一种药物中间体及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及坎格雷洛制备方法技术领域。
背景技术
坎格雷洛,英文名:cangrelor,化学名:N-[2-(甲硫基)乙基]-2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]-5'-腺苷酸,带二氯亚甲基二磷酸的单酐,四钠盐,化学结构式:
坎格雷洛系医药公司TheMedicinesCompany开发,目前正处于Ⅲ期临床实验,属于血小板ADP(P2Y12)受体拮抗剂类的抗血小板药。
关于坎格雷洛的合成,在专利CN1042430C以及论文J.Med.Chem.1999,42,213-220中有专述,所有这些文献无一例外地使用了N-乙酰基-2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷-2',3',5'-三乙酯(下式6化合物)作为合成路线中的一个关键中间体。以J.Med.Chem.1999,42,213-220为例,2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷(1)为起始原料,与乙酸酐反应生成四乙酰保护的化合物N-乙酰基-2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷-2',3',5'-三乙酯(6),然后化合物6经亲核取代反应,碱水解脱乙酰基,得到坎格雷洛关键中间体(5),再经磷酰化制得坎格雷洛,如式1-2所示。
分析现有N-乙酰基-2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷-2',3',5'-三乙醋(6)的合成路线可知,在实际酰化过程中,,2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷(1)与乙酸酐反应中,并不能得到纯的四乙酰化的目标产物。究其原因是2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷6位氮原子的活性较强,在乙酰化过程中N上易产生二乙酰化的副产物,如下式所示。该副产物的产生造成产品纯化困难、逐步带入随后的产物中。
发明内容
本发明的目的就是克服现有技术存在的上述问题,提供一种新的制备坎格雷洛的中间体。利用该新的中间体,能简单高收率的得到坎格雷洛。
本发明的另一个目的是提供所述的新中间体的制备方法和应用。
为达上述目的,本发明的技术方案如下:
下式的化合物2:
化合物2,其化学名称为N-[2-(甲硫基)乙基]-2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷-2',3',5'-三乙酯。
式2化合物的制备方法,该方法是将2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷溶于乙酸酐加入缚酸剂反应得到:
上述式2化合物的制备方法,反应时温度为-15℃-40℃,优选-5℃-20℃。所述的缚酸剂可以是乙酸钠、吡啶、三乙胺等,优选吡啶。化合物1与乙酸酐的投料摩尔比优选1:5-1:50。
式2化合物用于制备坎格雷洛及其它已知中间体,收率和纯度都比现有技术大有提高。
式2化合物用于制备坎格雷洛及其它已知中间体的步骤如下:
1)将甲酸加入乙酸酐后降至室温,加入化合物2反应得到式3化合物
2)将化合物3溶于反应溶剂中,碱性条件下加入2-氯乙基甲基硫醚反应得到化合物4
3)将化合物4在碱性条件下水解得到化合物5
上述式3化合物的制备,优选的条件是将甲酸加入乙酸酐后于40-60℃反应20-40min后降至室温。加入化合物2后的反应温度一般在60-100℃。化合物2与甲酸的投料摩尔比优选为1:4-1:50;化合物2与乙酸酐的投料摩尔比优选为1:4-:1:10。
上述式4化合物的制备方法,所述的碱性条件可以是无机碱碳酸钾、碳酸钠等,或有机碱三乙胺、吡啶等;优选碳酸钾或碳酸钠。
中间体化合物5制备坎格雷洛的方法可参考现有技术。
本发明的有益效果:现有技术所得产品纯度不高的主要原因是腺苷的N上的两个氢原子具有相当活性,易于被乙酰基所取代,且两个氢原子没有选择性,容易同时上两个保护基,造成收率低,产品难于纯化分离的困难。本发明的申请人通过更换N-保护基,采用活性较弱的甲酰基作为N保护基,顺利得到一种新的N-甲酰基保护的中间体,该中间体具有纯度高,稳定性好,制备方法易于操作等优点。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细描述,但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
以下内容中所涉及的实验材料和试剂,如未特别说明则为市售品。从现有原料到制得中间体化合物5的反应路线如下所示:
实施例1-4:2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷-2',3',5'-三乙酯(2)的合成
将2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷(10.0g,25.3mmol)溶于吡啶(20ml,253mmol,10eq)中,冰浴下滴加乙酸酐(35ml,5eq),-5℃反应3h,加100ml水析出白色固体,搅拌1h抽滤得白色固体11.35g,收率86%。ESI-MS(m/z):522.13[M+H]+,544.11[M+Na]+,560.09[M+K]+;1HNMRδ(CDCl3)7.87(1H,s,H-8),6.14(1H,d,H-1'),5.82(1H,t,H-2'),5.67(2H,s,NH2),5.45(1H,m,H-3'),4.41(3H,m,H-4',5'),3.29(2H,m,SCH2),2.63(2H,m,CF3CH2),2.13(3H,s,CH3CO),2.12(3H,s,CH3CO),2.07(3H,s,CH3CO)。
