CN105123520A - 一种有髯鸢尾生根培养基及其培养方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种有髯鸢尾生根培养基及其培养方法，该培养基以MS为基本培养基，添加白砂糖30-40g/L，琼脂6-7g/L，多效唑0.2-1.0mg/L，？pH为5.6-5.8。利用该培养基对有髯鸢尾不定芽进行诱导生根，接种5d即开始生根，比传统生根培养基提前10-13d，生根率提高24.26-43.33%，移栽时间提前22-26d，移栽成活率提高18.65-28.34%，且腐烂率降低20.62-32.36%，显著缩短了有髯鸢尾生根培养时间，大大提高了离体快繁效率及培养空间的利用率，株丛健壮挺拔，根系粗壮，叶片翠绿，整体抗性增强。

Description

一种有髯鸢尾生根培养基及其培养方法

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，特别涉及一种有髯鸢尾生根培养基及其培养方法。

背景技术

有髯鸢尾，鸢尾科（Iridaceae）宿根花卉，原产欧洲中部和南部，是一个几乎不育的杂种群。其花大、花形奇特、花色艳丽，垂瓣上密生色泽多变的须状附属物，具有极高的观赏价值。有髯鸢尾在园林中一般不结实，自然状态下的播种和分株因繁殖系数低而远远不能满足园林绿化建设的需要。因此，通过组织培养快速繁殖是目前尽快满足应用需求的有效途径之一。

生根培养是组培快繁体系中的重要环节，有髯鸢尾组培苗的传统生根培养基配置是以MS(或1/2MS)为基本培养基并添加一定浓度的植物生长调节剂BA、NAA或IBA等，最快生根时间需要10d以上，通常在生根培养28-40d后才能进行炼苗移栽，在这期间株丛腐烂死亡现象较严重，大大影响了繁殖效率。可见，有效缩短有髯鸢尾不定芽的生根时间对有髯鸢尾的快速繁殖具有重要意义。

多效唑（PP₃₃₃）是一种植物生长调节剂。具有延缓植物生长，抑制茎杆伸长，缩短节间、促进植物分蘖、增加植物抗逆性能，提高产量等效果，其农业应用价值在于它对作物生长的控制效应。近年来，多效唑开始应用于植物组织培养中，但应用于有髯鸢尾不定芽的快速生根培养尚属首次。

发明内容

本发明的目的是提供一种有髯鸢尾生根培养基及其培养方法。该培养基有效缩短了有髯鸢尾生根周期，加速了离体快繁效率，并且植株强壮，根系发达。

为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案来实现的：

一种有髯鸢尾生根培养基，其特征在于：以MS为基本培养基，添加白砂糖30-40g/L，琼脂6-7g/L，多效唑0.2-1.0mg/L，pH为5.6-5.8；

优选的，所述的多效唑为15%可湿性粉剂，需现用现配；

优选的，所述白砂糖的用量为40g/L，多效唑用量为0.6mg/L；

优选的，用0.1mol/L的NaOH或HCl溶液调节pH；

优选的，所述培养基要进行灭菌操作，其灭菌温度为121℃，灭菌时间为15-20min；进一步优选的灭菌时间为20min。

一种有髯鸢尾的生根培养方法，包括以下步骤：

（1）无根组培苗接种：于超净工作台上，取继代后的2-3cm的有髯鸢尾无根组培苗分切成4株/丛，接种于上述培养基中，每瓶接种3丛；

（2）生根培养：将接种的组培苗置于培养室培养，培养室温度23-25℃，光照和黑暗交替处理，每天光照10-12h，光照强度1000-1500Lx。

优选的，步骤（2）中的培养室温度为25℃，每天光照12h。

其中，所述培养基的配制过程为：（1）根据MS各组分母液的成分及用量称取各组分，使其充分溶解，配制成母液，并按相应浓度依次取用，加蒸馏水定容至所需体积，母液成分及用量见表1；

（2）称取0.1gPP₃₃₃加水溶解定容至100ml，配成1.0mg/ml的母液待用，然后根据所需浓度取用相应量的PP₃₃₃；

（3）按所需用量加入琼脂、白砂糖等，搅拌使其充分溶解；

（4）用pH试纸测定溶液pH，并用0.1mol/L的NaOH或HCl溶液调节pH至5.6-5.8。

（5）加热烧开，将做好的生根培养基分装于150ml三角瓶中，每瓶用量75ml，用封口膜密封，放于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min；灭菌后的培养基置于培养室静置，冷却后无污染即可用于接种。

