CN105018473A - 一种用于提取植物rna批量粉碎样品的方法 - Google Patents

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CN105018473A
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肖薪龙
姚银安
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Xinjiang Institute of Ecology and Geography of CAS
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Abstract

本发明涉及一种用于提取植物RNA批量粉碎样品的方法，该方法涉及装置是由泡沫盒、离心管架、离心管、泡沫块和固定片组成，将泡沫盒内放置一个2mL离心管架，其周围用泡沫块固定，然后再将泡沫盒预先用液氮冷却，将装有样品和钢珠的离心管置于液氮中，然后用镊子将其放入到泡沫盒中的离心管架上，使植物样品处于液氮的低温保护状态，通过快速晃动，使其批量粉碎，达到提取RNA粉碎样品的要求。本发明所述方法可同时粉碎多个植物样品，大大缩短了提取RNA过程中样品粉碎所花时间，节约样品，样品无交叉污染，并且样品始终处于低温保护状态，避免了RNA的降解。

Description

一种用于提取植物RNA批量粉碎样品的方法
技术领域
本发明涉及一种用于提取植物RNA批量粉碎样品的方法。
背景技术
提取RNA是分子实验室的最常见的实验操作之一，RNA质量的好坏直接制约着下一步的实验操作，如cDNA合成，RT-qPCR荧光定量，Northern分子杂交等。RNA提取的难度在于RNA很容易被RNA酶降解，而RNA酶在植物体内和外界都广泛存在，且不易清除。因此RNA提取粉碎样品时需要在液氮的低温保护下进行。传统的RNA提取样品粉碎是用研钵磨样，在液氮保护下快速研磨。这种方法费时费力，而且容易造成样品交叉污染。目前已有发明了一种低温研磨盒，但这种研磨盒仍然需要研磨棒对样品逐一研磨。即便使用手动搅拌机在离心管中研磨可省时省力，但手动搅拌机价格也比较高。市场上也出现了研磨机，通过钢珠或磁珠的震荡，批量使样品研磨。但是研磨机一般都不能使植物处于液氮低温保护状态，容易造成RNA的降解，且研磨机的价格更高。
本发明设计了一种用于提取植物RNA批量粉碎样品的方法，该方法中采用了简易的低温保护泡沫震荡盒，可以使植物样品始终处于液氮的低温保护状态，通过固定的2mL离心管和其内的钢珠快速晃动，批量使样品粉碎。该方法涉及的泡沫盒制作简单，操作也十分简便，且成本很低，具有较广的适用性及较高的实用性。
发明内容
本发明目的在于，提供一种用于提取植物RNA批量粉碎样品的方法，该方法涉及装置是由泡沫盒、离心管架、离心管、泡沫块和固定片组成，将泡沫盒内放置一个2mL离心管架，其周围用泡沫块固定，然后再将泡沫盒预先用液氮冷却，将装有样品和钢珠的离心管置于液氮中，然后用镊子将其放入到泡沫盒中的离心管架上，使植物样品处于液氮的低温保护状态，通过快速晃动，使其批量粉碎，达到提取RNA粉碎样品的要求。本发明所述方法可同时粉碎多个植物样品，大大缩短了提取RNA过程中样品粉碎所花时间，节约样品，样品无交叉污染，并且样品始终处于低温保护状态，避免了RNA的降解。
本发明所述的一种用于提取植物RNA批量粉碎样品的方法，该方法涉及装置是由泡沫盒、离心管架、离心管、泡沫块和固定片组成，在泡沫盒（4）内一端放置离心管架（5），泡沫盒（4）内的另一端放置用于固定离心管架（5）的泡沫块（3），在离心管架（5）内放置离心管（6），将泡沫盒（4）的一端与盖子（1）的一端采用胶带粘连，在盖子（1）的内侧与离心管（6）的对应处固定一块固定片（7），具体操作按下列步骤进行：
a、植物样品取样：取50-100 mg 植物盐角草或拟南芥地上部分样品放置于2mL离心管（6）中，加入一颗6mmde钢珠，盖上盖后放入液氮速冻，用于直接提取样品RNA或保存于温度-80℃冰箱备用；
b、将泡沫盒（4）内放置一个2mL离心管架（5），离心管架（5）的周围用泡沫块（3）固定，然后再将泡沫盒（4）预先用液氮冷却；
c、将装有盐角草或拟南芥地上部分样品和钢珠的离心管（6）置于液氮中，然后用镊子将其放入到泡沫盒（4）中的离心管架（5）上，盖上盖子（1），固定在盖子（1）上的固定片（7）正好使离心管（5）固定住，翻转泡沫盒（4）使液氮从泡沫盒（4）缝隙流出；
d、抓紧泡沫盒（4），上下快速摇晃30 s，颠倒泡沫盒（4）再快速上下摇晃30 s，摇晃，当盐角草或拟南芥地上部分样品成为粉末状后，打开离心管（6）盖子并迅速添加用于下一步提取RNA的常规的试剂即可。
本发明所述的一种用于提取植物RNA批量粉碎样品的方法，该方法中添加的试剂为QIAGEN 或 OMEGA试剂盒中试剂,用于后续RNA提取操作。
本发明所述的一种用于提取植物RNA批量粉碎样品的方法，该方法适用于盐角草、拟南芥等大多数易粉碎的植物地上部样品，对于幼嫩根部样品也同样适用。
附图说明
图1为本发明泡沫盒结构示意图；
图2为本发明离心管内盐角草及拟南芥样品粉碎图；
图3为本发明RNA提取结果电泳图。
具体实施方式
实施例1
本发明所述方法涉及装置是由泡沫盒、离心管架、离心管、泡沫块和固定片组成，在泡沫盒4内一端放置离心管架5，泡沫盒4内的另一端放置用于固定离心管架5的泡沫块3，在离心管架5内放置离心管6，将泡沫盒4的一端与盖子1的一端采用胶带粘连，在盖子1的内侧与离心管6的对应处固定一块固定片7，具体操作按下列步骤进行：
a、植物样品取样：取50mg 植物盐角草地上部分样品放置于2mL离心管6中，加入一颗6mm的钢珠，盖上盖后放入液氮速冻，用于直接提取样品RNA或保存于-80℃冰箱备用；
b、将泡沫盒4内放置一个2mL离心管架5，离心管架5的周围用泡沫块3固定，然后再将泡沫盒4预先用液氮冷却；
c、将步骤a中装有盐角草样品和钢珠的的离心管6置于液氮中，然后用镊子将其放入到泡沫盒4中的离心管架5上，盖上泡沫盒4的盖子1，固定在盖子1上的固定片7正好使离心管6固定住，翻转泡沫盒4使液氮从泡沫盒4缝隙流出；
d、抓紧泡沫盒4，上下快速摇晃30s，颠倒泡沫盒4再快速上下摇晃30 s，但注意不要震荡太剧烈使离心管6破裂，当盐角草样品成为粉末状后，打开离心管6盖子并添加用于下一步提取RNA的常规的QIAGEN 或 OMEGA试剂盒中试剂即可。
实施例2
本发明所述方法涉及装置是由泡沫盒、离心管架、离心管、泡沫块和固定片组成，在泡沫盒4内一端放置离心管架5，泡沫盒4内的另一端放置用于固定离心管架5的泡沫块3，在离心管架5内放置离心管6，将泡沫盒4的一端与盖子1的一端采用胶带粘连，在盖子1的内侧与离心管6的对应处固定一块固定片7，具体操作按下列步骤进行：
a、植物样品取样：取100mg 植物拟南芥地上部分样品放置于2mL 离心管6中，加入一颗6mm的钢珠，盖上盖后放入液氮速冻，用于直接提取样品RNA或保存于温度-80℃冰箱备用；
b、将泡沫盒4内放置一个2mL离心管架5，离心管架5的周围用泡沫块3固定，然后再将泡沫盒4预先用液氮冷却；
c、将装有拟南芥样品和钢珠的离心管6置于液氮中，然后用镊子将其放入到泡沫盒4中的离心管架5上，盖上泡沫盒4的盖子1，固定在盖子1上的固定片7正好使离心管6固定住，翻转泡沫盒4使液氮从泡沫盒4缝隙流出；
d、抓紧泡沫盒4，上下快速摇晃20 s，颠倒泡沫盒4再快速上下摇晃20 s，当拟南芥样品成为粉末状后，打开离心管6盖子并迅速添加用于下一步提取RNA的常规的QIAGEN 或 OMEGA试剂盒中试剂即可。

