CN104840613A - 一种治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物及其制备方法和用途,该药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而得:牵牛子9-17份、使君子9-17份、芫花2-3份、桂枝7-11份、青皮7-11份、乌梅10-15份、白术7-11份、栝楼皮9-12份;制备方法为:取牵牛子和使君子,用乙醇溶液回流提取;剩余药材加水煎煮提取,然后与前述乙醇提取液混合静置,滤液浓缩并干燥,所得提取物对小鼠原发性泡状棘球蚴病有显著的治疗作用。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,具体而言,涉及一种治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物及其制备方法和用途。
背景技术
泡状棘球蚴病是由泡状棘球蚴感染导致的可能致命人兽共患病。目前临床上使用甲苯咪唑和阿苯达唑等苯并咪唑类药物治疗泡状棘球蚴病,该类药物成功地抑制了部分患者泡状棘球蚴的生长及复发,延长了他们的寿命并使术后的生存质量得到明显改善。据报道统计苯并咪唑类药物的临床治疗成功率约55 %到90 %不等(Hemphill A ,Spicher M,Stadelmann B,et al. Innovative chemotherapeutical treatment options for alveolar and cystic echinococcosis[J] .Parasitology ,2007 ,34 (12) :1657-1670.)。但是,仍然有失败的病例被报道,原因主要为该类药物严重的副作用如肝脏毒性等而导致治疗的中断(Ishizu H,Uchino J,Sato N,et al. Effect of albendazole on recurrent and residual alveolar echinococcosis of the liver after surgery[J] .Hepatology ,1997 ,25 :528-531 .)。在所有病例中约有16%的病例在得到苯并咪唑类药物治疗后疾病仍有进行性的加重;在部分患者体内苯并咪唑类药物没有体现抗寄生虫作用,在治疗停止后寄生虫复发生长(Procha zkova A ,Chouki M ,Theurillat R,et al .Therapeutic drug monitoring of albendazole; determination of albendazole,alendazole sulfoxide and albendazole sulfone in human plasma using nonaqueous capillary electrophoresis[ J] .Electrophoresis ,2000 ,21 :729-736 .)。对于有些患者,尤其是无法进行外科手术治疗的患者,将终身服用药物以控制感染加重或预防复发。因此,研究新的治疗方法显得尤为重要。
发明内容
基于中医药在减毒增效方面的优势,本发明的目的在于通过对中药方剂进行深入研究,提供一种治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物及其制备方法和用途。
为了实现本发明的目的,发明人通过大量试验研究并不懈探索,最终获得了如下技术方案:
一种治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物,其中,所述的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而得:牵牛子9-17份、使君子9-17份、芫花2-3份、桂枝7-11份、青皮7-11份、乌梅10-15份、白术7-11份、栝楼皮9-12份。
进一步地,本发明的目的还可以这样实现:所述治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物,其中,所述的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而得:牵牛子11-14份、使君子11-14份、芫花2-3份、桂枝8-10份、青皮8-10份、乌梅11-13份、白术8-10份、栝楼皮10-12份。
进一步地,本发明的目的还可以这样实现:所述治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物,其中,所述的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而得:牵牛子12份、使君子12份、芫花3份、桂枝9份、青皮9份、乌梅12份、白术9份、栝楼皮11份。
一种治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物的制备方法,该方法包括如下步骤:
