CN104931476A - 一种多溴联苯醚的检测方法 - Google Patents
一种多溴联苯醚的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104931476A CN104931476A CN201410102415.XA CN201410102415A CN104931476A CN 104931476 A CN104931476 A CN 104931476A CN 201410102415 A CN201410102415 A CN 201410102415A CN 104931476 A CN104931476 A CN 104931476A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- detection method
- bde47
- sers
- pbde
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims abstract description 21
- 238000001069 Raman spectroscopy Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000004416 surface enhanced Raman spectroscopy Methods 0.000 claims description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 13
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 4
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 4
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 3
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 3
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000010703 silicon Substances 0.000 claims description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 2
- 241000931526 Acer campestre Species 0.000 claims 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims 1
- USIUVYZYUHIAEV-UHFFFAOYSA-N diphenyl ether Chemical class C=1C=CC=CC=1OC1=CC=CC=C1 USIUVYZYUHIAEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 3
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 abstract description 3
- 238000005464 sample preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 abstract description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 2
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 abstract description 2
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 abstract 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 238000003891 environmental analysis Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000000479 surface-enhanced Raman spectrum Methods 0.000 description 3
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 238000010907 mechanical stirring Methods 0.000 description 2
- 239000002082 metal nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 2
- VIHUMJGEWQPWOT-UHFFFAOYSA-N 1,2,3-tribromo-4-(3-bromophenoxy)benzene Chemical compound BrC1=CC=CC(OC=2C(=C(Br)C(Br)=CC=2)Br)=C1 VIHUMJGEWQPWOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XYBSIYMGXVUVGY-UHFFFAOYSA-N 2,2',4,4'-Tetrabromodiphenyl ether Chemical compound BrC1=CC(Br)=CC=C1OC1=CC=C(Br)C=C1Br XYBSIYMGXVUVGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QJZYHAIUNVAGQP-UHFFFAOYSA-N 3-nitrobicyclo[2.2.1]hept-5-ene-2,3-dicarboxylic acid Chemical compound C1C2C=CC1C(C(=O)O)C2(C(O)=O)[N+]([O-])=O QJZYHAIUNVAGQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 241000283153 Cetacea Species 0.000 description 1
- 229910004042 HAuCl4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- -1 Polybrominated diphenyl ethers (Polybrominated Diphenyl Ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000001237 Raman spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000003917 TEM image Methods 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000002156 adsorbate Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 231100000693 bioaccumulation Toxicity 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000004021 humic acid Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 description 1
- 229910000510 noble metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 239000002957 persistent organic pollutant Substances 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 238000004557 single molecule detection Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
本发明合成了Au纳米颗粒，利用先混合后离心的样品前处理方法使得多溴联苯醚富集在Au纳米颗粒的表面，并通过便携式拉曼光谱仪观察到了多溴联苯醚的拉曼特征峰。通过一系列实验证明本发明采用的样品制备方法及目标污染物分析方法操作简便，可以实现环境基质中多溴联苯醚的快速检测。
Description
技术领域
本发明属于环境分析领域，具体涉及一种多溴联苯醚的检测方法.
