CN104755090A - 用于除去有毒化合物的食品级细菌 - Google Patents

用于除去有毒化合物的食品级细菌 Download PDF

Info

Publication number
CN104755090A
CN104755090A CN201380029656.XA CN201380029656A CN104755090A CN 104755090 A CN104755090 A CN 104755090A CN 201380029656 A CN201380029656 A CN 201380029656A CN 104755090 A CN104755090 A CN 104755090A
Authority
CN
China
Prior art keywords
food grade
lactobacillus
grade bacteria
toxic compounds
bacteria
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201380029656.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN104755090B (zh
Inventor
乔丹·比桑茨
格雷戈尔·里德
马克·莫纳凯西
约翰·范·海尔卡马·弗利格
塔玛拉·斯莫奎纳
杰里米·伯顿
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
London Health Sciences Centre Research Inc
Gervais Danone SA
Original Assignee
London Health Sciences Centre Research Inc
Gervais Danone SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by London Health Sciences Centre Research Inc, Gervais Danone SA filed Critical London Health Sciences Centre Research Inc
Publication of CN104755090A publication Critical patent/CN104755090A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104755090B publication Critical patent/CN104755090B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A62—LIFE-SAVING; FIRE-FIGHTING
    • A62D—CHEMICAL MEANS FOR EXTINGUISHING FIRES OR FOR COMBATING OR PROTECTING AGAINST HARMFUL CHEMICAL AGENTS; CHEMICAL MATERIALS FOR USE IN BREATHING APPARATUS
    • A62D3/00—Processes for making harmful chemical substances harmless or less harmful, by effecting a chemical change in the substances
    • A62D3/02—Processes for making harmful chemical substances harmless or less harmful, by effecting a chemical change in the substances by biological methods, i.e. processes using enzymes or microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
    • C12N15/746—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora for lactic acid bacteria (Streptococcus; Lactococcus; Lactobacillus; Pediococcus; Enterococcus; Leuconostoc; Propionibacterium; Bifidobacterium; Sporolactobacillus)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/175—Rhamnosus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/102—Mutagenizing nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Emergency Management (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Business, Economics & Management (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及食品级细菌以及用于从被污染的环境或物质中除去包括铅、镉、汞、砷和杀虫剂在内的有毒化合物的方法。

