CN105287045A - 一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，包括鸡精液稀释液配制、分装与保存技术，以及与现有产业化输精技术配套的稀释液解冻、携带、预热、定量添加、混匀、输精等系统技术。该方法采用体温加热方式对稀释液实现预热，既简化了现有技术中稀释液使用前需要恒温水浴加热的繁琐操作问题，又能实现相对精确等温稀释；根据输精时采集一杯精液的体积与稀释比例确定一支稀释液的体积，实现一杯精液一支稀释液，解决生产中定量稀释操作繁琐问题；同时通过薄膜、手部、集精管的三者结合，在最大限度不改变目前工作现状下巧妙实现了集精、稀释与混匀一体可由1人完成，降低技术难度。
Description
技术领域
本发明属于家禽繁殖领域，涉及家禽精液稀释及人工输精技术，特别涉及一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法。
背景技术
随着现代化养禽业的发展，家禽养殖的规模化和集约化程度越来越高，为了提高受精率、加速良种化进程，提高优秀种鸡的利用率，减少种公鸡饲养量等等，种鸡的人工授精技术作为现代育种和生产中必不可少的手段变得越来越重要。目前，对鸡进行人工输精所用的几乎都是未稀释的鸡精液，一方面，未经稀释的鸡精液保存时间超过半小时，就要影响受精率；另一方面，使用未经稀释的鸡精液，家禽繁殖的成本被拉高。鸡精液是一种高度浓缩精子液，其容量小、密度大，每次射精大约为0.2-0.6mL，少数可达到1.0mL，但每毫升精液中精子密度约为35亿个之多；研究表明：鸡精液稀释后不但可扩大其体积，增加授精母禽数，并且稀释后的精液利用低温条件保存可以抑制或减弱精子细胞内的新陈代谢，精子寿命延长、运输方便，能最大限度地利用种公鸡。因而稀释精液人工输精技术逐渐成为了家禽繁殖领域的研究热点。
鸡精液稀释实质上是将鸡精液与配制的具有特定成分的稀释液按比例混合的过程，鸡精液稀释人工输精技术已经研究多年，但一直很难大范围推广。原因主要包括以下几点：
1、稀释液保存方法复杂繁琐：稀释液的保存方式基本都是采用添加抗生素在冰箱冷藏，保存时间短，有的甚至需要现配现用；稀释液配方繁多，报道效果不一致，很少进行孵化率检测。
2、等温稀释技术繁琐且不合理：原因是鸡精液稀释过程需要严格遵循“等温及时”标准。“等温”即稀释过程中稀释液的温度要与精液的温度基本一致，文献稀释精液人工授精技术在罗曼粉蛋种鸡中的应用一文中指出温差最多不能超过2℃。为保证等温要求，目前的方法是将水浴锅温度调到33-37度，稀释液预热。这种方法，一是不确定精液采集后稀释前的温度，二是如果原精温度不高，完全没有必要将稀释液预热到这么高的温度，因为温度越高，鸡精液存活时间越短；三是这种操作方法太繁琐，很难被种鸡场接受。未经稀释的鸡精子在体外存活时间很短，当鸡精液采集入集精装置之后30min，存活率通常会由最初的70-80%降低至30-40%，这样不仅使得精液的利用不够充分，并且影响受精率。如果严格按照上述理论操作，一方面要兼顾稀释液与鸡精液等温，另一方面又要操作快速完成稀释，整个过程操作难度较大，需要多人配合完成，人力成本偏高，效果也并非乐见，缺乏大规模推广使用价值。
3、现有技术的鸡精液稀释过程，均采用稀释液向精液中缓慢添加，且强调不能反秩序添加，并给出了原因：如果将精液加入稀释液，当稀释液体积较大时，最初几滴精液中的精子就会受到“稀释打击”，会导致精子休克而丧失受精能力；而把稀释液加入精液，最初加入的稀释液对精子而言，稀释比例很小，精液是随着稀释液添加含量的逐渐增多才慢慢被稀释，几乎不会对精子造成大的损伤，因而目前在进行鸡精液稀释时均采用稀释液向鸡精液中添加的顺序。