CN104769414B - 检体识别分离提取装置及检体识别分离提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种能够在对目标检体进行分离提取时防止目标检体损伤和污染并且能够实现分离提取处理的快速化的检体识别分离提取装置。控制机构(64)基于検体(S)的光信息算出目标检体的流速V，并且基于流速V，算出检体(S)到达分离提取喷嘴前端的时间T。并以能够在该时间T经过前将分离提取喷嘴前端浸渍到回收容器(69)内的液体中的方式移动回收容器(69)。然后，将从分离提取喷嘴(14)的前端(14b)排出的包含检体(S)的分离提取溶液(86)分离提取到回收容器(69)中。

Description

检体识别分离提取装置及检体识别分离提取方法
技术领域
本发明涉及一种检体识别分离提取装置及检体识别分离提取方法，其对分散在液体中的作为被测定对象的检体进行识别，并基于识别结果对目标检体进行分离提取。
背景技术
现有的检体识别分离提取装置作为用于识别、分离提取细胞等微小检体的装置广泛用于医疗领域的研究、检测等。于是，近些年，在研究及检测机构中，迫切希望能够在不破坏检体的情况下实现识别、分离提取，并且加快这些处理，由此提高研究、检测的效率。
检体识别分离提取装置一般由检测部和分离提取部构成。检测部检测对单一检体照射光而得到的光信息。另外，分离提取部基于检测结果回收所需的检体，废弃不需要的检体。
图17是表示现有检体识别分离提取装置中的分离提取部的构成之一例的图，图18(a)～(g)是表示上述分离提取部的动作之一例的图。
在图17所示的分离提取部，在分离提取喷嘴101的前端以规定压力形成有包含目标检体102的液滴103或液流。该液滴103或液流如果包含非目标检体104，则被排出到排液槽105(图18(a))，而如果包含目标检体102，则排液槽105向下方退避后，进一步横向移动(图18(b)～(c))，通过未图示的移动机构将回收容器106在上下方向移动，并插入充满液体107的回收容器106中，进行目标检体102的分离提取(图18(d))。然后，进行上述动作的反向动作，将排液槽105恢复到图18(a)的位置，结束分离提取处理(图18(e)～(g))。根据该构成，不对检体使用超声波、高电压来形成液滴，不施加多余的负荷即可进行分离提取，所以例如以活体细胞为对象的情况下，期待分离提取后的高存活率。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本专利第4413921号
发明内容
发明所要解决的课题
但是，上述现有构成存在以下问题。即，因为目标检体在进入回收容器前从分离提取喷嘴前端被排出，所以存在目标检体与分离提取喷嘴前端的端面、外壁接触导致损伤、污染的问题。另外，目标检体不限于位于从分离提取喷嘴前端排出的液滴的中央，在位于该液滴与外部气体的界面的情况下，有时因表面张力而受到损伤。特别是目标检体为活体细胞、脆弱细胞等的情况下，有可能伴随细胞破坏，分离提取后的细胞存活率下降，导致作业效率下降。
另外，在由排液槽回收非目标检体的构成中，为了分离提取一个目标检体，需要以下多个工序：排液槽向下移动及横向移动、回收容器向上移动及向下移动、及排液槽横向移动及向上移动，难以实现分离提取处理的快速化。
本发明的目的是提供一种能够在对目标检体进行分离提取时防止检体的损伤和污染、并且实现分离提取处理的快速化的检体识别分离提取装置及检体识别分离提取方法。
用于解决课题的手段
为了实现上述目的，本发明所涉及的检体识别分离提取装置是对分散在液体中的作为被测定对象的检体进行识别、基于识别结果对目标检体进行分离提取的检体识别分离提取装置，其特征在于，具有识别机构、分离提取机构、移动机构和控制机构，所述识别机构具有：对分散在液体中的检体进行收纳的检体收纳部，用于将上述液体输送到流路的压力控制部，用于对检体照射光的光照射部，对上述检体的光信息进行测定的光信息测定部，基于上述光信息判定上述检体为目标检体还是非目标检体的判定部；所述分离提取机构具有：具有与上述识别机构的流路连通的流路、将包含目标检体的分离提取溶液分离提取到回收容器的分离提取喷嘴，对从上述分离提取喷嘴前端排出的排液、或包含非目标检体、判断为无法分离提取的检体的排液进行吸引回收的排液回收部，对包含目标检体的分离提取溶液进行回收的回收容器；所述移动机构将上述分离提取喷嘴及上述回收容器中的至少一方移动，所述控制机构基于由上述光信息测定部测定的光信息、使上述分离提取喷嘴及/或上述回收容器相对移动；上述排液回收部具有：对从上述分离提取喷嘴前端排出的包含非目标检体的排液、或包含非目标检体、判断为无法分离提取的检体的排液进行吸引的吸引喷嘴。
另外，优选上述吸引喷嘴具有多个吸引路。
