CN104857514B

CN104857514B - 一种胰岛素脂质体透皮促进剂及其制备方法

Info

Publication number: CN104857514B
Application number: CN201510249440.5A
Authority: CN
Inventors: 朱利民; 武俊紫; 权静; 吴焕岭; 孙晓竹; 李赫宇
Original assignee: Donghua University
Priority date: 2015-05-15
Filing date: 2015-05-15
Publication date: 2018-01-19
Anticipated expiration: 2035-05-15
Also published as: CN104857514A

Abstract

本发明涉及一种胰岛素脂质体透皮促进剂及其制备方法，透皮促进剂的成分包括曲酸以及磷酸盐‑吐温20缓冲液PBS‑T。制备方法包括：将曲酸溶于PBS‑T中，震荡，即得促进剂。利用曲酸作为胰岛素脂质体透皮促进剂，来源广泛，价格便宜，具有实用价值，制备方法简单。本发明使用曲酸作为透皮促进剂具有明显促进胰岛素脂质体透皮的作用，提高胰岛素的透皮速率，具有很好的降糖效果。

Description

一种胰岛素脂质体透皮促进剂及其制备方法

技术领域

本发明属于胰岛素透皮促进剂及其制备领域，特别涉及一种胰岛素脂质体透皮促进剂及其制备方法。

背景技术

曲酸又名曲菌酸、麴酸，是一种黑色素专属性抑制剂，它进入皮肤细胞后能够与细胞中的铜离子络合，改变酪氨酸酶的立体结构，阻止酪氨酸酶的活化，从而抑制黑色素的形成。曲酸类美白活性剂较其它美白活性剂具有更好的酪氨酸酶抑制效果。它不作用于细胞中的其它生物酶，对细胞没有毒害作用，同时它还能进入细胞间质中，组成胞间胶质，起到保水和增加皮肤弹性的作用。

在人体皮肤中，酪氨酸在酪氨酸酶的催化作用下，与氧自由基经复杂的氧化、聚合，最后合成黑色素。曲酸能抑制酪氨酸酶的合成，因而可以强烈抑制皮肤黑色素的形成，而且安全无毒，不会产生白斑后遗症，所以曲酸已被配入化妆水、面膜、乳液、护肤霜中，制成能有效治疗雀斑、老人斑、色素沉着、粉刺等的高档美白化妆品，但是关于其促进胰岛素透皮的研究还没有文献报道。由于胰岛素在人体中的药代动力学和药效动力学特点均适合每天一次的给药方案。但是每天一次的皮下给药给病人带来很多不便，同时也给患者带来了极大的身心痛苦，经皮给药是一种理想的给药方式。经皮给药皮肤的水解酶活性相当小，有利于多肽及蛋白质药物保持稳定；可维持恒定的血药浓度，避免血药浓度波动带来的不良反应；避免肝脏的首过效应和胃肠道的降解；适应患者的顺应性，可自主给药，使用安全方便。

当前关于大分子透皮的研究，目前流行度较高的为微波、电流通道、超声等，但由于其促发机制较为复杂，因此关于如何提高胰岛素脂质体的透皮量和透皮效率是当前的热点。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种胰岛素脂质体透皮促进剂及其制备方法，该透皮促进剂来源广泛，价格便宜，有实用价值，可用于胰岛素透皮给药促进剂有明显的实用价值，应用于实际可明显节约胰岛素的成本，且制备方法简单。

本发明的一种胰岛素脂质体透皮促进剂，成分包括：曲酸以及磷酸盐-吐温20缓冲液PBS-T。

所述曲酸为透皮促进剂，PBS-T为曲酸的保护成分。

一种胰岛素脂质体透皮促进剂的制备方法，包括：

将曲酸溶于PBS-T中，震荡，即得促进剂；其中，促进剂中曲酸的质量浓度为0.5％～2％。

所述胰岛素脂质体包括：基本脂质体、柔性脂质体和模式药物；其中，基本脂质体包括卵磷脂和胆固醇，柔性脂质体为胆酸钠，模式药物为胰岛素。

所述胰岛素脂质体的粒径为500nm。

所述震荡的时间为5分钟。

所述促进剂中曲酸的质量浓度为1％。

所述胰岛素的分子量为5000以上。

所述的胰岛素脂质体透皮促进剂无论是涂在离体大鼠皮肤的表面还是糖尿病大鼠皮肤的表面，均可以促进胰岛素脂质体的传递，且传递的量优于单纯的脂质体。

所述脂质体皮肤给药后经皮肤给药后能明显增加胰岛素的透皮总量。

本发明所用的曲酸最佳质量浓度配比为1％(1.5％以及2.0％略高于1％，但没有统计学意义)，用量较少，但是实用价值很高，只需在大鼠表面涂用，10min以后给予胰岛素脂质体表面，就可以提高胰岛素的透皮速率，起到了很好的降糖效果。

本发明的所用的曲酸溶液虽然不可以直接促进胰岛素水溶液的透皮，但是可促进脂质体透皮，由于脂质体能够长效缓释，且在体内稳定，其分解产物在体内没有毒副作用，可能在今后具有临床应用价值。