但申请人认为，采完精后，先加精液后加稀释液的添加顺序，导致先采集的精液不能及时稀释（因为刚采集精液温度较高，不能及时稀释的伤害较大），而且在最忙碌的采精输精过程中还需要增加一个添加稀释液的操作步骤，无疑增加了采精输精过程的操作难度。因此为保证精液能够得到及时稀释，申请人尝试反秩序添加的研究，实践证明先加入稀释液的步骤可以实现边采集边稀释，避免上述不足。而且稀释打击理论，也因采集一杯精液时间较短（2min左右），以及随后能在稀释液中恢复而规避，实践也证明了综合效应是未影响孵化率，反而还有所提高。上述研究对于鸡精液稀释技术的推广、提高受精率以及实现公鸡精液大批量检测技术操作（譬如一批采集300只公鸡精液后再统一检测）具有积极有力的推动作用。
4、现有技术，稀释液定量加入方法缺乏描述，实际操作中采用注射器量取稀释液，再加入精液中的操作繁琐。
5、稀释操作缺乏规范且需专人操作：相关现有技术文件主要集中在试验时的精子质量检测，有限的几篇文献报导了生产应用情况，但缺乏鸡精液稀释的细致操作描述，如等温稀释、精液一定比例稀释以及稀释后混匀等过程，均缺乏细致描述，更谈不上从生产输精人员角度进行工序简化研究。申请人着重对鸡精液稀释过程进行研究，实现鸡稀释精液人工输精技术的简化操作，推动鸡精液稀释技术的大规模推广与应用。
发明内容
为解决上述现有鸡稀释精液人工输精技术存在的问题与缺陷，本发明提供了一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，该方法包括鸡精液稀释液配制、分装与保存技术，以及与现有产业化输精技术配套的稀释液解冻、携带、预热、定量添加、混匀、输精等系统技术，其首先根据输精时采集一杯精液的体积与稀释比例确定一支稀释液的体积，实现一杯精液一支稀释液，解决生产中定量稀释操作繁琐问题，其次采用体温加热方式对稀释液实现预热，既简化了现有技术中稀释液使用前需要恒温水浴加热的繁琐操作问题，又能实现相对精确等温稀释；同时通过薄膜、手部、集精管的三者结合，在最大限度不改变目前工作现状下巧妙实现了集精、稀释与混匀一体可由1人完成，降低了技术难度，缩减了设备与人力成本。
本发明解决的另外一个重要的技术问题是克服了现有鸡稀释精液人工输精技术中只能按照将稀释液加入到鸡精液中的技术偏见，使反秩序添加并完成鸡精液稀释成为可能，实践证明了反秩序添加未影响孵化率，反而还有所提高。
为实现以上技术目的，本发明采用的技术方案为：一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）配制稀释液及冷冻保存：配制鸡精液稀释液，据输精习惯一杯精液量与稀释比例，将稀释液1-5mL定量分装并置于－20～－18℃条件下冷冻保存备用；
2）预热鸡精液稀释液：将稀释液从冷冻环境中取出置于6～10℃环境中保存，输精前20～30min采用体温加热方式对其进行预热至与鸡精液温差处于±3℃之内；
3）稀释与混匀：将鸡精液与已经预热的稀释液按比例1:1～1:2置于集精管或稀释液瓶中，取膜状物并将其贴在手掌面或手指指肚处，手部带膜处覆盖集精管管口或稀释液瓶瓶口，利用手掌与五指之间的夹紧力，单手固定住集精管后摇匀管内液体；
4）输精：手拿集精管或稀释液瓶靠底部1/3处呈倾斜状，同时该手夹住一块灭菌棉，每次每只母鸡输精30uL，输一只母鸡顺便擦拭一下输精管尖端。
其中，步骤1）中1-2mL体积用于输精后期，只需少量精液的情况；步骤4）中手拿集精管或稀释液瓶靠底部1/3处呈倾斜状，便于滴管吸精液，同时该手夹住一块灭菌棉，输一只母鸡顺便擦拭一下输精管尖端，可以减少母鸡间交叉污染。
较佳实施情况下，所述步骤1）中稀释液的主要成分为果糖7.0-9.0g、谷氨酸钠4.0-6.0g、磷酸氢二钾11.0-14.0g、磷酸二氢钾0.5-0.7g、N-三羟甲基甲基-2-氨基乙磺酸3.0-5.0g、柠檬酸钾0.4-0.8g、三水醋酸钠3.0-6.0g、无水氯化镁0.2-0.4g、番茄红素0.05-0.1g、加石英双重蒸馏水至1.0L。
