CN104838250A - 通过质谱流式细胞术的细胞分析 - Google Patents

Abstract

互相排斥的基于细胞的分析技术的联合可以被应用于同一细胞组用于分析。同一细胞组可以被制备用于被每种技术分析，产生靶向用于质谱流式细胞术分析的候选细胞。此配置允许每种技术之间的信息的关联以同一细胞组产生多维细胞信息的矩阵。

Description

通过质谱流式细胞术的细胞分析

领域

本发明涉及用于通过质谱流式细胞术(mass cytometry)的细胞分析的设备和方法。

引言

细胞生物学研究的一个领域涉及通过鉴定指示细胞功能、细胞处理或由于某些反应的响应的生物特性询问细胞样品。这些特性的一些可通过传统的基于细胞的成像技术被观察到，所述基于细胞的成像技术例如，用于显现细胞的结构特征的外观的显微术或通过利用发光或放射性检测在免疫细胞化学和免疫组织化学中显现标志物。

可选地，使用质谱流式细胞术的单细胞分析的技术可以被应用于以金属缀合的抗体和金属插入剂标记，并且单独地被引导进入电感耦合等离子体(ICP)离子源的细胞，在那里细胞被汽化、雾化和离子化用于同时的元素分析。作为大量可区别的元素标签以及通过质谱流式细胞仪同时检测和定量的结果，通过此多重的技术确定的细胞特性可以被用于扩展细胞分析的维度，超过传统的基于细胞的成像或显现技术的能力。

但是，基于细胞的成像/显现技术和质谱流式细胞术技术需要细胞样品的分离的和专用的装置用于其分析。因此，联合基于离散样品的多种独立的细胞分析技术的结果以提高细胞信息的维度，可遭受固有的不确定性。

概述

鉴于前述和根据本发明的教导，申请人认识到，通过利用每种技术基于不同过程执行其询问的事实的优势，细胞组的多维分析可以通过技术的联合来执行。细胞组可以根据每种技术需要的条件最初地被准备，使得根据每种感兴趣的特性，每个过程可以被累积地应用于同一细胞组，而没有来自由每个过程施加的条件的实质的干扰。可以按倾向于保持用于每种随后的技术的条件，最终由用于最终研究的质谱流式细胞术检测器执行询问的次序选择询问过程的顺序。激光消融质谱流式细胞术过程可以被配置以仅仅靶向以前已经被鉴定为具有感兴趣的特性的候选细胞。对同一细胞组可以建立来自对每一候选细胞的质谱流式细胞术分析的结果与对应的感兴趣的特性之间的直接关联。

本发明的教导的另一方面是一种用于质谱流式细胞术的细胞分析的方法。该方法包括提供以多于一种有区别的元素标签标记的细胞组以及通过识别具有感兴趣的特性的候选细胞的位置，在所述细胞组中选择候选细胞。根据候选细胞在所述细胞组中的位置记录候选细胞的位置，使得当至少一束激光脉冲被导引至在记录的位置处的候选细胞上时，产生至少一束激光脉冲的每一束的离散羽流。每一离散羽流包括多于一种有区别的元素标签。该方法还包括将每一离散羽流引导进入电感耦合等离子体并且产生与多于一种有区别的元素标签的每一种对应的元素离子的组，其通过质谱流式细胞术可以被同时地对每一离散羽流检测。将检测的元素离子与感兴趣的特性关联。

本发明的教导的又另一方面是加元素标签的细胞分析系统。该系统具有被配置以识别候选细胞的位置的至少一个询问器以及被配置格式以记录候选细胞的位置的数据源。激光消融系统与数据源接口，其中激光消融系统被配置以在候选细胞的位置导引至少一束激光脉冲。该系统还包括与激光消融系统耦合的质谱流式细胞仪，其中质谱流式细胞仪被配置以检测与候选细胞缔合的元素标签。