Description

用于除去有毒化合物的食品级细菌
技术领域
本发明涉及用于提高解毒作用的食品级细菌。更具体地，本发明涉及食品级细菌或其提取物，以及使用食品级细菌或其提取物来减少所摄入的有毒化合物的摄取的方法和将有毒化合物与食品级细菌暴露于其中的环境隔离的方法。
背景技术
一般而言，人类和动物暴露于许多对环境、食物链、水源以及构成日常生活的一部分的各种物品造成污染的有毒化合物之下。在数量、类型和暴露方面，这些有毒化合物范围从牙膏和洗发水的成分波及到井水中的药物和病原体。在加拿大原住民和因纽特人中，环境毒素是导致其它非常普遍的疾病的危险因素，尤其是2型糖尿病[Sharp D.，环境毒素，造成加拿大土著居民糖尿病的潜在危险因素，Int J Circumpolar Health.2009；68(4):316-26]。大型柜台交易消费者市场已经假借‘解毒’的幌子兴起，但是大部分产品并不具有合理或临床证据来支持它们的用途。解毒的概念对消费者具有很大的吸引力，包括注重健康的人和其他关注媒体中越来越多的关于与有毒物质有关的污染和疾病的故事的人。因此，在该区域拥有极大的兴趣，几乎没有有效产品以及不断增长的需求。
最近，在加拿大通过施用益生菌补充或增加有益生物体变得相对可行，并且已经在消费者和保健专家之间引起很大的兴趣。实际上，在北美，益生菌是增长最快的食物部分之一。然而，对內源微生物和外源益生菌影响受试者的机理的深入了解受到了限制。
益生菌乳杆菌和双歧杆菌已经显示出有助于管理若干肠道病症。例如，美国专利No.6，641，808公开了使用乳杆菌用于治疗肥胖症；美国专利No.5，531，988公开了一种免疫球蛋白和细菌的混合物，诸如乳杆菌或双歧杆菌或其混合物，该混合物可以用来治疗腹泻、便秘、和气体/痉挛；美国专利No.6，080，401公开了一种益生菌的组合，该益生菌具有嗜酸乳杆菌和两歧双歧杆菌和中草药制剂，用于帮助减肥等。
益生菌产品改良毒素的能力很少得到研究，但是仍然具有某些基础。例如，已经发现乳杆菌和/或双歧杆菌来改变受试者的肠道代谢指纹(metabolicsignature)[Ndagijimana、M.LaghiL、VitaliB、Placucci G、Brigidi P、Guerzoni ME.通过1H核磁共振光谱评价合生素食品消耗对人类肠道代谢分布(metabolicprofiles)的影响.Int J Food Microbiol.2009；134:147-153]；结合到黄曲霉毒素(乳杆菌菌株)上[Hernandez-Mendoza A、Garcia HS，Steele JL，筛选有能力结合黄曲霉毒素B1的干酪乳杆菌菌株.Food Chem Toxicol.2009；47(6):1064-8]；并解毒或结合并消除其它霉菌毒素(动物双歧杆菌)[Fuchs S、Sontag G、Stidl R、EhrlichV、undi M、Knasmuller S.通过乳酸菌解毒棒曲霉毒素和赭曲霉毒素A两个丰富的霉菌毒素Food Chem Toxicol.2008；46(4):1398-407]。
总之，与有毒化合物相关联的问题真实存在，并且越来越受消费者关注。
重金属
重金属毒性是21世纪中最大健康风险之一。通过环境暴露和食物对铅和镉的消耗已经是不良健康结果的直接原因，这些不良健康结果包括：神经功能损伤和IQ损失、骨质疏松、肺癌和肾癌。
重金属(诸如铅和镉)存在于自然环境中，因此，随着时间的推移，许多细菌已经对这些金属形成了抗性机制，该抗性机制通常包括主动沉淀并隔离细胞内/外的金属或主动将金属排出细胞质外。已经对非食品级细菌在重金属的隔离和解毒中的用途进行了研究，并且已获得成功(JS Singh等，基因工程菌：一种用于环境修复和未来研究视角的新兴工具Gene.July 2011.40(1-2):1-9)；Rajkumar等，产铁载体的细菌用于提高重金属植物提取的潜能Trends Biotechnol.March2010.28(3):142-149)。
汞
汞是人类已知的毒性最大的物质之一，并且受试者对其的消耗与不良健康结果紧密相关，该不良健康结果包括儿童神经发育变异。还有，估计北美人和欧洲人每天消耗6.7微克的无机汞和甲基汞(世界卫生组织，1991)。
汞存在于自然环境中，并且，就其本身而言，许多细菌已经采用对它的抗性机制，这通常降低周围环境中的汞水平。已经对许多非食品级细菌在环境中的汞和汞化合物的隔离和解毒中的用途进行了研究，然而，食品级细菌的申请至今仍未得到演示。
砷
砷是一种类金属元素，通常有两种氧化状态：砷酸盐(As V)和亚砷酸盐(AsIII)。通常发现砷遍布于全球地壳，它高度溶于水并在地下水中高浓度发现。砷的毒性已经与许多种情况紧密相关，并且，众所周知的是导致器官衰竭、癌症和死亡。主要暴露途径是通过经由饮食的摄入，通常砷污染的水被用于灌溉农田，从而导致金属在植物和食品中累积。
杀虫剂
杀虫剂(诸如马拉硫磷和对硫磷)被归类为有机磷酸盐化合物并且作为胆碱酯酶抑制剂。马拉硫磷是在美国最广泛使用的杀虫剂之一，并且最近，对硫磷由于高毒性被限制使用，而且在许多发达国家不被使用。然而，农产品进口仍然始终对农产品上的对硫磷水平进行监测，并且在北美，它被用在某些罕见的情况中。
公众暴露的主要途径是通过经由饮食的消耗。如果不正确地遵循安全协议，那么农业工人和工业工人经过工作地点时通过吸收或吸入而导致暴露风险会增加。
鉴于与上述任何有毒化合物的暴露相关联的问题，有利的是，可提供能够将包括重金属、汞、砷、杀虫剂(诸如马拉硫磷和对硫磷或其组合)在内的有毒化合物与受试者的胃肠道相隔离的食品级细菌，以便减少可被受试者吸收的有毒化合物的数量，同时，对有毒化合物的解毒直接减少了可被受试者吸收的有毒化合物的毒性。
发明内容
本发明的目的是提供食品级细菌或其提取物，用于从环境中或从食品级细菌暴露于其中的物质中除去和/或中和有毒产品，其解决了传统解毒处理中固有的不足。本发明提供了方法和食品级细菌的用途，该食品级细菌用于除去和/或中和在动物的内环境中、动物暴露于其中的环境中或动物摄入或要摄入的物质中发现的有毒产物，它可以避免不良副作用，成本合理，并且可以有利于降低与所述有毒产物有关的疾病的风险。而且，本发明比较容易制造并且向受试者输送。
本发明的目的是提供食品级细菌或其提取物，通过减少受试者暴露于有毒化合物和摄取有毒化合物的应用来解毒和/或隔离包括重金属、汞、砷和杀虫剂在内的有毒化合物。
正因为如此，在一个实施例中，本发明提供了食品级细菌或其提取物，用于从物质或食品级细菌暴露于其中的环境中除去有毒化合物。
在一个实施例中，本发明提供了一种组合物，该组合物包括食品级细菌和合适载体，其中组合物包括有效剂量的食品级细菌以便从物质或食品级细菌暴露于其中的环境中除去有毒化合物。
在本发明的组合物的一个实施例中，治疗有效剂量为每毫升或更少的合适载体至少有约1×109的食品级细菌。
在本发明的组合物的另一实施例中，合适载体为含有碳水化合物的培养基。
在本发明的组合物的另一实施例中，含有碳水化合物的培养基为奶制品(milk-based product)。
在本发明的组合物的另一实施例中，有毒化合物选自由铅、镉、汞、砷、马拉硫磷和对硫磷组成的组(group)。
在本发明的组合物的另一实施例中，提供死亡或活体食品级细菌。
在本发明的组合物的另一实施例中，食品级细菌作为提取物来提供。
在本发明的组合物的另一实施例中，组合物包括两种或者多种不同的食品级细菌的组合。
在本发明的组合物的另一实施例中，组合物包括鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、发酵乳杆菌、约氏乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、和淀粉乳杆菌的菌株中两株或多株的组合。
在本发明的组合物的另一实施例中，食品级细菌选自下面所示的表1中列出的食品级细菌的组。值得一提的是，目的细菌菌株(bacteria strain of interest)是根据布达佩斯条约2013年3月5日保藏在CNCM(法国生物保藏中心，25rue duDocteur Roux，巴黎)的鼠李糖乳杆菌菌株，保藏号CNCM 1-4716。该菌株也被称为“DN 116-060”或R37。
在本发明的组合物的另一实施例中，环境为水环境。
在另一实施例中，本发明是一种组合物，该组合物包括食品级细菌、载体和动物饲料，其中食品级细菌能够从物质或食品级细菌暴露于其中的环境中除去有毒化合物，并且食品级细菌包括选自由表1中列出的食品级细菌或其任何组合组成的组的细菌分离株。
在一个实施例中，本发明是一种方法，用于减少受试者摄取被受试者消耗的有毒化合物，该方法包括：对受试者施用有效剂量的食品级细菌，该食品级细菌能够隔离受试者所消耗的有毒化合物。
在另一实施例中，提供了一种方法，其用于从物质或被污染的或怀疑被有毒化合物污染的环境中除去有毒化合物，该方法包括：将物质或环境与能够从物质或环境中除去有毒化合物的食品级细菌相接触。
在一个实施例中，本发明是一种减少受试者体内的有毒化合物的毒性作用的方法，该方法包括：对受试者施用治疗有效剂量的食品级细菌，该食品级细菌能够从物质或环境中除去有毒化合物。
在本发明的前述方法的一个实施例中，有毒化合物选自由铅、镉、汞、砷、马拉硫磷和对硫磷组成的组。
在本发明的前述方法的另一实施例中，提供了死亡或活体食品级细菌。
在本发明的前述方法的另一实施例中，食品级细菌作为提取物来提供。
在本发明的前述方法的另一实施例中，食品级细菌包括两种或多种不同的食品级细菌的组合。
在本发明的前述方法的另一实施例中，组合物包括鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、发酵乳杆菌、约氏乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、和淀粉乳杆菌的菌株中两种或多种的组合。
在本发明的前述方法的另一实施例中，食品级细菌选自表1中列出的食品级细菌的组。
在一个实施例中，本发明是一种获得能够从环境中除去有毒化合物的乳杆菌菌株的方法，该方法包括步骤：诱变或遗传转化乳杆菌。
在一个实施例中，本发明是一种方法，其用于获得能够从环境中除去有毒化合物的细胞级分，该方法包括以下步骤：(a)培养乳杆菌菌株；和(b)从步骤(a)中的培养物中回收细胞级分(cell fraction)。
在后两种方法的一个实施例中，有毒化合物选自由铅、镉、汞、砷、马拉硫磷和对硫磷组成的组。在另一个实施例中，提供了死亡或活体乳杆菌。在另一实施例中，乳杆菌作为提取物来提供。在另一实施例中，乳杆菌包括两株或多株不同的菌株的组合。在另一实施例中，乳杆菌选自表1中列出的乳杆菌的组。
在一个实施例中，本发明是食品级细菌的用途，其用于从物质或环境除去有毒化合物。
在食品级细菌的用途的一个实施例中，有毒化合物选自由铅、镉、汞、砷、马拉硫磷和对硫磷组成的组。
在食品级细菌的用途的另一实施例中，提供了死亡或活体食品级细菌。
在食品级细菌的用途的另一实施例中，食品级细菌作为提取物来提供。
在食品级细菌的用途的另一实施例中，食品级细菌作为两种或多种不同的食品级细菌的组合来提供。
在食品级细菌的用途的另一实施例中，食品级细菌作为鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、发酵乳杆菌、约氏乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、和淀粉乳杆菌的菌株中两株或多株来提供。
在食品级细菌的用途的另一实施例中，食品级细菌选自表1中列出的食品级细菌的组。
在另一实施例中，本发明提供了一种方法，其用于从疑为被所述有毒化合物所污染的物质中除去有毒化合物，该方法包括：将物质与能够从物质中除去有毒化合物的食品级细菌或其提取物相接触。
在另一实施例中，本发明提供了一种减少受试者体内的有毒化合物的毒性作用的方法，该方法包括：对受试者施用表1中的治疗有效剂量的食品级细菌或其任何组合。
在一个实施例中，本发明提供了一种获得能够从环境中除去有毒化合物的乳杆菌菌株的方法，该方法包括步骤：诱变或遗传转化乳杆菌。
在另一实施例中，本发明是一种方法，其用于获得能够从环境中除去有毒化合物的细胞级分。该方法在一个实施例中包括步骤：(a)培养乳杆菌菌株；和(b)从步骤(a)中的培养物中回收细胞级分。
在本发明方法的一个实施例中，食品级细菌包括两种或多种不同的食品级细菌的组合。
在本发明的一个实施例中，食品级细菌是乳杆菌。
在本发明的一个方面中，有毒化合物包括重金属。
