CN104726440A - 一种蜗牛酶的制备方法 - Google Patents

一种蜗牛酶的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104726440A
CN104726440A CN201510188175.4A CN201510188175A CN104726440A CN 104726440 A CN104726440 A CN 104726440A CN 201510188175 A CN201510188175 A CN 201510188175A CN 104726440 A CN104726440 A CN 104726440A
Authority
CN
China
Prior art keywords
snail
helicase
digestive
centrifugal
digestive system
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201510188175.4A
Other languages
English (en)
Inventor
刘斌
杨磊
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Weihai Sheng Ao Los Biosynthesis Science And Technology Ltd
Original Assignee
Weihai Sheng Ao Los Biosynthesis Science And Technology Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Weihai Sheng Ao Los Biosynthesis Science And Technology Ltd filed Critical Weihai Sheng Ao Los Biosynthesis Science And Technology Ltd
Priority to CN201510188175.4A priority Critical patent/CN104726440A/zh
Publication of CN104726440A publication Critical patent/CN104726440A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/88—Lyases (4.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/18—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
    • C12N9/6402—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from non-mammals
    • C12N9/6405—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from non-mammals not being snakes

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及一种蜗牛酶的制备方法，其解决了现有蜗牛酶提取方法工艺复杂、操作性差、提纯率低、成本高的技术问题，其步骤是：选用鲜活褐云玛瑙螺、清洗、去壳、取消化腺、抽消化液、第一次过滤、离心、第二次过滤、真空冻干、胶磨、保存。本发明广泛用于蜗牛酶的制备。

Description

一种蜗牛酶的制备方法
技术领域
本发明涉及一种酶的制备方法，具体地说是一种蜗牛酶的制备方法。
背景技术
蜗牛酶是从蜗牛的嗦囊和消化道中制备的混合酶，它含有纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、蛋白酶等20多种酶。蜗牛酶是很有价值的一种酶，它可以用于酵母细胞壁的破碎，因此广泛用于细胞生物学和基因工程学的研究；它可做饲料添加剂，从而提高饲料的消化率；也可用作果汁澄清，橘子脱囊衣，果酱制作等。蜗牛酶内含常见9种酶：从蜗牛消化腺中发现有纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、阿尔法淀粉酶、甘露糖酶、蔗糖酶、半乳聚糖酶、蛋白水解酶、氨基酸转移酶等多种具有生物活性的混合酶。而目前蜗牛酶的提取方法存在工艺复杂、操作性差和提纯率低的缺陷，保存条件高使得蜗牛酶价格居高不下，不能实现量产。
发明内容
本发明就是为了解决现有蜗牛酶提取方法工艺复杂、操作性差、提纯率低、成本高的技术问题，提供一种工艺简单、操作性强、提纯率高、成本低的蜗牛酶的制备方法。
本发明提供一种蜗牛酶的制备方法，包括以下步骤：
(1)蜗牛选购：选用鲜活褐云玛瑙螺；
(2)蜗牛清洗：将蜗牛置于放养箱中净饿3天，每天早晚用温度为18℃～28℃的清水冲洗，洗掉粪便和杂物；
(3)蜗牛去壳：取清洗干净的鲜活蜗牛，在工作台上敲碎蜗牛壳，小心剥去外壳；
(4)取消化腺：顺蜗牛的消化道剪开体壁剥离出消化腺；
(5)抽消化液：用灭菌针从蜗牛的素囊和胃里抽出红棕色的消化液，置于容器中；
(6)第一次过滤：将收集好的消化液通过450目过滤网，收集在无菌离心管中；
(7)离心：用低温离心机将第一次过滤后的消化液在0℃～5℃下离心9分钟，离心转速为11000转/分，取上清液；
(8)第二次过滤：将上清液经过细菌滤器过滤；
(9)真空冻干：滤液用塑料容器进行真空冻干20小时，蜗牛酶含水量在5％以下；
(10)胶磨：将冻干后的蜗牛酶在胶磨机中磨成粉末，分装在安瓶中；
(11)保存：安瓶抽气封管，装箱后置于干燥阴凉处保存。
优选地，步骤(1)中选用的鲜活褐云玛瑙螺的重量为14克以上，步骤(2)中的放养箱的底部打满小孔，放养箱的利用空间为30％，冲洗用的清水温度为23℃；步骤(7)中，离心时的温度为3℃；步骤(9)中，蜗牛酶含水量为5％。
本发明的有益效果是，本方法工艺简单、操作性强、提纯率高，可实现蜗牛酶的量产，蜗牛酶成品价格低，并可在常温下保存8年而蜗牛酶的活性仍保持良好。经中国科学院遗传与发育生物学研究所鉴定，本发明中的蜗牛酶具有有效降解酵母细胞壁的活性，每ug的酶，2小时内，30℃水浴中可降解1.28Χ106个酵母。试验所采用仪器为：BCA-100蛋白定量分析试剂盒(上海申能博采公司生产)、分光光度计(岛津公司生产)、OLYMPUS相差显微镜。
附图说明
图1是本发明的制备方法的过程图。
具体实施方式
如图1所示：
(1)蜗牛选购：
选用14克以上的鲜活褐云玛瑙螺(学名：Achatina Fulica)。
(2)蜗牛清洗：
将蜗牛置于底部打满小孔的放养箱中，每个放养箱利用空间约为30％，净饿3天，每天早晚用温度为18℃～28℃的清水冲洗，洗掉粪便和杂物，清洗可配合抹布，轻微翻动蜗牛，每次清洗还应仔细挑除已死掉的蜗牛。对于冲洗用的清水，其温度优选为23℃。
(3)蜗牛去壳：
取50KG清洗干净的鲜活蜗牛，在工作台上敲碎蜗牛壳，小心剥去外壳。
(4)取消化腺：
顺蜗牛的消化道剪开体壁剥离出消化腺。
(5)抽消化液：
用灭菌针从蜗牛的素囊和胃里抽出红棕色的消化液，置于容器中，一只褐云玛瑙螺平均可抽取1～1.5毫升消化液。
(6)第一次过滤：
将收集好的消化液通过450目过滤网，收集在无菌离心管中。
(7)离心：
用低温离心机将第一次过滤后的消化液在0℃～5℃下离心9分钟，离心转速为11000转/分，取上清液。对于离心温度，优选为3℃。
(8)第二次过滤：
将上清液经过细菌滤器过滤，可得滤液1000毫升。
(9)真空冻干：
滤液用塑料容器进行真空冻干20小时，蜗牛酶含水量在5％以下，冻干的蜗牛酶为结晶体，呈棕褐色，可得150克结晶体。对于蜗牛酶含水量，优选为5％。
(10)胶磨：
将冻干后的蜗牛酶在胶磨机中磨成粉末，分装在安瓶中。
(11)保存：
安瓶抽气封管，装箱后置于干燥阴凉处保存。

