CN105272985A

CN105272985A - 三唑并[4,5-d]嘧啶化合物及其合成方法、用途、组合物

Info

Publication number: CN105272985A
Application number: CN201410290580.2A
Authority: CN
Inventors: 刘斌; 左斌海; 许华锋; 柯兴斌; 邓培玲; 孙超
Original assignee: ZHUHAI LIANBANG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: ZHUHAI LIANBANG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2014-06-24
Filing date: 2014-06-24
Publication date: 2016-01-27
Anticipated expiration: 2034-06-24
Also published as: CN105272985B

Abstract

本发明提供一种三唑并[4,5-d]嘧啶化合物，其特征在于，具有式(Ⅰ)所示结构，。采用本发明提供的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物，结构简单、具有抗血小板聚集活性，可用于心肌梗死，心绞痛、脑梗死等心脑血管疾病的预防和治疗。

Description

三唑并[4,5-d]嘧啶化合物及其合成方法、用途、组合物

技术领域

本发明涉及一种三唑并[4,5-d]嘧啶化合物及其合成方法、用途、组合物。

背景技术

在现有技术中，血栓病是一种危害极大的心脑血管疾病，全球每年约有1200万人死于血栓病，接近总死亡人数的四分之一。常见的血栓病包括冠状动脉综合征(心肌梗死、不稳定心绞痛等)、脑梗死、各类静脉血栓等。血栓的形成主要是由于血液凝固和血小板黏附聚集所导致。血小板聚集于血管内壁是血栓形成的重要原因，通过抑制血小板的聚集，可以有效防止血栓的形成。抗血小板聚集类药物是临床上的主要抗血栓药物。据IMS统计，2009年，全球抗血栓药物的市场销售额为194.3亿美元，抗血小板药物的销售额达到了146亿美元，占抗血栓药市场的75％。而且，血小板药物销量逐年稳步增加，2010年达到了152亿美元，增幅为4.08％，2011年达到了164亿美元，同比增加了7.89％。

抗血小板聚集类药物有多种作用机理，其中ADP(二磷酸腺苷)受体抑制剂类药物是临床上治疗血栓的主要用药。ADP的受体为血小板膜上P2Y12。ADP与P2Y12受体结合后，能够触发形成稳定的、持久的血小板聚集效应。这种聚集效应主要通过四种机制实现：(1)抑制腺苷酸环化酶，从而降低cAMP浓度，cAMP浓度降低可以使cAMP依赖的蛋白激酶失活，使一种称为扩血管物质激活的磷酸蛋白(VSAP)不能磷酸化。VSAP的磷酸化可使血小板膜糖蛋白(GP)IIb/IIIa受体封闭，从而抑制血小板的聚集。(2)激活磷酯酰肌醇3激酶，促进血小板致密颗粒内有关物质的释放，形成稳定的血小板聚集。(3)通过激活磷酯酰激酶3激酶，使丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶B和RapibGTP结合蛋白活化。(4)促进血小板糖蛋白(GP)IIb/IIIa受体与纤维蛋白原结合的活性位点暴露与活化，从而促进血小板与纤维蛋白交联、血小板与血小板之间的聚集。ADP受体抑制剂能够与P2Y12结合，在不激活血小板聚集链式反应的同时，阻碍ADP与P2Y12的结合，从而抑制血小板的聚集。目前，ADP受体拮抗剂类药物的代表有氯吡格雷、普拉格雷和替格瑞洛，靶标都是P2Y12受体，能够有效阻碍ADP介导的信号传导，抑制血小板的活化和聚集。