将2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷(5.0g,12.65mmol)溶于乙酸酐(60ml,632.34mmol,50eq)中降至-15℃,加入三乙胺(3.84g,3eq),反应7h,加50ml水析出白色固体,搅拌1h抽滤得白色固体3.94g,收率60%。
将2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷(10.0g,25.3mmol)溶于吡啶(26ml,324mmol,13eq)中,冰浴下滴加乙酸酐(40ml,426mmol,17eq),10℃反应3h,加100ml水析出白色固体,搅拌1h抽滤得白色固体11.35g,收率86%。
将2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷(5.0g,12.65mmol)和乙酸钠(0.62g,7.59mmol,0.6eq)溶于乙酸酐(6ml,63.2mmol,5eq)中40℃反应5h,加10ml水析出白色固体,搅拌1h抽滤得白色固体4.48g,收率68%。
实施例5-8N-甲酰基-2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷-2',3',5'-三乙酰(3)的合成
低温下将甲酸(13ml,345mmol,18eq)加入乙酸酐(27ml,288mmol,15eq)50℃下搅拌30min,降至室温,加入化合物2(10.0g,19.2mmol),70℃反应3.5h。加水65ml析出白色固体,20℃左右搅拌2h抽滤得化合物(3)(9.86g,收率94.0%)。ESI-MS(m/z):572.15[M+Na]+;1HNMRδ(CDCl3)9.83(2H,s,NH+CHO),8.40(1H,s,H-8),6.21(1H,d,H-1'),5.85(1H,t,H-2'),5.56(1H,t,H-3'),4.40(3H,4-H'+5-2H'),3.32(2H,SCH2),2.64(2H,CF3-CH2),2.15-2.07(6H,CH3CO)。
低温下将甲酸(14.47ml,383.5mmol,50eq)加入乙酸酐(7.25ml,76.7mmol,10eq)50℃下搅拌30min,降至25℃,加入化合物2(4.0g,7.67mmol),60℃反应10h。加水65ml析出白色固体,20℃左右搅拌2h抽滤得化合物(3)(3.50g,收率83%)。
低温下将甲酸(13ml,345mmol,18eq)加入乙酸酐(27ml,288mmol,15eq)50℃下搅拌30min,降至室温,加入化合物2(10.0g,19.2mmol),80℃反应3.5h。加水65ml析出白色固体,20℃左右搅拌2h抽滤得化合物(3)(9.86g,收率94.0%)
低温下将甲酸(13ml,345mmol,18eq)加入乙酸酐(27ml,288mmol,15eq)50℃下搅拌30min,降至室温,加入化合物2(10.0g,19.2mmol),80℃反应3.5h。加水65ml析出白色固体,20℃左右搅拌2h抽滤得化合物(3)(9.86g,收率94.0%)低温下将甲酸(1.74ml,46.0mmol,4eq)加入乙酸酐(4.35ml,46.0mmol,4eq)50℃下搅拌30min,降至25℃,加入化合物2(6.0g,11.5mmol),100℃反应2h。加水65ml析出白色固体,20℃左右搅拌2h抽滤得化合物(3)(5.06g,收率80%)
实施例9-12:N-甲酰基-N-[2-(甲硫基)乙基]-2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷-2',3',5'-三乙酰(4)的合成
将化合物3(8.0g,14.6mmol)溶于80mlDMF中,再加入碳酸钾(4.02g,2eq),60℃反应1h,加入2-氯乙基甲基硫醚(4.35ml,3eq)60℃反应2h,得深色糖浆物8.58g,收率94%。TLC(二氯甲烷:甲醇=20:1)Rf=0.9。
将化合物3(5.0g,9.1mmol)溶于50mlDMF中,再加入三乙胺(1.3ml,1eq),60℃反应1h,加入2-氯乙基甲基硫醚(1.81ml,2eq)25℃反应15h,得深色糖浆物3.42g,收率60%。
将化合物3(4.0g,7.3mmol)溶于40mlDMF中,再加入碳酸钠(1.54g,2eq),60℃反应1h,加入2-氯乙基甲基硫醚(2.2ml,3eq)60℃反应2h,得深色糖浆物4.34g,收率95%。
将化合物3(4.0g,7.3mmol)溶于40mlDMF中,再加入乙酸钠(1.19g,2eq),60℃反应1h,加入2-氯乙基甲基硫醚(2.2ml,3eq)100℃反应1h,得深色糖浆物3.50g,收率80%。
实施例13:N-[2-(甲硫基)乙基]-2-[(3,3,3-三氟丙基)硫代]腺苷(5)合成
将化合物4(2.57g,4.1mmol)溶于氢氧化钠(2.14g,53.6mmol,13eq)的甲醇(80ml)溶液中,回流1h,减压蒸掉甲醇,加水,析出白色固体1.72g,收率89%。
ESI-MS(m/z):624[M+H]+,646[M+Na,]+;1HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ:8.25(1H,s,H-8),8.02(1H,s,NH),5.82(1H,d),5.36(1H,s,OH),5.11(1H,s,OH),5.00(1H,s,OH),4.56(1H),4.13(2H),3.92(1H,m),3.63,(4H),3.27(2H),2.72(4H),2.06(3H,s,SCH3)。