在本发明的另一方面中，有毒化合物包括重金属，并且食品级细菌包括死亡细菌。
在本发明的另一方面中，有毒化合物包括重金属，并且食品级细菌包括活体细菌。
在本发明的另一方面中，有毒化合物包括重金属，并且食品级细菌包括死亡细菌和活体细菌的混合物。
在本发明的另一方面中，重金属为镉。
在本发明的另一方面中，重金属为铅。
在本发明的另一方面中，有毒化合物包括汞。
在本发明的另一方面中，汞为无机汞。
在本发明的另一方面中，汞为有机汞.
在本发明的一个方面中，有毒化合物包括汞，并且食品级细菌包括死亡细菌。
在本发明的一个方面中，有毒化合物包括汞，并且食品级细菌包括活体细菌。
在本发明的一个方面中，有毒化合物包括汞，并且食品级细菌包括死亡细菌和活体细菌的混合物。
在本发明的另一方面中，有毒化合物包括砷。
在本发明的一个方面中，有毒化合物包括砷，并且食品级细菌包括死亡细菌。
在本发明的一个方面中，有毒化合物包括砷，并且食品级细菌包括活体细菌。
在本发明的一个方面中，有毒化合物包括砷，并且食物级细菌包括死亡细菌和活体细菌的混合物。
在本发明的另一方面中，有毒化合物包括杀虫剂。
在本发明的一个方面中，有毒化合物包括杀虫剂，并且食品级细菌包括死亡细菌。
在本发明的一个方面中，有毒化合物包括杀虫剂，并且食品级细菌包括活体细菌。
在本发明的一个方面中，有毒化合物包括杀虫剂，并且食品级细菌包括死亡细菌和活体细菌的混合物。
在本发明的另一个方面中，杀虫剂选自马拉硫磷或对硫磷。
在本发明的另一方面中，有毒化合物包括包括内毒素。
在本发明的另一方面中，有毒化合物包括杂环芳香胺。
在本发明的另一方面中，有毒化合物包括丙烯酰胺。
附图说明
结合本文中给出的详细描述和附图将更充分地理解本发明，这些附图是仅以举例说明的方式给出，并不限制本发明的预定范围。
图1A是一曲线图，其示出了食品级乳杆菌从溶液中除去铅(Pb)的能力(误差棒±SEM)。
图1B是一个曲线图，其示出了食品级乳杆菌从溶液中除去镉(Cd)的能力(误差棒±SEM)。
图2A是一曲线图，其示出了与大肠杆菌相比食品级乳杆菌从溶液中除去铅(Pb)的能力(误差棒±SEM)。
图2B是一曲线图，其示出了与大肠杆菌相比食品级乳杆菌除去镉(Cd)的能力(误差棒±SEM)。
图3A是一曲线图，其示出了活体和死亡食品级乳杆菌从溶液中除去铅(Pb)的能力(误差棒±SEM)。
图3B是一曲线图，其示出了活体和死亡食品级乳杆菌从溶液中除去镉(Cd)的能力(误差棒+SEM)。
图4是在不添加金属(面板(panel)A)、铅(面板B)、和汞(面板C)的情况下使用对照缓冲液温育的鼠李糖乳杆菌R37的TEM显微照片。
图5是在不添加金属(面板A)、铅(面板B)、和汞(面板C)的情况下使用对照缓冲液温育的鼠李糖乳杆菌R37的扫描电子显微照片。
图6A是鼠李糖乳杆菌R37的扫描电子显微照片(上)和不含可见沉积物的细胞的一部分的相应能量分散X射线光谱。
图6B是鼠李糖乳杆菌R37的扫描电子显微照片(上)和含有可见沉积物的细胞的一部分的相应能量分散X射线光谱。
图7是使用铅温育(面板A)、镉温育(面板B)、以及未添加金属的对照温育(面板C)的的鼠李糖乳杆菌GR-1的扫描电子显微照片。
图8是对未处理的细胞(面板A)、暴露于镉的细胞(面板B)、暴露于植物乳杆菌14917T的细胞(面板C)、和先后暴露于植物乳杆菌14917T和镉的细胞(面板D)的活力和死亡率进行比较的Caco-2细胞系的流式细胞仪分析。
图9A是一曲线图，其示出了具有铅的Man Rogosa Sharpe(MRS)培养基中乳杆菌物种的数量的增长。
图9B是一曲线图，其示出了具有镉的MRS培养基中乳杆菌物种的数量的增长。
图10A是一曲线图，其示出了本发明的食品级细菌从具有百万分之15(ppm)的Hg2+接种物的溶液中除去Hg2+的能力(误差棒±SEM；*表示根据未配对T-检验的显著差异(p<0.05))。
图10B是一曲线图，其示出了本发明的食品级细菌从具有十亿分之15(ppb)的Hg2+接种物的溶液中除去Hg2+的能力(误差棒±SEM；*表示根据未配对T-检验的显著差异(p<0.05))。
图11是一曲线图，其示出了本发明的食品级细菌从溶液中除去有机汞的能力(误差棒±SEM；*表示根据未配对T-检验的显著差异(p<0.05))。
图12是一曲线图，其示出了本发明的活体和死亡食品级细菌从溶液中除去无机汞的能力(误差棒±SEM；*表示根据未配对T-检验的显著差异(p<0.05))。
图13是一曲线图，其示出了食品级细菌的组内的乳杆菌抗汞性的可变性。面板(panel)A示出了Hg2+梯度中不同干酪乳杆菌菌株的生长，以及面板B示出了Hg2+梯度中的不同鼠李糖乳杆菌菌株的生长。
图14是一曲线图，其示出了在使用于37℃温育的1μg/mL HgCl2补充的HEPES-NaOH中鼠李糖乳杆菌R37和GR-1除去汞的24小时时程。
图15为曲线图，其示出了在HgCl2浓度为0.5ppm(面板A)和1ppb(面板B)下通过选择对汞的抗性(R)增加的鼠李糖乳杆菌菌株和对汞的敏感度(S)增加的菌株从溶液中除去汞。
图16为一曲线图，其示出了在起始接种物为10ppm下食品级细菌和大肠杆菌从溶液中除去As(III)和As(V)的能力。
图17为一曲线图，其示出了在起始接种物为1ppm下食品级细菌从溶液中除去As(III)的能力(误差棒±SEM)。
图18为一曲线图，其示出了在起始接种物为100ppm下乳杆菌从溶液中除去As(III)的能力。
图19为一曲线图，其描绘了益生菌从溶液中除去马拉硫磷(图19A)和对硫磷(图19B)的能力。用于马拉硫磷和对硫磷的起始接种物分别为5μg和0.5μg。(误差棒±SEM)。
图20为一曲线图，其示出了益生菌从溶液中同时除去马拉硫磷和对硫磷的能力。马拉硫磷初始浓度为5μg，而对硫磷浓度为0.5μg.(误差棒±SEM).
图21为一曲线图，其示出了食品级细菌和大肠杆菌从溶液中除去马拉硫磷(图21A)或对硫磷(图21B)的能力。用于杀虫剂马拉硫磷和对硫磷的起始接种物分别为10mg/L和3mg/L。(误差棒±SEM)。
具体实施方式
定义
除非另有定义，本文中使用的所有技术和科学术语具有相同的如本发明所属领域中的普通技术人员通常所理解的含义。而且，除非另有指示，除在权利要求中之外，“或”的用途包括“和”，反之亦然。非限制性术语不被解释为限制，除非特别说明或上下文另外清楚地指出(例如“包含”、“具有”和“包括”通常表示“包含但不限于”)。权利要求中的单数形式包括诸如“一”、“一个”和“所述”包括复数引用，除非另外明确声明。
表达式“食品级细菌”是指任何活体或死亡细菌，该细菌对人体健康无有害影响或具有GRAS(一般认为安全)状态。这类细菌可以选自由乳杆菌和芽孢杆菌组成的组。表1中列出了特别适合于本发明目的的食品级细菌的非限制性示例。
在本文件中使用的术语“益生菌”是指食品级细菌，当该食品级细菌存在并且以存活形式生存在受试者生物体内时，他们对受试者生物体起有益作用。
“食品生产动物”在本文中用来描述制备且用于人类消耗的任何动物。食品生产动物可以是但不局限于用于人类消耗的反刍动物(诸如菜牛和奶牛、猪、羊、鸡、火鸡或任何其它家禽)，或包括虾、龙虾或鱼在内的水生动物。
如本文所用，术语“从物质或环境中除去有毒化合物”是指除去一种或多种可以如在以下至少一个示例中所述的那样被测试的有毒化合物。
“受试者”或“多个受试者”在本文中用来描述动物界的成员，包括食品生产动物和人类。
本发明还涵盖衍生于亲本菌株的突变菌株或遗传转化菌株。这些突变或遗传转化菌株可以为这样的菌株：其中亲本菌株的一个或多个内源基已经被突变，例如，修饰其一些代谢特性(例如其发酵糖的能力、其对于酸的抗性、其经受胃肠道中运输的存活性、其后酸化(post-acidification)特性或其代谢物的产生)。它们还可以为由一种或多种目的基因遗传转化亲本菌株而产生的菌株，例如为了赋予所述遗传转化菌株额外的生理特征，或者使其表达具有人们期望通过所述菌株而赋予的治疗或接种效果的蛋白。这些菌株可以借助于用于乳杆菌的随机或定点诱变和基因转化的常规技术(诸如由Gury等(2004)描述的那些或Perea Velez等(2007)描述的那些)从菌株中获得，或借助于被称作“基因组改组”的技术(Patnaik等，2002和Wang等，2007)获得。
本发明的主题还是可以从乳杆菌菌株中获得的细胞级分。它们尤其是从所述菌株的培养物中获得的DNA制剂或细菌壁制剂。它们还可以是培养物上清液或这些上清液的级分。举例说明，一株乳杆菌菌株的无细胞上清液(CFS)可以使用用于从另一乳杆菌菌株中获得CFS的方法来获得。
本发明的主题还是一种用于获得细胞级分的方法，该方法包括步骤：
(a)培养乳杆菌菌株，并且
(b)从步骤(a)中的培养物中获得和/或回收细胞级分。
在本发明的组合物中，所述菌株可以以活体或死亡的完整细菌的形式使用。可选地，所述菌株可以以细菌裂解物的形式或以细菌级分的形式使用；适于该用途的细菌级分的选择例如通过测试它们从水环境中除去汞的性能而进行。细菌细胞优选有活力的存活细胞。
用于除去有毒化合物的食品级细菌
在一个实施例中，本发明涉及包括益生菌在内的食品级细菌或其提取物，其能够从食品级细菌暴露于其中的环境或从可能具有或可能被怀疑具有有毒化合物的物质中除去或隔离有毒化合物。物质可以包括可食用组合物(诸如基于蔬菜的食品或基于动物的食品)，并且还可以包括可饮用溶液，包括水、牛奶、糖浆、提取物和其它饮品。物质还可以包括用来生产食品和可饮用溶液的原始农产品。正因为如此，本发明还涉及使用本发明的食品级细菌来防止受试者摄取有毒化合物的方法，或在方法中，在受试者暴露于所述物质之前从物质中滤除有毒化合物。环境可以包括水环境(诸如受试者的胃肠道)，或者受试者居住的环境(诸如池塘)。
食品级细菌可以是任何类型的细菌，该细菌能够从可以被受试者消耗的食品或溶液中，或从在所述食品或溶液制造中使用的成分中除去有毒化合物。表1包括食品级细菌，该食品级细菌可以与本发明一起使用。在优选的方面，食品级细菌可以需氧，微需氧或厌氧生长，并且可以选自由表1的食品级细菌组成的组。可以通过任何可能将微生物引入到受试者胃肠道的方法来对受试者施用食品级细菌或其提取物。细菌可以与载体相混合，并被应用到液体或固体饲料或饮用水中。载体材料应该对受试者无毒。当处理活体食品级细菌时，载体材料应当对食品级细菌也是无毒的。当处理活体食品级细菌时，优选地，载体可以包括在贮存期间促进细菌的生存能力的成分。食品级细菌还可以配制成接种物糊状物以便直接注入受试者嘴巴。剂型可以包括所添加的成分来改善适口性、提高货架期、增加营养效益，等等。如果需要可再现的和测量的剂量，那么食品级细菌可以通过插管或注射器进行施用。待施用的食品级细菌的数量受控于影响功效的因素。当以饲料或饮用水的形式进行施用时，剂量可以延续几天甚至数周的时间。在几天内所施用的较低剂量的累积效应可以大于其一次大剂量。食品级细菌的一株或多株菌株也可以一起进行施用。菌株的组合可以是有利的，因为个体受试者至于菌株而言可以不同，其在给定个体中最为持久。
本发明还涉及食品级细菌的提取物或片段，它们能够从物质或样品中除去或隔离有毒化合物。如本文所示，本发明人发现死亡食品级细菌可以被用来隔离汞与样品。同样地，本发明涉及食品级细菌片段，其能够结合在目的物质中发现的有毒化合物。
应用
本发明的食品级细菌可以用作预防措施，以防止当前未携带有毒化合物的受试者通过暴露于其中存在有毒化合物的消费品或环境中而获取有毒化合物。本发明的食品级细菌还可以用来从受试者中大体上减少或大体上清除有毒化合物。
携带有有毒化合物的受试者的治疗可以被实现以通过对携带有毒化合物的受试者施用食品级细菌或其提取物来减少或清除受试者携带的有毒化合物的数量。
用于施用食品级细菌的方法可以基本上是相同的，不论是用于预防还是用于治疗。通过常规地对受治疗者施用有效剂量，通过预防和治疗的组合可以大体上减少或大体上清除被不希望的毒素所污染的风险。
在一个实施例中，本发明的食品级细菌可以在方法中用来从物质中滤出有毒化合物。在一个实施例中，方法可以包括：将物质与食品级细菌接触足够时间，并从物质中除去食品级细菌和毒素。为了实现这种从物质中过滤有毒化合物，食品级细菌、能够结合到有毒化合物的所述食品级细菌的提取物或片段可以例如附设到过滤器，或固体支撑(诸如亲和柱)，并且然后物质可以贯穿过滤器或亲和柱。
根据本发明的另一实施例，食品级细菌还可以被用来喂养水生动物(诸如鱼和虾)。在一个实施例中，本发明的食品级细菌例如可以被添加到含有水产动物的罐和池塘中。优选地，用于水生动物的食品级细菌可以是在淡水和海水环境中自然出现的细菌。
制剂和施用