另外，上述移动机构移动上述吸引喷嘴。优选上述移动机构使上述吸引喷嘴从上述分离提取喷嘴的侧方接近。
另外，优选上述控制机构算出目标检体的流速V，并且基于流速V算出上述目标检体到达上述分离提取喷嘴前端的时间T，以能够在该时间T过去前将上述分离提取喷嘴前端浸渍到上述回收容器内的液体中的方式，使上述分离提取喷嘴及/或上述回收容器相对移动。
更优选上述吸引喷嘴接近上述分离提取喷嘴时，上述分离提取喷嘴前端中的最下端高度h比上述吸引喷嘴前端的内周面最上部高度Hhigh低。
进一步优选上述吸引喷嘴接近上述分离提取喷嘴时，上述分离提取喷嘴前端中的最下端高度h比上述吸引喷嘴前端的内周面最上部高度Hhigh低，并且比上述吸引喷嘴的前端的内周面最下部高度Hlow低。
另外，更优选上述移动机构以在上述吸引喷嘴的前端的流动方向相对于在上述分离提取喷嘴前端的流动方向成规定角度α的方式使上述吸引喷嘴从上述分离提取喷嘴的侧方接近，上述规定角度α满足70°＜α＜110°。
另外，优选上述控制机构在使上述分离提取喷嘴及/或上述回收容器相对移动时，对应于目标检体的检测次数的增加，使上述分离提取喷嘴的前端与上述回收容器的距离增大。
另外，优选上述压力控制部对应于来自上述控制机构的信号改变上述分离提取喷嘴的流路中的液体的输送压力，上述控制机构在使上述分离提取喷嘴及/或上述回收容器相对移动时，对应于目标检体的检测次数的增加，使上述包含目标检体的液体的输送压力增大。
为了实现上述目的，本发明所涉及的检体识别分离提取方法是对分散在液体中的作为被测定对象的检体进行识别、基于识别结果对目标检体进行分离提取的检体识别分离提取方法，其特征在于，具有：对分散在液体中的检体进行收纳的收纳步骤；将上述液体输送到流路的液体输送步骤；对检体照射光的照射步骤；对上述检体的光信息进行测定的测定步骤；基于上述光信息，判定上述检体为目标检体还是非目标检体的判定步骤；用吸引喷嘴对从与上述流路连通的分离提取喷嘴的前端排出的排液、或包含非目标检体、判断为无法分离提取的检体的排液进行吸引回收的回收步骤；基于上述判定步骤的判定结果，以能够将上述分离提取喷嘴前端插入回收容器内的方式，使上述分离提取喷嘴及/或上述回收容器相对移动的控制步骤；将从上述分离提取喷嘴前端排出的包含目标检体的分离提取溶液分离提取到上述回收容器中的分离提取步骤。
发明效果
根据本发明，基于光信息判定检体为目标检体还是非目标检体，并且基于该光信息、按将分离提取喷嘴前端插入回收容器内的方式使分离提取喷嘴及/或回收容器相对移动。然后，将从分离提取喷嘴的前端排出的包含目标检体的分离提取溶液分离提取到回收容器中。由此，能够使目标检体不与分离提取喷嘴的端面、外壁或者外部气体接触地被回收到回收容器的液体中，防止目标检体的污染、损伤。另外，因为从分离提取喷嘴的前端排出的包含非目标检体的排液从分离提取喷嘴侧方被吸引喷嘴吸引回收，所以，与现有构成相比，能够缩短移动排液回收部的机械动作的移动距离、动作时间，能够实现分离提取处理的快速化。特别是现有的构成中排液回收部被配置于分离提取喷嘴的下方，所以分离提取时首先必须使排液回收部自分离提取喷嘴的下方避开。另一方面，在本发明中，因为排液回收部被配置于分离提取喷嘴侧方，所以目标检体分离提取时不必使排液回收部自分离提取喷嘴的下方避开，能够显著缩短分离提取处理的整体时间。
附图说明
图1是示意性地表示本发明的实施方式所涉及的检体识别分离提取装置整体构成的立体图。
图2是将图1的检体识别分离提取装置中的检体收纳部到分离提取喷嘴的前端部放大表示的局部截面图。
图3是说明图1的检体识别分离提取装置的功能的框图。
图4(a)～(d)是图3中的分离提取机构的动作的说明图。
图5(a)～(d)是进行图4所示动作时的分离提取喷嘴附近的放大图。
图6(a)～(b)是表示分离提取喷嘴的前端形状的变形例的图。
图7是图1的检体识别分离提取装置执行的检体识别分离提取处理的流程图。
图8(a)～(b)是排液回收时的分离提取喷嘴的流动方向和吸引喷嘴的流动方向的角度的说明图。
图9(a)～(b)是排液回收时分离提取喷嘴前端和吸引喷嘴前端的位置关系的说明图。
图10是表示分离提取喷嘴前端和吸引喷嘴前端的位置关系的变形例的图，(a)是侧面图，(b)是水平方向的截面图。
图11是表示分离提取喷嘴前端和吸引喷嘴前端的位置关系的其他变形例的图。
图12是分离提取溶液回收时的分离提取喷嘴的移动位置的变化的说明图。
图13是检体识别分离提取处理的变形例的说明图。
图14(a)是表示吸引喷嘴的变形例的侧面图，(b)是(a)的沿线A－A的截面图，(c)是说明(a)的吸引喷嘴的动作的图。
图15是表示图14(b)的吸引喷嘴的变形例的截面图。
图16是表示排液回收时的分离提取喷嘴前端和吸引喷嘴前端的位置关系的变形例的图。
图17是表示现有检体识别分离提取装置中的分离提取部的构成之一例的图。