氯吡格雷和普拉格雷都属于噻吩苯并吡啶类药物，而替格瑞洛属于三唑并嘧啶类药物。替格瑞洛与氯吡格雷、普拉格雷相比，具有以下优势：(1)氯吡格雷和普拉格雷都是前药，本身不是活性成分，需要在体内肝酶转化成活性成分；替格瑞洛本身就是活性成分，不需要转化，直接经肠胃迅速吸收，不受肝功能代谢的影响。因此，替格瑞洛药效见效更快，药效更强。另外，由于需要经过肝脏代谢成活性成分，导致其容易受到个体代谢系统的影响。研究显示，氯吡格雷对血小板的抑制作用具有个体差异性，且对部分患者无效。而替格瑞洛个体差异性小，对氯吡格雷低反应患者产生有效性。(2)替格瑞洛是可逆型ADP受体(P2Y12)抑制剂，而氯吡格雷和普拉格雷这类噻吩苯并吡啶类药物是非可逆型ADP受体(P2Y12)抑制剂。由于与受体的结合是可逆的，可逆型ADP受体抑制剂具有一定的优势，当停止用药后一段时间，药效消失快。而且，替格瑞洛这类可逆型ADP受体抑制剂的副作用更小，没有出现像噻吩苯并吡啶类药物常见的副作用(再生障碍性贫血、中性粒细胞减少、血小板减少等)。虽然，替格瑞洛与噻吩苯并吡啶类药物相比，具有见效快，活性高，副作用小等优势，但是，也具有一定的劣势。氯吡格雷、普拉格雷这类噻吩苯并吡啶类药物的分子结构简单，易于合成。氯吡格雷只有一个手性中心，而普拉格雷虽然有一个手性中心，药用成分却是消旋混合体，这都降低了这类药的用药成本。而替格瑞洛结构复杂，分子量超过500，有六个手性中心，相比而言，复杂程度远远超过氯吡格雷和普拉格雷。这导致替格瑞洛的用药成本高，降低了其竞争优势。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种结构简单、具有抗血小板聚集活性的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物。

本发明提供一种三唑并[4,5-d]嘧啶化合物，具有式(Ⅰ)所示结构，

R₁是H、C1-C3的烷基、CH₂OH、CHOHCH₃、苯基、被一个或者两个卤原子取代的苯基；

R₂是H、CH2OH、C1-C3的烷基；

R₃是H、CH2OH、C1-C3的烷基；

R₄是H、C1-C6的烷基、被一个或多个卤原子取代的C1-C6烷基、被一个或多个羟基取代的C1-C6烷基、取代环丙基、苄基、被一个或多个卤原子取代的苄基、苯环上被一个或多个卤原子取代的2-苯乙基；

R₅是H、C1-C5的烷基、被一个或多个卤原子取代的C1-C5烷基。

进一步地，

当R₁为苯基时，R₃和R₄均为H；

当R₃或R₄为CH₂OH时，R₁为H，R5为正丙基或正丁基。

进一步地，

R₄为丁基、羟基乙基、苄基、被一个或两个氟原子取代的苄基、2-苯乙基、取代环丙基。

进一步地，

R₄为取代环丙基，对应的化合物具有式(Ⅱ)所示结构

R₆为苯基、被一个或两个氟原子取代的苯基。

本发明还提供一种根据上述的化合物的制备方法，所述方法为一锅法合成，所述化合物通过下述路径合成：

进一步地，上述化学反应的条件为：

该反应的温度为0～30℃；

反应溶剂为乙酸乙酯和水；

结构通式(Ⅲ)的中间体先在亚硝酸钠和乙酸的作用下环化成结构通式(Ⅳ)的中间体；

然后再在碳酸钾或者碳酸钠的作用下与结构通式(Ⅴ)的原料反应，缩合成结构通式(Ⅰ)的化合物。

本发明还提供一种上述化合物在制备用于治疗或预防心肌梗死、脑梗死、暂时性局部缺血、外周血管疾病的药物中的用途。

本发明还提供一种上述化合物在制备用于治疗或预防不稳定或稳定心绞痛的药物中的用途。

本发明还提供一种上述化合物在制备用于治疗或预防血小板聚集疾病的药物中的用途。

本发明还提供一种组合物，包含上述任一项所述的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物及化合物和药学上可接受的辅料。

采用本发明提供的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物，结构简单、具有抗血小板聚集活性，可用于心肌梗死，心绞痛、脑梗死等心脑血管疾病的预防和治疗。

附图说明

此处所说明的附图用来提供对本发明的进一步理解，构成本申请的一部分，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：

图1示意性示出了实施例6中在200倍显微镜下的兔血小板的示意图。

具体实施方式

实施例1

本实施例提供化合物(2S)-3-(7-((R)-1-苯基乙胺)-5-正丙巯基-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)-1,2-丙二醇的合成，通过下述路径合成：

具体步骤如下：

(1)称量原料(2S)-3-(5-氨基-6-氯-2-正丙巯基嘧啶-4-氨基)-1,2-丙二醇(4.0g)加入到250mL三口瓶中，加入乙酸乙酯(80mL)，搅拌使原料全部溶解。加入乙酸(7.2g)之后，室温滴加浓度为1.2g/40mL的亚硝酸钠水溶液(40mL)，保持温度不超过30℃。滴加完之后，继续室温搅拌反应1-4h；

