CN105061572A - 关于红心火龙果籽白蛋白多肽、制备及应用 - Google Patents

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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
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    • A—HUMAN NECESSITIES
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Abstract

本发明公示红心火龙果籽白蛋白多肽、制备及应用，主要涉及多肽制备领域。其技术方案为红心火龙果籽白蛋白多肽，其序列为GPQQGHQILQQCCSELRQEEPV。制备步骤（1）将红心火龙果籽从果肉中取出，晾干后，用粉碎机粉碎；（2）红心火龙果籽粉末100g加入100-500ml75%乙醇中，超声萃取；（3）离心2000-3000rpm，10-30分钟，取上清；（4）加入pH4-5的缓冲液中，搅拌；（5）离心10000-15000rpm，10-30分钟，收集沉淀物；（6）将沉淀物复溶于pH7-9的缓冲液中，采用凝胶层析色谱柱分离出单一的组分；（7）冻干，即得。体外实验表明，该多肽能与砷、铅等重金属形成络合物，从而降低农药残留，如重金属砷、铅在体内的吸收。

Description

关于红心火龙果籽白蛋白多肽、制备及应用
技术领域
本发明涉及红心火龙果籽多肽领域，具体涉及红心火龙果籽白蛋白多肽制备领域。
背景技术
火龙果含有一般植物少有的植物性白蛋白，营养丰富、功能独特，是一种消费概念上的绿色、环保果品和具有一定疗效的保健营养食品。据报道，火龙果籽的营养尤为丰富，主要富含植物白蛋白。由于工业废水、废弃物处理回收未获重视，以致各种水资源受到了严重重金属污染，除了直接饮用水中毒外，人类摄人食品重金属含量超标也易中毒。而白蛋白在人体内遇到重金属离子时，会自动与重金属离子结合，由排泄系统排除体外，起到解毒的作用。
红心火龙果的营养价值远远高于普通的火龙果。现阶段，没有从红心火龙果籽中提取白蛋白的报道。也没有关于红心火龙果籽中白蛋白多肽用于解毒的报道。
发明内容：
发明目的：
本发明的目的是提供一种从红心火龙果籽中提取的白蛋白多肽，以及制备方法和应用。
技术方案
本发明的技术方案为红心火龙果籽白蛋白多肽，其序列为GPQQGHQILQQCCSELRQEEPV。多肽制备步骤包括（1）将红心火龙果籽从果肉中取出，晾干后，用粉碎机粉碎；（2）红心火龙果籽粉末100g加入100-500ml75%乙醇中，超声萃取；（3）离心2000-3000rpm，10-30分钟，取上清；（4）加入pH4-5的缓冲液中，搅拌；（5）离心10000-15000rpm，10-30分钟，收集沉淀物；（6）将沉淀物复溶于pH7-9的缓冲液中，采用凝胶层析色谱柱分离出单一的组分；（7）冻干，即得。其红心火龙果籽白蛋白多肽可用于去除农药残留，所述药物残留重金属砷、铅。
有益效益：
本发明的制备得到的红心火龙果籽白蛋白多肽，经蛋白质序列测定，序列为GPQQGHQILQQCCSELRQEEPV，纯度大于85%。体外实验表明，该多肽能与砷、铅等重金属形成络合物，从而降低农药残留，如重金属砷、铅在体内的吸收。
具体实施方式
实施例1
将红心火龙果籽从果肉中取出，晾干后，用粉碎机粉碎；将红心火龙果籽粉末100g加入100ml75%乙醇中，超声萃取；离心2000rpm，10分钟，取上清；在上清中，加入pH4.5的缓冲液中，搅拌；离心10000rpm，30分钟，收集沉淀物；将沉淀物复溶于pH7的缓冲液中，采用凝胶层析色谱柱分离出单一的组分；冻干，即得。采用固相蛋白质自动测序仪测定该多肽的序列为GPQQGHQILQQCCSELRQEEPV，纯度为96.3%。
实施例2
将红心火龙果籽从果肉中取出，晾干后，用粉碎机粉碎；将红心火龙果籽粉末100g加入500ml75%乙醇中，超声萃取；离心3000rpm，15分钟，取上清；在上清中，加入pH5的缓冲液中，搅拌；离心15000rpm，60分钟，收集沉淀物；将沉淀物复溶于pH9的缓冲液中，采用凝胶层析色谱柱分离出单一的组分；冻干，即得。采用固相蛋白质自动测序仪测定该多肽的序列为GPQQGHQILQQCCSELRQEEPV，纯度为85.1%。
实施例3
测定实施例1得到的多肽降低铅溶液中铅离子浓度的作用：取1mg/L的硝酸铅溶液2ml，共个实验4管，分别加入纯净水、1、2、4mg/ml的多肽，搅拌后，静置15分钟，离心15000rpm，10分钟后，取上清溶液。采用铅离子的原子吸收光谱法进行测定。结果显示，水、1、2、4mg/ml的多肽中铅的浓度分别为：0.86、0.43、0.24、0.05μg/L。本实验重复3次。由此可见，本发明制备的多肽可以显著性降低铅溶液中铅离子的含量。
实施例4
测定实施例1得到的多肽降低铅溶液中砷离子浓度的作用：取标准砷溶液（1ug/ml）2ml，共个实验4管，分别加入纯净水、1、2、4mg/ml的多肽，搅拌后，静置15分钟，离心15000rpm，10分钟后，取上清溶液。采用砷斑法进行砷含量的测定。结果显示，水、1、2、4mg/ml的多肽中铅的浓度分别为：0.70、0.36、0.21、0.12μg/ml。本实验重复3次。由此可见，本发明制备的多肽可以显著性降低砷溶液中五价砷离子的含量。
SEQUENCELISTING
<110>常州亚当生物技术有限公司
<120>关于红心火龙果籽白蛋白多肽、制备及应用
<130>
<160>1
<170>PatentInversion3.3
<210>1
<211>22
<212>PRT
<213>人工序列
<400>1
GlyProGlnGlnGlyHisGlnIleLeuGlnGlnCysCysSerGluLeu
151015
ArgGlnGluGluProVal
20

Claims (3)

1.一种红心火龙果籽白蛋白多肽，其特征在于：序列为GPQQGHQILQQCCSELRQEEPV。
2.根据权利要求书1所述的红心火龙果籽白蛋白多肽的制备方法：其特征在于：步骤包括（1）将红心火龙果籽从果肉中取出，晾干后，用粉碎机粉碎；（2）红心火龙果籽粉末100g加入100-500ml75%乙醇中，超声萃取；（3）离心2000-3000rpm，10-30分钟，取上清；（4）加入pH4-5的缓冲液中，搅拌；（5）离心10000-15000rpm，10-30分钟，收集沉淀物；（6）将沉淀物复溶于pH7-9的缓冲液中，采用凝胶层析色谱柱分离出单一的组分；（7）冻干，即得。
3.根据权利要求书1所述的红心火龙果籽白蛋白多肽用于去除农药残留或重金属残留。
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