图18(a)～(g)是表示图17的分离提取部的动作之一例的图。
具体实施方式
以下，边参照附图，边详细说明本发明的实施方式。
图1是示意性地表示本发明的实施方式所涉及的检体识别分离提取装置整体构成的立体图。该检体识别分离提取装置通过对分散在流动于流路内的液体中的被测定对象、即细胞等检体照射激发光，对检体的光信息进行测定，根据光信息判断是否分离提取检体，根据判断结果，将成为分离提取对象的目标检体分离提取到回收容器中。
另外，在图1及图2中，用白色圆圈表示的检体S是成为分离提取对象的目标检体，用黑色圆圈表示的检体SR是成为废弃对象的非目标检体。
检体识别分离提取装置1，如图1及图2所示，具有：对分散在液体A中的检体S、SR进行收纳的检体收纳部11；具有液体A流通的流路12a的流动池12；具有与流动池12的流路12a连通的流路14a、将包含检体S的分离提取溶液分离提取到培养板13(回收容器)的分离提取喷嘴14。液体A是检体S及检体SR分散在溶液中而得的样品混悬液。
检体收纳部11被配置于流动池12的上方。在检体收纳部11和流动池12之间配置导入喷嘴15，该导入喷嘴15具有将液体A从检体收纳部11导入到流动池12的流路12a的直线状流路15a。在流动池12的下方，配置具有直线形状的流路14a的分离提取喷嘴14，所述流路14a将在流动池12的流路12a内流动的液体A导入培养板13的孔。
检体收纳部11是上部具有导入液体A的开口部11a、并且在底壁11b具有喷出口11c的圆筒状容器。即，检体收纳部11具有对分散于液体A的检体进行收纳的功能。另外，在检体收纳部11的开口部11a载置可开关的盖16。在该盖16上设置将调整为规定压力的加压空气导入检体收纳部11内的管17。通过将加压空气从该管17导入检体收纳部11内，能够以规定压力将液体A送入流路15a。
为了将液体A导入检体收纳部11，例如在检体收纳部11与导入喷嘴15连接配置的状态时，将盖16打开，用移液管等将液体A从开口部11a导入检体收纳部11内。
导入喷嘴15是具有规定的截面形状的筒状部件，在下端侧具有锥形部15b。导入喷嘴15的上端部按其流路15a的入口侧与检体收纳部11的喷出口11c连通的方式被固定于检体收纳部11的底壁11b。另外，导入喷嘴15的锥形部15b通过压入或者螺接等固定在形成于流动池12的上端部并与流路12a连通的锥形孔12b内。应予说明，也可以代替锥形部15b及锥形孔12b，形成不具有锥形的直线部及孔。
在流动池12上设置与直线状的流路12a连通、用于将不含检体的液体(鞘流液)B导入流路12a的鞘流液导入孔18。另外，在流动池12设置用于将调整为规定压力的鞘流液B导入鞘流液导入孔18的鞘流液导入部19。
在流动池12的流路12a内，以分散在液体A中的检体S、SR单个流动的方式使液体A被鞘流液B包围。将液体A的液流称为样品液流，将包围样品液流的形式的鞘流液B的液流称为鞘流液流。
另外，在流动池12的下端部，以其流路12a与直线形状的流路14a连通的方式固定分离提取喷嘴14。流动池12和分离提取喷嘴14可以分别独立地设置，也可以为一体形成的形态。
由此，导入喷嘴15的直线状流路15a连通于检体收纳部11的喷出口11c，流动池12的直线状流路12a连通于该流路15a，并且分离提取喷嘴14的直线状流路14a连通于该流路12a。由此，检体收纳部11到分离提取喷嘴14的前端部的流路成为直线形状的流路。
另外，检体识别分离提取装置1具有：对在流动池12的流路12a内流动的液体A所包含的检体S、SR照射激发光而测定检体的光信息的测定体系30、40。如图1及图2所示，测定体系30、40是配置在流路12a的周围的两个测定体系，并且相对于流动池12的流路12a内流动的液体A所包含的检体S、SR的行进方向(样品液流在流路内的流动方向D)处于2个不同的位置。通过各测定体系30、40，在检体的行进方向中的不同位置分别对检体照射激发光，测定检体的光信息。
测定体系30具有：对在流动池12的流路12a内流动的检体照射激发光的光照射部，接收该激发光透过检体的透过光的透过光接收部，接收来自检体的侧方散射光及荧光的侧方散射光接收部。
测定体系30的光照射部具有将规定波长的激光(例如488nm的光)作为激发光射出的半导体激光元件31和传播该激光并在流路12a内流动的液体A的液流(样品液流)的附近射出的照射光纤32。
测定体系30的透过光接收部具有在样品液流的附近接收来自检体的透过光的光纤33和接收在光纤33中传播的透过光的光接收元件34。
测定体系30的侧方散射光接收部具有：在样品液流的附近接收来自检体的侧方散射光的光纤35；设置于光纤35、并按波长将侧方散射光及其所包含的荧光进行分离的三个光学过滤器36a～36c；接收被各光学过滤器分离的光的四个光接收元件37a～37d。
