CN104997917A - 一种妇科用含纳米银的中药组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种妇科用含纳米银的中药组合物,其制备步骤如下:制备纳米银溶液:制备甜橙皮提取液和黄连提取液,与9-11倍重量的0.5mM的硝酸银溶液混合,调节硝酸银溶液的pH值为7.0,48-55℃反应10-12min;制备复方中药提取液:取干药材虎杖、五味子、黄芩、丹参、肉桂按照重量比1:1:1:1:1混合水提放置备用;制备成品:将纳米银溶液和复方中药提取液按照体积比1:10的比例混合,加上药物上可接受的剂型制备成药物。
Description
技术领域
本发明涉及一种妇科用含纳米银的中药组合物,属于中药领域。
背景技术
女性下生殖道为开放性腔道,是人体内重要的微生态区,正常情况下是以优势菌为主组成的微生态系统。而女性阴道微生态失衡是引起妇科外阴及阴道炎症反复发作的主要原因。在维持阴道微生态平衡的因素中,雌激素、乳酸杆菌及阴道酸碱度(pH)起着至关重要的作用。在正常的生理情况下,雌激素使阴道上皮增生变厚并富含糖原,增加对病原体的抵抗力;糖原在阴道乳酸杆菌作用下分解为乳酸,维持阴道正常的酸性环境(pH≤4.5,多在3.8~4.4),抑制其他寄生菌及其病原体的生长,这是阴道的自净作用。目前,阴道分泌物中已分离到29种之多的微生物,其中最重要的是乳酸杆菌,它能产生一些抗微生物的物质,包括乳酸、细菌素、乳酸素B和过氧化氢。产过氧化氢的乳酸杆菌在控制阴道微生态环境中起重要作用,并通过与其他过氧化物的联合作用抑制其他病原体过度生长。另一方面,乳酸杆菌造成的酸性环境又有利于减少细胞表面负电荷和去除覆盖于受体表面的糖基,暴露受体而有助于细菌黏附。因此乳酸杆菌是通过正反两方面调节正常阴道的菌群。阴道微生态平衡一旦被打破或外源病原体侵入,即可导致炎症发生,如雌激素水平改变或阴道pH升高;滥用或使用抗生素会使病菌产生耐药性,并杀死大量有益菌,破坏阴道菌群的平衡,从而导致真菌生长旺盛,妇科疾病顽固难缠,难以彻底根治。
霉菌性阴道炎或念珠菌性阴道炎即外阴阴道假丝念珠菌病(VVC),是由念珠菌引起的一种常见多发的外阴阴道炎症性疾病。白色念珠菌为条件致病菌,10%~20%的非孕妇女及30%的孕妇阴道中有此菌寄生,但菌量少,不引起症状。只有当全身及阴道局部免疫能力下降,尤其是局部细胞免疫力下降,白色念珠菌大量繁殖,才会引发阴道炎症状。霉菌性阴道炎很容易治疗,但是非常容易复发。
纳米银粒子具有较强的抗菌能力,广泛应用于临床医学,如外科手术以及伤口愈合等,未来有潜力用于消炎、抗肿瘤、妇科以及再生医学等方面。目前,纳米银粒子的抑菌机理尚不十分清楚,可能的机理可分为:(1)纳米银粒子溶于水中会转化成银离子,杀死病原体;(2)纳米银粒子在细菌细胞膜外大量累积,会改变细胞膜的渗透率,导致细菌死亡;(3)纳米银粒子具有较小的粒径和大的比表面积,因此,纳米银粒子能轻易破坏细胞膜,进入细胞内,在细胞质中转化成银离子,损坏胞内结构。现有技术已有大量将纳米银应用于妇科阴道给药,以治疗念珠菌性阴道炎。但是由于纳米银的光谱抗菌效果,往往会破坏阴道的正常菌群平衡,造成念珠菌性阴道炎难以根治,极易复发的问题。
本发明旨在提供一种妇科用含纳米银的中药组合物,可以有效杀死念珠菌,对乳酸杆菌毒性不大,并且促进阴道上皮细胞再生,调节阴道微生态环境,使得念珠菌性阴道炎不再复发。
发明内容
本发明的目的是提供一种妇科用含纳米银的中药组合物及其制 备方法,利用生物制备,其原料天然,可以有效杀死念珠菌,对乳酸杆菌毒性不大,并且促进阴道上皮细胞再生,调节阴道微生态环境,使得念珠菌性阴道炎不再复发。
