CN102293972B - 一种调节女性阴道微生态的提取液 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种调节女性阴道微生态的中药组合物,其特征在于以重量份数中药制成:甘草1-2份、丁香1-2份、蛇床子1-2份、石榴皮1-2份、五倍子1-2份、虎杖1-2份、五味子1-2份、白头翁1-2份、黄连1-2份、黄柏1-2份、木香1-2份和生百部1-2份。本发明得到的中药组合物可直接用于女性阴道,有效去除阴道内的致病菌,能同时抗金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪链球菌、大肠杆菌、变形杆菌、白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌和其他念珠菌。
Description
技术领域
本发明涉及一种妇科病用药,具体为一种调节女性阴道微生态的提取液。
背景技术
众所周知,女性下生殖道为开放性腔道,是人体内重要的微生态区,正常情况下是以优势菌为主组成的微生态系统。而女性阴道微生态失衡是引起妇科外阴及阴道炎症反复发作的主要原因。在维持阴道微生态平衡的因素中,雌激素、乳酸杆菌及阴道酸碱度(pH)起着至关重要的作用。在正常的生理情况下,雌激素使阴道上皮增生变厚并富含糖原,增加对病原体的抵抗力;糖原在阴道乳酸杆菌作用下分解为乳酸,维持阴道正常的酸性环境(pH≤4.5,多在3.8~4.4),抑制其他寄生菌及其病原体的生长,这是阴道的自净作用。阴道内正常菌群是阴道微生态研究的核心内容,早在1892年,Dederlein首次发表了关于人类阴道微生态菌群的研究。后来人们发现健康女性的阴道菌群由多种厌氧菌和需氧菌构成。目前,阴道分泌物中已分离到29种之多的微生物,其中最重要的是乳酸杆菌,它在健康女性的阴道排出物标本中分离率高达50%~80%。它能产生一些抗微生物的物质,包括乳酸、细菌素、乳酸素B和过氧化氢。产过氧化氢的乳酸杆菌在控制阴道微生态环境中起重要作用,并通过与其他过氧化物的联合作用抑制其他病原体过度生长。另一方面,乳酸杆菌造成的酸性环境又有利于减少细胞表面负电荷和去除覆盖于受体表面的糖基,暴露受体而有助于细菌黏附。因此乳酸杆菌是通过正反两方面调节正常阴道的菌群。阴道微生态平衡一旦被打破或外源病原体侵入,即可导致炎症发生,如雌激素水平改变或阴道pH升高;滥用或使用抗生素会使病菌产生耐药性,并杀死大量有益菌,破坏阴道菌群的平衡,从而导致真菌生长旺盛,妇科疾病顽固难缠,难以彻底根治。
综上所述,改善阴道微环境,修复阴道微损伤,维持阴道微生态平衡、改善阴道清洁度、提高阴道粘膜免疫力,对于治疗女性阴道常见疾病具有重要意义,同时要考虑避免使用抗生素所引发的耐药性、二重感染、过敏反应以及对机体的毒副作用等弊端。目前市场上出现的妇科凝胶多为中药成分,且主要是通过抑制有害病菌来达到治疗妇科病的目的,在杀灭致病菌的同时也杀灭了很多益生菌,导致阴道内菌群失调、阴道免疫力低下,从而致使阴道炎反复发作,无法根治。
由于临床上抗菌和抗感染类药物的广泛使用甚至滥用,引发了当前各种严重问题:细菌耐药性逐年增加,某些抗感染药物疗效降低乃至失效,甚至若干已控制的传染病又有再度流行的趋势。故开发新的抗感染类药物刻不容缓。尽管到目前为止,任何抗感染类中药的作用都不能与西药相提并论,但抗感染类中药以其副作用小、耐药性低等西药无法比拟的优势,越来越受到人们的青睐,由此开发抗感染类中药就显得更加重要。同时,由于妇科疾病为成年女性的常见病,具有反复发作、病因复杂且常伴有多种严重并发症的特点,患者常需要长期用药,加之我国女性长久以来形成的用药习惯等因素,且中成药在常见妇科感染疾病的治疗方面具有独特的功效,故开发具有抗菌功效的中药妇科洗液迫在眉睫。
发明内容
本发明一种能够杀灭女性阴道内致病菌中药制剂,调节女性阴道微生态的提取液。为了实现本发明的目的,本发明采用如下的技术方案:
本发明一方面涉及一种调节女性阴道微生态的中药组合物,其特征在于以重量份数中药制成:甘草1-2份、丁香1-2份、蛇床子1-2份、石榴皮1-2份、五倍子1-2份、虎杖1-2份、五味子1-2份、白头翁1-2份、黄连1-2份、黄柏1-2份、木香1-2份和生百部1-2份。
在本发明的一个优选实施方式中,其特征在于该组合物是水提醇沉的提取液。
本发明还涉及上述中药组合物的提取物的制备方法,其特征在于包括如下步骤:将药材粉碎,加入水,加热煮沸,然后煎煮,趁热抽滤,将药渣加水继续煎煮,重复2-3次,最后将药液合并在一起,将合并的药液用30-50%浓度的乙醇进行醇沉提取,静置后取上清液,回收乙醇并浓缩得药液。