光接收元件37a接收被光学过滤器36a反射的侧方散射光。光接收元件37b接收透过光学过滤器36a并且被光学过滤器36b反射的荧光。光接收元件37c接收透过光学过滤器36b并且被光学过滤器36c反射的荧光。光接收元件37d接收透过光学过滤器36c的荧光。
测定体系40具有：对在流动池12的流路12a内流动的检体照射激发光的光照射部，接收该激发光透过检体后的透过光的透过光接收部，接收来自检体的荧光的荧光接收部。
测定体系40的光照射部具有将规定波长的激光(例如635nm的光)作为激发光射出的半导体激光元件41和传播该激光并在样品液流的附近射出的照射光纤42。应予说明，本实施方式中，作为光源采用半导体激光元件，但是也可以为射出特定波长的光的光源。
测定体系40的透过光接收部具有在样品液流的附近接收来自检体的透过光的光纤43和接收在光纤43中传播的透过光的光接收元件44。
测定体系30、40的各光纤32、33、35、42、43被光纤支承部件38、39支承，将光纤支承部件38、39定位在流动池12中并固定。光纤支承部件38、39的位置可相对于检体液流任意调整。
测定体系40的荧光接收部具有在样品液流的附近接收来自检体的荧光的光纤45和接收在光纤45中传播的荧光的光接收元件46。
另外，检体识别分离提取装置1被构成为：判断检体为目标检体还是非目标检体，基于该判定结果，在目标检体到达分离提取喷嘴14的前端14b前使培养板13移动，将包含目标检体的分离提取溶液分离提取到培养板13的孔W中。具体而言，检体识别分离提取装置1具有相对于分离提取喷嘴14可移动地支撑培养板13的未图示的台和驱动该台的后述驱动马达。
检体识别分离提取装置1具有对从分离提取喷嘴14的前端14b排出的包含非目标检体的排液进行回收的排液回收部50。排液回收部50具有：排液回收部主体51；从排液回收部51的侧面向侧方延伸出来而设置的吸引喷嘴52，该吸引喷嘴52吸引从分离提取喷嘴前端排出的包含非目标检体的排液经由流路52a(图2)。另外，检体识别分离提取装置1具有相对于分离提取喷嘴14可移动地支撑吸引喷嘴52的未图示的台和驱动该台的后述驱动马达。此处，排液或者分离提取溶液是指液体A、鞘流液B或者它们的混合液体从分离提取喷嘴14的端面14b被排出到外部的液体。
图3是说明图1的检体识别分离提取装置的功能的框图。
图3中，检体识别分离提取装置1具有识别机构61、分离提取机构62、移动机构63及控制机构64。
识别机构61具有：对分散在液体中的检体进行收纳的检体收纳部11、用于将液体输送到流路的压力控制部65、用于对检体照射光的光照射部66、对检体的光信息进行测定的光信息测定部67、基于光信息判定检体为目标检体还是非目标检体的判定部68。光信息测定部67是对应于图1的测定体系30、40的功能块。
分离提取手段62具有：具有与识别机构61的流路连通的流路、将包含目标检体的分离提取溶液分离提取到回收容器的分离提取喷嘴14，对从分离提取喷嘴前端排出的包含非目标检体的排液进行吸引回收的排液回收部50，对包含目标检体的分离提取溶液进行回收的回收容器69。应予说明，回收容器69对应于上述实施方式中的培养板13。
移动机构63具有对排液回收部50进行驱动的驱动马达70和对回收容器69进行驱动的驱动马达71，驱动马达70、71通过未图示的台移动排液回收部50和回收容器69。
控制机构64基于由测定体系30、40的各光接收部、即各光接收元件34、44、37a～37d及46得到的光信息(透过光、侧方散射光及荧光的各信息)判定检体为目标检体(检体S)还是非目标检体(检体SR)。另外，控制机构64能够由得自测定体系30、40的各光接收元件34、44的光信息的测定时差和各光接收元件34、44的间隔测定检体S、SR的流速V，并且基于测定的流速V，算出检体S、SR到达分离提取喷嘴14的前端部的时间T。应予说明，本实施方式中，控制机构64的一部分构成判定部68，但是控制机构64和判定部68也可以分别设置。
控制机构64判定检体为检体S的情况下，在算出的时间T经过前驱动控制驱动马达71。由此使回收容器69向上移动，分离提取喷嘴14的前端14b被插入回收容器69内的液体中，然后，处于前端14b的包含检体S的分离提取溶液50被分离提取到回收容器69内的液体中。即，控制机构64基于由光信息测定部67测定的光信息算出检体S的流速V，并且基于流速V，算出检体S到达分离提取喷嘴14的前端14b的时间T。控制机构64使回收容器69移动，从而在该时间T前将分离提取喷嘴14的前端14b浸渍到回收容器内的液体中。
图4(a)～(d)是图3中的分离提取机构62的动作的说明图，图5(a)～(b)是进行图4所示的动作时分离提取喷嘴附近的放大图。
