CN104946689A - 一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，包括粉碎、发酵、提取、一次浓缩、二次浓缩、干燥粉碎的操作步骤，其中发酵过程的温度控制在30-40℃，发酵时间为4-6天，通过连续式逆流螺旋提取器提取3次，采用一次浓缩、二次浓缩的方法进行进一步提纯，使白藜芦醇的收率达到0.9％，纯度达99％，且发酵时间大大减少，提高了生产效率，简化了生产过程。

Description

一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法
技术领域
本发明涉及从天然植物中提取白藜芦醇的领域，具体涉及一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法。
背景技术
白藜芦醇，分子式为C14H12O3，是一类活性多酚物质，具有顺式和反式两种构象，其中反式为具有生物活性的稳定结构，其活性强度是顺式的7—10倍，其结构式如下式所示：
白藜芦醇是肿瘤的化学预防剂，也是对降低血小板聚集，预防和治疗动脉粥样硬化、心脑血管疾病的化学预防剂，此外还可对骨质疏松、痤疮及老年痴呆症有预防作用，具有抗病毒及免疫调节功能。对人体内部一种单体抗衰老酶起作用，进而发挥预防各种年龄相关疾病、延长预期寿命的潜在作用。
白藜芦醇主要来源于红葡萄酒、虎杖、花生、桑葚等食物，目前天然的白藜芦醇主要是从虎杖、葡萄中提取，其中以从虎杖中提取白藜芦醇的研究较多，一般采用醇提法、水提法、薄层色谱法、超临界流体技术等方式。醇提法提取时间长，溶剂用量大，提取率低；水提法提取率低，成品成分复杂；超临界流体技术依赖于特殊仪器设备，压力大，运行成本高。此外由于白藜芦醇本身在虎杖等植物中的含量很低，只有0.1％左右，采用上述提取方式对原料的利用率也很低，现有技术中有将虎杖进行水解再提纯的方法，但是其水解或发酵的过程不易控制，水解或发酵时间过长，虽然白藜芦醇的收率有一定提高，在0.4％—0.5％左右，但是牺牲了白藜芦醇的纯度和生产时间，这是目前亟待解决的问题。
发明内容
有鉴于此，本申请提供一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，通过将虎杖原料进行发酵、提纯、一次浓缩、二次浓缩的方式，控制发酵过程的工艺参数，以及浓缩过程的溶剂选择，使白藜芦醇的收率达到0.9％，纯度达99％，且发酵时间大大减少，提高了生产效率。
为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，所述方法包括以下步骤：
(1)粉碎：取筛选后的虎杖原料粉碎至6—8目，得虎杖粉末；
(2)发酵：将粉碎后的虎杖粉末送入发酵罐，在温水条件下与水解生物酶发酵3—5天，过滤得发酵渣；
(3)提取：取发酵后的发酵渣，加入乙酸乙酯，每一吨所述发酵渣中加入的乙酸乙酯为3—4吨，在55—65℃条件下进行提取三次，每次0.5—1小时，得提取液；
(4)一次浓缩：将提取液在65℃条件下浓缩，回收提取液中的乙酸乙酯，得浸膏；
(5)二次浓缩：在一次浓缩后的浸膏中加入60—65％的甲醇进行溶解，再进行过滤，过滤后取滤液进行浓缩，回收滤液中的甲醇，静置后通过板框过滤得沉淀；
(6)干燥粉碎：将步骤(5)所得沉淀，经干燥，粉碎后得白藜芦醇成品。
优选的，所述步骤(2)发酵过程的温度控制在30—40℃，发酵时间为4—6天。
优选的，所述步骤(2)中水解生物酶的添加量为：每一吨所述虎杖粉末中加入水解生物酶4Kg。
所述步骤(3)中，每一吨所述发酵渣中加入的乙酸乙酯为3.5吨。
优选的，所述步骤(3)提取采用连续式逆流螺旋提取器。
优选的，所述步骤(5)二次浓缩中，所述板框过滤后，得到的滤液在60—65℃条件下进行浓缩，浓缩至无醇味后，冷却，采用离心机分离沉淀，将所述沉淀干燥、粉碎后得白藜芦醇成品。
优选的，所述步骤(6)中干燥过程的温度为80℃，干燥时间为12小时。