所述步骤2）中体温预热的具体方式为将盛有稀释液的稀释液瓶放入身体贴肤口袋实现预热至稀释液与鸡精液温差处于±3℃之内。
较佳实施情况下，所述步骤2）中稀释液解冻方法为将稀释液从冷冻室拿出存入可随身带的微型保温杯中，所述微型保温杯中放置少量冰块，可满足6～10℃温度要求，输精前20～30min置入贴肤口袋；当使用已预热的一支稀释液的时候，立即把下一支稀释液放入贴肤口袋预热。上述操作可利用冰冻的稀释液自身低温以及保温杯隔热效果来维持稀释液所需的低温环境，同时可抑制稀释液中可能的微生物生长繁殖。
优选的，所述体温预热时身体贴肤口袋具体要求为：冷季置于贴肤上衣胸前口袋，热季置于贴肤裤袋。
较佳实施情况下，所述步骤3）将鸡精液与稀释液按比例1:1～1:2置于集精管中的具体操作为：利用集精管采集规定用量鸡精液，根据稀释比例将已经预热的1～2倍体积的稀释液沿杯壁缓慢加入集精管内。
较佳实施情况下，所述步骤3）将鸡精液与稀释液按比例1:1～1:2置于稀释液瓶中的具体操作为：直接利用含有固定体积稀释液的稀释液瓶，逐个采集鸡精液，直到达到需要的稀释比例1:1～1:2为止。
较佳实施情况下，所述集精管或稀释液瓶为高4-6cm，内径2cm，管口为2.5～3cm喇叭状的试管。上述集精管或稀释液瓶为喇叭状的试管，喇叭口可用于缓存精液，如果有不合格的，可以擦除。
较佳实施情况下，所述步骤3）中混匀时用于密封管口或瓶口的膜状物为带有双面保护层的无菌薄膜或单层灭菌胶带或一次性灭菌PE医用手套。
较佳实施情况下，所述步骤3）稀释与混匀的具体操作为将鸡精液与已经预热的稀释液按比例1:1～1:2置于集精管或稀释液瓶中，取带有双面保护层的薄膜，撕下其中一面保护层，将薄膜贴在手掌靠近手腕处，撕下薄膜的另一面保护层，手掌带膜处覆盖集精管管口，利用手掌与中指或无名指之间的夹紧力反复颠倒集精管至管内液体整体颜色呈均匀状态，所述均匀状态为集精管或稀释液瓶中不含有白色不规则状物质。
本发明的有益效果：1）本发明方法涉及的稀释液配制步骤中，稀释液中添加了新型抗氧化剂番茄红素，能显著提高低温保存鸡精子的活力、生存指数、渗透压抗性、DNA的完整性，因而上述稀释液可采用冷冻方式保存而非传统的加抗生素冷藏，解决了鸡精液稀释液必须现配现用的问题，延长了保质期。
2）本发明方法涉及的稀释液分装冷冻保存步骤中，根据输精时采集一杯精液的体积与稀释比例确定一支稀释液的体积，实现一杯精液一支稀释液，省掉定量吸取稀释液然后缓缓添加到精液中的步骤，解决生产中定量稀释操作繁琐问题，可实现2个小时内，3人输精1000只母鸡。
3）在本发明研发初期，申请人通过测定不同环境与条件下原精稀释前温度如图1所示，确定了原精温度参照标准，曲线结果显示，精液温度在不同体积采集量及外界温度之下，其受影响较小，或者说原精温度较为稳定，温度在34.1±1.25℃（也就是32.85～35.35℃之间）。依据上述参照标准可实现原精温度相对的精确预测。
4）本发明方法在实际生产操作中采精员在采精前先将稀释液进行体温预热，待精液采集完毕立即与依靠体温预热的稀释液混合后进行输精操作，实验结果证明体温预热可以满足稀释液预热条件，按照上述方式预热稀释液对于稀释后输精的受精率就并无太大影响，这样反而简化了现有技术中稀释液使用前需要恒温水浴加热的繁琐操作问题，又能实现精液及时相对等温稀释。由图1可知，在鸡舍采取控温条件下，由于采集速度快，精液采出到稀释前时间短，原精温度受采集体积的影响小，但随舍温升高而升高，同时也发现与人体温预热稀释液的温度也是随环境温度升高而升高。尽管随着环境温度变化，但采用贴肤口袋（热季裤袋与冷季上衣口袋）体温预热稀释液方式，与原精采集后立即测定（即稀释前温度），始终在±3℃范围内，经试验证明，能获得很好的效果。同时通过实验也证明了按照上述操作时只要保证稀释液与鸡精液之间的温差处于±3℃之内即可达到较好受精率，这一结果无疑为后续研究人员指明了在精液稀释时无需再严格要求等温标准，解决了温度精确控制的难题，稀释操作成功率可大大提高。