附图

本领域中的技术人员将理解，下面描述的附图是仅为了阐明的目的。附图不预期以任何方式限制申请人的教导的范围。在随附的附图中，其中同样的标号表明同样的部分：

图1是根据本发明的教导的一个实施方案的系统和过程的图形表示；

图1A是在图1中阐明的系统的示意图；

图2是根据本发明的教导的包含多维细胞信息的示例性矩阵；

图3是根据图1的实施方案的基底(base)的近视图；和

图4是根据本发明的教导的ICP离子源的实施方案的示意图。

多种实施方案的描述

应该理解的是，提及多种元素与本发明的教导结合使用的短语“一个(a)”或“一个(an)”包含“一个或更多”或“至少一个”，除非上下文另外清楚地表明。首先对图1进行参考，其显示了细胞分析系统的图形表示，通常由标号10指示。细胞分析系统10包括与质谱流式细胞仪16的电感耦合等离子体(ICP)离子源14耦合的基底(base)12。通常，ICP离子源14可被认为是质谱流式细胞仪16的整体构件，但是为清楚起见，ICP离子源14被与质谱流式细胞仪16分离地展示。基底12，例如，玻璃显微镜载片，提供了可以被配置以持有细胞组18的表面，候选细胞20可以从细胞组18被鉴定，或已经被询问器19鉴定，为具有感兴趣的特性以及随后用于通过质谱流式细胞仪16分析。细胞分析系统10还包括激光消融系统23，用于提供导向所述细胞组18中在其位置22的候选细胞20的至少一束激光脉冲24。质谱流式细胞仪16可以包括用于控制激光消融系统以及用于产生对应的元素标签数据30的控制系统34。此系统的示意图被展示在图1A中。

通常，在质谱流式细胞术中，为了在单一细胞中同时的多重参数分析，细胞组18可以被多于一种有区别的元素标签Tn标记。有区别的元素标签Tn可以典型地选自包括过渡金属的组，如作为US2010/0144056公布的，被转让给本发明的教导的受让人的共同未决的美国专利申请号12/513,011中描述的。为方便起见，Tn中的符号“n”可以是可变的以表示不同过渡金属元素或金属同位素。在多种实施方案中，例如，细胞组18可以被多于一种的亲和试剂标记，例如，在不同类型元素缀合的抗体情况下，其中每一类型抗体被一种或更多种有区别的元素标签Tn加标签。缀合至每一类型抗体的有区别的金属或元素标签Tn可以是，仅举几个例子，Gd、Nd、Tb、Eu、Gd、Dy、Ho、Sm、Er、Yb中的任何一种或其组合的金属同位素。每一类型元素缀合的抗体可以通过其有区别的元素标签Tn独特地可区别。如通常已知的，在所述细胞组20中，表示对金属缀合的抗体的亲和力的细胞可以保持被多于一种元素标签Tn标记。因此，根据通过质谱流式细胞仪16的元素分析，细胞的元素标记通过与抗体缔合的有区别的元素标签Tn被表示。

如以上注解的，本发明的教导的申请人认识到，用于检测不同感兴趣的特性的询问过程，可以根据以下的规定在以同一细胞组18的多维细胞分析中联合：a)在开始，所述细胞组展示与每一询问过程对应的感兴趣的特性或可以按照展示与每一询问过程对应的感兴趣的特性的条件制备；b)可以选择分析的顺序以维持每一感兴趣的特性的完整性用于随后的询问过程；以及c)来自每一分析的结果可以被交叉关联。因为包含元素标签的标记的细胞在由ICP离子源14离子化期间被汽化，所以质谱流式细胞术检测过程可以是多维细胞分析的最终的询问器的基础。相应地，标记的细胞组18可以经历初始的询问过程以鉴定除了与多于一种有区别的元素标签Tn缔合的那些以外的具有被视为感兴趣的特性的候选细胞20。在多种实施方案中，例如，感兴趣的特性可以是鉴定可以是活的或死的候选细胞20的活力确定(viability determination)，并且另一感兴趣的特性可以是基于在活的或死的候选细胞中固有的物理形状或物理特征。依赖于或不依赖于任一前述的感兴趣的特性的进一步的感兴趣的特性可以，例如，对应与鉴定具有某些感兴趣的蛋白的候选细胞的免疫染色技术的条件相关的其他发光的特性。因此，预期的是，在相同的或不同的候选细胞20中，每一感兴趣的特性可以由其特定的物理位置代表。尽管公开的初始询问的过程通常符合光学显微镜或荧光显微镜，其他基于细胞的成像/显现类型询问器19例如，使用电子显微镜或共聚焦显微镜的已经被考虑，且其使用可以被单独地或以其组合的方式施加。因此，对于候选细胞选择过程，初始的询问可以由被配置以鉴定具有对应的感兴趣的特性的候选细胞的至少一个询问器19执行。在候选细胞20已经被鉴定后，如可以由其坐标界定的，候选细胞20关于其在所述细胞组18中位置的位置可以针对每一感兴趣的特性单独地或以其组合的方式被记录。如在图2中展示的，在数据源21中，关于候选细胞的位置22的信息以及相应的感兴趣的特性可以以控制系统34可访问的格式被编码并且可以被制成包含细胞信息36的多维的矩阵的部分。