(1)按重量份分别称取牵牛子9-17份、使君子9-17份、芫花2-3份、桂枝7-11份、青皮7-11份、乌梅10-15份、白术7-11份、栝楼皮9-12份,备用;
(2)取牵牛子、使君子粉碎,用体积分数90%-95%的乙醇溶液回流提取1-4次,每次0.5-2h,过滤,合并乙醇提取液;
(3)取芫花、桂枝、青皮、乌梅、白术和栝楼皮,合并,粉碎,加水煎煮1-4次,每次1-2h,合并煎液;
(4)将步骤(3)所得煎液减压浓缩至相对密度为1.10-1.20的浸膏,倾入步骤(2)得到的全部乙醇提取液,搅拌,静置12-48小时,过滤,滤液减压回收乙醇并浓缩,干燥,即得。
按照中药领域的常规制剂工艺,本发明治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物可以被制成口服制剂,包括口服液、片剂、胶囊剂、颗粒剂,等等。
需要说明的是,本发明采用的中药材原料的来源如下:牵牛子选用旋花科植物裂叶牵牛Pharbitis nil (L.)Choisy的干燥成熟种子。使君子选用使君子科植物使君子Quisqualis indica L.的干燥成熟果实。芫花选用瑞香科植物芫花Daphne genkwa Sieb. et Zucc.的干燥花蕾。桂枝选用樟科植物肉桂 Cinnamomum cassia Presl的干燥嫩枝。青皮选用芸香科植物橘Citrus reticulata Blanco的干燥幼果的果皮。乌梅选用蔷薇科植物梅Prunus mume (Sieh.)Sieb .et Zucc. 的干燥近成熟果实。白术选用菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根茎。栝楼皮选用葫芦科植物中华栝楼Trichosanthes kiarlowii Ma-xim. T. rosthornii Harms的果皮。
研究表明,机体感染棘球蚴后,细胞因子作为一种免疫调节剂,在抗感染中可促进免疫系统发挥抗感染作用,也可引起免疫病理损伤。IL-2是重要的炎症和免疫反应介质,参与多种感染性疾病的免疫反应,IL-2在肿瘤发生和寄生虫感染中是由抗原诱导活化的CD4+Th1 细胞分泌,具有加强宿主免疫力、抑制肿瘤和寄生虫生长的作用,其含量取决于靶细胞上mIL-2R(白介素2膜受体)的表达,当mIL-2R 高表达时,IL-2 含量低,反之则高。另外,IL-4是由Th2 细胞分泌的细胞因子,IL-4 的增加提示体液免疫亢进引起的机体损伤,该结果反映了棘球蚴病中Th1/T h2 细胞失衡,体液免疫功能亢进,从而造成以IgE 合成增加并由此以超敏反应为核心的免疫病理损伤。IL-2 含量升高同时又可通过分泌INF-γ来抑制Th2 细胞分泌IL-4,IL-4 水平降低提示体液免疫亢进引起的机体损伤得到减轻,同时也表明小鼠的体液免疫功能得到恢复。IL-4 可调节抗体IgE 的合成。本发明通过口服泡状棘球蚴虫卵的方式建立原发性泡状棘球蚴病小鼠模型,建模2个月后进行药物治疗,药物经口灌胃,疗程持续35d后检测各组小鼠泡状棘球蚴囊湿重及病理改变并检测血清IL-2、IL-4 、TNF-α和Ig-E的含量。实验中药物治疗组小鼠血清IL-2含量高于模型对照组,说明经本发明药物治疗后,泡状棘球蚴病小鼠的免疫力提高,Th1细胞的保护性免疫被激活。另外,药物治疗组小鼠血清IL-4 和IgE 均降低,与模型对照组比较均有明显的统计学意义,证明超敏反应被抑制,免疫状况有所改善,预示着本发明药物组合物对小鼠原发性泡状棘球蚴病有显著的治疗作用。
具体实施方式
以下是本发明的具体实施例,对本发明的技术方案做进一步作描述,但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。
实施例1:中药干膏粉的制备
(1)称取牵牛子1.2kg、使君子1.2kg,合并,粉碎,用体积分数95%的乙醇溶液提取3次,第一次用药材总量约12倍的乙醇溶液回流提取2h,第二次用药材总量约10倍的乙醇溶液回流提取1.5h,四层纱布过滤,合并乙醇提取液;
(2)称取芫花0.3kg、桂枝0.9kg、青皮0.9kg、乌梅1.2kg、白术0.9kg、栝楼皮1.1kg,合并,粉碎,加水煎煮2次,第一次加药材总量约10倍的纯化水,煎煮1.5h,第二次加药材总量约8倍的纯化水,煎煮1h,合并煎液;
(3)在0.07MPa的条件下减压浓缩步骤(2)的煎液至相对密度为1.10(65℃)的浸膏,然后倾入步骤(1)得到的乙醇提取液,搅拌,静置24小时后四层纱布过滤,滤液减压回收乙醇并浓缩成膏状,干燥,粉碎过100目筛,得到提取物干膏粉。
实施例2:中药干膏粉对原发性泡状棘球蚴病大鼠的影响试验
昆明种雌性小鼠,体重18-22g。随机取出12只作为空白对照组,其余小鼠用灌胃100mL泡状棘球蚴虫卵(储存浓度:2000虫卵/1mL PBS)的方式建立原发性泡球蚴感染模型。将模型小鼠随机分为药物治疗组和模型对照组,每组12只。原发性泡球蚴感染小鼠模型建立后2个月时给予药物,试验药物剂量标准为: 以小鼠体质量为基准,灌胃给予实施例1制备的中药干膏粉618.2mg/kg,1次/d,连续治疗35d。模型对照组和空白对照组均给予同体积蒸馏水,常规方法饲养。