首先，在备用状态下，吸引喷嘴52停在与不接触分离提取喷嘴14的侧面14c的位置相距不超过1mm左右的接近位置，吸引从分离提取喷嘴前端排出的排液或包含非目标检体SR、判定为不可分离提取的目标检体S的排液(图4(a))。此时，排液以规定压力从分离提取喷嘴14的前端14b被排出，成为向下凸出形状的排液80a(图5(a))，进而因分离提取喷嘴14的表面张力而沿着外侧壁14c向上鼓起，成为大致球形的排液80b(图5(b))。然后，排液80b因吸引喷嘴52的吸引力而成为从前端14b向前端52b流动的排液81(图5(c)的箭头E)。此时，吸引喷嘴的前端52b的端面优选设置成与分离提取喷嘴14内的流动方向大致平行。由此，能够可靠地吸引排液。
判定检体是可分离提取的检体S的情况下，通过在规定的时刻驱动驱动马达70，使吸引喷嘴52向上移动(箭头82)(图4(b))。该吸引喷嘴52进行斜向上或者垂直向上移动的动作。另外，在吸引喷嘴52向上移动的同时，通过驱动马达71使回收容器69向上移动(箭头83)，回收容器69停在分离提取喷嘴14的前端14b能插入回收容器69内的液体中的位置。即，在检体S从分离提取喷嘴14排出前，将分离提取喷嘴14插入到回收容器69。从吸引喷嘴52开始移动到分离提取喷嘴14能插入回收容器69内的液体中为止所需的时间例如为40ms。另外，检体S从分离提取喷嘴14的前端被排出的时间T例如为70ms。然后，包含检体S的分离提取溶液86被分离提取到回收容器69中(图4(c))。此时，包含检体S的分离提取溶液86以不与外部气体、前端14b的端面接触的方式与回收容器69内的液体F混合(图5(d))。
一旦检体S被分离提取，回收容器69就在驱动马达71的作用下向下移动(箭头84)(图4(d))。另外，在回收容器69向下移动的同时或者移动开始后，在驱动马达70的作用下吸引喷嘴52向下移动(箭头85)。该吸引喷嘴52进行斜向下或者垂直向下移动的动作。从回收容器69开始移动到吸引喷嘴52停止所需的时间例如为120ms。通过本动作，吸引喷嘴52及回收容器69回到备用位置，吸引喷嘴52再次吸引从分离提取喷嘴14的前端14b被排出的包含检体SR的排液。
应予说明，在回收容器69向下移动时，回收容器69内的液体F附着于分离提取喷嘴14的外侧壁14c、前端14b的端面，该附着的液体F的一部分垂下到回收容器69中，有时成为导致目标检体S污染的原因。另外，包含目标检体S的液滴附着于分离提取喷嘴14，使得目标检体S没有被分离提取到回收容器69内，有时导致分离提取精度下降。因此，作为分离提取喷嘴14的变形例，也可以采用在端部具有锥形部53a的分离提取喷嘴53(图6(a))。由此，提高附着于锥形部53a、端面53b的液体的沥水，能够抑制液体垂下导致的目标检体S的污染。另外，也可以采用具有端部相对于流动方向以规定角度被切断的切断面54a的分离提取喷嘴54(图6(b))。根据本形状，也能够提高附着于锥形部54a、端面54b的液体的沥水。
图7是图1的检体识别分离提取装置1执行的检体识别分离提取处理的流程图。
首先，将分散在液体A中的检体S、SR收纳在检体收纳部11中(步骤S11)，使吸引喷嘴52的前端52b接近分离提取喷嘴14的前端14b，并停止在备用位置(步骤S12)。于是，由管17施加规定压力，将液体A输送到流路14a中(步骤S13)。
接下来，对在流路14a中流动的检体S、SR照射激发光(步骤S14)，测定由各光接收元件接收的光信息，基于该光信息，判定在流路14a中流动的各检体是作为目标检体的检体S还是作为非目标检体的检体SR(步骤S17)。
在流路14a中流动的各检体是作为目标检体的检体S的情况下，使吸引喷嘴52从备用位置退避，使吸引喷嘴52的前端52b从分离提取喷嘴14的前端14b离开(步骤S18)。另外，在吸引喷嘴52退避的同时，移动回收容器69，使分离提取喷嘴14的前端14b浸渍在回收容器69内的液体中(步骤S19)。然后，将包含检体S的分离提取溶液分离提取到回收容器69内，由回收容器69回收检体S(步骤S20)。然后，移动回收容器69，使其退避至备用位置(步骤S21)，并且将吸引喷嘴52再次移动到备用位置，使吸引喷嘴52的前端52b接近分离提取喷嘴14的前端14b(步骤S22)，结束本处理。
如上所述，根据本实施方式，基于检体S的光信息算出目标检体的流速V，并且基于流速V，算出检体S到达分离提取喷嘴前端的时间T。另外，移动回收容器69，从而使分离提取喷嘴前端在该时间T前被浸渍到回收容器69内的液体中。然后，将从分离提取喷嘴14的前端14b排出的包含检体S的分离提取溶液86分离提取到回收容器69中。由此，能够使检体S以不与分离提取喷嘴14的端面、外壁或者外部气体接触的方式被回收到回收容器69的液体中，防止检体S因接触分离提取喷嘴14、外部气体而损伤、汚染。另外，因为将从分离提取喷嘴14的前端14b排出的包含检体SR的排液吸引回收，所以，与现有构成相比，能够显著缩短将排液回收部向上及向下移动的机械动作的移动距离、动作时间，能够实现分离提取处理的快速化。
