CN104801246A - 一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,其特征是包括:配制液体培养基;在一个容器内的灭菌后液体培养基中加入纳米颗粒A水溶液,混匀,接入真菌菌种,在温度15~35℃、80~200转/分钟旋转振荡下培养48~72小时,形成菌丝/纳米颗粒A复合球;将复合球放入纳米颗粒B液体培养基中旋转振荡培养24~48时,形成具有核壳结构菌丝纳米复合球;将复合球用氢氧化钠水溶液浸泡12小时后再用去离子水洗涤至中性,真空冷冻干燥,即制得核壳结构菌丝纳米复合球;本发明复合球材料具有良好的生物降解性、吸附性、热稳定性和力学性能,可广泛应用于催化,放射性核素、重金属离子及染料的吸附富集分离回收、以及水处理等。
Description
技术领域
本发明属于有机、无机纳米复合材料的制备,涉及一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法。本发明制得的核壳结构菌丝纳米复合球材料集有机、无机材料等诸多优良性能于一体,具有良好的生物降解性、吸附性、热稳定性和力学性能,可广泛应用于催化,以及放射性核素、重金属离子及染料的吸附富集分离回收、水处理等化工领域。
背景技术
纳米材料由于其相对于传统材料拥有诸多的优秀特性,已经在物理、化学、材料、生物等多学科中被给予重视,而以往的纳米材料由于颗粒尺寸小,致使回收利用的技术较难,从而导致使用成本的增加,限制了其大规模的应用。为了解决这个问题,必须对其进行复合,通过将纳米颗粒负载到载体,解决纳米材料回收利用的问题。
菌丝球目前被广泛用于废水处理,其主要是利用真菌菌丝作为吸附剂,对污染物进行吸附去除。真菌菌丝是一种天然的生物质,富含蛋白质、多糖、脂类等物质,其分子结构内含有糖苷键、氢键等结合键位,也含有羟基、羧基等一些官能团。真菌菌丝作为生物质载体,相比于化学合成材料,具有成本低,来源广,环境友好等优点。开发利用微生物菌丝纳米复合材料,对于节约能源、保护生态环境等具有重要意义。现有技术中,尚未见有关核壳结构真菌菌丝纳米复合球材料的文献报道。
发明内容
本发明的目的旨在克服现有技术中的不足,提供一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法;以解决纳米颗粒实际应用中回收利用难的问题,采用发明制备核壳结构菌丝纳米复合球材料成本低、环境友好、易规模化生产。
本发明的内容是:一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,其特征是包括以下步骤:
a、配制培养基:按照每100毫升液体培养基中含葡萄糖1~6克、蛋白胨0.25~1.25克、酵母粉0.25~1.25克、余量为水的原料组分和配比,取各组分原料、混合均匀、使固体物溶解,再在压力103.4千帕蒸汽压、温度120℃的条件下维持15~20分钟进行灭菌,即制得液体培养基;取2个容器(例如:250毫升的锥形瓶),在各容器中分别加入125毫升的灭菌后液体培养基;
b、制备菌丝/纳米颗粒A复合球:在一个容器内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米颗粒A 1~10毫克的纳米颗粒A水溶液4~20毫升,混合均匀,然后接入真菌菌种(一般可以为0.05~0.2克),在温度15~35℃、80~200转/分钟旋转振荡的条件下培养48~72小时,真菌菌丝生长延伸、将液体培养基中分散的纳米颗粒A附着其表面,菌丝缠绕、包裹,形成菌丝/纳米颗粒复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝/纳米颗粒A复合球;
c、制备纳米颗粒B液体培养基:在另一个容器内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米颗粒B 1~10毫克的纳米颗粒B水溶液4~20毫升,混合均匀,制得纳米颗粒B液体培养基;
