CN105106941A - 一种改善过敏症状的胶原蛋白组合物及胶原膜贴 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种改善过敏症状的胶原蛋白组合物，包括：胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖；所述胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的质量比为(5～10)：(0.0005～0.002)：(1.2～2.2)：(1.8～2.8)：(0.1～0.5)：(0.4～1.4)：(0.05～0.3)。本发明提供的胶原蛋白组合物不仅能够减少皮肤过敏的症状，还能够改善皮肤状态，并且，本发明中的胶原蛋白组合物对人体无毒害作用，安全性较高，本发明还提供了一种胶原膜贴。

Description

一种改善过敏症状的胶原蛋白组合物及胶原膜贴
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及一种改善过敏症状的胶原蛋白组合物及胶原膜贴。
背景技术
近年来报道的由于接触过敏原导致的皮肤过敏案例呈现逐年上升的趋势，位于过敏原前三名的就是花粉、灰尘以及化妆品。特别是化妆品，严重的可引起皮肤损伤甚至留下永久瘢痕。而作为消除痤疮、促进伤口愈合、减少瘢痕产生的胶原膜中的胶原蛋白同样属于一种过敏原，临床案例中有报道患者因注射胶原蛋白而导致的严重过敏症状。
目前，治疗过敏症状主要依靠内服药物或者是外涂激素类药物，但无论是内服药物还是外涂激素类药物，都会对人体产生一定的危害。
发明内容
本发明的目的在于提供一种改善过敏症状的胶原蛋白组合物及胶原膜贴，本发明提供的胶原蛋白组合物能够有效改善过敏症状，并对人体无毒害。
本发明提供一种改善过敏症状的胶原蛋白组合物，包括：胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖；
所述胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的质量比为(5～10)：(0.0005～0.002)：(1.2～2.2)：(1.8～2.8)：(0.1～0.5)：(0.4～1.4)：(0.05～0.3)。
优选的，所述胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的质量比为(6～9)：(0.0008～0.0015)：(1.5～2.0)：(2.0～2.5)：(0.2～0.4)：(0.5～1.2)：(0.1～0.25)。
优选的，所述间充质干细胞提取物按照以下步骤制得：
A)将间充质干细胞进行传代培养，得到传代培养的间充质干细胞；
B)将传代培养的间充质干细胞进行破碎，得到间充质干细胞悬液；
C)将所述间充质干细胞悬液依次进行离心和重悬，得到间充质干细胞提取物。
优选的，所述步骤C)中离心的转速为15000～20000g；
离心的时间为20～30min。
优选的，所述步骤C)后依次还包括过滤和超滤浓缩；
所述过滤的孔径为0.3～0.5μm；
所述超滤浓缩的截留分子量为4～6KD。
优选的，所述胶原蛋白组合物还包括水；
所述水在所述胶原蛋白组合物中的质量分数为90～99％。
优选的，所述胶原蛋白组合物的pH值为5～6。
本发明提供一种胶原膜贴，每50g胶原膜贴中，包括：
5～10g的胶原蛋白、0.5～2mg的间充质干细胞提取物、1200～2200mg的抗坏血酸、1800～2800mg的天冬氨酸、0.1～0.5g的柠檬酸钠、0.4～1.4g的山梨糖醇、0.05～0.3g的海藻糖和水，所述水在胶原膜贴中的质量分数为70～90％。
优选的，每50g胶原膜贴中，包括胶原蛋白6～9g。
优选的，每50g胶原膜贴中，包括干细胞提取物0.8～1.5mg。