Claims (2)

1.一种蜗牛酶的制备方法，其特征是包括以下步骤：
(1)蜗牛选购：选用鲜活褐云玛瑙螺；
(2)蜗牛清洗：将蜗牛置于放养箱中净饿3天，每天早晚用温度为18℃～28℃的清水冲洗，洗掉粪便和杂物；
(3)蜗牛去壳：取清洗干净的鲜活蜗牛，在工作台上敲碎蜗牛壳，剥去外壳；
(4)取消化腺：顺蜗牛的消化道剪开体壁剥离出消化腺；
(5)抽消化液：用灭菌针从蜗牛的素囊和胃里抽出红棕色的消化液，置于容器中；
(6)第一次过滤：将收集好的消化液通过450目过滤网，收集在无菌离心管中；
(7)离心：用低温离心机将第一次过滤后的消化液在0℃～5℃下离心9分钟，离心转速为11000转/分，取上清液；
(8)第二次过滤：将上清液经过细菌滤器过滤；
(9)真空冻干：滤液用塑料容器进行真空冻干20小时，蜗牛酶含水量在5％以下；
(10)胶磨：将冻干后的蜗牛酶在胶磨机中磨成粉末，分装在安瓶中；
(11)保存：安瓶抽气封管，装箱后置于干燥阴凉处保存。
2.根据权利要求1所述的蜗牛酶的制备方法，其特征是：
所述步骤(1)中选用的鲜活褐云玛瑙螺的重量为14克以上，所述步骤(2)中的放养箱的底部打满小孔，所述放养箱的利用空间为30％，冲洗用的清水温度为23℃；所述步骤(7)中，离心时的温度为3℃；所述步骤(9)中，蜗牛酶含水量为5％。
CN201510188175.4A 2015-04-20 2015-04-20 一种蜗牛酶的制备方法 Pending CN104726440A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510188175.4A CN104726440A (zh) 2015-04-20 2015-04-20 一种蜗牛酶的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510188175.4A CN104726440A (zh) 2015-04-20 2015-04-20 一种蜗牛酶的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104726440A true CN104726440A (zh) 2015-06-24

