 mg (66%)叔戊酯。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.47 – 7.38 (m, 2H), 7.37 – 7.29 (m, 3H), 5.27 (d, J = 8.4 Hz,1H), 4.41 (td, J = 7.8, 4.9 Hz, 1H), 2.91 – 2.72 (m, 2H), 2.34 – 2.20 (m,1H), 2.05 (dddd, J = 13.9, 11.2, 7.5, 5.6 Hz, 1H), 1.93 (p, J = 7.2 Hz, 2H),1.60 (s, 9H), 1.59 (s, 6H), 1.04 (t, J = 7.5 Hz, 3H)。
(MM-2-137) 在装有搅拌棒的20 mL闪烁管中将叔戊酯MM-2-135 (73 mg, 0.209mmol)溶于EtOAc (2 mL)。滴加在二噁烷中的4 N HCl (0.5 mL, 大约10当量)。5小时后，移除搅拌棒并在N2气流下将溶剂浓缩过夜(大约18小时)，得到51 mg (86%)铵盐，为白色粉末。
(MM-2-118) 在室温下，在20 mL闪烁管中将Boc-HoPhe-OH (100 mg, 0.358mmol)、二环己基碳二亚胺(DCC, 78 mg, 0.376 mmol, 1.05当量)和4-二甲氨基吡啶(DMAP, 9 mg, 0.072 mmol, 0.200当量)溶于CH2Cl2 (2 mL)。加入1-金刚烷醇(57 mg,0.376 mmol, 1.05当量)，并将反应混合物搅拌24小时。浑浊混合物通过3 cmCelite塞过滤，用CH2Cl2 (10 mL)稀释并用柠檬酸水溶液(10% w/v, 10 mL)和饱和NaHCO3洗涤。卤化相经Na2SO4干燥，轻轻倒出，和浓缩。快速色谱(SiO2, 5至10% EtOAc/己烷)得到74 mg (50%)金刚烷酯。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.40 – 7.33 (m, 2H), 7.30 – 7.22 (m, 3H),5.18 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 2.78 (dt, J = 10.8, 6.5Hz, 1H), 2.71 (dt, J = 10.8, 6.5 Hz, 1H), 2.26 (m, 3H), 2.21 (d, J = 3.0 Hz,6H), 2.08 – 1.94 (m, 1H), 1.75 (d, J = 3.2 Hz, 6H), 1.54 (s, 9H)。
(MM-2-123) 将金刚烷酯MM-2-118 (74 mg, 0.179 mmol)溶于在二噁烷中的4 NHCl (2.0 mL, 大约45当量)。3小时后，移除搅拌棒，并在N2气流下将溶剂浓缩过夜(大约18小时)，得到61 mg (97%)铵盐，为白色粉末。
(MM-2-117) 在室温下，在20 mL闪烁管中将Boc-HoPhe-OH (100 mg, 0.358mmol)、二环己基碳二亚胺(DCC, 78 mg, 0.376 mmol, 1.05当量)和4-二甲氨基吡啶(DMAP, 9 mg, 0.072 mmol, 0.200当量)溶于CH2Cl2 (2 mL)。加入新戊醇(66 mg, 0.749mmol, 2.10当量)，并将反应混合物搅拌24小时。浑浊混合物通过3 cmCelite塞过滤，用CH2Cl2 (10 mL)稀释并用柠檬酸水溶液(10% w/v, 10 mL)和饱和NaHCO3洗涤。卤化相经Na2SO4干燥，轻轻倒出，和浓缩。快速色谱(SiO2, 5% EtOAc/己烷)得到83 mg (66%)新戊酯。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.30 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.23 – 7.15 (m, 3H), 5.09(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.40 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 3.83 (q, J = 10.5 Hz, 2H),2.76 – 2.60 (m, 2H), 2.17 (m, 1H), 1.98 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 0.96 (s, 9H)。
(MM-2-122) 将新戊酯MM-2-117 (83 mg, 0.238 mmol)溶于在二噁烷中的4 NHCl (2.0 mL, 大约34当量)。3小时后，移除搅拌棒，并在N2气流下将溶剂浓缩过夜(大约18小时)，得到58 mg (85%)铵盐，为白色粉末。
(MM-2-81) 在室温下，在无水DMF (4.5 mL)中将Boc-HoPhe-OH (250 mg, 0.895mmol)、氯化铵(150 mg, 2.69 mmol, 3.00当量)、HOAt (134 mg, 0.984 mmol, 1.10当量)和2,6-二甲基吡啶(520 μL, 4.47 mmol, 5.00当量)溶解。加入EDCI•HCl (180 mg, 0.940mmol, 1.05当量)，并将混合物搅拌2天。将混合物用EtOAc (50 mL)稀释并用0.1 N HCl (2× 25 mL)和饱和NaCl水溶液(10 mL)洗涤。水相用EtOAc (20 mL)萃取1次，合并的有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。残余材料重溶于EtOAc，用H2O再次洗涤并干燥，得到236 mg甲酰胺，为白色固体。
(MM-2-92) 将甲酰胺MM-2-81 (100 mg, 0.359 mmol)溶于EtOAc (4 mL)和冷却至0℃。滴加在二噁烷中的4 N HCl (1 mL)，并将混合物升温至室温。5小时后，在N2气流下除去溶剂，得到75 mg (97%)甲酰胺HCl盐。
(MM-2-89) 在室温下将Boc-HoPhe-OH (100 mg, 0.358 mmol)、DEPBT (118 mg,0.394 mmol, 1.10当量)和Et3N (100 μL, 0.716 mmol, 2.00当量)溶于无水THF (2 mL)。15分钟后，滴加叔丁胺(41 μL , 0.394 mmol, 1.10当量)。12小时后，将混合物用EtOAc(15 mL)稀释并用柠檬酸(10 mL, 10% w/v)和饱和NaHCO3 (20 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，过滤和浓缩。快速色谱(SiO2, 10% EtOAc/己烷)得到120 mg (99%)叔丁基酰胺。1H NMR(500 MHz, CDCl3) δ 7.22 (dd, J = 8.2, 6.9 Hz, 2H), 7.13 (td, J = 6.0, 3.3 Hz,3H), 6.18 (s, 1H), 5.42 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.01 (q, J = 8.0 Hz, 1H), 2.63(m, 1H), 2.09 – 2.00 (m, 1H), 1.88 (dt, J = 13.7, 7.9 Hz, 1H), 1.41 (s, 9H),1.30 (s, 9H)。