技术背景
1928年印度物理学家Raman发现了拉曼散射效应，以此为基础建立起来的拉曼光谱（RS）技术在分子结构和分析化学等领域有着广泛的应用。1974年Fleischmann等第一次在粗糙银电极上观察到吡啶的表面增强拉曼散射（Surface Enhanced Raman Scattering，简称SERS）现象，到1997年SERS效应实现了单分子检测，随后由于纳米技术的飞速发展，对SERS的研究也取得了一定的成果。作为一种高探测灵敏度、高分辨率、对水惰性、可猝灭荧光、稳定性好的技术，SERS被广泛应用于吸附物界面取向及构型、构象研究和结构分析等方向。
基底的制备是实现优异SERS信号的关键，也是SERS领域的研究热点之一。当前，制备出符合特定要求的纳米尺度SERS基底在实验上仍然是一个挑战。纳米表面结构的最大优势是：（1）可获得形貌及粒径基本可控的纳米尺度颗粒；（2）可通过各种有序纳米结构模拟“粗糙表面”来定量研究SERS增强机理；（3）便于优化并得到强SERS效应的实验条件。金、银等贵金属纳米颗粒是目前表面增强拉曼光谱中最常用的SERS活性基底，其中金纳米颗粒由于性质稳定，适用范围更加广泛。
多溴联苯醚（Polybrominated Diphenyl Ethers，PBDEs）是一类全球性有机污染物，具有环境持久性、远距离传输、生物可累积性及生物毒害效应等特性。环境中的废水、沉积物、野生动物（包括海洋哺乳动物、鱼、鸟和蛋）和人体（奶、血清和脂肪组织等）均有PBDEs检出。其中四溴联苯醚（2,2’,4,4’-Tetrabromodiphenyl Ether，BDE47）是最为被普遍和深入研究的一种PBDEs同系物。常用的PBDEs检测方法有气相色谱法，液相色谱法，以及色质联用等分析法，这些方法所用的仪器价格昂贵，并且对样品前处理要求较高。因此，探索简便经济、快速高效的PBDEs检测方法已成为当今环境分析领域的重要研究方向之一。将SERS活性基底用于PBDEs的监测分析从理论上讲是可行的，但是限制其应用的一个主要问题是如何将非极性的PBDEs与金属纳米粒子之间的距离缩小，从而发生SERS效应。迄今为止，国内外尚未见到有关SERS应用于BDE47检测的报道。因此基于SERS技术开发价格低廉，性质稳定的PBDEs检测新方法对环境分析领域具备重要意义。
发明内容
为了克服现有技术的缺陷，本申请的发明人进行了反复的深入研究，从而完成本发明。本发明用一步法合成了一种Au纳米颗粒。采用混合离心法实现BDE47在纳米颗粒周围的富集，并通过便携式拉曼光谱仪观察到了BDE47的拉曼特征峰。通过一系列实验证明本发明采用的样品制备方法及目标污染物分析方法操作简便，可以实现环境基质溶液中的BDE47快速检测。
本发明首先合成了Au纳米颗粒，这种颗粒具有拉曼增强性能。将制备出的Au纳米颗粒与BDE47充分混合后离心，由于BDE47具有疏水性质，因此在离心的过程中可以吸附在Au纳米颗粒表面，缩短了BDE47分子与Au纳米颗粒表面的距离，为表面增强拉曼散射的发生创造了条件。利用便携式拉曼光谱仪可以在5s内检测到BDE47的拉曼特征峰。
通过下面的描述来阐明本发明的具体内容：
（1）用高温还原法合成Au纳米颗粒：将1mL2%的HAuCl4溶液加入到23mL去离子水中，在油浴锅内机械搅拌的条件下加热上述溶液，当温度升至100℃时，向上述溶液内加入1mL含柠檬酸钠质量为75mg的水溶液。反应20min，停止加热，将产物继续搅拌冷却至室温，得到Au纳米颗粒；
（2）SERS样品的准备：将0.5mL步骤（1）得到Au纳米颗粒与0.5mL BDE47的溶液在1.5mL离心管内混合，将所得混合液在8000rpm转速下离心20min，离心结束后，移去0.9mL上清液，离心管内剩余0.1mL待测物质；
（3）PBDEs的检测：将步骤（2）得到的待测物质滴于硅片上，使用便携式拉曼光谱仪进行信号采集，激光波长785nm，扫描时间5s，得到多溴联苯醚的SERS谱图。
附图说明
下面通过图例说明本发明的主要特征。
附图1为本发明制备的Au纳米颗粒的透射电镜照片，实验结果表明制备出的纳米颗粒大小均匀，平均粒径为18nm左右。
附图2为本发明中BDE47在不同样品准备方法下的SERS响应强度。检测结果充分说明本发明使用的先混合后离心的方法可以使非极性的BDE47富集在Au纳米颗粒表面，并且产生了均匀的拉曼增强效应。
附图3是BDE47的SERS谱图以及固体纯品的拉曼谱图。通过与纯品拉曼谱图的特征峰位置对比，可以看出BDE47在SERS谱图中的特征峰峰型与位置基本保持不变，这充分验证了本发明检测方法的可行性。
附图4是Au溶胶对BDE47检测的稳定性。实验结果表明制备得到的Au纳米基底在10天内对BDE47的检测信号稳定。
附图5是BDE47在环境基质中的SERS谱图。检测结果表明，腐殖酸的存在不影响BDE47的检测。附图5的实验结果说明本方法具备应用于实际样品检测的潜力。
发明实施例
下面进一步通过实施例来阐述本发明。
实施例1Au纳米颗粒的制备：取1mL2%的HAuCl4溶液加入到23mL去离子水中，在油浴锅内机械搅拌的条件下加热上述溶液，当温度升至100℃时，向上述溶液内加入1mL含柠檬酸钠质量为75mg的水溶液。反应20min，停止加热，将产物继续搅拌冷却至室温，得到Au纳米颗粒。
实施例2PBDEs的富集与检测：将0.5mL Au纳米颗粒与0.5mL BDE47溶液在1.5mL离心管内混合后，在8000rpm转速下离心20min，离心结束后，移去0.9mL上清液，将离心管内剩余物质混合，取5μL样品滴于硅片上，使用便携式拉曼光谱仪进行信号采集，扫描时间为5s，扫描波长785nm，得到多溴联苯醚的SERS谱图。
Claims (4)
1.一种多溴联苯醚检测方法，其由下述步骤组成：
（1）用高温还原法合成Au纳米颗粒：将1mL2%的HAuCl4溶液加入到23mL去离子水中，在油浴锅内机械搅拌的条件下加热上述溶液，当温度升至100℃时，向上述溶液内加入1mL柠檬酸钠的水溶液。反应20min，停止加热，将产物继续搅拌冷却至室温，得到Au纳米颗粒；