随后，通过访问数据源21中的信息，对于每一记录的位置22，控制系统34可以导引至少一束激光脉冲24至相应的候选细胞20上，使得以离散羽流26的形式的一些细胞材料可以被移出。通常，每一激光束可以产生一束离散羽流26，使得一系列激光脉冲可以产生一系列对应的离散羽流26。因此，对于每一离散羽流26，从候选细胞20移出的材料可以包含多于一种有区别的元素标签Tn。根据质谱流式细胞术分析，从候选细胞20检测多于一种有区别的元素标签Tn可以代表相关的亲和试剂的存在并且可以与对于候选细胞20的感兴趣的特性相关联，如在图2中示例的。

维持每个连续的羽流26的空间分离的同时，每一羽流26可以作为离散的和单独的实体被运输和被引导进入ICP离子源14。当每个离散的羽流26进入ICP离子源14时，每一元素标签Tn可以被离子化成对应的元素离子，所述对应的元素离子与每一元素标签Tn定量地相关。因为，在候选细胞20中，可以存在多于一种有区别的元素标签Tn，ICP离子源14可以对每一元素标签Tn产生元素离子的有区别的组。因此，对于每一离散羽流26，ICP离子源14可以产生元素离子28的组，在图1中一般性表示为(M⁺)。每一元素离子28的组可以根据离子的质量与电荷比(m/z)，通过质谱流式细胞仪16被检测。根据本发明的教导，质谱流式细胞仪16可以同时地检测每一类型元素离子，并且对于最小化重叠具有快速离子飞越时间(fast ion transit time)的优势，质谱流式细胞仪16可以区分源自连续的激光脉冲的元素离子组。元素标签数据30，在图1中显示为在数据的总集合32中的一系列单一数据档案，代表了从同时检测用于每一羽流26的系列的元素离子组28获得的数据。因此，对于每一激光脉冲24，细胞分析系统10可以检测并且鉴定多于一种的有区别的元素标签Tn的每一种并且产生元素标签数据30，所述元素标签数据30可以针对候选细胞的感兴趣的特性被记录。

虽然通常，单一激光脉冲24可以完全地消融候选细胞20并且产生包含多于一种有区别的元素标签Tn的羽流，可以有一些候选细胞20的情形需要一系列激光脉冲24以渗透进入细胞或通过邻近的表面，以便实现多于一种有区别的元素标签Tn的最大强度。此外，细胞谱分析(cellularprofiling)可以通过具有以时间的和空间的精度传递能量的能力的合适的激光配置被实现。大量的激光脉冲24可以被用以分辨在候选细胞20中包含的元素标签Tn。例如，在分析期间，由于每一激光脉冲24将移出标记的候选细胞20的连续的层，对应多于一种的有区别的元素标签Tn的元素离子组28可以同时地被质谱流式细胞仪16检测。每一检测的元素离子组28可以代表在每一层候选细胞20移出的材料。如以上注解的，一些离散羽流26可以不包含金属元素或一些离散羽流26可以包括多种浓度的一系列金属元素。因此，对于通过质谱流式细胞仪16执行的每个同时的测量，在集合32中的数据30可以包含基于一种或多种元素标签Tn的存在和一些例子中不存在的定性的和定量的信息。每个获得的数据30可以提供关于标记的候选细胞20的横截面或厚度特征的一条信息。

