CN105327172A - 一种抗心肌肥大的药物组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种抗心肌肥大的药物组合物及其制备方法和应用，该药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而成：玉米须30-42份、蒲葵叶15-25份、元胡9-15份、鸡冠花9-15份、龙眼核11-20份、黄连6-10份、仙鹤草6-12份、蒲黄6-10份、灯心草6-10份、糯稻根18-30份、安息香0.5-2份、蔷薇根10-15份。本发明可明显降低心肌肥厚指数、心肌细胞直径与横截面积、心肌间质胶原纤维含量，对心肌肥大患者有明显的心脏重构保护作用。

Description

一种抗心肌肥大的药物组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于中医药技术领域，具体涉及一种抗心肌肥大的药物组合物及其制备方法和应用。

背景技术

心肌肥厚是指心脏在遗传、环境、多种生理及病理因素的作用下，为了适应心脏做功增加而出现的心脏重量和体积增加，主要以心肌细胞体积增大和细胞外基质增多为特征。心肌肥厚由多种因素调节，且是一种复杂的动态过程。研究表明持续的压力和/或容量负荷过度，可增加室壁应力，导致心肌肥厚。大体可见心脏重量明显增加、心室结构改变；细胞水平上可见，心肌细胞长度和/或宽度增大，肌节数量增加、排列紊乱，胶原含量增加，纤维组织过度增生，细胞排列紊乱松散；分子水平上，转化生长因子-β、血管紧张素II、内皮素、儿茶酚胺等各种胞外刺激信号可激活信号转导，诱导胚胎型基因的表达，从而促使细胞发生肥大表型变化，最终导致心肌细胞肥大。

目前，临床可用于治疗心肌纤维化或心肌肥厚的药物有血管紧张素转化酶抑制剂，醛固酮受体拮抗剂，钙通道道阻滞剂，血管紧张素受体阻滞剂，β-受体阻滞剂，基质金属蛋白酶抑制剂，内皮素受体阻断剂等。目前，这些药物中，只有血管紧张素转化酶抑制剂取得了一定的临床治疗效果，但作用有限，不能取得非常明显的抗心肌纤维化或心肌肥厚的作用，其它药物目前尚无明显的证据显示可以改善心肌纤维化或心肌肥厚，所以目前缺乏针对性强和疗效好的治疗药物。

发明内容

基于中医药在减毒增效方面的优势，本发明的目的在于通过对民间验方进行深入研究，提供一种抗心肌肥大的药物组合物及其制备方法和应用。

为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验研究并不懈探索，最终获得了如下技术方案：

一种抗心肌肥大的药物组合物，它由如下重量份的中药材原料制备而成：玉米须30-42份、蒲葵叶15-25份、元胡9-15份、鸡冠花9-15份、龙眼核11-20份、黄连6-10份、仙鹤草6-12份、蒲黄6-10份、灯心草6-10份、糯稻根18-30份、安息香0.5-2份、蔷薇根10-15份。

优选地，如上所述的抗心肌肥大的药物组合物，它由如下重量份的中药材原料制备而成：玉米须34-38份、蒲葵叶18-22份、元胡11-13份、鸡冠花11-13份、龙眼核14-16份、黄连7-9份、仙鹤草8-10份、蒲黄7-9份、灯心草7-9份、糯稻根23-26份、安息香0.8-1.5份、蔷薇根11-13份。

在本发明的一个最优选的实施例中，如上所述的抗心肌肥大的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而成：玉米须36份、蒲葵叶20份、元胡12份、鸡冠花12份、龙眼核15份、黄连8份、仙鹤草9份、蒲黄8份、灯心草8份、糯稻根25份、安息香1.2份、蔷薇根12份。

