CN104840665A

CN104840665A - 一种防治急性脑血液循环障碍的药物组合物及其应用

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Publication number: CN104840665A
Application number: CN201510342592.XA
Authority: CN
Inventors: 强红枫
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2015-06-19
Filing date: 2015-06-19
Publication date: 2015-08-19

Abstract

本发明公开了一种防治急性脑血液循环障碍的药物组合物及其应用，该药物组合物可以是片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液，包含中药提取物和药剂学上可接受的辅料，该中药提取物由如下重量份的中药材原料制备而成：桑叶11-20份、丝瓜络23-31份、冬瓜皮18-30份、雪胆7-11份、瞿麦18-30份、决明子18-30份、灯心草6-9份、荸荠6-9份。本发明药物组合物可改善血管性痴呆模型大鼠的行为学及酶学变化，提示可用于防治急性脑血液循环障碍性疾病。

Description

一种防治急性脑血液循环障碍的药物组合物及其应用

技术领域

本发明属于中药提取技术领域，具体而言，涉及一种防治急性脑血液循环障碍的药物组合物及其应用。

背景技术

急性脑血液循环障碍性疾病，指患有脑血管疾病的患者，因各种诱发因素引起脑内动脉狭窄，闭塞或破裂，而造成急性脑血液循环障碍。如脑卒中(Stroke)，临床上表现为一过性或永久性脑功能障碍的症状和体征，其特点是起病突然，病程起伏，其中脑血管缺血性现象是血管性痴呆的主要致病因素。由于脑卒中发病率与日俱增，被当今医学界列为重点研究对象，并被认为是唯一可以预防的痴呆类型。因此，积极开展血管性痴呆的基础与药物开发研究意义重大。

发明内容

本发明的目的在于提供一种防治急性脑血液循环障碍的药物组合物及其应用。发明人以局灶性缺血再灌注方法复制与人类发病机制相类似的血管性痴呆大鼠模型，研究本发明药物对其行为学及酶学的影响，结果显示其可改善血管性痴呆模型大鼠的行为学及酶学变化，可用于防治急性脑血液循环障碍性疾病。

为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验研究并不懈探索，最终获得了如下技术方案：

一种防治急性脑血液循环障碍的药物组合物，包含中药提取物和药剂学上可接受的辅料，该中药提取物由如下重量份的中药材原料制备而成：桑叶11-20份、丝瓜络23-31份、冬瓜皮18-30份、雪胆7-11份、瞿麦18-30份、决明子18-30份、灯心草6-9份、荸荠6-9份。

进一步优选地，如上所述的防治急性脑血液循环障碍的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而成：桑叶14-16份、丝瓜络25-27份、冬瓜皮22-26份、雪胆8-10份、瞿麦22-26份、决明子22-26份、灯心草7-9份、荸荠7-9份。

在本发明的一个最优选的实施例中，如上所述的防治急性脑血液循环障碍的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而成：桑叶15份、丝瓜络26份、冬瓜皮24份、雪胆9份、瞿麦24份、决明子24份、灯心草8份、荸荠8份。

需要说明的是，本发明在制备过程中所采用的中药材原料具有如下来源：桑叶选用桑科植物桑Morus alba L.的干燥叶。丝瓜络选用葫芦科植物丝瓜Luffa cylindrica （L.）Roem.的干燥成熟果实的维管束。冬瓜皮选用葫芦科植物冬瓜Benincasa hispida （THunb.）Cogn.的干燥外层果皮。雪胆选用葫芦科雪胆属植物雪胆Hemsleya amabilis Diels的干燥块根。瞿麦选用石竹科石竹属植物瞿麦Dianthus superbus L.的干燥地上部分。决明子选用为豆科植物决明Cassia obtusifolia L.的干燥成熟种子。灯心草选用灯心草科植物灯心草 Juncus effusus L. 的干燥茎髓。荸荠选用莎草科荸荠属植物荸荠Eleocharis dulcis （Burm. f.）Trin. ex Henschel的干燥球茎。

本发明还提供了一种如上所述中药提取物的制备方法，该方法包括如下步骤：按重量比称取各中药材原料，合并，以90-95%乙醇加热回流提取，过滤提取液，所得滤液经回收乙醇后浓缩至稠膏，在55-60℃的温度下烘干，得中药提取物。

发明人以局灶性缺血再灌注方法复制与人类发病机制相类似的血管性痴呆大鼠模型，复制模型后大鼠神经功能缺失评分明显升高，穿梭箱实验中大鼠AAR次数减少、PAR电击时间延长，水迷宫实验中大鼠寻台潜伏期延长，提示模型复制成功。