采用果皮提取物制备纳米银粒子不仅高效快速,还能废物利用,有利于环保,植物叶及种子资源丰富,具有极强的再生能力,利用果皮、植物叶及种子等的提取物制备纳米银粒子极具潜力。现有技术公开了用风干的香蕉皮、柿子树叶、红木树叶、甜橙皮等成功制得纳米银粒子。纳米银粒子的形貌和粒径直接影响其抑菌及光催化能力,制备形貌和粒径可控的纳米银粒子对其应用有极大的意义。采用不同的生物材料可能会影响制备的纳米银粒子的形貌。虽然目前生物法尚不能精确控制所制备的纳米银粒子的粒径,但关于此方面的研究较多,影响粒径的因素主要有pH值、生物材料量、温度及反应时间。研究发现,随着pH值升高,制备出的银粒子粒径越小。增大提取物的量,会出现粒子粒径增大及减小两种相反的结果。随着反应温度升高,生成的纳米银粒子粒径越小。
现有技术公开了用甜橙皮制备纳米银粒子的方法。甜橙皮作为甜橙工业化加工生产中产生的加工副产物,一般被抛弃,既造成资源的巨大浪费,又污染环境。但是甜橙皮一般只能生产出球形,分布范围较广的纳米银粒子。纳米银粒子的抑菌能力取决于多方面的因素:(1)形貌。相同表面积的纳米银粒子处理大肠杆菌,不同的形貌其抑菌能力有差别,不同形状也许会导致其起有效作用表面积不同,影响抑菌能力。(2)粒径。银粒子粒径越小,抑菌能力越强。(3)制 备方法。生物法制备的纳米银粒子的抑菌能力高于化学法所制备的纳米银粒子。
为了实现上述的目的,本发明采用了以下的技术方案:
一种妇科用含纳米银的中药组合物的制备方法,其步骤如下:
(1)制备纳米银溶液:
制备甜橙皮提取液和黄连提取液,与9-11倍重量的0.5mM的硝酸银溶液混合,调节硝酸银溶液的pH值为7.0,48-55℃反应10-12min;
(2)制备复方中药提取液:
取干药材虎杖、五味子、黄芩、丹参、肉桂按照重量比1:1:1:1:1混合,将其粉碎,水提,放置备用;
(3)制备成品:
将纳米银溶液和复方中药提取液按照体积比1:10的比例混合,加上药物上可接受的剂型制备成药物。
作为优选,步骤(1)为:称取新鲜甜橙皮,加水量为甜橙皮重量的3倍榨成汁,过滤,4℃保存备用;取新鲜黄连根部,加水量为黄连根重量的3倍榨成汁,过滤,4℃保存备用,取1倍重量甜橙皮提取液,0.1-0.2倍重量黄连提取液,与9-11倍重量的0.5mM的硝酸银溶液混合,调节硝酸银溶液的pH值为7.0,48-55℃反应10-12min;
作为优选,步骤(2)为:取干药材虎杖、五味子、黄芩、丹参、肉桂按照重量比1:1:1:1:1混合,将其粉碎,加入总重量10倍的水, 100℃煎煮1.5小时,趁热抽滤,给药渣中再加入水继续煎煮,重复三次,最后将三次药液合并在一起,将合并的药液用40%的乙醇进行醇沉提取,静置24小时后取上清液用旋转蒸发仪回收乙醇,最后将回收过乙醇的药液浓缩至1ml药液相当于2.5-2.8g原药材,放置备用;
作为优选,步骤(3)为制备成凝胶。
本发明的有益之处在于:
1.本发明通过优化反应条件,可控地制备出特殊的纳米银溶液。
2.本发明制得的中药组合物可以有效杀死念珠菌,对乳酸杆菌毒性不大,并且可以条件阴道微生态环境,根治霉菌性阴道炎,不易复发。
3.本发明的制备方法简单,全程采用天然材料作为生产原料,绿色环保,保护环境,易于产业化操作。
4、本发明的含纳米银中药组合物性质稳定,常温存放6个月,纳米银粒子的直径没有显著变化。
具体实施方式
实施例1:
一种妇科用含纳米银的中药组合物凝胶的制备方法,其步骤如下:
称取新鲜甜橙皮,加水量为甜橙皮重量的3倍榨成汁,过滤,4℃保存备用;取新鲜黄连根部,加水量为黄连根重量的3倍榨成汁,过 滤,4℃保存备用,取1倍重量甜橙皮提取液,0.1倍重量黄连提取液,与9倍重量的0.5mM的硝酸银溶液混合,调节硝酸银溶液的pH值为7.0,48℃反应10min,制得纳米银溶液。
取干药材虎杖、五味子、黄芩、丹参、肉桂按照重量比1:1:1:1:1混合,将其粉碎,加入总重量10倍的水,100℃煎煮1.5小时,趁热抽滤,给药渣中再加入水继续煎煮,重复三次,最后将三次药液合并在一起,将合并的药液用40%的乙醇进行醇沉提取,静置24小时后取上清液用旋转蒸发仪回收乙醇,最后将回收过乙醇的药液浓缩至1ml药液相当于2.5g原药材,放置备用,制得复方中药提取液。
制备成凝胶:
每100ml凝胶含:脂肪重聚氧乙烯醚硫酸盐(AES:98%):15ml,十二烷基苯磺酸钠:0.18g,甘油:7ml,纳米银溶液1ml;复方中药提取液:10ml,柠檬酸:0.1g,薄荷脑:1.0g,NaCl:4g,防腐剂:0.5g;余量为蒸馏水定容至100ml。
实施例2:
一种妇科用含纳米银的中药组合物凝胶的制备方法,其步骤如下:
称取新鲜甜橙皮,加水量为甜橙皮重量的3倍榨成汁,过滤,4℃保存备用;取新鲜黄连根部,加水量为黄连根重量的3倍榨成汁,过滤,4℃保存备用,取1倍重量甜橙皮提取液,0.2倍重量黄连提取液,与11倍重量的0.5mM的硝酸银溶液混合,调节硝酸银溶液的pH值为7.0,55℃反应12min,制得纳米银溶液。
取干药材虎杖、五味子、黄芩、丹参、肉桂按照重量比1:1:1:1:1混合,将其粉碎,加入总重量10倍的水,100℃煎煮1.5小时,趁热抽滤,给药渣中再加入水继续煎煮,重复三次,最后将三次药液合并在一起,将合并的药液用40%的乙醇进行醇沉提取,静置24小时后取上清液用旋转蒸发仪回收乙醇,最后将回收过乙醇的药液浓缩至1ml药液相当于2.8g原药材,放置备用,制得复方中药提取液。
制备成凝胶:
每100ml凝胶含:脂肪重聚氧乙烯醚硫酸盐(AES:98%):15ml,十二烷基苯磺酸钠:0.18g,甘油:7ml,纳米银溶液1ml;复方中药提取液:10ml,柠檬酸:0.1g,薄荷脑:1.0g,NaCl:4g,防腐剂:0.5g;余量为蒸馏水定容至100ml。实施例3:
一种妇科用含纳米银的中药组合物凝胶的制备方法,其步骤如下:
称取新鲜甜橙皮,加水量为甜橙皮重量的3倍榨成汁,过滤,4℃保存备用;取新鲜黄连根部,加水量为黄连根重量的3倍榨成汁,过滤,4℃保存备用,取1倍重量甜橙皮提取液,0.15倍重量黄连提取液,与10倍重量的0.5mM的硝酸银溶液混合,调节硝酸银溶液的pH值为7.0,50℃反应11min,制得纳米银溶液。
取干药材虎杖、五味子、黄芩、丹参、肉桂按照重量比1:1:1:1:1混合,将其粉碎,加入总重量10倍的水,100℃煎煮1.5小时,趁热抽滤,给药渣中再加入水继续煎煮,重复三次,最后将三次药液合并在一起,将合并的药液用40%的乙醇进行醇沉提取,静置24小时后 取上清液用旋转蒸发仪回收乙醇,最后将回收过乙醇的药液浓缩至1ml药液相当于2.6g原药材,放置备用,制得复方中药提取液。
制备成凝胶:
每100ml凝胶含:脂肪重聚氧乙烯醚硫酸盐(AES:98%):15ml,十二烷基苯磺酸钠:0.18g,甘油:7ml,纳米银溶液1ml;复方中药提取液:10ml,柠檬酸:0.1g,薄荷脑:1.0g,NaCl:4g,防腐剂:0.5g;余量为蒸馏水定容至100ml。
实施例4:
一种妇科用含纳米银的中药组合物凝胶的制备方法,其步骤如下:
称取新鲜甜橙皮,加水量为甜橙皮重量的3倍榨成汁,过滤,4℃保存备用;取新鲜黄连根部,加水量为黄连根重量的3倍榨成汁,过滤,4℃保存备用,取1倍重量甜橙皮提取液,0.18倍重量黄连提取液,与9.5倍重量的0.5mM的硝酸银溶液混合,调节硝酸银溶液的pH值为7.0,50℃反应11min,制得纳米银溶液。
取干药材虎杖、五味子、黄芩、丹参、肉桂按照重量比1:1:1:1:1混合,将其粉碎,加入总重量10倍的水,100℃煎煮1.5小时,趁热抽滤,给药渣中再加入水继续煎煮,重复三次,最后将三次药液合并在一起,将合并的药液用40%的乙醇进行醇沉提取,静置24小时后取上清液用旋转蒸发仪回收乙醇,最后将回收过乙醇的药液浓缩至1ml药液相当于2.7g原药材,放置备用,制得复方中药提取液。
制备成凝胶:
每100ml凝胶含:脂肪重聚氧乙烯醚硫酸盐(AES:98%):15ml,十二烷基苯磺酸钠:0.18g,甘油:7ml,纳米银溶液1ml;复方中药提取液:10ml,柠檬酸:0.1g,薄荷脑:1.0g,NaCl:4g,防腐剂:0.5g;余量为蒸馏水定容至100ml。
实施例5:
对实施例1-4得到的纳米银溶液在制备成凝胶之前进行形态的表征。