本申请所述从虎杖中提取白藜芦醇的方法，包括粉碎、发酵、提取、一次浓缩、二次浓缩、干燥粉碎的操作步骤，所述粉碎步骤中，虎杖原料先进行筛选，无虫蛀、无沙粒，再粉碎至6—8目，备用；在所述发酵步骤中，在温水条件下与水解生物酶发酵，水解生物酶的添加量为：每一吨所述虎杖粉末中加入水解生物酶4Kg，同时对发酵温度和发酵时间进行严格的控制，此外还需保持发酵室内空气流通，保持一定的空气湿度；在所述提取过程中，通过乙酸乙酯采用连续式逆流螺旋提取器提取3次，合并提取液用于后续的浓缩；在所述一次浓缩过程中，回收提取液，得浸膏；在所述第二次浓缩过程，在一次浓缩后的浸膏中加入60—65％的甲醇进行溶解，再进行过滤，过滤后取滤液进行浓缩，回收滤液中的甲醇，静置后通过板框过滤得沉淀；所述板框过滤后，得到的滤液在60—65℃条件下进行浓缩，浓缩至无醇味后，冷却，采用离心机分离沉淀，将所述沉淀干燥、粉碎后得白藜芦醇成品；其中，干燥过程的温度为80℃，干燥时间为12小时。
此外，本申请所述水解生物酶为本领域常规的生物酶，来自于市售。
本申请与现有技术相比，其详细说明如下：本申请技术方案中采用将虎杖原料发酵的方式，控制发酵过程的时间和温度，将虎杖原料中白藜芦醇苷转化为白藜芦醇，再通过连续式逆流螺旋提取器提取3次，将提取液经过一次浓缩、二次浓缩，提高了白藜芦醇的收率达到0.9％，纯度达99％，减少发酵时间，提高了生产效率，简化了生产过程。
具体实施方式
为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。
实施例一
本申请所述从虎杖中提取白藜芦醇的方法，包括以下步骤：
(1)粉碎：虎杖原料先进行筛选，无虫蛀、无沙粒，再粉碎至6—8目，备用；
(2)发酵：将粉碎后的虎杖粉末送入发酵罐，在温水条件下与水解生物酶发酵5天，过滤得发酵渣，在所述发酵步骤中，水解生物酶的添加量为：每一吨所述虎杖粉末中加入水解生物酶4Kg，发酵过程的温度控制在30—40℃，此外还需保持发酵室内空气流通，保持一定的空气湿度；
(3)提取：取发酵后的发酵渣，加入乙酸乙酯，每一吨所述发酵渣中加入的乙酸乙酯为3.5吨，在60℃条件下进行提取三次，每次1小时，得提取液，在所述提取过程中，通过连续式逆流螺旋提取器提取，合并提取液用于后续的浓缩；
(4)一次浓缩：将提取液在65℃条件下浓缩，回收提取液中的乙酸乙酯，得浸膏；
(5)二次浓缩：在一次浓缩后的浸膏中加入65％的甲醇进行溶解，再进行过滤，过滤后取滤液进行浓缩，回收滤液中的甲醇，静置后通过板框过滤得沉淀；所述板框过滤后，得到的滤液在65℃条件下进行浓缩，浓缩至无醇味后，冷却，采用离心机分离沉淀，将所述沉淀干燥、粉碎后得白藜芦醇成品；
(6)干燥粉碎：将步骤(5)所得沉淀，经干燥，粉碎后得白藜芦醇成品，干燥过程的温度为80℃，干燥时间为12小时。
其中得到的白藜芦醇为白色晶体，经HPLC测定成品纯度为99.5％，收率为0.98％。
实施例二
本申请所述从虎杖中提取白藜芦醇的方法，包括以下步骤：
(1)粉碎：虎杖原料先进行筛选，无虫蛀、无沙粒，再粉碎至6—8目，备用；
(2)发酵：将粉碎后的虎杖粉末送入发酵罐，在温水条件下与水解生物酶发酵4天，过滤得发酵渣，在所述发酵步骤中，水解生物酶的添加量为：每一吨所述虎杖粉末中加入水解生物酶4Kg，发酵过程的温度控制在30—40℃，此外还需保持发酵室内空气流通，保持一定的空气湿度；
(3)提取：取发酵后的发酵渣，加入乙酸乙酯，每一吨所述发酵渣中加入的乙酸乙酯为3吨，在55℃条件下进行提取三次，每次0.5小时，得提取液，在所述提取过程中，通过连续式逆流螺旋提取器提取，合并提取液用于后续的浓缩；
(4)一次浓缩：将提取液在65℃条件下浓缩，回收提取液中的乙酸乙酯，得浸膏；
(5)二次浓缩：在一次浓缩后的浸膏中加入60％的甲醇进行溶解，再进行过滤，过滤后取滤液进行浓缩，回收滤液中的甲醇，静置后通过板框过滤得沉淀；所述板框过滤后，得到的滤液在60℃条件下进行浓缩，浓缩至无醇味后，冷却，采用离心机分离沉淀，将所述沉淀干燥、粉碎后得白藜芦醇成品；
