CN104777263B - 一种普瑞巴林手性异构体的分离检测方法 - Google Patents
一种普瑞巴林手性异构体的分离检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104777263B CN104777263B CN201510193642.2A CN201510193642A CN104777263B CN 104777263 B CN104777263 B CN 104777263B CN 201510193642 A CN201510193642 A CN 201510193642A CN 104777263 B CN104777263 B CN 104777263B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pregabalin
- dehydrated alcohol
- system suitability
- solution
- derivatization
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明提供了一种普瑞巴林手性异构体的衍生化分离检测方法，属分析化学领域。该方法以芴甲氧羰酰氯为衍生化试剂进行柱前衍生普瑞巴林，以CHIRALPAK
Description
技术领域
本发明涉及一种普瑞巴林手性异构体的分离检测方法，属分析化学领域。
技术背景
普瑞巴林化学名为(S)-3-(胺甲基)-5-甲基己酸，用于治疗癫痫和神经疼痛。普瑞巴林手性异构体几乎没有药理活性，其化学名为(R)-3-(胺甲基)-5-甲基己酸，是普瑞巴林的重要杂质，也是控制普瑞巴林质量的重要指标。但普瑞巴林为末端吸收，且紫外吸收不强，现有技术中：中国发明专利(专利号：200510057381.8，一种普瑞巴林手性异构体的分离测定方法)、印度药典2010版第1960～1961页普瑞巴林专论及国家标准YBH02442013普瑞巴林中均是采用Nα-(5-氟-2，4-二硝基苯基)-L-氨基酸类化合物为衍生化试剂进行衍生化，再经后处理后进入液相色谱系统进行分析，这几篇文献中的衍生方法均需要先将普瑞巴林用盐酸溶解再用氢氧化钠中和再与衍生试剂溶液在加热条件下进行衍生化，且反应结束后需在五氧化二磷和氢氧化钾体系中进行减压干燥以去除沸点低的有机溶剂，再用其它溶剂溶解并过滤以制备供试品溶液，后处理非常麻烦，给定量操作带来很多不可避免的误差，尽管后来专利号为200910045925.7(普瑞巴林及其手性异构体的分离检测方法)采用微波衍生法：取样品溶液20μl，衍生试剂溶液200μl和0.05mol/L三乙胺溶液20μl，600W微波加热衍生3min，再冷却至室温后加0.05mol/L醋酸溶液20μl，作为供试品溶液，此方法虽然避免了后续处理的繁琐步骤，但其要配制样品溶液、衍生化溶液、三乙胺溶液及醋酸溶液，且加样量较小，仍比较麻烦，且易产生误差。
本发明提供的一种柱前衍生化方法与手性色谱柱即可实现普瑞巴林与其手性异构体分离的测定方法，可较为迅速准确的实现普瑞巴林及其手性异构体的分离和测定。
发明内容
本发明的目的在于提供一种普瑞巴林手性异构体的分离检测方法，该方法采用衍生化试剂芴甲氧羰酰氯与普瑞巴林及其手性异构体同时进行衍生化反应，再经手性色谱柱进行分离测定。
为实现上述目的，本发明提供了如下的技术方案：
普瑞巴林在进柱前用衍生化试剂进行衍生化，其衍生试剂为芴甲氧羰酰氯，其分离测定过程包括：
①色谱条件：
采用AD-H手性色谱柱为色谱柱，以正己烷与无水乙醇混合物(比例为98∶2～85∶15，必要时可添加不大于5％的无水甲醇)为流动相，检测波长为200～230nm，流速为0.6～1.2ml/min，柱温15～40℃，进样体积为10～20μl，等度洗脱程序。
②溶液配制：
供试品溶液：取普瑞巴林25mg，加芴甲氧羰酰氯(40～200mg)置50ml量瓶中，加无水乙醇超声溶解后，再用无水乙醇或正己烷定容至刻度，作为供试品溶液；
系统适用性溶液：取普瑞巴林混旋物25mg，加芴甲氧羰酰氯(40～200mg)置50ml量瓶中，加无水乙醇超声溶解后，再用无水乙醇或正己烷定容至刻度，作为系统适用性溶液。
③测定方法：精密量取供试品溶液和系统适用性溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，按归一化法计算普瑞巴林异构体含量。
综上，本发明具有以下优点：
1、本发明采用芴甲氧羰酰氯普瑞巴林进行柱前衍生，不但使衍生后的产物具有较强的紫外吸收，而且不需要进行衍生后处理，可方便快捷的测定普瑞巴林的手性异构体；
2、本发明具有反应条件温和、反应速度快、过量衍生化试剂不干扰测定等优点；
3、本发明衍生化产物稳定，分析灵敏度高，普瑞巴林手性异构体的定量限为0.02％。
附图：
图1实施例1系统适用性溶液高效液相色谱图(正己烷∶无水乙醇：85∶15)
图2实施例2系统适用性溶液高效液相色谱图(正己烷∶无水乙醇：95∶5)
图3实施例3系统适用性溶液高效液相色谱图(正己烷∶无水乙醇∶无水甲醇90∶5∶5)
图4实施例4系统适用性溶液高效液相色谱图(正己烷∶无水乙醇：90∶10)
具体实施方式
以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
(1)仪器与条件
流动相∶正己烷-无水乙醇＝85∶15
检测波长：208nm
色谱柱：AD-H 250×4.5mm，5μm
流速：1.0ml/min
柱温：35℃
进样量：20ul
(2)实验步骤
取普瑞巴林混旋物25mg，加芴甲氧羰酰氯50mg置50ml容量瓶中，加无水乙醇超声溶解后再用无水乙醇定容至刻度摇匀，作为系统适用性溶液。
取系统适用性溶液在上述条件下进行分析。结果见图1，其中保留时间为8.393min的为普瑞巴林，其中保留时间为9.835min为普瑞巴林异构体，其余峰为未反应完的衍生试剂的峰，两者分离度为2.352。
实施例2
(1)仪器与条件
流动相∶正己烷-无水乙醇＝95∶5
检测波长：205nm
色谱柱：AD-H 250×4.5mm，5μm
流速：1.0ml/min
柱温：25℃
进样量：20ul
(2)实验步骤
取普瑞巴林混旋物25mg，加芴甲氧羰酰氯75mg置50ml容量瓶中，加无水乙醇20ml超声溶解后在用正己烷定容至刻度摇匀，作为系统适用性溶液。
取系统适用性溶液在上述条件下进行分析。结果见图2，其中保留时间为23.027min为普瑞巴林，其中保留时间为28.313min为普瑞巴林异构体，其余峰为未反应完的衍生试剂的峰，分离度为3.32。
实施例3
(1)仪器与条件
流动相∶正己烷-无水乙醇-无水甲醇＝90∶5∶5
检测波长：210nm
色谱柱：AD-H 250×4.5mm，5μm
流速：0.8ml/min
柱温：25℃
进样量：20ul
(2)实验步骤