本发明提供一种改善过敏症状的胶原蛋白组合物，包括：胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖；所述胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的质量比为(5～10)：(0.0005～0.002)：(1.2～2.2)：(1.8～2.8)：(0.1～0.5)：(0.4～1.4)：(0.05～0.3)。本发明提供的胶原蛋白组合物将胶原蛋白和间充质干细胞提取物联合使用，并且采用特定的配比，使其不仅能够减少皮肤过敏的症状，还能够改善皮肤状态，并且，本发明中的胶原蛋白组合物对人体无毒害作用，安全性较高，通过简单的外敷就能够改善皮肤表面的过敏症状，使用方便。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1为使用了本发明实施例4和比较例提供的胶原膜贴的小鼠耳部厚度变化。
具体实施方式
本发明提供一种胶原蛋白组合物，包括：胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖；
所述胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的质量比为(5～10)：(0.0005～0.002)：(1.2～2.2)：(1.8～2.8)：(0.1～0.5)：(0.4～1.4)：(0.05～0.3)。
本发明提供的胶原蛋白组合物能够有效改善过敏症状，并对人体无毒害。
本发明提供的胶原蛋白组合物的pH值优选为5～6，更优选为5.6～5.8。
本发明提供的胶原蛋白组合物包括胶原蛋白，所述胶原蛋白优选为动物胶原蛋白，本发明对所述胶原蛋白的来源没有特殊的限制，具体的，在本发明的实施例中，可采用武汉贝尔卡生物医药有限公司公司提供的Ⅰ型号的胶原蛋白。
在本发明中，所述间充质干细胞提取物优选按照以下步骤制得：
A)将间充质干细胞进行传代培养，得到传代培养的间充质干细胞；
B)将传代培养的间充质干细胞进行破碎，得到间充质干细胞悬液；
C)将所述间充质干细胞悬液依次进行离心和重悬，得到间充质干细胞提取物。
本发明将间充质干细胞进行传代培养，得到传代培养的间充质干细胞，本发明优选将间充质干细胞进行传代培养，取第3代～第8代的间充质干细胞进行后续处理。本发明优选将原代脐带或脐血进行分离培养，得到间充质干细胞，所述对原代脐带和脐血的分离培养的方法为本领域技术人员的常规操作方法。
原代培养和传代培养所用的培养液为DMEM/F12培养基+10％体积分数的胎牛血清，当原代细胞的融合度达到80％时，弃去培养液，然后用PBS磷酸盐缓冲液清洗细胞3遍，接着加入0.04％EDTA+0.25％胰蛋白酶消化液，消化液加入量为2mL/10cm2培养皿底面积，待80％的细胞变圆后加入培养液终止消化，培养液加入体积为5倍于消化液的加入体积。将消化下来的液体在600g转速下离心5分钟，除去上清液后加入培养液重悬细胞，细胞密度调整为1×105/mL，将细胞悬液加入到一个新的培养皿中，记为P1代细胞。按照同样方法将细胞传代至P8代。取P3-P8代细胞，弃去培养液后用PBS清洗3遍，得到传代培养的间充质干细胞。
本发明将传代培养的间充质干细胞进行破碎，得到间充质干细胞悬液，本发明优选采用EDTA+胰蛋白酶消化液消化细胞，然后采用超声破碎仪进行处理，得到间充质干细胞悬液。本发明优选按照2mL/10cm2培养皿底面积的比例加入0.04％EDTA+0.25％胰蛋白酶消化液消化细胞，然后将超声破碎仪调节到9～10千周声波处理消化下来的细胞悬液8分钟，得到间充质干细胞悬液。
本发明将间充质干细胞悬液依次进行离心和重悬，得到间充质干细胞提取物，在本发明中，所述离心的转速优选为15000～20000g，更优选为16000～19000g，所述离心的时间优选为20～30min，更优选为25～26min；离心后，弃去上清液，加入含有NaCl的PBS盐酸盐缓冲液重悬沉淀，得到间充质干细胞提取物，所述PBS盐酸盐缓冲液中NaCl的质量分数优选为0.85％-0.9％。
完成所述重悬后，本发明优选将重悬后的混合物依次进行过滤和超滤浓缩，本发明优选采用滤膜进行过滤，所述滤膜的孔径优选为0.3～0.5μm，更优选为0.45μm；过滤后，收集滤液，进行超滤浓缩，本发明优选采用滤膜进行超滤浓缩，所述滤膜的截留分子量优选为4～6KD，更优选为5KD，经过超滤浓缩后，得到间充质干细胞提取物，所述间充质干细胞提取物的体积为原体积的1/5～1/10。
