CN101564409B - 中华苦荬菜在制备治疗糖尿病药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及中华苦荬菜在制药领域中的新用途,具体是作为制备治疗或预防糖尿病的药物中的应用。实验证明,向链尿佐菌素致大鼠糖尿病模型口饲中华苦荬菜水提物后,造模动物的排尿量明显降低,体重呈逐渐上升趋势,血糖值明显降低。将中华苦荬菜以相当于成人等效剂量的200倍按小鼠可供灌胃的最大体积(0.4ml/10g)一日给药三次,结果证明无明显的毒副作用。
Description
技术领域
本发明涉及中华苦荬菜的一种新用途,具体涉及中华苦荬菜在制药领域中的新用途,尤其是在制备治疗糖尿病药物中的应用。
背景技术
中华苦荬菜Ixeris chinensis(Thunb)Nakai为菊科小苦菜属多年生草本植物中华苦荬菜的干燥全草,别名小苦苣菜、苦菜、滇苦莱、田苦卖菜、尖叶苦菜等。中华苦荬菜分布较广,在我国除气候和土壤条件极端严酷的高寒草原、草甸、荒漠戈壁和盐漠等地区外,几乎遍布全国各省区。中华苦荬菜是一种野生蔬菜,叶部发达,有苦味,但很清口,在我国有悠久的食用历史,目前有少量栽培。中华苦荬菜的根、花及种子均可入药,在历代本草中多有记述,是民间常用药。《中药大辞典》(江苏新医学院.上册.上海科学技术出版社.1986:1286)记载,中华苦荬菜味苦性寒,具有清热解毒,凉血止血等作用,主治肠炎、痢疾、黄疸、咽喉肿痛、吐血、尿血等症。李桂风(药用植物园.2002,1:8-9)记载,中华苦荬菜具有清热解毒、凉血消肿、活血破瘀、排脓收敛的功效,可用于治疗肺痈、乳痈、痢疾、肠炎及无名肿痛等多种疾病。
现代药理研究证明,中华苦荬菜具有保肝、抗炎、抗烟碱、抗氧化、抗病毒、抗白血病等药理作用,用于治疗急性黄疸型传染性肝炎、肠炎、阑尾炎、痢疾等疾病(蒋雷等.苦苣菜属植物化学成分及药理活性研究进展.齐鲁药事,2007,26(11):76;王晓飞等.中华苦荬菜研究进展.齐鲁药事,2006,25(4):238-239;任凤芝等.苦荬菜属植物化学成份和药理活性研究进展.广州化工,2000,28(4):131-133)。
1、抗炎保肝作用
1984年,Chiu HF等(Am J Chin Med.1989,17(1-2):17-23)通过对几种保肝药物的药理学和病理学研究发现,中华苦荬菜对四氯化碳导致的肝损伤具有明显的保肝作用,并且对肝小叶的脂肪性变形和坏死有明显的改善作用。1994年,Lin SC等(Am J Chin Med.1994,22(3-4):243-254)以注入一定量四氯化碳或N-乙酰苯胺的小鼠为实验动物,通过检测小鼠肝内血清转氨酶和血清组织病理变化,发现中华苦荬菜具有明显的抗炎保肝作用。2004年,Zheng QS等(Pharmazie.2004,59(4):286-289)对中华苦荬菜的抗炎保肝作用进行了进一步研究,发现从其中分离出的单体木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷的活性高于粗提物,表明木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷是其抗炎保肝作用的活性成分之一。2005年,Zheng QS等又发现从中华苦荬菜中分离出的单体洋芹素-7-O-β-D-葡萄糖苷对四氯化碳导致的肝损伤也具有明显的保肝作用(Biomed Environ Sci.2005,18(1):65-70)。
2、抗烟碱作用