此外，可以存在其中，例如，所述细胞组18的厚度是大于平均细胞直径的情形，例如，在细胞介质存在下细胞的重叠层的情况下或在厚的组织切片或未切片的整个组织样本的情况下，如通常在图3中表明的。因此，一种或更多种鉴定的候选细胞20或候选细胞20的一部分的位置可以以距所述细胞组18的上表面或下表面一定距离被包埋。在多种实施方案中，例如，包埋的一个或更多个候选细胞20可以通过使用共聚焦显微镜技术由荧光显微镜被鉴定以提供局部的细胞结构的图像。其他用于选择候选细胞20的技术可以是基于鉴定其感兴趣的特性，可以包括，仅举几个例子，磷光、反射、吸收。因此，嵌入的一个或更多个候选细胞20的位置或局部细节可以通过例如，3维空间中的笛卡尔坐标系统(X，Y，Z)被界定，其中图3中Z轴的值表示在所述细胞组18的厚度中的深度。3维坐标可以被记录(如图2中示例的)并且被用以代表以及识别候选细胞20关于其在所述细胞组18中位置的位置。在这种情况下，当候选细胞20的位置22经历根据本发明的教导的元素标签Tn分析时，深度坐标Z可以被认为是感兴趣的特性并且可以被用以表明激光脉冲24的预期的数目，例如，为了到达包埋的候选细胞20通常可以需要的激光脉冲24的预期的数目。通过连续的激光脉冲24产生的连续的离散羽流26可以不包含元素标签Tn直到至少一束激光脉冲24到达在坐标Z处的包埋的候选细胞20。相反地，被采用以到达候选细胞20并且以产生包含元素标签Tn的羽流和检测的元素离子组28的激光脉冲的实际数目可以与记录的深度Z关联，作为交叉校准两种互相排斥的基于细胞的技术的方式。

尽管本发明的教导结合多种实施方案被描述，不预期本发明的教导被限制为这样的实施方案。相反地，本发明的教导包含多种可选物、修改和等同物，如将被本领域中那些技术人员理解的。例如，本发明的教导的申请人认识到，与元素标签Tn缀合的标记同时地，所述细胞组18可以使用条件初始地被制备以展示通过如本领域中通常已知的用于鉴定候选细胞20的成像/显现过程可检测的感兴趣的特性。如此，除了元素标签Tn缀合的亲和试剂标记以外，所述细胞组18可以被制备为带有荧光团标记的蛋白和/或荧光报告蛋白的内源表达。此外，元素标签Tn缀合的抗体可以被制备为带有发光特征以便提供由多于一种的互相排斥的基于细胞的分析技术可检测的双重特性。在多种实施方案中，例如，在怀疑具有某种功能的生物样品中，除了荧光素用于标记以外，CD34蛋白可以使用148Nd元素同位素加标签。通过荧光显微术，生物样品可以被初始地检查，并且表达CD34的候选细胞可以在玻璃显微镜载玻片上被鉴定并被分离。分离的表达CD34的候选细胞的位置可以被靶向用于根据本发明的教导通过质谱流式细胞术的元素检测。在此实例中，检测的元素离子组28可以与荧光素检测关联，作为提供定量的方式或为了证实的目的。