得到间充质干细胞提取物后，本发明优选采用0.22μm孔径的滤膜进行过滤除菌，得到除菌后的间充质干细胞提取物。
按照上述方法，得到间充质干细胞提取物，其主要成分为间充质干细胞中的各种蛋白、酶类及生长因子等。
在本发明中，所述抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖均采用普通的市售商品即可。
在本发明中，所述胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的质量比为(5～10)：(0.0005～0.002)：(1.2～2.2)：(1.8～2.8)：(0.1～0.5)：(0.4～1.4)：(0.05～0.3)，更优选为(6～9)：(0.0008～0.0015)：(1.5～2.0)：(2.0～2.5)：(0.2～0.4)：(0.5～1.2)：(0.1～0.25)。
本发明提供的胶原蛋白组合物优选还包括水，所述水优选为去离子水，所述水在胶原蛋白组合物中的质量分数优选为90～99％，更优选为92～98％。
本发明优选将胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖混合，得到上述胶原蛋白组合物，本发明优选将胶原蛋白溶液、含有抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的PBS盐酸盐缓冲液、以及间充质干细胞提取物混合，得到胶原蛋白组合物。本发明优选先将含有抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的PBS盐酸盐缓冲液、以及间充质干细胞提取物混合，得到混合溶液，在将所述混合溶液与胶原蛋白溶液混合，得到胶原蛋白组合物，
本发明优选将胶原蛋白与冰醋酸溶液混合，得到胶原蛋白溶液；所述冰醋酸的摩尔浓度优选为0.01～0.1mol/L，更优选为0.05mol/L；所述冰醋酸的pH值优选为3～5，更优选为3.8～4.5；所述胶原蛋白与冰醋酸的混合温度优选为5～12℃；得到的胶原蛋白溶液中胶原蛋白的质量浓度为2～3％，优选为2.5％。
在本发明中，所述含有抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的PBS盐酸盐缓冲液中，抗坏血酸的质量浓度优选为80～100mg/mL，更优选为85～90mg/mL；所述天冬氨酸的质量浓度优选为100～150mg/mL，更优选为120～130mg/mL；所述柠檬酸钠的质量分数优选为0.2～1％，更优选为0.4～0.8％；所述山梨糖醇的质量分数优选为0.8～2.8％；更优选为1～2％；所述海藻糖的质量分数优选为0.1～0.6％，更优选为0.2～0.4％。
在本发明中，所述含有抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的PBS盐酸盐缓冲液、以及间充质干细胞提取物混合得到的混合物中蛋白质的浓度优选为40～60μg/mL，更优选为50μg/mL；本发明优选采用BCA法测定溶液中蛋白质的浓度。
本发明还提供了一种胶原膜贴，每50g胶原膜贴中，包括：
5～10g的胶原蛋白、0.5～2mg的间充质干细胞提取物、1200～2200mg的抗坏血酸、1800～2800mg的天冬氨酸、0.1～0.5g的柠檬酸钠、0.4～1.4g的山梨糖醇、0.05～0.3g的海藻糖和质量分数为70～90％的水。
在本发明中，每50g胶原膜贴中，含有胶原蛋白5～10g，优选为6～9g，更优选为7～8g；含有间充质干细胞提取物0.5～2mg，优选为0.8～1.5mg，更优选为1～1.2mg；含有抗坏血酸1200～2200mg，优选为1500～2000mg，更优选为1600～1800mg；含有天冬氨酸1800～2800mg，优选为2000～2500mg；含有柠檬酸钠0.1～0.5g，优选为0.2～0.4g；含有山梨糖醇0.4～1.4g，优选为0.5～1.0g；含有海藻糖0.05～0.3g，优选为0.1～0.2g；水的质量分数为70～90％，更优选为75～80。在本发明中，所述胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的来源与上述技术方案中胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的来源一致，在此不再赘述。