此处，吸引喷嘴52以吸引来自分离提取喷嘴14的排液所需的压力进行吸引，所以该吸引压力可能对在分离提取喷嘴14的流路14a中流动的液体A、鞘流液B带来影响。即，通过吸引的力对前端14b附近的检体液流施加加速度，导致流速V改变，可能导致检体S在比通过控制机构64算出的时间T早的时刻从分离提取喷嘴14排出。另外，如果吸引喷嘴52相对于分离提取喷嘴14的位置不合适，则无法有效地吸引来自分离提取喷嘴14的排液。
因此，首先在本实施方式中，如下所述地设定排液回收时的分离提取喷嘴14的流动方向和吸引喷嘴52的流动方向的角度。即，如图8所示，移动机构63按在吸引喷嘴52的前端52b的流动方向89相对于在分离提取喷嘴14的前端14b的流动方向88成规定角度α的方式，使吸引喷嘴52从分离提取喷嘴14的侧方接近。优选规定角度α1被设定为大于70°、小于180°(图8(a))，优选规定角度α2被设定为大于70°、小于110°(图8(b))。由此，能够大幅抑制吸引喷嘴52的吸引力对在分离提取喷嘴14的流路14a中流动的液体A、鞘流液B的作用，能够执行准确的分离提取处理。进而，规定角度α大于80°、小于90°的情况下，能够抑制吸引喷嘴52的吸引力对在分离提取喷嘴14的流路14a中流动的液体A、鞘流液B的作用，并且能够抑制排液从吸引喷嘴52的前端52b附近落下。
另外，由吸引喷嘴52的吸引作用也可通过排液回收时的分离提取喷嘴14的前端14b和吸引喷嘴52的前端52b的位置关系加以抑制。实际上，如图5(b)所示，在分离提取喷嘴14的前端14b形成的液滴在表面张力的作用下沿着外侧壁14c略向上方升起，所以可以在考虑该液滴的上升量的情况下，决定分离提取喷嘴14的前端14b和吸引喷嘴52的前端52b的位置关系。
图9(a)及(b)是排液回收时的分离提取喷嘴14的前端14b和吸引喷嘴52的前端52b的具体位置关系的说明图。应予说明，图9(a)及(b)是对应于图8(a)及(b)的图，分别表示α1＝80°、α2＝100°的情况。
设定为在吸引喷嘴52接近分离提取喷嘴14时，分离提取喷嘴14的前端14b中的最下端高度h比吸引喷嘴52的前端52b中的内周面最下部高度Hlow高，并且比其内周面最上部高度Hhigh低，另外，设定为Hlow比Hd低。该内周面最下部高度是指吸引喷嘴的内侧面52c中最低部分的高度，内周面最上部高度是指吸引喷嘴的内侧面52c中最高部分的高度。另外，Hd是指在分离提取喷嘴14的前端14b形成的球状液滴的上端部高度。根据这样的位置关系，吸引在表面张力作用下向分离提取喷嘴侧方升起的液滴部分，所以，由分离提取喷嘴14的侧壁缓和吸引喷嘴52的吸引力对样品液流的干扰。因此，能够进一步抑制对在流路14a中流动的液体A、鞘流液B的作用，能够执行更准确的分离提取处理。
另外，在图9(a)及(b)中，以α1＝80°、α2＝100°的情况为例进行了说明，但分离提取喷嘴14的最下端高度h满足h＜Hhigh并且Hlow＜Hd的关系的情况下，规定角度α可以被设定为任意值。
另外，在分离提取喷嘴14的前端14b中的最下端高度h也可以被设定为比吸引喷嘴52的前端52b的内周面最下部高度Hlow低(图10(a))。在h＜Hlow的情况下，沿分离提取喷嘴14的外侧壁14c上升的液滴80b(图10(b))附近的空气被吸引喷嘴52吸引，由此在喷嘴周围形成环绕圆筒的空气流G(图10(c))。在该空气流G的作用下，液滴80b在吸引喷嘴52的中央附近与空气一起被吸引。由此，上升到喷嘴侧方的液滴几乎全部被吸引。根据该位置关系，几乎没有残留在分离提取喷嘴的外侧壁14c的、可能包含非目标检体SR、判定为不可分离提取的目标检体S的液滴。因此，能够不影响样品液流地吸引排液，并且能够以不残留围绕分离提取喷嘴14的液滴的方式吸引排液。结果，能够执行准确的分离提取处理。
进而，对于Hlow＜Hd的条件，如图11所示，吸引喷嘴52的中央位置更优选以与液滴80b的上端部高度Hd相同或达到其近边的高度的方式配置。通过以该位置关系进行吸引动作，根据与上述相同的理由能够执行更准确的分离提取处理。
其次，在分离提取处理中，分离提取喷嘴14被多次浸渍在回收容器69的同一孔W中的情况下，回收容器69内的溶液量并不始终一样，会随着分离提取次数而增加。因此，在分离提取时的分离提取喷嘴14和回收容器69的位置关系一定的情况下，分离提取喷嘴14的前端14b中的压力随着回收容器69内的溶液的水压而改变，该水压可能对在分离提取喷嘴14的流路14a中流动的液体A、鞘流液B产生影响。
因此，在本实施方式中，控制机构64可被构成为能够存储在图7的步骤S16中检测到检体S的次数，并对应于检体S的检测次数改变该回收容器69的移动位置。