在多种实施方案中，记录的候选细胞20的信息包括但不限于其位置22，该信息可以是以多种数据源格式并且可以使用多种方案由控制系统34可访问。例如，所述细胞组18的视觉展示(visual representation)(比如荧光发射图像)可以被用以鉴定和代表每一候选细胞20。在此情况下，数据源21和控制系统34之间的界面可以是具有合适的视觉识别软件的光学检测系统。该软件可以被配置用于从发射图像确定候选细胞20的位置并且随后用于在候选细胞20的位置导引至少一束激光脉冲24。可选地，记录的信息可以由多种光学的机器可读的界面展现以及检索，所述界面例如，通过条形码(1D或2D)阅读器/扫描器实现的，或通过使用射频识别(RFID)或变化形式的其他界面以及其组合。此外，候选细胞20的位置连同其感兴趣的特性可以通常被记录为由控制系统34可访问的字母数字数据或可以手动地直接地进入激光消融系统的操作控制或质谱流式细胞术系统的数据。不论候选细胞的信息被从其转移自的界面格式如何，激光消融系统的配置可以被设计使得记录的信息可以提供用于在候选细胞20的位置22导引至少一束激光脉冲24的位置坐标。

在多种实施方案中，虽然基底12已经被描述为通常与显微术应用的材料需要一致的玻璃显微镜载玻片，申请人预期基底12由其它材料制成，所述其它材料例如以下的一种或组合，仅举几个例子：不锈钢、石英、陶瓷、聚四氟乙烯(PTFE)和聚醚醚酮(PEEK)。可选地，参考图3，基底12可以是可以从持有所述细胞组18的显微镜载片38中分离的支撑物或结构。例如，在光学显微术中，以多于一种有区别的元素标签Tn标记的细胞组18可被装在显微镜载片38上并且通过物镜从下方照明(对于典型的透照的光学显微术)或从上方照明(对于典型的荧光显微术)。由显微镜光学获得的图像可以被用于根据感兴趣的特性鉴定候选细胞20，所述感兴趣的特性例如物理形状或例如荧光探针的存在。鉴定的候选细胞20的位置连同其感兴趣的特性可以被记录以代表与生物样品的细胞分析相关的信息。通常，鉴定过程可以按需要重复，使得多于一种的候选细胞20可以被置于所述细胞组18中。在一种或更多种候选细胞20被鉴定后，显微镜载片38以及其内容物可被转移至用于支撑其的基底12。关于每一候选细胞20的位置的信息，例如由在所述细胞组18中以2-维的空间或3-维的空间中展示的笛卡尔坐标表示的，可以被利用以导引至少一束激光脉冲24至候选细胞20之上，用于对至少一束激光脉冲24的每一束产生离散羽流26。

本发明的教导的申请人认识到，为了每一元素标签数据30对应至少一束激光脉冲24的每一束，每一连续的羽流26与对应的离子的空间分离，在其沿着基底进入ICP离子源14之间以及在离子源14和质谱流式细胞仪16的离子检测器之间的路径行进期间，被维持。例如，典型地用于激光消融的固态激光器(例如，飞秒脉冲的激光)可以被配置以在10和100Hz之间的脉冲频率操作。在此频率范围，可每10至100msec产生羽流26。考虑到更低的限值，将要求系统10具有10msec级别的最大延迟时间。根据本发明的教导的多种实施方案，质谱流式细胞仪16特征可以是包括具有静电透镜的线性离子路径和能够平行元素离子检测的离子检测器的“流经”分析装置。在此配置中，可以实现10msec级别的延迟时间，使得元素离子(M⁺)的组可以在质谱流式细胞仪16中经历加速和通过用于同时检测。因此，可以实现分别地检测每一元素离子组28的离子检测器的可能性。

为维持质谱流式细胞仪16的上游对应的空间区别性，在基底12的激光消融位置与等离子体的入口之间的路径的配置可以被选择以最大化羽流26分离同时最小化流动湍流。在较低的限值，用于离子化之前维持每一羽流26的分离的10msec级别的延迟时间可以通过具有羽流行进的最小距离路径和相应的其加速方法被实现。通常，ICP离子源14利用如图4中表明的注射器管道42，并且载气流(未显示)可以被合适地应用以导引每一离散羽流26进入等离子体44。相应地，注射器管道42可以被配置以提供例如具有200以下雷诺数的层流几何形状或接近层流几何形状，用于接受羽流26并且用于载气与羽流26流动使得任何湍流可以被最小化。因此，在多种实施方案中，与基底12和离子源14之间的总路径以及离子源14和质谱流式细胞仪16的离子检测器之间的总路径对应的联合的延迟时间可以是在20msec和200msec之间。