需要说明的是，本发明的药物组合物在制备过程中所采用的中药材原料来源如下：玉米须选用禾本科玉蜀黍属植物玉米ZeamaysL.的花柱和花头。蒲葵叶选用棕榈科植物蒲葵Livistonachinensis（Jacq．）R．Br．的干燥叶。元胡选用罂粟科植物延胡索CorydalisyanhusuoW.T.Wang的干燥块茎。鸡冠花选用苋科植物鸡冠花CelosiacristataL.的干燥花序。龙眼核选用无患子科龙眼属植物龙眼DimocarpuslonganLour.干燥种子。黄连选用毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch.的干燥根茎。仙鹤草选用蔷薇科植物龙牙草AgrimoniapilosaLedeb.的干燥地上部分。蒲黄选用香蒲科植物水浊香蒲TyphaangustifoliaL.的干燥花粉。灯心草选用灯心草科植物灯心草JuncuseffususL.的干燥茎髓。糯稻根选用禾本科稻属植物糯稻OryzasativaL.var.glutinosaMatsum.的干燥根状茎及须根。安息香选用安息香科植物白花树Styraxtonkinensis（Pierre）CraibexHart.的干燥树脂。蔷薇根选用蔷薇科植物野蔷薇RosamultifloraThunb.的根。

本发明还提供了上述抗心肌肥大的药物组合物的制备方法，该方法包括如下步骤：

（1）按重量份分别称取玉米须30-42份、蒲葵叶15-25份、元胡9-15份、鸡冠花9-15份、龙眼核11-20份、黄连6-10份、仙鹤草6-12份、蒲黄6-10份、灯心草6-10份、糯稻根18-30份、安息香0.5-2份、蔷薇根10-15份，备用；

（2）取玉米须、蒲葵叶、蒲黄和蔷薇根粉碎，用体积分数大于90%的乙醇溶液（优选乙醇溶液的体积分数为94%-96%）回流提取2-4次，每次0.5-2h，过滤，合并乙醇提取液；

（3）取元胡、鸡冠花、龙眼核、黄连、仙鹤草、灯心草、糯稻根和安息香，合并，粉碎，加水煎煮2-4次，每次2-4h，合并煎液；

（4）将步骤（3）所得煎液减压浓缩至相对密度为1.05-1.15的浸膏，倾入步骤（2）得到的乙醇提取液，搅拌，静置12-48小时，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩，干燥，即得。

研究发现，正常心脏是由心肌细胞及周围的心脏间质组成，心脏间质主要包括细胞外基质（ECM）及其脉管系统，其中ECM围绕在心肌细胞周围，保持心脏结构与功能的完整性，主要由胶原构成。心肌肥厚过程包括了心肌细胞的肥大和心肌间质的纤维化，以往对于心肌肥厚的研究多是集中在研究心肌细胞功能改变对心室功能的影响，目前，越来越多的研究表明心肌细胞外基质的改变对心室功能产生很大的影响。心肌肥厚细胞外基质重塑即心肌胶原纤维化的发生发展过程，是原始刺激因素造成心肌组织中非心肌成分的不呈比例增生而导致的，常伴有心肌胶原成分的比例增加。羟脯氨酸（Hyp）是机体胶原蛋白的主要成分之一，在正常胶原蛋白中占13.4%，在弹性蛋白中占极少量，其他蛋白中均不存在，测定心肌Hyp的含量，可反映心肌胶原蛋白的含量，从而判断心肌间质细胞增殖和纤维组织增生的程度。

异丙肾上腺素诱导心肌肥厚模型是经典的动物心肌肥厚模型之一。本发明人参照文献建立小鼠心肌肥厚模型，造模14d后通过病理学观察，模型组心肌细胞明显肥大，心重指数和左心室肥厚指数均较对照组明显增加，表明小鼠心肌肥厚的动物模型成功建立；左心室胶原含量的明显增高表明了心肌肥厚小鼠出现了心肌细胞之间胶原的沉积，心肌胶原在心肌间质的普遍沉积提示异丙肾上腺素所致心肌肥厚模型也伴有心肌胶原网络的重塑，即心肌细胞外基质重构。而中药提取物低、高剂量组与模型组相比，差别也均有统计学意义，表现出该提取物对异丙肾上腺素致心肌成纤维细胞增生及胶原蛋白增加具有一定的抑制作用。