(MM-2-91) 在0℃将叔丁基酰胺MM-2-89 (60 mg, 0.179 mmol)溶于EtOAc (2mL)。滴加在二噁烷中的4 N HCl (0.5 mL, 大约11当量)。2小时后，移除搅拌棒并在N2气流下将溶剂浓缩过夜(大约18小时)，得到41 mg (98%)铵盐，为白色粉末。
(MM-2-113) 在室温下将Boc-HoPhe-OH (100 mg, 0.358 mmol)、DEPBT (118 mg,0.394 mmol, 1.10当量)和Et3N (100 μL, 0.716 mmol, 2.00当量)溶于无水THF (2 mL)。15分钟后，一次性加入1-金刚烷胺(60 mg, 0.394 mmol, 1.10当量)。12小时后，将混合物用EtOAc (15 mL)稀释并用柠檬酸水溶液(10 mL, 10% w/v)和饱和NaHCO3 (20 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，过滤和浓缩。快速色谱(SiO2, 20% EtOAc/己烷)得到132 mg (89%)金刚烷基酰胺。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42 – 7.33 (m, 2H), 7.28 (dt, J = 8.1,3.8 Hz, 3H), 5.71 (s, 1H), 5.17 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.03 (m, 1H), 2.86 –2.64 (m, 2H), 2.16 (t, J = 5.5 Hz, 3H), 2.07 (t, J = 2.6 Hz, 6H), 2.01 – 1.91(m, 1H), 1.80 – 1.70 (m, 6H), 1.54 (d, J = 2.7 Hz, 9H)。
(MM-2-116) 将金刚烷基酰胺MM-2-113 (54 mg, 0.131 mmol)溶于在二噁烷中的4 N HCl (2.0 mL, 大约61当量)。3小时后，移除搅拌棒并将溶剂在N2气流下浓缩过夜(大约18小时)，得到46 mg (99%)铵盐，为白色粉末。
(MM-2-111) 在室温下将Boc-HoPhe-OH (100 mg, 0.358 mmol)、DEPBT (118 mg,0.394 mmol, 1.10当量)和Et3N (100 μL, 0.716 mmol, 2.00当量)溶于无水THF (2 mL)。15分钟后，一次性加入新戊胺(46 μL, 0.394 mmol, 1.10当量)。12小时后，将混合物用EtOAc (15 mL)稀释并用柠檬酸(10 mL, 10% w/v)和饱和NaHCO3 (20 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，过滤和浓缩。快速色谱(SiO2, 20% EtOAc/己烷)得到85 mg (68%)新戊基酰胺。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.33 – 7.26 (m, 2H), 7.20 (td, J = 7.6, 6.8 Hz,3H), 6.25 – 6.09 (m, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.05 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 3.06 (m,2H), 2.70 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 2.19 (m, 1H), 1.92 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 0.91(s, 9H)。
(MM-2-115) 将新戊基酰胺MM-2-111 (46 mg, 0.132 mmol)溶于在二噁烷中的4N HCl (2.0 mL, 大约60当量)。3小时后，移除搅拌棒并在N2气流下将溶剂浓缩过夜(大约18小时)，得到40 mg (99%)铵盐，为白色粉末。
(MM-2-109/150/151/152/154) 正己基胺的代表性程序：在室温下，将Boc-HoPhe-OH (100 mg, 0.358 mmol)、正己基胺(47 μL, 0.358 mmol, 1.00当量)、HOAt (54 mg,0.394 mmol, 1.10当量)和2,6-二甲基吡啶(208 μL, 1.79 mmol, 5.00当量)溶于无水DMF(2 mL)。加入EDCI•HCl (72 mg, 0.376 mmol, 1.05当量)，并将混合物搅拌过夜。 混合物用EtOAc (20 mL)稀释并用0.1 N HCl (2 × 10 mL)和饱和NaCl水溶液(10 mL)洗涤。水相用EtOAc (10 mL)萃取1次，合并的有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(SiO2,20% EtOAc/己烷)返回85 mg (65%)己基酰胺。通过相同程序，得到了122 mg (87%)正辛基酰胺，140 mg (94%)正癸基酰胺，148 mg (93%)正十二烷基酰胺，和156 mg (92%)正十四烷基酰胺。1H NMR (MM-2-109, n = 1, 500 MHz, CDCl3) δ 7.31 – 7.24 (m, 2H), 7.21 –7.15 (m, 3H), 6.47 (s, 1H), 5.36 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.23 – 4.01 (m, 1H),3.34 – 3.13 (m, 2H), 2.68 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 2.22 – 2.05 (m, 1H), 1.94 (m,1H), 1.46 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.37 – 1.22 (m, 6H), 0.89 (t, J = 6.7 Hz,3H)。
1H NMR (MM-2-150, n = 3, 500 MHz, CDCl3) δ 7.32 – 7.25 (m, 2H), 7.23 –7.16 (m, 3H), 6.04 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.04 (m, 1H), 3.24 (q,J = 6.7 Hz, 2H), 2.68 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.15 (dq, J = 7.1, 6.6 Hz, 1H),1.93 (dt, J = 12.9, 7.7 Hz, 1H), 1.53 – 1.47 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.29 (m,10H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3H)。