此外，在多种实施方案中，基底12可以相对于ICP离子源14被放置使得对于每一羽流26的行进时间可以被最小化。例如，ICP离子源14可以被构造以包含基底12，用于提供紧密地耦合的激光-消融-ICP离子源。激光-消融-ICP离子源可以被配置带有具有用于激光脉冲24的光学入口、用于获得以及运输羽流的载气、以及用于产生元素离子组28的ICP离子源的整合的外壳(enclosure)。载气流可以被配置以在消融位置22扫除每一离散羽流26并且将每一羽流26直接传入等离子体44。

尽管在多种实施方案中，术语“细胞组”通常是关于在薄的切片的生物组织样品或未切片的组织完整样本中包含的细胞，但是本发明的教导可以被同等地应用于通常见于细胞培养物中的细胞。在多种方案中，所述细胞组18可以是细胞亚组的混合物，其每一亚组可以源自不同来源或不同生物实体。在此情况下，细胞的来源可以以感兴趣的特性之一为特征。例如，考虑到从多于一种生物实体获取的样品，其每一样品对应可以被多于一种有区别的元素标签Tn区别标记的细胞亚组。每一细胞亚组可以被合并为同一细胞组18，使得来自每一样品的细胞可以在细胞20的同一组中，共同地表达其有区别标记的元素缀合的抗体。合并的细胞组18可以被询问并且候选细胞20可以在没有候选细胞的来源的知识下，基于一些感兴趣的特性被鉴定和被选择。根据本发明的教导的元素分析后，元素标签Tn可以被检测并且对应的候选细胞20可以被鉴定为与特定的生物实体相关。相应地，感兴趣的特性与检测的元素离子24之间的关系可以被关联以确定指示该细胞亚组以及潜在地细胞的来源的感兴趣的特性。通常，本发明的教导的优势可以被应用于包括未破坏的细胞的细胞组，其中未破坏的候选细胞可以通过质谱流式细胞术被鉴定并且进一步分析其元素标签。

尽管已经被描述了努力以造成贯穿细胞分析的用于维持每一羽流26与对应的元素离子组28的空间分离的条件，但是本发明的教导的申请人认识到，一些空间扩展或重叠是可以存在的。相应地，申请人已经预期平均方法应用于两种或更多种获得的元素数据30，对从每一激光脉冲24产生的信息没有实质损失。可选地，联合每一获得的元素数据30为集合32的集成方法可以足以代表多维细胞分析的质谱流式细胞术信息部分。在多种实施方案中，例如FET的数据分析算法，可以被用于反卷积(de-convoluting)集成的数据集合32。不同形式的算法可以在分析系统10中被操作或可以在数据获取后被应用，如通常已知的。

此外，控制系统34可以被配置以用于根据本发明的教导的多重功能的目的。尽管控制系统34已被描述为与控制激光消融系统并且用于产生对应的元素标签数据30相关，典型地在逻辑控制下运行的控制系统34可以提供多种自动化水平或执行一系列反馈控制的活动，使分析系统10能够被自动化。在多种实施方案中，例如，控制系统34可以是与自动化的样品处理系统耦合的处理器驱动系统以执行询问和鉴定、信息记录和访问、激光脉冲的导引、质谱流式细胞术检测过程以及自动化地或通过使用者介入的数据关联。

Claims (20)

1.一种用于通过质谱流式细胞术细胞分析的方法，所述方法包括：

提供以多于一种有区别的元素标签(Tn)标记的细胞组(18)；

通过识别候选细胞(20)的位置，在所述细胞组(18)中选择所述候选细胞(20)，所述候选细胞(20)具有感兴趣的特性；

根据所述候选细胞(20)在所述细胞组(18)中的位置，记录所述候选细胞(20)的位置(22)；

在所述记录的位置(22)导引至少一束激光脉冲(24)至所述候选细胞(20)上并且产生所述至少一束激光脉冲(24)的每一束的离散羽流(26)，所述离散羽流(26)的每一个包括所述多于一种有区别的元素标签(Tn)；