为了方便使用，获得更好的使用效果，本发明将上述技术方案中的胶原蛋白组合物按照以下步骤制备成所述胶原膜贴：
将胶原蛋白组合物依次进行凝胶、交联和干燥，得到胶原膜贴。
本发明优选将胶原蛋白组合物放入模具中，进行凝胶，所述凝胶的温度优选为4～30℃，更优选为10～25℃；所述凝胶的时间优选为1～5小时，更优选为2～3小时；所述模具的形状可根据实际需要进行相应的调整。
本发明优选将凝胶后的胶原蛋白组合物放入交联剂中进行交联，所述交联剂优选为EDC交联剂(1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物)，所述交联剂的摩尔浓度优选为0.03mol/L；所述交联的时间优选为5～10小时，更优选为6～8小时。在本发明中，所述交联过程能够使胶原蛋白分子之间形成网状结构，改善其强度和拉伸性能。
本发明优选在完成交联后，将交联的胶原蛋白组合物用超纯水进行冲洗，以洗去表面附着的交联剂。
完成交联后，本发明将交联的胶原蛋白组合物进行干燥，除去一部分水分，使之成膜，方便使用。在本发明中，所述干燥的温度优选为20～40℃，更优选为30℃；所述干燥的时间优选为30～60min，更优选为40～45min；本发明优选采用低温干燥箱进行所述干燥。经过干燥后，胶原膜贴的含水率在70～90％之间。
本发明优选将所述胶原膜贴进行真空无菌包装，并使用环氧乙烷灭菌。
本发明提供一种改善过敏症状的胶原蛋白组合物，包括：胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖；所述胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的质量比为(5～10)：(0.0005～0.002)：(1.2～2.2)：(1.8～2.8)：(0.1～0.5)：(0.4～1.4)：(0.05～0.3)。本发明提供的胶原蛋白组合物将胶原蛋白和间充质干细胞提取物联合使用，并且采用特定的配比，使其不仅能够减少皮肤过敏的症状，还能够改善皮肤状态，并且，本发明中的胶原蛋白组合物对人体无毒害作用，安全性较高，通过简单的外敷就能够改善皮肤表面的过敏症状，使用方便。
为了进一步说明本发明，以下结合实施例对本发明提供的一种改善过敏症状的胶原蛋白组合物及胶原膜贴进行详细描述，但不能将其理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1间充质干细胞提取物的制备
将原代人脐带或脐血来源的间充质干细胞分离培养后进行传代培养，原代培养和传代培养所用的培养液为DMEM/F12培养基+10％体积分数的胎牛血清，当原代细胞的融合度达到80％时，弃去培养液，然后用PBS磷酸盐缓冲液清洗细胞3遍，接着加入0.04％EDTA+0.25％胰蛋白酶消化液，消化液加入量为2mL/10cm2培养皿底面积，待80％的细胞变圆后加入培养液终止消化，培养液加入体积为5倍于消化液的加入体积。将消化下来的液体600g离心5分钟，除去上清液后加入培养液重悬细胞，细胞密度调整为1×105/mL，将细胞悬液加入到一个新的培养皿中，记为P1代细胞。按照同样方法将细胞传代至P8代。取P3-P8代细胞待用。
实施例2胶原蛋白组合物的制备
取P3～P8代细胞，弃去培养液后用PBS清洗3遍，按照2mL/10cm2培养皿底面积的比例加入0.04％EDTA+0.25％胰蛋白酶消化液消化细胞，然后用超声破碎仪调节到9千周声波处理消化下来的细胞悬液8分钟。
处理完成后将悬液用19000g的离心力离心25分钟，弃去上清液，加入含有500mmolNacl的PBS重悬沉淀，用0.45μm孔径的滤膜过滤重悬液。