具体而言，在第一次分离提取处理中，以分离提取喷嘴14的前端14b和回收容器69中的孔W的底面的距离达到L1的方式移动回收容器(图12(a))。在第二次分离提取处理中，按分离提取喷嘴14的前端14b和回收容器69中的孔W的底面的距离成为L2(L1＜L2)的方式移动回收容器(图12(b))。进而，在第二次分离提取处理中，按分离提取喷嘴14的前端14b和回收容器69中的孔W的底面的距离成为L3(L2＜L3)的方式移动回收容器(图12(c))。即，对应于检体S的检测次数增加，增加分离提取喷嘴14的前端14b和回收容器的距离。由此，即使回收容器69内的溶液量随着检体S的检测次数而增加，分离提取喷嘴14的前端14b与水面的距离也是一定的，所以能够使分离提取喷嘴14的前端14b中的水压大体一定，能够执行准确的分离提取处理。应予说明，作为其他控制方法，也可以以从水面到14b的距离为L，由移动机构63执行距离L一定的控制。
另外，在分离提取时的分离提取喷嘴14和回收容器69的位置关系一定的情况下，也可以改变分离提取喷嘴14的前端14b的输送压力。在该情况下，压力控制部65构成为根据来自控制机构64的信号改变分离提取喷嘴14的流路14b中的液体的输送压力。控制机构64在使回收容器69移动时，对应于检体S的检测次数增加，增大包含检体S的液体的输送压力。输送压力的变化量可以一定，也可以对应于检测次数增大或减少。
例如，如图13所示，第一次分离提取处理以图13(a)所示的位置关系执行的情况下，在第二次分离提取处理时，执行压力控制，即在通常的控制压P上加上对应于分离提取喷嘴14的前端14b的深度的ΔP1(图13(b))。同样地，第三次分离提取处理时，执行压力控制，即在控制压P上加上对应于分离提取喷嘴14的前端14b的深度的ΔP2(图13(c))。
根据本构成，即使在回收容器69内的溶液量增大而在分离提取喷嘴14的前端14b中的水压增大的情况下，也能够通过以对应于该水压的输送压力从分离提取喷嘴14的前端14b分离提取液体，由此执行准确的分离提取处理。
应予说明，在上述实施方式中，设置具有吸引喷嘴52的排液回收部50，但只要是执行本发明的分离提取处理中的步骤S19、S20的构成即可，并不是必须为吸引喷嘴。也可以代替排液回收部50，设置对从分离提取喷嘴前端排出的排液或包含非目标检体SR、判定为不可分离提取的目标检体S的排液进行回收的排液槽。该排液槽能够使用与现有构成相同的产品，通过本构成也能够实现上述效果。
另外，在进行上述分离提取处理时，将分离提取喷嘴14固定并移动回收容器69，但并不限定于此，也可以设置驱动分离提取喷嘴14的未图示的驱动马达，使分离提取喷嘴14移动，而固定回收容器69。另外，也可以使分离提取喷嘴14和回收容器69双方相对移动。
另外，在上述实施方式中，1个吸引喷嘴设置1个吸引路，但并不限定于此，也可以1个吸引喷嘴设置2个以上吸引路。
例如图14(a)及(b)所示，吸引喷嘴90也可以由一体化部件构成，其具有方向彼此不同的中央轴X1、X2、并且具有一端侧的开口部91a、92a彼此接近而构成的2个吸引孔91、92。优选在俯视时中央轴X1、X2构成的角度大于0°小于180°。在吸引孔91、92的另一端侧，连接用于通过负压吸引排液的未图示的管等。吸引排液时，移动吸引喷嘴90的开口部91a、92a使其接近分离提取喷嘴14的前端14b，通过吸引孔91、92从2个方向吸引从分离提取喷嘴14出来的排液。另外，分注时，使吸引喷嘴90向斜上方移动而退避，使回收容器向上方移动(图14(c))。
根据本构成，与由1个吸引喷嘴吸引的情况相比，能够提高排液的吸引精度。另外，在1个吸引喷嘴的情况下，关于分离提取喷嘴14，在吸引喷嘴90的前端的配置位置的相反侧形成死区，在该死区残留排液而出现吸引不均。另一方面，只要将2个吸引孔91、92按成为上述角度的方式进行配置并吸引，就能够防止出现死区。因此，能够防止出现吸引不均，提高分类精度。
应予说明，在图14的吸引喷嘴90上设置有2个吸引孔91、92，但并不限定于此，也可以如图15所示，设置具有彼此不同方向的中央轴X3、X4，前端93a、94a彼此接近而成的2个吸引管93、94。由此，通过分别设置2个吸引路的构成，能够实现与上述相同的效果。
另外，在上述实施方式中，设定为分离提取喷嘴14的前端14b中的最下端高度h比吸引喷嘴52的前端52b中的内周面最下部高度Hlow高、并且比其内周面最上部高度Hhigh低(图9)，或者设定为分离提取喷嘴14的前端14b中的最下端高度h比吸引喷嘴52的前端52b的内周面最下部高度Hlow低(图10(a))，但并不限定于此。也可以如图16所示，设定为分离提取喷嘴14的前端14b中的最下端高度h比吸引喷嘴52的前端52b中的内周面最下部高度Hlow高、并且比其内周面最上部高度Hhigh高。