d、制备复合球材料:将菌丝/纳米颗粒A复合球放入纳米颗粒B液体培养基中,在温度15~35℃、80~200转/分钟旋转振荡的条件下培养24~48小时,形成具有核壳结构的菌丝纳米复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝纳米复合球;将菌丝纳米复合球用质量百分比浓度为0.5%的氢氧化纳水溶液浸泡12小时(氢氧化纳水溶液用量可以是能淹没菌丝纳米复合球为宜),过滤除去液体,固体物再用去离子水冲洗至中性(即pH为7),再在零下50℃、真空度1.3~13帕的条件下冷冻干燥48~72小时,即制得核壳结构菌丝纳米复合球。
本发明的内容中:步骤b和步骤c中所述纳米颗粒A与纳米颗粒B可以是纳米四氧化三铁、纳米金、纳米金棒、碳纳米管、单层氧化石墨烯纳米片、二氧化钛纳米管、单层蒙脱土纳米片、碳纤维、以及纳米碳化氮中的任一种,并且纳米颗粒A与纳米颗粒B是不同的物质(即纳米颗粒A与纳米颗粒B只要不是同一种物质即可)。
本发明的内容中:步骤a中所述葡萄糖可以替换为果糖、半乳糖或甘露糖。
本发明的内容中:步骤a中所述蛋白胨可以替换为骨肉蛋白胨、胰蛋白胨或豌豆蛋白胨。
本发明的内容中:步骤b中所述真菌菌种可以为平菇菌种、双孢蘑菇菌种、香菇菌种、面包菇菌种、红平菇菌种、鸡腿菇菌种、草菇菌种、虫草菌种等真菌菌种中的任一种。
与现有技术相比,本发明具有下列特点和有益效果:
(1)采用本发明,通过纳米颗粒的修饰,使制得的菌丝纳米复合球吸附材料比表面积增大,材料间的空间增多,溶解性能、吸附性能得到较大提高,使用中吸附过程耗时更短;
(2)采用本发明制得的新型菌丝体吸附材料,可用于废水处理,催化等方面,为真菌菌丝开发利用提供新的应用途径;
(3)本发明制得的核壳结构菌丝纳米复合球材料具有良好的生物降解性、吸附性、热稳定性和力学性能,可广泛应用于催化,放射性核素、重金属离子及染料的吸附富集分离回收、以及水处理等化工领域;
(4)本发明制备工艺简单,工序简便,成本低、环境友好、易规模化生产,实用性强。
具体实施方式
下面给出的实施例拟对本发明作进一步说明,但不能理解为是对本发明保护范围的限制,该领域的技术人员根据上述本发明的内容对本发明作出的一些非本质的改进和调整,仍属于本发明的保护范围。
实施例1:
一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,包括以下步骤:
a、配制培养基:按照每100毫升液体培养基中含葡萄糖1克、蛋白胨0.25克、酵母粉0.25克、余量为水的原料组分和配比,取各组分原料、溶解、混合均匀,并保持pH值不变,在压力103.4千帕蒸汽压、温度120摄氏度的条件下维持20分钟进行灭菌,即制得液体培养基;取2个250毫升的锥形瓶,在每个锥形瓶中加入125毫升的液体培养基;
b、制备菌丝/纳米颗粒A复合球:在一个锥形瓶内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含四氧化三铁(即纳米颗粒A)1毫克的纳米四氧化三铁水溶液4毫升,混合均匀,然后接入0.1克真菌菌种,在温度20℃、100转/分钟旋转振荡的条件下培养48小时,真菌菌丝生长延伸,将液体培养基中分散的四氧化三铁附着其表面,菌丝缠绕、包裹,形成菌丝/四氧化三铁纳米复合球;过滤除去液体,固体物即为菌丝/四氧化三铁纳米复合球;
c、制备纳米颗粒B液体培养基:在另一个锥形瓶内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米金(即纳米颗粒B)1毫克的纳米金水溶液10毫升,混合均匀,制得纳米金液体培养基;
d、制备复合球材料:将菌丝/四氧化三铁纳米复合球放入纳米金液体培养基中,在温度15~35℃、80~200转/分钟旋转振荡的条件下培养24~48小时,形成具有核壳结构的菌丝纳米复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝纳米复合球;将菌丝纳米复合球用质量百分比浓度为0.5%的氢氧化纳水溶液浸泡12小时,过滤除去液体,固体物再用去离子水冲洗至中性,再在零下50℃、真空度1.3~13帕的条件下冷冻干燥48~72小时,即制得核为纳米四氧化三铁、壳为纳米金的核壳结构的菌丝纳米复合球材料。
实施例2:
一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,包括以下步骤:
a、配制培养基:按照每100毫升液体培养基中含葡萄糖1克、蛋白胨0.25克、酵母粉0.25克、余量为水的原料组分和配比,取各组分原料、溶解、混合均匀,并保持pH值不变,在压力103.4千帕蒸汽压、温度120摄氏度的条件下维持20分钟进行灭菌,即制得液体培养基;取2个250毫升的锥形瓶,在每个锥形瓶中加入125毫升的液体培养基;
b、制备菌丝/纳米颗粒A复合球:在一个锥形瓶内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米氧化石墨烯(即纳米颗粒A)1毫克的纳米氧化石墨烯水溶液4毫升,混合均匀,然后接入0.2克真菌菌种,在温度20℃、100转/分钟旋转振荡的条件下培养48小时,真菌菌丝生长延伸、将液体培养基中分散的纳米氧化石墨烯附着其表面,菌丝缠绕、包裹,形成菌丝/纳米氧化石墨烯复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝/纳米氧化石墨烯复合球;
c、制备纳米颗粒B液体培养基:在另一个锥形瓶内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米金(即纳米颗粒B)1毫克的纳米金水溶液10毫升,混合均匀,制得纳米金液体培养基;
d、制备复合球材料:将菌丝/纳米氧化石墨烯复合球放入纳米金液体培养基中,在温度30℃、100转/分钟旋转振荡的条件下培养24小时,形成具有核壳结构的菌丝纳米复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝纳米复合球;将菌丝纳米复合球用质量百分比浓度为0.5%的氢氧化纳水溶液浸泡12小时,过滤除去液体,固体物再用去离子水冲洗至中性,再在零下50℃、真空度1.3~13帕的条件下冷冻干燥48~72小时,即制得核为氧化石墨烯、壳为纳米金的核壳结构的菌丝纳米复合球材料。
实施例3:
一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,包括以下步骤:
a、配制培养基:按照每100毫升液体培养基中含葡萄糖1克、蛋白胨0.25克、酵母粉0.25克、余量为水的原料组分和配比,取各组分原料、溶解、混合均匀,并保持pH值不变,在压力103.4千帕蒸汽压、温度120摄氏度的条件下维持15分钟进行灭菌,即制得液体培养基;取2个250毫升的锥形瓶,在每个锥形瓶中加入125毫升的液体培养基;
b、制备菌丝/纳米颗粒A复合球:在一个锥形瓶内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含氮化碳(即纳米颗粒A)2毫克的氮化碳水溶液10毫升,混合均匀,然后接入0.1克真菌菌种,在温度20℃、80转/分钟旋转振荡的条件下培养50小时,真菌菌丝生长延伸、将液体培养基中分散的纳米氮化碳附着其表面,菌丝缠绕、包裹,形成菌丝/氮化碳复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝/氮化碳复合球;
c、制备纳米颗粒B液体培养基:在另一个锥形瓶内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米金(即纳米颗粒B)1毫克的纳米金水溶液10毫升,混合均匀,制得纳米金液体培养基;
d、制备复合球材料:将菌丝/纳米氧化石墨烯复合球放入纳米金液体培养基中,在温度25℃、150转/分钟旋转振荡的条件下培养24小时,形成具有核壳结构的菌丝纳米复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝纳米复合球;将菌丝纳米复合球用质量百分比浓度为0.5%的氢氧化纳水溶液浸泡12小时,过滤除去液体,固体物再用去离子水冲洗至中性,再在零下50℃、真空度1.3~13帕的条件下冷冻干燥48~72小时,即制得核为纳米氮化碳,壳为纳米金的核壳结构的菌丝纳米复合球材料。
实施例4:
一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,包括以下步骤:
a、配制培养基:按照每100毫升液体培养基中含葡萄糖1克、蛋白胨0.25克、酵母粉0.25克、余量为水的原料组分和配比,取各组分原料、溶解、混合均匀,并保持pH值不变,在压力103.4千帕蒸汽压、温度120摄氏度的条件下维持20分钟进行灭菌,即制得液体培养基;取2个250毫升的锥形瓶,在每个锥形瓶中加入125毫升的液体培养基;
b、制备菌丝/纳米颗粒A复合球:在一个锥形瓶内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米四氧化三铁(即纳米颗粒A)1毫克的纳米四氧化三铁水溶液4毫升,混合均匀,然后接入0.2克真菌菌种,在温度20℃、100转/分钟旋转振荡的条件下培养48小时,真菌菌丝生长延伸、将液体培养基中分散的纳米四氧化三铁附着其表面,菌丝缠绕、包裹,形成菌丝/纳米四氧化三铁复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝/纳米四氧化三铁复合球;
c、制备纳米颗粒B液体培养基:在另一个锥形瓶内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含碳纳米管(即纳米颗粒B)1毫克的碳纳米管水溶液10毫升,混合均匀,制得碳纳米管液体培养基;
d、制备复合球材料:将菌丝/纳米四氧化三铁复合球放入碳纳米管液体培养基中,在温度30℃、100转/分钟旋转振荡的条件下培养24小时,形成具有核壳结构的菌丝纳米复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝纳米复合球;将菌丝纳米复合球用质量百分比浓度为0.5%的氢氧化纳水溶液浸泡12小时,过滤除去液体,固体物再用去离子水冲洗至中性,再在零下50℃、真空度1.3~13帕的条件下冷冻干燥48~72小时,即制得核为四氧化三铁、壳为碳纳米管的核壳结构的菌丝纳米复合球材料。
实施例5:
一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,包括以下步骤:
a、配制培养基:按照每100毫升液体培养基中含葡萄糖1克、蛋白胨0.25克、酵母粉0.25克、余量为水的原料组分和配比,取各组分原料、溶解、混合均匀,并保持pH值不变,在压力103.4千帕蒸汽压、温度120摄氏度的条件下维持20分钟进行灭菌,即制得液体培养基;取2个250毫升的锥形瓶,在每个锥形瓶中加入125毫升的液体培养基;
b、制备菌丝/纳米颗粒A复合球:在一个锥形瓶内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米二氧化钛(即纳米颗粒A)1毫克的纳米二氧化钛水溶液(水性浆料)8毫升,混合均匀,然后接入0.1克真菌菌种,在温度20℃、100转/分钟旋转振荡的条件下培养48小时,真菌菌丝生长延伸、将液体培养基中分散的纳米二氧化钛附着其表面,菌丝缠绕、包裹,形成菌丝/纳米二氧化钛复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝/纳米二氧化钛复合球;
c、制备纳米颗粒B液体培养基:在另一个锥形瓶内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米四氧化三铁(即纳米颗粒B)1毫克的纳米四氧化三铁水溶液10毫升,混合均匀,制得纳米金液体培养基;
d、制备复合球材料:将菌丝/纳米二氧化钛复合球放入纳米四氧化三铁液体培养基中,在温度20℃、100转/分钟旋转振荡的条件下培养48小时,形成具有核壳结构的菌丝纳米复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝纳米复合球;将菌丝纳米复合球用质量百分比浓度为0.5%的氢氧化纳水溶液浸泡12小时,过滤除去液体,固体物再用去离子水冲洗至中性,再在零下50℃、真空度1.3~13帕的条件下冷冻干燥48~72小时,即制得核为纳米二氧化钛、壳为纳米四氧化三铁的核壳结构的菌丝纳米复合球材料。
实施例6:
一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,包括以下步骤:
a、配制培养基:按照每100毫升液体培养基中含葡萄糖1克、蛋白胨0.25克、酵母粉0.25克、余量为水的原料组分和配比,取各组分原料、混合均匀、使固体物溶解,再在压力103.4千帕蒸汽压、温度120℃的条件下维持15分钟进行灭菌,即制得液体培养基;取2个容器(可以是250毫升的锥形瓶),在各容器中分别加入125毫升的灭菌后液体培养基;
b、制备菌丝/纳米颗粒A复合球:在一个容器内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米颗粒A 10毫克的纳米颗粒A水溶液4毫升,混合均匀,然后接入真菌菌种0.2克,在温度15℃、80转/分钟旋转振荡的条件下培养48小时,真菌菌丝生长延伸、将液体培养基中分散的纳米颗粒A附着其表面,菌丝缠绕、包裹,形成菌丝/纳米颗粒复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝/纳米颗粒A复合球;
c、制备纳米颗粒B液体培养基:在另一个容器内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米颗粒B 10毫克的纳米颗粒B水溶液4毫升,混合均匀,制得纳米颗粒B液体培养基;
d、制备复合球材料:将菌丝/纳米颗粒A复合球放入纳米颗粒B液体培养基中,在温度15℃、80转/分钟旋转振荡的条件下培养24小时,形成具有核壳结构的菌丝纳米复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝纳米复合球;将菌丝纳米复合球用质量百分比浓度为0.5%的氢氧化纳水溶液浸泡12小时,过滤除去液体,固体物再用去离子水冲洗至中性,再在零下50℃、真空度1.3帕的条件下冷冻干燥72小时,即制得核壳结构菌丝纳米复合球。
实施例7:
一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,包括以下步骤:
a、配制培养基:按照每100毫升液体培养基中含葡萄糖6克、蛋白胨1.25克、酵母粉1.25克、余量为水的原料组分和配比,取各组分原料、混合均匀、使固体物溶解,再在压力103.4千帕蒸汽压、温度120℃的条件下维持20分钟进行灭菌,即制得液体培养基;取2个容器(可以是250毫升的锥形瓶),在各容器中分别加入125毫升的灭菌后液体培养基;
b、制备菌丝/纳米颗粒A复合球:在一个容器内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米颗粒A 1毫克的纳米颗粒A水溶液20毫升,混合均匀,然后接入真菌菌种0.1克,在温度35℃、200转/分钟旋转振荡的条件下培养72小时,真菌菌丝生长延伸、将液体培养基中分散的纳米颗粒A附着其表面,菌丝缠绕、包裹,形成菌丝/纳米颗粒复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝/纳米颗粒A复合球;
c、制备纳米颗粒B液体培养基:在另一个容器内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米颗粒B 1毫克的纳米颗粒B水溶液20毫升,混合均匀,制得纳米颗粒B液体培养基;
d、制备复合球材料:将菌丝/纳米颗粒A复合球放入纳米颗粒B液体培养基中,在温度35℃、200转/分钟旋转振荡的条件下培养48小时,形成具有核壳结构的菌丝纳米复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝纳米复合球;将菌丝纳米复合球用质量百分比浓度为0.5%的氢氧化纳水溶液浸泡12小时,过滤除去液体,固体物再用去离子水冲洗至中性,再在零下50℃、真空度13帕的条件下冷冻干燥48小时,即制得核壳结构菌丝纳米复合球。
实施例8:
一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,包括以下步骤:
a、配制培养基:按照每100毫升液体培养基中含葡萄糖3克、蛋白胨0.75克、酵母粉0.75克、余量为水的原料组分和配比,取各组分原料、混合均匀、使固体物溶解,再在压力103.4千帕蒸汽压、温度120℃的条件下维持18分钟进行灭菌,即制得液体培养基;取2个容器(可以是250毫升的锥形瓶),在各容器中分别加入125毫升的灭菌后液体培养基;