赵云玲等(动物毒物学.2003,18(1-2):69-70)以生理盐水为对照,分别用中华苦荬菜干品口服液、注射液,鲜品口服液对染有烟碱毒的小白鼠和家兔进行解毒试验,经统计学分析处理,发现中华苦荬菜鲜品制成的口服制剂对烟碱中毒家兔和小白鼠口服应用具有明显的解救作用,而其干品制成的注射和口服两种制剂作用无显著意义。分析其原因,极有可能是在制剂过程中的加热破坏了其有效的解毒成分,从而减弱或失去了对抗尼古丁的作用。另外,许光鸿(兽医学杂志.2007,(6):26-27)收集的用中华苦荬菜治疗家畜烟碱中毒病例中,治疗效果显著,说明本品有明显的抗烟碱作用。
3、抗氧化作用
赵爱云等(天然产物研究与开发,2000,12(3):42-44)对20多种植物的甲醇提取物用DPHH法进行抗氧化活性研究,发现中华苦荬菜叶具有很高的抗氧化活性(与银杏叶接近),而其根的抗氧化活性则较低。Zheng QS等(Biomed Environ Sci.2005,18(1):65-70)通过化学发光单光子记数法测定洋芹素-7-O-β-D-葡萄糖苷的抗氧化活性,发现从中华苦荬菜中分离出的单体洋芹素-7-O-β-D-葡萄糖苷具有很强的抗氧化活性。
4、抗病毒、抗白血病作用
Chiang LC等(Am J Chin Med.2004,32(5):695-704)对5种中药的水提取物在体外进行抗病毒、抗白血病活性研究,所选病毒包括1-型单纯疱疹病毒(HSV-1)和2-型单纯疱疹病毒(HSV-2),白血病细胞系有K526、L1210、P3HRI、Raji和U937leukemia cells。研究结果表明,中华苦荬菜能有效抑制K526细胞的增殖,对1-型单纯疱疹病毒和2-型单纯疱疹病毒的复制均有一定的抑制作用,且在有效浓度下无细胞毒性。王储炎等(农产品资源,2008,37-38)发现中华苦荬菜水煎剂对急性淋巴型白血病、急慢性粒细胞白血病患者的白细胞脱氧酶有明显的抑制作用,还可用于防治宫颈癌、直肠癌、肛门癌症。
5、清热解毒,杀菌消炎
中华苦荬菜中含有蒲公英甾醇、胆碱等成分,对金黄色葡萄球菌耐药菌株、溶血性链球菌有较强的杀菌作用,对肺炎双球菌、脑膜炎球菌、白喉杆菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌等也有一定的杀伤作用,故对黄疸性肝炎、咽喉炎、细菌性痢疾、感冒发热及慢性气管炎、扁桃体炎等均有一定的疗效。王晓飞等(齐鲁药事,2006,25(4):238-239)研究发现,中华苦荬菜的乙醇提取物可以明显降低二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,说明中华苦荬菜的乙醇提取物具有明显的抗炎作用。
6、抗血栓形成,保护心血管系统
王晓飞等同时也报道了中华苦荬菜的乙醇提取物可以显著延长大鼠颈动脉血栓的形成时间,可显著降低大鼠高、中、低切变率的血液粘度,明显延长小鼠的耐缺氧存活,说明中华苦荬菜的乙醇提取物具有明显的抗血栓形成、降低血液粘度的作用和心血管系统保护作用。
7、其它
王储炎等还报道中华苦荬菜中丰富的铁元素有利于预防贫血,多种无机盐和微量元素有利于儿童的生长发育,多种维生素可促进伤口愈合,防止维生素缺乏。食用中华苦荬菜有助于促进人体内抗体的合成,增强机体免疫力,促进大脑机能。
发明内容
本发明的目的是提供中华苦荬菜的一种新用途,特别是在制药中的新用途。
实际上,本发明涉及中华苦荬菜作为制备治疗或预防糖尿病的药物中的应用。
为了更好地理解本发明的实质,下面以中华苦荬菜水提取物的药理实验及结果来说明其在治疗或预防糖尿病上的应用。同样地,使用中华苦荬菜或其他形态的中华苦荬菜制成品均可达到同样的药理效果,区别仅在于使用量上的不同。
本发明所述的中华苦荬菜水提取物的具体制备方法是:
称取一定量的中华苦荬菜,加入10倍量的水,浸泡0.5h后,煎煮1h,滤过,药渣中再加入10倍量的水,煎煮1h,滤过,合并滤液,离心,取上清液浓缩成稠膏状,于65℃烘箱中干燥后,研成细粉,过100目筛,即得含4g生药/g的中华苦荬菜浸膏细粉。
