CN105010132A - 高效诱导肉苁蓉种子萌发的方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于药用植物领域，公开一种高效诱导肉苁蓉种子萌发的方法。其特征在于：诱导萌发的物质为氟草敏水溶液。其有效作用在于：肉苁蓉种子用该诱导物质浸泡处理后，萌发率得到极大提高，有效的解决了肉苁蓉种子萌发率低下的问题。该技术适用于宁夏等西北省份沙漠地区肉苁蓉人工种植过程中的肉苁蓉种子萌发处理。

Description

高效诱导肉苁蓉种子萌发的方法

技术领域

本发明属于药用植物领域，具体涉及一种高效诱导肉苁蓉种子萌发的方法。 

背景技术

肉苁蓉(Cistanche deserticolaY.C.Ma)为列当科肉苁蓉属(Cistanche)的多年生专性根寄生植物，其寄主为藜科植物梭梭(Haloxylon ammodendron)，是我国西北荒漠半荒漠地区珍贵的植物资源，为国家二级保护植物，被列入《中国植物红皮书》。它具有补肾阳、益精血、润燥通肠等功效，是使用频率最高的补肾中药。 

自然条件下肉苁蓉的萌发率很低，不足1‰。萌发率低下是导致其野生资源日渐稀少的原因之一，也是阻碍其人工种植发展的主要因素之一。目前，提高肉苁蓉种子萌发的方法主要有：(1)物理处理法：即利用机械去种皮、低温、沙藏等物理方法处理肉苁蓉种子，促进其萌发；(2)化学处理法：即利用植物激素或者其他化学物质浸泡肉苁蓉种子，促进其萌发；(3)专利《荒漠肉苁蓉种子处理方法》(申请号为：201210160914.5)公开了荒漠肉苁蓉种子处理方法，主要是利用植物表达诱导剂、1-氯甲基氮杂硅三环、V_C、赤霉素组合处理诱导种子萌发。但以上这些方法不仅对种子质量要求较高，处理时间较长、而且处理肉苁蓉种子萌发率还是不够理想。因此，需要找到一种处理时间较短、诱导肉苁蓉萌发率较高的方法。 

发明内容

本发明目的是提供一种高效诱导肉苁蓉种子萌发的方法，本方法在适宜的培养条件下，利用化学物质氟草敏[化学名称为1-(3-三氟甲基苯基)-4-甲氨基-5-氯-6-哒嗪酮]处理肉苁蓉种子促进其萌发，用此方法可有效的提高肉苁蓉种子萌发率，适宜于肉苁蓉人工种植过程中的种子萌发处理。 

实现本发明的方案是： 

高效诱导肉苁蓉种子萌发的方法，包括如下步骤： 

(1)肉苁蓉种子消毒处理：将大小为0.4～0.8mm的肉苁蓉种子用20～25℃的蒸馏水浸泡12～24小时，再用70％乙醇消毒30～60秒，然后用无菌水清洗3～5次，再用0.1％次氯酸钠消毒10～15分钟，然后用无菌水清洗3～5次。 

(2)氟草敏诱导处理：将经过步骤(1)处理后肉苁蓉种子放在90mm的无菌玻璃培养皿中，用1×10^-9～1×10^-5mol·L^-1浓度范围内的氟草敏水溶液对种子进行浸泡处理，处理时间为3～5小时。 

(3)萌发培养：将经过步骤(2)处理后肉苁蓉种子摆放在铺有玻璃纤维滤纸(规格为90mm)的90mm无菌玻璃培养皿中，向皿中加入3～4mL无菌蒸馏水，皿四周用PARAFILM封口膜封口。然后置于温度为20～25℃、湿度60～80％、无光照条件下培养8～15天。 

上述步骤(2)中氟草敏水溶液可通过将3.037mg的氟草敏溶于1L无菌水中，得到浓度为1×10^-5mol·L^-1的溶液，然后按照通常的稀释方法得到其他浓度的溶液。 

上述步骤(1)中所述的大小为0.4～0.8mm的种子，可以通过将肉苁蓉种子先过筛孔直径为0.8mm种子筛，然后将所得的种子过筛孔直径为0.4mm的种子筛而得到。 

本发明的优点和有益效果为：(1)操作简单、处理时间短；(2)种子萌发率高，可达90％；(3)缩短萌发所需时间；(4)适宜于肉苁蓉人工种植过程中的种子萌发处理。 

附图说明

图1是未经诱导剂处理的对照组肉苁蓉种子不能萌发图；图2是诱导剂处理后的肉苁蓉种子萌发图。 

具体实施方式

实施例1 

本试验2011年在宁夏农林科学院农业生物技术研究中心实验室内进行，包括以下步骤： 

(1)肉苁蓉种子消毒处理：2011年5月8日取4℃低温保存的2009年采自于内蒙古阿拉善左旗苏海图人工种植的荒漠肉苁蓉种子，将种子先通过筛孔直径为0.8mm种子筛，然后将所得的种子再通过筛孔直径为0.4mm的种子筛。取所得到的种子10g用25℃的蒸馏水浸泡18小时。蒸馏水浸泡后的种子用70％乙醇消毒40秒，然后用无菌水清洗5次，再用0.1％次氯酸钠消毒15分钟，然后用无菌水清洗5次。 