Family

ID=53450856

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510188175.4A Pending CN104726440A (zh) 2015-04-20 2015-04-20 一种蜗牛酶的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104726440A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105019272A (zh) * 2015-08-14 2015-11-04 太仓市诚乐化纤有限公司 一种涤纶织物的天然染料染整工艺
CN106036984A (zh) * 2016-07-03 2016-10-26 陈毅忠 一种固定化蜗牛酶制备烟草浸膏的方法
CN106086118A (zh) * 2016-06-25 2016-11-09 仇颖超 一种蜗牛资源化制备几丁寡糖的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1216778A (zh) * 1998-10-10 1999-05-19 复旦大学 一种蜗牛酶的制备方法
CN102199582A (zh) * 2010-03-23 2011-09-28 叶阿彬 一种蜗牛酶的提取和保存方法
CN102846519A (zh) * 2012-08-11 2013-01-02 叶阿彬 一种蜗牛粘液的提取方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1216778A (zh) * 1998-10-10 1999-05-19 复旦大学 一种蜗牛酶的制备方法
CN102199582A (zh) * 2010-03-23 2011-09-28 叶阿彬 一种蜗牛酶的提取和保存方法
CN102846519A (zh) * 2012-08-11 2013-01-02 叶阿彬 一种蜗牛粘液的提取方法

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105019272A (zh) * 2015-08-14 2015-11-04 太仓市诚乐化纤有限公司 一种涤纶织物的天然染料染整工艺
CN106086118A (zh) * 2016-06-25 2016-11-09 仇颖超 一种蜗牛资源化制备几丁寡糖的方法
CN106036984A (zh) * 2016-07-03 2016-10-26 陈毅忠 一种固定化蜗牛酶制备烟草浸膏的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102199582B (zh) 一种蜗牛酶的提取和保存方法
CN103783254A (zh) 一种牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法
CN101607993B (zh) 一种斑点叉尾鮰鱼皮胶原蛋白的提取工艺
CN101766282B (zh) 从豆粕中同时提取大豆功能与疗效因子的工艺方法
CN102170795A (zh) 从磷虾生产蛋白质浓缩物时减少氟含量的方法
CN104726440A (zh) 一种蜗牛酶的制备方法
CN104560931B (zh) 一种蜗牛酶的提取方法
CN108929891B (zh) 一种鲎血血细胞蛋白活性肽的制备方法
CN102845599A (zh) 根、茎、叶及种子中药渣的再利用方法
CN101755994A (zh) 一种天然食品防腐剂鱼精蛋白的制备方法
CN104719794A (zh) 一种番石榴果片的制备方法
CN104642712A (zh) 一种蜗牛蛋白质粉的提取方法
CN103468663A (zh) 一种蜗牛蛋白酶的提取方法
CN105087134A (zh) 一种葵花籽油水酶法提取工艺
CN113122603A (zh) 酶解鱼溶浆和功能蛋白肽的制备工艺
CN107805273A (zh) 一种从蝇蛆中提取天然肽的方法
CN104738460A (zh) 一种山药片的制备方法
CN114426998A (zh) 鳄鱼肽的制备方法及制备的鳄鱼肽
Scopes et al. Making an extract
CN102697134B (zh) 天然仙人掌果蔬饮品及其制备方法
CN109111981A (zh) 一种生物复合酶法制备高纯度花生油脂体的方法
CN104738454A (zh) 一种无花果果片的制备方法
CN104324392B (zh) 一种新生猪胰腺提取胰岛前的注射制剂
CN103371351A (zh) 鸡精粉及其生产方法
Valarmathi et al. Study of enzyme activity in the land snail Cryptozona bistrialis in Nagapattinam, Tamil Nadu India

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20150624