5）本发明方法涉及的鸡精液稀释与混匀步骤通过薄膜、手部、集精管的三者结合，在最大限度不改变目前工作现状下巧妙实现了集精、稀释与混匀一体可由1人完成，大大降低了技术难度，缩减了设备与人力成本。
6）本发明克服了现有鸡稀释精液人工输精技术中只能按照将稀释液加入到鸡精液中的技术偏见，使反秩序添加并完成鸡精液稀释成为可能，实践证明反秩序添加的步骤可以实现边采集边稀释，能够最大程度上使鸡精液得到及时稀释，未影响孵化率，反而还有所提高。反秩序添加简化了鸡精液稀释操作，同时为鸡精液大批量检测技术提供了新思路，在实际操作中可以先准备好大量含一定量稀释液的离心管，可边采集边冷藏，每小时可采集300份精液，再集中对稀释的鸡精液进行大批量镜检，实行大批量高效率检测。
7）本发明方法与含有番茄红素成分的鸡精液稀释液配套使用，对鸡精液进行1:1稀释，节约一半公鸡，达到孵化率不降低，甚至提高1%左右孵化率的效果，经济效益显著。目前该技术已经通过了中试，即将产业化应用。
附图说明
图1为不同环境与条件下原精温度与体温预热稀释液效果对比图。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面对本发明的具体实施方式做详细说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其他方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。
实施例1：
具体操作方式包括以下步骤：
1）配制稀释液及冷冻保存：取果糖7.0g、谷氨酸钠6.0g、磷酸氢二钾11.0g、磷酸二氢钾0.7g、N-三羟甲基甲基-2-氨基乙磺酸3.0g、柠檬酸钾0.8g、三水醋酸钠3.0g、无水氯化镁0.4g、番茄红素0.05g、加石英双重蒸馏水至1.0L；将配制好的鸡精液稀释液采用塑料离心管5mL定量分装并置于－18℃条件下冷冻保存备用；
2）预热鸡精液稀释液：将稀释液从冷冻环境中取出存入可随身带的微型保温杯中，所述微型保温杯中放置少量冰块，可满足6～10℃温度要求，输精前30min置于贴肤上衣胸前口袋对其进行预热至与鸡精液温差处于±3℃之内；
3）稀释与混匀：利用集精管采集鸡精液5mL，根据稀释比例1:1将已经预热的5mL体积稀释液沿杯壁缓慢加入集精管内；取单层灭菌胶带并将其贴在拇指指肚处，手部带膜处覆盖集精管管口，中指支撑集精管底部，两指夹紧集精管反复颠倒7次后管内液体整体颜色均匀；
4）输精：手拿集精管靠底部1/3处呈倾斜状，同时该手夹住一块灭菌棉，采用5日间隔输精方式进行浅阴道输精，每次每只母鸡输精30uL，输一只母鸡顺便擦拭一下输精管尖端。
利用实施例1所述方法进行稀释精液人工输精实验，对照组采用原精输精，于2014年12月-2015年1月在湖南顺成实业有限公司进行实施例1和对照组的孵化效果检测。对其受精率及入孵蛋健雏率进行统计，统计结果如表1所示。按本实施例稀释比例1:1稀释，精液的利用率会提高一倍，同时孵化率提高1%左右，在生产实践过程中可以有效的利用种公鸡原精液，减少种公鸡的养殖量，降低生产成本，提高经济效益。
表1孵化效果检测结果
实施例2：
具体操作方式包括以下步骤：
1）配制稀释液及冷冻保存：取果糖9.0g、谷氨酸钠4.0g、磷酸氢二钾14.0g、磷酸二氢钾0.5g、N-三羟甲基甲基-2-氨基乙磺酸5.0g、柠檬酸钾0.4g、三水醋酸钠6.0g、无水氯化镁0.2g、番茄红素0.1g、加石英双重蒸馏水至1.0L；将配制好的鸡精液稀释液采用稀释液瓶1mL定量分装并置于－20℃条件下冷冻保存备用；
