CN104911183A - 抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA的转录模板 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA的转录模板，其可以用于转录出抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA，进而抑制胰腺癌TAK1基因表达；本发明还提供了一种抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体，本发明将构建的RNA干扰表达载体转染到胰腺癌PANC-1细胞株，可影响胰腺癌细胞的恶性生物学行为，延缓胰腺癌的演进，本发明为胰腺癌的治疗提供新的手段。
Description
技术领域
本发明涉及一种shRNA的转录模板，具体涉及一种抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA的转录模板、含有该转录模板的RNA干扰表达载体及其构建方法与用途。
背景技术
胰腺癌是我国目前预后最差的消化道肿瘤之一，其发病率与病死率在世界范围内均逐年上升。胰腺癌的发生发展与肿瘤细胞的增殖能力、凋亡水平以及肿瘤炎性微环境密切相关(Zhang Y,et al.Interleukin-6is required for pancreaticcancer progression by promoting MAPK signaling activation and oxidative stressresistance.Cancer Res,2013.73(20):6359-6374.Kunnumakkara AB,et al.{Gamma}-tocotrienol inhibits pancreatic tumors and sensitizes them to gemcitabinetreatment by modulating the inflammatory microenvironment.Cancer Res,2010.70(21):8695-8705.)。MAPK通路(Mitogen-activated protein kinase pathway)是目前发现的的最重要的细胞分裂调节通路，可参与细胞的增殖和凋亡。炎性微环境可诱导正常细胞中抑癌基因或癌基因突变，使正常细胞恶性转化；同时可促进肿瘤细胞的增殖、抗凋亡、血管生成、侵袭和转移，促进肿瘤的发生和发展，其中，NF-κB通路起着重要的作用。而同时作为MAPK通路的关键成员以及NF-κB通路调控的重要转录因子TAK1(Transforming growth factor beta-activated kinase 1)，与肿瘤的发生发展关系十分密切(Cai PC,et al.ElevatedTAK1 augments tumor growth and metastatic capacities of ovarian cancer cellsthrough activation of NF-kappaB signaling.Oncotarget,2014.5(17):7549-7562.)。
TAK1是MAPKKK家族成员，为丝氨酸、苏氨酸蛋白激酶，又称MAP3K7或MEKK7。TAK1基因位于染色体6q15位点上，这是一个与发育异常、炎症性疾病、肿瘤形成等多种疾病相关的基因。近期研究显示，TAK1在头颈部肿瘤，结肠肿瘤，胰腺癌中呈高表达，沉默TAK1后，可促进肿瘤细胞的凋亡，抑制了其侵袭、迁移等能力，起着癌基因的作用。沉默的TAK1可抑制NF-κB通路和/或MAPK通路的活性，进而调节下游靶基因(如AP-1，TNF-α，IL-1β，IL-6，IL-12等)表达，抑制肿瘤增殖、侵袭和迁移能力，促进肿瘤细胞凋亡(SinghA,et al.TAK1inhibition promotes apoptosis in KRAS-dependent colon cancers.Cell,2012.148(4):639-650.)。而NF-κB通路和MAPK通路均是肿瘤发生发展中重要的信号调节通路。
RNA干扰是双链RNA介导的特异性转录后基因表达沉默现象。当导入与mRNA同源的双链RNA时，可将mRNA降解或者阻止mRNA的正常翻译，从而使基因表达沉默。利用该方法可设计靶向胰腺癌TAK1基因的RNA干扰序列，从而抑制胰腺癌的发生发展。经过检索，目前尚无胰腺癌TAK1基因的RNA干扰序列的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的不足之处而提供了一种抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA的转录模板及其用途，本发明还提供了一种抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体及其用途，本发明还提供了一种抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体的构建方法。
为实现上述目的，所采取的技术方案：一种抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA的转录模板，所述转录模板为SEQ ID NO:5所示的序列和SEQ ID NO:6所示的序列退火杂交形成的双链DNA。
本发明还提供了一种抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体，所述RNA干扰表达载体包括骨架载体和上述所述的抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA的转录模板。
优选地，所述骨架载体为pFU-GW-011载体。
优选地，所述RNA干扰表达载体的启动子为U6启动子。
本发明还提供了上述所述抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体的构建方法，所述构建方法包括：
(1)分别合成SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的序列；
(2)将步骤(1)中合成的SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的序列退火杂交形成双链DNA；
(3)将步骤(2)得到的双链DNA与骨架载体相连，得到所述RNA干扰表达载体。
优选地，所述骨架载体为pFU-GW-011载体。
本发明还提供了上述所述的抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA的转录模板在制备治疗胰腺癌的药物中的用途。
本发明还提供了上述所述的抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA的转录模板在制备抑制胰腺癌TAK1基因表达的试剂中的用途。
本发明还提供了上述所述的抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体在制备治疗胰腺癌的药物中的用途。
本发明还提供了上述所述的抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体在制备抑制胰腺癌TAK1基因表达的试剂中的用途。
本发明的有益效果在于：本发明提供了一种抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA的转录模板，其可以用于转录出抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA，进而抑制胰腺癌TAK1基因表达；本发明还提供了一种抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体，本发明将构建的RNA干扰表达载体转染到胰腺癌PANC-1细胞株，可影响胰腺癌细胞的恶性生物学行为，延缓胰腺癌的演进，本发明为胰腺癌的治疗提供新的手段。
附图说明
图1为本发明的实施例1中Cherry标记的U6启动子的RNA干扰表达载体pFU-GW-011-TAK1-shRNA及插入酶切位点示意图；
图2为本发明的实施例2中pFU-GW-011-TAK1-shRNA表达载体转染荧光图(200×)，LM:light microscope；
图3为本发明的实施例2中pFU-GW-011-TAK1-shRNA表达载体转染PANC-1细胞后TAK1蛋白表达的Western blot检测图；
图4为本发明的实施例2中克隆形成实验检测pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1下调TAK1前后PANC-1细胞增殖能力的变化图；
图5为本发明的实施例2中Transwell实验检测pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1下调TAK1前后PANC-1细胞侵袭能力的变化图；
图6为本发明的实施例2中划痕实验检测pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1下调TAK1前后PANC-1细胞迁移能力的变化图。
图7为本发明的实施例3中裸鼠移植瘤实验检测pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1下调TAK1前后PANC-1细胞体内成瘤能力的变化和移植瘤HE染色病理图。
具体实施方式
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。本发明附图中shRNA-1、shRNA-2、shRNA-3和shRNA-NC分别指本发明实施例中的TAK1-shRNA-1、TAK1-shRNA-2、TAK1-shRNA-3和TAK1-shRNA-NC。
实施例1：构建pFU-GW-011-TAK1-shRNA真核表达载体
1.1所需试剂
限制性内切酶BamH I和Age I及相应Buffer、T4连接酶及其缓冲液、PCR产物纯化试剂盒、胶回收试剂盒均购于TaKaRa公司(大连宝生物工程有限公司)。
1.2设计、合成及筛选TAK1基因的特异shRNA
本发明选用的是上海吉凯基因化学技术有限公司提供的pFU-GW-011表达载体(其商品编号为GV298)来产生shRNA。该载体启动子为U6启动子，属于RNA聚合酶III启动子的一种，操纵一段小的发夹RNA(short hairpin RNA，shRNA)在哺乳动物细胞中的表达，在细胞内会自动被加工为siRNA，从而引发基因沉默或者表达抑制。
Human sapiens TGF beta-activated kinase 1(TAK1)mRNA，(GeneBankAccession No.NM_145331)序列如SEQ ID NO:1所示。
根据上述序列设计了并合成特异性TAK1-shRNA-1、TAK1-shRNA-2和TAK1-shRNA-3的转录模板的正义链和反义链，其中下划线部分为转录模板上与各自靶序列对应的序列，RNAi的靶序列如表1。
表1RNAi的靶序列
TAK1-shRNA-1的转录模板：
正义链：5’-CCGGGCAGTGATTCT TGGATT GTTTCTCGAGAAACAATC CAA GAA TCACTGCTT TTTG-3’(SEQ ID NO:5)；
反义链：3’-CGTCACTAA GAACCTAACAAA GAGCTCTTT GTTAGGTTC TTA GTGACGAAAAACCTAG-5’(SEQ ID NO:6)。
TAK1-shRNA-2的转录模板：
正义链：5’-CCGGCAGTGTGTCTTGTGATGGAATCT CGA GATTCCATC ACA AGA CACACTGTT TTT G-3’(SEQ ID NO:7)；
反义链：3’-GTCACACAGAACACTACCTTAGAGCTCTAAGGTAGTGTT CTGTGTGACAAAAACCTAG-5’(SEQ ID NO:8)。
TAK1-shRNA-3的转录模板：
正义链：5’-CCGGCCCGTGTGAAC CATCCTAATACTCGA GTATTAGGA TGGTTCACACGGGTT TTT G-3’(SEQ ID NO:9)；
反义链：3’-GGGCACACTTGGTAGGATTATGAGCTCATA ATC CTACCA AGTGTGCCCAAA AACCTAG-5’(SEQ ID NO:10)。
TAK1-shRNA-NC的转录模板：
正义链：5’-CCGGTTCTCCGAACGTGTCACGTTTCAAGAGAACGTGAC ACGTTCGGAGAATTTTTG-3’(SEQ ID NO:11)；
反义链：3’-AAG AGG CTT GCA CAG TGC AAA GTT CTC TTG CAC TGT GCA AGC CTC TTA AAA ACTT AA-5’(SEQ ID NO:12)。
1.3真核表达载体pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1、pFU-GW-011-TAK1-shRNA-2、pFU-GW-011-TAK1-shRNA-3和阴性对照(pFU-GW-011-TAK1-shRNA-NC)质粒的构建
具体流程：将1.2中TAK1-shRNA-1、TAK1-shRNA-2、TAK1-shRNA-3和TAK1-shRNA-NC的正义链和反义链经常温退火程序(90℃15min后自然冷却至25℃)后直接放入4℃保存。阴性对照的对照插入序列：TTCTCCGAACGTGTCACGT(SEQ ID NO:13)。图1显示了Cherry标记的U6启动子的RNA干扰表达载体pFU-GW-011-TAK1-shRNA及插入酶切位点示意图，用BamH I和Age I内切酶，分别酶切以上退火产物和载体pFU-GW-011(37℃过夜)。酶切产物经电泳区分条带，用胶回收试剂盒回收正确的DNA片段，随后进行连接反应。反应体系(20μl)：载体片段100ng，基因片段100ng，T4连接酶缓冲液2μl，T4连接酶1μl，余用去离子水补足。16℃连接过夜后，连接的表达载体转化感受态大肠杆菌菌株TOP10，经含氨苄霉素(100μg/ml)抗性的LB琼脂培养基筛选(37℃倒置培养16小时)后，挑取菌落进行阳性克隆PCR鉴定，随后QIAGEN Plasmid大抽Kit抽提质粒送上海美季生物技术有限公司进行DNA测序进一步鉴定。
实施例2：本发明实施例1中构建的pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1、pFU-GW-011-TAK1-shRNA-2和pFU-GW-011-TAK1-shRNA-3的体外效果实验
1、本发明实施例1中构建的pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1、pFU-GW-011-TAK1-shRNA-2和pFU-GW-011-TAK1-shRNA-3抑制效果鉴定
将本发明实施例1中pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1、pFU-GW-011-TAK1-shRNA-2、pFU-GW-011-TAK1-shRNA-3和阴性对照(pFU-GW-011-TAK1-shRNA-NC)表达载体分别用5μg/ml polybrene转染人胰腺癌PANC-1细胞株，转染72小时后采用荧光显微镜观察Cherry荧光细胞比例，采用western blot法检测TAK1蛋白的表达。从图2可见，荧光显微镜下观察转染率在80％以上。从图3中的Western blot结果显示pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1抑制胰腺癌细胞株PANC-1的TAK1蛋白的表达最为显著，因此本发明从中筛选出干扰效果最好的，即抑制TAK1效果最为显著的pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1。
2、pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1抑制TAK1表达后细胞增殖能力的检测
将PANC-1分为两组，分别是pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1组和pFU-GW-011-TAK1-shRNA-NC组。取生长状态良好的培养细胞，用PBS洗3遍，0.25％胰酶消化，细胞悬液充分吹打成单细胞悬液，以每孔2000个细胞接种于6孔板，每组3孔。十字形轻轻晃动培养皿，于37℃，5％CO2培养箱中培养2周至肉眼可见细胞克隆时，终止培养，弃去培养基，PBS洗2遍，空气干燥；甲醇固定15min，弃去甲醇，空气干燥；用Giemsa染色15min，流水缓慢洗去染液，空气干燥。图4显示pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1组克隆数为(151±13)个，pFU-GW-011-TAK1-shRNA-NC组克隆数为(374±43)个(P＝0.001)，提示下调TAK1可抑制PANC-1细胞株的增殖能力。
3、pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1抑制TAK1表达后细胞侵袭和迁移能力的检测
3.1Transwell小室实验
将PANC-1分为两组，分别是pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1组和pFU-GW-011-TAK1-shRNA-NC组。取生长状态良好的培养细胞，用PBS洗3遍，0.25％胰酶消化，细胞悬液充分吹打成单细胞悬液，用无血清DMEM培养基调整细胞密度为5×105个/ml，在Transwell上室加入200μl无血清细胞悬液，在Transwell下室加入0.5ml含10％胎牛血清的DMEM培养基作为诱导。于37℃，5％CO2培养箱中继续培养12h后，弃去培养基，细胞用4％多聚甲醛固定10min，棉签擦去未穿膜细胞，小室下层用Giemsa染色，200×倒置显微镜下观察，随机选取5个视野，计算穿膜细胞数。图5显示pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1组平均穿膜细胞数为(36±6)个/200×高倍镜视野，pFU-GW-011-TAK1-shRNA-NC组平均穿膜细胞数为(124±9)个/200×高倍镜视野，两者具有统计学差异(P<0.001)，提示下调TAK1可抑制PANC-1细胞株的侵袭能力。
3.2细胞划痕实验
将PANC-1分为两组，分别是pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1组和pFU-GW-011-TAK1-shRNA-NC组。取生长状态良好的培养细胞，用PBS洗3遍，0.25％胰酶消化，细胞悬液充分吹打成单细胞悬液，调整细胞密度为4×105个细胞每孔接种于6孔板，于37℃，5％CO2培养箱中继续培养24h。24h后，用200μl枪头于6孔板中单层细胞表面划痕，PBS洗3遍，去除划下的细胞残片，加入2ml无血清DMEM培养基，继续于37℃，5％CO2培养箱中继续培养48h，并分别于0h和48h拍照测量划痕宽度。图6显示下调TAK1后，PANC-1细胞迁移距离减少，提示下调TAK1后PANC-1细胞迁移能力下降。
实施例3：本发明实施例1中构建的pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1的体内效果实验
方法：雄性Balb/c裸鼠，10只，4-6周龄，购自广东省医学实验动物中心。检疫期结束后，将转染有pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1的胰腺癌PANC-1细胞株(处理组)和转染有pFU-GW-011-TAK1-shRNA-NC的胰腺癌PANC-1细胞株(阴性对照组)分别在Balb/c裸鼠背部左侧(处理组)和右侧(阴性对照组)行皮下注射，每侧分别注射105个细胞(处理组或阴性对照组)，裸鼠各侧分别做标记并记录成瘤裸鼠数量和瘤体体积。实验周期为42天。实验结束后，测量瘤体长径(a)和短径(b)，体积V(cm3)＝1/2×a×b2，并做组织切片。
结果：从图7可以知，处理组Balb/c裸鼠成瘤率为50％(5/10)，阴性对照组成瘤率为90％(9/10)。处理组成瘤体积为(0.29±0.26)cm3，阴性对照组成瘤体积为(1.80±0.71)cm3(P<0.001)，提示处理组移植瘤体积较阴性对照组小，pFU-GW-011-TAK1-shRNA-1可降低胰腺癌PANC-1细胞成瘤能力。处理组瘤体行组织切片及HE染色提示瘤体组织学保留了胰腺癌病理学特点。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (10)
1.一种抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA的转录模板，其特征在于，所述转录模板为如SEQ ID NO:5所示的序列和如SEQ ID NO:6所示的序列退火杂交形成的双链DNA。
2.一种抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体，其特征在于，所述RNA干扰表达载体包括骨架载体和权利要求1所述的抑制胰腺癌TAK1基因表达的shRNA的转录模板。
3.根据权利要求2所述的抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体，其特征在于，所述骨架载体为pFU-GW-011载体。
4.根据权利要求2所述的抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体，其特征在于，所述RNA干扰表达载体的启动子为U6启动子。
5.如权利要求2所述的抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：
(1)分别合成SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的序列；
(2)将步骤(1)中合成的SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的序列退火杂交形成双链DNA；
(3)将步骤(2)得到的双链DNA与骨架载体相连，得到所述RNA干扰表达载体。
6.根据权利要求5所述的抑制胰腺癌TAK1基因表达的RNA干扰表达载体的构建方法，其特征在于，所述骨架载体为pFU-GW-011载体。
7.如权利要求1所述的转录模板在制备治疗胰腺癌的药物中的用途。
8.如权利要求1所述的转录模板在制备抑制胰腺癌TAK1基因表达的试剂中的用途。
9.如权利要求2、3所述的RNA干扰表达载体在制备治疗胰腺癌的药物中的用途。
10.如权利要求2、3所述的RNA干扰表达载体在制备抑制胰腺癌TAK1基因表达的试剂中的用途。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107164480A (zh) * | 2017-06-01 | 2017-09-15 | 南昌大学第二附属医院 | Zeb2基因表达变异在胰腺癌化疗预后诊断中的应用 |
| CN109420170A (zh) * | 2017-08-25 | 2019-03-05 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 新型的肿瘤微环境相关靶点tak1及其在抑制肿瘤中的应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101490279A (zh) * | 2006-07-10 | 2009-07-22 | 阿斯利康(瑞典)有限公司 | 用taki抑制剂治疗癌症的方法 |
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Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101490279A (zh) * | 2006-07-10 | 2009-07-22 | 阿斯利康(瑞典)有限公司 | 用taki抑制剂治疗癌症的方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| S.E. MARTIN ET AL.: "RNAi screening identifies TAK1 as a potential target for the enhanced efficacy of topoisomerase inhibitors", 《CURR CANCER DRUG TARGETS》 * |
| 唐健 等: "TAK1蛋白在胰腺癌中的表达及其临床意义", 《消化肿瘤杂志（电子版）》 * |
| 黄志清 等: "TAK1siRNA对C2C12细胞内TAK1基因表达的影响", 《生物技术》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107164480A (zh) * | 2017-06-01 | 2017-09-15 | 南昌大学第二附属医院 | Zeb2基因表达变异在胰腺癌化疗预后诊断中的应用 |
| CN107164480B (zh) * | 2017-06-01 | 2018-11-06 | 南昌大学第二附属医院 | Zeb2基因表达变异在胰腺癌化疗预后诊断中的应用 |
| CN109420170A (zh) * | 2017-08-25 | 2019-03-05 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 新型的肿瘤微环境相关靶点tak1及其在抑制肿瘤中的应用 |
| CN109420170B (zh) * | 2017-08-25 | 2021-03-02 | 中国科学院上海营养与健康研究所 | 肿瘤微环境相关靶点tak1及其在抑制肿瘤中的应用 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Huang Fengting Inventor after: Zhang Shineng Inventor after: Tang Jian Inventor after: Zhuang Yanyan Inventor after: Peng Juanfei Inventor after: Cheng Wenjie Inventor after: Gu Zhiqiang Inventor after: Chen Wenying Inventor before: Zhang Shineng Inventor before: Huang Fengting Inventor before: Tang Jian Inventor before: Zhuang Yanyan Inventor before: Peng Juanfei Inventor before: Cheng Wenjie Inventor before: Gu Zhiqiang Inventor before: Chen Wenying |