尽管本发明不旨在局限于任何特定模式的应用，优选组合物的口服施用。一种食品级细菌可以被单独施用或者联合第二种不同的食品级细菌一起施用。任何数量的不同的食品级细菌都可以联合使用。“联合”意味着一起、基本上同时或顺序地。组合物可以例如以片、丸或胶囊的形式进行施用。应用的一种优选形式涉及到包括本发明的组合物的冻干胶囊的制剂。应用的另一优选形式涉及到本发明的冻干胶囊的制剂。应用的又一优选形式涉及到本发明的加热干燥的胶囊的制剂。
本文中使用的“有效剂量”意味着食品级细菌或细菌(例如乳杆菌)的数量，在合理的医学判断范围内，(在合理的效益/风险比下)高到足以显著地积极地修饰待治疗的状况，而低到足以避免严重的副作用。乳杆菌的有效量将随待达到的目标、正在接收治疗的受试者的年龄和身体状况、治疗的持续时间、并行治疗的性质和所采用的特定乳杆菌而改变。因此，乳杆菌的有效量将是将提供所需解毒作用的最小量。
明确的实际优势是食品级细菌(例如乳杆菌)可以以方便的方式(诸如通过口服、静脉注射(其中无存活)、或栓剂(阴道或直肠)途径进行施用。依据施用途径，包括食品级细菌的活性成分可能需要被包被在材料中，以保护所述微生物免受酶、酸和其它可以灭活所述生物体的自然条件的作用。为了通过肠外施用之外的方式施用食品级细菌，它们应该通过材料进行包被或使用材料进行施用来防止失活。例如，食品级细菌可以与酶抑制剂或在脂质体中共同施用。酶抑制剂包括胰蛋白酶抑制剂、二异丙基氟磷酸(DFP)和特雷西洛(trasylol)。脂质体包括水包油包水(water-in-oil-in-water)P40乳剂以及向宿主受试者的内部目标输送乳杆菌或它们的副产物的常规的和特别设计的脂质体。
食品级生物体该可以肠外或腹腔内施用。还可以以例如甘油、液体聚乙二醇及其混合物以及油的形式制备分散体。
适于注射用途的药用形式包括无菌水溶液(其中水溶性)或分散体，和用于临时制备无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。就所有情况而言，形式必须是无菌的并且必须是流动性的，流动性要达到易于注射的程度。它必须在生产和贮存条件下都是稳定的。载体可以是溶剂或含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、液体聚乙二醇等)、其合适混合物以及植物油的分散体。在分散体情况下，例如可以通过维持所需的颗粒大小使用包衣(诸如卵磷脂)维持适当的流动性。在许多情况下，它优选包括等渗剂，例如，糖或氯化钠。通过在延迟吸收的试剂(例如单硬脂酸铝和明胶)的组合物中的用途可以带来可注射组合物的延长吸收。
无菌可注射溶液的制备如下：按要求将食品级细菌以所需的量与上文列举的各种其它成分合并入适当的溶剂中，然后进行过滤灭菌。通常，分散体由上述的那些通过各种经灭菌的食品级细菌合并入无菌媒介物(vehicle)中来制备，该媒介物含有基础分散体介质和所需的其它成分。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，它们从其先前无菌过滤的溶液生产活性成分的粉末，外加任何额外所需的成分。另外优选的制备方法包括但不限于冻干和加热干燥。
当食品级细菌如上述被合适地保护时，活性化合物可以例如使用惰性稀释剂或可吸收的食用载体口服施用，或者它可以被包封在硬或软壳明胶胶囊中，或者它可以被压制成设计成通过胃(即肠溶衣)的片剂，或者它可以被直接合并入日常饮食的食物中。对于口服治疗施用，食品级细菌可以与赋形剂合并，并且以可摄入的片剂、含片、锭剂、胶囊、酏剂、混悬剂、糖浆剂、糯米纸囊剂、等等使用。
如上所述的片剂、锭剂、丸剂、胶囊等还可以含有下列物质：结合剂(诸如黄芪胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶)；赋形剂(诸如磷酸二钙)；崩解剂(诸如玉米淀粉、马铃薯淀粉、海藻酸，等等)；润滑剂(诸如硬脂酸镁)；和甜味剂(诸如可以添加的蔗糖，乳糖或糖精)，或调味剂(诸如薄荷、油或冬青调味剂或樱桃调味剂)。当剂量单位形式是胶囊时，除上述类型的材料外，它还可以含有液体载体。各种其它物质可以作为包衣存在，或以便修饰剂量单位的物理形式。例如，片剂、丸剂或胶囊或乳杆菌混悬剂可以使用虫胶、糖或上述两者进行包衣。
糖浆或酏剂可以含有活性化合物、作为甜味剂的蔗糖、作为防腐剂的对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯、染料和调味剂(诸如樱桃香精或橙香精)。当然，用于制备任何剂量单位形式的任何材料应该是药学纯并且在所采用的数量内大体上无毒。另外，食品级生物体可以被合并入缓释制剂和剂型。
尤其有利的是配制剂量单位形式的胃肠外组合物，以便于施用与剂量的一致性。本文中所用的剂量单位形式是指物理上分离的单位，该单位适合作为用于待治疗的哺乳动物受试者的单位剂量；每个单位含有预定量的所计算的食品级细菌以便与所需要的药用载体联合以产生所需的预防或治疗效果。本发明的新型剂量单位形式的说明书可以由(a)和(b)指示或可以直接取决于(a)和(b)：(a)食品级细菌的独特特征和待达到的特定预防、解毒或治疗效果，并且(b)复合这种食品级细菌用于在肠道内建立和维持健康菌群的领域中固有的局限性。
食品级生物体与如上文公开的剂量单位形式的合适的药学上或食品上可接受的载体复合，从而以有效量进行方便和有效的施用。剂量单位形式可以例如含有主要活性化合物，其数量约为每毫升有109活或非活乳杆菌。在组合物含有辅助成分(诸如益生元(prebiotics))的情况下，剂量参照常用剂量和所述成分的施用方式来确定。
药学上可接受的载体可以采用牛奶或其部分的形式，包括酸奶。还可以采用脱脂牛奶、脱脂奶粉、不含牛奶或者不含乳糖的产品。脱脂奶粉按常规悬浮在磷酸盐缓冲液(PBS)中，高压灭菌或过滤以便消除蛋白质污染物和生活污染物，随后冷冻干燥、加热干燥、真空干燥或低压冻干。
一些可以作为药物载体的物质的其它实例为糖(诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖)；淀粉(诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉)；纤维素及其衍生物(诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素)；粉末状tragancanth；麦芽；明胶；滑石；硬脂酸；硬脂酸镁；硫酸钙；碳酸钙；植物油(诸如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和可可油)；多元醇(诸如丙二醇、甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇)；琼脂；海藻酸；无热原的水；等渗盐水；蔓越莓提取物和磷酸盐缓冲溶液；脱脂奶粉；以及例如在药物剂型中使用的其它无毒配伍物质(诸如维生素C、雌激素和紫锥菊(echinacea))。润湿剂和润滑剂(诸如十二烷基硫酸钠)，以及着色剂、调味剂、润滑剂、赋形剂、压片剂、稳定剂、抗氧化剂和防腐剂也可以存在。
因此，根据本发明，受试者可以口服施用至少一种治疗有效量的食品级细菌和药学上可接受的载体。食品级细菌可以是乳杆菌。乳杆菌可以选自包括表1中列出的细菌的组。
表1：测试菌株的降解或隔离有毒化合物的能力
上述公开对本发明进行了一般描述。形式上的改变和等同物的替换被视为建议的或实施的权宜之计。尽管本文中采用了特定术语，但是这些术语是为了描述性的意思而非用于限制的目的。
示例
对示例进行是为了说明的目的而非旨在限制本发明的范围。
示例1-从水环境中除去无机铅和镉的演示
在细胞浓度约为1×109CFU/mL下，将鼠李糖乳杆菌GR-1、干酪乳杆菌393T、约氏乳杆菌20533和植物乳杆菌14917T的24小时培养物的1毫升接种物添加到含有Pb或Cd的50mM HEPES缓冲液中，并于37℃温育50mMHEPES缓冲液5小时。温育后，于5，000G离心除去细胞。通过电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析上清液中的总金属浓度。
图1示出了在用于铅和镉的起始接种物分别为2ppm和2.5ppm下食品级乳杆菌从溶液中除去Pb(A)和Cd(B)的能力。依据所检查的乳杆菌的物种/菌株和金属环境，在除去中出现变化。如图1A所示，从溶液中除去45-50％的Pb，同时如图1B所示，40-80％的Cd也被除去。根据单因素方差分析(ANOVA)，Pb和Cd的除去都被视为显著的(p<0.05)。
示例2-食品级细菌从水溶液中除去铅和镉的特异性演示
在细胞浓度约为1×109CFU/mL下，将鼠李糖乳杆菌GR-1、鼠李糖乳杆菌GG、大肠杆菌Co1和大肠杆菌25922的24小时培养物的1毫升接种物添加到含有Pb或Cd的50mM HEPES缓冲液中，并于37℃温育50mM HEPES缓冲液5小时。温育后，于5，000G离心除去细胞。通过电感耦合等离子体质谱(ICP-S)分析上清液中的总金属浓度。如图2所示，对于Pb(图2A)和Cd(图2B)来说，乳杆菌从溶液中除去70-80％的金属，而大肠杆菌只除去30-50％的金属。与大肠杆菌菌株和未经温育的对照相比，根据单因素方差分析(ANOVA)，乳杆菌除去量显示为显著的(P<0.05)。
示例3-通过活体和死亡乳杆菌除去铅和镉
在本示例中，在起始接种物为3ppm下，对活体和死亡乳杆菌从溶液中除去铅(图3A)和镉(图3B)的能力进行了测试。
如示例1和2先前所述，进行测定。将所有乳杆菌的存活细胞与在5.5千戈瑞(KG)下通过γ射线辐射1小时杀死的细胞进行比较。因为γ辐射杀死细胞，而不破坏细胞壁/膜完整性，所以使用γ辐射。使用存活和死亡细胞的均等的接种物。参考图3B，使用γ射线辐射的活体细胞(live and cells)都能除去几乎相等数量的镉。然而，如图3A所示，在存活或死亡细胞结合更多的铅的能力之间存在分歧。本文中获得的结果表明：金属的结合很可能是无需活跃代谢细胞的表面相关动作(surface associated action)。正因为如此，本发明还涉及能够结合重金属的食品级细菌的各个组成部分。
示例4-被动隔离活性的演示
图4示出了在加入有1mM Pb(B)和1mM HgCl2(C)的50mM HEPES-NaOH缓冲液中温育的鼠李糖乳杆菌R37的TEM显微照片。然而，在全部使用重金属(B和C)温育的细胞内观察到许多沉积物；当未添加金属(A)时，一些较小的沉积物也可见。沉积物的性质使用SEM和EDX分析来确认。
图5是在添加有1mM Pb(B)和1mM HgCl2(C)的50mM的HEPES-NaOH缓冲液中温育的鼠李糖乳杆菌R37的SEM显微照片。然而，在全部使用重金属(B和C)温育的细胞内观察到许多沉积物；当未添加金属(A)时，一些较小的沉积物也可见。
图6示出了对鼠李糖乳杆菌R37中假定的金属沉积物的能量分散X-射线能谱(EDX)分析。使用SEM成像的锇包衣样品使用EDX进行分析以便确定细胞内假定的金属沉积物的元素组成。图6A演示了不含任何可见沉积物并且没有检测到汞的细胞的部分光谱(下)。图6B示出了通过质量证明汞的细胞隔离对确定含有36.62％的汞的大型沉积物的分析(见表2)。
对于显示细胞中有汞的GR-1、R3、R39、干酪乳杆菌C3，也获得了类似的结果。
表2
示例5-食品级细菌之上和之内金属的沉淀和结合的确认
在最终浓度为10mM的金属存在的情况下在50mM HEPES缓冲液中于37℃温育乳杆菌2小时。通过于37℃在10mM金属溶液中温育细菌(鼠李糖乳杆菌GR-1)2小时进行测定。温育后，将细菌稀释100倍，并且通过0.2μm过滤器过滤以捕集细菌和允许溶液通过。过滤器在室温下干燥2小时，然后涂覆5nm的四氧化锇。金属的识别通过EDAX X-射线分析来确认，其表明金属沉淀为加入到溶液中的重金属。
图7为使用铅(A)或镉(B)温育的鼠李糖乳杆菌GR-1的扫描电子显微照片(SEM)。图像中可以观察到的亮点表示细胞表面上和内部的重金属颗粒的沉淀。图7(C)显示非金属对照，其为没有添加金属的乳杆菌，注意不存在金属颗粒沉淀。
示例6-作为肠上皮屏障模型的Caco-2细胞系上的食品级乳杆菌的保护作用的初步证明