(2)氟草敏诱导处理：2011年5月9日取消毒处理的肉苁蓉种子放在90mm的无菌玻璃培养皿中，每皿放入100粒肉苁蓉种子，再向皿中分别加入1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7、1×10^-8、1×10^-9mol.L^-1的氟草敏水溶液2mL，对肉苁蓉种子进行浸泡处理，处理时间为5小时，以蒸馏水处理的肉苁蓉种子作为对照，每个处理重复3次。 

(3)萌发培养：将各浓度氟草敏溶液诱导处理后肉苁蓉种子摆放在铺有玻璃纤维滤纸(规格为90mm)的90mm无菌玻璃培养皿中，再向皿中加入4mL无菌蒸馏水，皿四周用PARAFILM封口膜封口，然后置于温度为24℃、湿度80％、黑暗条件下培养。 

(4)萌发情况观察：每天利用Leica体式显微镜观察肉苁蓉种子萌发情况，记录初始萌发时间，待各处理萌发的种子数不再增加时(15d后)，视萌发完全，统计萌发率。 

试验结果(见表1)表明，经氟草敏处理后的肉苁蓉种子萌发率最高达90％，而对照的肉苁蓉种子未见萌发；氟草敏处理后的肉苁蓉种子萌发间为7天。 

表1氟草敏对肉苁蓉种子萌发的影响 

注：萌发率＝萌发种子数／供试种子总数×100％ 

实施例2 

本试验2012年在宁夏农林科学院农业生物技术研究中心实验室内进行，包括以下步骤： 

(1)肉苁蓉种子消毒处理：2012年7月11日取4℃低温保存的2009年采自于内蒙古阿拉善左旗苏海图人工种植的肉苁蓉种子，将种子先通过筛孔直径为0.8mm种子筛，然后将所得的种子再通过筛孔直径为0.4mm的种子筛。取所得到的种子5g用25℃的蒸馏水浸泡24小时。蒸馏水浸泡后的种子用70％乙醇消毒40秒，然后用无菌水清洗5次，再用0.1％次氯酸钠消毒15分钟，然后用无菌水清洗5次。 

(2)氟草敏诱导处理：2011年7月12日取消毒处理的肉苁蓉种子放在90mm的无菌玻璃培养皿中，每皿放入0.1g肉苁蓉种子，再向皿中分别加入1×10^-5mol.L^-1的氟草敏水溶液2mL，对肉苁蓉种子进行浸泡处理，处理时间为4小时。 

(3)不同温度条件下萌发培养：将氟草敏溶液诱导处理后肉苁蓉种子摆放在铺有玻璃纤维滤纸(规格为90mm)的90mm无菌玻璃培养皿中，每皿放入100粒肉苁蓉种子，再向皿中加入4mL无菌蒸馏水，皿四周用PARAFILM封口膜封口，然后分别置于温度为15、18、21、24、27、30、33℃，湿度80％、黑暗条件下培养，每个处理重复3次。 

(4)萌发情况观察：每天利用Leica体式显微镜观察肉苁蓉种子萌发情况，记录初始萌发时间，待各处理萌发的种子数不再增加时(15d后)，视萌发完全，统计萌发率。 

试验结果(见表2)表明，经氟草敏处理后的肉苁蓉种子萌发率最高达90％，而对照的肉苁蓉种子未见萌发；氟草敏处理后的肉苁蓉种子萌发间为7天。 

表2不同温度条件下氟草敏对肉苁蓉种子萌发的影响 

注：萌发率＝萌发种子数／供试种子总数×100％ 。 

Claims (2)

1.高效诱导肉苁蓉种子萌发的方法，其特征在于：诱导萌发的物质为氟草敏水溶液。

2.根据权利要求1所述高效诱导肉苁蓉种子萌发的方法，其特征在于：按下列步骤进行：

(1)肉苁蓉种子消毒处理：将大小为0.4～0.8mm的肉苁蓉种子用20～25℃的蒸馏水浸泡12～24小时，再用70％乙醇消毒30～60秒，然后用无菌水清洗3～5次，再用0.1％次氯酸钠消毒10～15分钟，然后用无菌水清洗3～5次。

(2)氟草敏诱导处理：将经过步骤(1)处理后肉苁蓉种子放在90mm的无菌玻璃培养皿中，用1×10^-9～1×10^-5mol·L^-1浓度范围内的氟草敏水溶液对种子进行浸泡处理，处理时间为3～5小时。

(3)萌发培养：将经过步骤(2)处理后肉苁蓉种子摆放在铺有玻璃纤维滤纸(规格为90mm)的90mm无菌玻璃培养皿中，向皿中加入3～4mL无菌蒸馏水，皿四周用PARAFILM封口膜封口。然后置于温度为20～25℃、湿度60～80％、无光照条件下培养8～15天。