本发明还涉及一种药物制剂,其特征在于上述中药组合物以及药物上可接受的辅料制成药学上可接受的剂型。
在本发明的一个优选实施方式中,其特征在于所述的药物上可接受的剂型是洗液、凝胶剂或栓剂。
本发明还涉及一种凝胶剂,其特征在于由上述中药组合物以及药学上可接受的辅料制成,其中所述的药学上可接受的辅料包括脂肪重聚氧乙烯醚硫酸盐,蒸馏水,十二烷基苯磺酸钠,甘油,乙醇,柠檬酸,薄荷脑,NaCl以及防腐剂中的一种或2种或3种或全部。
本发明还涉及上述中药组合物在制备调节女性阴道微生态的药物中的应用。
本发明还涉及上述中药组合物在体外抗菌或在制备抗菌药物中的应用。
在本发明的一个优选实施方式中,其中所述的抗菌是指抗金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪链球菌、大肠杆菌、变形杆菌、白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌和/或其他念珠菌。
本发明得到的中药组合物可直接用于女性阴道,有效去除阴道内的致病菌,能同时抗金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪链球菌、大肠杆菌、变形杆菌、白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌和其他念珠菌。
具体实施方式
中药配方:
甘草、丁香、石榴皮、五倍子、五味子、虎杖、黄柏、黄连、白头翁、木香、蛇床子、生百部。以上药品均购于银川市兴庆区古方大药房
凝胶处方:
脂肪重聚氧乙烯醚硫酸盐(AES:98%):14.4ml,蒸馏水:57.6ml,十二烷基苯磺酸钠:0.192g,甘油:7ml,乙醇(95%):6ml,复方甘草提取液:8ml,柠檬酸:0.096g,薄荷脑:1.0g,NaCl:4g,防腐剂:0.5g
共制:100ml
制作工艺:
(一)复方甘草药液的提取
取甘草、丁香、蛇床子、石榴皮、五倍子、虎杖、五味子、白头翁、黄连、黄柏、木香和生百部,将其粉碎,然后各称取约10g,放入1000ml的平底烧瓶中,用量筒量取880ml的水,搅拌加入,然后置入电热套中加热,先调至100℃沸腾之后再调到50℃进行煎煮,煎煮1小时,1小时后放置一会趁热抽滤,给药渣中再加入880ml的水继续煎煮,重复三次,最后将三次药液合并在一起,将合并的药液用40%的乙醇进行醇沉提取,静置24小时后取上清液用旋转蒸发仪回收乙醇,最后将回收过乙醇的药液浓缩至1ml药液相当于2.5g原药材,放置备用。
(二)AES的溶解:
量取74mlAES于烧杯(500ml)中,加入296ml水(AES∶水=1∶4),用搅拌器搅拌(搅拌转速适中,加热温度70到90摄氏度,时间1.5小时),至充分溶解。
(三)成品制备:
取AES溶解液72ml、十二烷基苯磺酸钠0.192g、甘油7ml、乙醇6ml、复方甘草提取液8ml、薄荷脑1g、NaCl(增稠剂)4g、柠檬酸(PH调节剂)0.096g、以及双乙酸钠(防腐剂)0.5g,于烧杯中,将烧杯放置于电热套中加热,加热温度控制在80到85摄氏度,同时用搅拌器搅拌(搅拌转速适中,时间1.5小时左右),搅拌至完全混合呈澄清状态即可。此时PH值达到6左右,每1ml凝胶含药量为0.2g。
抑菌试验:
(一)培养基的制备
营养琼脂:称取琼脂6.4g,加入200ml水,搅拌加热煮沸,121℃高压灭菌15min,分装至直径9厘米培养皿中,15-20ml/个,制成平板备用。
MH肉汤(单料):称取本品2.7g,加入100ml蒸馏水于锥形瓶(250ml)中,搅拌煮沸溶解,121℃高压灭菌15min备用。
MH肉汤(双料):称取本品5.4g,加入100ml蒸馏水,搅拌加热煮沸,121℃高压灭菌15min备用。
营养肉汤(NB):称取本品1.8g,加入100ml蒸馏水于锥形瓶(250ml)中,搅拌煮沸溶解,121℃高压灭菌15min备用。
生理盐水:称取0.9g加入100ml蒸馏水搅拌煮沸溶解,高压灭菌。
(二)菌液制备:
将接种于灭菌好的培养基中,37℃18-24小时培养后,用无菌生理盐水校正浓度至107-108CFU/ml(菌落形成单位),即为供试菌的菌悬液。用接种环于培养好的各种受试菌株的培养基上划取一个菌落分装在3ml的MH肉汤(双料)中,放置于摇床(37℃,50r)中,培养6小时,即为供试菌的菌液。
(三)菌液的稀释:
将30ul各种受试菌株接种于30ml的营养肉汤中,放置于摇床(37℃,50r)中,培养6小时。
