CN104744535A - 一种从日本楤木叶片中提取芦丁的方法 - Google Patents

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李德生
茹丽叶
李荣花
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Abstract

本发明公开了一种从日本楤木叶片中提取芦丁的方法，利用超声提取日本楤木中的芦丁，并在提取过程中通过改进提取试剂的种类、试剂的比例、提取次数、提取试剂的去除、提取液过滤的材料，以达到较高的提取效率和纯度，为日本楤木叶片中芦丁的工业化提取工艺提供依据。本发明的优点是：用超声提取法提取芦丁，提取率较高，最高可达98.42％；操作简便，省时；提取出的芦丁纯度较高，最高可达53.62％；用高效液相色谱法测定芦丁，能定性和定量测定，精密度高。

Description

一种从日本楤木叶片中提取芦丁的方法
技术领域
本发明涉及芦丁的提取方法，特别是一种从日本楤木叶片中提取芦丁的方法。
背景技术
芦丁(rutin)又称芸香苷，是黄酮醇槲皮素与二糖芸香二糖之间形成的糖苷，为浅黄色粉末或极细的针状结晶，熔点为174-178℃，略溶于水，能溶于热水及乙醇，主要存在于芸香科、豆科、金丝桃科、鼠李科和大戟科等植物中，广泛存在于植物的根、茎、叶、花、果实等中。芦丁是黄酮类化合物的主要活性成分之一，具有抗氧化作用，能清除生物体内的自由基；具有加强毛细血管通透性和弹性等多种功能。对许多人类疾病具有治疗价值，具有抑制酶的活性、抗癌、抗菌、抗病毒、抗炎症、抗过敏、抗糖尿病并发症等功能，且无毒无害，对人类的肿瘤、衰老、心血管病等退变性疾病的治疗和预防有重要意义，它作为弱雌激素,在治疗妇女更年期综合症方面有很好的应用前景。临床上可用于防治脑溢血、高血压、视网膜出血、紫瘢、急性出血性肾炎、慢性气管炎、糖尿病型白内障等。
对不同生长年限的楤木属植物根、茎、叶中的总黄酮含量进行测定，结果表明楤木叶中所含总黄酮量最多，3年生长白楤木叶中含有总黄酮9.680mg/g。对多种中药材中的芦丁含量进行测定，结果表明，槐花中的芦丁含量最高为61.0mg/g，连翘叶中含量为23.72mg/g，荞麦中含量为18.20mg/g，葡萄籽中含量为14.60mg/g，苦丁茶中含量为10.51mg/g，壶瓶枣中含量为3.00mg/g。
中草药、中药制剂中总黄酮类化合物含量的测定主要有金属离子络合法、高效液相法、荧光分光光度法、毛细管电泳法、薄层扫描法等。芦丁的提取方法主要有：回流提取、碱提取酸沉淀法、浸提法、超声提取、超临界CO2萃取。超声提取法因其省时、耗能低、操作简便已被广泛应用于生物活性物质的提取中。目前对楤木属植物的研究多为分析其化学成分及药理活性，在其黄酮类化合物的研究中，仅有采用硝酸铝显色法和紫外分光光度计法测定总黄酮及回流提取总黄酮的工艺条件优化，对日本楤木的超声提取、高效液相法测定芦丁的工艺条件优化还未见报道。
发明内容
本发明的目的是针对上述技术分析，提供一种从日本楤木叶片中提取芦丁的方法，本方法利用超声提取日本楤木中的芦丁，并在提取过程中通过改进提取试剂的种类、试剂的比例、提取次数、提取试剂的去除、提取液过滤的材料，以达到较高的提取效率和纯度，为日本楤木叶片中芦丁的工业化提取工艺提供依据。
本发明的技术方案：
一种从日本楤木叶片中提取芦丁的方法，步骤如下：
1)采用展叶20天的日本楤木叶片在70℃恒温干燥箱中烘干48小时，研磨后过60目筛，得到日本楤木叶片碎料；
2)将上述日本楤木叶片碎料加入提取液中并混合均匀，然后经超声清洗器超声54min，设置超声清洗器的温度为25℃；
3)将提取后的液体冷却至室温，经滤膜过滤，得到滤液，滤液用旋转蒸发仪在55℃水浴下蒸干；
4)将上述蒸干的样品用100mL去离子水溶解并定容；
5)将上述溶液用石油醚萃取，溶液与石油醚的体积比为1:1，萃取3次，合并水层，然后98℃水浴直至水分挥发完全，得到芦丁结晶；
6)将上述芦丁结晶用甲醇溶解定容，可进行芦丁的检测。
所述提取液为76wt％的乙醇溶液。
所述日本楤木叶片碎料与提取液的用量比为1g：57mL。