2）预热鸡精液稀释液：将稀释液从冷冻环境中取出置于8℃环境中保存，输精前20min置于贴肤裤袋对其进行预热至与鸡精液温差处于±3℃之内；
3）稀释与混匀：直接利用已经预热的含有1mL体积稀释液的稀释液瓶，逐个采集鸡精液，直到达到需要的稀释比例1:2为止；取一次性灭菌PE医用手套戴在手部，将稀释液瓶瓶口扣在手掌靠近手腕处，利用手掌与中指或无名指之间的夹紧力反复颠倒8次稀释液瓶至瓶内液体整体颜色呈均匀状态；稀释液瓶为高5cm，内径2cm，管口为3cm喇叭状的试管；
4）输精：手拿稀释液瓶靠底部1/3处呈倾斜状，同时该手夹住一块灭菌棉，采用5日间隔输精方式进行浅阴道输精，每次每只母鸡输精30uL，输一只母鸡顺便擦拭一下输精管尖端。
实施例3：
具体操作方式包括以下步骤：
1）配制稀释液及冷冻保存：取果糖8.0g、谷氨酸钠5.0g、磷酸氢二钾12.0g、磷酸二氢钾0.6g、N-三羟甲基甲基-2-氨基乙磺酸4.0g、柠檬酸钾0.6g、三水醋酸钠5.0g、无水氯化镁0.3g、番茄红素0.075g、加石英双重蒸馏水至1.0L；将配制好的鸡精液稀释液采用稀释液瓶4mL定量分装并置于－20℃条件下冷冻保存备用；
2）预热鸡精液稀释液：将稀释液从冷冻室拿出存入可随身带的微型保温杯中，所述微型保温杯中放置少量冰块，可满足6～10℃温度要求，输精前25min贴肤裤袋或上衣胸前口袋对其进行预热至与鸡精液温差处于±3℃之内；
3）稀释与混匀：直接利用含有4mL体积稀释液的稀释液瓶，逐个采集鸡精液，直到达到需要的稀释比例1:1为止；所述稀释液瓶为高6cm，内径2cm，管口为3cm喇叭状的试管；取带有双面保护层的薄膜，撕下其中一面保护层，将薄膜贴在手掌靠近手腕处，撕下薄膜的另一面保护层，手掌带膜处覆盖集精管管口，利用手掌与中指或无名指之间的夹紧力反复颠倒集精管至管内液体整体颜色呈均匀状态；
4）输精：手拿稀释液瓶靠底部1/3处呈倾斜状，同时该手夹住一块灭菌棉，采用5日间隔输精方式进行浅阴道输精，每次每只母鸡输精30uL，输一只母鸡顺便擦拭一下输精管尖端。
利用实施例3所述方法进行稀释精液人工输精实验，对照组采用原精输精，分别进行1～3号孵化实验并完成效果检测。其中，1号实验的常规组采用恒温水浴预热稀释液后添加到鸡精液中，且没有采用结合薄膜的混匀方式，其他操作同实施例3；2号实验所处时间为冷季；3号实验所处时间为热季；分别对其受精率及入孵蛋活胚率进行统计，统计结果如表2所示。
表2不同公司不同处理方式孵化检测结果
结果显示，1号实验采用恒温水浴处理稀释液的常规组，受精率与入孵蛋活胚率均低于原精输精的对照组；而对比2号实验和3号实验，无论是冷季体温预热还是热季体温预热稀释液，受精率与入孵蛋活胚率均高于原精输精的对照组，且均高于1号实验组。上述数据证明了生产实践过程中按照本发明方案进行稀释精液人工输精，可以显著提高受精率及入孵蛋活胚率，从而达到有效利用种公鸡原精液、减少种公鸡的养殖量、降低生产成本、提高经济效益的目的，经济效益明显，而且操作简单，不需要因实施稀释技术而专门增加人手。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）配制稀释液及冷冻保存：配制鸡精液稀释液，据输精习惯一杯精液量与稀释比例，将稀释液1-5mL定量分装并置于－20～－18℃条件下冷冻保存备用；
2）预热鸡精液稀释液：将稀释液从冷冻环境中取出置于6～10℃环境中保存，输精前20～30min采用体温加热方式对其进行预热至与鸡精液温差处于±3℃之内；
3）稀释与混匀：将鸡精液与已经预热的稀释液按比例1:1～1:2置于集精管或稀释液瓶中，取膜状物并将其贴在手掌面或手指指肚处，手部带膜处覆盖集精管管口或稀释液瓶瓶口，利用手掌与五指之间的夹紧力，单手固定住集精管后摇匀管内液体；