取普瑞巴林混旋物25mg，加芴甲氧羰酰氯100mg置50ml容量瓶中，加无水乙醇20ml超声溶解后再用正己烷定容至刻度摇匀，作为系统适用性溶液。
取系统适用性溶液在上述条件下进行分析。结果见图3，其中保留时间为21.426min为普瑞巴林，其中保留时间为25.807min为普瑞巴林异构体，其余峰为未反应完的衍生试剂的峰，分离度为3.09。
实施实例4
(1)仪器与条件
流动相∶正己烷-无水乙醇＝90∶10
检测波长：205nm
色谱柱：AD-H 250×4.5mm，5μm
流速：1.0ml/min
柱温：30℃
进样量：20ul
(2)实验步骤
取普瑞巴林混旋物25mg，加芴甲氧羰酰氯50mg置50ml容量瓶中，加无水乙醇20ml超声溶解后再用正己烷定容至刻度摇匀，作为系统适用性溶液。
取系统适用性溶液在上述条件下进行分析。结果见图4，其中保留时间为18.436min为普瑞巴林，其中保留时间为22.198min为普瑞巴林异构体，其余峰为未反应完的衍生试剂的峰，分离度为2.99。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种分离测定普瑞巴林手性异构体的方法，其特征在于：该方法以芴甲氧羰酰氯为衍生化试剂进行柱前衍生普瑞巴林，以手性色谱柱为色谱柱，以正已烷与无水乙醇混合物为流动相，比例为98∶2～85∶15，通过高效液相色谱-紫外检测法进行普瑞巴林手性异构体的分离测定。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：普瑞巴林与衍生化试剂的摩尔比为1∶1～1∶5。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：流动相中添加不大于5％的无水甲醇。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：其色谱条件包括：添加不大于5％的无水甲醇，检测波长为200～230nm，流速为0.6～1.2ml/min，柱温15～40℃，进样体积为10～20μl，等度洗脱程序。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：检测过程包括供试品溶液的制备、系统适用性溶液的制备和液相测定三个步骤：
①供试品溶液：取普瑞巴林25mg，加40～200mg芴甲氧羰酰氯置50ml量瓶中，加无水乙醇超声溶解后，再用无水乙醇或正已烷定容至刻度，作为供试品溶液；
②系统适用性溶液：取普瑞巴林混旋物25mg，加40～200mg芴甲氧羰酰氯置50ml量瓶中，加无水乙醇超声溶解后，再用无水乙醇或正已烷定容至刻度，作为系统适用性溶液；
③测定方法：精密量取供试品溶液和系统适用性溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，按归一化法计算普瑞巴林异构体含量。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510193642.2A CN104777263B (zh) | 2015-04-23 | 2015-04-23 | 一种普瑞巴林手性异构体的分离检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510193642.2A CN104777263B (zh) | 2015-04-23 | 2015-04-23 | 一种普瑞巴林手性异构体的分离检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104777263A CN104777263A (zh) | 2015-07-15 |
| CN104777263B true CN104777263B (zh) | 2017-01-11 |
Family
ID=53618863
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510193642.2A Active CN104777263B (zh) | 2015-04-23 | 2015-04-23 | 一种普瑞巴林手性异构体的分离检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104777263B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106770838B (zh) * | 2017-02-15 | 2019-05-14 | 延边大学 | 氨基官能团手性化合物拆分标记带荧光衍生化试剂 |
| CN110174467B (zh) * | 2018-10-25 | 2022-04-08 | 武汉武药制药有限公司 | 一种高效液相色谱法分析分离2,4-二氰基-3-异丁基戊二酰胺的方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100368803C (zh) * | 2006-02-05 | 2008-02-13 | 重庆医药工业研究院有限责任公司 | 一种普瑞巴林手性异构体的分离测定方法 |
| CN101788542B (zh) * | 2009-01-22 | 2012-07-04 | 上海臣邦医药科技有限公司 | 普瑞巴林及其手性异构体的分离检测方法 |
-
2015
- 2015-04-23 CN CN201510193642.2A patent/CN104777263B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104777263A (zh) | 2015-07-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Medina et al. | Simultaneous determination of paracetamol, caffeine and acetylsalicylic acid by means of a FI ultraviolet pls multioptosensing device | |
| Wang et al. | Preparation of restricted access molecularly imprinted polymers based fiber for selective solid-phase microextraction of hesperetin and its metabolites in vivo | |
| Chocholouš et al. | Fast simultaneous spectrophotometric determination of naphazoline nitrate and methylparaben by sequential injection chromatography | |