Caco-2细胞使用如上所述的补充的鹰极限必需培养基(Eagles MinimumEssential Medium)在12或24孔板中生长2周。两个星期后，抽取培养基，并且用温热的50mM HEPES缓冲液轻轻洗涤细胞两次。目的细菌培养物也在5mL肉汤培养物中生长22小时，并且用50mM HEPES洗涤2次。细菌细胞在鹰极限必需培养基中重悬至10mL，而溶液中无任何Pen/Strep，将400μL的培养基添加到在24孔板的孔中，并且在12孔板中使用900μL的培养基。允许使用细胞系于37℃温育细菌2小时。在温育期间，通过将原浓度的Pb、Cd或As添加到所需浓度的培养基来制作鹰极限必需培养基的金属掺入溶液。温育期后，抽取细菌金属溶液，使得只剩下粘附在Caco-2细胞单层上的细胞，培养基更换为金属掺入培养基，此外，建立其即在培养基中无金属又不使用菌种温育的控制孔。于37℃在金属掺入培养基中细胞被温育5小时。
该温育后，通过抽取除去培养基并丢弃。使用温热的HEPES缓冲液轻轻洗涤细胞一次，然后用500μl的0.25％(w/v)胰蛋白酶从孔中除去直至细胞从烧瓶中分离。添加500μL的细胞培养基以便阻止胰蛋白酶反应，并且每孔中的总体积被转移到单独的无菌1.5mL离心管中。细胞悬液通过移液混合，以避免形成气泡。在台式微型离心机中以120RPM离心细胞2分钟，丢弃上清液，细胞悬浮在1×PBS中。通过在干净的样品管中使用450μL的试剂(目录号4000-0041)悬浮50μL的细胞将细胞稀释10倍，将细胞染色至少5分钟。然后在Guava EasyCyte微型台式流式细胞计量仪上使用Guava ViaCount测定来分析染色的细胞的活力。基于活力来分离细胞，从而形成两个截然不同的群体：活体细胞和死亡细胞。对群体进行分析并且使用用于流式细胞术数据的FiowJo(TreeStarTM)分析软件进行比较。在存在或不存在乳杆菌的情况下暴露于金属之后，对细胞进行分析以观察活力差异。
图8示出了对比较用于未处理的细胞(A)、暴露于镉的Caco-2细胞(B)、暴露于植物乳杆菌14917T的Caco-2细胞(C)和先后用植物乳杆菌14917T预处理和暴露于镉的Caco-2细胞(D)的生存力和死亡率的Caco-2细胞系进行的流式细胞术分析。如(D)所示，仅暴露于镉(B)时，在暴露于镉之前添加植物乳杆菌14917T有助于增加细胞系的存活率。
示例7-乳杆菌属的抗铅和镉的食品级细菌的活力
通过使用来自乳杆菌物种鼠李糖乳杆菌GR-1和植物乳杆菌14917T的24小时新鲜肉汤培养物的107细菌的接种物温育浓度为100ppm的含有铅或镉的200μL孔的Man Rogosa Sharpe(MRS)培养基进行测定。通过OD600测量于37℃温育24小时的生长。通过波长为600nm的光密度测量对生长进行24小时测量，每30分钟读取读数。生长测定之后，所有物种被稀释并且在MRS琼脂上涂板以确定溶液中的菌落形成单位(CFU)。
图9示出了所有测试的乳杆菌物种在浓度为100ppm的具有铅(图9A)或镉(图9B)的MRS培养基中的生长。
示例8-从水环境中除去无机汞的演示
将鼠李糖乳杆菌DN116-060的24小时培养物的1％接种物添加到含有HgCl2的de Man Rogosa Sharpe(MRS)肉汤中，并且于37℃温育de Man Rogosa Sharpe(MRS)肉汤24小时。温育后，5，000g离心除去细胞。通过冷蒸气原子吸收光谱法(CVAAS)分析上清液中的总汞浓度。如图10所示，乳杆菌除去了百万分之1(ppm)汞接种物的94.4％(图10A)和十亿分之15(ppb)接种物的86％(图10B)。根据未配对T-检验，两种除去均视为显著的(p<0.05)。
示例9-从水环境中除去有机汞的演示
将鼠李糖乳杆菌DN116-060的24小时培养物的1％接种物添加到含有HgCl2的de Man Rogosa Sharpe(MRS)肉汤中，并且于37℃温育de Man Rogosa Sharpe(MRS)肉汤24小时。温育后，于5，000g离心除去细胞。通过冷蒸气原子吸收光谱法(CVAAS)分析上清液中的总汞浓度。
图11示出了在起始接种物为1ppm MeHgCl2下食品级细菌从溶液除去MeHg2+的能力(误差棒±SEM)。如图11所示，乳杆菌除去了1ppm汞接种物的23.2％(根据未配对t-检验p<0.05)。
示例10-通过活体和死亡鼠李糖乳杆菌DN116-060除去无机汞
如示例9中先前所述在浓度为500ppb HgC12下进行测定。在接种物相当于存活细胞的最终细胞密度下，将鼠李糖乳杆菌DN116-010的存活细胞与通过在80℃下加热10分钟杀死的细胞进行比较。
图12示出了在起始接种物为500ppb HgCl2下活体和死亡鼠李糖乳杆菌DN116-060从溶液中除去Hg2+的能力。如图12所示，存活细胞能够除去的汞显著多于加热杀死的细胞(根据未配对t-检验p<0.05)，这表明存在汞的被动隔离以及潜在的代谢解毒作用。
根据示例9中先前所述，在整个HgCl2的浓度光谱中进行测定。24小时后，于37℃通过波长为600nm的光密度测量培养物的生长。在演示了汞抗性在食品级细菌之间是可变性状的两个物种中观察到光谱的汞抗性。
图13示出了于37℃经过24小时温育后通过OD600测量的Hg2+的梯度中的干酪乳杆菌(n＝38)(图13A)和鼠李糖乳杆菌(n＝40)(图14B)的生长。每组连接点表示一株菌株。抗性是构成两个物种内的抗性属性的光谱的菌株可变性状。图13B示出了三株鼠李糖乳杆菌菌株，与其余菌株相比，其显示出明显更高的抗性。
示例12
在使用于37℃温育的1μg/mL的HgCl2补充的HEPES-NaOH中鼠李糖乳杆菌R37(存活和加热杀死的形式)和GR-1除去汞的24小时时程。参照图14，隔离活动不是瞬间的，并且12小时后在鼠李糖乳杆菌R37中达到最大，同时在鼠李糖乳杆菌GR-1的情况下在24小时时观察到最大除去。
示例13-食品级细菌的抗性菌株比汞敏感菌株除去更多的汞
使用选择对汞的抗性和灵敏度增加的鼠李糖乳杆菌菌株来进行如示例1中所述的测定。
图15示出了在HgCl2浓度为0.5ppm(图15A)和1ppb(图15B)下通过选择对汞的抗性(R)增加的鼠李糖乳杆菌菌株和灵敏度(S)增加的菌株从溶液中除去汞。抗性株明显比其敏感对应物从溶液中除去更多的汞(如使用Bonferroni事后检验[图15A]和未配对t-检验[图15B]通过ANOVA确定的p<0.05)。(误差棒±SEM)
示例14-从水环境中除去亚砷酸盐和砷酸盐
细菌培养物在优选培养基中生长24小时；用于乳杆菌的Man Rogoas Sharpe(MRS)肉汤和用于大肠杆菌的Luria-Bertani(LB)肉汤。
对细胞进行离心、洗涤并在PBS中进行重悬。在含有9mL的掺入砷的PBS缓冲液的样品管之间分布1mL aliquouts，将1mL的MRS或LB肉汤添加到样品管中。于37℃温育细胞5小时；温育后，于5，000g离心除去细胞。通过电感耦合等离子体质谱分析(ICP-MS)分析残留于溶液中的总砷。如图16所示，乳杆菌都能除去50-60％的As(III)和As(V)，而大肠杆菌DH5α中不太有效。
示例15-通过乳杆菌的面板除去亚砷酸盐(As III)的演示
通过使用1×109CFU/m的所选择的乳杆菌温育1ppm(9.08×1018自由原子)亚砷酸盐溶液(HEPES缓冲液)来进行测定。于37℃温育溶液5小时；温育后，于5，000g离心除去细胞。通过电感耦合等离子体-质谱(ICP-MS)分析残留于溶液中的总砷。
如图17和表3所示，乳杆菌除去总砷的1-3％，其通过查看溶液中的总自由原子与结合到每一个物种的总自由原子之间的浓度差异来确定。
表3
示例16-通过乳杆菌除去高浓度的砷(III)的演示
通过使用1×109CFU/m的所选择的乳杆菌温育HEPES缓冲液的100ppm亚砷酸盐溶液进行测定。于37℃温育溶液5小时；温育后，于5，000g离心除去细胞。通过电感耦合等离子体-质谱(ICP-MS)分析残留于溶液中的总砷。
如图18所示，与未处理的对照样品相比，所有乳杆菌均显示出从溶液中除去近70％的砷的能力。物种之间在砷的除去量的能力上变化小，而且不显著。
示例17-通过益生菌从水环境除去马拉硫磷和对硫磷的演示
鼠李糖乳杆菌GR-1的细菌肉汤培养物在Man Rogosa Sharpe(MRS)肉汤中生长24小时。对细胞进行收集，洗涤并在1×PBS缓冲液中进行重悬。1mL的细胞悬液被转移到含有具有杀虫剂的HEPES缓冲液和MRS的50：50混合物的样品管中。用于马拉硫磷和对硫磷的杀虫剂的起始接种物分别为5μg/L的HEPES缓冲液和0.5μg/L的HEPES缓冲液。于37℃温育样品5小时。温育后，于5，000g离心除去细胞。通过气象色谱-质谱(GC-MS)分析残留于溶液中的杀虫剂，并且将值与未处理的对照进行比较。
参照图19，鼠李糖乳杆菌GR-1能够从溶液中除去20％的马拉硫磷(19A)和50％的对硫磷(19B)。
示例18-通过益生菌同时除去马拉硫磷和对硫磷的演示
鼠李糖乳杆菌GR-1的细菌肉汤培养物在Man Rogosa Sharpe(MRS)肉汤中生长24小时。对细胞进行收集，洗涤并在1×PBS缓冲液中重悬。1mL的细胞悬液被转移到含有具有杀虫剂的HEPES缓冲液和MRS的50：50混合物的样品管中。用于马拉硫磷和对硫磷的杀虫剂的起始接种物分别为5μg/L的HEPES缓冲液和0.5μg/L的HEPES缓冲液。于37℃温育样品5小时。温育后，于5，000g离心除去细胞。通过气象色谱-质谱(GC-MS)分析残留于溶液中的杀虫剂，并且将值与未处理的对照进行比较。
如图20所示，鼠李糖乳杆菌GR-1能够从溶液中除去50％的马拉硫磷和50％的对硫磷。
示例19-通过食品级细菌和一些大肠杆菌物种的面板除去杀虫剂的演示
乳杆菌的细菌肉汤培养物在Man Rogosa Sharpe(MRS)肉汤中生长24小时，大肠杆菌物种在Lucella Broth(LB)中生长24小时。对细胞进行收集，洗涤并在1×PBS缓冲液中进行重悬。1mL的细胞悬液被转移到含有具有杀虫剂的HEPES缓冲液和MRS或LB的50：50混合物的样品管中。用于马拉硫磷和对硫磷的杀虫剂的起始接种物分别为10μg/L的HEPES缓冲液和3μg/L的HEPES缓冲液。于37℃温育样品5小时。温育后，5，000g离心除去细胞。通过气象色谱-质谱(GC-MS)分析残留于溶液中的杀虫剂，并且将值与未处理的对照进行比较。
图21A示出了乳杆菌能够除去35-60％的马拉硫磷，而大肠杆菌能够除去10-25％的马拉硫磷。图21B示出了乳杆菌和大肠杆菌能够除去55-70％的对硫磷。
示例20-通过食品级细菌的面板除去内毒素的演示
内毒素是导致脓毒症和死亡的众所周知的毒素。它们由许多革兰氏阴性细菌产生，并且迄今为止，几乎没有有效的治疗开发出来。细菌产生的其它致命毒素包括由大肠杆菌0157:H5产生的致死性志贺毒素，以及来自艰难梭菌的TcdA和TcdB毒素，TcdA和TcdB这两种毒素都损害人结肠粘膜并且为致命细胞毒性酶。由艰难梭菌毒素造成的死亡已经成为了北美医院和护理家庭主要关注的问题。益生菌疗法已经在防止由O157：H7和艰难梭菌引起的感染中显示出巨大的前景。
因为已经表明碱性磷酸酶的上调可以在肠道中除去内毒素毒性并改善肠道的渗透性，所以在粪便和血液中可以测量碱性磷酸酶水平(活性和蛋白)。猪模型被用于该测定，艰难梭菌会通过市售的酶联荧光免疫测定从粪便中检测到。
实施例21-通过食品级细菌的面板除去黄曲霉毒素的演示
黄曲霉素(肝致癌物质)是疾病的重要原因，尽管在北美暴露于主要群体的风险低。黄曲霉素B1已经被包括在内，因为益生菌可以对其产生影响，并且这种结果对于许多美国子群体(例如大型农场群落)和其他国家(如中东、阿根廷)的子群体具有启发意义。
通过亲和柱净化和LC-MS/MS荧光从血液中测量黄曲霉毒素。
示例22-通过食品级细菌的面板除去杂环式芳香胺(HAA)的演示
杂环芳香胺在食品(例如，加工的肉)中被发现(HAA)，并且引起与饮食有关的诱变，该诱变起着慢性疾病(包括心血管疾病和癌症)病因的作用。它们直接与癌症的关联低，但是因为积极解毒效果提供了良好的消费者消息，所以待被益生菌抑制的它们的潜能使它们值得研究。
使用HPLC从尿液和血液样品测量它们。
示例23-通过食品级细菌的面板除去丙烯酰胺的演示
丙烯酰胺通过工业制备，但是由于其神经毒性而受到高度调控。在处理或在高温烹调期间，它在某些食品中，特别是富含碳水化合物和低蛋白的基于植物的食品(法式炸薯条、薯片)中，自然形成。还在香烟烟雾中大量发现。Health Canada对丙烯酰胺进行监测并研究，但因为没有建立什么是毒性/安全水平，所以在研究中很难设置“限制”或甚至告诉什么被认为是危险的。它会导致癌症，而将引起这种效果的具体浓度信息则是未知的
通过HPLC检测丙烯酰胺。