（2）SERS样品准备：将步骤（1）得到的SERS基底与含有BDE47的溶液在1.5mL离心管内混合，将所得混合液在8000rpm转速下离心一定时间，离心结束后，移去上清液，剩余物质为待测样品；
（3）PBDEs的检测：使用便携式拉曼光谱仪对步骤（2）得到的待测样品进行信号采集，得到BDE47的SERS谱图。
2.如权利要求1所述的一种多溴联苯醚检测方法，步骤（1）中，柠檬酸钠用量为75mg。
3.如权利要求1所述的一种多溴联苯醚检测方法，步骤（2）中，BDE47与Au基底的用量均为0.5mL，混合液离心时间为20min。
4.如权利要求1所述的一种多溴联苯醚检测方法，步骤（3）中的多溴联苯醚检测方法如下：取5μL待测样品滴于硅片上，利用便携式拉曼光谱仪进行信号采集，激光波长785nm，扫描时间5s。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410102415.XA CN104931476B (zh) | 2014-03-19 | 2014-03-19 | 一种多溴联苯醚的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410102415.XA CN104931476B (zh) | 2014-03-19 | 2014-03-19 | 一种多溴联苯醚的检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104931476A true CN104931476A (zh) | 2015-09-23 |
| CN104931476B CN104931476B (zh) | 2019-05-28 |
Family
ID=54118748
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410102415.XA Expired - Fee Related CN104931476B (zh) | 2014-03-19 | 2014-03-19 | 一种多溴联苯醚的检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104931476B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106872439A (zh) * | 2017-02-14 | 2017-06-20 | 济南出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | 快速检测防老剂2246的表面增强拉曼光谱方法 |
| CN112666151A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-04-16 | 国网福建省电力有限公司 | 一种快速定性定量分析痕量溴离子的方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101101263A (zh) * | 2007-07-20 | 2008-01-09 | 苏州大学 | 高活性表面增强拉曼光谱的核壳纳米粒子及其制备方法 |
| WO2008016375A2 (en) * | 2005-12-29 | 2008-02-07 | Intel Corporation | Modification of metal nanoparticles for improved analyte detection by surface enhanced raman spectroscopy (sers) |
| CN102004096A (zh) * | 2010-09-28 | 2011-04-06 | 吉林大学 | 多环类芳烃及其取代物的表面增强拉曼检测方法 |
| US20110165077A1 (en) * | 2007-04-02 | 2011-07-07 | Ximei Qian | In vivo tumor targeting and spectroscopic detection with surface enhanced raman nanoparticle tags |
| CN102608101A (zh) * | 2012-03-08 | 2012-07-25 | 中国海洋大学 | 高灵敏度检测水中多环芳烃的表面增强拉曼活性基底 |
-
2014
- 2014-03-19 CN CN201410102415.XA patent/CN104931476B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008016375A2 (en) * | 2005-12-29 | 2008-02-07 | Intel Corporation | Modification of metal nanoparticles for improved analyte detection by surface enhanced raman spectroscopy (sers) |
| US20110165077A1 (en) * | 2007-04-02 | 2011-07-07 | Ximei Qian | In vivo tumor targeting and spectroscopic detection with surface enhanced raman nanoparticle tags |
| CN101101263A (zh) * | 2007-07-20 | 2008-01-09 | 苏州大学 | 高活性表面增强拉曼光谱的核壳纳米粒子及其制备方法 |
| CN102004096A (zh) * | 2010-09-28 | 2011-04-06 | 吉林大学 | 多环类芳烃及其取代物的表面增强拉曼检测方法 |
| CN102608101A (zh) * | 2012-03-08 | 2012-07-25 | 中国海洋大学 | 高灵敏度检测水中多环芳烃的表面增强拉曼活性基底 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| JIANG X, ET AL.: "Surface-enhanced Raman spectroscopy detection of polybrominated diphenylethers using a portable Raman spectrometer", 《TALANTA》 * |
| LI WANG, ET AL.: "Photochemical synthesis and self-assembly of gold nanoparticles", 《COLLOIDS AND SURFACES A: PHYSICOCHEM. ENG. ASPECTS》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106872439A (zh) * | 2017-02-14 | 2017-06-20 | 济南出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | 快速检测防老剂2246的表面增强拉曼光谱方法 |
| CN112666151A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-04-16 | 国网福建省电力有限公司 | 一种快速定性定量分析痕量溴离子的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104931476B (zh) | 2019-05-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104458704B (zh) | 基于dna修饰的sers基底检测低浓度汞离子的方法 | |
| Jayan et al. | Mesoporous silica coated core-shell nanoparticles substrate for size-selective SERS detection of chloramphenicol | |
| CN103357887B (zh) | 一种海胆状空心金银合金纳米颗粒及其制备方法和应用 | |
| CN106053426B (zh) | 基于表面增强拉曼光谱技术检测人体体液中毒品的方法 | |
| CN103616366B (zh) | 一种可以定量检测多氯联苯的表面增强拉曼光谱的方法 | |
| Sun et al. | Chiral colorimetric recognition of amino acids based on silver nanoparticle clusters | |
| CN107101990B (zh) | 一种牛奶中双酚a残留的表面增强拉曼检测方法 | |
| CN106984830A (zh) | 不同长径比金纳米棒的制备方法 | |
| CN104977288A (zh) | 一种基于咖啡环效应的多环芳烃检测方法 | |
| CN109967758A (zh) | ZIF-8/Au复合物表面增强拉曼基底的制备方法 | |
| CN105223183A (zh) | 一种可用于阴阳离子色素选择性检测的基底 | |
| CN102095715A (zh) | 抗氧化剂bht的表面增强拉曼光谱检测方法 | |
| CN105738341A (zh) | 一种重金属汞离子检测方法 | |
| CN106770175A (zh) | 一种利用表面增强拉曼光谱检测百草枯的方法 | |
| CN107309436A (zh) | 一种金磁纳米颗粒及其制备方法与应用 | |
| Wei et al. | A facile surface-enhanced Raman spectroscopy detection of pesticide residues with Au nanoparticles/dragonfly wing arrays | |
| Ye et al. | A simple label-free rhodamine 6G SERS probe for quantitative analysis of trace As 3+ in an aptamer–nanosol | |
| Geng et al. | Rapid and sensitive detection of amphetamine by SERS-based competitive immunoassay coupled with magnetic separation | |
| CN104931476A (zh) | 一种多溴联苯醚的检测方法 | |
| CN110687100A (zh) | 一种高sers增强活性的核壳型纳米粒子及sers定量检测基底 | |
| CN101482509A (zh) | 表面增强拉曼光谱检测动物活性单细胞样品处理方法 | |
| CN108240976A (zh) | 一种将双发射比率荧光量子点探针用于检测多巴胺的荧光分析方法 | |
| Zhang et al. | Detection and quantification of Bucinnazine hydrochloride injection based on SERS technology | |
| CN105973864A (zh) | 一种表面增强拉曼散射效应氧化硅/金微球的制备方法及应用 | |
| CN108580921A (zh) | 一种金/银纳米球棒组装sers基底及制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20190528 Termination date: 20200319 |