1H NMR (MM-2-151, n = 5, 500 MHz, CDCl3) δ 7.31 – 7.26 (m, 2H), 7.22 –7.16 (m, 3H), 6.03 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 5.06 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.04 (q, J= 9.1 Hz, 1H), 3.24 (q, J = 6.7 Hz, 2H), 2.68 (t, J = 8.1 Hz, 2H), 2.15 (m,1H), 1.92 (m, 1H), 1.52 – 1.47 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.34 – 1.21 (m, 14H),0.88 (t, J = 6.9 Hz, 3H)。
1H NMR (MM-2-152, n = 7, 500 MHz, CDCl3) δ 7.31 – 7.26 (m, 2H), 7.22 –7.16 (m, 3H), 6.07 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.04 (d, J = 8.1 Hz,1H), 3.24 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 2.72 – 2.61 (m, 2H), 2.24 – 2.07 (m, 1H), 1.92(m, 1H), 1.49 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.27 (m, 18H), 0.89 (t, J =6.9 Hz, 3H)。
1H NMR (MM-2-154, n = 9, 500 MHz, CDCl3) δ 7.31 – 7.27 (m, 2H), 7.22 –7.16 (m, 3H), 6.05 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.04 (q, J = 6.9 Hz,1H), 3.24 (q, J = 6.7 Hz, 2H), 2.68 (t, J = 8.1 Hz, 2H), 2.15 (m, 1H), 1.92(m, 1H), 1.48 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.34 – 1.22 (m, 22H), 0.89(t, J = 6.8 Hz, 3H)。
(MM-2-114/153A-D) 正己基酰胺的代表性的程序：将己基酰胺MM-2-109 (72 mg,0.199 mmol)溶于在二噁烷中的4 N HCl (2.0 mL, 大约40当量)。3小时后，移除搅拌棒并在N2气流下将溶剂浓缩过夜(大约18小时)，得到57 mg (97%)胺HCl盐，为白色粉末。通过相同程序，得到了92 mg (90%)正辛基酰胺，107 mg (90%)正癸基酰胺，109 mg (86%)正十二烷基酰胺，和126 mg (93%)正十四烷基酰胺。
Neoseptin-4和其中间体/类似物的制备
将氢化钠(60%, 0.50 g, 12.4 mmol)悬于THF (10 mL)并在0℃，滴加2-[4-(三-异丙基-甲硅烷氧基)苯基]乙醇(0.67 mL, 6.48 mmol)。在0℃，在氩气氛下，将混合物搅拌15分钟，然后加入3-氟-4-硝基苯甲酸(1.0 g, 5.4 mmol)。将混合物在0℃搅拌5分钟并在室温下搅拌2小时，用饱和NH4Cl水溶液猝灭，用EtOAc稀释，和用HCl水溶液(0.1 M, × 2)萃取。收集有机层，浓缩，产物通过快速色谱法纯化(SiO2, 3:2:0.1己烷/Et2O/HOAc)，得到所述化合物，为固体(1.26 g, 85%)。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 11.78 (s, 1H),7.90 (d,J=8.3 Hz, 1H), 7.83 (d, J=6.1 Hz, 1H), 7.73 (dd, J=8.3, 1.6 Hz, 1H),7.24 (d, J=8.5 Hz, 2H), 6.86 (d, J=8.5 Hz, 2H), 4.45 (t, J=6.7 Hz, 2H), 3.08(t, J=6.7 Hz, 2H), 1.34-1.22 (m, 3H), 1.11 (d, J=7.2 Hz, 18H)；MS-ESI (m/z)计算值[C24H33NO6Si+Na]+ ：482.1969；实测值：482.1964.
在0.5打兰管中将上面化合物(95 mg, 0.30 mmol)与含HoPhe-OtBu (88 mg,0.35 mmol)的DMF (0.75 mL)混合。加入HOAt (61 mg, 0.45 mmol)、EDCI (69 mg, 0.36mmol)和2,6-二甲基吡啶(0.17 mL, 1.5 mmol)。在室温下搅拌12小时后，将反应混合物倒入1 N HCl水溶液。水层用EtOAc (2×)萃取。合并的ETOAc萃取液用1 N HCl水溶液、饱和NaHCO3水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，过滤和真空蒸发。快速色谱(SiO2)得到纯产物酰胺(90%)。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 7.80 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.50(s, 1H), 7.30-7.21 (m, 6H), 7.12 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.85 (d, J = 7.3 Hz,2H), 4.74-4.50 (m, 1H), 4.30 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.10 (t, J = 6.7 Hz, 2H),2.80-2.72 (m, 2H), 2.40-2.26 (m, 1H), 2.20- 2.11 (m, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.30-1.24 (m, 3H), 1.09 (d, J = 7.0 Hz, 18H)；MS-ESI (m/z)计算值[C38H52N2O7Si+H]+ ：677.3；实测值：677.3.
(MRS-2-477) 将先前的酰胺化合物(250 mg, 350 mmol)溶于无水THF (8 mL)并用TBAF (0.43 mL,在THF中的1M溶液, 1.20当量)处理。将反应混合物在室温下搅拌1小时，真空除去溶剂。残余物的快速色谱(25% EtOAc/己烷)得到166 mg (91%)酚产物MRS-2-477。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 7.82 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.40-7.11 (m, 8H), 6.85 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 5.40 (brs, 1H), 4.80-4.65 (m, 1H),4.38 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.10 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.80-2.72 (m, 2H), 2.50-2.30 (m, 1H), 2.25- 2.10 (m, 1H), 1.50 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C29H32N2O7+Na]+ ：543.2；实测值：543.2.
(MRS-2-481) 将芳基硝基化合物MRS-2-477 (120 mg, 0.23 mmol)溶于丙酮/饱和NH4Cl水溶液(1:1, 各5 mL)。将Zn纳米粉末(151 mg, 2.30 mmol, 10当量)分批加入该反应混合物，将其在室温下剧烈搅拌1小时。不均匀的混合物通过Celite过滤以去除Zn盐，滤液用EtOAc (50 mL)稀释并用H2O (50 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出并浓缩，得到113 mg (99%)苯胺化合物4 (Neoseptin-4)。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ9.30 (s,1H), 8.20 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.50-7.30 (m, 7H), 7.20 (d, J = 7.1 Hz, 2H),6.65 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 5.25 (s, 2H), 4.80 (q, J = 6.0 Hz, 1H), 4.18 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 3.00 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.70-2.65 (m, 1H), 2.55-2.50 (m,1H), 2.10- 2.00 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C29H34N2O5+H]+ ：491.2；实测值：491.2。
(MRS-2-491) 将MRS-2-481 (20 mg, 0.041 mmol)溶于4 N HCl/二噁烷(1 mL)，并将反应介质搅拌8小时。在N2气流下蒸发溶剂和过量HCl，得到17 mg (99%)羧酸5 MRS-2-491，其不经过纯化。
(MRS-3-23) 胺偶联的通用程序如下：使用了上述羧酸(120 mg, 0.261 mmol)、HoPhe-OEt (54 mg, 0.261 mmol, 1当量)、2,6-二甲基吡啶(0.91 mL, 0.783 mmol, 3当量)、HOAt (43 mg, 0.313 mmol, 1.2当量)和EDCI•HCl (60 mg, 0.313 mmol, 1.2当量)。快速色谱(25% EtOAc/己烷)得到150 mg (88%)偶联产物MRS-3-23。1H NMR (600 MHz,DMSO-d 6) δ 7.75 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.30-7.20 (m, 6H), 7.15(d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.50 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 4.74-4.60 (m, 1H), 4.30-4.15(m, 4H), 3.15 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.80-2.72 (m, 2H), 2.40-2.26 (m, 1H),2.20- 2.10 (m, 1H), 1.30-1.20 (m, 6H), 1.10 (d, J = 7.2 Hz, 18H)；MS-ESI (m/z)计算值[C36H48N2O7Si+H]+ ：649.3；实测值：649.3。
(MRS-3-29) 使用了锌-硝基还原的通用程序：使用了芳基硝基MRS-3-23 (150mg, 0.231 mmol)、Zn纳米粉末(150 mg, 2.31 mmol, 10当量)和丙酮/饱和NH4Cl水溶液(各5 mL)，得到130 mg (86%)苯胺MRS-3-29，其无需进一步纯化就使用。
(MRS-3-37) 将TIPS-醚MRS-3-29 (120 mg, 0.19 mmol)溶于无水THF (3 mL)并用TBAF (0.39 mL, 0.39 mmol, 2当量)处理。在室温下搅拌1小时后，将混合物用EtOAc(20 mL)稀释并用盐水(20 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(50%EtOAc/己烷)得到76 mg (85%)酚产物MRS-3-37。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 9.25 (s,1H), 8.40 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.50-7.30 (m, 7H), 7.20 (d, J = 8.1 Hz, 2H),6.50 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 5.30 (s, 2H), 4.45-4.30 (m, 1H), 4.20-4.05 (m, 4H),2.95 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.80-2.60 (m, 2H), 2.00- 1.90 (m, 2H), 1.20 (t, J =6.1 Hz, 3H)；MS-ESI (m/z)计算值[C27H30N2O5+H]+ ：463.2；实测值：463.2。
(MRS-3-31) 胺偶联的通用程序如下：使用了以上羧酸(120 mg, 0.261 mmol)、HoPhe-OMe (51 mg, 0.261 mmol, 1当量)、2,6-二甲基吡啶(0.91 mL, 0.783 mmol, 3当量)、HOAt (43 mg, 0.313 mmol, 1.2当量)和EDCI•HCl (60 mg, 0.313 mmol, 1.2当量)。快速色谱(25% EtOAc/己烷)得到129 mg (78%) MRS-3-31。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ7.80 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.40-7.20 (m, 6H), 7.15 (d, J = 8.3Hz, 2H), 6.60 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 4.74 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.45 (t, J = 6.6Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.15 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.72 (t, J = 6.4 Hz, 2H),2.45-2.40 (m, 1H), 2.20- 2.10 (m, 1H), 1.40-1.20 (m, 3H), 1.10 (d, J = 7.2Hz, 18H)；MS-ESI (m/z)计算值[C35H46N2O7Si+H]+ ：635.3；实测值：635.3。
(MRS-3-45) 将TIPS-醚MRS-3-31 (123 mg, 0.19 mmol)溶于无水THF (3 mL)并用TBAF (0.39 mL, 0.39 mmol, 2当量)处理。在室温下搅拌1小时后，将混合物用EtOAc(20 mL)稀释并用盐水(20 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。残余物MRS-3-45直接用于下一步骤。
(MRS-3-45-II) 使用了锌-硝基还原的通用程序：使用了芳基硝基MRS-3-45 (100mg, 0.208 mmol)、Zn纳米粉末(137 mg, 2.08 mmol, 10当量)和丙酮/饱和NH4Cl水溶液(各5 mL)。快速色谱(50% EtOAC/己烷)得到130 mg (86%, 2步骤) MRS-3-45-II。1H NMR(600 MHz, DMSO-d 6) δ 9.15 (s, 1H), 8.40 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.40-7.15 (m,7H), 7.10 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.65 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 5.20 (s, 2H), 4.25(q, J = 6.2 Hz,, 1H), 4.10 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.60 (s, 3H), 2.95 (t, J =6.7 Hz, 2H), 2.75-2.70 (m, 1H), 2.60- 2.50 (m, 2H), MS-ESI (m/z)计算值[C26H28N2O5+H]+ ：449.2；实测值：449.2。
(MRS-3-121) 胺偶联的通用程序如下：使用了以上羧酸(145 mg, 0.316 mmol)、HoPhe-Oi-Pr (70 mg, 0.316 mmol, 1当量)、2,6-二甲基吡啶(0.110 mL, 0.95 mmol, 3当量)、HOAt (52 mg, 0.380 mmol, 1.2当量)和EDCI•HCl (73 mg, 0.380 mmol, 1.2当量)。快速色谱(25% EtOAc/己烷)得到130 mg (62%)偶联产物MRS-3-121。1H NMR (600MHz, DMSO-d 6) δ 8.20 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.30-7.20 (m, 6H),7.10 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.62 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 4.75 (q, J = 6.6 Hz, 1H),4.40-4.30 (m, 1H), 4.10 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.90 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.80-2.70 (m, 1H), 2.60- 2.40 (m, 1H), 2.00-1.95 (m, 2H), 1.30-1.20 (m, 9H), 1.10(d, J = 7.1 Hz, 18H)；MS-ESI (m/z)计算值[C37H50N2O7Si+H]+ ：663.3；实测值：663.3。
(MRS-3-153) 使用了TBAF脱保护和Zn 硝基还原的通用程序：异丙酯MRS-3-121(120 mg, 0.181 mmol)、TBAF (0.105 mL, 2当量, 1 M在THF中)、Zn纳米粉末(181 mg,2.76 mmol, 10当量)。快速色谱(50% EtOAc/己烷)得到80 mg (93%) MRS-3-153。1H NMR(600 MHz, DMSO-d 6) δ 8.35 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.35-7.20 (m,6H), 7.12 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.70 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 5.25 (s, 2H), 4.80(q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.50-4.40 (m, 1H), 4.15 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.95 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 2.85-2.70 (m, 1H), 2.62- 2.40 (m, 1H), 2.00-1.85 (m, 2H),1.14-1.10 (m, 6H)；MS-ESI (m/z)计算值[C28H32N2O5+H]+ ：477.2；实测值：477.2。
(MRS-3-25) 胺偶联的通用程序如下：使用了以上羧酸化合物1 (120 mg, 0.261mmol)、1-甲基-3-苯基丙基胺(39 mg, 0.261 mmol, 1当量)、2,6-二甲基吡啶(0.084 mL,0.783 mmol, 3当量)、HOAt (43 mg, 0.313 mmol, 1.2当量)和EDCI•HCl (60 mg, 0.313mmol, 1.2当量)。快速色谱(25% EtOAc/己烷)得到126 mg (82%) MRS-3-25。1H NMR (600MHz, DMSO-d 6) δ 7.76 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.30-7.20 (m, 6H),7.10 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 4.30-4.20 (m, 3H), 3.05(t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.80-2.70 (m, 2H), 2.00-1.95 (m, 2H), 1.30 (d, J = 6.2Hz, 3H), 1.20-1.10 (m, 3H), 1.09 (d, J = 7.2 Hz, 18H)；MS-ESI (m/z)计算值[C34H46N2O5Si+H]+ ：591.3；实测值：591.3。
(MRS-3-39) 使用了TBAF脱保护和Zn 硝基还原的通用程序：酰胺MRS-3-25 (120mg, 0.203 mmol)、TBAF (0.106 mL, 2当量, 1 M在THF中)、Zn纳米粉末(120 mg, 1.84mmol, 10当量)。快速色谱(50% EtOAc/己烷)得到51 mg (62%)苯胺MRS-3-39。1H NMR (600MHz, DMSO-d 6) δ 9.20 (s, 1H), 7.90 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.30-7.20 (m, 7H),7.15 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.69 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 5.10 (s, 2H), 4.10 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.95-3.70 (m, 1H), 2.95 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.55-2.45 (m,2H), 1.80-1.60 (m, 2H), 1.10 (d, J = 6.2 Hz 3H)；MS-ESI (m/z)计算值[C25H28N2O3+H]+ ：405.2；实测值：405.2。
(MRS-3-27) 胺偶联的通用程序如下：使用了以上羧酸化合物1 (120 mg, 0.261mmol)、3-苯基丙基胺(35 mg, 0.261 mmol, 1当量)、2,6-二甲基吡啶(0.084 mL, 0.783mmol, 3当量)、HOAt (43 mg, 0.313 mmol, 1.2当量)和EDCI•HCl (60 mg, 0.313 mmol,1.2当量)。快速色谱(20% EtOAc/己烷)得到119 mg (79%) MRS-3-27。
(MRS-3-41) 使用了TBAF脱保护和Zn 硝基还原的通用程序：酰胺MRS-3-27 (100mg, 0.173 mmol)、TBAF (0.90 mL, 2当量, 1 M在THF中)、Zn纳米粉末(124 mg, 1.90mmol, 10当量)。快速色谱(50% EtOAc/己烷)得到39 mg (58%) MRS-3-41。1H NMR (600MHz, DMSO-d 6) δ 9.25 (s, 1H), 8.05 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.30-7.20 (m, 7H),7.15 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 6.70 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 5.10 (s, 2H), 4.10 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.20-3.15 (m, 2H), 2.90 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.60 (t, J = 6.4Hz, 2H), 1.80-1.70 (m, 2H)；MS-ESI (m/z)计算值[C24H26N2O3+H]+ ：391.2；实测值：391.2。
(MRS-3-17) 将氢化钠(60%, 0.150 g, 6.22 mmol)悬于THF (10 mL)并在0℃滴加2-苯基乙醇(0.317 g, 2.59 mmol)。在0℃，在氩气氛下将混合物搅拌15分钟，然后加入3-氟-4-硝基苯甲酸(0.400 g, 2.16 mmol)。将混合物在0℃搅拌5分钟和在室温下搅拌2小时，用饱和NH4Cl水溶液猝灭，用EtOAc稀释，用HCl水溶液(0.1 M, × 2)萃取。收集有机层，浓缩，产物经快速色谱法纯化(SiO2, 3:2:0.1己烷/Et2O/HOAc)，得到MRS-3-17，为固体(0.428 g, 69%)。
(MRS-3-33) 胺偶联的通用程序如下：使用了羧酸MRS-3-17 (100 mg, 0.348mmol)、HoPhe-OtBu (82 mg, 0.348 mmol, 1当量)、2,6-二甲基吡啶(0.120 mL, 1.04mmol, 3当量)、HOAt (57 mg, 0.417 mmol, 1.2当量)和EDCI•HCl (80 mg, 0.417 mmol,1.2当量)。快速色谱(25% EtOAc/己烷)得到148 mg (84%) MRS-3-33。1H NMR (600 MHz,DMSO-d 6) δ 7.75 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.40-7.11 (m, 11H), 4.80-4.65 (m, 1H), 4.38 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.10 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.60-2.52(m, 2H), 2.40-2.30 (m, 1H), 2.20- 2.10 (m, 1H), 1.50 (s, 9 H)；MS-ESI (m/z)计算值[C29H32N2O6+H]+ ：505.2；实测值：505.2。
(MRS-3-47) 使用了锌-硝基还原的通用程序：使用了芳基硝基MRS-3-33 (80 mg,0.173 mmol)、Zn纳米粉末(113 mg, 1.73 mmol, 10当量)和丙酮/饱和NH4Cl水溶液(各5mL)。快速色谱(25% EtOAC/己烷)得到58 mg (71%, 2步骤)苯胺MRS-3-47。1H NMR (600MHz, DMSO-d 6) δ 8.20 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.40-7.15 (m, 12H), 5.20 (s, 2H),4.25 (q, J = 6.0 Hz, 1H), 4.18 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.10 (t, J = 6.7 Hz, 2H),2.70-2.62 (m, 1H), 2.60-2.55 (m, 1H), 2.10- 2.00 (m, 2H), 1.45 (s, 9H)；MS-ESI(m/z)计算值[C29H34N2O4+H]+ ：475.2；实测值：475.2。
以上两步骤合成描述于Shah 等人, Org Biomol Chem6:2168-2172 (2008)。
(MRS-3-93) 将氢化钠(60%, 0.124 g, 2.59 mmol)悬于THF (5 mL)并在0℃滴加2-(3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)苯基)乙醇(0.382 g, 1.29 mmol)。在0℃，在氩气氛下，将混合物搅拌15分钟，然后加入3-氟-4-硝基苯甲酸(0.200 g, 1.08 mmol)。将混合物在0℃搅拌5分钟并在室温下搅拌2小时，用饱和NH4Cl水溶液猝灭，用EtOAc稀释，和用HCl水溶液(0.1 M, × 2)萃取。收集有机层，浓缩，产物通过快速色谱法纯化(SiO2, 3:1:0.1己烷/Et2O/HOAc)，得到MRS-3-93，为固体(0.421 g, 85%)。
(MRS-3-99) 胺偶联的通用程序如下：使用了羧酸MRS-3-93 (230 mg, 0.500mmol)、HoPhe-OtBu (114 mg, 0.500 mmol, 1当量)、2,6-二甲基吡啶(0.170 mL, 1.49mmol, 3当量)、HOAt (81 mg, 0.599 mmol, 1.2当量)和EDCI•HCl (114 mg, 0.599 mmol,1.2当量)。快速色谱(25% EtOAc/己烷)得到337 mg (99%) MRS-3-99。1H NMR (600 MHz,DMSO-d 6) δ 7.90 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.40-7.35 (m, 5H), 7.20(d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 6.85-6.80 (m,1H), 6.75 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.80 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.40 (t, J = 6.9 Hz,2H), 3.20 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.80-2.70 (m, 2H), 2.45-2.35 (m, 1H), 2.23-2.11 (m, 1H), 1.60 (s, 9H), 1.40-1.24 (m, 3H), 1.15 (d, J = 7.0 Hz, 18H)；MS-ESI (m/z)计算值[C38H52N2O7Si+H]+ ：677.3；实测值：677.3。
(MRS-3-113) 使用了TBAF脱保护和Zn 硝基还原的通用程序：酰胺MRS-3-99 (200mg, 0.295 mmol)、TBAF (0.590 mL, 2当量, 1 M在THF中)、Zn纳米粉末(193 mg, 2.95mmol, 大约10当量)。快速色谱(50% EtOAc/己烷)得到99 mg (68%) MRS-3-113。1H NMR(600 MHz, DMSO-d 6) δ 9.40 (s, 1H), 8.20 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.40-7.20 (m,7H), 6.75-6.70 (m, 2H), 6.62-6.55 (m, 2H), 5.25 (s, 2H), 4.45 (q, J = 6.2 Hz,1H), 4.20 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.00 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.70-2.60 (m, 1H),2.55-2.50 (m, 1H), 2.00-1.95 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C29H34N2O5+H]+ ：491.2；实测值：491.2。
(MRS-3-35) 胺偶联的通用程序如下：使用了3-羟基苯甲酸(47 mg, 0.348mmol)、HoPhe-OtBu (82 mg, 0.348 mmol, 1当量)、2,6-二甲基吡啶(0.120 mL, 1.04mmol, 3当量)、HOAt (57 mg, 0.417 mmol, 1.2当量)和EDCI•HCl (80 mg, 0.417 mmol,1.2当量)。快速色谱(30% EtOAc/己烷)得到100 mg (81%)酚MRS-3-35。
(MRS-3-89) 在室温下将酚MRS-3-35 (540 mg, 1.51 mmol)和烷基溴MM-1-73(651 mg, 1.82 mmol, 1.20当量)溶于丙酮(10 mL)。加入K2CO3 (628 mg, 4.55 mmol, 3当量)，并将混合物回流加热24小时。将反应混合物冷却至室温，过滤，和浓缩。快速色谱(25%EtOAc/己烷)得到365 mg (38%)醚MRS-3-89。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 7.40-7.20(m, 9H), 7.10 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 4.70 (q, J = 6.4Hz, 1H), 4.18 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.05 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.80-2.60 (m,2H), 2.30-2.20 (m, 1H), 2.10-2.00 (m, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.30-1.20 (m, 3H),1.10 (d, J = 6.4 Hz, 18H)；MS-ESI (m/z)计算值[C38H53NO5Si+H]+ ：632.2；实测值：632.2。
(MRS-3-95) 将醚MRS-3-89 (150 mg, 0.237 mmol)溶于THF (1 mL)。加入TBAF(0.474 mL, 2当量, 1 M在THF中)，并将混合物搅拌1小时。除去溶剂后，快速色谱(25%EtOAc/己烷)得到80 mg (71%)酚MRS-3-95。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 7.40-7.10(m, 11H), 6.68 (d, J = 6.4Hz, 2H), 4.20 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 4.18 (t, J = 6.9Hz, 2H), 2.90 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.70-2.65 (m, 1H), 2.60-2.55 (m, 1H),2.10-2.00 (m, 2H), 1.39 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C29H33NO5+H]+ ：476.2；实测值：476.2。
3-卤代-(4-((三异丙基甲硅烷基)氧基)苯基)乙醇制备的通用程序
通过以上顺序，自市售的苯甲酸制备了Cl和F取代的酚。LAH还原描述于Bubert 等人, ChemMedChem, 3:1708–1730 (2008)。双重TIPS保护/选择性的单脱保护步骤描述于Shah等人, J. Org.Biomol.Chem.6:2168–2172 (2008)。
(MRS-3-105) 将氢化钠(60%, 0.109 g, 4.53 mmol)悬于THF (5 mL)并在0℃滴加2-(3-氯-4-(三异丙基甲硅烷氧基)苯基)乙醇(0.747 g, 2.26 mmol)。在氩气氛下，在0℃，将混合物搅拌15分钟，然后加入3-氟-4-硝基苯甲酸(0.350 g, 1.89 mmol)。将混合物在0℃搅拌5分钟并在室温下搅拌2小时，用饱和NH4Cl水溶液猝灭，用EtOAc稀释，和用HCl水溶液(0.1 M, × 2)萃取。收集有机层，浓缩，产物通过快速色谱法纯化(SiO2, 3:1:0.1EtOAc/己烷/HOAc)，得到MRS-3-105，为固体(0.747 g, 80%)。
(MRS-3-109) 胺偶联的通用程序如下：使用了羧酸MRS-3-105 (247 mg, 0.500mmol)、HoPhe-OtBu (117 mg, 0.500 mmol, 1当量)、2,6-二甲基吡啶(0.170 mL, 1.49mmol, 3当量)、HOAt (81 mg, 0.599 mmol, 1.2当量)和EDCI•HCl (114 mg, 0.599 mmol,1.2当量)。快速色谱(25% EtOAc/己烷)得到352 mg (99%) MRS-3-109。1H NMR (600 MHz,DMSO-d 6) δ 8.10 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.50-7.20 (m, 8H), 6.80 (d, J = 8.1 Hz,1H), 6.60 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.80 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 3.70 (t, J = 6.4 Hz,2H), 2.60 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.55-2.50 (m, 2H), 2.45-2.35 (m, 1H), 2.23-2.11 (m, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.40-1.24 (m, 3H), 1.15 (d, J = 6.9 Hz, 18H)；MS-ESI (m/z)计算值[C38H51ClN2O7Si+H]+ ：711.2；实测值：711.3。
(MRS-3-133) 使用了TBAF脱保护和Zn 硝基还原的通用程序：酰胺MRS-3-109(350 mg, 0.482 mmol)、TBAF (1.00 mL, 2当量, 1 M在THF中)、Zn纳米粉末(297 mg,4.54 mmol, 大约10当量)。快速色谱(50% EtOAc/己烷)得到200 mg (78%, 2步骤) MRS-3-105。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 8.30 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 6.8Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.35-7.25 (m, 6H), 6.75 (d, J = 6.2. Hz, 1H), 6.55 (d,J = 6.6 Hz, 1H), 5.57 (s, 2H), 4.25 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 3.60 (t, J = 6.7 Hz,2H), 2.70-2.60 (m, 4H), 2.00-1.95 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C29H33ClN2O5+H]+ ：525.2；实测值：525.2。
(MRS-3-111)将氢化钠(60%, 0.037 g, 1.55 mmol)悬于THF (4 mL)并在0℃滴加2-(3-氟-4-(三异丙基甲硅烷氧基)苯基)乙醇(0.243 g, 0.77 mmol)。在0℃，在氩气氛下，将混合物搅拌15分钟，然后加入3-氟-4-硝基苯甲酸(0.120 g, 0.65 mmol)。将混合物在0℃搅拌5分钟并在室温下搅拌2小时，用饱和NH4Cl水溶液猝灭，用EtOAc稀释，和用HCl水溶液(0.1 M, × 2)萃取。收集有机层，浓缩，产物通过快速色谱法纯化(SiO2, 3:1:0.1EtOAc/己烷/HOAc)，得到MRS-3-111，为固体(0.238 g, 77%)。
(MRS-3-117) 胺偶联的通用程序如下：使用了羧酸MRS-3-111 (238 mg, 0.498mmol)、HoPhe-OtBu (117 mg, 0.500 mmol, 1当量)、2,6-二甲基吡啶(0.170 mL, 1.49mmol, 3当量)、HOAt (81 mg, 0.599 mmol, 1.2当量)和EDCI•HCl (114 mg, 0.599 mmol,1.2当量)。快速色谱(25% EtOAc/己烷)得到250 mg (72%) MRS-3-117。1H NMR (600 MHz,DMSO-d 6) δ 7.90 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.45-7.20 (m, 7H), 6.90(d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.55 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 4.45(t, J = 6.3 Hz, 2H),3.20 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.70-2.60 (m, 2H), 2.40-2.35(m, 1H), 2.30-2.18 (m, 1H), 1.52 (s, 9H), 1.35-1.25 (m, 3H), 1.10 (d, J = 6.2Hz, 18H)；MS-ESI (m/z)计算值[C38H51FN2O7Si+H]+ ：694.3；实测值：694.3。
(MRS-3-137) 使用了TBAF脱保护和Zn硝基还原的通用程序：酰胺MRS-3-117 (250mg, 0.359 mmol)、TBAF (0.720 mL, 2当量, 1 M在THF中)、Zn纳米粉末(300 mg, 4.58mmol, 大约13当量)。快速色谱(50% EtOAc/己烷)得到132 mg (72%, 2步骤)苯胺MRS-3-137。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 9.55 (s, 1H), 8.25 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.45-7.15 (m, 8H), 6.85 (d, J = 6.9. Hz, 1H), 6.65 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 5.20 (s,2H), 4.20 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.15 ( t, J = 6.1Hz, 2H), 2.90 (t, J = 6.7 Hz,2H), 2.75-2.70 (m, 1H), 2.62-2.58 (m, 1H), 2.00-1.95 (m, 2H), 1.40 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C29H33FN2O5+H]+ ：509.2；实测值：509.2。
(MM-1-315) 将TIPS-Neoseptin-4 (200 mg, 0.309 mmol)、HOAt (46 mg, 0.340mmol, 1.1当量)和Boc-Phe-OH (82 mg, 0.309 mmol, 1.0当量)溶于无水DMF (1.5 mL)。加入2,6-二甲基吡啶(0.144 mL, 1.24 mmol, 4.0当量)。试剂溶解后，加入EDCI•HCl (62mg, 0.325 mmol, 1.05当量)，并将混合物搅拌48小时。用EtOAc (10 mL)稀释后，将混合物用1 N HCl (5 mL)、饱和NaHCO3 (5 mL)和盐水(5 mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。将所得残余物重溶于无水THF (2 mL)并在室温下滴加TBAF (1.0 mL, 3.0当量, 1M在THF中)。30分钟后，加入H2O (10 mL)，混合物用EtOAc (10 mL)稀释。水相用EtOAc (10mL)萃取1次，合并的有机相经Na2SO4干燥，轻轻倒出和浓缩。快速色谱(40% EtOAc/己烷)得到192 mg (89%)酰胺MM-1-315。1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 8.45 (d, J = 8.4 Hz,1H), 7.50 (s, 1H), 7.40-7.20 (m, 11H), 7.10 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.65 (d, J =7.1 Hz, 2H), 4.55 (q, J = 6.1 Hz, 1H), 4.50-4.45 (m, 1H), 4.15 (t, J = 6.4Hz, 2H), 3.00 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.70-2.60 (m, 4H), 2.35-2.25 (m, 1H),2.15-2.00 (m, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.45 (s, 9H)；MS-ESI (m/z)计算值[C43H51N3O8+H]+：737.3；实测值：738.3。
(Neoseptin-1) 将化合物MM-1-315 (78 mg, 0.112 mmol)溶于4 N HCl/二噁烷(1 mL, 4.00 mmol, 大约36当量)。将混合物搅拌6小时，然后在N2气流下蒸发溶剂和过量HCl，得到65 mg (99%) Neoseptin-1，为HCl盐。
本文引用的每篇专利、专利申请和文献都通过引用结合。
上述描述和实施例意图是说明性的，不应理解为限制性的。本发明的精神和范围内的还有其它变化是可能的并且会容易地向本领域技术人员呈递它们。

Claims (18)

1.一种化合物，其在结构上对应于下式I，或其药学上可接受的盐
其中
X是O、S、NR1、CH2，其中R1是H或C1-C4烃基，或X不存在和两个原子连接所示苯环；
Y是O、S、NR2、CH2，其中R2是H或C1-C4烃基；
R3是C1-C6烃基；
R4和R5是氢或羟基，但是R4和R5中仅有一个是氢，或R4和R5两者都是羟基；
W是单个6-元烃环结构，所述环结构W任选地包含：与一个或多个环原子键合的一个或多个取代基，其中所述一个或多个取代基含有总共至多8个原子，其选自氟、氯、碳、氮、氧和硫及其混合物；和
虚线(----)代表一个或多个任选的双键。
2.权利要求1的化合物，其中X不存在或是O。
3.权利要求1的化合物，其中Y是CH2。
4.一种化合物，其在结构上对应于下式II，或其药学上可接受的盐
其中环系W的A、B、E、G、L和M是碳(C)或氮(N)，其中A、B、E、G、L和M中不超过3个是氮，和其中W任选地含有与一个或多个环原子键合的一个或多个取代基，其中所述一个或多个取代基含有总共至多8个原子，所述原子选自氟、氯、碳、氮、氧和硫及其混合物；
X是O、S、NR1、CH2，其中R1是H或C1-C4烃基，或X不存在和两个原子连接所示苯环；和
R3是C1-C6烃基。
5.权利要求4的化合物，其中A、B、E、G、L和M中不超过2个是氮。
6.权利要求4的化合物，其中X不存在或是O。
7.权利要求4的化合物，其中R3是含有4-6个碳原子的大的烃基。
8.权利要求4的化合物，其中环结构W含有选自叠氮基、氟代、甲基、甲氧基和三氟甲基的取代基，并且所述取代基位于自与该分子剩余部分连接位置开始计数的6-元环的4位上。
9.一种化合物，其在结构上对应于下式III或式IV，或其药学上可接受的盐
其中环W任选地含有与一个或多个环原子键合的一个或多个取代基，其中所述一个或多个取代基含有总共至多8个原子，所述原子选自氟、氯、碳、氮、氧和硫及其混合物，A、B、E、G、L和M是碳(C)或氮(N)原子，其中A、B、E、G、L和M中不超过2个是氮，并且R3是含有4-6个碳原子的大的烃基。
10.权利要求9的化合物，其中R3是叔丁基、新戊基、环戊基或环己基。
11.权利要求9的化合物，其中环结构W是苯基。
12.一种化合物，其在结构上对应于下列结构式，或其药学上可接受的盐
。
13.一种化合物，其在结构上对应于下列结构式，或其药学上可接受的盐
。
14.药物组合物，其包含溶于或分散于生理学上可接受的载体中的有效量的权利要求1-13中任一项的化合物或其药学上可接受的盐。
15.权利要求14的药物组合物，其中所述有效量是佐剂有效量。
16.权利要求14的药物组合物，其中所述有效量是TLR4激动剂有效量。
17.权利要求1-13中任一项的化合物或药学上可接受的化合物盐作为佐剂在制备免疫组合物中的用途，所述组合物包含有效量的免疫原和有效量的佐剂。
18.权利要求17的用途，其中在同一组合物中给予所述免疫原和所述佐剂。
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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5922791B2 (ja) 2012-10-29 2016-05-24 京セラ株式会社 弾性表面波センサ
US10131683B2 (en) 2014-07-17 2018-11-20 Molecular Templates, Inc. TH-302 solid forms and methods related thereto
AU2016229136B2 (en) 2015-03-10 2018-08-09 Obi Pharma, Inc. DNA alkylating agents
BR112017021167A2 (pt) 2015-04-02 2018-07-03 Obi Pharma, Inc. composto, método de tratamento de câncer, e processo para preparar o composto de fórmula i
TWI772263B (zh) 2015-06-24 2022-08-01 美商免疫原公司 含有ｄｎａ烷化劑之氮丙啶
US20180327364A1 (en) * 2015-11-13 2018-11-15 Brandeis University Mtor inhibitors and methods of use thereof
US11040959B2 (en) 2016-06-29 2021-06-22 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Diprovocims: a new and potent class of TLR agonists
WO2019099578A1 (en) 2017-11-14 2019-05-23 Chidren's Medical Center Corporation Use of imidazopyrimidine for modulating human immune response
WO2019099564A1 (en) 2017-11-14 2019-05-23 Children's Medical Center Corporation Novel imidazopyrimidine compounds and uses thereof

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102015651A (zh) * 2008-03-03 2011-04-13 Irm责任有限公司 作为tlr活性调节剂的化合物和组合物

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4045438A (en) 1975-10-24 1977-08-30 Yeda Research And Development Co. Ltd. Cephalosporin antibiotics
US4031083A (en) 1975-10-24 1977-06-21 Yeda Research And Development Co., Ltd. Cephalosporin antibiotics
US20050004144A1 (en) * 2003-04-14 2005-01-06 Regents Of The University Of California Combined use of IMPDH inhibitors with toll-like receptor agonists
CN103012304B (zh) 2005-06-30 2014-07-23 卫材R&D管理有限公司 用于制备免疫佐剂的化合物
CN101304748A (zh) * 2005-08-22 2008-11-12 加利福尼亚大学董事会 Tlr激动剂
CA2656487A1 (en) * 2006-07-07 2008-01-17 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Selective caspase inhibitors
ES2456964T3 (es) * 2007-02-07 2014-04-24 The Regents Of The University Of California Conjugados de agonistas de TLR sintéticos y usos de los mismos
WO2010037402A1 (en) * 2008-10-02 2010-04-08 Dako Denmark A/S Molecular vaccines for infectious disease
US20110293565A1 (en) * 2009-01-30 2011-12-01 Idera Pharmaceuticals, Inc. Novel synthetic agonists of tlr9

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102015651A (zh) * 2008-03-03 2011-04-13 Irm责任有限公司 作为tlr活性调节剂的化合物和组合物

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Design, Synthesis, and Evaluation of an α-Helix Mimetic Library Targeting Protein-Protein Interactions;Alex Shaginian et al.;《Journal of the American Chemical Society》;20090331;第131卷(第15期);第5564-5572页 *

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