| Can et al. | Reversed-phase HPLC analysis of levetiracetam in tablets using monolithic and conventional C18 silica columns | |
| CN104569279A (zh) | 一种消炎镇痛膏的质量检测方法 | |
| CN110849980A (zh) | 一种l-丙氨酸异丙酯中对映异构体含量的检测方法 | |
| Bhatt et al. | Simultaneous estimation of pregabalin and methylcobalamine in pharmaceutical formulation by RP-HPLC method | |
| CN104777263B (zh) | 一种普瑞巴林手性异构体的分离检测方法 | |
| CN110441446B (zh) | 一种有效检测2-氯丙酰氯纯度的方法 | |
| CN113671077A (zh) | 丙烯酰氯及其有关物质检测方法 | |
| CN105806963B (zh) | L‑脯氨醇及其对映异构体的分离检测方法 | |
| CN109900830A (zh) | 采用hplc分离测定塞来昔布中磺酰胺类杂质的方法及应用 | |
| CN103134886A (zh) | 一种hplc法分析分离伊班膦酸钠及杂质的方法 | |
| Mohammadian et al. | Derivatization of γ-amino butyric acid analogues for their determination in the biological samples and pharmaceutical preparations: a comprehensive review | |
| CN105866290B (zh) | 一种瑞加诺生有关物质的高效液相色谱分析方法 | |
| Sarfraz et al. | Development and validation of a bioanalytical method for direct extraction of diclofenac potassium from spiked plasma | |
| CN109030668B (zh) | 钆塞酸二钠中间体的高效液相分析方法 | |
| Karthikeyan et al. | Determination of residual epichlorohydrin in sevelamer hydrochloride by static headspace gas chromatography with flame ionization detection | |
| Dong et al. | Simultaneous determination of paracetamol and diclofenac in wastewater by high-performance liquid chromatography method | |
| Rahman et al. | Enantiomeric determination of carvedilol by a newly developed and validated chiral HPLC method | |
| CN109387588B (zh) | 水溶性紫外吸收剂的分离方法及其应用 | |
| CN104374861A (zh) | 一种用hplc分离测定利奥西呱原料药的有关物质的方法 | |
| Al-Sowdani et al. | Determination of extracted methamphetamine from hashish narcotic plant by home-made ion chromatography system | |
| Li et al. | Hydrophobic deep eutectic solvent-based vortex assisted liquid–liquid microextraction for the determination of famciclovir in water samples coupled with high performance liquid chromatography | |
| Patil et al. | Chromatographic Method Development and Validation (HPLC-UV Technique) of p-Formaldehyde Quantification in Duloxetine Hydrochloride Drug Substance by using Chemical Derivatization |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| DD01 | Delivery of document by public notice | ||
| DD01 | Delivery of document by public notice |
Addressee: Wang Xue Document name: Notification that Application Deemed not to be Proposed |
|
| CP03 | Change of name, title or address | ||
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: 100176 Beijing, Beijing economic and Technological Development Zone, two street 8, No. 8, A block, 16 building, Dazu Business Bay. Patentee after: Beijing purple Medical Technology Co., Ltd. Address before: 102209 Beijing Changping District Beiqijia Town, Bai Temple Industrial Park 16, Hong an Albert hospital, purple Meng Technology Patentee before: Beijing Zimeng Tongda Science and Technology Co., Ltd. |