所述滤膜为聚酯纤维膜，膜孔径为0.22μm。
所述石油醚沸程规格为60-90℃。
本发明的优点是：用超声提取法提取芦丁，提取率较高，最高可达98.42％；操作简便，省时；此工艺提取出的芦丁纯度较高，最高可达53.62％；用高效液相色谱法测定芦丁，能定性和定量测定，精密度高。
附图说明
图1为本发明芦丁的提取流程图。
具体实施方式
实施例：
参见附图1，本发明从日本楤木叶片中提取芦丁的方法，步骤如下：
1)采用展叶20天的日本楤木叶片在70℃恒温干燥箱中烘干48小时，研磨后过60目筛，得到日本楤木叶片碎料；
2)将2g上述日本楤木叶片碎料加入114mL提取液中并混合均匀，然后经超声清洗器超声54min，设置超声清洗器的温度为25℃；
3)将提取后的液体冷却至室温，经滤膜过滤，得到滤液，滤液用旋转蒸发仪在55℃水浴下蒸干；
4)将上述蒸干的样品用100mL去离子水溶解并定容；
5)将上述溶液用石油醚(60-90℃)萃取,溶液与石油醚的体积比为1:1，萃取3次，合并水层，然后98℃水浴直至水分挥发完全，得到芦丁结晶；
6)将上述芦丁结晶用甲醇溶解定容，可进行芦丁的检测。
以上步骤中，步骤2)中所用的提取液为76wt％的乙醇溶液，步骤3)中过滤所用的滤膜为膜孔径0.22μm的聚酯纤维膜，步骤5)中石油醚为60-90℃的沸程规格，以上步骤中所用只是本发明的优选，但不限于上述步骤中所述，熟悉本领域技术的人员，对上述实施例做出各种显然容易的修改，如对提取液、滤膜、等作出的改变，并依据本发明的一般原理应用到其他实施例中，同样可以实现本发明的目的。
上述对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和应用本发明，因此，本发明不限于这里的实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，对于本发明做出的改进和修饰都应该在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种从日本楤木叶片中提取芦丁的方法，其特征是步骤如下：
1)采用展叶20天的日本楤木叶片在70℃恒温干燥箱中烘干48小时，研磨后过60目筛，得到日本楤木叶片碎料；
2)将上述日本楤木叶片碎料加入提取液中并混合均匀，然后经超声清洗器超声54min，设置超声清洗器的温度为25℃；
3)将提取后的液体冷却至室温，经滤膜过滤，得到滤液，滤液用旋转蒸发仪在55℃水浴下蒸干；
4)将上述蒸干的样品用100mL去离子水溶解并定容；
5)将上述溶液用石油醚萃取，溶液与石油醚的体积比为1:1，萃取3次，合并水层，然后98℃水浴直至水分挥发完全，得到芦丁结晶；
6)将上述芦丁结晶用甲醇溶解定容，可进行芦丁的检测。
2.根据权利要求1所述的从日本楤木叶片中提取芦丁的方法，其特征是：所述提取液为76wt％的乙醇溶液。
3.根据权利要求1所述的从日本楤木叶片中提取芦丁的方法，其特征是：所述日本楤木叶片碎料与提取液的用量比为1g：57mL。
4.根据权利要求1所述的从日本楤木叶片中提取芦丁的方法，其特征是：所述滤膜为聚酯纤维膜，膜孔径为0.22μm。
5.根据权利要求1所述的从日本楤木叶片中提取芦丁的方法，其特征是：所述石油醚沸程规格为60-90℃。
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JP2004026741A (ja) * 2002-06-27 2004-01-29 Naris Cosmetics Co Ltd 化粧料
CN102180921A (zh) * 2011-03-25 2011-09-14 宁夏大学 一种从枸杞叶中提取高纯度芦丁的方法
CN104098635A (zh) * 2014-08-11 2014-10-15 白心亮 一种从槐米中提取芦丁的方法

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翁喜娇，等: "高效液相色谱法测定不同时期的日本楤木叶中芦丁含量", 《中国果菜》 *
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