采用紫外-可见分光光度法,透射电镜(TEM)表征不同实施例下合成的纳米银溶液,结果如表1所示。
表1
实施例6:
(1)乳酸杆菌抑菌效果测评
采用牛津杯法进行乳酸杆菌抑菌试验。放置直径为8mm的牛津杯,加入实施例1-5合成的中药组合物凝胶。放入37℃培养箱中培养24h,用游标卡尺测量抑菌圈直径。用本发明的纳米银溶液和中药复方提取液(均配置为和凝胶同组分相同的浓度)分别作为对照1和对照2。测试结果见表2所示。
表2
从上表可以明显的看出,复配之后,对乳酸杆菌的毒作用意想不到的减少了,这有利于减少副作用。
(2)念珠菌抑菌实验
将白色念珠菌接种于灭菌好的培养基中,37℃过夜培养后,用无菌生理盐水校正浓度至107-108CFU/ml。用接种环于培养好的白色念珠菌的培养基上划取一个菌落分装在3ml的MH肉汤(双料)中,放置于摇床(37℃,50r)中,培养6小时,即为供试菌的菌液。
将实施例1-5的凝胶取1ml,MH单料1ml分别置于1-5号试管中,并依次加入100ul白色念球菌,将试管均放置于摇床(37℃,50r)中,培养16-18小时。(因为中药液本身的浑浊和人为视觉的差异,细菌生长后,使得肉眼无法观察,或观察的实验结果易出现偏差。因此,需要将试管中的液体接种于固体培养皿中观察细菌生长情况。)转种到营养琼脂平板培养基上,用接种环涂布,置37℃电热恒温培养箱培养16~18小时,最后观察菌落的生长状况。平行做3次,以2次或3次相同结果为准,结果均无白色念珠菌菌落生长。抑菌试验结果表明:实施例1-4的凝胶对白色念珠菌具有极强的抑制作用。
(3)霉菌性阴道炎治疗实例
选取20名确诊为霉菌性阴道炎,且反复发作3次以上,25-25周岁的女性。于月经期结束后第三天开始用药,阴道给药每次10ml,连续使用15天。停药一个月后复诊,均痊愈。随访一年,无一例复发。
由此可见,本发明的妇科用含纳米银的中药组合物对霉菌性阴道炎有非常好的效果。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种妇科用含纳米银的中药组合物的制备方法,其步骤如下:
制备纳米银溶液:
制备甜橙皮提取液和黄连提取液,与9-11倍重量的0.5mM 的硝酸银溶液混合,调节硝酸银溶液的pH 值为7.0,48-55℃反应10-12min;
制备复方中药提取液:
取干药材虎杖、五味子、黄芩、丹参、肉桂按照重量比1:1:1:1:1混合,将其粉碎,水提,放置备用;
制备成品:
将纳米银溶液和复方中药提取液按照体积比1:10的比例混合,加上药物上可接受的剂型制备成药物。
2.权利要求1所述的妇科用含纳米银的中药组合物的制备方法,其特征在于:
步骤(1)为:称取新鲜甜橙皮,加水量为甜橙皮重量的3倍榨成汁,过滤,4℃保存备用;取新鲜黄连根部,加水量为黄连根重量的3倍榨成汁,过滤,4℃保存备用,取1倍重量甜橙皮提取液,0.1-0.2倍重量黄连提取液,与9-11倍重量的0.5mM 的硝酸银溶液混合,调节硝酸银溶液的pH 值为7.0,48-55℃反应10-12min。
3.权利要求2所述的妇科用含纳米银的中药组合物的制备方法,其特征在于:
步骤(2)为:取干药材虎杖、五味子、黄芩、丹参、肉桂按照重量比1:1:1:1:1混合,将其粉碎,加入总重量10倍的水,100℃煎煮1.5小时,趁热抽滤,给药渣中再加入水继续煎煮,重复三次,最后将三次药液合并在一起,将合并的药液用40%的乙醇进行醇沉提取,静置24小时后取上清液用旋转蒸发仪回收乙醇,最后将回收过乙醇的药液浓缩至1ml药液相当于2.5-2.8g原药材,放置备用。
4.权利要求3妇科用含纳米银的中药组合物的制备方法,其特征在于:
步骤(3)为:制备成凝胶。
5.权利要求1-4所述的方法制备得到的妇科用含纳米银的中药组合物。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20151028 |
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |