CN104893975B - 一种双室选择透过性细胞培养装置及其应用 - Google Patents

一种双室选择透过性细胞培养装置及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN104893975B
CN104893975B CN201510281271.3A CN201510281271A CN104893975B CN 104893975 B CN104893975 B CN 104893975B CN 201510281271 A CN201510281271 A CN 201510281271A CN 104893975 B CN104893975 B CN 104893975B
Authority
CN
China
Prior art keywords
cell culture
culture chamber
cell
chamber
semi
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201510281271.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104893975A (zh
Inventor
刘小青
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chinese Health Industry Group Co.,Ltd.
FULIXIN LIFE TECHNOLOGY CO.,LTD.
Shenzhen Guangcai Life Engineering Technology Co ltd
Original Assignee
Prosperous Life Science Co Ltd Of Fu Li
Shenzhen Fu Lixin Health Industry Development Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Prosperous Life Science Co Ltd Of Fu Li, Shenzhen Fu Lixin Health Industry Development Co Ltd filed Critical Prosperous Life Science Co Ltd Of Fu Li
Priority to CN201510281271.3A priority Critical patent/CN104893975B/zh
Priority to HK15107920.3A priority patent/HK1203745A2/zh
Priority to EP15181334.2A priority patent/EP3098297A1/en
Priority to US14/829,865 priority patent/US20160348055A1/en
Publication of CN104893975A publication Critical patent/CN104893975A/zh
Priority to HK15111031.1A priority patent/HK1210207A1/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104893975B publication Critical patent/CN104893975B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M29/00Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
    • C12M29/04Filters; Permeable or porous membranes or plates, e.g. dialysis
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M25/00Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
    • C12M25/02Membranes; Filters
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/02Form or structure of the vessel
    • C12M23/10Petri dish
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/02Form or structure of the vessel
    • C12M23/14Bags
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/34Internal compartments or partitions
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/38Caps; Covers; Plugs; Pouring means
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M27/00Means for mixing, agitating or circulating fluids in the vessel
    • C12M27/16Vibrating; Shaking; Tilting
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M33/00Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M35/00Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
    • C12M35/08Chemical, biochemical or biological means, e.g. plasma jet, co-culture

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

本发明公开了一种双室选择透过性细胞培养装置,其中,所述装置包括:至少2个细胞培养室:第一细胞培养室和第二细胞培养室;其中,所述第一细胞培养室用于培养能分泌供养物质的供养细胞,所述第二细胞培养室用于接受供养物质以培养目标细胞;所述第一细胞培养室通过一半透膜与第二细胞培养室相连接;所述第一细胞培养室和第二细胞培养室均设置有一进液及接种通道。通过本发明可以有效降低目标细胞的培养成本,并且所述装置结构简单易实现,具有良好的市场应用前景。

Description

一种双室选择透过性细胞培养装置及其应用
技术领域
本发明涉及细胞培养技术领域,尤其涉及一种双室选择透过性细胞培养装置及其应用。
背景技术
细胞培养是生命及再生医学领域中广泛应用的关键技术,采用普通基本培养基(DMEM或RIPM1640)并额外添加胎牛血清可以实现常规哺乳细胞的培养,但是对于需要额外添加许多细胞因子等的一些特殊类型细胞,这种常规的细胞培养体系往往细胞培养成本非常高。因此,对这种特殊类型的细胞,降低细胞培养成本成为可持续发展的关键问题。
随着细胞治疗个性化技术的兴起,体外扩增特殊功效的细胞成了临床前研究以及临床治疗的重点研发项目。具有体外扩增特殊功效的细胞包括由多功能的造血干细胞、T细胞、NK细胞、DC细胞以及CIK细胞等,将这类细胞体外扩增之后再回输到哺乳生物体内,有利于提高机体的造血装置功能:如提升红细胞、免疫细胞等的数量及功能维护、抗肿瘤能力以及免疫防御能力。
然而体外扩增特殊功效的细胞须添加多种细胞因子、蛋白或抗体,在常规培养基下培养会造成成本高且操作复杂的问题,而现有市场上并未有一种能有效解决上述问题的技术方案。
因此,现有技术还有待于改进和发展。
发明内容
鉴于上述现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种双室选择透过性细胞培养装置及其应用,旨在解决现有技术中常规培养基培养需额外添加供养物质的细胞时成本高且操作复杂的问题。
本发明的技术方案如下:
一种双室选择透过性细胞培养装置,其中,所述装置包括:至少2个细胞培养室:第一细胞培养室和第二细胞培养室;其中,所述第一细胞培养室用于培养能分泌供养物质的供养细胞,所述第二细胞培养室用于接受供养物质以培养目标细胞;所述第一细胞培养室通过一半透膜与第二细胞培养室相连接;所述第一细胞培养室和第二细胞培养室均设置有一进液及接种通道。
所述双室选择透过性细胞培养装置,其中,所述细胞培养室包括适合于贴壁细胞培养的培养皿、培养板、培养罐,适合于高密度培养的多滤膜性培养罐和适合于悬浮细胞培养的培养袋、培养罐中的一种。
所述双室选择透过性细胞培养装置,其中,所述半透膜的孔径≤0.22μm。
所述双室选择透过性细胞培养装置,其中,所述供养物质包括细胞因子、蛋白多肽、抗体和其它小分子物质中的一种或多种。
所述双室选择透过性细胞培养装置,其中,所述细胞培养室固定在可摇动装置上,用于促进细胞培养室之间的非细胞成分交换。
所述双室选择透过性细胞培养装置,其中,所述第一细胞培养室和第二细胞培养室为水平放置,所述第一细胞培养室通过一设置有半透膜的细管与第二细胞培养室相连接。
所述双室选择透过性细胞培养装置,其中,所述第一细胞培养室和第二细胞培养室为垂直放置,所述第一细胞培养室的底部通过一半透膜与第二细胞培养室的顶部相连接。
所述双室选择透过性细胞培养装置,其中,所述第一细胞培养室中还设置有用于高密度培养贴壁细胞的多层细胞培养滤膜。
所述双室选择透过性细胞培养装置,其中,所述第一细胞培养室的顶部设置有一非密封盖,所述第二细胞培养室的底部设置有一用于换液的阀门装置。
一种如上所述双室选择透过性细胞培养装置的应用,其中,所述双室选择透过性细胞培养装置专门应用于培养需添加供养物质的细胞的培养。
有益效果:本发明所述双室选择透过性细胞培养装置及其应用,其包括至少2个培养不同细胞的细胞培养室:第一细胞培养室和第二细胞培养室,其通过一半透膜将两个细胞培养室间隔开,使得第一细胞培养室中细胞所释放的细胞因子、抗体等小分子物质可以通过半透膜进入第二细胞培养室中为其细胞培养所利用,且两个细胞培养室中所培养的细胞不会透过半透膜进行混合。通过本发明可以有效降低目标细胞的培养成本,并且所述装置结构简单易实现,具有良好的市场应用前景。
附图说明
图1为本发明实施例一中的双室袋式细胞培养装置的结构示意图。
图2为本发明实施例二中的双室罐式细胞培养装置的结构示意图。
图3为本发明实施例三中的多滤膜型双室罐式细胞培养装置的结构示意图。
图4为本发明实施例四中的可换液型双室罐式细胞培养装置的结构示意图。
图5为本发明实施例四中的多滤膜可换液型双室罐式细胞培养装置的结构示意图。
具体实施方式
本发明提供一种双室选择透过性细胞培养装置及其应用,为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确,以下对本发明进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
本发明提供一种双室选择透过性细胞培养装置,其中,所述装置包括:至少2个细胞培养室:第一细胞培养室和第二细胞培养室;其中,所述第一细胞培养室用于培养能分泌供养物质的供养细胞,所述第二细胞培养室用于接受供养物质以培养目标细胞。并且所述第一细胞培养室通过一半透膜与第二细胞培养室相连接;所述第一细胞培养室和第二细胞培养室均设置有一进液及接种通道。
本发明实施例中通过一半透膜将两个细胞培养室间隔开,使得第一细胞培养室中细胞所释放的细胞因子、抗体等小分子物质可以通过半透膜进入第二细胞培养室中为其细胞培养所利用,且两个细胞培养室中所培养的细胞不会透过半透膜进行混合。通过本发明可以有效降低目标细胞的培养成本,并且所述装置结构简单易实现,具有良好的市场应用前景。
具体地,每个细胞培养室中单独培养不同的细胞,其中第一细胞培养室所培养的供养细胞能细胞因子、蛋白多肽和抗体等多种供养物质,而这些物质正是第二细胞培养室中培养的目标细胞进行扩增时所需要的,通过设置2个培养不同的细胞的细胞培养室,可以有效降低需要额外添加供养物质的目标细胞的生产成本。
另外,本发明中所述第一细胞培养室通过一半透膜与第二细胞培养室相连接。半透膜即为选择性透过膜,其只允许离子和小分子物质自由通过,而生物大分子如细胞等则不能自由通过,其原因是因为半透膜的孔径比离子和小分子的大,但比生物大分子如蛋白质和淀粉的小。本发明中采用半透膜将第一细胞培养室和第二细胞培养室连接起来,使得两个细胞室之间的小分子物质能进行自由交换,如第一细胞培养室中供养细胞所分泌的细胞因子、蛋白多肽等能通过半透膜进入到第二细胞培养室中供目标细胞的生长所用,其对目标细胞具有促增或促进某种途径的活化作用,而2个细胞培养室中所培养的供养细胞和目标细胞并不会通过半透膜进行交换,有效保持细胞培养的单一性,避免细胞混杂。
较佳实施例中,本发明所述细胞培养室包括适合于贴壁细胞培养的培养皿、培养板、培养罐,适合于高密度培养的多滤膜性培养罐和适合于悬浮细胞培养的培养袋、培养罐中的一种或多种。本发明中对于所述双室选择透过性细胞培养装置可以采用不同类型的培养器皿作为细胞培养室,并且在所述细胞培养室设置有一进液及接种通道,可用于加入营养液和进行细胞接种,实现对细胞的培养。另外,本发明所述细胞培养室允许气体如CO2的自由进出。进一步地,所述进液及接种通道可以设置在所述细胞培养室的上方位置。需说明的是,本发明所述高密度培养是指细胞密度接近理论值的培养。由于细胞种类及目标产物差异性较大,高密度培养的最终细胞数量无法用一个确切的值或范围界定。例如,培养液中工程菌的菌体浓度在50gDCW/L以上就可以成为大肠杆菌的高密度发酵,而某些极端微生物细胞密度达到数克每升也可认为是高密度培养。
优选地,所述半透膜的孔径≤0.22μm。具体地,所述半透膜的孔径为0.22μm、0.1μm,当然,也可以根据实际生产的需要选择其他孔径大小的半透膜。本发明所述半透膜允许细胞因子、蛋白多肽或抗体等小分子物质自由通过,但不允许供养细胞或目标细胞的通过。
较佳实施例中,所述细胞培养室固定在可摇动装置上,用于促进细胞培养室之间的非细胞成分交换。本发明中所述细胞培养室可以通过固定在可轻度摇动、振动或旋转的装置上,如固定在摇床上,可以有效促进两个细胞培养室之间的非细胞成分(即细胞因子、蛋白多肽或抗体等)充分交换,满足目标细胞生长的需要。
进一步地,本发明所述第一细胞培养室和第二细胞培养室既可以为水平放置的,也可以为垂直放置的。当其为水平放置时,所述第一细胞培养室通过设置有一半透膜的细管与第二细胞培养室相连接,此时半透膜设置于连接两个细胞培养室的细管内部中间位置;当其为垂直放置时,所述第一细胞培养室的底部通过一半透膜与第二细胞培养室的顶部相连接,此时第一细胞培养室的底部与第二细胞培养室的顶部是贴合在一起的,仅通过一半透膜将二者隔开。
更优选地,所述第一细胞培养室中还设置有多层细胞培养滤膜,其可以实现高密度培养贴壁细胞,即细胞可以在细胞培养滤膜的表面上附着生长,而多层的细胞培养滤膜可以最大面积地培养细胞,提高空间利用率。较佳实施例中,所述细胞培养滤膜可以为半透膜结构,其孔径≤0.22μm,使得供养物质即细胞因子等可以自由通过,而所培养的供养细胞和目标细胞并不能自由通过,防止细胞混杂。
另外,当第一细胞培养室和第二细胞培养室为垂直放置时,所述第一细胞培养室的顶部设置有一非密封盖,所述第二细胞培养室的底部设置有一用于换液的阀门装置。具体地,所述非密封盖可以采用塑料等多种材质制成,其盖住第一细胞培养室的上方,可以有效防止灰尘等污染物进入细胞培养室中,而采用非完全密封的盖子,可以允许细胞培养室中的气体(如CO2)与外界进行交换。另外,所述阀门装置可以设置在第二细胞培养室底部所连接的塑料导管中,当然所述塑料导管与第二培养室底部连接位置上也设置有一半透膜结构,防止细胞损失。当细胞进行培养时,阀门装置处于关闭状态,当需进行换液时,阀门装置处于打开状态,此时塑料导管可以通过一胶管与抽气机连接,并通过抽气机除掉部分旧的培养基,再通过换液及接种通道添加新的培养基。
本发明还提供一种如上所述双室选择透过性细胞培养装置的应用,其中,所述双室选择透过性细胞培养装置专门应用于培养需添加供养物质的细胞的培养;所述供养物质包括细胞因子、蛋白多肽、抗体和其它小分子物质中的一种或多种。更具体地,所述供养物质包括纤维细胞生长因子1、成纤维细胞生长因子2、表皮生长因子、血小板衍生生长因子、胰岛素、胰岛素样生长因子1、血管内皮细胞生长因子、胎盘生长因子、白血病抑制因子、转铁蛋白、集落刺激因子1、肿瘤坏死因子、肿瘤转化因子、巨噬细胞集落刺激因子、粒细胞集落刺激因子、白介素-2、白介素-4、白介素-5、白介素-6、白介素-12、白介素-15、白介素-23、干扰素、促红细胞生成素、促血小板生成素、干细胞因子、抗CD3抗体、抗CD28抗体中的一种或多种。
下面以具体实施例对本发明技术方案作进一步阐述。
实施例一
双室袋式细胞培养装置
本实施例描述的双培养袋式细胞培养装置具备如下特点:培养袋所用的材料允许气体(如CO2)自由通过,但不允许其他液体分子渗漏出去。两个培养袋之间通过一个细管相连,相连的细管31中间有一个选择性半透膜30,选择性半透膜的孔径为0.22μm。这种选择性半透膜30允许第一细胞培养室10中培养的细胞所分泌的细胞因子、蛋白多肽、抗体或其他小分子物质到达第二细胞培养室20中,为第二细胞培养室20所培养的细胞利用,这些通过半透膜的细胞因子、蛋白多肽、抗体或其他小分子物质对第二细胞培养室20所接种的细胞有促进增殖或有促进某种途径的活化作用,每个培养袋都有相应的细胞接种及加液口40(见图1),并且所述培养袋可以置于能轻度旋转或振动的装置上,这种旋转或振动由于培养液中的除细胞以外的物质成分能充分交换。
实施例二
双室罐式细胞培养装置
本实施例描述的双培养罐式细胞培养装置具备如下特点:两个细胞培养室在空间上是垂直放置的,且其中间所连接的选择性半透膜30的孔径为0.1μm。这种选择性半透膜30允许第一细胞培养室10中培养的细胞所分泌的细胞因子、蛋白多肽、抗体或其他小分子物质到达第二细胞培养室20中,为第二细胞培养室20所培养的细胞利用,这些通过选择性半透膜30的细胞因子、蛋白多肽、抗体或其他小分子物质对第二细胞培养室20所接种的细胞有促进增殖或有促进某种途径的活化作用。第一细胞培养室10由一个盖子50盖住,但不是完全密封,允许气体(如CO2)与外界发生交换(见图2)。这种装置可以置于能轻度旋转或振动的装置上,这种旋转或振动由于培养液中的除细胞以外的物质成分能充分交换。
实施例三
多滤膜型双室罐式细胞培养装置
本实施例描述的多滤膜型双室罐细胞培养装置室是在实施例二的基础上改进而来,具体改进如下:在第一细胞培养室10中垂直放置有多层细胞培养滤膜30(即多层选择性半透膜),使其能高密度培养贴壁细胞,选择性半透膜的孔径为0.16μm。选择性半透膜30不仅允许细胞贴壁生长,还允许细胞培养室中培养的细胞所分泌的细胞因子、蛋白多肽、抗体或其他小分子物质到达第二细胞培养室20,为第二细胞培养室20所培养的细胞利用,这些通过选择性半透膜30的细胞因子、蛋白多肽、抗体或其他小分子物质对第二细胞培养室20所接种的细胞有促进增殖或有促进某种途径的活化作用(见图3)。这种装置可以置于能轻度旋转或振动的装置上,这种旋转或振动由于培养液中的除细胞以外的物质成分能充分交换。
实施例四
可换液型双室罐式细胞培养装置及多滤膜可换液型双室罐式细胞培养装置
本实施例描述的可换液型双室罐式细胞培养装置是在实施例2(或实施例3)的基础上改进而来。具体改进如下:在第二细胞培养室20的底部连接有一塑料导管60,且在该塑料导管60上设置有一个可开关的阀门61,在细胞培养时阀门61关闭;中途换液时阀门61打开。该塑料导管60通过一根乳胶管70与抽气机相连,抽气机打开时释放旧的培养基,同时通过进液及接种通道添加新的培养基(见图4)。第一细胞培养室也可以设计成多滤膜型,以实现高密度贴壁细胞的培养(见图5)。这种装置可以置于能轻度旋转或振动的装置上,这种旋转或振动由于培养液中的除细胞以外的物质成分能充分交换。
综上所述,本发明所述双室选择透过性细胞培养装置及其应用,其包括至少2个培养不同细胞的细胞培养室:第一细胞培养室和第二细胞培养室,其通过一半透膜将两个细胞培养室间隔开,使得第一细胞培养室中细胞所释放的细胞因子、抗体等小分子物质可以通过半透膜进入第二细胞培养室中为其细胞培养所利用,且两个细胞培养室中所培养的细胞不会透过半透膜进行混合。通过本发明可以有效降低目标细胞的培养成本,并且所述装置结构简单易实现,具有良好的市场应用前景。
应当理解的是,本发明的应用不限于上述的举例,对本领域普通技术人员来说,可以根据上述说明加以改进或变换,所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。

Claims (2)

1.一种双室选择透过性细胞培养装置,其特征在于,所述装置包括:至少2个细胞培养室:第一细胞培养室和第二细胞培养室;其中,所述第一细胞培养室用于培养能分泌供养物质的供养细胞,所述第二细胞培养室用于接受供养物质以培养目标细胞;
所述第一细胞培养室通过一半透膜与第二细胞培养室相连接;所述第一细胞培养室和第二细胞培养室均设置有一进液及接种通道;
所述半透膜的孔径≤0.22μm;
所述细胞培养室固定在可摇动装置上,用于促进细胞培养室之间的非细胞成分交换;
所述第一细胞培养室和第二细胞培养室为垂直放置,所述第一细胞培养室的底部通过一半透膜与第二细胞培养室的顶部相连接;
所述第一细胞培养室的顶部设置有一非密封盖,所述第二细胞培养室的底部设置有一用于换液的阀门装置;
所述阀门装置设置在第二细胞培养室底部所连接的塑料导管中,所述塑料导管与第二细胞培养室底部的连接位置上也设置有一半透膜结构;
所述供养细胞包括纤维细胞生长因子1、成纤维细胞生长因子2、表皮生长因子、血小板衍生生长因子、胰岛素、胰岛素样生长因子1、血管内皮细胞生长因子、胎盘生长因子、白血病抑制因子、转铁蛋白、集落刺激因子1、肿瘤坏死因子、肿瘤转化因子、巨噬细胞集落刺激因子、粒细胞集落刺激因子、白介素-2、白介素-4、白介素-5、白介素-6、白介素-12、白介素-15、白介素-23、干扰素、促红细胞生成素、促血小板生成素、干细胞因子、抗CD3抗体、抗CD28抗体中的一种或多种;
所述细胞培养室包括适合于贴壁细胞培养的培养皿、培养板、培养罐,适合于高密度培养的多滤膜性培养罐和适合于悬浮细胞培养的培养袋、培养罐中的一种;
所述第一细胞培养室中还设置有用于高密度培养贴壁细胞的多层细胞培养滤膜。
2.一种如权利要求1所述双室选择透过性细胞培养装置的应用,其特征在于,所述双室选择透过性细胞培养装置专门应用于培养需添加供养物质的细胞的培养。
CN201510281271.3A 2015-05-28 2015-05-28 一种双室选择透过性细胞培养装置及其应用 Active CN104893975B (zh)

Priority Applications (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510281271.3A CN104893975B (zh) 2015-05-28 2015-05-28 一种双室选择透过性细胞培养装置及其应用
HK15107920.3A HK1203745A2 (zh) 2015-05-28 2015-08-17 種雙室選擇透過性細胞培養裝置及其應用
EP15181334.2A EP3098297A1 (en) 2015-05-28 2015-08-18 A dual chamber selectively permeable device for cell culture and the applications thereof
US14/829,865 US20160348055A1 (en) 2015-05-28 2015-08-19 Dual chamber selectively permeable device for cell culture and the applications thereof
HK15111031.1A HK1210207A1 (zh) 2015-05-28 2015-11-09 種雙室選擇透過性細胞培養裝置及其應用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510281271.3A CN104893975B (zh) 2015-05-28 2015-05-28 一种双室选择透过性细胞培养装置及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104893975A CN104893975A (zh) 2015-09-09
CN104893975B true CN104893975B (zh) 2016-06-01

Family

ID=53879395

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510281271.3A Active CN104893975B (zh) 2015-05-28 2015-05-28 一种双室选择透过性细胞培养装置及其应用

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20160348055A1 (zh)
EP (1) EP3098297A1 (zh)
CN (1) CN104893975B (zh)
HK (2) HK1203745A2 (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11325130B2 (en) * 2016-02-12 2022-05-10 Ginreilab Inc. Multiwell instrument
FR3065227B1 (fr) 2017-04-13 2024-04-12 Biomerieux Sa Dispositif de controle microbiologique, procede de mise a disposition et utilisation d'un tel dispositif
CN108192824A (zh) * 2018-01-19 2018-06-22 深圳光彩生命工程技术有限公司 一种nk细胞的双层培养装置、系统及方法
CN111601878B (zh) * 2018-01-24 2024-04-16 横河电机株式会社 培养用添加剂扩散机构、培养用容器、培养系统及细胞制造方法
EP3650528A1 (en) * 2018-11-08 2020-05-13 Aglaris Ltd Cell culture system and method
CN109401971B (zh) * 2018-12-28 2024-01-30 江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院) 一种多功能自动化独立/联合共培养装置
CN111849778A (zh) * 2019-04-29 2020-10-30 弗元(上海)生物科技有限公司 细胞培养装置及系统
WO2021230750A1 (en) * 2020-05-15 2021-11-18 Universiteit Leiden Screening plate and method for co-culturing cells