Claims (35)

1.一种组合物，包括食品级细菌和合适载体，其中，该组合物包括有效剂量的所述食品级细菌，以便从物质或所述食品级细菌暴露于其中的环境中除去有毒化合物。
2.权利要求1所述的组合物，其中治疗有效剂量为每毫升或更少的所述合适载体至少约有1×109的所述食品级细菌。
3.权利要求1所述的组合物，其中该合适载体为含有碳水化合物的培养基。
4.权利要求3所述的组合物，其中该含有碳水化合物的培养基为奶制品。
5.权利要求1、2、3或4所述的组合物，其中所述有毒化合物选自由铅、镉、汞、砷、马拉硫磷和对硫磷组成的组。
6.权利要求1、2、3 、4或5所述的组合物，其中提供死亡或活体食品级细菌。
7.权利要求1、2、3 、4或5所述的组合物，其中该食品级细菌作为提取物来提供。
8.权利要求1、2、3 、4 、5、6或7所述的组合物，其中该组合物包括两种或者多种不同的食品级细菌的组合。
9.权利要求1、2、3 、4 、5、6或7所述的组合物，其中该组合物包括鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、发酵乳杆菌、约氏乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、和淀粉乳杆菌的菌株中两株或多株的组合。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的组合物，其中该食品级细菌选自表1中列出的食品级细菌的组。
11.根据权利要求1-11中任一项所述的组合物，其中该环境为水环境。
12.一种组合物，包括食品级细菌、载体和动物饲料，其中所述食品级细菌能够从物质或所述食品级细菌暴露于其中的环境中除去有毒化合物，并且所述食品级细菌包括选自由表1中列出的所述食品级细菌或其任意组合组成的组的细菌分离株。
13.一种方法，用于减少受试者摄取被所述受试者消耗的有毒化合物，该方法包括：对受试者施用有效剂量的食品级细菌，该食品级细菌能够隔离被所述受试者所消耗的所述有毒化合物。
14.一种方法，用于从物质或被污染的或怀疑被有毒化合物污染的环境中除去有毒化合物，该方法包括：将所述物质或环境与能够从所述物质或环境中除去所述有毒化合物的食品级细菌相接触。
15.一种方法，减少受试者体内的有毒化合物的毒性作用，该方法包括：对受试者施用治疗有效剂量的食品级细菌，该食品级细菌能够从物质或环境中除去所述有毒化合物。
16.权利要求13、14或15所述的方法，其中所述有毒化合物选自由铅、镉、汞、砷、马拉硫磷和对硫磷组成的组。
17.权利要求13、14或15所述的方法，其中提供了死亡或活体食品级细菌。
18.权利要求13、14或15所述的方法，其中该食品级细菌作为提取物来提供。
19.权利要求13、14或15所述的方法，其中该食品级细菌包括两种或多种不同的食品级细菌的组合。
20.根据权利要求13-19中任一项所述的方法，其中该组合物包括鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、发酵乳杆菌、约氏乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、和淀粉乳杆菌的菌株中两株或多株的组合。
21.权利要求20所述的方法，其中该食品级细菌是选自表1中列出的食品级细菌的组。
22.一种方法，其获得能够从环境中除去有毒化合物的乳杆菌菌株，该方法包括步骤：诱变或遗传转化所述乳杆菌。
23.一种方法，用于获得能够从环境中除去有毒化合物的细胞级分，包括步骤：
（a）培养乳杆菌菌株；和
（b）从步骤（a）中的培养物中回收所述细胞级分。
24.如权利要求22-23中任一项中所述的方法，其中所述有毒化合物选自由铅、镉、汞、砷、马拉硫磷和对硫磷组成的组。
25.如权利要求22-23中任一项中所述的方法，其中提供了死亡或活体乳杆菌。
26.如权利要求22-23中任一项中所述的方法，其中该乳杆菌作为提取物来提供。
27.如权利要求22-23中任一项中所述的方法，其中该乳杆菌包括两种或多种不同的菌株的组合。
28.如权利要求22-23中任一项中所述的方法，其中该乳杆菌选自表1列出的乳杆菌的组。
29.一种食品级细菌的用途，用于从物质或环境中除去有毒化合物。
30.权利要求29所述的用途，其中所述有毒化合物选自由铅、镉、汞、砷、马拉硫磷和对硫磷组成的组。
31.权利要求29所述的用途，其中提供了死亡或活体食品级细菌。
32.权利要求29所述的用途，其中该食品级细菌作为提取物来提供。
33.权利要求29所述的用途，其中该食品级细菌作为两种或多种不同的食品级细菌的组合来提供。
34.权利要求29所述的用途，其中该食品级细菌作为鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、发酵乳杆菌、约氏乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、和淀粉乳杆菌的菌株中两株或多株的组合来提供。
35.权利要求29所述的用途，其中该食品级细菌选自表1中列出的食品级细菌的组。
CN201380029656.XA 2012-04-05 2013-04-05 用于除去有毒化合物的食品级细菌 Expired - Fee Related CN104755090B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261620796P 2012-04-05 2012-04-05
US61/620,796 2012-04-05
PCT/CA2013/000328 WO2013149333A1 (en) 2012-04-05 2013-04-05 Food grade bacteria for the removal of toxic compounds