表1.MS培养基组成及母液配制

本发明对有髯鸢尾生根培养基进行了大量的配方配制和生根培养研究，结果发现，在MS基础培养上，添加一定浓度的多效唑能够使植株提早生根且植株生长健壮、根系发达。该发明使有髯鸢尾生根时间比传统生根培养基提前10-13d，生根率提高24.26-43.33%，腐烂率降低20.62-32.36%，移栽时间提前22-26d，移栽成活率提高18.65-28.34%。显著缩短了有髯鸢尾生根培养时间，降低了生根期间的腐烂率，大大提高了离体快繁效率及培养空间的利用率。

具体实施方式

下面将结合有髯鸢尾品种“印度首领”、“白与蓝”具体实施例，详细说明本发明的具体实施方式：

实施例1

1.无根组培苗接种：于超净工作台上，取继代后的2-3cm左右的有髯鸢尾“印度首领”无根组培苗分切成4株/丛，接种于编号SG0-SG5的生根培养基中（生根培养基的组成见表2），每瓶接种3丛，每种培养基接种10瓶，分别设3组重复。

表2.生根培养基组成

2.生根培养：将接种的组培苗置于培养室培养，培养室温度25℃，光照和黑暗交替处理，每天光照12h，光照强度1300Lx。培养过程中随时观察并记录SG0-SG5的生根情况，培养15d后统计生根结果，见表3。

表3.有髯鸢尾“印度首领”组培苗生根情况统计表

3.驯化移栽：经过表3中的培养天数后，编号SG1-SG5培养基中的生根苗无需炼苗，将高5cm左右的生根苗从培养瓶中取出，用温水冲洗干净其基部的琼脂，将根部在0.1%多菌灵溶液里浸泡10s，移栽到经0.3%KMnO₄溶液消毒处理（浇透）的蛭石基质中；编号SG0培养基中的生根苗要经过闭瓶强光炼苗，即将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗3d左右，遮阴度为50%~70%。

4.移栽后管理：移栽后用塑料薄膜覆盖保湿，遮阳网遮盖防护，注意管理到位，定期浇杀菌剂杀菌，适时浇水，15d后揭膜，20d后统计移栽成活率。

实施例2

无根组培苗接种：于超净工作台上，取继代后的2-3cm左右的有髯鸢尾“白与蓝”无根组培苗分切成4株/丛，分别接种于编号S0-S5生根培养基中其组成见表4，每瓶接种3丛，每种培养基接种10瓶，分别设3组重复。

表4.生根培养基组成

2.生根培养：将接种的组培苗置于培养室培养，培养室温度25℃，光照和黑暗交替处理，每天光照12h，光照强度1500Lx。培养过程中随时观察并记录S0-S5生根情况，培养15d后统计生根结果，见表5。

表5.有髯鸢尾“白与蓝”组培苗生根情况统计表

3.驯化移栽、4.移栽后管理与实施例1相当。

采用本发明生根培养基进行有髯鸢尾生根培养，接种5d即开始生根，开始生根天数提前10-13d，无需炼苗，移栽时间提前22-26d，显著缩短了有髯鸢尾生根培养时间，大大提高了离体快繁效率。接种15d生根率达96.67%，提高了24.26-43.33%，株丛腐烂率降低20.62-32.36%，最优平均根长可达5.70cm，平均根数6.6条，显著提高了有髯鸢尾根系质量和株丛抗性。移栽后成活率达85.81%，提高了18.65-28.34%，株丛健壮挺拔，根系粗壮，叶片翠绿。

Claims (8)

1.一种有髯鸢尾生根培养基，其特征在于：以MS为基本培养基，添加白砂糖30-40g/L，琼脂6-7g/L，多效唑0.2-1.0mg/L，pH为5.6-5.8。

2.根据权利要求1所述的一种有髯鸢尾生根培养基，其特征在于：所述多效唑为15%可湿性粉剂，需现用现配。

3.根据权利要求1所述的一种有髯鸢尾生根培养基，其特征在于：所述白砂糖的用量为40g/L，多效唑用量为0.6mg/L。

4.根据权利要求1所述的一种有髯鸢尾生根培养基，其特征在于：用0.1mol/L的NaOH或HCl溶液调节pH。

5.根据权利要求1-4任一项所述的一种有髯鸢尾生根培养基，其特征在于：所述培养基要进行灭菌操作，灭菌温度为121℃，灭菌时间为15-20min。

6.根据权利要求5所述的一种有髯鸢尾生根培养基，其特征在于：灭菌时间为20min。

7.一种有髯鸢尾的生根培养方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）无根组培苗接种：于超净工作台上，取继代后的2-3cm的有髯鸢尾无根组培苗分切成4株/丛，接种于权利要求1-6任一项所述的培养基中，每瓶接种3丛；

（2）生根培养：将接种的组培苗置于培养室培养，培养室温度23-25℃，光照和黑暗交替处理，每天光照10-12h，光照强度1000-1500Lx。

8.根据权利要求7所述的一种有髯鸢尾的生根培养方法，其特征在于：步骤（2）中的培养室温度为25℃，每天光照12h。