一、中华苦荬菜水提物对链尿佐菌素致大鼠糖尿病模型的影响
1、实验材料
1.1实验动物:SD大鼠,SPF/VAF级,雄性,体重250±20g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,合格证号SCXK(京)2002-0003。动物饲养环境:中国中医科学院实验动物中心。
1.2受试药物:由山西中医学院药学院提供,含4g生药/g,批号:20081102。实验时用蒸馏水配制成所需浓度。
1.3剂量设计:70kg体重人一日服用量为4.2g,则0.06g/kg/d,按人与动物等效剂量折算,大鼠为0.4g/kg/d,实验时将其定为中剂量,大剂量为其2倍,小剂量为其1/2。实验时按1ml/100g给药,各剂量组按等容不等浓灌胃给药。
1.4试剂及仪器:链尿佐菌素(STREPTOZOTOCIN),SIGMA公司产品,S-0130Lot 082K 0827;考马斯良蓝G-250,英国产,批号:911008;生化测试试剂,北京北化康泰临床试剂公司产品。半自动生化分析仪;代谢笼;天平。
2、方法及结果
选SD大鼠,雌雄兼用,体重250±20g,实验前称重,禁食12h,按64mg/kg体重,腹腔注射STZ柠檬酸缓冲溶液进行造模,72h后测定造模后血糖,选择造模后血糖值在13.8~25mmol/l的动物进行实验。
将入选动物分为模型对照组、给药大、中、小三个剂量组,每组35只,同时设正常对照组24只。给药组分别灌胃给药,1ml/100g,每日一次,对照组在同等情况下给予蒸馏水。分别于给药后3、7、12天每组解剖10只动物,观察以下指标:
1、收集24h尿液,记录24h总尿量(表1);
2、称体重,记录体重变化情况(表2);
3、血糖(表3)。
表1 对链尿佐菌素性大鼠糖尿病模型尿量的影响
与正常对照组比较,##P<0.01;与模型对照组比较,**P<0.01,*P<0.05。
表1中结果显示:模型组动物从造模3天起排尿量即明显增高,给药三个剂量组口饲给模型动物后,动物的24h尿量明显降低,与模型对照组比较P<0.01和P<0.05。
表2 对链尿佐菌素性大鼠糖尿病模型体重的影响
与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与正常对照组比较,##P<0.01。
表2中结果显示:动物造模后体重明显减轻,并随造模时间延长呈逐渐下降的趋势,而给药三个剂量组口饲给模型动物后,动物的体重呈逐渐上升趋势,12天后明显高于模型对照组,与模型对照组比较有显著性差异,P<0.01。
表3 对链尿佐菌素性大鼠糖尿病模型血糖的影响
与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与正常对照组比较,##P<0.01。
表3中结果显示:中、小剂量组从给药7天后大鼠糖尿病模型动物血糖值明显降低,大剂量组在给药12天后血糖明显降低,与模型组比较有显著性差异,P<0.01。
3、讨论
糖尿病是一种严重的终身性慢性疾病,属于中医“消渴”范畴,中西医均以“三多一少”(多饮、多食、多尿、消瘦)、尿浊、尿甜、疲乏为主症。本实验研究表明,中华苦荬菜可以明显降低糖尿病模型动物血糖值与24h尿量,明显升高模型动物体重,提示该药物在治疗糖尿病方面有显著疗效。
二、中华苦荬菜急性毒性试验
观察中华苦荬菜临床应用的安全性,根据急性毒性实验方法和技术要求,选用小鼠为受试动物,观察一日灌胃给与最大剂量中华苦荬菜,确定无毒反应,为拟定临床用量提供参考。
1、材料与方法
1.1药品
受试中华苦荬菜药物:由山西中医学院药学院提供,含4g生药/g,批号:20081102。实验时用蒸馏水配制成可灌胃的最大浓度的混悬液。
1.2动物与饲养条件