b、制备菌丝/纳米颗粒A复合球:在一个容器内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米颗粒A 5毫克的纳米颗粒A水溶液12毫升,混合均匀,然后接入真菌菌种0.1克,在温度25℃、150转/分钟旋转振荡的条件下培养60小时,真菌菌丝生长延伸、将液体培养基中分散的纳米颗粒A附着其表面,菌丝缠绕、包裹,形成菌丝/纳米颗粒复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝/纳米颗粒A复合球;
c、制备纳米颗粒B液体培养基:在另一个容器内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米颗粒B 5毫克的纳米颗粒B水溶液12毫升,混合均匀,制得纳米颗粒B液体培养基;
d、制备复合球材料:将菌丝/纳米颗粒A复合球放入纳米颗粒B液体培养基中,在温度25℃、150转/分钟旋转振荡的条件下培养36小时,形成具有核壳结构的菌丝纳米复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝纳米复合球;将菌丝纳米复合球用质量百分比浓度为0.5%的氢氧化纳水溶液浸泡12小时,过滤除去液体,固体物再用去离子水冲洗至中性,再在零下50℃、真空度1.3~13帕的条件下冷冻干燥62小时,即制得核壳结构菌丝纳米复合球。
实施例9~15:
一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,包括以下步骤:
a、配制培养基:按照每100毫升液体培养基中含葡萄糖1~6克、蛋白胨0.25~1.25克、酵母粉0.25~1.25克、余量为水的原料组分和配比,取各组分原料、混合均匀、使固体物溶解,再在压力103.4千帕蒸汽压、温度120℃的条件下维持15~20分钟进行灭菌,即制得液体培养基;取2个容器(可以是250毫升的锥形瓶),在各容器中分别加入125毫升的灭菌后液体培养基;
各实施例中各原料组分的具体质量用量(克)见下表:
b、制备菌丝/纳米颗粒A复合球:在一个容器内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米颗粒A 1~10(实施例9~15分别为2、3、4、6、7、8、9)毫克的纳米颗粒A水溶液4~20(实施例9~15分别为18、15、12、9、7、5、4)毫升,混合均匀,然后接入真菌菌种(可以为0.05~0.2克中任一),在温度15~35℃、80~200转/分钟旋转振荡的条件下培养48~72小时,真菌菌丝生长延伸、将液体培养基中分散的纳米颗粒A附着其表面,菌丝缠绕、包裹,形成菌丝/纳米颗粒复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝/纳米颗粒A复合球;
c、制备纳米颗粒B液体培养基:在另一个容器内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米颗粒B 1~10毫克的纳米颗粒B水溶液4~20毫升,混合均匀,制得纳米颗粒B液体培养基;
d、制备复合球材料:将菌丝/纳米颗粒A复合球放入纳米颗粒B液体培养基中,在温度15~35℃、80~200转/分钟旋转振荡的条件下培养24~48小时,形成具有核壳结构的菌丝纳米复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝纳米复合球;将菌丝纳米复合球用质量百分比浓度为0.5%的氢氧化纳水溶液浸泡12小时(氢氧化纳水溶液用量可以是能淹没菌丝纳米复合球为宜),过滤除去液体,固体物再用去离子水冲洗至中性,再在零下50℃、真空度1.3~13帕的条件下冷冻干燥48~72小时,即制得核壳结构菌丝纳米复合球。