(2)监控步骤(1)的原料消失后，滴加浓度为15.1g/40mL的碳酸钾的水溶液(40mL)。滴加完之后，投入R-苯乙胺(2.0g)，继续搅拌反应10-24h；

(3)监控步骤(2)的原料(2S)-3-(7-氯-5-正丙巯基-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)-1,2-丙二醇消失后，停止搅拌。加入30mL乙酸乙酯，分液，水相用50mL乙酸乙酯萃取。合并乙酸乙酯相，用50mL的6％的碳酸钠水溶液洗涤，再用50mL纯水洗涤一次，最后用8.3g无水硫酸钠干燥。蒸掉溶剂得目标产品4.3g。

产品为黄色固体，收率81.1％，纯度99.2％。

LC-MS(M+H+)：389.2。

实施例2

本实施例提供化合物(2S)-3-(7-((1R,2S)-2-(3,4-二氟苯基)环丙氨基)-5-正丙巯基-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)-1,2-丙二醇的合成，通过下述路径合成：

具体步骤如下：

(1)称取原料(2S)-3-(5-氨基-6-氯-2-正丙巯基嘧啶-4-氨基)-1,2-丙二醇(2.87g)加入到250mL三口瓶中，加入40mL乙酸乙酯和30mL纯化水，再加入乙酸(5.2g)，搅拌，然后滴加浓度为0.70g/30mL亚硝酸钠的水溶液30mL，控制温度不超过30℃，滴加完之后，继续搅拌1-4h；

(2)监控步骤(1)的原料消失后，滴加浓度为10.8g/30mL的碳酸钾的水溶液30mL，滴加完之后，投入原料(1R,2S)-3,4-二氟苯基环丙胺(3.7g)，继续搅拌反应10-24h；

(3)监控步骤(2)的原料(2S)-3-(7-氯-5-正丙巯基-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)-1,2-丙二醇消失后，停止搅拌，分液，水相用40mL乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯相，用浓度为0.5mol/L的乙酸水溶液30mL洗涤两次，再用无水硫酸钠干燥，蒸掉溶剂乙酸乙酯，得目标产物3.9g。

产品为淡黄色固体，收率89.8％，纯度99.6％。

LC-MS(M+H+)：437.2。

实施例3

本实施例提供化合物2-(7-苯甲氨基-5-正丙巯基-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)乙醇的合成，通过下述路径合成：

具体步骤如下：

(1)称取原料2-(5-氨基-6-氯-2-正丙巯基嘧啶-4-氨基)乙醇(4.0g)加入到250mL三口瓶中，加入40mL纯化水和40mL乙酸乙酯，再加入乙酸(6.3g)，搅拌，然后滴加浓度为1.10g/40mL亚硝酸钠的水溶液40mL，控制温度不超过30℃，滴加完之后，继续搅拌1-3h；

(2)监控步骤(1)的原料消失后，滴加浓度为12.9g/40mL的碳酸钾的水溶液40mL，滴加完之后，投入苯甲胺(2.1g)，继续搅拌反应10-20h；

(3)监控步骤(2)的原料2-(7-氯-5-正丙巯基-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)消失后，停止搅拌。抽滤，滤饼用20mL乙酸乙酯洗涤两次，在45℃下真空干燥，得到目标产物4.8g。

产品为白色固体，收率92.3％，纯度99.5％。

LC-MS(M+H+)：345.1。

实施例4

本实施例提供化合物2-(7-(2-羟基)乙胺基-5-正丙巯-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)乙醇的合成，通过下述路径合成：

(1)250mL三口瓶中加入原料2-(5-氨基-6-氯-2-正丙巯基嘧啶-4-氨基)乙醇(4.0g)，加入80mL乙酸乙酯，搅拌使其全部溶解。一次性加入8.1g乙酸和40mL纯水，室温条件下滴加浓度1.3g/40mL的亚硝酸钠水溶液40mL，滴加完毕之后，室温搅拌反应。

(2)监控步骤(1)的原料消失后，滴加浓度为11.9g/40mL乙醇胺的水溶液40mL。滴加完之后，继续室温搅拌反应。

(3)监控步骤(2)的原料2-(7-氯-5-正丙巯基-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)乙醇消失后，停止搅拌。抽滤，滤饼用40mL乙酸乙酯洗涤。所得固体在45℃真空干燥，得到目标产物4.0g。

产品为灰白色固体，收率87.7％，纯度99.9％。

LC-MS(M+H+)：299.1。

实施例5

本实施例提供化合物2-(7-(4-氟苯甲胺基)-5-正丁巯-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)-1,3-丙二醇的合成，通过下述路径合成：