(6)干燥粉碎：将步骤(5)所得沉淀，经干燥，粉碎后得白藜芦醇成品，干燥过程的温度为80℃，干燥时间为12小时。
其中得到的白藜芦醇为白色晶体，经HPLC测定成品纯度为99.0％，收率为0.90％。
实施例三
本申请所述从虎杖中提取白藜芦醇的方法，包括以下步骤：
(1)粉碎：虎杖原料先进行筛选，无虫蛀、无沙粒，再粉碎至6—8目，备用；
(2)发酵：将粉碎后的虎杖粉末送入发酵罐，在温水条件下与水解生物酶发酵6天，过滤得发酵渣，在所述发酵步骤中，水解生物酶的添加量为：每一吨所述虎杖粉末中加入水解生物酶4Kg，发酵过程的温度控制在30—40℃，此外还需保持发酵室内空气流通，保持一定的空气湿度；
(3)提取：取发酵后的发酵渣，加入乙酸乙酯，每一吨所述发酵渣中加入的乙酸乙酯为4吨，在65℃条件下进行提取三次，每次1小时，得提取液，在所述提取过程中，通过连续式逆流螺旋提取器提取，合并提取液用于后续的浓缩；
(4)一次浓缩：将提取液在65℃条件下浓缩，回收提取液中的乙酸乙酯，得浸膏；
(5)二次浓缩：在一次浓缩后的浸膏中加入65％的甲醇进行溶解，再进行过滤，过滤后取滤液进行浓缩，回收滤液中的甲醇，静置后通过板框过滤得沉淀；所述板框过滤后，得到的滤液在65℃条件下进行浓缩，浓缩至无醇味后，冷却，采用离心机分离沉淀，将所述沉淀干燥、粉碎后得白藜芦醇成品；
(6)干燥粉碎：将步骤(5)所得沉淀，经干燥，粉碎后得白藜芦醇成品，干燥过程的温度为80℃，干燥时间为12小时。
其中得到的白藜芦醇为白色晶体，经HPLC测定成品纯度为99.2％，收率为0.94％。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：
(1)粉碎：取筛选后的虎杖原料粉碎至6—8目，得虎杖粉末；
(2)发酵：将粉碎后的虎杖粉末送入发酵罐，在温水条件下加入水解生物酶发酵3—5天，过滤得发酵渣；
(3)提取：取发酵后的发酵渣，加入乙酸乙酯，每一吨所述发酵渣中加入的乙酸乙酯为3—4吨，在55—65℃条件下进行提取三次，每次0.5—1小时，得提取液；
(4)一次浓缩：将提取液在65℃条件下浓缩，回收提取液中的乙酸乙酯，得浸膏；
(5)二次浓缩：在一次浓缩后的浸膏中加入重量分数为60—65％的甲醇进行溶解，再进行过滤，过滤后取滤液进行浓缩，回收滤液中的甲醇，静置后通过板框过滤得沉淀；
(6)干燥粉碎：将步骤(5)所得沉淀，经干燥，粉碎后得白藜芦醇成品。
2.根据权利要求1所述的一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，其特征在于：所述步骤(2)发酵过程的温度控制在30—40℃，发酵时间为4—6天。
3.根据权利要求1所述的一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，其特征在于：所述步骤(2)中水解生物酶的添加量为：每一吨所述虎杖粉末中加入水解生物酶4Kg。
4.根据权利要求1所述的一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，每一吨所述发酵渣中加入的乙酸乙酯为3.5吨。
5.根据权利要求1所述的一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，其特征在于：所述步骤(3)提取采用连续式逆流螺旋提取器。
6.根据权利要求1所述的一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，其特征在于：所述步骤(5)二次浓缩中，所述板框过滤后，得到的滤液在60—65℃条件下进行浓缩，浓缩至无醇味后，冷却，采用离心机分离沉淀，将所述沉淀干燥、粉碎后得白藜芦醇成品。
7.根据权利要求1所述的一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，其特征在于：所述步骤(6)中干燥过程的温度为80℃，干燥时间为12小时。
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