上述实施例6~15中:步骤b和步骤c中所述纳米颗粒A与纳米颗粒B是纳米四氧化三铁、纳米金、纳米金棒、碳纳米管、单层氧化石墨烯纳米片、二氧化钛纳米管、单层蒙脱土纳米片、碳纤维、以及纳米碳化氮中的任一种,并且纳米颗粒A与纳米颗粒B是不同的物质(即纳米颗粒A与纳米颗粒B只要不是同一种物质、又是所述物质之一即可)。
上述实施例中:步骤a中所述葡萄糖可以替换为果糖、半乳糖或甘露糖。
上述实施例中:步骤a中所述蛋白胨可以替换为骨肉蛋白胨、胰蛋白胨或豌豆蛋白胨。
上述实施例中:步骤b中所述真菌菌种可以为平菇菌种、双孢蘑菇菌种、香菇菌种、面包菇菌种、红平菇菌种、鸡腿菇菌种、草菇菌种、虫草菌种等真菌菌种中的任一种。
上述实施例中:所采用的各原料均为市售产品。
上述实施例中:所采用的百分比例中,未特别注明的,均为质量(重量)百分比例或本领域技术人员公知的百分比例;所述质量(重量)份可以均是克或千克。
上述实施例中:各步骤中的工艺参数(温度、时间、浓度、压力等)和各组分用量数值等为范围的,任一点均可适用。
本发明内容及上述实施例中未具体叙述的技术内容同现有技术。
本发明不限于上述实施例,本发明内容所述均可实施并具有所述良好效果。
Claims (5)
1. 一种核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,其特征是包括以下步骤:
a、配制培养基:按照每100毫升液体培养基中含葡萄糖1~6克、蛋白胨0.25~1.25克、酵母粉0.25~1.25克、余量为水的原料组分和配比,取各组分原料、混合均匀、使固体物溶解,再在压力103.4千帕蒸汽压、温度120℃的条件下维持15~20分钟进行灭菌,即制得液体培养基;取2个容器,在各容器中分别加入125毫升的灭菌后液体培养基;
b、制备菌丝/纳米颗粒A复合球:在一个容器内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米颗粒A 1~10毫克的纳米颗粒A水溶液4~20毫升,混合均匀,然后接入真菌菌种,在温度15~35℃、80~200转/分钟旋转振荡的条件下培养48~72小时,真菌菌丝生长延伸、将液体培养基中分散的纳米颗粒A附着其表面,菌丝缠绕、包裹,形成菌丝/纳米颗粒复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝/纳米颗粒A复合球;
c、制备纳米颗粒B液体培养基:在另一个容器内的灭菌后液体培养基中加入浓度为每毫升溶液中含纳米颗粒B 1~10毫克的纳米颗粒B水溶液4~20毫升,混合均匀,制得纳米颗粒B液体培养基;
d、制备复合球材料:将菌丝/纳米颗粒A复合球放入纳米颗粒B液体培养基中,在温度15~35℃、80~200转/分钟旋转振荡的条件下培养24~48小时,形成具有核壳结构的菌丝纳米复合球,过滤除去液体,固体物即为菌丝纳米复合球;将菌丝纳米复合球用质量百分比浓度为0.5%的氢氧化纳水溶液浸泡12小时,过滤除去液体,固体物再用去离子水冲洗至中性,再在零下50℃、真空度1.3~13帕的条件下冷冻干燥48~72小时,即制得核壳结构菌丝纳米复合球。
2.按权利要求1所述核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,其特征是:步骤b和步骤c中所述纳米颗粒A与纳米颗粒B是纳米四氧化三铁、纳米金、纳米金棒、碳纳米管、单层氧化石墨烯纳米片、二氧化钛纳米管、单层蒙脱土纳米片、碳纤维、以及纳米碳化氮中的任一种,并且纳米颗粒A与纳米颗粒B是不同的物质。
3.按权利要求1或2所述核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,其特征是:步骤a中所述葡萄糖替换为果糖、半乳糖或甘露糖。
4.按权利要求1或2所述核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,其特征是:步骤a中所述蛋白胨替换为骨肉蛋白胨、胰蛋白胨或豌豆蛋白胨。
5.按权利要求1或2所述核壳结构菌丝纳米复合球的制备方法,其特征是:步骤b中所述真菌菌种为平菇菌种、双孢蘑菇菌种、香菇菌种、面包菇菌种、红平菇菌种、鸡腿菇菌种、草菇菌种、虫草菌种中的任一种。
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