将所述离散羽流(26)的每一个引导进入电感耦合等离子体(14)并且产生与所述多于一种有区别的元素标签(Tn)的每一个对应的元素离子(28)的组；

通过质谱流式细胞术对所述离散羽流(26)的每一个同时地检测所述元素离子(28)的组的每一个；且

使所述检测的元素离子(28)与所述感兴趣的特性关联。

2.根据权利要求1所述的方法，其中提供以多于一种有区别的元素标签(Tn)标记的细胞组(18)包括以多于一种元素缀合的抗体标记所述细胞组(18)，所述多于一种元素缀合的抗体的每一个包括一种或更多种有区别的元素标签(Tn)。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述一种或更多种有区别的元素标签(Tn)选自包括过渡金属的组。

4.根据权利要求3所述的方法，其中使所述检测的元素离子(28)与所述感兴趣的特性关联包括从所述检测的元素离子(24)产生元素标签数据(30)并且记录针对所述感兴趣的特性的所述元素标签数据。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述细胞组(18)包括多于一种细胞亚组，每种所述细胞亚组以多于一种有区别的元素标签(Tn)标记。

6.根据权利要求5所述的方法，还包括根据所述感兴趣的特性鉴定所述多于一种细胞亚组。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述感兴趣的特性通过荧光、磷光、反射、吸收、形状识别、物理特征或其组合的一种或更多种来鉴定。

8.根据权利要求4所述的方法，还包括在二维空间中表示所述候选细胞(20)在所述细胞组(18)中的所述位置(22)。

9.根据权利要求4所述的方法，还包括在三维空间中表示所述候选细胞(20)在所述细胞组(18)中的所述位置(22)。

10.根据权利要求8或权利要求9所述的方法，还包括制备具有所述感兴趣的特性的所述细胞组(18)。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述感兴趣的特性通过荧光、磷光、反射、吸收、形状识别、物理特征或其组合的一种或多种来鉴定。

12.根据权利要求10所述的方法，其中所述候选细胞(20)通过荧光发射来鉴定。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述细胞组(18)是组织样品。

14.一种用于加元素标签的细胞分析的系统，所述系统包括：

至少一个询问器(19)，所述至少一个询问器(19)被配置以识别候选细胞(20)的位置(22)；

数据源(21)，所述数据源(21)具有记录所述候选细胞(20)的所述位置(22)的格式；

激光消融系统(23)，所述激光消融系统(23)与所述数据源(21)接口，所述激光消融系统(23)被配置以在所述候选细胞(20)的所述位置(22)导引至少一束激光脉冲(24)；以及

质谱流式细胞仪(16)，所述质谱流式细胞仪(16)与所述激光消融系统(23)耦合，所述质谱流式细胞仪(16)被配置以检测与所述候选细胞(20)缔合的所述元素标签。

15.根据权利要求14所述的系统，其中所述至少一个询问器(19)被配置以识别具有感兴趣的特性的所述候选细胞的所述位置(22)并且所述数据源(21)进一步被配置格式以记录所述感兴趣的特性。

16.根据权利要求15所述的系统，还包括控制系统(34)，所述控制系统(34)被配置以使所述激光消融系统(23)与所述数据源(21)接口。

17.根据权利要求16所述的系统，其中所述控制系统(34)被配置以访问所述数据源(21)并且以在所述候选细胞的所述位置(22)导引所述至少一束激光脉冲(24)。

18.根据权利要求15所述的系统，其中所述至少一个询问器(19)选自光学显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、共聚焦显微镜以及其任何组合。

19.根据权利要求14所述的系统，其中所述数据源(21)包括选自字母数字、发射图像、条形码、射频识别(RFID)以及其任何组合的格式。

20.根据权利要求14所述的系统，其中所述质谱流式细胞仪(16)包括离子检测器以及所述候选细胞的所述位置和所述离子检测器之间界定的总路径，所述总路径被配置以使能够实现在20至200msec之间的联合的延迟时间。