昆明小鼠,40只,雌雄各半,体重20+2g,级别:SPF,由中国医学科学院实验动物研究所提供,合格证号:SCXK(京)2005-0013。动物按性别分笼饲养,每笼5只。喂养山西医科大学实验动物中心提供的标准块状鼠料。实验室内温度20±2℃,湿度60%±10%,每日明-暗时间为14h∶10h。
1.3实验仪器
电子天平,上海有声衡器有限公司。
1.4实验方法
根据中华苦荬菜的推荐临床用药量,按最大给药量开展实验。
取小鼠40只,随机分为给药组和对照组,每组20只,雌雄各半。给药组以中华苦荬菜可供灌胃的最大浓度(约0.1g/ml),分3次灌胃给药,上、中、下午均按小鼠可供灌胃的最大体积(0.4ml/10g)给药物(以小鼠体重均重20g计,相当于人用量的200倍)。给药前禁食不禁水16h,灌胃时间间隔为3h,间隔期间不供食,给药后常规饲养观察7d。对照组则灌胃给予等量蒸馏水,余同给药组。
给药前和给药后的第8天测量各组动物体重,观察给药后各组动物的毒性反应情况。每日观察小鼠活动、毛发、口鼻分泌物,二便情况以及食量及饮水量。
1.5统计学处理
统计资料以均值加减标准差(x±s)表示,组间比较用t检验。
2、实验结果
2.1一般状况
将中华苦荬菜以最大给药量灌胃给药后,连续观察7天,并于第8天处死动物,解剖观察主要脏器(肝、心、脾、肺、肾、胃肠等)的肉眼变化情况,结果见表1。
表1 中华苦荬菜急性毒性实验小鼠毒性反应情况(n=20)
实验期间,给药组与对照组的小鼠均无死亡情况发生,且实验观察的各个方面均表现出了相似的状况,无明显异常反应发生。
2.2对小鼠体重的影响
中华苦荬菜急性毒性实验给药前后各组动物的体重变化情况见表2。
表2 中华苦荬菜急性毒性实验小鼠体重变化(x±s)
结果显示,给药期间各个阶段,给药组与对照组的小鼠在体重增长方面未出现明显差异。
3、讨论
本实验研究表明:中华苦荬菜以相当于成人(70kg)等效剂量的200倍按小鼠可供灌胃的最大体积(0.4ml/10g)一日给药三次,连续观察小鼠的一般状况、动物体重、活动、毛发、口鼻分泌物、二便情况以及食量与饮水量指标均无异常改变,主要组织脏器大体观察及镜下检查均无中毒性病理改变,提示该药物大剂量口服不会影响动物的一般状况、饮食、体重及各主要组织脏器的生长发育及组织形态方面的改变,无明显的毒、副作用。表明推荐的临床使用剂量亦不会影响人体的一般状况、饮食、体重、血液及各主要组织脏器的生长发育及组织形态方面的改变,无明显的毒副作用。
具体实施方式
实施例1
称取中华苦荬菜700g,加入10倍量的水,浸泡0.5h后,煎煮1h,滤过,药渣中再加入10倍量的水,煎煮1h,滤过,合并滤液,离心,取上清液浓缩成稠膏状,于65℃烘箱中干燥后,研成细粉,过100目筛,得到含4g生药/g的中华苦荬菜浸膏细粉。
实施例2
取实施例1得到的中华苦荬菜浸膏细粉适量,加入到4倍量的熔融至澄明的基质(PEG4000∶PEG6000=2∶1)中混匀,滴入二甲基硅油冷却液中,收缩成丸,取出丸粒,擦干后制成滴丸产品。
实施例3
取实施例1得到的中华苦荬菜浸膏细粉适量,加入常规量的淀粉和硬脂酸镁,按照公知的制片技术和装备制成片剂产品。
实施例4
取实施例1得到的中华苦荬菜浸膏细粉适量,加入一定浓度的乙醇溶液,按照常规方法制备丸条、切割、搓圆、干燥,得到水丸产品。
实施例5
取实施例1得到的中华苦荬菜浸膏细粉适量,加入淀粉适量,混匀,制成颗粒,装入胶囊中制成胶囊产品。
Claims (2)
1.中华苦荬菜作为唯一活性物质在制备治疗或预防糖尿病的药物中的应用。
2.中华苦荬菜的水提取物作为唯一活性物质在制备治疗或预防糖尿病的药物中的应用。
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