输精：手拿集精管或稀释液瓶靠底部1/3处呈倾斜状，同时该手夹住一块灭菌棉，每次每只母鸡输精30uL，输一只母鸡顺便擦拭一下输精管尖端。
2.根据权利要求1所述的一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，其特征在于，所述步骤1）中稀释液的主要成分为果糖7.0-9.0g、谷氨酸钠4.0-6.0g、磷酸氢二钾11.0-14.0g、磷酸二氢钾0.5-0.7g、N-三羟甲基甲基-2-氨基乙磺酸3.0-5.0g、柠檬酸钾0.4-0.8g、三水醋酸钠3.0-6.0g、无水氯化镁0.2-0.4g、番茄红素0.05-0.1g、加石英双重蒸馏水至1.0L。
3.根据权利要求1所述的一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，其特征在于，所述步骤2）中体温预热的具体方式为将盛有稀释液的稀释液瓶放入身体贴肤口袋实现预热至稀释液与鸡精液温差处于±3℃之内。
4.根据权利要求3所述的一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，其特征在于，所述步骤2）中稀释液解冻方法为将稀释液从冷冻室拿出存入可随身带的微型保温杯中，所述微型保温杯中放置少量冰块，可满足6～10℃温度要求，输精前20～30min置入贴肤口袋；当使用已预热的一支稀释液的时候，立即把下一支稀释液放入贴肤口袋预热。
5.根据权利要求3或4所述的一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，其特征在于，所述体温预热时身体贴肤口袋具体要求为：冷季置于贴肤上衣胸前口袋，热季置于贴肤裤袋。
6.根据权利要求1所述的一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，其特征在于，所述步骤3）将鸡精液与稀释液按比例1:1～1:2置于集精管中的具体操作为：利用集精管采集规定用量鸡精液，根据稀释比例将已经预热的1～2倍体积的稀释液沿杯壁缓慢加入集精管内。
7.根据权利要求1所述的一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，其特征在于，所述步骤3）将鸡精液与稀释液按比例1:1～1:2置于稀释液瓶中的具体操作为：直接利用含有固定体积稀释液的稀释液瓶，逐个采集鸡精液，直到达到需要的稀释比例1:1～1:2为止。
8.根据权利要求1所述的一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，其特征在于，所述集精管或稀释液瓶为高4-6cm，内径2cm，管口为2.5～3cm喇叭状的试管。
9.根据权利要求1所述的一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，其特征在于，所述步骤3）中混匀时用于密封管口或瓶口的膜状物为带有双面保护层的无菌薄膜或单层灭菌胶带或一次性灭菌PE医用手套。
10.根据权利要求9所述的一种可用于种鸡场人工输精的精液稀释方法，其特征在于，所述步骤3）稀释与混匀的具体操作为将鸡精液与已经预热的稀释液按比例1:1～1:2置于集精管或稀释液瓶中，取带有双面保护层的薄膜，撕下其中一面保护层，将薄膜贴在手掌靠近手腕处，撕下薄膜的另一面保护层，手掌带膜处覆盖集精管管口，利用手掌与中指或无名指之间的夹紧力反复颠倒集精管至管内液体整体颜色呈均匀状态，所述均匀状态为集精管或稀释液瓶中不含有白色不规则状物质。
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