穿梭箱实验是通过条件刺激，测试大鼠的主动回避反应，主要反映大鼠的非陈述记忆能力情况，从而评定大鼠的注意力、记忆力和执行能力有无下降，可用于学习及记忆保持能力的测定。本发明研究结果表明，在复制模型前给予本发明药物后，大鼠的AAR次数增加、PAR电击时间缩短，提示该药可提高模型大鼠主动回避能力。

水迷宫实验是英国心理学家Morris于20世纪80年代初 (1981)设计并应用于脑学习记忆机制研究的一种实验手段，其在痴呆研究中的应用非常普遍，主要反映大鼠的空间学习能力。本发明研究结果表明，在复制模型前给予本发明药物后，大鼠的寻台潜伏期缩短，与模型组比较差异有统计学意义。

一氧化氮作为一种自由基性质的气体，是以精氨酸为底物，在一氧化氮合酶催化下产生的具有神经毒性作用。过氧化脂酶是体内细胞膜性结构中的多介不饱和脂肪酸受到氧自由基的作用而生成的过氧化脂质，其聚集在体表的细胞膜上的同时也侵犯体内各脏器，使机体发生多种病变。本发明研究结果表明，在复制模型前给予本发明药物后，大鼠一氧化氮、过氧化脂酶含量均明显减少，与模型组比较差异有统计学意义，这提示本发明药物可提高模型大鼠酶活力。

综上，本发明药物组合物可改善血管性痴呆模型大鼠的行为学及酶学变化，提示可用于防治急性脑血液循环障碍性疾病。

具体实施方式

以下是本发明中药提取物的制备实施例，并通过动物试验例的形式对本发明的上述技术效果再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1 中药提取物的制备

称取桑叶150g、丝瓜络260g、冬瓜皮240g、雪胆90g、瞿麦240g、决明子240g、灯心草80g和荸荠80g，适当剪碎，加95%乙醇10L，加热回流提取2次(每次2.5h)，合并提取液，过滤，滤液经回收乙醇并浓缩至稠膏，至真空干燥箱中(60℃)烘干，粉碎，过100目筛，得中药提取物。

实施例2 中药提取物的制备

称取桑叶150g、丝瓜络260g、冬瓜皮240g、雪胆90g、瞿麦240g、决明子240g、灯心草80g和荸荠80g，适当剪碎，加90%乙醇11L，加热回流提取2次(每次3h)，合并提取液，过滤，滤液经回收乙醇并浓缩至稠膏，至真空干燥箱中(60℃)烘干，粉碎，过100目筛，得中药提取物。

实施例3 中药提取物对血管性痴呆模型大鼠的影响试验

清洁级SD大鼠52只，雌雄各半，体质量280-320g，按如下方法复制血管性痴呆模型：术前大鼠禁食12h，自由饮水。腹腔注射水合氯醛(350mg/kg)麻醉大鼠，暴露大鼠左侧颈动脉鞘，将4-0号外科尼龙单线(头端经砂纸磨平滑后，覆以0.01％多聚左旋赖氨酸)经颈外动脉插入颈内动脉，过颈动脉分叉处继续进线约18-20mm，稍感阻力时停止，说明线栓已经到手术部位，随后分离颈外动脉并结扎其残端固定线栓，栓塞2h后即再灌注24h，缝合伤口。假手术大鼠仅作分离左侧颈动脉，而不进行栓塞。术后大鼠切口严格以络合碘消毒，注射青霉素(4万U/只)抗炎。手术期间以红外线恒温灯维持大鼠体温在(37±0.5)℃。术后48 h，大鼠苏醒后进行神经功能缺失评分：0分，无明显神经损伤症状；1分，不能完全伸展对侧前爪；2分，行走时向对侧旋转；3分，行走时向对侧倾倒；4分，不能自发行走，意识丧失。1～3分者为有效模型。筛选有效模型大鼠40只，随机均分为四组，即假手术组(等容生理盐水)、模型对照组(等容生理盐水)与提取物高、低剂量组(给予实施例1制备的提取物干粉，剂量分别为700、350mg/kg)，于术前48h灌胃给药，每8h给药1次，连续7次。给药结束后，依次进行如下实验：

（1）穿梭箱实验:穿梭箱为一封闭的长方形盒子(30cm×10cm×20cm)，顶部有蜂鸣器，底部平行排列铜栅，间隔0.5cm，铜栅可以通电。初始设定电刺激(1mA)时间为15s，蜂鸣时间为5s，间隔时间为15s。将大鼠放入穿梭箱适应3min，给予蜂鸣刺激5s，然后给予电刺激。主动逃避(AAR)后，相应的蜂鸣声结束，被动逃避(PAR)时相应的电击结束。间歇15s，反复循环直到设定20次。记录PAR、AAR次数以及被电击时间。训练4d后，第5天正式测试，电击强度不变，以在蜂鸣5s内完成穿梭的时间为AAR，在电击下完成穿梭的时间为PAR时间。记录AAR次数、PAR电击时间。