以上，基于实施方式具体说明本发明人所实施的发明，但本发明并不限定于上述实施方式，也可以在不脱离其主旨的范围内变更。
符号说明
1 检体识别分离提取装置
11 检体收纳部
14 分离提取喷嘴
50 排液回收部
61 识别机构
62 分离提取机构
64 控制机构
65 压力控制部
66 光照射部
67 光信息测定部
68 判定部
69 回收容器

Claims (12)

1.一种检体识别分离提取装置，是对分散在液体中的作为被测定对象的检体进行识别、基于识别结果对目标检体进行分离提取的检体识别分离提取装置，其特征在于，具有：
识别机构，所述识别机构具有：对分散在液体中的检体进行收纳的检体收纳部，用于将所述液体输送到流路的压力控制部，用于对检体照射光的光照射部，对所述检体的光信息进行测定的光信息测定部，基于所述光信息判定所述检体为目标检体还是非目标检体的判定部，
分离提取机构，所述分离提取机构具有：具有与所述识别机构的流路连通的流路、并通过插入回收容器内的液体中而将包含目标检体的分离提取溶液分离提取到回收容器的分离提取喷嘴，对包含目标检体的分离提取溶液进行回收的回收容器，对从所述分离提取喷嘴前端排出的排液进行吸引回收的排液回收部，
将所述分离提取喷嘴及所述回收容器中的至少一方移动的移动机构，
基于由所述光信息测定部测定的光信息，使所述分离提取喷嘴及/或所述回收容器相对移动的控制机构，
所述排液回收部具有：对从所述分离提取喷嘴前端排出的包含非目标检体的排液进行吸引的吸引喷嘴，
所述吸引喷嘴接近所述分离提取喷嘴时，所述分离提取喷嘴前端中的最下端高度h比所述吸引喷嘴前端内周面最上部高度Hhigh低。
2.如权利要求1所述的检体识别分离提取装置，其特征在于，从所述分离提取喷嘴前端排出的包含非目标检体的排液是包含非目标检体和判断为无法分离提取的检体的排液。
3.如权利要求1或2所述的检体识别分离提取装置，其特征在于，所述吸引喷嘴具有多个吸引路。
4.如权利要求1或2所述的检体识别分离提取装置，其特征在于，所述移动机构移动所述吸引喷嘴。
5.如权利要求4所述的检体识别分离提取装置，其特征在于，所述移动机构使所述吸引喷嘴从所述分离提取喷嘴的侧方接近。
6.如权利要求1或2所述的检体识别分离提取装置，其特征在于，所述控制机构算出目标检体的流速V，并且基于流速V，算出所述目标检体到达所述分离提取喷嘴前端的时间T，以能够在该时间T经过前将所述分离提取喷嘴前端浸渍到所述回收容器内的液体中的方式，使所述分离提取喷嘴及/或所述回收容器相对移动。
7.如权利要求1或2所述的检体识别分离提取装置，其特征在于，所述吸引喷嘴接近所述分离提取喷嘴时，所述分离提取喷嘴前端中的最下端高度h比所述吸引喷嘴前端内周面最上部高度Hhigh低，并且比所述吸引喷嘴的前端的内周面最下部高度Hlow低。
8.如权利要求5所述的检体识别分离提取装置，其特征在于，所述移动机构以在所述吸引喷嘴前端的流动方向相对于在所述分离提取喷嘴前端的流动方向成规定角度α的方式，使所述吸引喷嘴从所述分离提取喷嘴的侧方接近，
所述规定角度α满足70°＜α＜110°。
9.如权利要求1或2所述的检体识别分离提取装置，其特征在于，所述控制机构在使所述分离提取喷嘴及/或所述回收容器相对移动时，对应于目标检体的分离提取次数的增加，使所述分离提取喷嘴的前端与所述回收容器的距离增大。
10.如权利要求1或2所述的检体识别分离提取装置，其特征在于，所述压力控制部在使所述分离提取喷嘴及/或所述回收容器相对移动时，对应于目标检体的分离提取次数的增加，使所述包含目标检体的液体的输送压力增大。
11.一种检体识别分离提取方法，是对分散在液体中的作为被测定对象的检体进行识别、基于识别结果对目标检体进行分离提取的检体识别分离提取方法，其特征在于，具有：
对分散在液体中的检体进行收纳的收纳步骤，
将所述液体输送到流路的液体输送步骤，
对检体照射光的照射步骤，
对所述检体的光信息进行测定的测定步骤，
基于所述光信息、判定所述检体为目标检体还是非目标检体的判定步骤，
用吸引喷嘴对从与所述流路连通的分离提取喷嘴的前端排出的排液进行吸引回收的回收步骤，
基于所述光信息，以能够将所述分离提取喷嘴前端插入回收容器内的方式使所述分离提取喷嘴及/或所述回收容器相对移动的控制步骤，
通过插入回收容器内的液体中而将从所述分离提取喷嘴前端排出的包含目标检体的分离提取溶液分离提取到所述回收容器中的分离提取步骤，
所述检体识别分离提取方法使用权利要求1至10中任一项所述的检体识别分离提取装置。
12.如权利要求11所述的检体识别分离提取方法，其特征在于，从与所述流路连通的分离提取喷嘴的前端排出的排液是包含非目标检体、判断为无法分离提取的检体的排液。
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