具体步骤如下：

(1)称取原料2-(5-氨基-2-正丁巯基-6-氯嘧啶-4-氨基)-1,3丙二醇(1.5g)加入到100mL三口瓶中，加入25mL乙酸乙酯和4.3g乙酸。室温搅拌下滴加浓度为0.5g/15mL的亚硝酸钠溶液15mL。滴完完毕之后，继续室温搅拌反应1-4h；

(2)检测到(1)步的原料反应完全之后，滴加浓度为6.9g/mL的碳酸钾溶液15mL。滴加完之后，一次性投入0.7g4-氟苯甲胺，继续搅拌反应10-24h；

(3)检测到步骤(2)的原料2-(7-氯-5-正丁巯基-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基)-1,3丙二醇完全反应之后，抽滤，滤饼用20mL乙酸乙酯洗涤一次。所得固体在45℃下真空干燥，得到目标产品1.6g。

产品为灰白色固体，收率80.5％，纯度99.7％。

LC-MS(M+H+)：407.2。

表1和表2中所列化合物均采用以上五个实施例同样的方法进行合成，所用是LC-MS仪器为：安捷伦6120单四级杆液质联用仪。化合物的质谱信息在表1和表2中列出。

实施例6

抗血小板聚集活性测试

从健康兔子的胸主动脉抽取新鲜血液，加入起抗凝作用的柠檬酸钠溶液(质量分数为3.8％)，加入量为血液体积的1/9。

将血样在200g/1000rpm下离心15min，取上层清液(富血小板血浆PRP)。剩余部分在1500g/4000rpm下离心10min，取上层清液(贫血小板血清PPP)。用PPP将PRP中的血小板个数调整为3.0*108/mL。图1为200倍显微镜下的兔血小板的示意图。

按照Born氏比浊法，将275μLPRP加入到比浊管中，加入磁子。将比浊管放入血小板聚集仪中，37℃保温搅拌3-5min。经PPP和PRP校正后，加入15μL待测化合物的溶液，使其最终浓度为8.0μM。搅拌五分钟之后，再加入浓度为10.0μLADP溶液0.6mM诱导聚集，使其最终浓度20μM。空白对照中，只加入空白溶液以及ADP溶液进行对照。

根据仪器自动打印出来的5min内的聚集曲线读取样品最大聚集率，经过以下公式计算血小板抑制率：

抑制率(％)＝100％*(空白聚集率-样品最大聚集率)/空白聚集率

化合物的血小板聚集抑制率列于表1和表2中，通过抑制率的百分比反应血小板聚集活性，抑制率越大，说明抗血小板聚集活性越高。

表1化合物结构信息和抗血小板聚集活性数据

表2化合物结构信息和抗血小板聚集活性数据

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种三唑并[4,5-d]嘧啶化合物，其特征在于，具有式(Ⅰ)所示结构，

R₂是H、CH2OH、C1-C3的烷基；

R₃是H、CH2OH、C1-C3的烷基；

R₅是H、C1-C5的烷基、被一个或多个卤原子取代的C1-C5烷基。

2.根据权利要求1所述的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物，其特征在于，

当R₁为苯基时，R₃和R₄均为H；

当R₃或R₄为CH₂OH时，R₁为H，R5为正丙基或正丁基。

3.根据权利要求1所述的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物，其特征在于，

4.根据权利要求3所述的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物，其特征在于，

R₄为取代环丙基，对应的化合物具有式(Ⅱ)所示结构

R₆为苯基、被一个或两个氟原子取代的苯基。

5.一种根据权利要求1所述的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物的制备方法，其特征在于，所述方法为一锅法合成，所述化合物通过下述路径合成：

6.根据权利要求5所述的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物的制备方法，其特征在于，上述化学反应的条件为：

反应的温度为0～30℃；

反应溶剂为乙酸乙酯和水；

7.根据权利要求1所述的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物，在制备用于治疗或预防心肌梗死、脑梗死、暂时性局部缺血、外周血管疾病的药物中的用途。

8.根据权利要求1所述的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物，在制备用于治疗或预防不稳定或稳定心绞痛的药物中的用途。

9.根据权利要求1所述的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物，在制备用于治疗或预防血小板聚集疾病的药物中的用途。

10.一种组合物，其特征在于，包含权利要求1至4任一项所述的三唑并[4,5-d]嘧啶化合物及化合物和药学上可接受的辅料。