Claims (1)

1.一种用于提取植物RNA批量粉碎样品的方法，其特征在于该方法涉及装置是由泡沫盒、离心管架、离心管、泡沫块和固定片组成，在泡沫盒（4）内一端放置离心管架（5），泡沫盒（4）内的另一端放置用于固定离心管架（5）的泡沫块（3），在离心管架（5）内放置离心管（6），泡沫盒（4）的一端与盖子（1）的一端采用胶带粘连，在盖子（1）的内侧与离心管（6）的对应处固定一块固定片（7），具体操作按下列步骤进行：
a、植物样品取样：取50-100 mg 植物盐角草或拟南芥地上部分样品放置于2mL 离心管（6）中，加入一颗6mm的钢珠，盖上盖后放入液氮速冻，用于直接提取样品RNA或保存于温度-80℃冰箱备用；
b、将泡沫盒（4）内放置一个2mL离心管架（5），离心管架（5）的周围用泡沫块（3）固定，然后再将泡沫盒（4）预先用液氮冷却；
c、将装有盐角草或拟南芥地上部分样品和钢珠的离心管（6）置于液氮中，然后用镊子将其放入到泡沫盒（4）中的离心管架（5）上，盖上盖子（1），固定在盖子（1）上的固定片（7）正好使离心管（5）固定住，翻转泡沫盒（4）使液氮从泡沫盒（4）缝隙流出；
d、抓紧泡沫盒（4），上下快速摇晃20-30s，颠倒泡沫盒（4）再快速上下摇晃20-30 s，摇晃，当盐角草或拟南芥地上部分样品成为粉末状后，打开离心管（6）盖子并迅速添加用于下一步提取RNA的常规试剂即可。
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