收集滤液，采用截留分子量为5KD的过滤膜进行超滤浓缩，浓缩后的体积为原体积的1/5。
浓缩液用0.22umμm孔径的滤膜过滤除菌，然后采用BCA法测定蛋白质浓度，用含有抗坏血酸90mg/mL、天冬氨酸120mg/mL、0.12％质量分数的柠檬酸钠、0.72％质量分数的山梨糖醇、0.08％质量分数海藻糖的PBS磷酸盐缓冲液将浓缩液的蛋白质浓度调节到50μg/mL，得到混合溶液；
将胶原蛋白加入到浓度为0.05mol/L的冰醋酸溶液(pH3.8)中混匀，温度控制在12℃，匀速搅拌直到完全溶解，得到质量浓度为2.5％胶原蛋白溶液；
将20mL混合溶液加入到80mL制得的胶原蛋白溶液中，调节溶液的pH值至5.8得到胶原蛋白组合物。
实施例3胶原蛋白组合物的制备
取P3～P8代细胞，弃去培养液后用PBS清洗3遍，按照2mL/10cm2培养皿底面积的比例加入0.04％EDTA+0.25％胰蛋白酶消化液消化细胞，然后用超声破碎仪调节到9千周声波处理消化下来的细胞悬液8分钟。
处理完成后将悬液用15000g的离心力离心25分钟，弃去上清液，加入含有700mmolNacl的PBS重悬沉淀，用0.5μm孔径的滤膜过滤重悬液。
收集滤液，采用截留分子量为5KD的过滤膜进行超滤浓缩，浓缩后的体积为原体积的1/10。
浓缩液用0.22umμm孔径的滤膜过滤除菌，然后采用BCA法测定蛋白质浓度，用含有抗坏血酸70mg/mL、天冬氨酸100mg/mL、0.12％质量分数的柠檬酸钠、0.72％质量分数的山梨糖醇、0.08％质量分数海藻糖的PBS磷酸盐缓冲液将浓缩液的蛋白质浓度调节到50μg/mL，得到混合溶液；
将胶原蛋白加入到浓度为0.05mol/L的冰醋酸溶液(pH3.8)中混匀，温度控制在5℃，匀速搅拌直到完全溶解，得到质量浓度为2.5％胶原蛋白溶液；
将20mL混合溶液加入到80mL制得的胶原蛋白溶液中，调节溶液的pH值至5.8得到胶原蛋白组合物。
实施例4胶原膜贴的制备
将实施例2得到的胶原蛋白组合物放入凝胶膜具中，5℃凝胶2h。
将上述胶原膜放入浓度为0.03mol/L的EDC交联剂中交联8h，取出胶原膜，用超纯水冲洗；
将上述所得的胶原膜放入低温干燥箱中，30℃干燥45分钟，得到的胶原膜贴含水率为80％。
将干燥好的胶原膜贴真空无菌包装，并用环氧乙烷灭菌。
实施例5胶原膜贴的制备
将实施例3得到的胶原蛋白组合物放入凝胶膜具中，30℃凝胶1h。
将上述胶原膜放入浓度为0.03mol/L的EDC交联剂中交联8h，取出胶原膜，用超纯水冲洗；
将上述所得的胶原膜放入低温干燥箱中，30℃干燥40分钟，得到的胶原膜贴含水率为85％。
将干燥好的胶原膜贴真空无菌包装，并用环氧乙烷灭菌。
比较例1
从市场购得广州创尔生物技术股份有限公司提供的商品名为创富康的胶原贴辅料。
应用例
皮肤过敏小鼠的制备：
用75％酒精将二硝基氯苯配制成浓度为3mg/mL的溶液备用，称为致敏剂1；取7-13周龄SD小鼠20只，剃去腹部毛发；将致敏剂1均匀涂于小鼠腹部裸露部分，每只涂抹0.1ml，每天涂抹1次，连续涂抹4天；在第5天用致敏剂1涂抹在小鼠的耳部，并在48小时后用针盘式刻度计测量小鼠耳部肿胀程度，将肿胀程度相近(厚度在0.8mm±0.09mm)的小鼠挑出12只，随机分为A、B、C三组，每组4只小鼠。
A组小鼠使用本发明实施例4制得的胶原膜贴于肿胀耳部，每次贴1小时，每天更换胶原膜一次，连续贴7天，每天测量小鼠耳部肿胀程度。
B组小鼠使用比较例1中的胶原贴辅料，贴于肿胀的耳部，每天更换胶原膜一次，连续贴7天，每天测量小鼠耳部肿胀程度。
C组小鼠使用浸泡过PBS磷酸盐缓冲液的纱布贴于肿胀耳部，每天更换纱布一次，连续7天，每天测量小鼠耳部肿胀程度。
结果如表1和图1所示，表1为使用了本发明实施例4和比较例提供的胶原膜贴的小鼠耳部厚度平均值；图1为使用了本发明实施例4和比较例提供的胶原膜贴的小鼠耳部厚度变化。
表1使用了本发明实施例4和比较例提供的胶原膜贴的小鼠耳部厚度平均值
其中，A组和B组相比P值小于0.05；A组和C组相比P值小于0.05。