基于发明人的上述研究成果，本发明的第三个目的在于提供一种制药用途，即上述的药物组合物在制备抗心肌肥大的药物中的应用；或者上述的药物组合物在制备抗心肌纤维化的药物中的应用。

与现有技术相比，本发明提供了一种抗心肌肥大效果显著的药物组合物，其可明显降低心肌肥厚指数、心肌细胞直径与横截面积、心肌间质胶原纤维含量，对心肌肥大患者有明显的心脏重构保护作用。

附图说明

图1为正常对照组心肌结构HE染色切片图；

图2为模型对照组心肌结构HE染色切片图；

图3为提取物低剂量组心肌结构HE染色切片图；

图4为提取物高剂量组心肌结构HE染色切片图。

具体实施方式

以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案做进一步作描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。

实施例1提取物干膏粉的制备

（1）称取玉米须3.6kg、蒲葵叶2.0kg、蒲黄0.8kg和蔷薇根1.2kg，合并，粉碎，用体积分数95%的乙醇溶液提取3次，第一次用药材总量约12倍的乙醇溶液回流提取2h，第二次用药材总量约10倍的乙醇溶液回流提取1.5h，四层纱布过滤，合并乙醇提取液；

（2）称取元胡1.2kg、鸡冠花1.2kg、龙眼核1.5kg、黄连0.8kg、仙鹤草0.9kg、灯心草0.8kg、糯稻根2.5kg和安息香0.12kg，合并，粉碎，加水煎煮2次，第一次加药材总量约15倍的纯化水，煎煮4h，第二次加药材总量约13倍的纯化水，煎煮3h，合并煎液；

（3）在0.07MPa的条件下减压浓缩步骤（1）的煎液至相对密度为1.10（65℃）的浸膏，然后倾入步骤（1）得到的乙醇提取液，搅拌使混匀，静置24小时，四层纱布过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩成膏状，干燥，粉碎过100目筛，得到提取物干膏粉。

实施例2中药提取物抗心肌肥大小鼠的药效研究

昆明种小鼠32只，体质量20-23g，随机分为如下四组：正常对照组、模型对照组、提取物低剂量组和高剂量组，每组8只，雌雄各半。试验开始后，模型对照组及提取物各剂量组均背部皮下持续注射异丙肾上腺素，剂量采用首剂40mg/kg，第2天20mg/kg，第3天10mg/kg，第4天5mg/kg，并以此剂量维持10d，自由进食，给水，正常对照组小鼠相同部位注射相同体积的生理盐水。于造模第2天，提取物高、低剂量组分别给予120和360mg/（kg·d）中药提取物（按实施例1的处方工艺制备）持续灌胃，正常对照组和模型对照组均给予等体积生理盐水灌胃，每日给药1次，与异丙肾上腺素注射相隔5h，给药治疗2周。小鼠均在同一条件下笼养，保持室内空气清洁，常规饮水及照明，标准颗粒饲料喂养。

给药结束后，小鼠禁食12h称重，处死，摘取心脏，精密天平称全心重量，去除大血管、心房、心外膜脂肪组织，用预冷的生理盐水冲洗干净，沿室间隔剪去右室游离壁，剩余部分用滤纸吸干水分后称左心室重量（包括室间隔），计算全心重量/体重即心重指数、左心室重量/体重即左心室重量指数。以左心室重量指数表示心肌肥厚程度。将左室切成的小块心肌组织置于中性福尔马林固定液中固定，另外取部分左室组织放入冻存管，标号后立即置于超低温冰箱，待测羟脯氨酸含量。

病理学检查显示：400×显微镜下观察，正常对照组心肌细胞排列整齐，未见细胞肥大现象；模型对照组与正常对照组相比，心肌细胞明显肥大，细胞间距增宽，胞浆丰富、着色深，胞核浓染、增大，提取物治疗组心肌细胞肥大均有减轻，以高剂量组最明显，参见图1~4。