(四)抑菌试验
将复方甘草原药液1ml,MH单料1ml分别置于1-9号试管中,并依次加入100ul大肠杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、白色念球菌、克柔念珠菌、粪链球菌、热带念珠菌、其他念珠菌,再将凝胶洗液1ml,MH单料1ml分别置于10-18号试管中,并依次加入100ul大肠杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、白色念球菌、克柔念珠菌、粪链球菌、热带念珠菌、其他念珠菌,然后将2mlMH肉汤(单料)分别置于19-27号试管中,并依次加入100ul大肠杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、白色念球菌、克柔念珠菌、粪链球菌、热带念珠菌、其他念珠菌,最后于28号试管中加入2mlMH肉汤(单料),将1-28号试管均放置于摇床(37℃,50r)中,培养16-18小时。(因为中药液本身的浑浊和人为视觉的差异,细菌生长后,使得肉眼无法观察,或观察的实验结果易出现偏差。因此,需要将试管中的液体接种于固体培养皿中观察细菌生长情况。)转种到营养琼脂平板培养基上,用接种环涂布,置37℃电热恒温培养箱培养16~18小时,最后观察菌落的生长状况。平行做3次,以2次或3次相同结果为准。
(五)抑菌试验结果
用复方甘草原药液、凝胶洗液对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪链球菌、大肠杆菌、变形杆菌、白色念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌、其他念珠菌进行体外抑菌实验,抑菌结果表一
表一:复方甘草原药液、凝胶洗液体外抑菌实验结果(mg/ml)
注:--代表无菌落生长,-代表有1-2个菌落生长。
(六)结论
复方甘草原药液和凝胶洗液对9种供试菌株进行抑菌试验,显示均有不同程度的抑菌活性;并且均对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪链球菌、克柔念珠菌已达到了杀菌的效果了,而原药液则对白色念珠菌达到了抑菌效果,成品凝胶对大肠杆菌也达到了抑菌效果。
应当理解的是,对本领域普通技术人员来说,可以根据上述说明加以改进或变换,而所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (9)
1.调节女性阴道微生态的中药组合物,其特征在于由以下重量份数中药制成:甘草1-2份、丁香1-2份、蛇床子1-2份、石榴皮1-2份、五倍子1-2份、虎杖1-2份、五味子1-2份、白头翁1-2份、黄连1-2份、黄柏1-2份、木香1-2份和生百部1-2份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于该组合物是水提醇沉的提取液。
3.权利要求2所述的中药组合物的提取物的制备方法,其特征在于包括如下步骤:将药材粉碎,加入水,加热煮沸,然后煎煮,趁热抽滤,将药渣加水继续煎煮,重复2-3次,最后将药液合并在一起,将合并的药液用30-50%浓度的乙醇进行醇沉提取,静置后取上清液,回收乙醇并浓缩得药液。
4.一种药物制剂,其特征在于由权利要求1或2所述的中药组合物以及药物上可接受的辅料制成药学上可接受的剂型。
5.根据权利要求4所述的药物制剂,其特征在于所述的药物上可接受的剂型是洗液、凝胶剂或栓剂。
6.一种凝胶剂,其特征在于由权利要求1或2所述的中药组合物以及药学上可接受的辅料制成,其中所述的药学上可接受的辅料包括脂肪重聚氧乙烯醚硫酸盐,蒸馏水,十二烷基苯磺酸钠,甘油,乙醇,柠檬酸,薄荷脑,NaCl以及防腐剂中的一种或2种或3种或全部。
7.权利要求1或2所述的中药组合物在制备调节女性阴道微生态的药物中的应用。
8.权利要求1或2所述的中药组合物在体外抗菌或在制备抗菌药物中的应用。
9.权利要求8所述的应用,其中所述的抗菌是指抗金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪链球菌、大肠杆菌、变形杆菌、白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌和/或其他念珠菌。
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