由表1和图1可以看出，本发明提供的胶原膜贴能够有效的改善皮肤表面的过敏症状，并且由于所用原材料都是无毒害的，因此，使用安全性更高。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种改善过敏症状的胶原蛋白组合物，包括：胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖；
所述胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的质量比为(5～10)：(0.0005～0.002)：(1.2～2.2)：(1.8～2.8)：(0.1～0.5)：(0.4～1.4)：(0.05～0.3)。
2.根据权利要求1所述的胶原蛋白组合物，其特征在于，所述胶原蛋白、间充质干细胞提取物、抗坏血酸、天冬氨酸、柠檬酸钠、山梨糖醇和海藻糖的质量比为(6～9)：(0.0008～0.0015)：(1.5～2.0)：(2.0～2.5)：(0.2～0.4)：(0.5～1.2)：(0.1～0.25)。
3.根据权利要求1所述的胶原蛋白组合物，其特征在于，所述间充质干细胞提取物按照以下步骤制得：
A)将间充质干细胞进行传代培养，得到传代培养的间充质干细胞；
B)将传代培养的间充质干细胞进行破碎，得到间充质干细胞悬液；
C)将所述间充质干细胞悬液依次进行离心和重悬，得到间充质干细胞提取物。
4.根据权利要求3所述的胶原蛋白组合物，其特征在于，所述步骤C)中离心的转速为15000～20000g；
离心的时间为20～30min。
5.根据权利要求3所述的胶原蛋白组合物，其特征在于，所述步骤C)后依次还包括过滤和超滤浓缩；
所述过滤的孔径为0.3～0.5μm；
所述超滤浓缩的截留分子量为4～6KD。
6.根据权利要求1所述的胶原蛋白组合物，其特征在于，所述胶原蛋白组合物还包括水；
所述水在所述胶原蛋白组合物中的质量分数为90～99％。
7.根据权利要求1所述的胶原蛋白组合物，其特征在于，所述胶原蛋白组合物的pH值为5～6。
8.一种胶原膜贴，每50g胶原膜贴中，包括：
5～10g的胶原蛋白、0.5～2mg的间充质干细胞提取物、1200～2200mg的抗坏血酸、1800～2800mg的天冬氨酸、0.1～0.5g的柠檬酸钠、0.4～1.4g的山梨糖醇、0.05～0.3g的海藻糖和水，所述水在胶原膜贴中的质量分数为70～90％。
9.根据权利要求8所述的胶原膜贴，其特征在于，每50g胶原膜贴中，包括胶原蛋白6～9g。
10.根据权利要求8所述的胶原膜贴，其特征在于，每50g胶原膜贴中，包括干细胞提取物0.8～1.5mg。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103784474A (zh) * 2014-01-26 2014-05-14 广州赛莱拉生物科技有限公司 人脂肪间充质干细胞提取物及其冻干粉和应用
CN104120162A (zh) * 2014-07-23 2014-10-29 成都清科生物科技有限公司 水溶性活性胶原的制备方法和表皮修复生长因子液

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103784474A (zh) * 2014-01-26 2014-05-14 广州赛莱拉生物科技有限公司 人脂肪间充质干细胞提取物及其冻干粉和应用
CN104120162A (zh) * 2014-07-23 2014-10-29 成都清科生物科技有限公司 水溶性活性胶原的制备方法和表皮修复生长因子液

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
朱明 等: "间充质干细胞治疗皮肤创伤的研究进展", 《中国细胞生物学学报》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110615838A (zh) * 2019-08-14 2019-12-27 浙江珂瑞康生物医疗科技有限公司 一种无菌速溶未变性天然胶原冻干品及制备方法

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