以不同浓度的中药提取物作用于各组小鼠，结果发现：与正常对照组相比，模型对照组小鼠心重指数、左心室重量指数的值增加，明显高于正常对照组，差异具有显著性（P<0.01）；与模型对照组相比，各中药提取物治疗组小鼠心重指数、左心室重量指数的值较模型对照组有下降趋势，见表1，高剂量组心室重量指数明显下降，具有显著性（P<0.05）。

表1各组心重指数和左心室重量指数比较

组别	样本量	心重指数（mg/g）	左心室重量指数（mg/g）
				正常对照组	8	4.80±0.28	3.13±0.14
模型对照组	8	5.62±0.31**	3.52±0.16**
				提取物低剂量组	8	5.41±0.22*	3.39±0.16
提取物高剂量组	8	5.09±0.16￥￥	3.17±0.18￥

与正常对照组比较，^* P＜0.05，^** P＜0.01；

与模型对照组比较，^￥ P＜0.05，^￥￥ P＜0.01。

另外，与正常对照组小鼠比较，模型对照组小鼠左心室心肌细胞中羟脯氨酸含量明显升高（P<0.01）；与模型对照组比较，提取物低、高剂量组小鼠Hyp含量均显著降低（P<0.05、P<0.01），见表2。

表2各组左心室羟脯氨酸含量比较

组别	样本量	羟脯氨酸含量（μg/mg）
			正常对照组	8	0.32±0.04
模型对照组	8	0.51±0.08**
			提取物低剂量组	8	0.40±0.07￥
提取物高剂量组	8	0.33±0.05￥￥

与正常对照组比较，^* P＜0.05，^** P＜0.01；

与模型对照组比较，^￥ P＜0.05，^￥￥ P＜0.01。

Claims (6)

1.一种抗心肌肥大的药物组合物，其特征在于：所述的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而成：玉米须30-42份、蒲葵叶15-25份、元胡9-15份、鸡冠花9-15份、龙眼核11-20份、黄连6-10份、仙鹤草6-12份、蒲黄6-10份、灯心草6-10份、糯稻根18-30份、安息香0.5-2份、蔷薇根10-15份。

2.根据权利要求1所述的抗心肌肥大的药物组合物，其特征在于：所述的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而成：玉米须34-38份、蒲葵叶18-22份、元胡11-13份、鸡冠花11-13份、龙眼核14-16份、黄连7-9份、仙鹤草8-10份、蒲黄7-9份、灯心草7-9份、糯稻根23-26份、安息香0.8-1.5份、蔷薇根11-13份。

3.一种抗心肌肥大的药物组合物的制备方法，该方法包括如下步骤：

（1）按重量份分别称取玉米须30-42份、蒲葵叶15-25份、元胡9-15份、鸡冠花9-15份、龙眼核11-20份、黄连6-10份、仙鹤草6-12份、蒲黄6-10份、灯心草6-10份、糯稻根18-30份、安息香0.5-2份、蔷薇根10-15份，备用；

（2）取玉米须、蒲葵叶、蒲黄和蔷薇根粉碎，用体积分数大于90%的乙醇溶液回流提取2-4次，每次0.5-2h，过滤，合并乙醇提取液；

（3）取元胡、鸡冠花、龙眼核、黄连、仙鹤草、灯心草、糯稻根和安息香，合并，粉碎，加水煎煮2-4次，每次2-4h，合并煎液；

（4）将步骤（3）所得煎液减压浓缩至相对密度为1.05-1.15的浸膏，倾入步骤（2）得到的乙醇提取液，搅拌，静置12-48小时，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩，干燥，即得。

4.根据权利要求3所述抗心肌肥大的药物组合物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的乙醇溶液的体积分数为94%-96%。

5.权利要求1或2所述的药物组合物在制备抗心肌肥大的药物中的应用。

6.权利要求1或2所述的药物组合物在制备抗心肌纤维化的药物中的应用。