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1290744A (zh) * 1999-12-09 2001-04-11 中国科学院力学研究所 逆流透析式空间细胞培养器及培养方法
CN2570288Y (zh) * 2002-09-30 2003-09-03 周晋 一次性半透连通式细胞隔离联合培养瓶
CN1814745A (zh) * 2005-12-15 2006-08-09 中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所 一种细胞培养装置
CN101812404A (zh) * 2010-04-27 2010-08-25 惠识瑶 罐外循环的流化床式细胞反应器及培养动物细胞方法
CN102220281A (zh) * 2011-04-19 2011-10-19 陕西省食品药品检验所 一种肝细胞与Kupffer细胞共培养体系及其应用

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ZA839241B (en) * 1982-12-14 1984-08-29 Bio Response Inc Method for culturing living cells
US20050112030A1 (en) * 2003-08-21 2005-05-26 Gaus Stephanie E. Meshwell plates
DE102006051283A1 (de) * 2006-10-25 2008-04-30 Edi (Experimentelle & Diagnostische Immunologie) Gmbh Zellkultursystem, Verfahren zu seiner Herstellung sowie seine Verwendung in der präklinischen Untersuchung
FR2931484B1 (fr) * 2008-05-26 2011-01-07 Assist Publ Hopitaux De Paris Bioreacteur a double compartiment.
JP2012527217A (ja) * 2009-04-24 2012-11-08 ジ・オハイオ・ステート・ユニバーシティ 双方向微小環境系
EP2832847B1 (en) * 2012-03-29 2019-02-06 Hitachi, Ltd. Culture vessel and automated culture apparatus
EP2971057A4 (en) * 2013-03-15 2016-11-02 Kiyatec Inc BIOREACTOR SYSTEM

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1290744A (zh) * 1999-12-09 2001-04-11 中国科学院力学研究所 逆流透析式空间细胞培养器及培养方法
CN2570288Y (zh) * 2002-09-30 2003-09-03 周晋 一次性半透连通式细胞隔离联合培养瓶
CN1814745A (zh) * 2005-12-15 2006-08-09 中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所 一种细胞培养装置
CN101812404A (zh) * 2010-04-27 2010-08-25 惠识瑶 罐外循环的流化床式细胞反应器及培养动物细胞方法
CN102220281A (zh) * 2011-04-19 2011-10-19 陕西省食品药品检验所 一种肝细胞与Kupffer细胞共培养体系及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
HK1203745A2 (zh) 2015-10-30
US20160348055A1 (en) 2016-12-01
CN104893975A (zh) 2015-09-09
HK1210207A1 (zh) 2016-04-15
EP3098297A1 (en) 2016-11-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104893975B (zh) 一种双室选择透过性细胞培养装置及其应用
CN101611132B (zh) 高效透气装置及培养细胞的方法
US6255106B1 (en) Process for simultaneous cultivation of different mammalian cells
CN110438157A (zh) 肝前体样细胞系、构建方法以及在生物人工肝领域的应用
CN106148266A (zh) 一种免疫细胞用培养基及该培养基的添加剂
CN205188305U (zh) 细胞共培养的培养皿
CN102978160A (zh) 一种体外诱导扩增nkt细胞的方法
CN103952300A (zh) 一种微流控芯片及细胞趋化运动研究方法
PT1625212E (pt) Órgão imunitário artificial
CN102321581A (zh) 腹水肿瘤细胞致敏dc-cik的制备方法
CN103740644A (zh) 一种基于3d培养体系的扩增造血干细胞的方法
CN107446888A (zh) Nk细胞培养基、培养方法及二者的应用
CN204644371U (zh) 一种集成式多细胞非接触共培养装置
CN105324478A (zh) 培养容器
CN204803325U (zh) 一种双室选择透过性细胞培养装置
CN103361271A (zh) 细胞增殖袋及细胞增殖装置
CN103834614A (zh) 一种附子多糖诱导nkt细胞增殖的制备方法及其应用
CN107400660B (zh) 一种激活和扩增nkt细胞的方法
CN203382764U (zh) 细胞增殖袋及细胞增殖装置
CN207259522U (zh) 用于贴壁细胞生长的细胞培养皿
CN205473829U (zh) 细胞培养和细胞间相互作用的共培养装置
CN102329726A (zh) 细胞培养皿
CN210314291U (zh) 主动交换空气的培养细菌/细胞的摇瓶
CN105624109B (zh) 一种使用生物反应器培养nkt细胞的方法
CN204385206U (zh) 干细胞培养灌流装置

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1210207

Country of ref document: HK

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: GR

Ref document number: 1210207

Country of ref document: HK

CP03 Change of name, title or address

Address after: Unit 2102, central business building, Futian District Central District, Shenzhen, Guangdong

Co-patentee after: FULIXIN LIFE TECHNOLOGY CO.,LTD.

Patentee after: Shenzhen Zhongsheng Health Industry Co.,Ltd.

Address before: 518000 central business building 2102, Futian District Central District, Shenzhen, Guangdong

Co-patentee before: FULIXIN LIFE TECHNOLOGY CO.,LTD.

Patentee before: SHENZHEN FULIXIN HEALTH INDUSTRY DEVELOPMENT CO.,LTD.

CP03 Change of name, title or address
CP03 Change of name, title or address
CP03 Change of name, title or address

Address after: Guangdong city of Shenzhen province Nanshan District Guangdong streets Hyde three No. 126 Houhai Excellence Center 14 1406

Co-patentee after: FULIXIN LIFE TECHNOLOGY CO.,LTD.

Patentee after: Shenzhen China Health Industry Group Co.,Ltd.

Address before: 518000 central business building 2102, Futian District Central District, Shenzhen, Guangdong

Co-patentee before: FULIXIN LIFE TECHNOLOGY CO.,LTD.

Patentee before: Shenzhen Zhongsheng Health Industry Co.,Ltd.

CP03 Change of name, title or address

Address after: Guangdong city of Shenzhen province Nanshan District Guangdong streets Hyde three No. 126 Houhai Excellence Center 14 1406

Co-patentee after: FULIXIN LIFE TECHNOLOGY CO.,LTD.

Patentee after: Chinese Health Industry Group Co.,Ltd.

Address before: 518000 Guangdong city of Shenzhen province Nanshan District Guangdong streets Hyde three No. 126 Houhai Excellence Center 14 1406

Co-patentee before: FULIXIN LIFE TECHNOLOGY CO.,LTD.

Patentee before: Shenzhen China Health Industry Group Co.,Ltd.

CP03 Change of name, title or address
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20180103

Address after: No. 2, building No. 2, big thousand industrial plant, district 67, Xin'an street, Baoan District, Guangdong

Patentee after: SHENZHEN GUANGCAI LIFE ENGINEERING TECHNOLOGY CO.,LTD.

Address before: 518000 Guangdong city of Shenzhen province Nanshan District Guangdong streets Hyde three No. 126 Houhai Excellence Center 14 1406

Co-patentee before: FULIXIN LIFE TECHNOLOGY CO.,LTD.

Patentee before: Chinese Health Industry Group Co.,Ltd.

TR01 Transfer of patent right
PP01 Preservation of patent right

Effective date of registration: 20200618

Granted publication date: 20160601

PP01 Preservation of patent right
PD01 Discharge of preservation of patent

Date of cancellation: 20230618

Granted publication date: 20160601

PD01 Discharge of preservation of patent
DD01 Delivery of document by public notice
DD01 Delivery of document by public notice

Addressee: Ruan Aiming

Document name: Notice of Termination of Suspension Procedure