实验小鼠治疗35d后,于第36d摘眼球取血,离心,取血清,应用放射免疫法测血清IL-2、IL-4、TNF-α及Ig-E。同时,摘取腹腔全部泡状棘球蚴囊称重,并计算抑囊率[抑囊率=模型对照组泡状棘球蚴囊湿重-用药组泡状棘球蚴囊湿重)/模型对照组泡状棘球蚴囊湿重]。另外,分别取从模型小鼠腹腔中取出棘球蚴组织,10%甲醛溶液固定,石蜡包埋,切片,HE染色,显微镜下观察虫囊角质层、生发膜、育囊及原头蚴生长变化情况。试验结果如下:
(1)通过表1的试验统计结果可以看出,治疗35d后,模型对照组与空白对照组比较IL-2含量明显降低,经中药提取物治疗后显著提高(P<0.01),治疗组与空白对照组比较无统计学意义(P>0.05);模型对照组与空白对照组比较IL-4含量明显升高,经中药提取物治疗后明显降低(P<0.01),且治疗组与空白对照组比较无统计学意义(P>0.05);血清IgE含量的变化、各组间比较与IL-4 情况完全相同;TNF-α含量治疗组和模型对照组与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01),中药治疗组与模型对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。
表1:治疗后各组小鼠血清IL-2、IL-4、TNF-α和Ig-E含量比较
续表1:治疗后各组小鼠血清IL-2、IL-4、TNF-α和Ig-E含量比较
与正常对照组比较,* P<0.05;** P<0.01;
药物组与模型对照组比较,# P<0.05,## P<0.01。
(2)通过表2的试验统计结果可以看出,药物治疗组囊湿重较对照组明显减少,经方差分析其差异有极显著性统计学意义(P<0.01)。
表2:药物治疗后泡状棘球蚴湿重及抑制率变化
与模型对照组比较,* P<0.05,** P<0.01。
(3)泡球蚴的病理组织学光镜观察结果显示,模型对照组泡球蚴组织基本正常,角质层、生发层清晰,多数见育囊或芽生结构,育囊内有多少不等的原头蚴。药物治疗组多数泡球蚴囊泡发生实变或变性坏死,中心钙化,结构失常,角质层变薄或消失,生发层变性、断裂甚至脱落,生发层细胞核固缩、溶解或消失,很少见育囊及原头蚴。
Claims (5)
1.一种治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物,其特征在于:所述的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而得:牵牛子9-17份、使君子9-17份、芫花2-3份、桂枝7-11份、青皮7-11份、乌梅10-15份、白术7-11份、栝楼皮9-12份。
2.根据权利要求1所述治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物,其特征在于:所述的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而得:牵牛子11-14份、使君子11-14份、芫花2-3份、桂枝8-10份、青皮8-10份、乌梅11-13份、白术8-10份、栝楼皮10-12份。
3.根据权利要求2所述治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物,其特征在于:所述的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而得:牵牛子12份、使君子12份、芫花3份、桂枝9份、青皮9份、乌梅12份、白术9份、栝楼皮11份。
4.一种治疗原发性泡状棘球蚴病的药物组合物的制备方法,该方法包括如下步骤:
(1)按重量份分别称取牵牛子9-17份、使君子9-17份、芫花2-3份、桂枝7-11份、青皮7-11份、乌梅10-15份、白术7-11份、栝楼皮9-12份,备用;
(2)取牵牛子、使君子粉碎,用体积分数90%-95%的乙醇溶液回流提取1-4次,每次0.5-2h,过滤,合并乙醇提取液;
(3)取芫花、桂枝、青皮、乌梅、白术和栝楼皮,合并,粉碎,加水煎煮1-4次,每次1-2h,合并煎液;
(4)将步骤(3)所得煎液减压浓缩至相对密度为1.10-1.20的浸膏,倾入步骤(2)得到的全部乙醇提取液,搅拌,静置12-48小时,过滤,滤液减压回收乙醇并浓缩,干燥,即得。
5.权利要求1-3任一项所述的中药材原料组合物在制备治疗原发性泡状棘球蚴病的药物中的用途。
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CN105582007A (zh) * | 2016-01-22 | 2016-05-18 | 兰州大学 | 蛇床子素在制备用于治疗包虫病的药物中的新用途 |
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Non-Patent Citations (2)
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