通过表1的试验结果可以看出，与假手术组比较，模型组大鼠AAR次数减少，PAR电击时间延长，差异有统计学意义(P＜0.01)；与模型组比较，提取物低、高剂量组大鼠AAR次数增加、PAR电击时间缩短，差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。

表1 各组穿梭箱实验结果比较

模型对照组与假手术组比较，^▼ P＜0.05，^▼▼ P＜0.01；

治疗组与模型对照组比较，^★ P＜0.05，^★★ P＜0.01。

（2）水迷宫实验:水迷宫实验在完成穿梭箱实验后进行。水迷宫为一圆形水池，水池内放入奶粉使之成为乳白色，水温恒定(24±1)℃。平台位于水下2cm，将每只大鼠头部染黑，第1天于象限边1/2弧度处将大鼠头朝池壁入水，120s未找到平台者，将其引至平台；第2～4天为训练，每天上下午各训练4次，每次选择不同的入水点入水；第5天开始正式测试，撤去平台，任意将大鼠从最后一次训练时的方位入水，电脑记录大鼠第1次跨越平台的时间，即为寻台潜伏期(超过120s以120s计)。

通过表2的试验结果可以看出，与假手术组比较，模型组大鼠寻台潜伏期延长，差异有统计学意义(P＜0.01)；与模型组比较，提取物低、高剂量组大鼠寻台潜伏期缩短，差异有统计学意义(P＜0.01)。

表2 各组大鼠水迷宫实验结果比较

分组	样本量（只）	寻台潜伏期（s）
			假手术组	10	12.50±3.04
模型对照组	10	38.27±2.45^▼▼
			提取物低剂量组	10	25.33±4.37^★★
提取物高剂量组	10	17.68±3.32^★★

模型对照组与假手术组比较，^▼ P＜0.05，^▼▼ P＜0.01；

治疗组与模型对照组比较，^★ P＜0.05，^★★ P＜0.01。

(3)生化指标的测定:行为学实验结束后，腹腔注射3.5%水合氯醛麻醉大鼠，腹主动脉取血于冰台上快速断头取脑组织，分离脑皮质和海马，称质量。冰生理盐水中研磨匀浆脑皮质，静置，4℃下以离心半径8cm、3000r/min离心10 min，取上清液，制备10%的脑皮质生理盐水匀浆，分别测定定一氧化氮、过氧化脂酶的含量。

通过表3的试验结果可以看出，与假手术组比较，模型组大鼠一氧化氮和过氧化脂酶含量增加，差异有统计学意义(P＜0.01)；与模型组比较，提取物低、高剂量组的一氧化氮和过氧化脂酶含量减少，差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。

表3 各组大鼠脑组织NO、LPO含量比较

模型对照组与假手术组比较，^▼ P＜0.05，^▼▼ P＜0.01；

治疗组与模型对照组比较，^★ P＜0.05，^★★ P＜0.01。

Claims

1.一种防治急性脑血液循环障碍的药物组合物，包含中药提取物和药剂学上可接受的辅料，其特征在于所述的中药提取物由如下重量份的中药材原料制备而成：桑叶11-20份、丝瓜络23-31份、冬瓜皮18-30份、雪胆7-11份、瞿麦18-30份、决明子18-30份、灯心草6-9份、荸荠6-9份。

2.根据权利要求1所述的防治急性脑血液循环障碍的药物组合物，其特征在于所述的中药提取物由如下重量份的中药材原料制备而成：桑叶14-16份、丝瓜络25-27份、冬瓜皮22-26份、雪胆8-10份、瞿麦22-26份、决明子22-26份、灯心草7-9份、荸荠7-9份。

3.根据权利要求2所述的防治急性脑血液循环障碍的药物组合物，其特征在于所述的中药提取物由如下重量份的中药材原料制备而成：桑叶15份、丝瓜络26份、冬瓜皮24份、雪胆9份、瞿麦24份、决明子24份、灯心草8份、荸荠8份。

4.一种根据权利要求1或2或3所述的中药提取物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：按重量比称取各中药材原料，合并，以90-95%乙醇加热回流提取，过滤提取液，所得滤液经回收乙醇后浓缩至稠膏，在55-60℃的温度下烘干，得中药提取物。

5.权利要求1或2或3所述的中药提取物在制备防治急性脑血液循环障碍性疾病的药物中的应用。