有益效果

(1)本发明利用曲酸作为胰岛素脂质体透皮促进剂，来源广泛，价格便宜，具有实用价值，制备方法简单；

(2)本发明的透皮促进剂提高胰岛素的透皮速率，具有很好的降糖效果。

附图说明

图1为实施例1所得的胰岛素脂质体的SEM图片；1-a为普通脂质体、1-b为柔性脂质体；

图2为实施例2中胰岛素的体外模拟透皮量和透皮速度；其中，2-a为实施例2中得到的透皮量与时间的关系，2-b为实施例2中得到的24h透皮速度；

图3为实施例3中的胰岛素脂质体的体内降糖情况。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例1

胰岛素脂质体透皮促进剂以及胰岛素脂质体的合成。

(1)准确称取曲酸1g，溶于100g的磷酸盐-吐温-20缓冲液(Phosphate BufferedSaline-Tween20，PBS-T)中，震荡5分钟，即得促进剂，之后至于4度冰箱中保存备用，使用时取出即可。

(2)胰岛素脂质体的制备：旋转蒸发法制备大豆卵磷脂薄膜(卵磷脂25mg，胆固醇5mg)，旋转蒸发时控制温度为45℃，之后将含有胰岛素(1mg)的三乙醇胺盐酸缓冲液(15mL)倒入薄膜；探头式超声仪器超声10分钟，再次置于旋转蒸发仪上旋转1小时得到相应的脂质体凝胶溶液即得，使用时稀释相应的倍数即可。其中，步骤(2)为实施例1a。

(3)胰岛素柔性脂质体的制备：旋转蒸发法制备大豆卵磷脂薄膜(卵磷脂25mg，胆固醇5mg)，旋转蒸发时控制温度为45℃，之后将含有胰岛素(1mg)、胆酸钠(1mg)的三乙醇胺盐酸缓冲液(15mL)倒入薄膜；探头式超声仪器超声10分钟，再次置于旋转蒸发仪上旋转1小时得到相应的脂质体凝胶溶液即得，使用时稀释相应的倍数即可。其中，步骤(3)为实施例1b。

表1脂质体的基本性能

类别	粒径(nm)	Zeta电位(mv)	载药率(％)	包封率(％)	回收率
						普通脂质体	152.9±10.4	-34.6±3.7	80.21±2.6	73.53±3.2	99.9±1.8
柔性脂质体	104.6±13.7	-38.8±2.2	81.56±3.1	73.53±3.2	99.1±1.6

实施例2

大鼠皮肤的收集以及体外透皮实验。

(1)随机选取10只SD大鼠，大鼠体重为130-150g，大鼠买来后适应性喂养2天后处死，剥离大鼠皮，专门收集大鼠腹部皮肤后，剔除表面脂肪组织，最后至于-80摄氏度冰箱保存。

(2)取大鼠皮肤至于透皮仪上，给予不同组别相应的曲酸溶液(质量分数为0.5％、1.0％、1.5％以及2.0％)处理，给予胰岛素脂质体500ug(实施例1a中的胰岛素脂质体)涂布，另选取实施例1a中的普通脂质体涂于不经曲酸处理的大鼠皮肤，取实施例1b中的柔性脂质体涂于不经曲酸处理的大鼠皮肤，测试大鼠透皮量，并与普通脂质体和柔性脂质体比较，如图2所示。其中，普通脂质体和柔性脂质体的性能参数如表1所示。

实施例3

胰岛素脂质体的体内降糖观察。

(1)2型糖尿病大鼠动物模型的建立，给予高脂饲料喂食6个月建立2型糖尿病大鼠模型，高脂饲料由10％的猪油、18.9％的蛋白粉，70％的普通饲料、1％的胆固醇以及0.1％的胆酸钠构成。

(2)实验开始时推掉大鼠表面毛发，给予不同浓度的(质量分数为0.5％、1.0％、1.5％以及2.0％)曲酸处理后，涂布胰岛素脂质体(实施例1a中的胰岛素脂质体)，另选取实施例1a中的普通脂质体涂于不经曲酸处理的大鼠皮肤，取实施例1b中的柔性脂质体涂于不经曲酸处理的大鼠皮肤，分别于第0h、1h、2h、3h、4h、5h、6h，尾静脉取血，用三诺血糖仪进行血糖测定，观察大鼠降糖特点，如图3所示。

Claims

1.一种胰岛素脂质体透皮促进剂，其特征在于，成分包括：曲酸以及磷酸盐-吐温20缓冲液PBS-T；促进剂中曲酸的质量浓度为0.5％～2％。

2.一种胰岛素脂质体透皮促进剂的制备方法，包括：

3.根据权利要求2所述的一种胰岛素脂质体透皮促进剂的制备方法，其特征在于，所述胰岛素脂质体包括：基本脂质体、柔性脂质体和模式药物；其中，基本脂质体包括卵磷脂和胆固醇，柔性脂质体为卵磷脂、胆固醇和胆酸钠，模式药物为胰岛素。

4.根据权利要求2所述的一种胰岛素脂质体透皮促进剂的制备方法，其特征在于，所述胰岛素脂质体的粒径为500nm。

5.根据权利要求2所述的一种胰岛素脂质体透皮促进剂的制备方法，其特征在于，所述震荡的时间为5分钟。

6.根据权利要求2所述的一种胰岛素脂质体透皮促进剂的制备方法，其特征在于，所述促进剂中曲酸的质量浓度为1％。