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104755090A true CN104755090A (zh) 2015-07-01
CN104755090B CN104755090B (zh) 2020-10-20

Family

ID=48471060

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201380029656.XA Expired - Fee Related CN104755090B (zh) 2012-04-05 2013-04-05 用于除去有毒化合物的食品级细菌
CN201380029689.4A Pending CN104540934A (zh) 2012-04-05 2013-04-05 食品级鼠李糖乳杆菌细菌

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201380029689.4A Pending CN104540934A (zh) 2012-04-05 2013-04-05 食品级鼠李糖乳杆菌细菌

Country Status (6)

Country Link
US (3) US9540609B2 (zh)
EP (2) EP2833898B1 (zh)
CN (2) CN104755090B (zh)
CA (1) CA2869566C (zh)
RU (1) RU2639547C2 (zh)
WO (2) WO2013150497A1 (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106616042A (zh) * 2016-12-23 2017-05-10 江南大学 一种植物乳杆菌饲料及其应用
CN109207405A (zh) * 2018-10-22 2019-01-15 江苏省家禽科学研究所 一种耐镉乳酸菌及其应用
CN110317758A (zh) * 2019-07-19 2019-10-11 河南广安生物科技股份有限公司 一种肉鸡双毒素解毒剂及其制备方法
WO2022160360A1 (zh) * 2021-01-29 2022-08-04 重庆第二师范学院 一种发酵乳杆菌lf-schy34及其应用

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013150497A1 (en) * 2012-04-05 2013-10-10 Compagnie Gervais Danone Lactobacillus rhamnosus food grade bacteria
US9616114B1 (en) 2014-09-18 2017-04-11 David Gordon Bermudes Modified bacteria having improved pharmacokinetics and tumor colonization enhancing antitumor activity
ES2659064T3 (es) * 2014-12-12 2018-03-13 Compagnie Gervais Danone Bacterias de Lactobacillus Rhamnosus de calidad alimentaria
CN104489489B (zh) * 2015-01-12 2017-05-03 湖南农业大学 一种利用乳杆菌和酵母菌混合发酵消减大米中重金属镉的方法
US11129906B1 (en) 2016-12-07 2021-09-28 David Gordon Bermudes Chimeric protein toxins for expression by therapeutic bacteria
US11180535B1 (en) 2016-12-07 2021-11-23 David Gordon Bermudes Saccharide binding, tumor penetration, and cytotoxic antitumor chimeric peptides from therapeutic bacteria
PL233582B1 (pl) * 2017-08-21 2019-11-29 Politechnika Lodzka Szczep bakterii mlekowych Lactobacillus rhamnosus
CN109260645B (zh) * 2018-10-31 2021-07-02 湖南中茂生物科技有限公司 一种去除植物来源黄酮类提取物中残留农药的方法
CN109527339A (zh) * 2018-11-30 2019-03-29 东北农业大学 一种利用鼠李糖乳杆菌去除液体样品中展青霉素的方法
CN110591988B (zh) * 2019-11-01 2021-05-14 四川农业大学 鼠李糖乳杆菌753及其应用、青贮饲料添加剂、青贮饲料

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101074142A (zh) * 2007-06-20 2007-11-21 上海裕麒环境技术服务有限公司 一种污水处理过程中污泥循环再利用方法
CN101333502A (zh) * 2007-06-27 2008-12-31 上海泓宝绿色水产科技发展有限公司 应急菌的制备和修复水产养殖环境的方法
CN102872475A (zh) * 2012-09-26 2013-01-16 天津市伯曼生物科技有限公司 一种除臭降铬的生物制剂及其制备方法

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5531988A (en) 1994-10-28 1996-07-02 Metagenics, Inc. Bacteria and immunoglobulin-containing composition for human gastrointestinal health
US6080401A (en) 1998-11-19 2000-06-27 Reddy; Malireddy S. Herbal and pharmaceutical drugs enhanced with probiotics
KR20010101171A (ko) * 1998-12-11 2001-11-14 추후기재 비뇨생식기 감염의 치료 및 예방을 위한 락토바실러스의경구 투여
US6641808B1 (en) 1999-09-22 2003-11-04 Lacpro Industries, Llc Composition for treatment of obesity
TW588109B (en) * 2000-07-29 2004-05-21 Tcell Biotechnology Food Co Lt Lactobacillus rhamnosus strain and uses thereof
BRPI0613805A2 (pt) * 2005-07-20 2011-02-15 Unilever Nv método de preparação de um produto comestìvel e produto comestìvel
RU2332993C2 (ru) * 2006-10-19 2008-09-10 ООО "Научно-технический центр "Промбезопасность-Оренбург" Способ защиты организма человека от неблагоприятных воздействий окружающей среды и композиция для его осуществления
US20090029447A1 (en) * 2007-07-26 2009-01-29 West Virginia University Process for removing mercury from air or water
FR2928935B1 (fr) * 2008-03-19 2011-05-20 Gervais Danone Sa Souche de lactobacillus rhamnosus.
EP2579881A4 (en) * 2010-05-25 2015-01-21 David Kossor COMPOSITIONS AND METHODS FOR REDUCING THE TOXICITY OF MERCURY
WO2013150497A1 (en) * 2012-04-05 2013-10-10 Compagnie Gervais Danone Lactobacillus rhamnosus food grade bacteria

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101074142A (zh) * 2007-06-20 2007-11-21 上海裕麒环境技术服务有限公司 一种污水处理过程中污泥循环再利用方法
CN101333502A (zh) * 2007-06-27 2008-12-31 上海泓宝绿色水产科技发展有限公司 应急菌的制备和修复水产养殖环境的方法
CN102872475A (zh) * 2012-09-26 2013-01-16 天津市伯曼生物科技有限公司 一种除臭降铬的生物制剂及其制备方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ABOU-BAKER SALIM ET AL: "Effect of Lactic Acid Bacteria against Heavy Metals Toxicity in Rats", 《JOURNAL OF AMERICAN SCIENCE》 *
FANDI IBRAHIM ET AL: "Probiotic bacteria as potential detoxification tools: assessing their heavy metal binding isotherms", 《CAN. J. MICROBIOL》 *
JATINDRA N. BHAKTA ET AL: "Isolation and Probiotic Characterizatioin of Arsenic-Resistant Lactic Acid Bacteria for Uptaking Arsenic", 《WORLD ACADEMY OF SCIENCE, ENGINEERING AND TECHNOLOGY》 *
T. HALTTUEN ET AL: "Rapid removal of lead and cadmium from water by specific lactic acid bacteria", 《 INTERNATIONAL JOURNAL OF FOOD MICROBIOLOGY》 *
TEEMU HALTTUNEN ET AL: "Arsenic removal by native and chemically modified lactic acid bacteria", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF FOOD MICROBIOLOGY》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106616042A (zh) * 2016-12-23 2017-05-10 江南大学 一种植物乳杆菌饲料及其应用
CN109207405A (zh) * 2018-10-22 2019-01-15 江苏省家禽科学研究所 一种耐镉乳酸菌及其应用
CN110317758A (zh) * 2019-07-19 2019-10-11 河南广安生物科技股份有限公司 一种肉鸡双毒素解毒剂及其制备方法
WO2022160360A1 (zh) * 2021-01-29 2022-08-04 重庆第二师范学院 一种发酵乳杆菌lf-schy34及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
EP2833898B1 (en) 2018-11-14
EP2833898A1 (en) 2015-02-11
US20150191691A1 (en) 2015-07-09
RU2014143979A (ru) 2016-05-27
WO2013149333A1 (en) 2013-10-10
EP2833898A4 (en) 2015-12-09
US20150079236A1 (en) 2015-03-19
CN104540934A (zh) 2015-04-22
CN104755090B (zh) 2020-10-20
CA2869566C (en) 2022-08-30
RU2639547C2 (ru) 2017-12-21
US9540609B2 (en) 2017-01-10
US10487305B2 (en) 2019-11-26
WO2013150497A1 (en) 2013-10-10
EP2834377A1 (en) 2015-02-11
US20200140806A1 (en) 2020-05-07
CA2869566A1 (en) 2013-10-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104755090A (zh) 用于除去有毒化合物的食品级细菌
CN102458426A (zh) 产生细菌素的戊糖乳杆菌及其在食品和药物组合物中的应用
AU2014254813B2 (en) Composition containing bacterium belonging to genus Lactobacillus
CN114381411B (zh) 乳酸乳球菌jyll-60及其在制备提高免疫力的产品上的应用
CN105420150A (zh) 一种嗜酸乳杆菌及其应用
Khushboo et al. Characterization and selection of probiotic lactic acid bacteria from different dietary sources for development of functional foods
Mathipa et al. Cocktails of probiotics pre-adapted to multiple stress factors are more robust under simulated gastrointestinal conditions than their parental counterparts and exhibit enhanced antagonistic capabilities against Escherichia coli and Staphylococcus aureus
Chaudhari et al. In vitro and in vivo evaluation of probiotic potential and safety assessment of Bacillus coagulans SKB LAB-19 (MCC 0554) in humans and animal healthcare
JP6214162B2 (ja) 新規の低温耐性ラクトバチルス・ガセリ株
Ulsemer et al. Safety assessment of the commensal strain Bacteroides xylanisolvens DSM 23964
CN105733978A (zh) 一株屎肠球菌wefa23
WO2020203792A1 (ja) 骨格筋遅筋化用組成物
CN113913334B (zh) 一株粪肠球菌ef-za1107-06及其应用
CN102250800B (zh) 草酸降解菌njodl1及其应用
CN103987839B (zh) 能够抑制幽门螺杆菌菌株粘附至上皮细胞的新德式乳杆菌保加利亚亚种菌株
CN105733977B (zh) 益生菌饲料添加剂
CN102250799B (zh) 草酸降解菌njode1及其应用
US20170360849A1 (en) Bacteria donors and pharmaceutical compositions
EP3031931B1 (en) Lactobacillus rhamnosus food grade bacteria
US20230022942A1 (en) Method for analyzing ileostomy subjects using a probiotic containing bacillus subtilis
TWI479020B (zh) Lactic acid bacteria having a function of lowering uric acid in blood
TWI405849B (zh) Lactic acid bacteria having a function of lowering uric acid in blood

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20201020